close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

ИНСТРУКЦИЯ.108

код для вставкиСкачать
ЗАО "ЭКОлаб"
"ЭКОлаб-Гем-Лейшман"
"КРАСИТЕЛЬ ЭОЗИН-МЕТИЛЕНОВЫЙ СИНИЙ
ТИПА ЛЕЙШМАНА (В РАСТВОРЕ)"
ЗАО "ЭКОлаб"
ИНСТРУКЦИЯ
ПО ПРИМЕНЕНИЮ КРАСИТЕЛЯ ЭОЗИН-МЕТИЛЕНОВОГО СИНЕГО ТИПА ЛЕЙШМАНА (В РАСТВОРЕ)
(ЭКОлаб-Гем-Лейшман)
Назначение
Краситель ЭКОлаб-Гем-Лейшман предназначен для фиксации и окраски форменных элементов крови в клинико-диагностических и биохимических лабораториях.
Краситель рассчитан на фиксацию и окраску 660 или 1000 мазков крови при расходе 1,5 или 1,0 мл раствора красителя на фиксацию и окраску одного мазка крови.
Принцип метода
Метод фиксации основан на том, что обработка мазков фиксирующими жидкостями (фиксация), придает форменным элементам крови стойкость по отношению к воде, содержащейся в рабочих растворах красителей, которая гемолизирует эритроциты и изменяет строение лейкоцитов. Кроме того, фиксация, вызывая коагуляцию белка, приводит к прикреплению препарата к стеклу.
Метод определения основан на том, что в результате взаимодействия с красителем форменные элементы крови приобретают специфическую окраску и это позволяет произвести подсчет их количества.
Состав красителя
Краситель представляет собой метанольный раствор, содержащий 0,2% продуктов взаимодействия азура, эозина и метиленового синего - 1 флакон (1 л).
Аналитические характеристики красителя
Форменные элементы крови должны иметь следующую окраску:
эритроциты - розовый или розовый с серым оттенком цвет;
лейкоциты:
нейтрофилы - ядра - фиолетовый цвет, цитоплазма - бледно-розовый, или розовый, или розово-серый цвет, зернистость цитоплазмы - светло-фиолетовый цвет;
эозинофилы - ядра - фиолетовый цвет, цитоплазма - слабо-голубой цвет, зернистость цитоплазмы - оранжево-красный или кирпично-красный цвет;
базофилы - ядра - фиолетовый цвет, цитоплазма - бледно-розовый или светло-фиолетовый цвет, зернистость цитоплазмы - цвет от темно-фиолетового до черного;
лимфоциты - ядра - фиолетовый цвет, цитоплазма - голубой, или серо-голубой, или светло-синий, или серовато-синий цвет;
моноциты - ядра - светло-фиолетовый цвет, цитоплазма - серый или синевато-серый цвет;
тромбоциты:
грануломер - красновато-фиолетовый, или темно-фиолетовый или фиолетовый с серым оттенком цвет;
гиаломер - голубой, или фиолетовый, или розовато-сиреневый или серо-синий цвет.
Анализируемые пробы
Мазки крови
Меры предосторожности Потенциальный риск применения красителя - класс 2а.
В состав красителя входит метиловый спирт. При работе с ним следует соблюдать осторожность и не допускать попадания на кожу и слизистые; при попадании немедленно промыть пораженное место большим количеством проточной воды. При проглатывании следует выпить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту.
Меры предосторожности - соблюдение "Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР" (Москва, 1981 г.).
При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
Оборудование, материалы и реагенты:
* Весы технические лабораторные;
* рН-метр;
* микроскоп;
* секундомер;
* масло иммерсионное;
* стекла предметные;
* стекла со шлифованным краем;
* цилиндры мерные вместимостью 50 мл и 500 мл;
* пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости от 1,0 мл до 3,0 мл;
* колба мерная вместимостью 1 л;
* калий фосфорнокислый однозамещенный;
* натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный;
* вода дистиллированная;
* краситель ЭКОлаб-Гем-Романовский;
* перчатки резиновые или пластиковые.
Подготовка к анализу
Приготовление фосфатного буферного раствора
В мерную колбу вместимостью 1 л внести 0,49 г калия фосфорнокислого однозамещенного и 1,2 г натрия фосфорнокислого двузамещенного 12-водного, добавить 500 мл дистиллированной воды, перемешать до полного растворения солей, довести объем раствора дистиллированной водой до метки и вновь перемешать.
Измерить рН. Буферный раствор должен иметь значение рН 6,8-7,2.
Приготовление рабочего раствора красителя ЭКОлаб-Гем Лейшман
Смешать краситель ЭКОлаб-Гем-Лейшман с фосфатным буферным раствором в соотношении 1:2-1:5.
Рабочий раствор красителя готовят непосредственно перед применением; его можно хранить при комнатной температуре (18-25) оС в плотно закрытом флаконе не более 6 часов.
Приготовление рабочего раствора красителя ЭКОлаб-Гем-Романовский
Смешать краситель ЭКОлаб-Гем-Романовский с фосфатным буферным раствором в соотношении 1:10 или 1:20.
Рабочий раствор красителя ЭКОлаб-Гем-Романовский готовят непосредственно перед применением; его можно хранить при комнатной температуре в плотно закрытом флаконе не более 6 часов.
Приготовление мазков крови Мазки крови приготовить на предметных стеклах с помощью более узких стекол со шлифованным краем. Предметное стекло взять за длинные края и прикоснуться его поверхностью, отступив на 0,5-1,0 см от узкого края, к капле крови. Предметное стекло следует положить на стол или держать в левой руке за края. Правой рукой приставить стекло со шлифованным краем к предметному стеклу под углом 45о и подвести к капле крови до соприкосновения с ней. После того как кровь растечется по всему шлифованному краю, стеклом сделать скользящее движение справа налево, равномерно распределяя кровь на стекле тонким слоем, до тех пор, пока не будет исчерпана вся капля. Мазок должен занимать 2/3 поверхности предметного стекла, иметь четкие границы и заканчиваться "щеточкой" ("метелочкой"). Толщина мазка зависит от величины угла между стеклами: чем острее угол, тем тоньше мазок. Правильно приготовленный мазок имеет желтоватый цвет и одинаковую толщину по всей поверхности. Нельзя сильно нажимать на стекло, так как это может привести к повреждению форменных элементов крови.
После приготовления мазки крови необходимо быстро высушить на воздухе до исчезновения влажного блеска; при медленном высыхании может измениться морфология клеток. Проведение анализа
1 способ. На высушенные мазки крови налить с помощью пипетки краситель так, чтобы он покрыл весь мазок крови (1,0-1,2) мл и выдержать в течение 3 минут (см. п.1 примечания). По окончании фиксации добавить при тщательном перемешивании двойное количество фосфатного буферного раствора, выдержать в течение 5-10 минут. По окончании окрашивания мазки промыть фосфатным буферным раствором или водопроводной водой (см. п.2 приложения), высушить на воздухе и микроскопировать с иммерсионной системой. 2 способ. На высушенные мазки крови налить с помощью пипетки краситель так, чтобы он покрыл весь мазок крови (1,0-1,2) мл и выдержать в течение 3 минут (см. п.1 примечания), краситель слить или смыть фосфатным буферным раствором. На зафиксированные мазки крови с помощью пипетки налить рабочий раствор красителя так, чтобы он покрыл весь мазок крови (1,0-1,2) мл, выдержать в течение 5-15 минут. Время окрашивания и концентрацию рабочего раствора подобрать предварительно на нескольких фиксированных мазках, окрашивая их в течение 5-15 мин. различными разведениями красителя фосфатным буферным раствором 1:2-1:5. По окончании окрашивания мазки промыть фосфатным буферным раствором или водопроводной водой (см. п.2 приложения), высушить на воздухе и микроскопировать с иммерсионной системой. 3 способ. На высушенные мазки крови налить с помощью пипетки краситель так, чтобы он покрыл весь мазок крови (1,0-1,2) мл и выдержать в течение 3 минут (см. п.1 примечания). Добавить такое же количество фосфатного буферного раствора. Через 2-3 мин краситель слить или смыть фосфатным буферным раствором. На зафиксированные мазки крови налить с помощью пипетки рабочий раствор красителя ЭКОлаб-Гем-Романовский так, чтобы он покрыл весь мазок крови (1,3-1,5) мл, выдержать в течение 15 - 40 минут. Время окрашивания и концентрацию рабочего раствора подобрать предварительно на нескольких фиксированных мазках, окрашивая их в течение 15 - 40 мин. различными разведениями красителя фосфатным буферным раствором 1:10 - 1:20. По окончании окрашивания мазки промыть фосфатным буферным раствором или водопроводной водой (см. п.2 приложения), высушить на воздухе и микроскопировать с иммерсионной системой.
Примечание:
1. При превышении времени фиксации фиксатором - красителем может произойти чрезмерное подсыхание его на мазке крови и выпадение точечных кристаллов красящего вещества, видимых в поле зрения микроскопа и мешающих проведению микроскопического исследования. При появлении этого эффекта необходимо уменьшить время фиксации.
2. Значительное отклонение рН водопроводной воды от значения 6,8-7,2 могут приводить к преобладанию синих и серых тонов окраски и нечеткости контуров клеточных элементов. В этих случаях для промывки мазков после окрашивания вместо водопроводной воды рекомендуется использовать фосфатный буферный раствор.
Условия хранения и эксплуатации красителя
Краситель ЭКОлаб-Гем-Лейшман должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при комнатной температуре (18-25) оС течение всего срока годности. Не допускается воздействие прямых солнечных лучей.
Срок годности красителя - 1,5 года. Краситель после вскрытия флакона можно хранить при комнатной температуре в плотно закрытом флаконе в течение всего срока годности.
Рабочий раствор красителя ЭКОлаб-Гем-Лейшман готовят непосредственно перед применением; можно хранить не более 6 часов в плотно закрытом флаконе при комнатной температуре.
Рабочий раствор красителя ЭКОлаб-Гем-Романовский готовят непосредственно перед применением; его можно хранить не более 6 часов в плотно закрытом флаконе при комнатной температуре.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение
инструкции по применению красителя
По вопросам, касающимся качества красителя ЭКОлаб-Гем-Лейшман, следует обращаться по адресу: 142530, Московская обл., г. Электрогорск, ул. Буденного, д. 1, ЗАО "ЭКОлаб"; тел. (49643) 3-30-93 - отдел сбыта, факс (49643) 3-30-85.
2
2
Автор
Vasja
Vasja98   документов Отправить письмо
Документ
Категория
Другое
Просмотров
1 220
Размер файла
56 Кб
Теги
инструкция, 108
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа