close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Экстракция водного извлечения гриба чаги диэтиловым эфиром.

код для вставкиСкачать
УДК 615.322
М. А. Бурмасова (соис.), М. А. Сысоева (д.х.н., доц.)
Экстракция водного извлечения гриба чаги диэтиловым эфиром
Казанский национальный исследовательский технологический университет,
кафедра пищевой биотехнологии
420015, г. Казань, ул. К. Маркса, 68; тел. (843) 2318911, e!mail: m!burmasowa@mail.ru
M. A. Burmasova, M. A. Sysoeva
’
Chaga s aqueous extracts processing by diethyl ether
Kazan National Research Technological University,
68, K. Marx Str., 420015, Kazan, Russia; ph. (843)2318911, e!mail: m!burmasowa@mail.ru
Исследован состав веществ, экстрагируемых из
водного извлечения березового гриба чаги диэ
тиловым эфиром. Показано присутствие в вод
ном извлечении чаги простых фенолов, фенол
карбоновых кислот, катехинов, флавоноидов и
олиго и/или полисахаридов. В водном извлече
нии чаги установлены следующие вещества:
флороглюцин, феруловая, 3оксибензойная, м
оксифенилпропионовая кислоты, изорамнетин,
метилированные уроновые кислоты. Определе
но количественное содержание суммы феноль
ных веществ.
Ключевые слова: бумажная хроматография;
водное извлечение; тонкослойная хроматогра
фия; чага; экстракция диэтиловым эфиром.
Гриб чага является лекарственным сырь
ем . Препараты на его основе обладают широ
ким спектром действия и применяются в гаст
роэнтерологии и онкологической практике,
как симптоматические и общетонизирующие
средства 2.
Химический состав водного извлечения,
изготавливаемого для таких препаратов, как
«Бефунгин» и «Экстракт березового гриба»,
содержит (в % от сухого веса): зольные эле
менты – 25.00–29.00 %, азот общий – 0.48–
0.55 %, полисахариды – 6.00–8.00 %, летучие
кислоты – 0.73–0.79 %, щавелевая кислота –
3.98–4.50 %, ароматические кислоты – 0.54–
0.78 %, тритерпеновые кислоты – следы, сте
рины и тритерпены – 0.20%, фенолы – 0.28–
0.36 %, меланин – 48.00–60.00 % 3. По литера
турным данным 4, биологическую активность
спиртовых экстрактов чаги обеспечивают фе
нольные соединения различных классов. По
этому исследование фенольных соединений,
переходящих в водное извлечение, особенно
актуально. В литературе описаны исследова
ния чаги, водных извлечений на ее основе и
1
The composition of chaga ’s aqueous extracts
processed by diethyl ether was research. Simple
phenols, phenolcarbonic acids, catechins,
flavonoids, oligo and polysaccharides in chaga’s
aqueous extracts were detected. Total content of
phenol components was assayed. In water
extraction of polypore following substances:
floroglucin, ferulic, 3oxybenzoic, moxyphe
nylpropionic acids, isoramnetin, methylated
uronic acids are established.
Key words : aqueous extract; chaga; diethyl
ether extraction; paper chromatography; thin
layer chromatography.
меланина с применением химического гидро
лиза 5. Однако, некоторые классы фенольных
соединений (например, фенольные гликози
ды) в таких условиях могут подвергаться раз
рушению. С этой точки зрения интересным
представляется применение обработки водного
извлечения чаги органическими растворителя
ми различной полярности. Такой подход по
зволяет сохранять большинство биологически
активных веществ с их уникальной химической
структурой и проводить их идентификацию.
Целью работы является исследование ве
ществ, экстрагируемых из водного извлечения
чаги диэтиловым эфиром, после удаления из
него липидов и терпенов петролейным эфиром.
Экспериментальная часть
Лекарственное сырье – гриб чага – закуп
лено в аптечной сети. Производитель ЗАО
«Здоровье», МО, Красногорский район, серия
020706.
Водное извлечение чаги получали мето
дом ремацерации 12. Содержание экстрактив
Дата поступления 12.04.12
50
Башкирский химический журнал. 2012. Том 19. № 2
ных веществ в извлечении определяли соглас
но методике 13. Обработка органическими ра
створителями осуществлялась по схеме 8. Со
держание фенольных веществ определяли по
методике, описанной в литературе 14. Кислот
ный гидролиз эфирного экстракта проводили
25%ным раствором хлористоводородной кис
лоты – 20 мин, 3 ч; 6н раствором серной кис
лоты в течение 3 ч.
Колоночную хроматографию осуществля
ли по методике 15. Элюирование проводили
системами растворителей – диэтиловый эфир :
этилацетат (9:1→3:7).
Качественный состав фенолкарбоновых
кислот определяли методом бумажной хрома
тографии в системе растворителей бензол :
пропионовая кислота : вода (2:2:1). Методом
тонкослойной хроматографии в системе ра
створителей – бензол : метанол : уксусная кис
лота (45:8:4) (система 1). В качестве проявите
лей применяли 1% водный раствор хлорного
железа, реактив Паули 16.
Качественный состав углеводов определя
ли методом бумажной хроматографии в систе
ме растворителей бутанол : уксусная кислота :
вода (4:1:5). В качестве проявителей использо
вали анилинфталевый реактив, основной аце
тат свинца 16.
Качественный анализ простых фенолов
проводили методом бумажной хроматографии
в системе растворителей бутанол : уксусная
кислота : вода (4:1:5). В качестве проявителя
применяли пары аммиака 16.
Качественный состав флавоноидов изуча
ли с использованием метода бумажной хрома
тографии, тонкослойной хроматографии на
пластинках «Sorbfil». Использовались следую
щие системы растворителей бутанол : уксус
ная кислота : вода (4:1:5); хлороформ : уксус
ная кислота (5:2). В качестве проявителей ис
пользовали хлористый алюминий, ванилино
вый реактив.
Электронные спектры снимали на спект
рофотометре UNICO UY/YIS 2800.
Обсуждение результатов
Водное извлечение чаги представляет со
бой сложную коллоидную систему. Дисперс
ной фазой этой системы является основное
действующее вещество водного извлечения –
меланин. Дисперсионная среда коллоидной
системы содержит соли, аминокислоты, белки,
фенольные соединения и другие вещества 6.
Водное извлечение чаги обрабатывали
петролейным эфиром 7. Затем обработку про
должали диэтиловым эфиром с получением
эфирного экстракта. Из литературы известно,
что диэтиловым эфиром из природного объек
та можно извлечь нейтральные и полярные
липиды, а также различные классы фенольных
соединений: простые фенолы, катехины, окси
коричные кислоты, агликоны флавоноидов 8.
Экстракт содержит 0.41% экстрактивных
веществ от сухого остатка водного извлечения
чаги. Сумма фенольных веществ экстракта со
ставляет 71% от суммы экстрактивных ве
ществ. Экстракт сконцентрировали в 25 раз, что
позволило получить экстракт с суммой экстрак
тивных веществ порядка 10%. С помощью бу
мажной хроматографии экстракта установле
но, что в нем в свободном состоянии содержат
ся фенолкарбоновые кислоты и простые фено
лы. На бумажной хроматограмме они
обнаруживаются одним пятном. Использова
ние тонкослойной хроматографии в характер
ной для фенольных соединений системе ра
створителей 1 позволило их разделить. Были
идентифицированы: флороглюцин, гидрохи
нон, пирокатехин, гваякол, 3оксибензойная
кислота, феруловая кислота, сиреневая кисло
та. Флороглюцин, 3оксибензойная кислота,
феруловая кислота определены впервые.
Идентификация проведена по нанесенным
стандартам и литературным данным 9.
Для определения веществ, находящихся в
экстракте в связанном состоянии, проведен его
кислотный гидролиз хлористоводородной и
серной кислотами. На хроматограмме гидро
лизата хлористоводородной кислоты присут
ствует одно не разделившееся пятно, которое
дает положительную реакцию на сахара. Такая
картина сохраняется в течение всего процесса
гидролиза. Cерная кислота вызывает наимень
шую деструкцию моносахаридов, поэтому про
веден гидролиз экстракта серной кислотой. В
гидролизате установлено наличие глюкозы,
ксилозы, галактозы и арабинозы. Ранее в вод
ном извлечении чаги было показано присут
ствие углеводов сложного строения, структур
ными компонентами которых являлись глюко
за, ксилоза, галактоза и сорбит 5, а также ара
биноза 10. Кроме того, на хроматограмме
гидролизата проявляется вещество, дающее
положительную реакцию на сахара, которое
идентифицировать не удалось. Подбор усло
вий проявления позволил отнести это вещество
к метилированным уроновым кислотам. Мети
лированные уроновые кислоты в водном из
влечении чаги определены впервые. Иденти
фикация проведена по нанесенным стандартам
и литературным данным 11.
Башкирский химический журнал. 2012. Том 19. № 2
51
Для разделения веществ, находящихся в
экстракте, была проведена распределительная
хроматография на колонке с силикагелем. Ис
следован экстракт в концентрации 7.5% от
сухих веществ. Было отобрано 10 проб. Ана
лиз проб осуществлялся посредством спектро
фотометрии и бумажной хроматографии. Для
более детального исследования проб их кон
центрировали в 5 раз и наносили на хроматог
раммы. В первых трех пробах обнаружен пи
рокатехин. Результаты соотнесены с электрон
ным спектром стандартного вещества и литера
турными данными. В пробах 2–6 показаны
фенолкарбоновые кислоты – поксибензойная
кислота и моксифенилпропионовая кислоты.
Результаты соотнесены с литературными дан
ными и стандартом поксибензойной кислоты.
мОксифенилпропионовая кислота определена
впервые. В пробах 5–7 обнаружены вещества,
относящиеся к классу катехинов. Принадлеж
ность веществ к классу катехинов установлена
с помощью хроматографического метода. Кро
ме этого, в пробах 2–3 и 7–10 с распредели
тельной колонки идентифицированы веще
ства флавоноидной природы, а именно: изо
рамнетин и кверцетин соответственно. Фла
воноид изорамнетин определен впервые.
Обнаружены также вещества, предположи
тельно, флавонолы, идентифицировать кото
рые не удалось.
Анализируя и обобщая выше приведен
ный материал, можно сформулировать следу
ющие выводы:
Суммарное содержание фенольных соеди
нений, извлекаемых из водного извлечения
чаги диэтиловым эфиром, составляет 71% от
суммы экстрактивных веществ водного извле
чения чаги.
Из водного извлечения чаги диэтиловым
эфиром экстрагируются простые фенолы, фе
нолкарбоновые кислоты, катехины, флавонои
ды и олиго и/или полисахариды, состоящие
из глюкозы, ксилозы, галактозы, арабинозы и
метилированных уроновых кислот.
Впервые в водном извлечении чаги уста
новлены следующие вещества: флороглюцин,
феруловая, 3оксибензойная, моксифенил
пропионовая кислоты, изорамнетин, метили
рованные уроновые кислоты.
Литература
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
Государственная фармакопея СССР: Вып.2.
Общие методы анализа. Лекарственное расти
тельное сырье / МЗ СССР.– 11е изд., доп.–
М.: Медицина, 1989.– 400 с.
Пастушенков Л. В., Пастушенков А. Л., Пасту
шенков В. Л. Лекарственные растения: Исполь
зование в народной медицине и быту.– СПб.:
ДЕАН, 1998.– 384 с.
Шиврина А. Н. Химическая характеристика
действующих начал чаги // В сб.: Продукты
биосинтеза высших грибов и их использова
ние.– М.Л, 1966.– С. 49.
Yuki Nakajima, Yuzo Sato, and Tet Suya Konishi.
// Chem. Pharm. Bull.– 2007.– V. 55, №8.–
Р. 1222.
Рыжова Г. Л., Кравцова С. С., Матасова С. А.,
Грибель Н. В., Пашинский В. Г., Дычко К. А.
// Хим. фарм. ж.– 1997.– №10.– С. 44.
Якимов П. А., Андреева С. М., Алексеева Е. В.
О причинах изменения устойчивости пигмент
ного комплекса в водных экстрактах из чаги //
Комплексное изучение физиологически активных
веществ низших растений.– М.Л, 1961.– С.113.
Юмаева Л. Р., Хабибрахманова В. Р., Сысое
ва М. А., Гамаюрова В. С. / Тез. докл. Обще
рос. конф. молодых ученых «Пищевые техноло
гии».– Казань, 2006.– С. 118.
Запрометов М. Н. Основы биохимии фенольных
соединений.– М.: Высшая школа, 1974.– 214 с.
Ахрем А. А, Кузнецова А. И. Тонкослойная
хроматография.– М.: Наука, 1964.– 176 с.
Кузнецова О. Ю., Боцманова О. Е., Кудаш
кин А. А., Сысоева М. А., Шестакова Л. М.,
Гамаюрова В. С. / Тез. докл. I Форума моло
дых ученых и специалистов Республики Татар
стан.– Казань, 2001.– С. 39.
Захарова И. Я., Косенко Л. В. Методы изуче
ния микробных полисахаридов.– Киев: Науко
ва думка, 1982.– 192 с.
Сысоева М. А., Кузнецова О. Ю., Гамаюро
ва В. С., Халитов Ф. Г., Суханов П. П. //
Вестн. Казанского технол. унта (КГТУ).–
2003.– №2.– С. 172.
Государственная фармакопея СССР: Вып.1.
Общие методы анализа. / МЗ СССР. – 11е
изд., доп.– М.: Медицина, 1987.– 336 с.
ПолюдекФабини Р., Бейрих Т. Органический
анализ.– Л.: Химия, 1981.– 624 с.
Черняева Г. Н., Пермякова Г. В. // Раститель
ные ресурсы.– 2003.– Вып.1.– С. 64.
Хроматография на бумаге / Под ред. И. М. Хайса,
К. Мацека.– М.: Издво иностранной литерату
ры, 1962.– 851 с.
Работа выполнена на оборудовании ЦКП «Наноматериалы и нанотехнологии»
при финансовой поддержке Министерства образования и науки Российской Федера!
ции в рамках федеральной целевой программы «Исследования и разработки по при!
оритетным направлениям развития научно!технологического комплекса России на
2007–2013 годы» по госконтракту № 01201252915 от 28.02.2012 г тема: «Разработ!
ка биологически активных добавок на основе супрамолекулярных бионаносистем».
52
Башкирский химический журнал. 2012. Том 19. № 2
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
12
Размер файла
88 Кб
Теги
грибы, извлечения, эфиром, водного, чаги, диэтиловым, экстракции
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа