close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Синтез и противомикробная активность гидразонов акридона

код для вставкиСкачать
Aвтор: Lyahov Sergey Июнь/2007г., Одесский национальный университет им. Мечникова, кафедра фармацевтической химим, "хор"
Одесский национальный университет им. И.И.Мечникова
Химический факультет
Кафедра фармхимии
Физико-химический институт им.А.В.Богатского
Национальной Академии Наук Украины
Отдел медицинской химии
СИНТЕЗ И ПРОТИВОМИКРОБНАЯ АКТИВНОСТЬ
ГИДРАЗОНОВ АКРИДОНА
Дипломная работа
студента VI курса заочного обучения
Одесса, 2007
РЕФЕРАТ
Квалификационная работа выполнена в Физико-химическом институте им. А.В.Богатского НАН Украины в отделе медицинской химии. Работа посвящена синтезу гидразинсодержащих производных акридина и изучению их противомикробной активности. Квалификационная работа выполнена на 36 страницах печатного текста. Содержит 13 рисунков и 5 таблиц. Использовано 50 литературных источников.
Ресинтезировано 7 описанных ранее акридинилгидразонов N,N-диалкилглицина. Изучена их противомикробная активность и обнаружено, что все синтезированные соединения этого ряда значительно превосходят по активности Акридиновый оранжевый. Синтезировано два ранее неописаных акридинилгидразона N,N-диалкилгамма-аминомасляной кислоты, доказана их структура набором спектральных методов.
СОДЕРЖАНИЕ
Введение4
1Производные аминоакридина: получение и противомикробная активность (обзор литературы)5
1.1Исходные акридинилирующие агенты и акридон5
1.2Методы получения гидразиноакридинов8
1.3Антибактериальная активность производных акридина.11
1.4Биологическая активность гидразонов акридона12
2Обсуждение результатов14
2.1Синтез исходных акридона, 9-хлоракридина и 9-метоксиакридина15
2.2Синтез исходных гидразидов N,N-диалкилированого глицина17
2.3Синтез исходных гидразидов N,N-диалкилированой ГАМК18
2.4Синтез гидразонов акридона20
2.5Изучение противобактериальной активности гидразонов акридона24
3Экспериментальная часть27
3.1Химическая экспериментальная часть.27
3.2Биологическая экспериментальная часть29
Выводы30
Литература31
ВВЕДЕНИЕ
Производные 9-аминоакридина являются одним из наиболее изученных классов гетероциклических соединений с точки зрения их биологической активности.
К этому классу относятся противомалярийный препарат акрихин, противоопухолевые агенты ASA и нитракрин, акридиниламиноспирты и бис-акридины, обладающие противовирусным и интерферониндуцирующим действием. Для производных акридинилгидразина показано противовирусная и антитрипаносомозная активность. Многие аминоакридины обладают значительным противомикробным потенциалиом. В основе большинства видов биологической активности производных 9-аминоакридина лежит их способность к интеркаляции в ДНК. Примечательно, что именно 9-аминоакридин и его аналоги явились первыми из изученных интеркаляторов.
Ранее было обнаружено, что акридинилгидразоны N,N-диалкилированного глицина являются интеркаляторами ДНК средней силы и эффективно ингибируют матричные функции ДНК в условиях ПЦР, являются эффективными противовирусными и интерферониндуцирующими агентами. В связи с этим, в рамках рабочей гипотезы о потенциальной активности интеркаляторов относительно любых объектов - носителей доступной ДНК, было выдвинуто предположение о наличии у гидразонов акридона противобактериальной активности. В связи с этим целью работы был ресинтез описаных ранее акридинилгидразонов N,N-диалкилированного глицина и синтез ранее неописаных акридинилгидразонов N,N-диалкилгамма-аминомасляной кислоты и изучение их противобактериальной активности. Работа является частью исследований, проводимых в отделе медицинской химии Физико-химического института им. А.В. Богатского НАН Украины по целенаправленному созданию нуклеотропных противовирусных, противобактериальных препаратов и индукторов интерфеорона.
1 ПРОИЗВОДНЫЕ АМИНОАКРИДИНА: ПОЛУЧЕНИЕ И ПРОТИВОМИКРОБНАЯ АКТИВНОСТЬ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ) 1.1 Исходные акридинилирующие агенты и акридон
Практичеcки вcе опиcанные в литературе акридинcодержащие интеркаляторы получены конденcацией реакционноcпоcобных производных акридина, таких как 9-хлоракридин и 9-метоксиакридин, c cоответcтвующими соединениями, содержащими амино- или гидразиногруппу. Одним из вариантов получения исходных 9-хлор- и 9-метоксиакридина является метод, при котором сначала получают акридон. 1.1.1 Акридон
Для получения незамещенного акридона могут быть иcпользованы методы, оcнованные на непоcредcтвенном окиcлении акридина. Так, 1.2 был получен окиcлением 1.1 гипобромитом натрия в метаноле по Лехмштедту [1] (рис.1.1). 1.11.2Рисунок1.1Синтез акридона окислением акридина Опиcан метод получения 1.2 обработкой 1.1 надбензойной киcлотой c поcледующей изомеризацией образующегося N-окиcи акридина 1.4 в акридон укcуcным ангидридом [2]. Для получения акридонов, не cодержащих амино- и гидрокcильных групп (1.2, где R  NH2, OH), раcпроcтраненной являетcя циклизация cоответcтвующих N-фенилантраниловых киcлот 1.5 cерной киcлотой [3]. Для акридонов, содержащих амино- и оксигруппы удобным cпоcобом получения являетcя изомеризация 3-фенилантранилов 1.3 в уcловиях киcлотного катализа [4, 5] или окиcление cоответcтвующих 2-аминобензофенонов 1.6 [6] (рис. 1.2)
1.11.31.41.21.51.6Рисунок1.2Способы синтеза замещенных акридонов. 1.1.2 9-Хлоракридин
В литературе [7, 8] описан способ получения 9-хлоракридина 1.7, в основе которого лежит циклизация N-фенилантраниловой кислоты 1.5 под действием 8-кратного избытка хлорокиси фосфора при кипячении.
1.51.7Рисунок1.3Синтез 9-хлоракридина При этом, согласно литературе, выходы составляют 65 - 80 %. Ранее было показано [9], что уменьшение избытка хлорокиси фосфора из 8 до 1.5-кратного (от расчетного) с разбавлением реакционной среды хлороформом снижает опасность проведения синтеза и трудоемкость стадии нейтрализации, но не уменьшает количество образующихся в результате реакции смолистых примесей.
1.1.3 9-Метоксиакридин
9-Метоксиакридин 1.8 является удобным реагентом при получении производных 9-аминоакридина в мягких условиях [10]. От 9-хлоракридина 1.7, применяемого в тех же целях, его выгодно отличают стабильность при хранении и отсутствие побочных веществ кислого характера при акридинилировании оснований аминокомпонентов. Основным методом получения 1.8 является обработка 1.7 метилатом натрия в кипящем метаноле (рис. 1.4). Выходы при этом составляют 85 - 90 % [11]. С другой стороны, было показано, что абсолютная среда не является обязательной для успешного проведения реакции. 9-Метоксиакридин образуется и в присутствии в качестве основания гидроксида натрия вместо метилата. В этом случае следует считаться с возможностью гидролиза как 9-хлоракридина, так и продукта реакции до акридона, однако скорость этого гидролиза, по-видимому, невелика. При ограниченном времени проведения реакции удается достичь выходов на уровне 65 - 70 %.
1.71.8Рисунок1.4 Синтез 9-метоксиакридина в присутствии метилата натрия игидроксида натрия. 1.2 Методы получения гидразиноакридинов
Основной реакцией, лежащей в основе получения производных 9-гидразиноакридинов является реакция замещение у C9-атома акридинового цикла (рис. 1.5) [11].
1.7 (X = Cl)1.8 (X = OCH3)Рисунок1.5Схема синтеза 9-гидразиноакридинов 9-хлоракридин явился первым производным акридина, использовавшимся для получения производных 9-гидразиноакридина, при этом наилучшие результаты были достигнуты при проведении реакции в феноле [12 - ,13,14,15,16,17]. Несмотря на обратимость реакции и, следовательно, целесообразность введения одного из реагентов в избытке (для смещения равновесия), в большинстве случаев синтезы ведут при соотношении реагентов близких к эквивалентному. Количество фенола (с учетом его небольшой молекулярной массы) может быть небольшим. В большинстве случаев оно определяется растворимостью реагентов в феноле в выбранных экспериментальных условиях.
В большинстве случаев реакцию по умолчанию проводят при 110 - 120 oC, однако этот температурный диапазон не является строго обязательным. По-видимому, реакция не менее успешно может протекать и при меньших температурах. Так, при акридинилировании гидразидов аминокислот действием 2-метокси-6,9-дихлоракридина применялся следующий температурный режим: 40 мин при 100 oC и 150 мин. при 60 - 80 oC [18]. Одновременно, в работе [9] хорошие выходы были достигнуты при более мягких условиях для акридинилирования менее нуклеофильных аминокомпонентов. К сожалению, данные по рациональному выбору температурного диапазона реакции в доступной литературе нам обнаружить не удалось.
Продолжительность синтеза, необходимая для достижения максимальных выходов, варьируется в зависимости от нуклеофильности гидразинокомпонента и температуры реакции в широких пределах. Так, при акридинилировании гидразинов действием 9-хлоракридина, высокие выходы достигаются всего за 30 - 40 минут при 60 - 65 oC. Для достаточно полного акридинилирования 4-нитроанилина требуется нагревание при 120 oC в течение 6 часов. Считается [19], что реакция акридинилирования идет в условиях общего кислотного катализа. Именно этим соображением и обуславливают выбор фенола в качестве растворителя. С другой стороны, показано, что при реакции 9-хлоракридина с избытком первичного амина в отсутствии растворителя (т.е в среде, которую следует считать основной) продукты образуются в мягких условиях, быстро и с хорошими выходами [9]. Таким образом целесообразность кислотного катализа и использования фенола в качестве растворителя весьма сомнительна.
Основной проблемой при выделении продуктов акридинилирования является отделение остатков фенола и продуктов его окисления и, с другой стороны, отделение побочного продукта - акридона. Если от основной массы фенола удается избавиться отмыванием продукта раствором щелочи (при выделении продукта акридинилирования в виде основания) или диэтиловым эфиром (при выделении в виде гидрохлорида), то удаление остаточных количеств 1.2 представляет значительную проблему. Так, после двух последовательных операций (осаждение основания из водного раствора 1  раствором NaOH, фильтрование и промывка основания на фильтре водой, перевод полученного основания в гидрохлорид) в продукте все еще оставался фенол на уровне 0.01 - 0.05 % [9]. Удаление акридона является еще более сложной задачей из-за крайне низкой растворимости акридона в большинстве органических растворителей. Так, во всех образцах гидразиноакридинов, полученных из 9-хлоракридина и оснований гидразинов методом полуколичественной ТСХ в присутсвии свидетеля обнаружен акридон на уровне не менее 0.01 %. В отдельных образцах (как правило - акридиниламинокислотах) содержание неудаляемого акридона достигает 1 % [9].
Основными недостатками 9-хлоракридина является его низкая стабильность при хранении, раздражющие свойства и чрезвычайно высокая чувствительность к влаге в условиях синтеза. Так, при хранении 9-хлоракридина в течение 1 месяца при комнатной температуре он подвергается трансформации на 10 - 15 %, причем акридон составляет не более 7 - 8 %. Через 1 год хранения при - 18 oC в герметично закрытрой таре 9-хлоракридин в образце не обнаруживается.
При попадании на слизистые (твердое вещество или пары) 9-хлоракридин вызывает сильное чувство жжения, а при попадании значительных количеств на незащищенную кожу (особенно в виде раствора в органических растворителях) может вызвать изъязвление. Во всех случаях наблюдается стойкая пигментация покровов. Легко проникает через резиновые перчатки. При работе с ним следует применять специфические меры предосторожности.
При акридинилировании гидразинов действием 9-хлоракридина чрезвычайно важное значение имеет отсутствие влаги в растворителях, поскольку 9-хлоракридин с легкостью подвергается гидролизу и алкоголизу (рис.1.6), катализируемым сильными кислотами, причем реакция является автокаталитической, т.к в результате нее кроме акридона образуется HCl.
1.71.2Рисунок1.6 Гидролиз и алкоголиз 9-хлоракридина Работ, в которых 9-метоксиакридин использовали для синтеза производных 9-амино- и 9-гидразиноакридина, крайне мало. Так, на более чем 200 работ, в которых для получения 9-аминоакридина использован 9-хлоракридин, приходится всего 12 работ, в которых использован 9-метоксиакридин. Для получения производных 9-гидразиноакридина возможность применения 9-метоксиакридина впервые показана в работах сотрудников Физико-химического института им. А.В. Богатского НАН Украины. Этот реагент был применен нами для акридинилирования аминокислот и их эфиров [20], акридиниламиноспиртов [21], анилинов [22], гидразинов [23] и гидразидов феноксикарбоновых [24] и аминокислот [25]. Не рассматривая подробно эти работы отметим лишь основные результаты.
9-Метоксиакридин является эффективным акридинилирующим агентом и позволяет получать производные 9-амино- и 9-гидразиноакридина с высокими выходами и в мягких условиях (кипячение в метаноле).
Скорость реакции в значительной степени зависит от нуклеофильности аминокомпонента и составляет от нескольких секунд (для акридинилирования производных арилгидразинов и семикарбазида) до 8 часов (для анилинов). Для нерастворимых в метаноле аминоксилот и дигидразидов двухосновных кислот продолжительность приходится увеличивать до 12 - 24 часов, соответственно.
При акридинилировании гидрохлоридов аминов категорически необходимо применение абсолютных растворителей и строго контролировать содержание влаги и избыточной HCl в гидрохлоридах аминокомпонентов в связи с чрезвычайно высокой склонностью 9-метоксиакридина к образованию акридона (при наличии в реакционной среде влаги и/или кислоты).
1.3 Антибактериальная активность производных акридина.
Работы по противомикробной активности ряда аминоакридинов, опубликованные до 1970 года, подробно проанализированы в обзорной статье [26], где автором отмечается высокая перспективность акридинов и их аминопроизводных в качестве противомикробных агентов при применении in vivo и in vitro, в качестве антисептических агентов и фунгицидов. Так, производные 9-аминоакридина 1.9 запатентованы [27] в качестве антисептических средств. Облучение светом в ряде случаев повышает противобактериальную активность этих производных [28], что дополнительно указывает на опосредование противобактериального действия нуклеиновыми кислотами. В ряде случаев показано ингибирующее действие аминоакридинов на размножение микобактерий [29].
R' =H, CH3CO; R'' = H, CH3CO;
R''' = CnH2n+1, CnH2n (n = 1...10)
1.91.10 В серии работ [30 - , 31, 32, 33] показана активность ряда нитропроизводных 9-аминоакридина 1.10, зависящая в большей степени от характера и положения заместителей R и R', чем от положения нитрогруппы.
Бис-акридины при слабом мутагенном эффекте (< 1 % относительно 9-аминокридина или 38.5 мут.кол./мкМ/чашку) являются сильными ингибиторами роста Salmonella typhimurium (0.17 - 1.84 мкМ / чашку - 50 %) [34].
Однозначная корреляция противомикробной активности с интеркалирующей способностью и способностью ингибировать транскрипцию была показана для серии производных акридинона [35]. Кроме того, показано [36] сильное потенциирование малоактивными (при индивидуальном применении) акридинами действия сульфаниламидных препаратов.
И, наконец, вышедший в 2001 г подробный обзор по антибактериальной активности производных акридина [37] показывает, что эти объекты не теряют своей актуальности и работа в этом направлении продолжается.
1.4 Биологическая активность гидразонов акридона
Для гидразонов акридона показано ингибирующее влияние на различные формы Schistosoma cruzi [38]. 10-[2-(Диэтиламино)этил]-акридин-9-он-(тиазолидин)гидразон 1.11 проявил выраженную активность (p.o) относительно Shistosoma mansoni, причем трехкратное применение препарата в дозе 20 мг/кг через 12 недель после инфицирования мышей приводило к полному исчезновению всех форм паразита в организме животных [39].
1.111.12 Аналогичные результаты были получены на обезьянах [40, 41] и при раннем применении препарата, - в течение 24 ч после инфицирования (100 мг/кг) и через 7 суток после инфицирования (25 мг/кг) [42]. При этом препарат, как и ряд его аналогов оказался малотоксичным [43]. Активность препарата обусловлена избирательным ингибированием экспрессии генов паразита [44]. В серии аналогов 1.11 по крайней мере 4 вещества проявили высокую шистосомоцидную активность, ингибируя развития паразита у инфицированных обезьян даже в концентрациях 12.5 мг/кг; побочные эффекты при этом практически отсутствовали [45].
Фунгицидная активность производных акридина убедительно продемонстрирована серией работ индийских исследователей [12 - 17], причем наибольшую активность проявили гидразинсодержащие производные 1.12.
1.131.14 Бис-аналоги 1.13 проявили высокую противовирусную активность в экспериментах куриных эмбрионах относительно вируса гриппа А2/Гонконг [24], а соединения 1.14 оказались высокоэффективными индукторами интерферона [46].
2 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
Для ранее синтезированных соединений общей формулы 1.14 нами [47] было установлено существование таутомерного равновесия и показано, что соединения 1.14 в виде оснований предпочтительно находятся в "акридоновой" форме 1.14Б.
1.14 А1.14Б Было обнаружено, что соединения 1.14 являются интеркаляторами ДНК средней силы и эффективно ингибируют матричные функции ДНК в условиях ПЦР [25], являются эффективными противовирусными [48] и интерферониндуцирующими агентами [46]. В связи с этим, в рамках рабочей гипотезы о потенциальной активности интеркаляторов относительно любых объектов - носителей доступной ДНК, было выдвинуто предположение о наличии у соединений 2.1 - 2.9 противобактериальной активности. 2.1 - 2.9где NR2 = n = 12.12.22.32.42.52.62.7n = 32.82.9 Для проверки этого предположения необходимо было ресинтезировать ранее описанные соединения 2.1 - 2.7, отработать методику получения и синтезировать неописанные ранее производные 2.8 и 2.9 и изучить их противобактериальную активность.
2.1 Синтез исходных акридона, 9-хлоракридина и 9-метоксиакридина
Как уже было сказано в обзоре литературы, при получении 9-хлоракридина из N-фенилантраниловой кислоты уменьшение избытка хлорокиси фосфора до 1.5-кратного (от расчетного) с разбавлением реакционной среды хлороформом снижает опасность проведения синтеза и трудоемкость стадии нейтрализации, но не уменьшает количество образующихся в результате реакции смолистых примесей.
В связи с этим нами был разработан более удобный и безопасный способ получения 9-хлоракридина 1.7, основными достоинствами которого являются повышение выхода, считая на N-фенилантраниловую кислоту, и уменьшение смолообразования. На первой стадии из N-фенилантраниловой кислоты 1.5 получают 9,10-дигидро-9-оксоакридин (акридон 1.2) по описанной в литературе методике [49, стр. 18], причем выход акридона составляет 90 - 95 % (рис. 2.1). Следует отметить, что, независимо от степени чистоты N-фенилантраниловой кислоты, 1.2 получается хроматографически чистым непосредственно из синтеза и последующая трансформация 1.2 в 1.7 проходит без образования побочных продуктов. В то же время при получении 1.7 из 1.5 качество исходного весьма сильно влияет на количество смолистых примесей в продукте.
1.51.21.7Рисунок2.1Синтез 9-хлоракридина 9-Хлоракридин получают на второй стадии (дезоксихлорировании), которую проводят твердофазным методом - спеканием тонкорастертой смеси 1.2 с расчетным количеством пентахлорида фосфора при 120 oC в течение 1 часа. Полученный после охлаждения твердый конгломерат растирают в тонкий порошок в шаровой мельнице, который затем с помощью механической мешалки перемешивают с концентрированным раствором аммиака. Последующие фильтрование, промывка, высушивание и экстракция сухого остатка хлороформом приводят к 9-хлоракридину 1.7 с выходом 65 - 70 %. Сухой остаток после экстракции четыреххлористым углеродом представляет собой чистый акридон (получается с выходом 25 - 32 %), который может быть повторно использован. Таким образом, общий выход 9-хлоракридина в расчете на N-фенилантраниловую кислоту составляет 85 - 92 %.
На следующей стадии получения 9-метоксиакридина 1.8, несмотря на хорошие выходы (85 - 90 %) описанного в литературе метода и удобство проведения синтеза, этот метод требует на подготовительных стадиях получение абсолютного метанола и использование металлического натрия (пожаро-взрывоопасность).
Нами был модифицирован метод получения 1.8 и показана возможность использования в качестве основания 60 %-го раствора гидроксида калия (или натрия) в коммерчески доступном метаноле (содержание влаги до 2 %). Синтез 1.8 проводится (рис. 2.2) кипячением 1.7 в смеси 60 %-го водного раствора гидроксида калия и метанола в течение 8 ч. Избыток метанола удаляют, реакционную массу разлагают водой, фильтруют с последующей промывкой осадка водой, высушивают и перекристаллизовывают сырой продукт из петролейного эфира. В качестве побочного продукта с выходами 10 - 15 % образуется акридон 1.2, который может быть повторно использован для получения 9-хлоракридина. Таким образом при незначительном снижении выходов (75 - 80 %) достигается снижение стоимости и повышение безопасности.
1.71.8Рисунок2.2 Синтез 9-метоксиакридина. 2.2 Синтез исходных гидразидов N,N-диалкилированого глицина
Обработка ранее полученных эфиров N,N-диалкилированого глицина 2.10 - 2.16 действием гидразингидрата в метаноле приводила к гидразидам 2.17 - 2.23 с хорошими выходами (рис. 2.3). 2.10 - 2.162.17 - 2.23где NR2 = эфиры2.102.112.122.132.142.152.16гидразиды2.172.182.192.202.212.222.23Рисунок2.3 Синтез гидразидов N,N-диалкилированного глицина Чистоту соединений 2.17 - 2.23 контролировали методом ТСХ на пластинках Silufol UV-254; строение - данными ИК-спектроскопии и масс-спектрометрии.
Таблица2.1Физико-химические параметры исходных гидразидов N,N-диалкилированого глицина
Соеди-
нениеМол.
массаБрутто-
формулаВыход,
%Т.пл., °C или[М]+Rf 2Т.кип., °C / Р (мм.рт.ст.)2.17145.21С6H15N3O90- 11450.462.18157.22C7H15N3O8198 - 991570.302.19159.19C6H13N3O2881071590.382.20143.19C6H13N3O52- 11430.242.21171.24C8H17N3O7095 - 961710.412.22171.24C8H17N3O7572 - 731710.432.23172.23C7H16N4O8490 - 911720.12 Примечания: 1 - некристаллизующееся маслообразное вещество; 2 - элюирующая система - хлороформ : метанол (10:1)
В масс-спектрах гидразидов 2.17 - 2.23 имеются пики молекулярных ионов низкой интенсивности. Наиболее характерным расщеплением молекулярного иона является разрыв -связи аминоацильного остатка и связи N-N гидразина. В ИК-спектрах гидразидов 2.17 - 2.23 по сравнению со спектрами эфиров отсутствует полоса при 1730 - 1735 см-1 (карбонильная группа сложного эфира), но появляется полоса при 1650 см-1 (карбонильная группа гидразида). В области 3200 - 3450 см-1 (с максимумом при 3350 - 3370 см-1) появляется интенсивная широкая полоса с "плечами", соответствующая валентным колебаниям связей N-H различной степени и вида ассоциации. 2.3 Синтез исходных гидразидов N,N-диалкилированой ГАМК
Обработкой -бутиролактона 2.24 тионилхлоридом в присутствии хлористого цинка с последующим метанолизом хлорангидрида 2.25 получали метиловый эфир 2.26. Замена галогена по Финкельштейну приводила к иодоэфиру 2.27, обработкой которого избытком диэтиламина с последующим гидразинолизом аминоэфира 2.28 получали гидразид 2.29 (рис. 2.4). Замещение атома хлора в 2.26 на диэтиламиногруппу приводило к смеси продуктов, в которой доминирующим (по данным ТСХ) был амид 2.30. 2.242.252.262.27
2.282.29Рисунок2.4- Схема синтеза диэтиламинобутаноилгидразина2.30 Аналогично, исходя из метилового эфира 4-пиперидинобутановой кислоты 2.31 был получен соответствующий гидразид 2.32.
2.312.32Рисунок2.5- Схема синтеза пиперидинбутаноилгидразина Таблица2.2Физико-химические параметры исходных гидразидов N,N-диалкилированой ГАМК
Соеди-
нениеМол.
массаБрутто-
формулаВыход,%Т.пл., °C [М]+Rf 22.28173.26С9H19NO294-11730.542.29173.26С8H19N3O28562 - 631730.222.31185.27С10H19NO271-11850.582.32185.27С9H19N3O7768 - 691850.21 Примечания: 1 - некристаллизующееся маслообразное вещество; 2 - элюирующая система - хлороформ : метанол (10:1)
2.4 Синтез гидразонов акридона
Гидразоны акридона 2.1 - 2.9 получали действием 9-метоксиакридина 1.8 на гидразиды 2.17 - 2.23 и 2.29, 2.32 в кипящем метаноле (рис. 2.6). Следует отметить, что продукты 2.8, 2.9 были получены с умеренными выходами в связи с хорошей растворимостью в большинстве органических растворителей и, как следствие, заметными потерями веществ при получении и очистке.
n = 12.17 - 2.23n = 12.1 - 2.7n = 32.29, 2.32n = 32.8, 2.9Рисунок2.6Синтез гидразонов акридона Чистоту всех синтезированных соединений контролировали методом ТСХ на пластинках Silufol UV-254; строение - данными ПМР и ИК-спектроскопии и масс-спектрометрии.
В ИК спектрах акридинилированных продуктов 2.1 - 2.9 в области 3200 - 3450 см-1 наблюдаются две полосы - узкая интенсивная полоса при 3410 - 3420 см-1 и широкая сложная полоса с несколькими "плечами" при 3150 - 3300 см-1. Кроме того, в спектре наблюдаются полосы при 1460 - 1465 см-1, 1540 - 1555 см-1, 1585 - 1590 см-1, 1600 - 1610 см-1, характерные для колебаний ароматических и гетероароматических систем. Волновое число полосы, соответствующей валентным колебаниям карбонильной группы (1655 - 1675 см-1), изменяется симбатно электроотрицательности концевого амина.
Таблица2.3Физико-химические параметры гидразонов акридона
Соеди-
нениеМол.
массаБрутто-
формулаВыход, %Т.пл., °C [М]+Rf12.1322.41C19H22N4O751873220.522.2334.42C20H22N4O83241 - 2423340.472.3336.40C19H20N4O2852533360.452.4320.40C19H20N4O531313200.452.5348.45C21H24N4O75246 - 2473480.512.6348.45C21H24N4O702143480.542.7349.44C20H23N5O64249 - 2503490.182.8350.47C21H26N4O30126 - 1273500.422.9362.48C22H26N4O41108 - 1103620.44 Примечания: 1 - элюирующая система - бензол : триэтиламин : метанол (10:1:1). В спектрах 1H-ЯМР конечных продуктов 2.1 - 2.9 наблюдаются резонансные сигналы протонов "ароматической " и "алифатической" частей молекулы, соотношение интегральных интенсивностей которых соответствует расчетному. Существенно, что в спектрах в области 7.0 - 8.3 наблюдается удвоенный набор сигналов половинной от расчетной интенсивности каждый, что свидетельствует в пользу существования двух таутомерных форм, находящихся в соотношении 1 : 1.
Таблица2.4Описание ПМР-спектров гидразонов акридона
№Характеристики спектра:
мультиплетность, хим. сдвиг (м. д.), интенсивность, тип протонов122.1Алифатические: т. 1.032 м.д., (6Н, J = 7.2 Гц, (СН3СН2)2N); кв. 2.609 м.д., (4Н, J = 7.2 Гц, (СН3СН2)2N); с. 3.246 м.д., (2Н, СОСН2N).
Ароматические: м. 7.051 м.д., (1Н); м. 7.124 м.д., (1Н); м. 7.212 м.д., (1Н); м. 7.365 м.д., (2Н); м. 7.521 м.д., (1Н); м. 8.177 м.д., (2Н).
Обменивающиеся: ш.с. 10.557 м.д., (1Н); о.ш.с. 11.069 м.д., (1Н).2.2Алифатические: м. 1.460 м.д., (2Н, J = 5.4 Гц, СН2(СН2СН2)2N); м. 1.580 -1.670 м.д., (4Н, J = 5.4 Гц, СН2(СН2СН2)2N); т. 2.582 м.д., (4Н, J = 5.4 Гц, СН2(СН2СН2)2N); с. 3.177 м.д., (2Н, СОСН2N).
Ароматические: м. 7.081 м.д., (1Н); м. 7.197 м.д., (1Н); м. 7.248 м.д., (1Н); м. 7.411 м.д., (2Н); м. 7.552 м.д., (1Н); м. 8.204 м.д., (2Н).
Обменивающиеся: ш. с. 10.600 м.д., (1Н); о. ш. с. 11.066 м.д., (1Н).2.3Алифатические: т. 2.644 м.д., (4Н, J = 7.2 Гц, O(СН2СН2)2N); т. 3.710 м.д., (4Н, J = 7.2 Гц, O(СН2СН2)2N); с. 3.231 м.д., (2Н, СОСН2N).
Ароматические: м. 7.086 - 7.137 м.д., (1Н); м. 7.163 - 7.261 м.д., (2Н); м. 7.374 - 7.464 м.д., (2Н); м. 7.535 - 7.605 м.д., (1Н); м. 8.180 - 8.250 м.д., (2Н).
Обменивающиеся: ш. с. 10.568 м.д., (1Н); о. ш. с. 10.975 м.д., (1Н).2.4Алифатические: н/р т. 1.809 м.д., (4Н, (СН2СН2)2N); н/р т. 2.700 м.д., (4Н, (СН2СН2)2N); с. 3.350 м.д., (2Н, СОСН2N).
Ароматические: м. 7.035 - 7.128 м.д., (2Н); м. 7.208 - 7.235 м.д., (1Н); м. 7.369 - 7.395 м.д., (2Н); м. 7.486 - 7.536 м.д., (1Н); м. 8.112 - 8.210 м.д., (2Н).
Обменивающиеся: ш. с. 10.523 м.д., (1Н); о. ш. с. 11.018 м.д., (1Н).2.5Алифатические: д. 0.918 м.д., (3Н, J = 6.6 Гц, CH3CH(СН2СН2)2N); м. 1.300 - 1.420 м.д., (1Н, CH3CH(СН2СН2)2N); набор мультиплетов 1.165 - 1.295 м.д., (2Н) + 1.613 - 1.655 м.д., (2Н) + 2.168 - 2.242 м.д., (2Н) + 2.752 - 2.861 м.д., (2Н) = (CH3CH(СН2СН2)2N); с. 3.153 м.д., (2Н, СОСН2N).
Ароматические: м. 7.030 - 7.081 м.д., (1Н); м. 7.101 - 7.151 м.д., (1Н); м. 7.198 - 7.242 м.д., (1Н); м. 7.378 - 7.402 м.д., (2Н); м. 7.501 - 7.552 м.д., (1Н); м. 8.148 - 8.206 м.д., (2Н).
Обменивающиеся: ш. с. 10.408 м.д., (1Н); о. ш. с. 11.018 м.д., (1Н).2.6Алифатические: набор мультиплетов 1.537 - 1.721 м.д., (6Н) + 2.749 -2.784 м.д., (4Н) + м. 3.315 - 3.340 м.д., (2Н) = (СН2СН2СН2)2N); с. 3.354 м.д., (2Н, СОСН2N).
Ароматические: м. 7.075 - 7.126 м.д., (1Н); м. 7.154 - 7.205 м.д., (1Н); м. 7.229 - 7.255 м.д., (1Н); м. 7.402 - 7.451 м.д., (2Н); м. 7.532 - 7.583 м.д., (1Н); м. 8.209 - 8.260 м.д., (2Н).
Обменивающиеся: ш. с. 10.507 м.д., (1Н); о. ш. с. 11.051 м.д., (1Н). Продолжение таблицы 2.4
122.7 Алифатические: с. 2.240 м.д., (3Н, CH3N(СН2СН2)2N); н/р м. 2.280 - 2.500 м.д., (4Н, CH3N(СН2СН2)2N); н/р м. 2.578 - 2.711 м.д., (4Н, CH3N(СН2СН2)2N); с. 3.207 м.д., (2Н, СОСН2N).
Ароматические: м. 7.063 - 7.114 м.д., (1Н); м. 7.175 - 7.241 м.д., (2Н); м. 7.391 - 7.445 м.д., (2Н); м. 7.547 - 7.598 м.д., (1Н); м. 8.167 - 8.206 м.д., (2Н).
Обменивающиеся: ш. с. 10.548 м.д., (1Н); ш. с. 10.981 м.д., (1Н).2.8Алифатические: т. 1.034 м.д., (6Н, J = 7.2 Гц, (СН3СН2)2N); кв. 2.611 м.д., (4Н, J = 7.2 Гц, (СН3СН2)2N); т. 3.246 м.д., (2Н, СОСН2СН2СН2N), м. 3.335 м.д. ((2Н, СОСН2СН2СН2N); м. 3.998 м.д. (2Н, СОСН2СН2СН2N).
Ароматические: м. 7.056 м.д., (1Н); м. 7.129 м.д., (1Н); м. 7.221 м.д., (1Н); м. 7.371 м.д., (2Н); м. 7.528 м.д., (1Н); м. 8.179 м.д., (2Н).
Обменивающиеся: ш.с. 10.56 м.д., (1Н); о.ш.с. 11.10 м.д., (1Н).2.9Алифатические: м. 1.460 м.д., (2Н, J = 5.4 Гц, СН2(СН2СН2)2N); м. 1.580 -1.670 м.д., (4Н, J = 5.4 Гц, СН2(СН2СН2)2N); т. 2.582 м.д., (4Н, J = 5.4 Гц, СН2(СН2СН2)2N); т. 3.254 м.д., (2Н, СОСН2СН2СН2N), м. 3.332 м.д. ((2Н, СОСН2СН2СН2N); м. 4.025 м.д. (2Н, СОСН2СН2СН2N).
Ароматические: м. 7.088 м.д., (1Н); м. 7.191 м.д., (1Н); м. 7.254 м.д., (1Н); м. 7.412 м.д., (2Н); м. 7.552 м.д., (1Н); м. 8.210 м.д., (2Н).
Обменивающиеся: ш. с. 10.64 м.д., (1Н); о. ш. с. 11.07 м.д., (1Н). В масс-спектрах 2.1 - 2.9 имеются пики молекулярных ионов низкой интенсивности. Наиболее характерным расщеплением молекулярного иона является разрыв -связи аминоацильного остатка и связи N-N гидразина (рис. 2.7).
Рисунок2.7Фрагментация под электронным ударом гидразонов акридона 2.5 Изучение противобактериальной активности гидразонов акридона1
Основным показателем противобактериальной активности препаратов была бактериостатическое действие относительно Staphylococcus aureus 209p. Известно, что штамм Staphylococcus aureus 209p чувствителен к антибиотикам (пенициллина, стрептомицина, биомицина, окситетрациклина, полимиксина). Кроме того, в литературе имеются данные, согласно которых такое производное акридина как Акридиновый желтый 2.33 обладает выраженной противомикробной активностью относительно этого штамма [50].
2.33 Проведенные исследования показали, что синтезированные гидразоны акридона проявляют заметную противобактериальную активность, так как контакт Staphylococcus aureus 209p с препаратами сопровождался снижением жизнеспособности указанного тест-штамма. Результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что гидразоны акридона прявляют высокую бактериостатическую активность в дозах от 50 до 3 мкг/мл. Изучение прямого противобактериального действия препаратов показало, что жизнеспособность тест-штамма зависит от времени его контакта с препаратами. При длительном контакте Staphylococcus aureus 209p с препаратами бактерицидное действие гидразонов акридона было более выражено. Так, для большинства препаратов при двухчасовом контакте бактерицидность проявлялась при концентрации 50 мкг/мл, в то время как через 12 ч контакта - при 25 мкг/мл. Таблица2.5Противомикробные свойства аминоацетилгидразонов акридона№Минимальная бактериостатическая концентрация на St. Aureus 209p Минимальная бактерицидная концентрация на St. Aureus 209pмкг/млМмкг/млМ2.16.219.225.077.52.212.537.470.0209.32.33.19.225.074.32.43.19.712.539.02.56.217.825.071.72.66.217.850.0143.52.76.217.750.0143.12.33400.01461.0-- На основании предварительных данных противомикробной активности соединений, имеющих наилучшие показатели относительно Staphylococcus aureus 209p, была установлена зависимость бактерицидной активности от микробной нагрузки. Увеличение микробной нагрузки от 10 - 50 раз для соединения 2.5 не влияет на противомикробную активность. Для соединений 2.3, 2.4 и 2.6 увеличение микробной нагрузки в 10 раз в присутствии препаратов не приводит к росту культуры.
Из приведенных данных следует, что соединения 2.1 - 2.7, способны ингибировать рост бактерий и проявлять бактериостатическую активность в низких концентрациях, почти в 100 раз меньших, чем препарат сравнения Акридиновый желтый. Наиболее активными бактерицидными препаратами являются соединения 2.3 и 2.4, а наименее активное соединение - 2.2. Таким образом, причинно-следственная связь между структурой соединений 2.1 - 2.7 и их способностью ингибировать размножение микроорганизмов заключается в способности этих соединений интеркалировать в ДНК микроорганизмов, следствием чего является ингибирование репликации и транскрипции, без которых размножение микроорганизмов невозможно.
Дополнительным аргументом в пользу этого предположения служит хорошее соответствие между способностью соединений ингибировать вирусную репродукцию и их противомикробным действием (рис. 2.8 ). Для двух разных инфекционных агентов с разной стратегией и механизмом размножение корелляция между способностью веществ ингибировать размножение обоих возможна, по-видимому, только в том случае, если у обоих агентов имеется одна и та же мишень. Такой мишенью изучаемых веществ для обоих инфекционных агентов является их геном.
Рисунок2.8Корреляция между противовирусной (AV) и противомикробной (AM)активностями
3 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 3.1 Химическая экспериментальная часть.
Акридон (1.2) В колбе емкостью 500 мл растворяют 42.7 г (0.2 моль) 1.5 в 100 мл конц. H2SO4 (уд. вес1.84) и раствор нагревают на кипящей водяной бане 30 мин. после чего выливают в 1 л кипящей воды. После кипячения в течение 5 мин., желтый осадок отфильтровывают. Влажный осадок кипятят в течение 5 мин. с раствором 30 г (0.28 моль) соды в 400 мл воды, после чего отфильтровывают, промывают водой до нейтральной реакции промывных вод и высушивают при нагревании. Выход 37.5 г (96 %).
9-Хлоракридин (1.7). В фарфоровой ступке растирают 63 г (0.323 моль) акридона 1.2 с 37 г (0.178 моль) пятихлористого фосфора, переносят в широкогорлую колбу, горло которой закрывают пробкой с газоотводной трубкой (конец трубки помещают в колбу с водой так, чтобы он не касался поверхности воды, но был как можно ближе к ней). Колбу нагревают на глицериновой бане до температуры 110 - 130 оС и выдерживают при этой температуре 2 ч. Реакционную смесь растирают до тонкого порошка, который возвращают в ту же колбу. В ступку помещают часть порошка и добавляют 8 - 10 %-ный водный раствор аммиака. Смесь тщательно растирают до отсутствия красных комков, переносят в отдельный стакан. Аналогично обрабатывают всю смесь, следя за тем, чтобы рН смеси все время был на уровне 8 - 10. Полученную суспензию отфильтровывают на воронке Бюхнера через бумажный фильтр и промывают водой до нейтральной реакции. Осадок высушивают на воздухе и экстрагируют из него продукт четыреххлористым углеродом. Экстракт высушивают хлористым кальцием, четыреххлористый углерод отгоняют в вакууме досуха. Остаток перекристаллизовывают из гептана. Выход 46.7 г (68 %).
9-Метоксиакридин (1.8). К раствору 11 г (0.2 моль) гидроксида калия в 10 см3 воды добавляют 120 см3 метанола, перемешивают и вносят 35 г (0.164 моль) 1.7. Смесь кипятят при перемешивании 4 часа, избыток метанола частично отгоняют в вакууме, остаток переносят в 5-кратный объем воды. Выпавший осадок по охлаждении смеси отфильтровывают и промывают на фильтре водой до нейтральной реакции. Высушивают на воздухе. Фильтрат экстрагируют хлороформом, экстракт высушивают сульфатом натрия и осушитель отфильтровывают. Сухой осадок переносят в фильтрат, нагревают и выпавший в осадок акридон отфильтровывают. Фильтрат упаривают в вакууме досуха, остаток перекристаллизовывают из гептана. Выход 30.5 г (85 %).
Диэтиламиноуксусной кислоты N'-акридин-9-илгидразид (2.1). К кипящему раствору 0.726 г (0.005 моль) 2.17 в 10 см3 метанола добавляют в один прием 1.05 г (0.005 моль) 1.8. Реакционную смесь кипятят 30 мин, метанол упаривают в вакууме досуха, остаток растворяют в 4 см3 теплого бензола. К полученному раствору постепенно добавляют 20 см3 теплого гептана и медленно охлаждают до комнатной температуры. Продукт кристаллизуется при потирании палочкой о стенки стакана. Кристаллический осадок отфильтровывают, промывают на фильтре смесью бензола с гептаном (1 : 5), охлажденной до -18 oC (3  1 см3), гептаном (2  1 см3) и высушивают в вакууме. Выход 1.21 г (75 %). Аналогично были получены соединение 2.4, 2.8 и 2.9. Соединения 2.2, 2.3, 2.5 - 2.7Ошибка! Источник ссылки не найден. получают аналогично, с той лишь разницей, что продукты кристаллизуются из реакционной смеси и их перекристаллизовывают из метанола.
Диэтиламиноуксусной кислоты гидразид (2.17). К раствору 16.7 г (0.115 моль) диэтиламиноуксусной кислоты метилового эфира 2.10 в 20 см3 метанола добавляют 6.26 см3 (0.125 моль) 100 %-ого гидразингидрата. Реакционную смесь кипятят 4 ч, упаривают в вакууме (20 - 30 мм рт.ст., температура бани 80 - 85 oC) досуха и выдерживают в этих условиях 1 ч. Продукт получают в виде бледноокрашенного масла (15 г, 90 %), которое используют без дополнительной очистки. Аналогично получают соединение 2.20, 2.29 и 2.32. Соединения 2.18, 2.19, 2.21 - 2.23, получают аналогично с той лишь разницей, что гидразиды выделяются в кристаллическом виде и очищаются перекристаллизацией из смеси бензола с гептаном.
4-Диэтиламин-1-илбутановой кислоты метиловый эфир (2.28). Кипятят 12 ч при перемешивании смесь 100 см3 бензола, 87.37 г (0.37 моль) 2.27 и 55 г (0.74 моль) диэтиламина. Осадок отфильтровывают, промывают на фильтре бензолом (3  20 см3), фильтрат упаривают, поднимая под конец перегонки температуру до 100 оС. К остатку снова добавляют бензол (100 см3), тщательно перемешивают и охлаждают до комнатной температури. Если снова выпадает осадок, его отфильтровывают, промывают на фильтре бензолом (3  20 см3), фильтрат упаривают, поднимая под конец перегонки температуру до 100 оС. Кубовый остаток перегоняют в вакууме, собирая фракцию, кипящую при 95 °C (20 мм рт. ст.). Выход 60 г (94 %). C9H19NO2. M.W. 173.26. Аналогично получают соединения 2.31.
3.2 Биологическая экспериментальная часть2
Изучение противомикробной активности осуществляли в жидкой питательной среде методом посева на агар. Исследования проводили с использованием Staphylococcus aureus (штамм 209 p) при нагрузке 1  105 кл/мл.
Готовили серию двукратных разведений препарата в питательной среде таким образом, чтобы получить растворы с концентрациями 50, 25, 12.5, 6.25 и 3.125 мкг/мл. В каждую пробирку с 2 мл среды мясо-пептонного бульона (МПБ) вносили 0.9 мл раствора препарата и 0.1 мл суспензии микроорганизмов. Пробирки инкубировали в термостате на протяжении 24 ч при температуре 37 оС. При визуальном просмотре пробирок отбирались пробирки, в которых среда была прозрачной, т.е. размножение микроорганизмов было задержано. Наименьшая концентрация препарата, которая обеспечивала задержку роста считалась за бактериостатическую.
За бактерицидную считалась минимальная концентрация препарата, которая обеспечивала отсутствие колоний в чашках с мясо-пептонным агаром после посева на них материала с пробирок с прозрачной средой и инкубировании при 37 oС в течение 5 суток. Все эксперименты проводили в трехкратном повторении.
ВЫВОДЫ
В результате проделанной работы: 1. Осуществлен ресинтез семи N,N-диалкиламиноацетилгидразонов акридона и показано, что они являются высокоэффективными противобактериальными препаратами с бактериостатическими концентрациями в диапазоне 3.1 - 12.5 мкг/мл, что почти в 100 раз ниже, чем у препарата сравнения Акридинового желтого (400 мкг/мл). 2. Отработан метод получения акридинилгидразонов N,N-диалкилгамма-аминомасляной кислоты. Синтезировано два неописаных ранее соединения и доказана их структура набором спектральных методов. 3. Показано, что способность веществ ингибировать вирусную репродукцию кореллирует с их противобактериальным действием. ЛИТЕРАТУРА
1 Противомикробная активность была изучена сотрудником Киевского института микробиологии и вирусологии им. Д.К. Заболотного к.б.н. Тимошок Н.М.
2 Противомикробная активность была изучена сотрудником Киевского института микробиологии и вирусологии им. Д.К. Заболотного к.б.н. Тимошок Н.М.
1.Lehmstedt A. Über ms-Acridin-Derivate (II). VI. Mitteil. über Acridin //Berichte. - 1931. - Vol. 64, № 6. - P.1232 - 1239.
2.Lehmstedt K., Klee H. Über das Acridol und die Tautomerie N-Oxy-acridon - 9-Oxy-acridin-N-oxyd. (XIII. Mitteil. Über Acridin) und IV. Mitteil, Über ms-Acridin-Derivate //Berichte. - 1936. - Vol. 69, № 5 - P.1155 - 1158.
3.Jourdan F. Neue Synthesen von Derivaten des Hydroacridins und Acridins //Berichte. - 1885. - Vol. 18, № 1. - P.1444 - 1456.
4.Lehmstedt K. Eine einfache Synthese des Acridons und 3-substituierter Acridone (IX. Mitteil. Über Acridin) //Berichte. - 1932. - Vol. 65, № 5 - P.834 - 839.
5.Lehmstedt K. Der wahre Verlauf der Synthese von 3-Nitro-acridonen nach I. Tanasescu (X. Mitteil. Über Acridin) //Berichte. - 1932. - Vol. 65, № 6 - P. 999 - 1005.
6.Bowen J., Gupta P., Kahu N., Lewis J. // J. Chem. Soc., Perkin Trans. - 1972. - P.2524.
7Skonieczny S. A review on the synthesis of the 9-substituted acridines (1970-1976) // Heterocycles. - 1977. - Vol. 6, № 7. - P. 987 - 1060.
8 Методы получения химических реактивов и препаратов. - М.: ИРЕА, 1974. - Вып. 26. - С. 24 - 25.
9 Сувейздис Я.И. Синтез, свойства и биологическая активность аминоакридинов / Автореферат дисс. ... к.х.н., Одесса, 1996.
10 Moloney G.P., Kelly D.P., Mack P. Synthesis of acridine-based DNA bis-intercalating agents // Molecules. - 2001. - Vol. 6. - P. 230 - 243.
11 Albert A. The acridines. Their preparation, physical, chemical, and biological properties and uses // London: "Arnold" .- 1966 .- 655 p.
12 Sharma R.S., Bahel S.C. Synthesis of N-acridin-5-yl-N'-aroyl(aryloxyacetyl)hydrazines as a possible fungicides // Bokin Bobai. - 1982. - Vol. 10, № 3. - P. 111 - 114.
13 Pathak P.B., Bahel S.C. Synthesis and fungicidal activity of N-acridin-5-yl-N'-aroyl(aryloxyacetyl)hydrazines // Bokin Bobai. - 1980. - Vol. 8, № 6. - P. 247 - 250.
14 Mishra V.K., Bahel S.C. Synthesis of some fungicidal N-acridin-5-yl-N'-(-aryloxypropionyl)hydrazines // Bokin Bobai. - 1983. - Vol. 11, № 3. - P. 103 - 105.
15 Mishra V.K., Bahel S.C. Synthesis of thiazolyl compounds as potential fungicides // J. Indian Chem. Soc. - 1984. - Vol. 61, № 10. - P. 916 - 918.
16 Srivastava S.K., Pathak R.B., Bahel S.C. Synthesis of some N-acridin-9-yl-N'--aryloxypropionylhydrazines as potential fungicides // Indian J. Pharm. Sci. - 1991. - Vol. 53. - P. 237 - 239.
17 Srivastava S.K., Pathak R.B., Bahel S.C. Synthesis of anti fungal N-acridin-5-yl-N'--aryloxybutanoylhydrazines // J. Indian Chem. Soc. - 1985. - Vol. 62. - P. 486 - 487.
18Шибнев В.А., Финогенова М.П., Гринберг Л.Н., Аллахвердиев А.М. Синтез акридиновых производных гидразидов аминокислот и их антималярийная активность // Биоорг. Хим. .- 1988 .- Т. 14, №.11 .- С. 1565 - 1569.
19Sinha B.K., Cysyk R.L., Millar D.B., Chignell C.F.. Synthesis and biological properties of some spin-labeled 9-aminoacridines // J Med Chem .- 1976. - Vol. 19, № 8 .- P. 994 - 998
20 Lyakhov S.A., Suveyzdis Ya.I., Bykhovskaya O.V., Isko N.M., Litvinova L.A. Biological active acridine derivatives. Part 3: Acridinylaminoacids and their esters: synthesis and cytostatic activity // Die Pharmazie. - 1997. - Vol. 52, № 7. - P. 560 - 561
21 Lyakhov S.A., Suveyzdis Y.I., Berezina L.K., Andronati S.A., Lvov D.K., Litvinova L.A., Denisenko R.V. Biological active acridine derivatives. 2. Chiral 9-aminoacridines // Die Pharmazie. - 1994. - Vol. 49, № 12. - P. 926 - 927 22 Ляхов С.А., Сувейздис Я.І., Кривцанова НМ, Хоменко О.А., Литвинова Л.О., Андронаті С.А. Синтез і цитостатична активність деяких аніліноакридинів // Фарм. журн. - 2000. - № 2. - C. 61 - 64
23 Ляхов С.А., Ляхова О.А., Мазепа О.В., Литвинова Л.О., Грень А.І. Синтез та цитотоксичність акридиніл-арилгідразонів // ФАР. - 2002. - №1 (33). - С. 30 - 34.
24 Ляхов С.А., Ляхова Е.А., Панченко Н.Н., Литвинова Л.А., Андронати С.А. Синтез и противовирусная активность новых производных бис-акридинилгидразидов арилоксиуксусных кислот // Хим.-фарм. журн. - 2001. - Т. 35, № 12. - С. 10 - 13
25 Ляхова Е.А., Ляхов С.А., Литвинова Л.А., Топилова З.М., Вельчева И.В., Грень А.И., Лебедюк М.Н., Федчук В.П., Хорохорина Г.А. Синтез и ДНК-связывающие свойства акридинилгидразидов N,N-диалкилированных производных глицина // Хим.-фарм. журн. - 2003. - Т. 37, № 4. - С. 16 - 21.
26 Dean A.C.R. Antibacterial action of acridines // Chem. Heterocycl. Compounds. - 1973. - Vol. 9. - P. 789 - 813.
27 Пат. DD 212038 Германии, МКИ C 07 D 219/10. Acylated 2-alkoxy-6,9-diaminoacridine derivatives with antiseptic properties / H. Boehland (Германия), R. Muller (Германия), I. Loehrisch (Германия). Опубл. 21.07.1909.
28 Wainwright M., Phoenix D.A., Marland J., Wareing D.R., Bolton F.J. In vitro photobactericidal activity of aminoacridines // J. Antimicrob. Chemother. - 1997. - Vol. 40, № 4. - P. 587 - 589.
29 Abadi A.H., El-Subbagh H.I., Al-Khamees H.A. Synthesis, antitumor and antitubercular evaluation of certain new xanthenone and acridinone analogs // Arzneimittelforschung. - 1999. - Vol. 49, № 3. - P. 259 - 266.
30 Исаев С.Г., Дроговоз С.М., Шульга И.С., Сарбаш Т.Ф., Жиляева Г.М. Силаева Л.Ф. Биологическая активность нитропроизводных акридина // Фарм. Журн. - 1990. - № 2. - С. 41 - 44.
31 Шульга И.С., Сухомлинов А.К., Гончаров А.И., Дикая Е.М. Синтез и антимикробная активность некоторых производных 5-нитроакридина // Хим.-фарм. Журн. - 1974. - Т. 8, № 10. - С. 6 - 9.
32 Шульга И.С., Сухомлинов А.К., Гончаров А.И., Дикая Е.М. Синтез и антимикробные свойства некоторых производных 1-нитро-9-аминоакридина // Хим.-фарм. Журн. - 1974. - Т.8, № 4. - С. 16 - 18.
33 Гайдукевич А.Е., Сухомлинов А.К., Гончаров А.И., Сашко Т.С. Синтез и противомикробная активность производных 6-нитро-9-аминоакридина // Хим.-фарм. Журн. - 1971. - Т.6, № 1. - С. 29 - 32.
34 Ferguson L.R., Turner P.M., Denny W.A. The mutagenic effects of diacridines and diquinolines in microbial systems // Mutat. Res. - 1990. - Vol. 232. - P. 337 - 343.
35 Cremieux A., Chevalier J., Sharples D., Berny H., Galy A.M., Brouant P., Galy J.P., Barbe J. Antimicrobial activity of 9-oxo and 9-thio acridines: correlation with interacalation into DNA and effects on macromolecular biosynthesis // Res. Microbiol. - 1995. - Vol. 146, № 1. - P. 73 - 83.
36 Tawil G.G., Youself R.T. Bacteriostatic and bactericidal activities of acryflavine-antibiotic combinations // Sci. Pharm. - 1986. - Vol. 54, №1. - P. 19 - 22.
37 Wainwright M. Acridine - a neglected antibacterial chromophore (Review) // J. Antimicrob. Chemotherapy. - 2001. - Vol. 47. - P. 1 - 13.
38 Пат. 4711889 США, МКИ A 61 K 031/47; C 07 D 219/10. Schistosomicidal acridanone hydrazones / U. Brombacher (США), H. Link (США), M. Montavon (США). № 887580; Заявл. 18.07.86; Опубл. 08.12.87; НКИ 514/297.
39 [207-001762] Metwally A., Abdel Hadi A., Mikhail E.G., Abou Shadi O., Sabry H., El-Nahal H. Study of the efficacy of the new antischistosomal drug 10-[2-(diethylamino)ethyl]-9-acridanone-(thiazolidin-2-ylidene) hydrazone against an Egyptian strain of S. mansoni in mice // Arzneimittelforschung. - 1997. - Vol. 47, № 8. - P. 975 - 979.
40 [207-000589] Sulaiman S.M., Ali H.M., Homeida M.M., Bennett J.L. Efficacy of a new Hoffmann-La Roche compound (Ro 15-5458) against Schistosoma mansoni (Gezira strain, Sudan) in vervet monkeys (Cercopithecus aethiops) // Trop. Med. Parasitol. - 1989. - Vol. 40, № 3. - P. 335 - 336.
41 [207-000504] Sturrock R.F., Bain J., Webbe G., Doenhoff M.J., Stohler H. Parasitological evaluation of curative and subcurative doses of 9-acridanone-hydrazone drugs against Schistosoma mansoni in baboons, and observations on changes in serum levels of anti-egg antibodies detected by ELISA // Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. - 1987. - Vol. 81, № 2. - P. 188 - 192.
42 [207-001646] Pereira L.H., Coelho P.M., Costa J.O., de Mello R.T. Activity of 9-acridanone-hydrazone drugs detected at the pre-postural phase, in the experimental schistosomiasis mansoni // Mem. Inst. Oswaldo Cruz. - 1995. - Vol. 90, № 3. - P. 425 - 428.
43 [207-001659] Coelho P.M., Pereira L.H., de Mello R.T. Antischistosomal activity of acridanone-hydrazones in Cebus monkeys experimentally infected with the SJ strain of Schistosoma mansoni // Rev. Soc. Bras. Med. Trop. - 1995. - Vol. 28, № 3. - P. 179 - 183.
44 [207-000673] Eshete F., Bennett J.L. The schistosomicidal compound Ro 15-5458 causes a reduction in the RNA content of Schistosoma mansoni // Mol. Biochem. Parasitol. - 1991. - Vol. 45, № 1. - P. 1 - 8.
45 [207-000680] Coelho P.M., Pereira L.H. Schistosoma mansoni: preclinical studies with 9-acridanone-hydrazones in Cebus monkeys experimentally infected // Rev. Inst. Med. Trop. Sao Paulo. - 1991. - Vol. 33, № 1. - P. 50 - 57.
46 Пат. 65845 А України, МПК 7 С 07 D 213/00, С 07 C 209/00. Похідні акридиніл-9-гідразиду амінооцтової кислоти як індуктори інтерферону / С.А. Ляхов (Україна), О.А. Ляхова (Україна), Л.О. Литвинова (Україна), С.А. Андронаті (Україна), С.Л. Рибалко (Україна), С.Т. Дядюн (Україна) та Г.І. Фортунський (Україна). - № 2003065362; Заявл. 10.06.2003; Опубл. 15.04.2004. Бюл. №4. - 4 с [207-000680].
47 Дизайн синтез та зв'язок структура-властивості в низці інтерфероніндукуючих та противірусних лігандів ДНК: Звіт про НДР (заключний) / Фіз.-хім. ін-т ім. О.В. Богатського НАН України. - № ДР 0104U004313. - Одеса, 2006. - 250 с
48 Ляхова Е.А. Синтез и биологическая активность гидразинсодержащих производных акридина, антрацена и флуорена: Автореф. дис. ... канд. хим. наук: 02.00.10 / Одесса, 2005. - 22 с.
49 Синтезы органических препаратов: Пер. с англ.: Сбор. 2. / Под ред. Казанского Б.А. - М.: Изд. ин. лит., 1949. - 655 с.
50 Азейман Б.Ю., Швайгер М.О., Мандрик Т.П.. Зелепуха С.І., Кіпріанова О.А. Зіставлення антимікробної дії різних груп барвників з іх дією на ракові клітини аденокарциноми Ерлиха in vitro // Мікробіологічний журнал - 1960 - т.ХХІІ. в 6. - С.52-61
---------------
------------------------------------------------------------
1
Документ
Категория
Химия
Просмотров
174
Размер файла
1 175 Кб
Теги
Диплом и связанное с ним
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа