close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Способы получения спермы у животных

код для вставкиСкачать
Aвтор: Гордон Мария 2006г., Москва, Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологий им. К.И.Скрябина. каф. акушерства, гинекологии и искуственного осеменения
МЕТОДЫ ПОЛУЧЕНИЯ СПЕРМЫ
При выборе метода получения спермы следует ориентироваться на такой, который отвечает следующим основным требованиям: 1) позволяет получать весь эякулят без всяких потерь; 2) не снижает количества и жизнеспособности спермиев; 3) гарантирует здоровье производителей от травм и особенно от инфекционных болезней; 4) прост технически, выполним в производственных условиях без сложного оборудования; 5) обеспечивает стерильностъ получения спермы.
Все существующие методы получения спермы можно разделить на: 1) уретральные, позволяющие получать сперму непосредственно из уретры самца, и 2) влагалищные, заключающиеся в собирании спермы из влагалища самки после ее естественного осеменения.
Уретральные методы получения спермы. Сущность его заключается в применении искусственной вагины, позволяющей воспроизводить механические и термические раздражения нервных окончаний половою члена производителя и получать от него полноценный эякулят.
Искусственная вагина - это прибор, состоящий из цилиндра, изготовленною из жести, резины или эбонита, в просвет которою вставлена эластичная резиновая трубка. Концы резиновой трубки завернуты на концы цилиндра, благодаря чему между внутренней поверхностью цилиндра и наружной поверхностью резиновой трубки образуется замкнутое пространство, сообщающееся с внешней средой через патрубок, предназначенный для вливания воды и нагнетания воздуха между стенками цилиндра и резиновой трубки. Один конец искусственной вагины остается открытым, а на другом укрепляют спермоприемник для собирания спермы. Конструкция искусственных вагин имеет вариации в зависимости от вида животных.
Искусственная вагина для жеребца состоит из алюминиевого цилиндра, суживающегося впереди и оканчивающеюся горловиной, на которую заворачивают передний конец резиновой камеры и надевают спермоприемник в виде широкого резинового стакана. В середине цилиндра имеется патрубок с завинчивающейся металлической пробкой. Путем отвинчивания и завинчивания пробки можно регулировать давление в полости искусственной вагины. Сбоку к цилиндру прикреплена ручка для удобства фиксации вагины. При получении спермы в холодном помещении на вагину надевают чехол.
Искусственная нагина для быка образца 1942, имеет цилиндр из толстой резины и пластичную камеру, концы которой завернуты на концы цилиндра. Концы резиновой камеры на цилиндре закрепляются резиновыми кольцами.
Для наполнения вагины водой и воздухом на цилиндре имеется патрубок, в который вставлен эбонитовый краник. На одном из концов искусственной вагины фиксируется резиновым держателем стеклянный двустенный спермоприемпик. Исследования И. И. Родина показали, что при естественном осеменении во влагалище коровы кончик полового члена быка описывает почти полный круг диаметром 10 -14 см. При получении спермы в искусственную вагину из-за узости ее цилиндра кончик пениса сгибается в сторону. По этой причине вследствие болезненности у производителя наступает торможение рефлекса эякуляции. Учитывая указанную особенность, И. И. Родин сконструировал более совершенную искусственную вагину с баллонообразным расширением для свободного движения конечной части полового члена. В этом случае эякуляция приближается к естественному акту без болевых ощущений и сжатия мочеиспускательного канала.
В искусственных вагинах указанных образцов при опускании их спермоприемником вниз после эякуляции микроорганизмы, осевшие на внутренней поверхности резиновой камеры, смешиваются со спермой и вместе с ней попадают в спермоприемник. Этот недостаток, снижающий санитарные качества спермы, устраняют укорочением искусственной вагины образца 1942 г. и присоединением к ней специальной конусообразной насадки из прозрачного термостойкого органического стекла с герметическим спермоприемником. Во время совокупительного толчка кончик полового члена быка выводится из искусственной вагины в просвет насадки и не соприкасается с ее стенками; здесь происходит выделение спермы непосредственно в спермоприемник, что обеспечивает ее стерильность.
За рубежом применяют укороченные искусственные вагины (длина цилиндра 33 см) с уменьшенным диаметром. К одному из концов вагины присоединяют резиновую конусообразную трубку длиной 17 см со стеклянным спермоприемником в виде пробирки. Перед получением спермы на резиновую трубку со спермоприемником надевают специальный теплоудерживающий чехол. В момент глубокого совокупительного движения кончик пениса безболезненно загибается в резиновой трубке в сторону и происходит нормальная эякуляция. В России в последние годы стали использовать укороченную искусственную вагину (цилиндр длиной 30 см) с разовым спермоприемником из полиэтиленовой пленки. Имеются и другие модели приборов, но все они построены по одному принципу.
Искусственная вагина для барана состоит из эбонитового цилиндра, она не содержит специальных колец для фиксации резиновой камеры, концы ее прочно удерживаются на цилиндре самостоятельно. Отверстие патрубка, находящегося на середине цилиндра, широкое, и в него вставляется резиновая пробка с эбонитовым краником.
Искусственная вагина для хряка. Для получения спермы от хряков пользуются укороченной искусственной вагиной, применяемой для быков, или одной из моделей А. В. Квасницкого. Укорочение искусственной вагины, предназначенной для быков, производят с учетом длины пениса хряка. При слишком короткой вагине наступает торможение половых рефлексов, а при длинной - потеря спермы (ее обратное вытекание). Поэтому необходимо производить индивидуальный подбор длины цилиндра. Спермоприемником служит темная широкогорлая стеклянная банка емкостью 500 мл с пластмассовым фильтром, который можно заменить сложенной вдвое стерильной марлей. Спермоприемник присоединяют к вагине с помощью отрезка резиновой камеры, на котором сверху делают отверстие диаметром около 3 мм для выхода воздуха из спермоприемника в момент наполнения ее спермой. На спермоприемник надевают ватный или поролоновый чехол. В последнее время стали использовать разовые спермоприемники из полиэтиленовой пленки. Их применение наряду с другими мероприятиями снижает микробную загрязненность спермы.
А. В. Квасницкий предложил электрическую и водоналивную искусственные вагины. Обе они имеют двустенные металлические цилиндры и собственно вагины. В электрической искусственной вагине вода быстро нагревается электросвечой, расположенной в нижней части между стенками цилиндра. Перед получением спермы свечу необходимо отключить от сети. Водоналивную искусственную вагину заправляют горячей водой. Собственно вагину (коническую металлическую трубку с патрубком и закрепленной резиновой камерой) вставляют в просвет нагретого металлического цилиндра, смазывают внутреннюю поверхность камеры стерильным вазелином и накачивают через патрубок воздух, давление которого контролируют с помощью водного манометра (нормальное давление 45 - 50 см водяного столба). Спермоприемник изготовлен из прозрачной пластмассы. Он состоит из градуированного цилиндрического стакана емкостью 600 мл и навинчивающегося на него колпака. Для фильтрации спермы в процессе ее получения в спермоприемник вставляют специальный фильтр. Присоединяют спермоприемник к вагине при помощи резиновой соединительной трубки.
Искусственная вагина для кролика состоит из стеклянного баллона с двумя отверстиями, вокруг которых оттянуты выступы для укрепления (внутренней) резиновой трубки. Заполняют вагину теплой водой через отходящие от баллона два патрубка, соединенных с эбонитовыми кранами. В качестве спермоприемника используют небольшую пробирку, которую присоединяют к стеклянному баллону резиновой муфтой. Искусственная вагина кролика отличается сравнительно большим объемом баллона для воды, чтобы быстро не охлаждался эякулят.
Получение спермы посредством искусственной вагины. У животных всех видов метод искусственной вагины позволяет получать сперму двумя путями: 1) на самку, самца или кастрата и 2) на чучело.
Сперму на животное получают в обстановке, обычно создаваемой при естественном осеменении. Его лучше помешать в станок. В момент садки техник держит подготовленную вагину справа на уровне таза животного. При получении спермы на искусственную вагину требуется определенный навык. Нельзя подставлять вагину к головке полового члена преждевременно или, наоборот, поздно, так как это обусловливает торможение эякуляции. Ее следует подставлять в тот момент, когда половой член производителя приближается к крупу манекена. При этом у быка и барана левой рукой через препуций слегка отводят половой член в сторону и направляют его в отверстие искусственной вагины, которую удерживают до конца эякуляции.
Делать это надо осторожно, чтобы не вызвать болевых ощущений. В половом члене быка мною чувствительных нервных окончаний, и они сосредоточены главным образом в головке пениса. Одни из них, так называемые колбы Краузе, воспринимают температурные раздражения. При этом поверхностно лежащие колбы Краузе возбуждаются под влиянием холода, а глубоко лежащие - под воздействием тепла. Другие нервные окончания - Фатер-Пачиниевы тельца - воспринимают давление; они находятся в висцеральном листке препуция. Имеются еще тельца Мейснера, являющиеся органами осязания, и нервные чувствительные окончания, воспринимающие боль. Чрезмерное возбуждение этих нервных окончаний тормозит проявление совокупительного рефлекса и эякуляции. У хряка и жеребца в отличие от быка и барана эякуляция происходит в результате соответствующих раздражений нервных окончаний не только головки, но и основания полового члена.
В момент эякуляции у крупного и мелкого рогатого скота искусственная вагина должна располагаться под углом 35 - 45 °С по отношению к горизонтальной плоскости. У животных других видов уклон ее может быть меньше. Слишком большие уклоны вагины вверх, вниз и в стороны могут травмировать половой член.
Животные, чтобы не вызвать торможения половых рефлексов у производителя и профилактировать у него поражения связочного аппарата тазовых конечностей, должны быть ниже производителя (для быка примерно на 10 см) и с нешироким крупом.
От производителей всех видов сельскохозяйственных животных можно получать сперму в искусственную вагину, пользуясь вместо животного чучелом. Искусственную вагину располагают сбоку чучела так же, как и при получении спермы на животное, или чаще всего помещают вагину внутри чучела в тазовой полости. Однако при получении спермы на чучело отсутствуют необходимые нейросексуальные раздражители, что приводит к торможению половых рефлексов. До 40 % взрослых быков не удается приучить делать садки на чучело, а у некоторых быков, делающих садку, со временем возникает искусственно приобретенная импотенция. Для усиления половых рефлексов, получения большего и лучшего качества спермы от быков-производителей лучше пользоваться передвижным чучелом конструкции П. И. Пакенаса. Бык активно идет за чучелом. Когда чучело останавливают, бык делает садку.
По окончании эякуляции искусственную вагину поворачивают спермоприемником вниз, открывают краник, чтобы выпустить воздух и обеспечить стекание спермы в спермоприемник. Затем спермоприемник отделяют от вагины и немедленно передают его в лабораторию, а вагину - в моечную.
Сперму хряков обычно получают на чучело. Предложено много чучел различных конструкции. Удобным оказалось деревянное чучело модели А. В. Квасницкого с откидной спинкой. Внутри чучела размещены электрическая вагина со спермонрисмником и две электролампочки, поддерживающие определенную температуру. Чучело укреплено на деревянной площадке.
Имеется металлическое чучело конструкции В. Б. Дорошкова. Его достоинством является возможность обогревания задней части и изменения угла наклона искусственной вагины. Поэтому создаются наилучшие условия для процесса эякуляции. С. И. Сердюк предложил новое чучело ССХ-2 (станок для садки хряков, модель 2), деревянный корпус которого обтянут тканью, пропитанной эпоксидной смолой. Это позволяет мыть и дезинфицировать чучело без опасения нарушения его целостности. Искусственная вагина фиксируется с возможностью ее свободного движения вокруг своей продольной оси, что максимально приближает коитус к естественному акту. Поэтому исключается торможение половых рефлексов и получают сперму высокою качества.
При получении спермы у жеребца вагину нужно крепко держать у таза кобылы, чтобы создать нужный упор для полового члена. Вследствие сильного увеличения объема полового члена во время эрекции головки создастся опасность разрыва камеры. Поэтому при чрезмерном повышении давления в вагине открываю краник или отвертывают немного винтовую пробку, выпускают часть воздуха и воды и вновь завинчивают пробку. Давление в вагине следует изменять на основе учета индивидуальных реакций жеребца.
При получении спермы от кролика искусственную вагину подставляют рукой, подведенной в области промежности, под круп самки или чучела.
Правила получения спермы. Получают сперму от производителей в условиях теплого, светлого, просторного манежа и идеальной чистоты. За 1,5 - 2 ч до получения спермы в манеже и лаборатории включают бактерицидные лампы, что уменьшает микробную и грибковую загрязненность спермы. Производителей, чучело или животное, на которое берут сперму, тщательно чистят, используют поролоновые накладки на искусственную вагину. При чистке производителей особое внимание обращают па нижнюю часть живота, область препуциального отверстия, которую обмывают теплым 2%-ным раствором соды, фурацилином 1 : 5000. В теплое время года быков, хряков и жеребцов моют под душем. Некоторые специалисты рекомендуют полость препуция у быков промывать различными дезинфицирующими растворами. Однако следует иметь в виду, что дезинфицирующие вещества при длительном их применении уменьшают бактерицидные свойства слизистой оболочки препуция. На станциях искусственного осеменения в ряде стран полость препуция у быков перед получением спермы не промывают.
Чтобы не допустить несчастных случаев при получении спермы от производителей, особенно от быков и жеребцов, в манеже устраивают заградительные столбы. Лицам, получающим сперму от производителей, не следует присутствовать при ветеринарно-санитарных обработках, особенно таких, которые причиняют животным боль. Вообще в станке и манеже, предназначенных для получения спермы, запрещается проводить ветеринарные мероприятия (туберкулинизация, взятие крови и др.), так как при этом у производителей возникают условные тормозные рефлексы на станок или манеж. Производителям всех видов животных перед получением спермы следует обязательно предоставлять проводку, что усиливает проявление половых рефлексов. Для улучшения качества эякулята в некоторых странах на станциях искусственного осеменения перед получением спермы быка сильно возбуждают коровой. Особенно хорошие результаты получаются при использовании самки в охоте. Макмилан и Фильден установили, что возбуждение быка в присутствии коровы в охоте увеличивает объем получаемой спермы на 18,4-18,9% по сравнению с объемом, получаемым при использовании для возбуждения той же коровы при отсутствии охоты. Половое возбуждение быка в течение 6-10 мин является важным средством улучшения качественных показателей спермы (увеличение объема, концентрации, уменьшение микробных тел и др.) и ее оплодотворяющей способности.
Искусственную вагину для получения спермы у производителей необходимо правильно собрать и подготовить. Новую камеру тщательно моют горячим 3 %-ным раствором двууглекислой соды, чтобы удалить сернистые соединения, и обильно ополаскивают чистой водой. После высушивания камеру натягивают на цилиндр так, чтобы гладкая ее поверхность была обращена внутрь, а шероховатая - к цилиндру. Внутренняя трубка искусственной вагины должна быть равномерно натянута на основной цилиндр. Слабое или слишком сильное натяжение трубки, перекручивания ее могут нарушить коитус. Искусственную вагину надо приготовить так, чтобы воспроизвести естественные условия при коитусе (температуру, давление, скользкость и др.).
Каждый раз перед употреблением искусственную вагину обеззараживают в соответствии с действующей инструкцией по проведению искусственного осеменения. Если после обеззараживания внутренняя поверхность вагины остается влажной, ее досуха протирают стерильной салфеткой. Очень быстро и надежно стерилизация вагины достигается в паровом стерилизаторе конструкции В. А. Пасечника. В стерилизаторе вода закипает за 15-17 мин. Стерилизация паром при температуре 100 °С 60 вагин и 80 спермоприемников проводится за 1,5 - 2 ч.
Разовые спермоприемники из полиэтиленовой пленки вместе с искусственными вагинами стерилизуют автоклавированием при 105°С ( - 0,5 атм избыточных) в течение 30 мин.
В Чехословакии для стерилизации искусственных вагин используют специальный стерилизатор с ультрафиолетовым излучателем, расположенным внутри трубчатого держателя, на который фиксируют вагину. Патогенные микроорганизмы уничтожаются за 40 с. При этом резиновые стенки искусственной вагины не повреждаются.
Для заполнения вагины готовят воду, подогретую до 60 - 70 °С. Перед использованием вагины температуру проверяют химическим термометром, вводимым в просвет внутренней трубки. Постоянную температуру в подготовленной искусственной вагине удобно поддерживать помещением ее в шкаф-термостат. При получении спермы температура вагины должна быть в пределах 40 - 42 градуса.
Исследования И. И. Родина показали, что для вагины быка и барана оптимальной температурой является 41 -42С. В этом случае температура резиновой камеры у входа в вагину соответствует температуре тела животною, что способствует нормальному коитусу. Понижение температуры нарушает динамику эякуляции. Температура выше 42С, не оказывая отрицательного влияния на течение полового акта, снижает жизнеспособность и переживаемость спермиев. Кроме того, повторные применения вагины с высокой температурой изменяют порог возбудимости, вследствие чего в дальнейшем у производителей эякуляция происходит только при более высокой температуре вагины.
Применение холодной вагины обусловливает быстрое развитие у производителя тормозных рефлексов.
Для смазывания внутренней стенки вагины используют простерилизованный на водяной бане чистый белый иди желтый вазелин. Однако от него резиновая камера быстро разрушается, ее эластичность уменьшается. Поэтому после получения спермы необходимо как можно быстрее очистить вагину от вазелина. Лучшие результаты для смазывания резиновой камеры получаются от применения специальных растворов, предложенных В. А. Пасечником (рецепт № 1: крахмал - 6 г, глицерин - 10 г, дистиллированная вода - 100 мл; рецепт № 2: крахмал - 6 г. глицерин - 10 г, кипяченое молоко- 100 мл; рецепт № 3: крахмал - 6 г, глицерин- 10 г, лимоннокислый натрий - 3 г, вода дистиллированная - 100 мл), или глицериновых сред для разбавления спермы.
Необходимо тщательно следить за тем, чтобы внутренняя поверхность искусственной вагины была смазана по всей ее длине, за исключением конца, который оставляют на 3 - 4 см несмазанным, чтобы он лучше зажимал спермоприемник. Особое внимание уделяют чистоте спермоприемника. Его каждый раз тщательно моют раствором соды и чистой водой. Перед употреблением спермоприемник стерилизуют в автоклаве или кипятят, а затем ополаскивают свежепростерилизованным физиологическим раствором хлористого натрия.
Объем эякулята быка и барана очень мал. Поэтому для предотвращения гибели спермиев от температурного шока при получении спермы необходимо иметь теплый, лучше стеклянный двустенный спермоприемник. Межстенное пространство спермоприемника для быка вмещает 100 мл, а для барана - 50 мл воды. Вода должна быть подогрета до 30-35 С.
При накачивании в вагину воздуха надо нагнетать его столько, чтобы выходное отверстие ее было полностью закрыто, а полость окружена упругими, напряженными, ровными (без складок) стенками. При недостаточном давлении эякуляция протекает вяло. Слишком сильное давление, затрудняющее введение полового члена в вагину, может нарушить эякуляцию: она нормально протекает у барана, быка и хряка при давлении в вагине 40 - 60 мм ртутного столба.
При получении спермы следует учитывать индивидуальные особенности производителей, их разную степень реактивности. Одних быков сразу подводят к самке или чучелу, других предварительно выдерживают, не допуская к станку в течение 3-5 мин, и т. д.
Техник должен учитывать индивидуальные особенности производителей с целью получения максимального количества и лучшего качества спермы.
У хряков эякуляция нарушается или совершенно не происходит, если давление воздуха в искусственной вагине ослабевает. Поэтому после накачивания воздуха в искусственную вагину ее надо проверить: в ней не должно быть утечки воздуха или воды.
Каждый раз по окончании работы и особенно когда при получении спермы произошло соскакивание или разрыв камеры, необходимо проверять наличие всех резиновых деталей вагины. Слетевшие с вагины резиновые кольца или оторвавшиеся части резиновой камеры могут надеться на половой член и пережать его вплоть до некроза. После получения спермы воду из вагины выливают, помещают ее в емкость с раствором фурацилина 1 : 5000, затем тщательно моют теплым 1,5%-ным раствором углекислой соды, ополаскивают чистой водой и хранят в сухом состоянии.
Стерильной салфеткой протирают препуции, на волосках которою в момент коитуса и искусственную вагину может оставаться вазелин. К нему прилипают различные механические примеси, вызывая баланопостит. Часто это бывает у быков, когда в качестве подстилки используют опилки. Поэтому опилки применять нельзя.
Метод получения спермы на вагину наиболее распространен в практике искусственного осеменения и считается лучшим из всех существующих методов как по простоте техники, так и по качеству и количеству получаемой спермы.
Фистульный метод получения спермы. Уретростомию необходимо производить с таким расчетом, чтобы нижний конец фистулы располагался на уровне дна таза между седалищными буграми. Через несколько дней после операции жеребцы приспосабливаются к новым условиям, для мочеиспускания они принимают позу, характерную для кобылы, и не овлажняют мочой конечности. Через 3-4 недели после операции производитель может быть использован для получения спермы через фистулу.
Перед получением спермы корень хвоста забинтовывают, а края фистулы протирают ватными тампонами, смоченные в растворе борной кислоты, физиологическом растворе натрия хлорида, 50-60% спирте и др. В момент садки жеребца на кобылу в охоте хвост производителя отводят в сторону и под фистулу подставляют сосуд с овальным входом. Через несколько секунд сперма сильной струей заполняет спермоприемник. На все это требуется 3-4 мин. стоящий из тонкой резиновой трубки, один конец которой наглухо закрыт, а свободный растянут на широком резиновом кольце. Посредством спермособирателя сперму поучают двумя способами: 1) без введения его во влагалище и 2) с введением во влагалище самки
Лунине результаты получены при использовании спермособирателя для быка, сконструированного И. И. Родиным, в котором создаются более естественные условия для эякуляции
Получении спирты метолом мастурбации - путем механического раздражения головки полового члена трением о нее препуциального мешка. Этот метод дает хороший эффект только у собак. Практика покачала, что у них быстро развивается рефлекс на мастурбацию, в силу которого при помещении собаки на стол и уже при подготовке к мастурбации у животного появляется эрекция, а после нескольких соприкосновений препуция с головкой половою члена происходит эякуляция. V копытных животных этим методом получать сперму не удается.
Получение спермы методом массажа. У быка перед получением спермы полосы па препуциальном мешке подстригают. Без предварительного контакта производителя с коровой (без возбуждения) сперму получить не удается. Поэтому быка подводят к корове для общего возбуждения, под влиянием которого сперма из придатка семенника перемешается в ампулы спермиопровода. После этого руку, обильно смазанную вазелином, вводят в прямую кишку быка - за ампуловидное ее расширение, а затем отводят назад вместе со свободно перемещающимся участком прямой кишки в тазовую полость, где нащупывают шейку мочевого пузыря и расположенные впереди ампулы спермиопроводов, выступающие в форме утолщенных шнуров, и пузырьковидные железы. Нежным поглаживанием рукой их содержимое выдавливают и по мере его выделения собирают в стеклянный сосуд или в обычный спермоприемник.
Метод элктроэякуляции. В лаборатории искусственного был разработан метод электороэякуляции у баранов и козлов. Самцу, укрепленному в станке, вводят через прямую кишку серебряный электрод и располагают над мочевым пузырем. Вторым электродом служит пинцет Пэана, налагаемый на верхушку мошонкн. Источник тока - батарея в 30 В, После установки прибора замыкают и размыкают электоцепь сначала короткими импульсами, а потом дают несколько удлиненных импульсов. Под влиянием электротока ампулы спермиопроводов сокращаются и находящиеся в них спермин выделяются.
В настоящее время предложены методы электроэякуляции у животных разных видов (быков, баранов, кроликов, птицы), но ни один из них ни нашел практического применения.
Влагалищные методы получения спермы. Губочный метод применили для получения спермы от быков, баранов и жеребцов. В настоящее время губочный метод в практике искусственного осеменения не применяется.
Сущность метода заключается в использовании губки, которую после соответствующей обработки вводят во влагалище самки, находящейся в состоянии половой охоты, а затем допускают коитус с производителем. После эякуляции губку извлекают из влагалища, а эякулят, вы делившийся во время полового акта и впитавшийся и губку, отжимают руками или специальным прессом.
Влагалищный (зеркальный) метод заключается в собирании спермы из влагалища влагалищным зеркалом или другими приборами сразу после коитуса. Этот прием использовали у коров, овец и лошадей; у лошадей удается собрать сперму только когда шейка матки закрыта. У свиней получают сперму после введения стерильного тампона в переднюю часть влагалища. В этом случае во время эякуляции сперма вытекает из вульвы. Сейчас данный метод не применяется. Литература
Ветеринарное акушерство и гинекология. Пол редак. В.С.Шипилова. Москва, Агропромиздат 1986
Документ
Категория
Ветеринария
Просмотров
452
Размер файла
82 Кб
Теги
рефераты
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа