close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Изменчивость молекулярно-генетической структуры популяций у яблонной плодожорки Cydia pomonella (L. ) под влиянием инсектицидов и других стрессовых факторов внешней среды

код для вставкиСкачать
—≈Ћ№— ќ’ќ«я…—“¬≈ЌЌјя Ѕ»ќЋќ√»я, 2013, є 1, с. 61-67
”ƒ 632.78:577.21
»«ћ≈Ќ„»¬ќ—“№ ћќЋ≈ ”Ћя–Ќќ-√≈Ќ≈“»„≈— ќ… —“–” “”–џ
ѕќѕ”Ћя÷»… ” яЅЋќЌЌќ… ѕЋќƒќ∆ќ– » Cydia pomonella (L.)
ѕќƒ ¬Ћ»яЌ»≈ћ »Ќ—≈ “»÷»ƒќ¬ » ƒ–”√»’ —“–≈——ќ¬џ’
*
‘ј “ќ–ќ¬ ¬Ќ≈ЎЌ≈… —–≈ƒџ
¬.». »Ћ№, ≈.Ќ. Ѕ≈—≈ƒ»Ќј
— использованием PCR-анализа оценили состав двух географических попул¤ций ¤блонной плодожорки по ƒЌ -маркерам. ќписана молекул¤рно-генетическа¤ структура исследуемых
попул¤ций вредител¤ и изучена ее изменчивость под вли¤нием инсектицидов, условий года и географического положени¤. ѕо двум микросателлитным локусам исследовано внутрипопул¤ционное
генетическое разнообразие вредител¤ в садах с разной интенсивностью инсектицидных обработок. ѕоказано, что генетическое разнообразие попул¤ций у ¤блонной плодожорки определ¤етс¤
главным образом ее генетическими особенност¤ми, а не инсектицидным фактором или погодными
услови¤ми.
лючевые слова: полиморфизм, генетическое разнообразие, микросателлитные локусы,
попул¤ци¤, ¤блонна¤ плодожорка, ƒЌ , RAPD-PCR, SSR-PCR.
»зучение генетики попул¤ций насекомых-вредителей имеет большое значение дл¤ мониторинга процессов их миграции и потока генов (1,
2). роме того, анализ изменчивости молекул¤рно-генетической структуры попул¤ций способствует более глубокому пониманию механизмов развити¤ резистентности насекомых к инсектицидам (3).
яблонна¤ плодожорка Cydia pomonella (L.) (Lepidoptera: Tortricidae) ? основной вредитель фруктового сада во всем мире. —выше 70 %
обработок плодовых культур инсектицидами св¤заны с контролем ее численности (4). Ќесмотр¤ на значительный экономический ущерб, причин¤емый ¤блонной плодожоркой, об изменчивости генетической структуры и
генетического разнообрази¤ попул¤ций C. pomonella под вли¤нием инсектицидов известно очень мало. ¬ то же врем¤ подобные сведени¤ важны
при разработке стратегии защитных меропри¤тий (5).
–анее мы исследовали молекул¤рно-генетическую структуру различных географических попул¤ций ¤блонной плодожорки по RAPD (randomly
amplified DNA polymerase chain reaction), ISSR (inter simple sequence repeats)
и SSR (simple sequence repeats) маркерам (6-9).
÷ель насто¤щей работы заключалась в изучении вли¤ни¤ инсектицидов, географического положени¤ и условий года на молекул¤рно-генетическую структуру и генетическое разнообразие попул¤ций Cydia pomonella.
ћетодика. ќбъектом наблюдений (2008-2010 годы, раснодарский
край) были выборки из двух попул¤ций ¤блонной плодожорки. Ќасекомых отлавливали с помощью феромонных ловушек в садах с неодинаковой интенсивностью инсектицидных обработок: особей краснодарской
попул¤ции ? в саду ¬сероссийского Ќ»» биологической защиты растений (¬Ќ»»«Ѕ–, до 12 обработок ежегодно), учхозе ЂЁкологический садї
(4-5 обработок экологически малоопасными инсектицидами), учхозе Ђќрганический садї (без обработок), особей ейской ? в садах Ђ олледж ≈йскийї (до 12 обработок ежегодно) и Ђћалюсї (без обработок). ќбъем каждой выборки составл¤л 20-60 насекомых.
¬ыделение ƒЌ , RAPD- и SSR-PCR проводили по протоколам,
описанным нами ранее (10, 11). ¬о избежание ошибки опыта в RAPDPCR все исследуемые образцы ƒЌ анализировали одновременно в одной
*
–абота выполнена при поддержке –‘‘» и администрации раснодарского кра¤ (грант є 09-04-96514).
61
реакции (по каждому праймеру отдельно), на одном приборе, с использованием стандартного набора реактивов. ак мы уже отмечали, соблюдение
таких условий достаточно дл¤ адекватной оценки результатов RAPD-PCR,
в том числе при анализе ƒЌ насекомых из разных таксонов (12). ¬ SSRPCR использовали две пары праймеров (13), фланкирующих микросателлитные локусы: —р1.63 ? мотив повтора (GA)19, —р2.39 ? мотив повтора
(“—)4ј—(“—)11. ѕродукты SSR-PCR раздел¤ли в 8 % полиакриламидном
геле длиной 20 см и толщиной 1 мм при напр¤жении 200-300 ¬ в течение
5-6 ч. ¬изуализацию ампликонов после предварительного окрашивани¤
бромистым этидием проводили в ультрафиолетовом свете, использу¤ трансиллюминатор ECX-20.M (ЂVilber Lourmatї, ‘ранци¤).
—тепень ƒЌ -полиморфизма определ¤ли как отношение числа полиморфных ƒЌ -фрагментов к общему числу ƒЌ -маркеров. ћолекул¤рно-генетическую структуру описывали по частоте встречаемости ƒЌ -фрагментов и проводили сравнительную оценку изменчивости по критерию ?2.
—равнение средних значений по выборке выполн¤ли по t-критерию —тьюдента с использованием программы Microsoft Excel. ќценку генетического
разнообрази¤ попул¤ций, генетического сходства и кластерный анализ данных осуществл¤ли по M. Nei и —. Shennon методом UPGMA (невзвешенный парно-групповой метод с арифметическим усреднением) в программе
POPGENE v. 1.31.
–езультаты. ¬ л и ¤ н и е и н с е к т и ц и д о в н а в н у т р ип о п у л ¤ ц и о н н о е г е н е т и ч е с к о е р а з н о о б р а з и е. –езультаты SSR-PCR анализа показали, что между насекомыми из краснодарской попул¤ции C. pomonella видимые различи¤ в ƒЌ -спектрах в целом отсутствовали (рис. 1). Ёто же нагл¤дно демонстрировали данные статистической обработки (табл. 1).
1. ƒЌ -полиморфизм по SSR-маркерам и генетическое разнообразие попул¤ций Cydia pomonella (L.) в садах с разной интенсивностью инсектицидных
обработок ( раснодарский край, 2010 год)
раснодарска¤ попул¤ци¤
учхоз Ђќрганиѕоказатель
учхоз ЂЁколоческий садї
¬Ќ»»Ѕ«–
гический садї
(без обработок)
≈йска¤ попул¤ци¤
сад Ђћалюсї
(без обработок)
сад Ђ олледж
≈йскийї
Ћ о к у с —р.1.63
0,17±0,14*
0,08±0,09
0,08±0,06
0,29±0,18*
0,15±0,17
0,15±0,11
Ћ о к у с —р.2.39
h
0,22±0,15*
0,25±0,14*
0,22±0,17*
0,17±0,11
0,12±0,10
I
0,35±0,19*
0,40±0,19*
0,35±0,24*
0,30±0,16
0,22±0,15
ѕ р и м е ч а н и е. ¬Ќ»»«Ѕ– ? сад ¬сероссийского Ќ»» биологической защиты растений, до 12 обработок по насекомым ежегодно; учхоз ЂЁкологический садї и сад Ђ олледж ≈йскийї ? соответственно 4-5
и до 12 обработок по насекомым ежегодно; h ? генетическое разнообразие по ћ. Nei (среднее±стандартное отклонение), I ? индекс Ўеннона (среднее±стандартное отклонение).
* ƒостоверно отличаютс¤ от выборки из сада Ђ олледж ≈йскийї (tфакт. ? t05).
h
I
0,14±0,17
0,23±0,23
0,14±0,16
0,22±0,23
ќценка вли¤ни¤ инсектицидной нагрузки на внутрипопул¤ционный
генетический полиморфизм у ¤блонной плодожорки показала, что как в
краснодарской, так и в ейской попул¤ции значени¤ индексов генетического
разнообрази¤ в вариантах без обработок практически не отличались от таковых при инсектицидных обработках (различи¤ были статистически не
достоверны). ѕри этом важно отметить, что даже значительное число инсектицидных обработок (в садах ¬Ќ»»Ѕ«– и Ђ олледж ≈йскийї ? до 12 ежегодно) не вызывало снижени¤ внутрипопул¤ционного генетического разнообрази¤ у насекомых (см. табл. 1).
62
ј
Ѕ
–ис. 1. »ндивидуальные электрофореграммы ампликонов (SSR-PCR) по микросателлитным локусам —р1.63 (ј) и —р2.39 (Ѕ) у насекомых из краснодарской попул¤ции Cydia pomonella (L.),
собранных в садах с интенсивными инсектицидными обработками (а ? ¬сероссийский Ќ»»
биологической защиты растений, до 12 обработок по насекомым ежегодно) и без обработок
(б ? учхоз Ђќрганический садї): ћ ? маркеры молекул¤рных масс, п.н. (8 % полиакриламидный гель) ( раснодарский край, 2010 год).
¬ то же врем¤ при сравнении двух исследуемых географических
попул¤ций ¤блонной плодожорки имелись достоверные различи¤, особенно четко вы¤вл¤емые по локусу Cp.2.39 (см. табл. 1). “ак, генетическое
разнообразие в краснодарской попул¤ции C. pomonella было в 1,5-2,0 раза
выше, чем в ейской (в целом по всем выборкам tфакт. = 3,69 ? t05). Ёто указывало на тот факт, что внутрипопул¤ционное генетическое разнообразие
главным образом обусловлено географическим положением попул¤ции (ее
биологическими и генотипическими особенност¤ми, определ¤емыми в
том числе потоком генов), тогда как инсектицидные обработки не привод¤т к снижению генетического разнообрази¤ в попул¤ци¤х (ранее мы, наоборот, предполагали, что такое снижение возможно) (8, 9).
ѕодобное заключение подтверждалось оценкой генетического сход63
ства исследуемых выборок. Ќаиболее близкими в генетическом отношении
оказались ейские выборки из садов Ђ олледж ≈йскийї и Ђћалюсї (генетическа¤ идентичность i по ћ. Nei равн¤лась 1,00), что свидетельствовало об
их принадлежности к одной попул¤ции. ѕо аналогии выборки из краснодарской попул¤ции были генетически близки (i = 0,94-0,96) и отличались
от выборок из ейской попул¤ции. Ёто нагл¤дно демонстрировали и данные
кластерного анализа (рис. 2), согласно которому исследуемые выборки входили в два кластера, соответствующие их географическому положению.
“аким образом, у ¤блонной плодожорки внутрипопул¤ционное генетическое
разнообразие не обусловлено
числом инсектицидных обработок в садах. ѕри этом очевидно, что инсектициды могут
вли¤ть не только на численность попул¤ции насекомых
–ис. 2. ƒендрограмма, отражающа¤ генетические рас- в целом, но и на ее молекусто¤ни¤ между ейской (1) и краснодарской (2 и 3) попу- л¤рно-генетическую структул¤ци¤ми Cydia pomonella (L.) из садов с разной интенсив- ру, то есть частоту встречаеностью инсектицидных обработок (4) (см. раздел Ђћетомости отдельных генетических
дикаї). ƒендрограмма построена методом UPGMA (невзвешенный парно-групповой метод с арифметиче- элементов. ќднако подобный
ским усреднением) по ћ. Nei ( раснодарский край, эффект не приводил к изме2010 год).
нению внутрипопул¤ционного генетического разнообрази¤, а различи¤ по этому показателю определ¤лись исключительно географическим положением попул¤ций (их генотипическими особенност¤ми и услови¤ми размножени¤).
—деланные нами выводы согласуютс¤ с данными немецких ученых
(14), изучавших устойчивость ¤блонной плодожорки к бакуловирусу CpGV.
ќни вы¤снили, что даже при высоких показател¤х резистентности попул¤ци¤ вредител¤ оставалась генетически неоднородной и в ней присутствовали чувствительные к вирусному препарату насекомые. —ледовательно, генетическое разнообразие у чувствительных и резистентных попул¤ций может не различатьс¤ из-за гетерогенности последних.
¬ л и ¤ н и е у с л о в и й г о д а н а м о л е к у л ¤ р н ог е н е т и ч е с к у ю с т р у к т у р у и г е н е т и ч е с к о е р а з н оо б р а з и е п о п у л ¤ ц и й. ƒл¤ анализа изменчивости молекул¤рногенетической структуры попул¤ции ¤блонной плодожорки в зависимости
от условий окружающей среды были отобраны выборки насекомых из одного сада (¬Ќ»»Ѕ«–) в разные периоды исследований (2008 и 2010 годы).
»нсектицидна¤ нагрузка при этом не измен¤лась, однако погодные услови¤ 2010 года характеризовались экстремально высокими температурами в
летние мес¤цы (свыше 40 ∞—) и практически полным отсутствием осадков.
–езультаты PCR-анализа краснодарской попул¤ции C. pomonella по
RAPD-маркерам вы¤вили отсутствие сколько-нибудь видимых различий
в ƒЌ -спектрах между двум¤ исследуемыми выборками (2008 и 2010 годов). ¬ то же врем¤ в р¤де случаев (по отдельным праймерам) в выборках
насекомых отмечали неодинаковую частоту некоторых ƒЌ -маркеров.
роме того, наблюдалось некоторое снижение числа ƒЌ -фрагментов на
особь в 2008 году по сравнению с аналогичным показателем в 2010 году
(табл. 2). Ёто, по-видимому, объ¤сн¤етс¤ частичной деградацией водных
растворов ƒЌ , хранившихс¤ в течение 2 лет (с 2008 года) при ?20 ∞—.
ќднако в целом молекул¤рно-генетическа¤ структура оставалась неизмен64
ной, статистически значимых отличий в ƒЌ -спектрах мы не обнаружили
(?2факт. ? ?205).
2. ƒЌ -полиморфизм по RAPD-маркерам в краснодарской попул¤ции Cydia
pomonella (L.) на фоне интенсивных инсектицидных обработок в разные годы исследований ( раснодарский край, сад ¬сероссийского Ќ»» биологической защиты растений)
—тепень ƒЌ „исло детектируемых —реднее число ƒЌ RAPD-праймер полиморфизма, % ƒЌ -фрагментов
фрагментов на особь
2008
2010
2008
2010
2008
2010
ќ–ј02
ќ–ј06
ќ–ј20
ќ–¬01
ќ–¬08
ќ–D06
ќ–≈07
ѕ р и м е ч а н и е.
стоверны).
100
100
19
18
100
100
15
16
94,7
94,7
19
19
100
100
17
16
94,1
94,1
12
17
100
100
11
15
100
94,1
17
17
„исло ежегодных обработок инсектицидами ?
?2
5,9
7,5
8,4
4,4
7,8
21,2
4,5
6,9
25,2
4,9
5,2
17,2
4,3
5,3
12,8
4,0
5,9
18,2
5,3
7,4
22,5
до 12; ?2факт. ? ?205 (различи¤ недо-
ƒл¤ того чтобы проверить предположение о частичной деградации
ƒЌ , мы провели RAPD-анализ ейской попул¤ции насекомых по двум
праймерам ? ќ–ј06 и ќ–ј20, сравнив препараты ƒЌ , которые находились при ?20 ∞— в течение 2 лет, со свежевыделенными (2011 год) из биоматериала той же выборки 2008 года (насекомых хранили в чашках ѕетри
при +4 ∞—). ¬ варианте, когда в PCR использовали ƒЌ после хранени¤
при ?20 ∞—, по RAPD-праймеру ќ–ј06 имелись ампликоны, которые были
выражены очень слабо или совсем отсутствовали, а по RAPD-праймеру
ќ–ј20 насчитывалось достоверно меньше ƒЌ -фрагментов, чем при анализе свежевыделенной ƒЌ (в среднем на особь соответственно 8,7±0,92
против 14,2±0,78, tфакт. = 4,59 ? t05).
3. ƒЌ -полиморфизм по SSR-маркерам и генетическое разнообразие попул¤ций Cydia pomonella (L.) на фоне интенсивных инсектицидных обработок в
разные годы исследований ( раснодарский край)
ѕоказатель
n
A
Ar
h
I
?2
≈йска¤ попул¤ци¤ (сад Ђ олледж ≈йскийї) раснодарска¤ попул¤ци¤ (сад ¬Ќ»»Ѕ«–)
2008
2010
2008
2010
Ћ о к у с —р.1.63
20
12
2,6
0,19±0,14
0,31±0,20
20
12
1,8
0,14±0,09
0,26±0,14
13,3
35
25
3,5
0,14±0,13
0,24±0,19
60
25
4,3
0,15±0,15
0,26±0,19
23,0
Ћ о к у с —р.2.39
20
27
5,9
0,19±0,13
0,32±0,18
n
20
26
60
A
27
32
32
Ar
5,1
8,5
11,3
h
0,18±0,13
0,19±0,16
0,26±0,14*
I
0,31±0,18
0,31±0,21
0,41±0,18*
23,3
58,8*
?2
ѕ р и м е ч а н и е. ¬Ќ»»Ѕ«– ? ¬сероссийский Ќ»» биологической защиты растений; n ? объем выборки, A ? число аллелей, Ar ? обогащенность аллел¤ми (allelic richness), или средн¤¤ частота аллелей
на одну особь, h ? генетическое разнообразие по M. Nei (среднее±стандартное отклонение), I ? индекс Ўеннона (среднее±стандартное отклонение).
* –азличи¤ достоверны (tфакт. ? t05; ?2факт. ? ?205).
¬ы¤вленный факт свидетельствовал, что зафиксированные нами изменени¤ в молекул¤рно-генетической структуре попул¤ций были, скорее
всего, вызваны не изменени¤ми условий внешней среды, а деградацией
водных растворов ƒЌ при хранении.
¬ отличие от RAPD-маркеров, микросателлитные SSR-маркеры обладают большей воспроизводимостью ввиду более высокой температуры
65
отжига в полимеразной цепной реакции и большей специфичностью св¤зывани¤ праймеров с ƒЌ -матрицей. ѕоэтому несомненный интерес представл¤ло изучение изменчивости молекул¤рно-генетической структуры у
исследуемых попул¤ций насекомых по микросателлитным локусам под
вли¤нием условий года. –езультаты SSR-PCR анализа показали, что электрофоретические спектры ампликонов, полученные с использованием ƒЌ насекомых, собранных в 2010 году, характеризовались большим числом
фрагментов по сравнению с таковыми в 2008 году (табл. 3). ¬ краснодарской попул¤ции C. pomonellа такое изменение в молекул¤рно-генетической структуре и генетическом разнообразии (по локусу —р.2.39) было к
тому же статистически значимым (tфакт. ? t05; ?2факт. ? ?205). роме того,
при анализе ƒЌ ¤блонной плодожорки в образцах 2008 года наблюдали
некоторое уменьшение среднего числа ƒЌ -фрагментов на особь и снижение внутрипопул¤ционного генетического разнообрази¤ по сравнению с
аналогичными показател¤ми в образцах 2010 года.
“аким образом, как и при анализе попул¤ций C. pomonella по RAPDмаркерам, с SSR-маркерами, несмотр¤ на более высокую специфичность
св¤зывани¤, также вы¤вл¤лось общее снижение числа ƒЌ -маркеров в
PCR-спектрах образцов ƒЌ , выделенных в 2008 году. ѕо нашим данным, это объ¤сн¤лось частичной деградацией водных растворов ƒЌ (образцы 2008 года), хранившихс¤ в течение 2 лет при ?20 ∞—, а не изменени¤ми в молекул¤рно-генетической структуре и генетическом разнообразии попул¤ций ¤блонной плодожорки. —ледовательно, как жаркое и сухое
лето 2010 года, так и инсектициды не оказали деструктивного вли¤ни¤ на
внутрипопул¤ционное генетическое разнообразие.
»так, в попул¤ци¤х ¤блонной плодожорки Cydia pomonella (L.)
вли¤ние инсектицидов и условий года не приводит к снижению генетического разнообрази¤, а различи¤ по этому показателю, наблюдаемые между попул¤ци¤ми, определ¤ютс¤ в первую очередь их географическим положением (генетическими особенност¤ми). ќчевидно, что стрессовые факторы внешней среды, будь то инсектициды или экстремальные погодные
услови¤, могут сказатьс¤ на численности или молекул¤рно-генетической
структуре попул¤ции C. pomonella, то есть на частоте некоторых генотипов.
ќднако, как свидетельствуют наши эксперименты, это не всегда означает,
что одновременно снижаетс¤ внутрипопул¤ционное генетическое разнообразие особей. ¬ыполн¤¤ сравнительный PCR-анализ с различными выборками насекомых, необходимо также учитывать тот факт, что при хранении
возможна частична¤ деградаци¤ водных препаратов выделенной тотальной
ƒЌ (например, из-за размораживани¤ при аварийном отключении электроэнергии). ѕодобные изменени¤ неизбежно привод¤т к снижению числа
ƒЌ -фрагментов в анализируемых PCR-спектрах (RAPD- и SSR-PCR). ¬
этой св¤зи мы рекомендуем сохран¤ть биоматериал (насекомых) в чашках
ѕетри при +4 ∞—, а водные препараты ƒЌ лиофилизировать или переосаждать этанолом и хранить в морозильной камере (при ?20 ∞—).
јвторы выражают искреннюю благодарность ќ.ƒ. Ќи¤зову и ≈.—. —угон¤еву
за предоставленный биоматериал.
√Ќ” ¬сероссийский Ќ»» биологической
защиты растений –оссельхозакадемии,
ѕоступила в редакцию
19 сент¤бр¤ 2011 года
350039 –осси¤, г. раснодар-39, ¬Ќ»»Ѕ«–,
e-mail: vlkil@inbox.ru
VARIABILITY OF MOLECULAR GENETIC STRUCTURE IN CODLING
66
MOTH Cydia pomonella (L.) POPULATIONS UNDER THE INFLUENCE
OF INSECTICIDES AND ENVIRONMENTAL STRESSES
V.I. Kil?, E.N. Besedina
All-Russian Research Institute of Biological Plant Protection, Russian Academy of Agricultural Sciences,
VNIIBZR, Krasnodar, 350039 Russia, e-mail vlkil@inbox.ru
Received September 19, 2011
Supported by the Russian Foundation for Basic Research and Administration of Krasnodar Krai
Abstract
The results of the PCR analysis of two codling moth populations using RAPD and SSR
markers are presented. The molecular genetic structure of investigated pest populations is described
and its variability under influence of insecticides, varying climatic conditions during 2008 to 2011
and geographic location is studied. The intra-population genetic diversity by two microsatellite loci
was estimated in pests from the gardens with different insecticide press. Genetic diversity of codling
moth populations was shown to depend mainly on genetic features of the populations, bur not on the
insecticide load or weather conditions.
Keywords: polymorphism, genetic diversity, microsatellite loci, population, codling moth,
DNA, RAPD-PCR, SSR-PCR.
REFERENCES
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
Scott L.J., Lawrence N., Lange C.L. et al. Population dynamics and gene flow
of Helicoverpa armigera (Lepidoptera: Noctuidae) on cotton and grain crops in the Murrumbidgee Valley, Australia. J. Econ. Entomol., 2006, 99: 155-163.
Endersby N.M., Hoffmann A.A., McKechnie S.W., Weeks A.R. Is there genetic structure
in populations of Helicoverpa armigera from Australia? Entomol. Exp. Appl., 2007, 122: 253-263.
Timm A.E., Geertsema H., Warnich L. Gene flow among Cydia pomonella (L.) (Lepidoptera: Tortricidae) geographic and host populations in South Africa. J. Econ. Entomol., 2006, 99:
341-348.
Franck P., Reyes M., Olivares J., Sauphanor B. Genetic architecture in codling moth
populations: comparison between microsatellite and insecticide resistance markers. Mol. Ecol.,
2007, 16: 3554-3564.
Calkins C.O., Faust R.J. Overview of areawide programs and the program for suppression of
codling moth in the western USA directed by the United States Department of Agriculture ?
Agricultural Research Service. Pest. Manag. Sci., 2003, 59: 601-604.
Kil' V.I., Besedina E.N., Fedicheva O.O. Trudy Stavropol'skogo otdeleniya Russkogo entomologicheskogo obshchestva (materialy II Mezhdunarodnoi nauchno-prakticheskoi internet-konferentsii
ЂAktual'nye voprosy entomologiiї) [Sci. Works of the Stavropol? Department of Russian Entomological Society. Proc. II Int. Sci.-Pract. Internet Conf. ЂLive Issues of Entomologyї], 2009, 5: 154-157.
Kil' V.I., Besedina E.N., Fedicheva O.O. Informatsionnyi byulleten' VostochnoPalearkticheskoi regional'noi sektsii Mezhdunarodnoi organizatsii po biologicheskoi bor'be s vrednymi zhivotnymi i rasteniyami (materialy dokladov Mezhdunarodnogo simpoziuma ЂZashchita rastenii ? dostizheniya i perspektivyї, g. Kishinev) [Inf. Bull. of the East-Palearctic Regional Department of the International Organization for Biological Control of Pest Animals and Plants.
Proc. Int. Symp. ЂCrop Protection ? Achievments and Prospectsї], 2009, 40: 92-94.
Kil' V.I. Materialy Mezhdunarodnoi nauchno-prakticheskoi konferentsii ЂBiologicheskaya zashchita
rastenii ? osnova stabilizatsii agroekosistemї [Proc. Int. Sci.-Pract. Conf. ЂBiological Crop Protection ? A Basis of Sustainable Agroecosystemsї]. Krasnodar, 2010, v. 6: 281-284.
Kil' V.I. Politematicheskii setevoi elektronnyi nauchnyi zhurnal Kubanskogo gosudarstvennogo universiteta [Multitopic Scientific Electronic Network Magazine of Kuban State University], 2010,
62(08), oktyabr' (http://ej.kubagro.ru/2010/08/pdf).
Kil' V.I. Metodika otsenki DNK-polimorfizma populyatsii nasekomykh s pomoshch'yu PTSR
(RAPD- i ISSR-PCR): metodicheskie rekomendatsii [The Method for Evaluating DNA Polymorphism in Insect Populations Using RAPD- and ISSR-PCR: Guidelines]. Krasnodar, 2009.
Kil' V.I. Politematicheskii setevoi elektronnyi nauchnyi zhurnal Kubanskogo gosudarstvennogo universiteta [Multitopic Scientific Electronic Network Magazine of Kuban State University], 2011,
68(04), aprel' (http://ej.kubag-ro.ru/2011/04/pdf).
Kil' V.I., Gronin V.V., Krutenko D.V., Ismailov V.Ya. Sel?skokhozyaistvennaya Biologiya
[Agricultural Biology], 2008, 1: 70-76.
Franck P., Guйrin F., Loiseau A., Sauphanor B. Isolation and characterization of microsatellite loci in the codling moth Cydia pomonella L. (Lepidoptera, Tortricidae). Molecular Biology Notes, 2005, 5(1): 99-102.
Asser-Kaiser S., Fritsch E., Undorf-Spahn K., Kienzle J., Eberle K.E., Gund N.A., Reineke A., Zebitz C.P.W., Heckel D.G., Huber J., Jehle J.A. Rapid emergence of Baculovirus
resistance in codling moth due to dominant sex linked inheritance. Science, 2007, 317: 1916-1918.
67
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа