close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Фармако-токсикологическая оценка мази Гентадиовет и её применение при лечении инфицированных кожно-мышечных ран у крупного рогатого скота

код для вставкиСкачать
На правах рукописи
ТАРАСОВ АЛЕКСАНДР ВЯЧЕСЛАВОВИЧ
ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА МАЗИ
ГЕНТАДИОВЕТ И ЕЁ ПРИМЕНЕНИЕ ПРИ ЛЕЧЕНИИ
ИНФИЦИРОВАННЫХ КОЖНО-МЫШЕЧНЫХ РАН
У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
06.02.03 – ветеринарная фармакология с токсикологией
06.02.04 – ветеринарная хирургия
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата ветеринарных наук
Краснодар 2018
Работа выполнена в Краснодарском научно-исследовательском ветеринарном институте – обособленном структурном подразделении федерального
государственного бюджетного научного учреждения «Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии»
Научный руководитель:
Научный консультант:
Кузьминова Елена Васильевна
доктор ветеринарных наук
Родин Игорь Алексеевич
доктор ветеринарных наук, профессор
Официальные оппоненты:
Дельцов Александр Александрович
доктор ветеринарных наук, ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии – МВА имени
К.И. Скрябина», доцент кафедры физиологии,
фармакологии и токсикологии имени А.Н. Голикова и И.Е. Мозгова
Чеходариди Фёдор Николаевич
доктор ветеринарных наук, профессор,
ФГБОУ ВО «Горский государственный аграрный университет», заведующий кафедрой ветеринарно-санитарной экспертизы, хирургии и
акушерства факультета ветеринарной медицины и ветеринарно-санитарной экспертизы
Ведущая организация:
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Воронежский государственный аграрный
университет имени императора Петра І»
Защита состоится «21» июня 2018 г., в 14 часов 00 минут в аудитории №1
факультета ветеринарной медицины на заседании диссертационного совета
Д 220.038.07 при ФГБОУ ВО «Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина» по адресу: 350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13, тел.: 8(861) 221-56-37, e-mail: kubsau@mail.ru
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Кубанский государственный аграрный университет имени И. Т. Трубилина» и на сайте http://www.kubsau.ru
Автореферат разослан «_____» ______________ 2018 года
Ученый секретарь
диссертационного совета, доцент
Винокурова Диана Петровна
2
1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы исследования. Лечение ран и их осложнений
остается одной из наиболее важных и актуальных проблем современной ветеринарной хирургии. В хозяйствах промышленного типа ряд факторов, таких как гиподинамия, стрессы, содержание большого количества животных
на ограниченной площади, нарушение технологических режимов, ветеринарно-санитарных правил, ведет к частому травмированию животных. Положение осложняется и тем, что в современных животноводческих хозяйствах раневая инфекция, как правило, является постоянным спутником каждого механического повреждения тканей животного и, тем самым, наносит отрасли
значительный экономический ущерб (В.А. Антипов с соавт., 2009; А.А. Стекольников с соавт., 2007; Г.С. Кузнецов, 1980; D. Whitby, 1995).
В настоящее время ветеринарными специалистами используется разнообразные методы и средства лечения гнойных ран, при этом местное лечение
ран с помощью мазей остаѐтся самым распространенным в силу своей результативности (Л.П. Трояновская, 2011; А.Н. Безин, 2014; Э.И. Веремей,
1989; Б.С. Семенов с соавт., 1997).
Среди лекарственных средств для наружного применения широко используются мази и гели на основах, которые не травмируют поврежденную
поверхность при нанесении, обеспечивают дренаж ран, а лекарственные вещества, входящие в их состав, проявляют оптимальное лечебное действие. При
этом современные препараты должны обладать разнонаправленным действием и сочетать в себе такие свойства, как широкая антимикробная активность,
высокая дегидратирующая способность, стимуляция регенерации тканей.
Перспективным в этом аспекте является разработка ветеринарных лекарственных препаратов на основе производных акриловой кислоты, включающих антибактериальные, противовоспалительные соединения, а также
стимуляторы регенерации, что и определило тему нашего исследования.
Степень разработанности проблемы. Развитие синтетической химии
и особенно химии полимеров в последние десятилетия способствовало использованию в фармации вспомогательных веществ из класса полимеров, что
в свою очередь, привело к совершенствованию технологии, улучшению качества, стабильности и эффективности лекарственных форм. Одним из передовых направлений в технологии мягких лекарственных форм является использование производных акриловой кислоты – карбополов, что обусловлено их
ценными свойствами: при нанесении на кожу они образуют тончайшие гладкие пленки; обеспечивают пролонгированный эффект, а также высокую биодоступность и равномерное высвобождение лекарственных веществ; хорошо
распределяются по слизистым и кожной поверхности; обладают микробиологической устойчивостью; инкорпорируют лекарственные вещества гидрофильной и липофильной природы.
Наибольший вклад в развитие этого направления фармацевтической
технологии в России внесли труды сотрудников ВНИИФ – М.Т. Алюшина,
В.Н. Ли, К.В. Алексеева и их школ (1976-2015).
3
Разработкой комплексных мазей для лечения гнойно-мышечных ран у
животных в ветеринарной медицине занимались ученые: В.А. Лукьяновский,
1997; Ф.Н. Чеходариди, 2005; И.А. Родин, 2016 и другие.
В связи с тем, что на фармацевтическом рынке России мазей для ветеринарного применения на основе карбополов, включающих диоксидин и гентамицина сульфат, не представлено, то уровень разработки темы диссертации потребовал дополнительной ее конкретизации за счет создания мягкой
лекарственной формы с высокой лечебной эффективностью при гнойномышечных ранах у крупного рогатого скота, что и было осуществлено в
настоящей диссертационной работе.
Цель и задачи исследований. Цель работы – разработка мази гентадиовет, изучение ее фармако-токсикологических свойств и лечебной эффективности при инфицированных кожно-мышечных ранах у крупного рогатого
скота.
Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

провести мониторинг распространѐнности хирургической патологии у
крупного рогатого скота в некоторых хозяйствах Краснодарского края;

разработать состав мази гентадиовет, изучить ее физико-химические
свойства, стабильность и определить срок годности препарата;

провести доклинические исследования мази, включающие изучение антимикробной активности, токсикологическую оценку, а также эффективность
применения гентадиовета при экспериментальных ранах у животных;

изучить эффективность гентадиовета при лечении инфицированных
кожно-мышечных ран у крупного рогатого скота в производственных условиях;

рассчитать экономическую эффективность применения препарата.
Научная новизна. Разработан состав мази гентадиовет, изучены ее физико-химические и специфические свойства. Обоснованы показатели качества разработанной мази и установлен срок ее годности. Впервые проведено
определение комплекса токсикологических показателей гентадиовета, позволившее выявить степень безопасности применения препарата. Изучен лечебный эффект гентадиовета при заживлении экспериментальных инфицированных кожно-мышечных ран у животных и выявлено положительное действие мази на течение таких поражений. В производственных условиях экспериментально доказана эффективность препарата при лечении гнойных
кожно-мышечных ран у крупного рогатого скота. Рассчитана экономическая
эффективность применяемых схем лечения.
Теоретическая и практическая значимость работы. Для ветеринарной медицины предложен новый препарат – гентадиовет, позволяющий достигнуть положительных результатов при терапии инфицированных ран у
животных и сократить сроки лечения.
Проведѐнные исследования содержат новое решение проблемы терапии гнойной раневой патологии у крупного рогатого скота, заключающееся в
применении мази гентадиовет, что ускоряет сроки очищения ран от некротических масс, появление здоровых грануляций и эпителизацию гнойных ран,
4
при этом полное выздоровление травмированных животных происходит на 56 суток раньше по сравнению с традиционными способами лечения.
Данные проведенных исследований учтены при разработке научнотехнической документации (временная инструкция по применению препарата гентадиовет в ветеринарии).
Результаты работы внедрены в хозяйствах Краснодарского края: на молочно-товарных фермах учебно-опытных хозяйств «Кубань» КубГАУ и
«Племзавод учхоз Краснодарское КГАУ».
Изложенные в диссертационной работе материалы могут быть использованы при составлении научно-информационной литературы, в учебном
процессе сельскохозяйственных ВУЗов, а также в ветеринарной хирургической практике.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту:
 распространѐнность хирургической патологии у крупного рогатого скота
в некоторых хозяйствах Краснодарского края (учебно-опытных хозяйствах
«Кубань» КубГАУ и «Племзавод учхоз Краснодарское КГАУ»);
 изучение антимикробной активности и оптимального соотношения компонентов в препарате;
 состав, физико-химические свойства и контроль качества мази гентадиовет;
 специфическая активность мази;
 токсикологическая оценка препарата;
 эффективность гентадиовета при экспериментальных инфицированных
кожно-мышечных ранах у животных;
 клиническое изучение мази гентадиовет при лечении раневой патологии у
крупного рогатого скота в условиях животноводческого хозяйства.
Личное участие автора. Все приведенные в диссертации данные получены при личном участии автора, как на этапе постановки задач и разработки методических подходов к их выполнению, так и при наборе первичных
фактических данных, статистической обработке и анализе полученных результатов, написании и оформлении публикаций. Выводы диссертации
сформулированы автором.
Апробация работы. Результаты экспериментальных и клинических
исследований, являющихся основой диссертации, доложены и обсуждены: на
заседаниях Ученого совета Краснодарского НИВИ (2013 – 2017 гг.); на Международной научно-практической конференции, посвященной 85-летию Самарской НИВС «Актуальные проблемы развития ветеринарной науки» (Самара, 2014); на Международной научно-практической конференции «Интеграция науки и практики в обеспечении ветеринарного благополучия» (Казахстан, Алматы, 2015); на Международной научно-практической конференции,
посвященной 70-летию Краснодарского НИВИ «Актуальные проблемы современной ветеринарной науки и практики» (Краснодар, 2016).
Публикации. Основные материалы диссертации опубликованы в 10
научных статьях, 4 из которых в рецензируемых научных изданиях, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ.
5
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 162 страницах машинописного текста и состоит из разделов: введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения. Список использованной литературы включает 267 источников, в том числе иностранных – 71. Работа иллюстрирована 19 таблицами, 45 фотографиями и рисунками.
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Работа выполнена в период с 2013 по 2017 годы в лаборатории фармакологии Краснодарского научно-исследовательского ветеринарного института – обособленного структурного подразделения федерального государственного бюджетного научного учреждения «Краснодарский научный центр по
зоотехнии и ветеринарии». Клинические исследования проводились на базе
учебно-опытных хозяйств «Кубань» КубГАУ и «Племзавод учхоз Краснодарское КГАУ». Часть экспериментов проведена на кафедре анатомии, ветеринарного акушерства и хирургии факультета ветеринарной медицины Кубанского государственного аграрного университета имени И. Т. Трубилина.
В период 2014-2015 г.г. с целью изучения распространѐнности случайных ран была проведена хирургическая диспансеризация в учебно-опытных
хозяйствах «Кубань» КубГАУ и «Племзавод учхоз Краснодарское КГАУ»
(всего обследовано 2890 животных). При этом в различные времена года на
молочно-товарных фермах этих хозяйств изучался видовой состав микрофлоры при гнойных ранах конечностей, вымени и крупа животных.
Основным объектом исследований являлся препарат гентадиовет,
представляющий собой мазь и включающий диоксидин, гентамицина сульфат, метилурацил, экстракт ромашки, карбопол и ряд других вспомогательных веществ.
Исследования проведены в соответствии с требованиями к врачебнобиологическому эксперименту по подбору аналогов, постановке контроля,
соблюдению одинаковых условий кормления и содержания животных в период проведения работы и учета результатов. При постановке опытов были
использованы физиологические, клинические, токсикологические, морфологические, биохимические, микробиологические, планиметрические и другие
методы исследований.
Изучение антимикробной активности и оптимального соотношения
компонентов в препарате проводили, определяя антимикробную активность
гентамицина сульфата и диоксидина методом диффузии в агар, используя S.
aureus, S. еpidermidis, P. аeruginosa, E. coli и E. faecalis – согласно методическим рекомендациям по изучению специфической активности противомикробных лекарственных средств. Антибактериальную активность многокомпонентной мази гентодиовет определяли по методике, предложенной Г.М.
Першиным (1971).
6
Определение стабильности мази проводили согласно ОФС.1.1.0009.15
«Определение сроков годности лекарственных средств».
Общетоксические свойства гентадиовета оценивали путем определения
острой и хронической токсичности мази в соответствии с «Методическими
рекомендациями по токсико-экологической оценке лекарственных средств,
применяемых в ветеринарии», одобренных секцией отделения ветеринарной
медицины РАСХН (1998) и согласно «Руководству по экспериментальному
(доклиническому) изучению новых фармакологических веществ», под общей
редакцией проф. Р.У. Хабриева (2005).
В первой и второй сериях экспериментов токсические параметры мази
определяли в остром опыте при ее однократном пероральном введении белым беспородным крысам и мышам в дозах от 0,42 г/кг до 10,4 г/кг массы тела. В третьей серии острых опытов гентадиовет наносили на кожные покровы
кроликам в количестве 10000 мг/кг массы тела.
Параметры хронической токсичности гентадиовета в первой серии экспериментов изучали на белых крысах, при этом образец мази задавали животным в форме болюсов (индивидуально, течение 1 месяца, один раз в сутки)
в дозах: 1 опытная – 2080 мг/кг массы тела (466,7 мг/животное); 2 опытная –
1040 мг/кг массы тела (233,4 мг/животное); 3 опытная – 520 мг/кг массы тела
(116,7 мг/животное); 4 –контрольная.
Во второй серии экспериментов изучение хронической токсичности
гентадиовета было проведено на лабораторных животных при накожном
способе применения, для чего было отобрано 30 крыс (по 10 в группе). В
опытной группе гентадиовет наносили на участок кожи с выстриженной шерстью размером 4x4 см, в течение 30 дней один раз в сутки. Контролем служили
интактные крысы и животные, которым на кожу наносили мазевую основу –
карбопол.
Влияние гентадивета на поведенческие реакции крыс оценивали в тесте
«открытое поле» с учетом ориентировочно-исследовательского эмоционального, стереотипного и двигательного компонентов по поведенческому атласу
для грызунов (В.П. Пошивалов, 1978).
Кровь для лабораторных исследований брали в конце опыта у пяти животных из каждой группы. Лабораторные биохимические исследования проводились на автоматическом биохимическом анализаторе «Vitalab Flexor».
Комплексный гематологический анализ периферической крови проводили на
автоматизированном анализаторе «Mythic 18 vet».
По окончании хронического эксперимента изучалось воздействие гентадиовета на макро- и микроструктуру внутренних органов крыс. Материал
для исследования отбирали сразу непосредственно после убоя и фиксировали
в 10 %-ном растворе нейтрального формалина. Проводку материала осуществляли общепринятыми в патогистологии методами (Г.А. Меркулов,
1969). Заливку материала осуществляли в парафин и после этого при помощи
микротома МС-2 готовили серийные парафиновые срезы толщиной 5-6 мкм,
которые окрашивали гематоксилином и эозином. Микрофотографии изготав7
ливали при помощи микроскопа «Микмед-1» и цифрового фотоаппарата
«Canon А-470».
Патоморфологические исследования проводили на кафедре анатомии,
ветеринарного акушерства и хирургии Кубанского ГАУ под руководством
доктора ветеринарных наук, доцента В.М. Кравченко.
Эксперименты по изучению местно-раздражающего действия мази
проводили на кроликах методом накожных аппликаций и конъюнктивальной
пробой. В первой серии исследований на крупе кроликов выстригали шерсть
на участке размером 10x10 см, избегая механических повреждений кожных
покровов. На подготовленный участок кожи животного опытной группы с
помощью шпателя наносили мазь гентадиовет, равномерно распределяя ее по
всей поверхности опытного участка и слегка втирая в кожу. Раздражающее
действие образца мази сравнивали с контрольной группой кроликов, которым аналогично применяли мазевую основу (карбопол). Всех животных содержали в индивидуальных клетках и крепили на шею воротники из пластика, предотвращающие слизывание препарата. Реакцию кожи на воздействие
препарата оценивали в течение 3 суток после однократного нанесения.
Во второй серии экспериментов определение раздражающего действия
препарата проводили на слизистой оболочке глаза кролика, нанося мазь на
передний сегмент правого глаза, при этом левый глаз у кроликов был контрольным. Реакцию слизистой оболочки опытного глаза, века и роговицы регистрировали сразу после воздействия и в течение 7 дней наблюдения, после
чего делали окончательное заключение в баллах.
Лечебные свойства гентадиовета изучены на моделях гнойномышечных ран у животных в нескольких сериях экспериментов. При моделировании гнойной раны у лабораторных крыс производилось иссечение
кожного лоскута 1x1,5 см с последующим заражением раны суточной культурой S. аureus (1-я серия экспериментов) и E. fekalis (2-я серия экспериментов). Эффективность гентадиовета оценивали по внешнему виду животных,
поведению, а также состоянию раневого процесса и ходу заживления ран. В
качестве препарата сравнения использовали диоксидиновую мазь.
Раневой процесс воспроизводили на модели кожной раны у бычков
голштино-фризской породы в возрасте 11-12 месяцев. Всем экспериментальным животным в области бедра с латеральной стороны готовили операционное поле по Филончикову. После проведения местной инфильтрационной
анестезии, используя трафарет, скальпелем делали вертикальный разрез длиной 7 см и глубиной 3 см. Инфицирование раны проводили путем фиксирования провизорными швами тампона смоченного суточной микробной взвесью E. coli.
Лечение проводили на 6-е сутки после воспроизведения модели гнойной кожно-мышечной раны, которое включало: в опытной группе – хирургическую обработку раны и нанесение на раневую поверхность мази гентадиовет; в контрольной группе – хирургическую обработку раны и нанесение на
раневую поверхность мази диоксиколь (многокомпонентная мазь на гидрофильной основе, содержащая диоксидин и метилурацил).
8
В период 2014-2015 г.г. на фермах учебно-опытного хозяйства «Кубань» КубГАУ в производственных условиях был проведен эксперимент по
оценке лечебной эффективности мази гентадиовет при инфицированных
кожно-мышечных ранах у крупного рогатого скота. С этой целью были подобраны две группы животных – опытная и контрольная, которые формировались по принципу парных аналогов (с учетом пола, возраста, массы тела,
эксплуатационного периода, характера раны и ее инфицирования). При лечении раны в опытной группе обрабатывали мазью гентадиовет, а у контрольных животных – мазью левомеколь.
Клиническое описание раневого процесса проводили по методике, рекомендованной Б.М. Оливковым (1949). Осуществляли осмотр ран, их краѐв,
отмечали наличие корочек на ранах, их цвет и степень отделяемости. Определяли начало образование грануляционной ткани, еѐ характер (бледнорозовый, розовый, мелкозернистый, крупнозернистый), а также начало появления эпителизации.
Показатель «площадь раневой поверхности» вычислялся по методу
Поповой Л.Н. (1942). На рану накладывалась прозрачная полимерная пленка,
на которую маркером копировались контуры раны. Контур переносился на
миллиметровую бумагу, за счет чего вычислялась площадь раневой поверхности.
Экономическую эффективность рассчитывали путѐм определения экономического ущерба, предотвращенного ущерба, затрат на ветеринарные мероприятия согласно методическим рекомендациям по определению экономической эффективности ветеринарных мероприятий.
Полученные в опытах данные были подвергнуты биометрической обработке посредством персонального компьютера с операционной системой
Microsoft Windows® XP 8.1 и прикладных программ. В качестве последних
были применены программы MS Excel и Statsoft Statistica 6.0. Критерий достоверности определяли по таблице Стьюдента.
3 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1 Структура и распространённость хирургической патологии у
крупного рогатого скота в хозяйствах Краснодарского края
При хирургической диспансеризации, проведенной в период 20142015 г.г. в учебно-опытных хозяйствах «Кубань» КубГАУ и «Племзавод
учхоз Краснодарское КГАУ» Краснодарского края было обследовано 2890
животных). В результате установлено, что в УОХ «Кубань» процент здорового поголовья крупного рогатого скота составил 48,3%, а в «Племзавод учхоз
Краснодарское КГАУ» – 60,2% (таб.1).
Раны занимают в данных хозяйствах от 26,3 до 30,1%, а если учитывать всю гнойную раневую патологию, включая абсцессы и флегмоны и ссадины, то от 41,3 до 44,5%. Первое место среди хирургической патологии у
животных занимают болезни конечностей – от 48,2 до 49,4%. Второе место –
9
гнойные поражения мягких тканей (раны), доля которых составляет от 26,3%
до 30,1%. На третьем месте абсцессы и флегмоны – от 7% до 11,4%.
Таблица 1 – Распространѐнность хирургической патологии в некоторых
хозяйствах Краснодарского края
Хозяйство
«Кубань»
«Краснодаское»
Всего исследовано
животных
650
в%
2240
в%
Здоровых
314
48,3
1348
60,2
Хирургически
больных
336
51,7
892
39,8
При бактериологических исследованиях среди микроорганизмов, выделенных из ран, чаще всего обнаруживались E. coli (27,42%), P. aeruginosa
(25,81% ), S. aureus (22,58%), S. epidermidis и E. faecalis (14,51%), остальные
виды культур были выделены в 9,68% случаев. Смешанные виды культур
были выделены в 43,55% экспертиз. Наиболее часто среди смешанных культур выделялись S. aureus, E. coli и E. faecalis, S. aureus и S. epidermidis. При
бактериологических исследованиях эти культуры в большинстве были чувствительны к гентамицину и диоксидину.
3.2 Состав, физико-химические свойства и контроль качества
мази гентадиовет
При определении антимикробной активности действующих веществ
мази гентадиовет установлено, что оптимальная антимикробная активность
комбинации гентамицина сульфата и диоксидина в отношении S. aureus, S.
epidermidis, E. faecalis, E. coli, P. aeruginosa проявляется при содержании гентамицина – 0,2% и диоксидина – 2%. При дальнейшем увеличении концентрации антибактериальных компонентов существенного повышения в активности не установлено.
Препарат гентадиовет представляет собой мягкую лекарственную форму – мазь, компоненты которой (диоксидин, гентамицина сульфат, метилурацил, экстракт ромашки, карбопол и ряд других вспомогательных веществ)
позволяют одновременно воздействовать на разные звенья раневого процесса, проявляя противомикробное, противовоспалительное и ранозаживляющие
действие.
По физико-химическим свойствам гентадиовет представляет собой однородную вязко-пластичную упругую массу гелеобразной консистенции, от
светло-желтого до желто-коричневого цвета, рН которой находится в пределах 6,9-7,0
При определении стабильности препарата в динамике течение 2-х летнего периода контролировались показатели однородности, рН, коллоидной
устойчивости, а также содержание основных компонентов гентадиовета: диоксидина, гентамицина сульфата и метилурацила. В результате проведенных
10
исследований установлено, что срок годности мази гентадиовет составляет 2
года со дня изготовления.
При изучении антибактериальной активности комплексной мази во
всех сериях эксперимента отмечено отсутствие роста S. aureus, E. coli, P.
aeruginosa в пробирках с разведением препарата 1:1, а S. epidermidis и E. faecalis в пробирках с разведением 1:2.
3.3 Токсикологическая оценка мази гентадиовет
Острую токсичность мази гентадиовет в первой серии экспериментов определяли при ее однократном пероральном введении белым беспородным крысам в дозах от 0,42 г/кг до 7,1 г/кг массы тела. В результате проведенных исследований установлено, что однократное внутрижелудочное введение мази гентадиовет в дозах от 420 до 7100 мг/кг не вызывало гибели и
острой интоксикации животных, не влияло отрицательно на их общее состояние и поведение. Лишь при введении исследуемого образца мази в максимальных дозах − 3,2; 4,7 и 7,1 г/кг массы тела регистрировалось кратковременное (до 60 минут) угнетение, связанное с манипуляциями. Последующее
двухнедельное наблюдение за крысами показало, что по всем показателям
подопытные животные не имели отличий от контрольных аналогов.
Во второй серии опытов при оценке острой токсичности гентадиовета,
исследуемый образец мази вводился per os мышам через атравматичный зонд
в дозе 0,25 грамм (в пересчете на килограмм массы тела животного доза составила 10400 мг). Гибели и острой интоксикации лабораторных животных
за период наблюдений не регистрировали.
В третьей серии экспериментов при определении степени опасности
мази гентадиовет при одноразовом нанесении на кожные покровы проводили
на кроликах. Мазь в количестве 10000 мг/кг массы тела наносили на выстриженные участки кожи животных размером 4х6 см, со временем экспозиции 4
часа. В результате установлено, что гентадиовет не обладает острой токсичностью при одноразовом нанесении на кожные покровы животных.
Таким образом, однократное введение исследуемого образца гентадиовета в дозах от 420 до 10400 мг/кг массы тела переносится животными без
гибели и видимых последствий – он классифицируется как препарат малотоксичный и по ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества» относится к 4-му
классу опасности (малоопасные вещества).
Хроническую токсичность гентадиовета изучали в двух сериях – на лабораторных животных при пероральном и накожном способе введении.
В первой серии экспериментов 40 лабораторных крыс со средней массой тела 224,42,3 г разделили на 4 группы – по 10 особей в каждой. Животным опытных групп давали болюсы с препаратом (индивидуально, течение 1
месяца, один раз в сутки), контрольная группа получала болюсы без действующего вещества в эквиобъеме и в том же режиме дозирования (таб. 2).
11
Таблица 2 – Схема опыта при определении хронической токсичности мази
гентадиовет на лабораторных крысах – введение per os (n = 10)
Группы
1 опытная
2 опытная
3 опытная
4 контрольная
Доза препарата
1/5 – 2080 мг/кг массы тела (466,7 мг/животное)
1/10 – 1040 мг/кг массы тела (233,4 мг/животное)
1/20 – 520 мг/кг массы тела (116,7 мг/животное)
Болюсы, без действующего вещества в эквиобъеме и в том
же режиме дозирования
В ходе эксперимента было установлено, что гибели не зарегистрировано
ни в одной из групп, на протяжении первых двух недель общее состояние подопытных крыс ничем не отличалось от контрольных животных. На 3-й и 4-й
неделях эксперимента в 1-й группе крыс (с максимальной дозировкой препарата) отмечалось некоторое снижение моторной активности по сравнению с
остальными группами животных. При исследовании шерстного покрова выпадения шерсти, алопеций, изменения цвета и структуры не установлено. Отклонений в функциях пищеварения и мочеотделения отмечено не было.
Гравиметрическими исследованиями установлено, что при применении
гентадиовета в течение 30-ти дней наблюдался прирост массы тела лабораторных животных, как в опытных (во 2-й на 3,6% и в 3-й на 5,1%), так и в
контрольной группах (на 4,8%). В группе же с максимальной дозировкой
препарата зарегистрировано снижение массы тела крыс на 2,3%.
При определении хронической токсичности препарата гентадиовет исследовали спонтанную двигательную активность крыс в тесте «открытое поле». При анализе этих данных установлено, что в первой опытной группе выявлены незначительные отличия в показателях психоэмоционального состояния и успешности выполнения тестовых заданий животными. Так, при применении гентадиовета в максимальной дозе отмечен более низкий уровень
исследовательской и вертикальной двигательной активности по сравнению с
животными других групп. При наблюдении за поведением крыс второй и
третьей опытных групп, в сравнении с контролем, достоверных изменений в
поведенческих реакциях не выявлено.
В результате анализа лабораторных исследований крови установлено,
что при применении гентадиовета в дозе 2080 мг/кг массы тела животного в
периферической крови выявлено увеличение доли сегментоядерных нейтрофилов, что проявляется «сдвигом вправо» лейкоцитарной формулы. При
этом зарегистрировано снижение доли лимфоцитов, все эти изменения носили достоверный характер, как относительно контроля, так и относительно
нижнего предела видовой нормы. У опытных крыс после 30-дневного введения гентадиовета в наивысшей дозе выявлено достоверно значимое уменьшение количества тромбоцитов до 81,6±5,4*109/л (разница с контролем в 5,2
раза), а также зарегистрировано снижение уровня гематокрита (характер тенденции) не выходящее за пределы нормы.
12
При оценке биохимического профиля крови установлено, что в первой
опытной группе содержание мочевины и триглицеридов было снижено в
сравнении с животными других групп (таб. 3). О возросшей нагрузке на печень при применении максимальной дозы (466,7 мг/животное) гентадиовета
свидетельствует увеличение активности гепатоиндикаторных ферментов.
Так, в первой опытной группе разница в сравнении с контролем по содержанию аспартатаминотрансферазы составила 2,5 раза, а в уровне аланинаминотрансферазы – 4,7 раза (при степени достоверности Р0,05 по отношению к
контролю). О наличии холестатических отклонений у этих крыс свидетельствует достоверное увеличение уровня щелочной фосфатазы на 31,7% в
сравнении с интактными животными.
Таблица 3 – Биохимические показатели крови лабораторных крыс при применении per os гентадиовета в хроническом эксперименте (М±m; n=5)
Группы
1-я группа
2-я группа 3-я группа контроль
Общий белок, г/л
79,4±4,6
75,9±3,7
81,2±2,4
80,4±4,1
Глюкоза, мМ/л
17,6±0,5
16,5±0,8
17,4±0,9
16,7±1,2
Мочевина, мМ/л
10,2±0,24
8,9±0,33
9,3±0,18
6,3±0,28*
Холестерин, мМ/л
1,5±0,03
1,8±0,06
1,6±0,02
1,7±0,03
АсАТ, Ед/л
93,5±2,84
81,8±1,26
201,5±3,16* 87,9±2,15
АлАТ, Ед/л
28,9±1,23
32,4±1,45
152,9±2,83* 36,5±2,17
Щ.Ф., Ед/л
581,3±7,1
764,6±5,3
1007,5±11,4* 687,9±8,9
Об. билируб., мкМ/л
6,4±0,14
7,1±0,38
6,2±0,43
7,8±0,25
Пр. билируб., мкМ/л
4,4±0,42
3,8±0,54
3,6±0,29
4,3±0,51
Кальций общ., мМ/л
3,2±0,25
2,8±0,37
3,1±0,44
2,4±0,27
Фосфор неорг., мМ/л
3,4±0,12
2,6±0,14
2,9±0,21
3,2±0,09
Креатинин, мМ/л
37,2±0,27
37,5±0,46
36,9±0,33
37,1±0,24
Триглицериды, мМ/л
0,9±0,08
1,2±0,06
1,1±0,19
0,5±0,13
Примечание: *– степень достоверности Р  0,05 по отношению к контролю
Показатели
У крыс, получавших препарат в меньших дозах, концентрация определяемых показателей значимо не отличалась от показателей контрольной
группы.
При патоморфологических и гистологических исследованиях выявлена
тенденция к дозозависимому увеличению коэффициента массы печени – в
первой опытной группе (препарат вводился в наивысшей дозе) этот показатель превосходил контроль на 10,9%.
В этой же опытной группе у трех крыс из десяти при гистологических
исследованиях в печени отмечена умеренная очаговая лимфоидная инфильтрация периваскулярной соединительной ткани, снижено число макрофагов с
высокой фагоцитарной активностью, в цитоплазме печеночных клеток встречаются вакуоли. В отдельных печеночных дольках объем гепатоцитов увеличен, их ядра находятся на грани митотического деления. Крупные сосуды
13
расширены за счет переполнения эритроцитами. В кишечнике наблюдалось
усиление мононуклеарноклеточной инфильтрации соединительной ткани
собственной пластинки слизистой оболочки, а также снижение содержания
бокаловидных клеток в покровном эпителии.
Таким образом, установлено, что ежедневное применение препарата
гентадиовет в течение 30 дней крысам в токсичных дозах 233,4 мг/животное
и 116,7 мг/животное не вызывает раздражения, воспаления или деструкции
тканей, а также не сопровождается развитием дистрофических, деструктивных, очаговых склеротических изменений в паренхиматозных клетках и
строме внутренних органов. Применение препарата в наивысшей дозе – 1/5
от максимально введенной в остром опыте – 2080 мг/кг массы тела или 466,7
мг/животное повышает нагрузку на печень при отсутствии явных клинических признаков интоксикации.
Вторая серия экспериментов по изучению хронической токсичности
гентадиовета была проведена на лабораторных крысах. Гентадиовет наносили
животным на участок кожи с выстриженной шерстью размером 4x4 см в течение 30 дней один раз в сутки. Контролем служили интактные крысы и животные, которым на кожу наносили мазевую основу – карбопол.
Установлено, что гибели животных не зарегистрировано ни в одной из
групп. Общее состояние крыс не отличалось от такового у интактных и получавших мазевую основу. При лабораторном анализе крови токсического действия
препарата на определяемые показатели не зарегистрировано. Длительное
накожное применение мази не оказывает негативного влияния на весовые характеристики животных. Гистологический анализ срезов кожи крыс с участков нанесения гентадиовета выявил неизмененную структуру кожи.
Эксперименты по изучению местно-раздражающего действия мази гентадиовет методом накожных аппликаций и конъюнктивальной пробой были
проведены на кроликах. В результате установлено, что при воздействии гентадиовета на конъюнктиву через 1-2 минуту животные начали проявлять
беспокойство, проявляя попытки расчесть глаз с мазью. В дальнейшем не
выявлено изменений в клиническом состоянии организма кроликов (температура тела, частота пульса и количество дыхательных движений), но развивалась слабая гиперемия конъюнктивы – без выделений, которая исчезала у
всех кроликов через 1-2 дня. Последующее наблюдение в течение недели не
выявило никаких изменений у животных: роговица оставалась чистой; конъюнктивит не развивался, выделения отсутствовали. Суммарный балл составил от 1 до 3 (слабая выраженность раздражающего действия).
При нанесении мази и карбопола на кожу у кроликов как опытной, так
и контрольной групп за весь период наблюдений изменения на коже не отмечались, отеки и утолщения кожной складки отсутствовали.
14
3.4 Эффективность гентадиовета при экспериментальных
инфицированных кожно-мышечных ранах
Эксперименты проведены на лабораторных крысах с массой тела 220 –
240 грамм, из которых было сформировано две группы по 10 животных в
каждой. Опыты были осуществлены в двух повторностях, при моделировании гнойной раны производилось выбривание шерсти в области холки, после
этого стерильным скальпелем производилось иссечение кожного лоскута
1x1,5 см. В первой серии опытов в рану помещался марлевый тампон с взвесью суточной культуры S. aureus, а во второй серии экспериментов – E. fekalis. После этого накладывался накожный адаптационный шов, а рана покрывалась давящей марлевой асептической повязкой.
Крысам первой группы на раны наносили ежедневно гентадиовет в течение 10 дней подряд, 2-й группе животных (контрольной) раны обрабатывали диоксидиновой мазью по аналогичной схеме. Спустя 24 часа после нанесения экспериментальной раны при осмотре у всех животных наблюдали
отѐчность краѐв ран, наличие гнойного экссудата, вязкой консистенции, при
пальпации болезненны и горячие.
У крыс опытных групп в среднем на третьи сутки после применения
мази гентадиовет из полости раны выявлено уменьшение выделения гнойного экссудата, снижение болезненности, уменьшение отечности вокруг раны.
На пятые-шестые сутки выделение экссудата прекратилось, полость раны
очистилась от гнойной массы, ткани уплотнились, отмечается грануляция по
всей поверхности раны. Размер ран уменьшается в среднем до 0,2 см в сутки.
Заживление ран происходило по вторичному натяжению и полностью завершилось на 12-14-е сутки. У животных второй опытной группы видимый процесс заживления по сравнению с 1-й опытной группой был более длительным. Полное заживление ран по вторичному натяжению наступило в среднем
к 17-му дню.
В результате проведенного опыта установлено, что мазь гентадиовет
эффективна при экспериментальных ранах у лабораторных крыс, при этом
срок заживления ран у животных наступает на 3-5 суток раньше, чем в контрольной группе.
При изучении эффективности мази гентадиовет воспроизведение модели гнойной кожно-мышечной раны проводили на крупном рогатом скоте.
Животные были сформированы в две группы по семь голов в каждой и им в
области бедра с латеральной стороны готовили операционное поле по Филончикову. После проведения местной инфильтрационной анестезии, используя трафарет, скальпелем делали вертикальный разрез длиной 7 см и
глубиной 3 см. Инфицирование раны проводили путем фиксирования провизорными швами тампона, смоченного суточной микробной взвесью E. coli (в
1 мл взвеси 1 млрд. микробных клеток). Заживление ран проходило по вторичному натяжению, без наложения сближающих швов. Лечение начинали
на 6-е сутки после воспроизведения модели гнойной кожно-мышечной раны,
15
в опытной группе применяли мазь гентадиовет, а в контрольной – мазь диоксиколь.
При клиническом осмотре на первые сутки после нанесения ран у всех
животных наблюдалась одинаковая картина: угнетение, повышение температуры тела на 1,9-2,5°С, учащение дыхания на 5,9-7,4 дых./мин. и пульса на
12,3-20,1 уд./мин. и уменьшение частоты сокращений рубца на 0,6-1,5 ед./за 5
мин. В следующие дни наблюдения общая температура тела постепенно
снижалась и к 6-м суткам незначительно превышала физиологические показатели. В дальнейшем на 1-3 сутки лечения температура тела в обеих группах
достигла фоновых показателей (в опытной группе этот процесс проходил более активно) и далее незначительно изменялась в пределах границ нормы. В
целом, после нанесения ран наивысший подъѐм температуры тела, пульса и
дыхания отмечался на первый день после нанесения ран, как ответная реакция организма на травму, обуславливая развитие острого воспаления с последующим образованием гнойно-некротической раны.
При моделировании гнойной кожно-мышечной раны у крупного рогатого скота изучались показатели площади зоны воспаления и заживление раневой поверхности по индексу Поповой. В контрольной группе этот показатель составлял в среднем 10,08% и его пик пришелся на 12-21 сутки лечения,
а в опытной группе он в среднем равнялся 17,05% с максимумом на 9-19
сутки лечения. В целом, процесс выздоровления в опытной группе протекал
активнее, чем в контрольной, так как интенсивность воспалительного процесса замедлилась на 5-6 сутки лечения мазью гентадиовет, а в контрольной
группе площадь воспалительного отѐка стала уменьшаться только после девятых суток лечения (рис. 1).
60
40
20
опытная группа
контрольная группа
день 24
опытная группа
день 19
день 15
день 12
день 9
день 7
день 1
день 3
день 5
0
Рис. 1 – Динамика индекса Поповой при применении мазей гентадиовет
(опыт) и диоксиколь (контроль)
Площадь заживления ран была примерно одинаковой в обеих группах
до 7-х суток лечения (47,3% – в опытной, против 40,4% – в контрольной). В
последующий период заживление в опытной группе шло более интенсивно,
так как его пик пришелся на 9 – 12-е сутки, а в контрольной только на 12 –
15-е. В процессе лечения в опытной группе осложнений не отмечалось, тогда
как у контрольных животных наблюдался один случай.
16
3.5 Лечебная эффективность мази гентадиовет при инфицированных
кожно-мышечных ранах у крупного рогатого скота
В период 2014-2015 г.г. на фермах УОХ «Кубань» КГАУ в производственных условиях был проведен эксперимент по оценке лечебной эффективности мази гентадиовет при инфицированных кожно-мышечных ранах у
крупного рогатого скота. С этой целью подобрались две группы животных –
опытная и контрольная по 30 животных в каждой, которые формировались
по принципу парных аналогов (с учетом пола, возраста, массы тела, эксплуатационного периода, характера раны и ее инфицирования).
Животным после первичной хирургической обработки раны наносили
на поверхность в опытной группе мазь гентадиовет, а в контрольной группе –
мазь левомеколь.
В начальный период после получения ран у животных наблюдалась
приблизительно одинаковая клиническая картина: общая и местная температура повышены, животные угнетѐны, вялые и апатичны, аппетит снижен. На
первый день лечения в области ран наблюдался хорошо выраженный отек
краев, стенок и дна, а также были изменены ткани окружающие рану – они
плотные, при пальпации ран присутствует ярко выраженная болезненность,
из полости ран обильно выделяется воспалительный инфильтрат. Также была
отмечена гиперемия, на краях раны и прилежащих к ним тканей наблюдали
наличие сгустков крови и корочек желто-коричневого цвета. В глубине раны
присутствовало большое количество гнойно-фибринозного экссудата с ихорозным запахом, коричневого цвета и вязкой консистенции. В обеих группах
животных уровень возвышения отечности по сравнению с нормальной тканью составил около 3-4 см.
На 3-й день лечения животные в опытной группе в сравнении с контрольной были менее угнетены, при вставании отсутствовала видимая болевая реакция. У животных в обеих группах аппетит сниженный, при этом отдается предпочтение сухим кормам, общее состояние удовлетворительное.
Воспалительный отѐк вокруг ран начал уменьшаться по сравнению с первым
днем лечения. Ткани напряжѐнные, плотной консистенции, отечные, при
пальпации отмечается сильная болезненность. Вокруг раны наличие желтых
корочек, на стенках ран располагаются множественные очажки сухого гноя.
Вытекание воспалительного экссудата менее обильное по сравнению с 1-ми
сутками лечения. Рана почти вся заполнена грануляциями, просвет раны открыт значительно меньше (за счет разросшейся грануляционной ткани стенок). На дне раны кусочки некротизированной ткани. При удалении чужеродных объектов, гнойных корочек и девитализированных тканей обнажились слабо кровоточащие кожно-мышечные ткани бледно-розового цвета.
На 5-е сутки лечения общие физиологические показатели в пределах
нормы, аппетит повышенный, при манипуляциях с ранами наблюдается умеренно агрессивное поведение. Отечность в районе ран спадает, края раны
слабо гиперемированны, болевая реакция выражена слабо. Воспалительный
инфильтрат практически отсутствует, вокруг ран незначительное количество
17
гнойного экссудата, в самих ранах небольшое количество гнойных масс
светло-желтого цвета, грануляция бледно-розового цвета, сочная и обильная.
В ранах наблюдается значительное разрастание грануляционной ткани с образованием грануляционного валика. После удаления засохших корочек на
внутренней поверхности и на дне ран видна грануляционная кровоточащая
ткань бледно-красного цвета. По краям раны видимый эпителиальный ободок. По углам раны происходит рубцовое стягивание, площадь раневой поверхности уменьшается.
На 7-е сутки клиническая картина у животных находилась в пределах
физиологических показателей. Отек спал и практически отсутствует, края
раны незначительно утолщены и уплотнены, малоподвижны, безболезненны.
Поверхность раны покрыта незначительным количеством сухих корочек
желто-белого цвета без неприятного запаха. В полости ран незначительное
количество гнойных масс бледно-желтого цвета. У части животных на ране,
поверх грануляционной ткани, наличие гнойных очажков.
В ранах грануляционная ткань стала мелкозернистой бледно-розового
цвета (происходит дифференциация клеток грануляционной ткани), процесс
заживления ран усиливается. Размеры ран заметно уменьшились. Начинается
формирование раневой корочки и процесс эпителизации. Грануляции однородные, мелко-зернистые, плотной консистенции, розового цвета, заполняют
всю полость раны. По краю раны ярко выраженный эпителиальный ободок. В
углах раны наблюдается наличие рубцовой ткани.
Поверхность раны слабо гиперемированна, безболезненна. Отмечается
наличие незначительных корочек гнойно-некротических масс в ранах и вокруг них. Дно раны бледно-розового цвета, покрыто тонкой пленкой мутного
серозного экссудата.
На 12-е сутки общее состояние животных соответствует физиологической норме. Отмечалось значительное уменьшение площади ран, отечность и
болезненность отсутствовали, раны чистые, свободные от гнойных масс и
сухих корочек, отмечалась активная эпителизация – образование раневой корочки.
На 15-17-е сутки лечения края раны плотные, подвижные, утолщѐнные,
бледно-серого цвета с корочками. Поверхность раны красного цвета, блестящая. Продолжается процесс эпителизации тканей. Рана затягивается и зарастает шерстным покровом.
На 31-е сутки с начала лечения поведение животных и их общее состояние физиологически естественное. Шерстный покров полностью покрывает
место раны и она визуально незаметна. Рубец слегка заметен, на ощупь практически не ощущается, его длина составляет 2,9 – 3,1 см и толщина 0,9 – 1,1
мм.
18
Опыт – гентадиовет
Контроль – левомеколь
Рис. 2 – Раны у животных на 12-е сутки лечения
В контрольной группе все этапы проявлялись аналогично опытной, но
при этом уменьшение площади ран проходило медленнее (уменьшение площади началось на 8-9-ый день лечения, в опытной – на 6-7-ой день). Окончательное заживление в контрольной группе отмечалось к 37-41 дню лечения.
В таблице 4 приведены сроки появления грануляций и начала эпителизации у животных с инфицированными ранами при лечении мазями гентадиовет и левомеколь.
Таблица 4 – Клинические признаки раневого процесса у животных при
лечении гнойных ран (М±m; n=30)
Опытная
Контрольная
гентадиовет
левомеколь
Показатели
сутки
Купирование воспалительных процессов
7,2±0,17*
8,8±0,21
Исчезновение экссудации
7,4±0,43*
11,2±0,58
Начало появления грануляций
8,4±0,24*
12,2±0,13
Заполнение грануляциями всей раны
12,0±0,25*
17,0±0,5
Начало краевой эпителизации
15,2±0,37
18,6±0,51
Полная эпителизация ран
27,2±0,66
33,0±0,75
Примечание: * – степень достоверности Р  0,05 по отношению к контролю
При лечении ран в опытной группе купирование воспалительных процессов протекало на 22,3% быстрее в сравнении с контрольными животными.
При лечении гентадиоветом регистрировалось снижение сроков исчезновения экссудации, относительно применения мази левомеколь (разница 51,3%),
а скорость эпителизации замедлилась и составила 22,4% или 3-3,5 дней. При
применении мази гентадиовет при гнойных ранах уменьшение сроков лечения на разных стадиях раневого процесса составило от 1,5 до 6-ти суток.
Совокупный анализ полученных результатов позволяет заключить, что
клинические, планиметрические, бактериологические исследования свидетельствуют о том, что мазь гентадиовет является эффективным лекарствен19
ным средством для лечения инфицированных кожно-мышечных ран у крупного рогатого скота.
Экономическая эффективность применения мази гентадиовет при терапии инфицированных ран у крупного рогатого скота составляет 13,59 рублей на
1 рубль затрат (при лактации) и 10,63рублей на 1 рубль затрат (при откорме).
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Проведенный нами анализ структуры и распространѐнности хирургической патологии у крупного рогатого скота в некоторых хозяйствах Краснодарского края показал, что в настоящее время лечение инфицированных
кожно-мышечных ран у крупного рогатого скота остаѐтся актуальной проблемой для ветеринарных специалистов. С учетом полученных данных при
выборе действующих веществ гентадиовета ориентировались на вещества,
проявляющие широкий спектр антибактериального действия и эффективность в отношении основных возбудителей раневой инфекции. Разработано
новое высокоэффективное лекарственное средство на основе гелей карбомеров – мазь гентадиовет, применение которой обеспечивает улучшение качества лечения и сокращение его сроков. Доклиническими исследованиями на
животных (мышах, крысах, кроликах) доказана безвредность препарата при
его применении.
Выводы:
1.
Результатами хирургической диспансеризации, проведенной в учебноопытных хозяйствах «Кубань» КубГАУ и «Племзавод учхоз Краснодарское
КГАУ» Краснодарского края установлено, что основное место среди хирургической патологии у крупного рогатого скота занимают болезни конечностей – от 48,2 до 49,4%, доля гнойных поражений мягких тканей (ран) составляет от 26,3% до 30,1%, а абсцессов и флегмон – от 7% до 11,4%.
2.
Теоретически и экспериментально обоснован состав и разработана технология получения препарата гентадиовет, который представляет собой мягкую лекарственную форму – мазь на основе производного акриловой кислоты, включающей антибактериальные и противовоспалительные соединения.
По физико-химическим свойствам гентадиовет представляет собой однородную вязко-пластичную упругую массу гелеобразной консистенции, от светло-желтого до желто-коричневого цвета, оптимальный рН которой находится
в диапазоне от 6,9 до 7,0. Экспериментально доказано, что срок годности мази составляет 2 года со дня изготовления.
3.
При изучении специфической активности гентадиовета установлено,
что препарат обладает выраженными антимикробными свойствами по отношению к основным возбудителям раневой инфекции. Оптимальная антимикробная активность комбинации гентамицина сульфата и диоксидина в отношении S. aureus, S. еpidermidis, E. faecalis, E. сoli, P. aeruginosa проявляется
при содержании гентамицина – 0,2% и диоксидина – 2%.
4.
При проведении доклинических исследований разработанной мази
установлено, что гентадиовет при однократном пероральном введении лабораторным животным в дозах от 420 до 10400 мг/кг массы тела, а также при
20
одноразовом нанесении на кожные покровы классифицируется как препарат
малотоксичный и по ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества» относится к 4-му
классу опасности (малоопасные вещества). В результате проведенных хронических исследований мази на лабораторных крысах при разных способах
введения установлено, что накожное применение препарата не оказывает
токсического действия на организм животных. Применение per os гентадиовета в токсичных дозах в течение месяца только в максимальном объеме
(466,7 мг/животное или 1/5 от максимально введенной в остром опыте) приводит к развитию сдвигов в метаболизме организма животных, повышая
нагрузку на печень, при отсутствии явных клинических признаков интоксикации. При более низких дозировках препарата его токсического действия не
выявлено.
5.
На модели экспериментальных инфицированных ран у лабораторных и
продуктивных животных установлена эффективность многокомпонентной
мази гентадиовет при лечении ран в первой фазе воспалительного процесса.
Сроки заживления ран сокращались на 3-5 суток, а также происходило более
раннее формирование грануляционной ткани, еѐ созревание и эпителизация в
сравнении с препаратом сравнения – мазью диоксиколь.
6.
Совокупный анализ полученных результатов клинических, планиметрических и бактериологических исследований в производственных опытах
свидетельствует о том, что мазь гентадиовет является эффективным лекарственным средством для лечения гнойных кожно-мышечных ран у крупного
рогатого скота. Заживление ран происходило в группе животных, где применялось лечение мазью гентадиовет, в более короткие сроки (с разницей на 5-6
суток), по сравнению с контрольной группой, где применялась мазь левомеколь, при этом раневой процесс не осложнялся вторичным инфицированием.
7.
Применение разработанного препарата – мази гентадиовет при терапии
инфицированных ран у крупного рогатого скота снижает расходы на лечение. Экономическая эффективность результатов исследования составляет
13,59 рублей на 1 рубль затрат (при лактации) и 10,63 рубля на 1 рубль затрат
(при откорме).
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
Для ветеринарной медицины предложен новый препарат – мазь гентадиовет, позволяющий достигнуть положительных результатов при терапии
инфицированных ран у животных. Применение мази регламентируется инструкцией по применению от 26.04.2017 г.
С целью сокращения сроков лечения гнойных ран у крупного рогатого
скота предлагается использовать местное применение мази гентадиовет.
Производство опытных партий препарата осуществляется в отделе фармакологии Краснодарского НИВИ и ООО «ВКДЦ» (г. Краснодар).
Результаты исследований могут быть использованы при составлении
научной и информационной литературы, в учебном процессе профильных
учебных заведений.
21
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:
Публикации в рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК РФ:
1. Кузьминова, Е.В. Использование новых мазевых основ при лечении ран в
эксперименте /Е.В. Кузьминова, М.П. Семененко, А.Н.Трошин, А.В. Тарасов //Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. –
2015. – № 2. – С. 137-139.
2. Тарасов, А.В. Применение препарата «гентадиовет» при открытых механических повреждениях у коров /А.В.Тарасов, Е.В. Кузьминова, М.П. Семененко, И.А. Родин, А.И. Околелова //Ветеринария Кубани. – 2015. – №
5. – С. 13-14.
3. Тарасов, А.В. Определение параметров токсичности мази гентадиовет /А.В.
Тарасов, Е.В. Кузьминова, М.П. Семененко, И.А. Родин //Международный
научно исследовательский журнал. – 2016. – № 11-2 (53). – С. 165-167.
4. Околелова, А.И. К вопросу о лечении животных с открытыми механическими повреждениями /А.И. Околелова, И.А. Родин, Е.В. Кузьминова, А.В.
Тарасов //Ветеринария Кубани. – 2017. – № 3. – С. 12-15.
Статьи, опубликованные в других изданиях:
5. Кузьминова, Е.В. Доклиническое изучение препарата на основе полимера
акриловой кислоты /Е.В. Кузьминова, М.П. Семененко, И.А. Родин, А.В.
Тарасов //Materialy X Mezinarodnivĕdecko-practikaconference «Vedeckyprumysl evropseno kontinentu – 2014». – Dil 16. Lekařstvi. Zvěrolekařstvi.:
Praha. Publishing House «Educationand Science». – 2014. – S. 90-92.
6. Кузьминова, Е.В. Лечение экспериментальных ран у животных препаратом на основе полимера акриловой кислоты /Е.В. Кузьминова, М.П. Семененко, И.А. Родин, А.В. Тарасов //Материалы Международной конф.,
посвященной 85-летию Самарской НИВС «Актуальные проблемы развития ветеринарной науки». – Самара.– 2014. – С. 197-200.
7. Родин, И.А. Доклиническое изучение препарата для местного лечения ран
/И.А. Родин, А.В. Тарасов //Молодой ученый. – 2015. – № 7 (87). – С.
1040-1042.
8. Тарасов, А.В. Изучение параметров острой токсичности мази гентадиовет
/А.В.Тарасов, Е.В. Кузьминова, М.П. Семененко //Материалы международной научно-практической конференции «Интеграция науки и практики в
обеспечении ветеринарного благополучия». Казахстан. Алматы. – 2015. –
С. 234-238.
9. Тарасов, А.В. Эффективность применения препарата гентадиовет при лечении гнойных кожно-мышечных ран у крупного рогатого скота /А.В. Тарасов //Молодой ученый. – 2015. – № 19 (99). – С. 322-325.
10.Тарасов, А.В. Экспериментально-клиническое исследование многокомпонентной мази при лечении гнойных кожно-мышечных ран у крупного рогатого скота /А.В. Тарасов, И.А. Родин, Е.В. Кузьминова, М.П. Семененко
//В сборнике «Актуальные проблемы современной ветеринарной науки и
практики» по материалам Международной научно-практической конференции,
посвященной
70-летию
Краснодарского
научноисследовательского ветеринарного института. – 2016. – С. 113-116.
22
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа