close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

265. ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ НАНОРАЗМЕРНОГО ПОРОШКА ЖЕЛЕЗА ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВА СВИНИНЫ

код для вставкиСкачать
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Л.Г. Каширина, В.В. Кулаков, Э.О. Сайтханов
ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ
НАНОРАЗМЕРНОГО ПОРОШКА ЖЕЛЕЗА ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ
ПРОИЗВОДСТВА СВИНИНЫ
Монография
Рязань, 2013
1
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
УДК 614.31:637.054
ISBN 978-5-98660-148-9
Рецензенты:
- заведующий кафедрой нормальной физиологии с курсом психофизиологии
доктор медицинских наук, профессор, заслуженный работник высшей школы
ГБОУ ВПО «Рязанского государственного медицинского университета имени академика И.П. Павлова» Минздрава России Лапкин М.М.
- доктор биологических наук, профессор кафедры общей зоотехнии и биологии ФГБОУ ВПО «Рязанского государственного агротехнологического уни
верситета имени П.А. Костычева» Баковецкая О.В.
В монографии представлены результаты исследований влияния наноразмерного порошка железа на организм свиней разных возрастных групп и в
периоды разных физиологических состояний. Определена концентрация и
кратность введения их в составе рационов. Изучено влияние наноразмерного
порошка железа, как биологически активной добавки, к рациону супоросных
свиноматок в период последней трети супоросности. Определено физиологическое состояние свиноматок, влияние препарата на репродуктивные
функции их и здоровье поросят, полученных от этих свиноматок. Рассмотрено воздействие наноразмерного порошка железа на качество свиноводческой продукции, при использовании в качестве биологической добавки в рационах свиней в период откорма. Освещены вопросы изменения органолептических и физико-химических показателей свинины под влиянием изучаемой добавки.
Книга предназначена для научных работников, занимающихся изучением
влияния порошков различных металлов в наноразмерной форме как биологически активных добавок к рационам сельскохозяйственных животных, может
быть полезна аспирантам и студентам ветеринарного и сельскохозяйственного профиля.
Л.Г. Каширина, В.В. Кулаков, Э.О. Сайтханов
ISBN 978-5-98660-148-9
Федеральное государственное бюджетное образовательное
учреждение высшего профессионального образования
«Рязанский государственный агротехнологический
университет имени П.А. Костычева, 2013
2
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Оглавление
ВВЕДЕНИЕ………………………………………………………………………..6
Глава 1. Обзор литературы……………………………………………………….9
1.1 Биологическое значение железа для организма животных………………...9
1.2 Железосодержащие органические соединения животного организма.......17
1.3 Механизм всасывания и транспорт железа в организме животных……...23
1.4 Влияние дефицита и избытка железа на организм животных……………30
1.5 Характеристика неорганических наноматериалов, их особенности и токсическое влияние………………………………………………………………...34
1.6 Особенности железа в ультрадисперсном состоянии……………………. 37
1.7 Биологическое применение ультрадисперсного порошка железа………..38
Глава 2. Физиологические исследования на лабораторных животных по
определению оптимальной кратности введения наноразмерного порошка железа..........................................................................................................................43
Глава 3. Использование наноразмерного порошка железа в процессе
воспроизводства свиней…………….…………………………………………...51
3.1 Материал и методы исследований………………………………………….51
3.1.1 Методы исследования гематологических показателей………………....56
3.1.2 Методы исследования показателей продуктивности……………………58
3.1.2.1 Определение репродуктивных функций свиноматок………………….59
3.1.2.2 Определение интенсивности роста поросят…………………………59
3.1.3 Методы исследования химического состава молока свиноматок……...59
3.2 Результаты исследований…………………………………………………...61
3.2.1 Первая серия опытов (на супоросных свиноматках)……………………61
3.2.1.1 Гематологические показатели свиноматок…………………………….61
3.2.1.2 Химический состав молока свиноматок……………………………….83
3.2.1.3 Динамика живой массы свиноматок……………………………………85
3.2.1.4 Воспроизводительная способность и продуктивность свиноматок….87
3.2.2 Вторая серия опытов (на поросятах молочниках)……………………….89
3
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
3.2.2.1Общее физиологическое состояние и гематологические показатели поросят-молочников………………………………………………………………..89
3.2.2.2 Иммунобиологический статус поросят - молочников……………….109
3.2.2.3 Интенсивность роста поросят в подсосный период………………….115
3.2.2.4 Переваримость и использование питательных веществ рациона поросятами…………………………………………………………………………...119
Глава 4. Влияние наноразмерного порошка железа на физиологические
показатели, продуктивность свиней и качество продуктов убоя…………...123
4.1 Материал и методы исследований………………………………………...123
4.2 Результаты исследований………………………………………………….124
4.2.1 Влияние наноразмерного порошка железа на прирост живой массы
свиней в период доращивания и откорма…………………………………...124
4.2.2 Влияние наноразмерного железа на гематологические
показатели………………………………………………………………………127
4.2.3 Влияние наноразмерного железа на переваримость основных питательных веществ рациона…………………………………………………………..143
4.2.4 Влияние наноразмерного железа на минеральный состав мышечной
ткани свиней…………………………………………………………………148
4.2.5 Влияние УДП железа на санитарные показатели мяса и доброкачественность жира………………………………………………………………..152
4.2.6 Органолептические исследования мяса свиней………………………..156
4.2.7 Влияние УДП порошка железа на гистологическое строение мышечной
ткани и ткани печени животных………………………………………………158
Глава 5. Расчет экономической эффективности использования УДП железа в
качестве биологически активной добавки……………………………………163
Глава 6. Выводы и предложения производству……………………………...167
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ……………………………………………………...170
4
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
 УДПМ – ультрадисперсные порошки металлов;
 УДП – ультрадисперсный порошок;
 УДЖ – ультрадисперсное железо;
 СОД – супероксиддисмутаза;
 ИУК – индолилуксусная кислота;
 НАДН – никотинамидадениндинуклеотид;
 ПОЛ – перекисное окисление липидов;
 DMT1 – divalent metal transporter (от англ. – переносчик двухвалентного
железа);
 ТФ – трансферрин;
 ОР – основной рацион;
 АлАТ – аланинаминотрансфераза;
 АсАТ – аспартатаминотрансфераза;
 СОЭ – скорость оседания эритроцитов;
 ОЖСС – общая железосвязывающая способность;
 ЛЖСС – латентная железосвязывающая способность;
 СтимНСТ – стимулированный НСТ-тест;
 СпонНСТ – спонтанный НСТ-тест;
 ИС – индекс стимуляции;
 БЭВ – безазотистые экстрактивные вещества;
 НИИ ДГ – научно-исследовательский институт детской гематологии.
5
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ВВЕДЕНИЕ
Всестороннее развитие отраслей сельского хозяйства является неотъемлемой частью повышения благосостояния нашей страны. В настоящее время
одной из первостепенных задач агропромышленного комплекса является
увеличение объемов производства мяса и полное удовлетворение в нем нас еления. Мировое развитие животноводства свидетельствует, что решение проблемы производства мяса в значительной степени решается за счет производства свинины как наиболее скороспелой и технологичной отрасли. В последние годы увеличение продуктивности животных на 60-65% достигнуто за
счет совершенствования системы кормления и прогрессивных технологий
содержания и на 35-40% – за счет селекции, генетики и племенного дела.
Следовательно, организация полноценного и рационального кормления свиней - одно из основных условий повышения их продуктивности (М.
Мысик, 2001). Внедряемая в практику животноводства детализированная система нормированного кормления предусматривает контролирование рационов животных по 24-35 показателям, в том числе: по энергии, протеину, сухому веществу, незаменимым аминокислотам, макро- и микроэлементам, витаминам (В. Логинова, 2004; А.П. Кебец, Н.М. Кебец, В.Н. Бочкарев, 2004).
Известно, что свиньи чувствительны к недостатку не только протеина, но
и минерально-витаминным компонентам рациона, которые в значительной
степени определяют здоровье животных. В связи с этим большой интерес
представляет использование различных кормовых и биологически активных
добавок, являющихся дополнительным источником минеральных веществ и
витаминов.
Обогащение рационов кормовыми добавками повышает продуктивность
животных, оказывает положительное влияние на плодовитость, эмбриональное развитие и рост потомства, снижает отрицательное воздействие стрессфакторов (В.Г. Рядчиков, 2000; Г.М. Бажов и др., 2002; Л.Н. Гамко и др.,
2002; Е.Ю. Матяшов, 2002; В.И. Темираев, 2003; А.Я. Яхин, 2003).
6
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
С помощью биологически активных добавок можно корректировать многие биохимические процессы и состояние защитных механизмов организма
(Б.Д. Кальницкий, 1985; Н.М. Теппер, 1987; П. А. Красочко, А. С. Ястребов,
2001; В. С. Прудников, В. П. Жалдыбин, 2002; Г.П. Вирясов, 2002; Н.В. Данилевская, 2003; В.И. Фисинин, 2004).
В то же время использование различных кормовых и биологически активных добавок требует всестороннего изучения их влияния на организм.
Большое значение имеют вопросы определения дозировок и режима использования добавок, а также их соотношение и взаимодействие с нормами и другими факторами, такими как состав рациона, возраст животных, длительность применения и др.
На сегодняшний день все больше внимания уделяется применению в животноводстве в качестве биологически активных добавок наноразмерных порошков металлов в ультрадисперсном состоянии. По данным Л.В. Коваленко,
Г.Э. Фолманис, 2006 данные вещества обладают высокой биологической активностью.
Наибольший интерес у ученых вызывают такие металлы как железо, кобальт, медь, так как они являются наиболее значимыми микроэлементами,
принимающими участие в гемопоэзе и обеспечивающими нормальное протекание основных физиологических процессов в организме животных.
Основным производителем ультрадисперсных порошков металлов является Московский институт стали и сплавов и институт металлургии и материаловедения им. А.А. Байкова РАН.
Первыми производителями металлов в ультрадисперсном состоянии являются профессор Д.И. Рыженков, доценты В.В. Левин и Э.Л. Дзидзигури.
Исследования данных поро шков, проведенные в последние годы, показали их эффективность в растениеводстве, кормопроизводстве, животноводстве и птицеводстве.
Наноразмерные порошки железа применяются в качестве биологически
активной добавки в рационах крупного рогатого скота различных половоз7
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
растных групп, кроликов и птиц (М. Горшков, В. Мусатова, Л. Коваленко,
2000; Л.Е. Амплеева, 2006; А.А. Назарова, 2009). Активно ведется научная
деятельность по изучению влияния наноразмерных порошков железа, меди и
цинка на организм свиней различных половозрастных групп (А.Г. Грушкин,
2009).
Серьезным основанием к широкому использованию в животноводстве
биологически активных веществ является их высокая экономическая эффективность. Количество биологически активных препаратов, рекомендуемых
для скармливания, ежегодно увеличивается, по этому, необходимо знать, как
они влияют на качество животноводческой продукции, учитывать последствия для человека при потреблении ее.
Свиньи, как известно, особенно чувствительны к несбалансированности
рационов и в связи с этим необеспеченность их даже по одному из элементов
питания ведет к снижению усвоения питательных веществ, перерасходу кормов, нарушению обмена веществ, недополучению продукции, заболеваниям и
гибели.
Изыскание дополнительных природных кормовых средств, разработка и
организация производства премиксов, балансирующих добавок, обеспечивающих повышение использования питательных веществ рационов, является
важнейшей задачей кормления животных (Б.Д. Кальницкий, 1985; Н.К. Кирилов, Г.А. Алексеев, С.Д. Назаров, 1997; В.Т. Самохин, 1997, 1999; К.Х. Папуниди, А.В. Иванов, М.Г. Зухрабов, 2000).
Все выше сказанное послужило толчком к проведению нами исследований на свиньях по использованию наноразмерного железа в ультрадисперсном состоянии на процессы воспроизводства супоросных свиноматок, рост и
развитие потомства, полученного от них, на качество мяса.
8
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Биологическое значение железа для организма животных
Значение железа, как элемента, и его соединений для живого организма
очень велико. Оно присутствует во всех клетках живого организма и играет
важнейшую роль в его жизнедеятельности.
Железо часто не относят к числу микроэлементов, исходя из большой потребности в нем организмов. Однако функции, которые выполняет этот металл в растительных и животных организмах, сходны с теми, которые присущи истинным микроэлементам. Эффективность действия и характер обмена в организме всех других элементов тесно связан с особенностями обмена
железа (И.А. Чернавина, 1970; И.С. Трончук, Б.Е. Фесина, Г.М. Почерняева,
1990; С.Н. Хохрин, 2002).
Биологическая ценность железа определяется многогранностью его
функций, незаменимостью другими металлами в сложных биохимических
процессах, активным участием в клеточном дыхании, обеспечивающем нормальное функционирование тканей и органов (В. Янченко, 2005; Н.А. Лобан,
О.Я. Василюк и др., 2008).
Железо, входящее в состав биологических систем, можно разделить на
две группы – геминное и негеминное.
Группу геминного железа представляют железосодержащие хромопротеиды – гемопротеиды. К ним относятся дыхательные пигменты – гемоглобин
и миоглобин, цитохромы, а также гемсодержащие ферменты – каталаза и пероксидаза. К группе негеминного железа относится резервное и паренхиматозное железо. Резервное железо необходимо, прежде всего, для процесса
кроветворения, оно находится в своем естественном «депо», а именно в глобулярном белковом комплексе – ферритине, который в свою очередь локализуется в печени, селезенке и костном мозге. Паренхиматозное железо соср едоточено в тканях, преимущественно в мышечной и не используется даже в
случае дефицита кроветворения. Также к негеминному можно отнести желе9
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
зо, входящее в состав трансферрина (сидерфилина), лактоферрина и гаптоглобина. Данные белковые комплексы содержат около 0,1% железа, однако
также выполняют немаловажную функцию (Т.В. Казюкова, 2000).
Группа наиболее известных природных дыхательных пигментов – белка
крови гемоглобина и мышечного белка миоглобина – по химической структуре представляет собой комплекс двухвалентного железа с протопорфирином IX. Данный комплекс традиционно называется гемом.
Атом Fe2+ в составе протопорфирина IX координационно не насыщен. Он
имеет свободные d-орбитали, в связи с чем, способен присоединять один или
два дополнительных лиганда (атома, иона или молекулы). Именно это свойство гема и определяет способность молекул гемоглобина и миоглобина присоединять молекулярный кислород и другие жизненно важные лиганды (Е.В.
Румянцев, Е.В. Антина, Ю.В. Чистяков, 2007).
Гемоглобин (от греч. haimatos – кровь и лат. globus – шар) составляет
приблизительно 95 % сухой массы эритроцитов – красных кровяных клеток –
и выполняет функцию переносчика молекулярного кислорода и диоксида углерода кровью. Содержит до 65 % железа. Гемоглобин – это тетрамерный белок, состоящий из четырех субъединиц, каждая из которых состоит из гема и
одной молекулы белкового компонента – глобина. Благодаря строго упорядоченной четвертичной структуре гемоглобин имеет почти правильную форму шара диаметром 55 Å (В. Элиот, Д. Элиот, 2002; В.М. Холод, А.П. Курдеко, 2005).
Миоглобин (от греч. mios – мышца и лат. globus – шар) – небольшой глобулярный белок, состоящий из одного гема и одной полипептидной цепи, с одержащей 153 аминокислоты. В связи с этим, молекулу миоглобина можно
рассматривать как ¼ молекулы гемоглобина. В молекуле миоглобина сосредоточено до 10% железа (Б.Д. Березин, Н.С. Ениколопян, 1988).
Миоглобин активно связывает кислород в мышцах. В виде оксимиоглобина он служит резервуаром для кислорода в покоящихся скелетных мыш-
10
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
цах, а при мышечной активности освобождает кислород (А. Уайт, Ф. Хендлер, Э. Смит, 1981).
Механизм связывания кислорода миоглобином и гемоглобином достаточно хорошо изучен (Д. Мецлер, 1980). Присоединение кислорода гемоглобином и миоглобином есть не что иное, как процесс аксиальной координации
молекулярного лиганда, в данном случае кислорода, на координацио нноненасыщенной d-орбитали двухвалентного железа.
Важно отметить, что при взаимодействии кислорода с гемоглобином степень окисления железа не изменяется, в отличие от свободного гема. Это явление называется «эффект белковой защиты» и происходит из-за низкой диэлектрической проницаемости среды внутри глобул гемоглобина. Таким о бразом, глобин предохраняет двухвалентное железо в геме от окисления.
Как уже говорилось выше, так называемое геминное железо входит в состав таких белков как пероксидаза, каталаза и цитохромы. Поэтому целесообразно дать краткую характеристику данных веществ.
С функциональной точки зрения каталитически активные железосодержащие белки удобно делить на три группы (E.C.Slater, 1958).
 Первая группа включает пероксидазу и каталазу.
Пероксидаза – гликопротеид, для которого носителем соответствующей
изменчивости могут быть углеводные компоненты. Такой компонент, даже
небольшой по массе, может сообщать молекуле качественно новое состояние
и регулировать отношение фермента к различным изменениям среды. Доказано (Е. А. Строев, 1986), что углеводная часть придает белку большую специфичность. Это своего рода векторные группы протеидов, которые «узнают» участки других структур, иные макромолекулы и поверхность клеток.
Пероксидаза – это двухкомпонентный фермент, представляющий собой
сочетание активной группы, вступающей в химическое взаимодействие с
субстратами коллоидального белкового «носителя», усиливающего каталитическое действие этой группы. По своей природе это глобулярный белок
диаметром 50Å (F.Clementi, G.Palade, 1969), который содержит около 43% α11
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
спиральных участков в составе белковой части молекулы. По номенклатуре
ферментов, принятой на Международном химическом съезде в 1979 году, пероксидаза – фермент, действующий на перекись водорода в качестве акцептора. Изученные до настоящего времени пероксидазы состоят из неокрашенного гликопротеида и соединенного с ним коричнево-красного железопорфирина (В. А. Андреева, 1988).
Фермент способен выполнять самые разнообразные функции в живых организмах, что обусловлено разнообразием механизмов его действия, спосо бностью катализировать реакции оксидазного и пероксидазного окисления
субстратов (рис. 1.1).
Интенсивность аэробных процессов в живых организмах может быть
оценена по активности пероксидазы, которая совместно с супероксиддисмутазой (СОД) и каталазой, входит в состав высокомолекулярных антиоксидантов живых организмов, предотвращающих разрушительное действие активных форм кислорода (I.Fridovich, 1986; B.Halliwell, 1998).
Рисунок 1.1 – Функциональная роль пероксидазы в растительных и животных тканях (В. В. Рогожкин, 2004)
12
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Пероксидаза способна катализировать реакции окисления различных
биологически активных веществ (никотинамидадениндинуклеотид (НАДН),
индолилуксусная кислота (ИУК), аскорбиновая кислота, флавониды и др.),
среди которых следует выделить антиоксиданты – вещества, способные подавлять образование свободных радикалов, ингибировать перекисное окисление липидов (ПОЛ).
В живых организмах существует физиологически нормальный уровень
свободно радикальных процессов и перекисного окисления липидов, необходимый для регулирования липидного состава, проницаемости мембран, и ряда биосинтетических процессов (Е.М. Молочкина и др., 1991).
В генерировании свободных радикалов в биогенных системах может
принимать участие и пероксидаза, регулируя тем самым биохимические основы баланса (П.А. Савицкий и др., 1998).
Другим немаловажным гемсодержащим ферментом из группы пероксидаз
является каталаза.
Каталаза (от греч. Katalуo – разрушаю), фермент из группы гидропероксидаз, катализирующий окислительно-восстановительную реакцию, в ходе
которой из 2 молекул перекиси водорода образуются вода и кислород.
Каталаза получена в кристаллическом состоянии. Её молекулярная масса
250 000. Она широко распространена в клетках животных, растений и микроорганизмов. Относится к хромопротеидам, имеющим в качестве простетической (небелковой) группы окисленный гем.
Специфичность каталазы в отношении к субстрату-восстановителю невелика, поэтому данный фермент может катализировать не только разложение
H2O2, но и окисление низших спиртов.
Функция каталазы сводится к разрушению токсической перекиси водорода, образующейся в ходе различных окислительных процессов в организме
(E.C.Slater, 1958).
 Вторая группа представлена несамоокисляющимися цитохромами.
13
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Данные вещества легко восстанавливаются до гемохромогенов, имеющих
четко выраженную абсорбционную полосу в видимой области спектра.
В последствие они окисляются до соединений трехвалентного железа
(парагематинов) немолекулярным кислородом. Более высокая степень окисления, чем Fe3+ для них не известна.
Цитохромы этой группы с трудом связываются с ингибиторами дыхания:
окисью углерода, цианидом или азидом (Д. Г. Кнорре, С. Д. Мызина, 2000).
 Третья группа – это самоокисляющиеся цитохромы.
То есть цитохромы данной группы окисляются до парагематинов (активных форм) непосредственно кислородом. Самый яркий представитель данной
группы – цитохром а3 – цитохромоксидаза.
Цитохромы – это гемопротеиды, содержащие в качестве простетической
группы гем. Служат переносчиками электронов в процессах внутриклеточного дыхания, окислительного фосфорилирования, фотосинтеза, ферментативного гидроксилирования и других окислительно-восстановительных реакциях. Цитохромы найдены у всех животных, растений и микроорганизмов. Известно несколько десятков индивидуальных цитохромов, многие из которых
выделены в гомогенном состоянии (М. Диксон, Э. Уэбб, 1982).
Исходя из вышесказанного видно, что в тканях животных и растений основной путь транспорта электронов от дыхательного субстрата к молекулярному кислороду включает соединения именно железопорфириновой природы. Этот научно подтвержденный факт в итоге делает невозможным процесс
клеточного «дыхания» живых организмов без основы гемопротеида – без железа.
Негеминное железо, локализующееся главным образом в митохондриях
клетки, играет существенную роль в клеточном дыхании, участвуя в окислительном фосфорилировании и транспорте электронов при терминальном
окислении, в цикле трикарбоновых кислот (цикле Кребса) (А. Ленинджер,
1985).
14
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Ферритин и гемосидерин – запасные соединения железа в клетке, находящиеся главным образом в ретикулоэндотелиальной системе печени, селезенки и костного мозга. Приблизительно одна треть резервного железа организма, преимущественно в виде ферритина, выпадает на долю печени. Запасы железа могут быть при необходимости мобилизованы для нужд организма
и предохраняют его от токсичного действия свободно циркулирующего железа.
Известно, что гепатоциты и купферовские клетки печени участвуют в создании резервного железа. Они имеют тенденцию запасать относительно
больше негеминового железа в виде гемосидерина.
Не смотря на это, при парентеральном введении железа, как гепатоциты,
так и купферовские клетки печени аккумулируют большое количество дополнительного ферритина (Г. Эйхгорн, 1978).
Сферическая белковая оболочка молекулы ферритина состоит из 24 субъединиц, имеющих молекулярный вес 18500 – 19000. Общий молекулярный
вес апоферритина 445000 (Д.Г. Кнорре, С.Д. Мызина, 2000). Электронномикроскопические исследования показали, что ферритин имеет полую оболочку с внутренним диаметром 70 – 80 Å. Оболочка имеет 6 каналов, расширяющихся по направлению к внутренней части (их диаметр 9 – 12 Å). Ядро
ферритина состоит из мицелл железо-фосфатного комплекса, имеющих кристаллическую структуру. Захват и освобождение железа осуществляется через белковые каналы путем свободного пассажа, а его отложение и мобилизация происходят на поверхности микрокристаллов. Стимуляция синтеза
ферритина железом является хорошо установленным фактом (Д.К. Шапиро,
1976).
Как известно, печень является основным компонентом ретикулоэндотелиальной системы. В конце жизнедеятельности эритроциты фагоцитируются
макрофагами этой системы, а освобождающееся железо либо оседает в печени в виде ферритина или гемосидерина, либо возвращается в плазму крови и
15
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
захватывается в паренхиматозных клетках печени и мышц, а также в макрофагах ретикулоэндотелиальной системы печени, селезенки и костного мозга.
Гемосидерин – темно-желтый пигмент, состоящий из оксида железа. Он
образуется при распаде гемоглобина и последующей денатурации и депротеинизации белка ферритина, отвечающего за хранение железа в организме.
Аккумуляция гемосидерина в тканях и органах тела происходит при различных заболеваниях (Н.А. Преображенский, Р.П. Евстигнеев, 1970).
Гемосидерин является вторым запасным соединением железа в клетке и
содержит значительно больше железа, чем ферритин. В отличие от ферритина он нерастворим в воде. Существует достаточно аргументированное предположение, что преобразование ферритина в гемосидерин происходит путем
постепенного перенасыщения ферритиновой молекулы железом с последующим ее разрушением и образованием гемосидерина (Я. Мусил, О. Новакова, К. Кунц, 1984).
Важное физиологическое значение имеют такие железосодержащие соединения как лактоферрин и гаптоглобин.
Лактоферрин – полифункциональный белок из семейства трансферринов.
Лактоферрин является глобулярным гликопротеином с молекулярной массой
около 80 кДа и широко представлен в различных секреторных жидкостях, таких как молоко, слюна, слезы, секреты носовых желез. Лактоферрин является
одним из компонентов иммунной системы организма, принимает участие в
системе неспецифического гуморального иммунитета, регулирует функции
иммунокомпетентных клеток и является белком острой фазы воспаления (T.
Fujihara, K.Hayashi, 1995).
Гаптоглобин – белок плазмы крови, который связывает гемоглобин, высвобождающийся из эритроцитов, и тем самым ингибирует его окислительную активность, предотвращая выведение из организма. Комплекс гемоглобин-гаптоглобин затем удаляется клетками ретикуло-эндотелиальной системы.
16
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
1.2 Железосодержащие органические соединения животного
организма
Железо, находящееся в организме человека, можно разбить на 2 большие
группы: клеточное и внеклеточное. Соединения железа в клетке, отличающиеся различным строением, обладают характерной только для них функциональной активностью и биологической ролью для организма. В свою очередь
их можно подразделить на 4 группы. К первой группе относятся гемопротеиды, основным структурным элементом которых является гем. Это гемоглобин, миоглобин, цитохромы, каталаза и пероксидаза. Ко второй группе относят железосодержащие ферменты негеминовой группы. Среди них ос обое
место занимают сукцинат - дегидрогеназа, ацетил - коэнзим А - дегидрогеназа, НАДН (никотинамиддинуклеотид) - цитохром С-редуктаза. К железосодержащим соединениям третьей группы относятся ферритин и гемосидерин
внутренних органов, а четвертая группа включает железо, рыхло связанное с
белками и другими органическими веществами (Jacobs, Worwood, 1974).
Среди внеклеточных соединений железа выделяют железо-связывающие
белки трансферрин и лактоферрин, содержащиеся во внеклеточных жидкостях.
Гемоглобин, содержащийся в эритроцитах, выполняет важную для организма газотранспортную функцию - переносит экзогенный кислород и эндогенный углекислый газ. Эритроцит по отношению к гемоглобину играет роль
буферной системы, способной регулировать общую величину газотранспортной функции. Гемоглобин - сложный белок, состоящий из белковой молекулы - глобина, соединенной полипептидными цепочками с четырьмя комплексами гема. Глобин состоит из двух пар полипептидных цепочек, каждая из
которых содержит 141-146 аминокислот. Гем, составляющий 4% веса молекулы гемоглобина, содержит железо в центре порфиринового кольца (Jackson
et al., 1974; Poulson, 1976, Ленинджер).
17
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Миоглобин - дыхательный белок сердечной и скелетной мускулатуры. Он
состоит из одной полипептидной цепи, содержащей 153 аминокислоты и соединен с гемпростетической (железонебелковой) группой. Основной функцией миоглобина является транспортировка кислорода через клетку и регуляция его содержания в мышце для осуществления сложных биохимических
процессов, лежащих в основе клеточного дыхания. Он содержит 0,34% железа. Миоглобин депонирует кислород во время сокращения мышц, а при их
поражении он может попадать в кровь и выделяться с мочой (Д. Г. Кнорре, С.
Д. Мызина, 2000).
Железосодержащие ферменты и негеминовое железо клетки находится
главным образом в митохондриях. Наиболее изученными и важными для организма ферментами являются цитохромы, каталаза и пероксидаза.
Цитохромы представляют собой липидные комплексы гемпротеидов и
прочно связаны с мембраной митохондрии. Существует мнение (M. Joshua
Baughman, K. Vamsi Mootha, 2006), что митохондриальное дыхание необходимо для процессов дифференцировки тканей, а внемитохондриальное игр ает важную роль в процессах роста и дыхания клетки. Основной биологической ролью большинства цитохромов является участие в переносе электронов, лежащих в основе процессов терминального окисления в тканях (А.И.
Арчаков, 1975).
Наиболее важным представителем данной группы является цитохром а 3
(цитохромоксидаза).
Цитохромоксидаза является конечным ферментом митохондриального
транспорта электронов - электронотранспортной цепочки, ответственным за
образование АТФ при окислительном фосфорилировании в митохондриях.
Каталаза, как и цитохромы, состоит из единственной полипептидной цепочки, соединенной с гем - группой. Она является одним из важнейших ферментов, предохраняющих эритроциты от окислительного гемолиза (А. Ленинджер, 1985).
18
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Каталаза - это фермент, который разлагает образующуюся в процессе
биологического окисления перекись водорода на воду и молекулярный кислород, а также окисляет в присутствии перекиси водорода низкомолекулярные спирты и нитриты (У. Г. Эванз, 1990).
Каталаза была получена в кристаллическом состоянии. Её молекулярная
масса оценивается в 250 кДа. Фермент широко распространён в клетках животных, растений и микроорганизмов. Относится к хромопротеидам, имеющим в качестве простетической группы окисленный гем. Специфичность каталазы в отношении к субстрату - восстановителю невелика, поэтому она
может катализировать не только разложение перекиси водорода, но и окисление низших спиртов. Функция каталазы сводится к разрушению токсической перекиси водорода, образующейся в ходе различных окислительных
процессов в организме (Л. Страйер, 1984).
Каталаза выполняет двойную функцию в зависимости от концентрации
перекиси водорода в клетке (М. Диксон, Э. Уэбб, 1982). При высокой ко нцентрации перекиси водорода фермент катализирует реакцию ее разложения,
а при низкой - и в присутствии донора водорода (метанол, этанол и др.) становится преобладающей пероксидазная активность каталазы.
Пероксидаза - это фермент, катализирующий дегидрогенизацию (окисление) различных веществ в присутствии перекиси водорода, которая действует как акцептор водорода и превращается в воду в ходе данной химической
реакции (Б. Альбертс, 1984).
Пероксидаза содержится преимущественно в лейкоцитах и слизистой
тонкого кишечника. Она также обладает защитной функцией, предохраняя
клетки от их разрушения перекисными соединениями (В. В. Рогожкин, 2004).
Важно отметить такое вещество, как миелопероксидаза. Это железосодержащий геминовый фермент, находящийся в гранулах нейтрофильных
лейкоцитов, освобождающийся в фагоцитирующие вакуоли в течение лизиса
гранул. Активированное этим ферментом разрушение белка клеточной стенки бактерий является смертельным для микроорганизма, а активированное
19
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
им йодинирование частиц относится к бактерицидной функции лейкоцитов
(А. Б. Рубин, 1998).
К железосодержащим относятся и флавопротеиновые ферменты, в которых железо не включено в геминовую группу и необходимо только для реакций переноса. По данным ученых (Р. Досон, Д. Эллиот, У. Эллиот, К. Джонс,
1991) эти ферменты в комбинации с восстановительными системами образуют многочисленные окислительно - восстановительные системы, играющие
важную роль в клеточном метаболизме (углеводный, белковый, жировой обмен). Наиболее изученным представителем группы флавопротеиновых ферментов является сукцинат-дегидрогеназа, которая наиболее активна в цикле
трикарбоновых кислот. Митохондриальные мембраны свободно проницаемы
для субстрата фермента.
Негеминовое железо, локализующееся главным образом в митохондриях
клетки, играет существенную роль в дыхании клетки, участвуя в окислительном фосфорилировании и транспорте электронов при терминальном окислении, в цикле трикарбоновых кислот (У. Г. Эванз, Д. Финдлей, 1990).
Ферритин и гемосидерин - запасные соединения железа в клетке, находящиеся главным образом в ретикулоэндотелиальной системе печени, селезенки и костного мозга. Приблизительно одна треть резервного железа организма, преимущественно в виде ферритина, падает на долю печени. Запасы
железа могут быть при необходимости мобилизованы для нужд организма и
предохраняют его от токсичного действия свободно циркулирующего железа
(В.М. Холод, А.П. Курдеко, 2005).
Известно (Н. Е. Кучеренко, 1988), что гепатоциты и купферовские клетки
печени участвуют в создании резервного железа, причем в нормальной печени большая часть железа обнаружена в гепатоцитах в виде ферритина. При
парентеральном введении железа как гепатоциты, так и купферовские клетки
печени аккумулируют большое количество дополнительного ферритина, хотя
последние имеют тенденцию запасать относительно больше из лишнего негеминового железа в виде гемосидерина.
20
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Ферритин - это сложный белок металлопротеид. Впервые обнаружен чехословацким учёным Лауфбергером (1934) в печени животных. Ядро ферритина состоит из мицелл железо-фосфатного комплекса, имеющих кристаллическую структуру. Захват и освобождение железа осуществляется через белковые каналы путем свободного пассажа, а его отложение и мобилизация
происходят на поверхности микрокристаллов. Стимуляция синтеза ферритина железом является хорошо установленным фактом (Д. Мецлер, 1980).
Как известно (Д. Г. Кнорре, С. Д. Мызина, 2000), печень является осно вным компонентом ретикулоэндотелиальной системы. В конце жизнедеятельности эритроциты фагоцитируются макрофагами этой системы, а освобождающееся железо или оседает в печени в виде ферритина (гемосидерина),
или возвращается в плазму крови и захватывается в паренхиматозных клетках печени и мышц, а также в макрофагах ретикулоэндотелиальной системы
печени, селезенки и костного мозга.
Гемосидерин является вторым запасным соединением железа в клетке и
содержит значительно больше железа, чем ферритин. В отличие от ферритина он нерастворим в воде. Существует предположение (А. А. Болдырев,
1986), что преобразование ферритина в гемосидерин происходит путем постепенного перенасыщения ферритиновой молекулы железом с последующим ее разрушением и образованием зрелого гемосидерина.
Внеклеточное железо сосредоточено в плазме крови. Во внеклеточных
жидкостях железо находится в связанном состоянии - в виде железо - белковых комплексов. Уровень железа в плазме крови зависит от ряда факторов:
взаимоотношения процессов разрушения и образования эритроцитов, состояния запасного фонда железа в желудочно-кишечном тракте. Однако наиболее важной причиной, определяющей уровень плазменного железа, является
взаимодействие процессов синтеза и распада эритроцитов (И.И. Садовникова, 2010).
Железо - связывающий белок трансферрин, открытый шведскими учеными (Prunier et al., 1964), содержится в небольшом количестве в плазме крови.
21
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Молекулярный вес трансферрина 76000 - 80000, он состоит из единственной
полипептидной цепочки с расположенными на ней двумя значительно схожими, если не идентичными, металлсвязывающими пространствами. Эти
пространства (А и В) наиболее прочно связывают железо по сравнению с
ионами других металлов. Синтезируется трансферрин преимущественно в
паренхиматозных клетках печени (З. П. Кометиани, М.Г. Векуа, 1988). Функции трансферрина в организме представляют значительный интерес. Он не
только переносит железо в различные ткани и органы, но и «узнает» синтезирующие гемоглобин ретикулоциты и возможно другие нуждающиеся в железе клетки. Трансферрин отдает железо им только в том случае, если клетки
имеют специфические рецепторы, связывающие железо. Таким образом, этот
железо-связывающий белок функционирует как транспортное средство для
железа, обмен которого в организме зависит как от общего поступления железа в плазму крови, так и от его количества, захваченного различными тканями соответственно количеству в них специфических рецепторов для железа. Кроме того, трансферрин обладает защитной функцией - предохраняет
ткани организма от токсического действия железа (Н. А. Преображенский, Р.
П. Евстигнеева, 1976).
Железо-связывающий белок лактоферрин обнаружен во многих биологических жидкостях: молоке, слезах, желчи, синовиальной жидкости, панкреатическом соке и секрете тонкого кишечника. Кроме того, он находится в специфических гранулах нейтрофильных лейкоцитов, образуясь в клетках миелоидного ряда со стадии промиелоцита. Подобно трансферрину, лактоферрин способен связывать 2 атома железа специфическими пространствами. Он
состоит из одной полипептидной цепочки, молекулярный вес приблизительно равен 80000. В физиологических условиях этот железо-связывающий белок насыщен железом до 20% в ничтожных количествах он содержится в
плазме крови, освобождаясь в нее из нейтрофильных лейкоцитов (Т.Г. Канышкова, В.Н. Бунева, Г.А. Невинский, 2001).
22
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В настоящее время известны следующие функции этого белка: бактериостатическая, участие в иммунных процессах и абсорбции железа в желудочно-кишечном тракте. Свободный от железа лактоферрин - аполактоферрин
обладает бактериостатическими свойствами, которые теряются при насыщении его железом. Аполактоферрин тормозит рост бактерий и грибов, и во зможно, играет роль во внутриклеточной гибели микроорганизмов. При низкой концентрации лактоферрина в нейтрофильных лейкоцитах может
уменьшаться их бактерицидная активность (Т. Fujihara, К. Hayashi, 1995).
Железосерные ферменты - это еще один важный класс железосодержащих ферментов, участвующих в переносе электронов в клетках животных,
растений и бактерий. Железосерные ферменты не содержат гемогрупп, они
характеризуются тем, что в их молекулах присутствует равное число атомов
железа и серы, которые находятся в особой лабильной форме, расщепляющейся под действием кислот. К железосерным ферментам относится, например, ферредоксин хлоропластов, осуществляющий перенос электронов от
возбужденного светом хлорофилла на разнообразные акцепторы электронов
(R. Weisner, J. Rathmann, H.G. Holzhutter, 1996).
1.3 Механизм всасывания и транспорт железа в организме животных
Всасывание железа определяет в основном содержание железа в организме и является ведущим фактором в регуляции состава железа в теле у человека и животного. Выделение железа из организма - процесс недостаточно
регулируемый. Существует сложный механизм, препятствующий всасыванию избыточного количества железа.
Хотя теоретически весь кишечник способен осуществлять всасывание
железа, включая толстую кишку, основное количество железа всасывается в
двенадцатиперстной кишке, а также в начальной части тощей кишки. Эти
данные были установлены как в эксперименте на крысах и собаках, так и при
клинических исследованиях, проведенных у здоровых людей и у больных
23
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
железодефицитной анемией. По данным Wheby (1970), чем больше дефицит
железа, тем дальше в тощую кишку распространяется зона всасывания железа.
Вопрос о механизме всасывания железа нельзя считать решенным. Ни
одна из существующих гипотез не может полностью объяснить механизм регуляции всасывания железа. Наибольшей популярностью пользовалась гипотеза, выдвинутая Granick (1949), по которой основная роль в регуляции
всасывания железа отводится соотношению между белком апоферритином,
свободным от железа, и ферритином, связанным с железом. Согласно этой
гипотезе прием большого количества железа приводит к насыщению апоферритина и прекращению всасывания железа. Наступает так называемый слизистый блок. При малом количестве железа в организме в слизистой оболочке кишки содержится мало ферритина, в результате чего всасывание железа
усиливается. Однако некоторые факты не могут быть объяснены гипотезой
Граника. При приеме больших доз железа всасывание его значительно возрастает, несмотря на имеющийся слизистый блок; при активации эритропоэза
всасывание возрастает, несмотря на высокое содержание железа в слизистой
оболочке кишки (Brown et. al., 1958; Weintraub et al., 1964).
По мнению Wheby (1956), процесс всасывания железа у человека включает в себя три компонента: а) проникновение железа в слизистую оболочку из
просвета кишки; б) проникновение железа из слизистой оболочки кишки в
плазму; в) заполнение запасов железа в слизистой оболочке и влияние этих
запасов на всасывание. Скорость проникновения железа в слизистую оболочку из просвета кишки всегда больше, чем скорость поступления железа из
слизистой оболочки кишки в плазму. Хотя обе величины зависят от потребностей железа в организме, проникновение железа в слизистую оболочку
кишки в меньшей степени зависит от содержания железа в организме, чем
проникновение железа из слизистой оболочки в плазму. При повышенной
потребности организма в железе скорость его поступления в плазму из слизистой оболочки приближается к скорости проникновения в слизистую обо24
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
лочку кишки. При этом железо в слизистой оболочке практически не откладывается. Время прохождения железа через слизистую оболочку составляет
несколько часов; в этот период она рефрактерна к дальнейшему всасыванию
железа. Через некоторое время железо вновь всасывается с такой же интенсивностью. При уменьшении потребности организма в железе уменьшается
скорость проникновения его в слизистую оболочку кишки, еще в большей
степени уменьшается дальнейшее поступление железа в плазму. При этом
большая часть железа, которое не всасывается, откладывается в виде ферр итина.
Захват железа слизистой оболочкой кишки - не простая физическая адсорбция. Этот процесс осуществляется щеточной каймой клетки. По данным
Parmley с соавторами (1978), применявших цитохимические методы исследования и электронную микроскопию, двухвалентное железо в мембране микроворсинок окисляется в трехвалентное, которое, по всей вероятности, связывается с каким-то носителем, однако природа этого носителя пока не ясна.
Всасывание железа, входящего в состав гема, резко отличается от всас ывания ионизированного железа. Молекула гема разлагается не в просвете
кишки, а в слизистой оболочке кишки, где имеется фермент гемоксигеназа,
присутствие которого необходимо для распада молекулы гема на билирубин,
окись углерода и ионизированное железо. Всасывание гема происходит значительно более интенсивно, чем всасывание неорганического пищевого железа. (Conrad et al., 1967; Raffin et al., 1974).
При нормальном содержании в организме железа значительная часть его
проходит через слизистую оболочку кишки в ток крови, определенная часть
задерживается в слизистой. При недостатке железа в слизистой задерживается значительно меньшая его часть, основная часть оказывается в плазме. При
избытке железа в организме основная часть железа, проникшего в слизистую
оболочку, в ней и задерживается. В дальнейшем эпителиальная клетка,
наполненная железом, продвигается от основания к концу ворсинки, затем
слущивается и теряется с калом вместе с не всосавшимся железом.
25
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Этот физиологический механизм всасывания включается в тех случаях,
когда в просвете кишки имеется обычная содержащаяся в нормальной пище
концентрация железа. Если же концентрация железа в кишке в десятки и сотни раз превышает физиологические концентрации, всасывание ионного
двухвалентного железа во много раз возрастает, что следует учитывать при
лечении больных солями двухвалентного железа.
Smith и Pannaeciuli (1958) установили четкую линейную зависимость
между логарифмом дозы железа и логарифмом количества всосавшегося железа. Механизм всасывания высоких концентраций солевого железа неизвестен. Трехвалентное железо практически не всасывается ни в физиологических концентрациях, ни, тем более, в избыточных.
Железо, входящее в состав белков, содержащих гем, всасывается значительно лучше, чем из ферритина и гемосидерина (Layrisse, 1975). На всасывание железа оказывает влияние ряд факторов. Некоторым из них многие годы придавалось большее внимание, чем они заслуживают, некоторым меньшее. Так, очень много работ посвящено изучению влияния желудочной секреции на всасывание железа.
Jacobs с соавт. (1964) показали, что соляная кислота оказывает несомненное влияние на всасывание железа, находящегося в трехвалентной форме.
Это относится как к солевому железу, так и к железу, входящему в состав
пищи. Так, Bezwoda с соавт. (1978) исследовали всасывание железа из хлеба,
выпеченного из муки, к которой прибавили перед приготовлением теста меченое трехвалентное железо. Было показано, что в кислой среде всасывание
трехвалентного железа, увеличивается, а при повышении рН желудочного
сока понижается. По данным С.И. Рябова и Е.С. Рысса (1976), всасывание
радиоактивного железа в двухвалентной форме не зависело от желудочной
секреции. Желудочная секреция не оказывает никакого влияния на всасывание железа, входящего в состав гема (Heinrich, 1975).
При хронических панкреатитах всасывание железа усиливается (Kahn,
1966; Davis, Biggs, 1967), что связано, вероятно, с наличием в панкреатиче26
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ском соке какого-то вещества, необходимого для ограничения всасывания
железа, однако до настоящего времени доказать наличие такого вещества не
удалось. Несомненное влияние на всасывание железа оказывает ряд веществ.
Так, оксалаты, фитаты, фосфаты входят в комплекс с железом и снижают его
всасывание. Аскорбиновая, янтарная, пировиноградная кислоты, фруктоза,
сорбит усиливают всасывание железа. Также влияет и алкоголь (Charlton et
al., 1964).
После всасывания железо связывается с трансферрином, который переносит железо к эритрокариоцитам костного мозга. Кроме того, трансферрин переносит железо от клеток, где хранятся запасы железа, к красным ядерным
клеткам костного мозга, а также от фагоцитирующих макрофагов, где эритроциты распадаются, к клеткам костного мозга и к местам, где сохраняются
запасы железа. Одна молекула трансферрина присоединяет два атома железа.
В настоящее время обсуждается вопрос о том, идентичны ли в функциональном отношении оба атома железа, фиксированные на поверхности трансферрина. Fletcher, Huehns в 1967 г. выдвинули гипотезу о гетерогенности
атомов железа, передающегося трансферрином. Они полагают, что вначале
железо связывается с одним из участков, который обозначается А. Эритрокариоциты костного мозга и плацента снимают железо с этого участка. Второй
участок – В, содержащий железо, участвует в передаче железа гепатоцитам и
слизистой оболочке кишки. В том случае, когда оба участка заполнены железом, в белке наступают конформационные изменения, способствующие передаче железа клеткам.
Однако в настоящее время не представлены существенные доказательства
правильности этой гипотезы. Не исключена возможность одинаковой значимости обоих атомов железа (Aisen, Brown, 1977). Знание этого вопроса имеет
значение для понимания кинетики железа в организме. На мембране эритрокариоцита и на мембране ретикулоцитов имеются специфические участки
для обратимого присоединения трансферрина. Связывание железа с транс-
27
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
феррином и его освобождение - это активные процессы, которые могут быть
подавлены ингибиторами ферментов.
После того как трансферрин «разгружает» железо на поверхности
эритрокариоцита, оно проникает внутрь клетки. Трансферрин в большинстве
случаев возвращается в плазму, но некоторые молекулы трансферрина при
этом проникают внутрь эритрокариоцита и связываются с молекулой носителя белком с молекулярной массой 20000. Bales, Workman (1974) описали белок сидерфилин, который связывает железо в клетке и передает его для синтеза гемоглобина и ферритина.
Железо, возможно в комплексе с трансферрином или сидерфилином,
проникает в митохондрии, где происходит синтез гема из протопорфирина и
железа. Образование ферритина происходит в эритрокариоците из апоферритина, синтезируемого в клетке, и железа, проникшего в клетку. Предполагалось, что ферритин используется в эритрокариоците как обязательный или
необязательный субстрат, участвующий в синтезе гемоглобина. Однако в
настоящее время установлено, что синтез гемоглобина не требует обязательного его включения ферритина, и нет пока убедительных данных о том, что
ферритин в эритрокариоците может быть использован для синтеза гемоглобина.
Как гемосидерин, так и ферритин используется в качестве белков запаса,
однако скорость использования гемосидерина значительно более медленная,
чем ферритина. Hershko (1974) изучал вопросы регуляции обмена железа,
которое находится в запасах. В норме основную часть железа, связанного с
трансферрином, организм использует для э ритропоэза. Фагоцитирующие
макрофаги, получившие железо при разрушении в них эритроцитов, в основном передают это железо трансферрину, который использует это железо
вновь для эритропоэза. Паренхиматозные клетки тоже содержат железо, но
это железо в основном в них откладывается, и лишь малая часть его передается трансферрину и используется для эритропоэза.
28
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В свою очередь паренхиматозные клетки получают железо от трансферрина. В опытах на крысах установлено (Cook et al., 1972; Hershko et al., 1973),
что в паренхиматозные клетки проникает железо из сыворотки, связанное с
трансферрином и входящее в состав ферритина сыворотки, а также содержащееся в гемоглобине (связанном с гаптоглобином сыворотки) или геме (связанном с гемопексином сыворотки). В то же время железо из эритроцитов,
подвергнутых нагреванию для ускорения их гибели или из комплекса ферритина с антителами к ферритину, а также из введенного животным коллоидного железа поступает в основном в фагоцитирующие макрофаги. Макрофаги получают главным образом железо от нежизнеспособных эритроцитов. В макрофагах определяется выраженная активность фермента гемоксигеназы, который разрушает гемоглобин с образованием билирубина, окиси
углерода и железа, способного присоединиться к трансферрину. В освобождении железа из макрофагов участвуют аскорбиновая кислота и фермент
ферроксидаза. (Bothwell et al„ 1964).
Освобождение железа из паренхиматозных клеток увеличивается при
кровотечениях и уменьшается при массивных гемотрансфузиях. При кровотечениях уменьшается захват эритроцитов макрофагами; следовательно,
освобождение железа макрофагами в такой ситуации имеет меньшее значение.
29
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
1.4 Влияние дефицита и избытка железа на организм животных
В общем виде дефицит железа развивается при нарушении баланса между
поступлением и потерями железа из организма. Его гомеостаз в организме
поддерживается главным образом за счет механизма абсорбции в желудочнокишечном тракте, так как выделение железа лимитировано. Многочисленными исследованиями показано (А.Г. Румянцев, Е.Ф. Морщакова, А.Д. Павлов, 2002) компенсаторное повышение абсорбции меченого железа при обеднении им организма, поэтому уместно говорить только о неадекватном потребностям организма усвоении железа в том случае.
Общее содержание железа в пище и его усвоение, зависящее преимущественно от соотношения продуктов животного и растительного происхождения, веществ, усиливающих или тормозящих абсорбцию, определяет его поступление в организм. Потребности в железе определяются его эндогенными
затратами в связи с беременностью, ростом, и расходованием железа с кр овопотерями различного происхождения, а также с отшелушивающимися
клетками кожи и десквамацией кишечного эпителия.
Определенную, но не основную роль, в происхождении обеднения организма железом могут играть нарушения пищеварения в связи с заболеваниями желудка и кишечника. Некоторые инфекционно-воспалительные заболевания могут привести к перераспределению железа в организме и тем самым
вызвать сидеропению. Однако истинного дефицита железа в этих случаях не
наблюдается. То же самое можно сказать и об опухолях различных организмов и систем. Самым распространенным заболеванием, возникающим при
дефиците железа, является гипохромная железодефицитная анемия (Т.В. Казюкова, Г.А. Самсыгина, 2000).
Анемия или малокровие – состояние, характеризующееся уменьшением
по сравнению с нормой количества гемоглобина и эритроцитов в единице
объема крови. Это может быть вследствие абсолютного уменьшения числа
30
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
эритроцитов или в силу их функциональной недостаточности, в результате
пониженного содержания в них гемоглобина. По существующей классификации выделяют восемь основных форм анемий, однако у молодых животных наибольшее распространение имеет анемия, связанная с недостатком у
них железа. Она характеризуется расстройством деятельности кроветворных
органов и нарушением обменных процессов, которое приводит к отставанию
молодняка в росте и снижению резистентности к заболеваниям. Болеют преимущественно поросята (Г.Г. Щербаков, А.В. Коробов, 2002).
Основной причиной болезни является недостаток в организме железа. Потребность молодняка в нем определяется двумя факторами – расходом железа на осуществление жизненных процессов и увеличением живой массы, а
таким образом, и объема крови (И.Ф. Горлов, В.И. Водянников, А.И. Сивко и
др., 2005). В связи с высокой интенсивностью роста поросят, потребность в
железе у них значительно больше, чем у молодняка других видов животных.
Так, уже на 6-8 день жизни после рождения вес поросенка удваивается, к
двум месяцам (отъем) увеличивается в 14-16 раз, а к 6-7 месяцам – в 50-60
раз (И.В. Петрухин, 1989).
У поросят есть две возможности удовлетворить потребности в железе – за
счет молока матери и за счет внутреннего (эндогенного) источника, связанного в основном (на 65%) с распадом эритроцитов. Молоко свиноматок, богатое пластическими веществами, очень бедно железом. В частности, в их
молозиве его в 2 раза меньше, чем в молозиве коров. Поэтому с молоком поросенок в сутки может получить только 1-1,5 мг железа, или всего лишь 1520% от необходимого (Т. Е. Костина, 1982; Н. Шульга, 2005).
Эндогенное железо, освобождающееся из гемоглобина при распаде эритроцитов, составляет в сутки около 1%. Из плазмы оно обычно поглощается
ретикуло-эндотелиальной системой и идет на синтез новых эритроцитов, расходуется в организме или депонируется. Однако особенностью молодых животных, в том числе и поросят, является то, что ретикулоэндотелиальная система у них функционирует слабо (Р.Я. Гильмутдинов, Р.З. Курбанов, 1999).
31
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Предрасполагающим к заболеванию анемией поросят фактором является
и тот, что при рождении у них запас железа составляет всего 50 мг, так как
поступление его плоду в период беременности свиноматок лимитируется
плацентарным барьером и составляет всего лишь 2% от полученного свиноматкой.
Такой незначительный его резерв быстро расходуется, так как только на 1
кг привеса требуется примерно 27 мг этого элемента. Поэтому уже к 7- 8 дню
жизни поросят у них наступает дефицит железа, а к 3-4-недельному возрасту,
анемия достигает кульминации.
Способствуют возникновению и тяжести болезни недостатки в организме
питательных веществ, витаминов и минеральных элементов. Не исключается
и то, что срок функционирования эритроцитов у свиней составляет 63 дня
против 120 дней у других животных (Э. Г. Шутов, 1994; М.Г. Николадзе,
2002).
Дефицит железа в организме приводит к уменьшению уровня гемоглобина
и снижению активности железосодержащих ферментов, тесно связанных с
синтезом белка и другими важными клеточными функциями. Кроме того,
железо гемоглобина выполняет важную роль в образовании комплекса «кислород-гемоглобин» и пролонгировании (увеличении продолжительности) его
существования, по времени достаточном для достижения этим комплексом
самых периферических частей организма, где он по ходу постепенно распадается и отдает тканям освобождающийся кислород. При недостатке железа
продолжительность существования такого комплекса в различной степени
сокращается, возникает состояние гипоксии. В этом случае компенсаторно
учащаются дыхание, работа сердца, развивается его гипертрофия (И.В. Петрухин, 1976; Ю.С. Шкункова, А.П. Пустовалов, 1988; ).
Кроме того, дефицит железа в организме приводит к уменьшению уровня
гемоглобина и снижению активности железосодержащих ферментов (В.И.
Георгиевский, 1979).
32
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Избыток железа в организме сопровождают чаще всего два заболевания –
гемохроматоз и гемосидероз.
Гемохроматоз (пигментный цирроз, бронзовый диабет) – это наследственное заболевание. У животных не регистрировалось. Причина заключается в
утрате кишечником способности регулировать поступление железа по мере
необходимости. В результате все доступное из пищи железо поступает в
кровь. Проявляется болезнь не только в окраске кожи, но и в массовом отложении железа в органах, особенно в печени. Известный генетик И. В. Давыдовский (1969) назвал эту болезнь "дегенеративным ржавением" (М. Г. Николадзе, 2002; В.М. Холод, А.П. Курдеко, 2005).
Гемохроматоз – болезнь тяжелая, но не безнадежная. Сейчас имеются
препараты, которые захватывают железо и переводят его в растворимое с остояние, тем самым способствуя выведению с мочой.
Гемосидероз довольно редкая болезнь, возникающая при массовом разрушении эритроцитов. Причиной гемосидероза могут стать частые переливания крови, отравление (в частности, грибами), укусы змей, некоторые инфекционные заболевания, например малярия. Заболевание характеризуется избыточным отложением гемосидерина в тканях организма. Такое явление возникает при нарушении обмена железосодержащих пигментов, при избыточном поступлении железа алиментарно (Л.И. Идельсон, 1985).
Гемосидерин может избыточно отложиться в различных органах и тканях,
что приводит к нарушению их функции. Например, избыточное отложение
гемосидерина в печени может привести к нарушению функции печени и появлению таких симптомов как желтуха и асцит. Кроме того, повышенное содержание железа в организме способно привести к активизации болезнетворных микробов и ослаблению иммунитета (В.Н. Гурин, 2002).
33
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
1.5 Характеристика неорганических наноматериалов, их особенности
и токсическое влияние
Наиболее полно описаны биологические свойства нанопорошков железа в монографии Коваленко и Фолманиса. Ими были проведены широкомасштабные исследования воздействия наночастиц железа на мышей, крыс,
крупнорогатый скот, птиц, рыб, некоторые растительные объекты. Так,
острое пероральное введение мышам суспензии наночастиц железа в дозе 50,
100 и 500 мкг/кг не вызывало каких-либо токсических эффектов. Только
дробное введение доз 1000, 2000 и 5000 мкг/кг приводило к развитию воспалительного процесса на слизистой желудка и кишечника, а также сдвигов в
гемопоэзе. Хроническое воздействие наночастицами железа в дозах 20 и 40
мкг/кг в течение 90 дней не приводило к значимым отклонениям от биохимических и гематологических показателей контрольной группы. Кроме того,
было показано, что дозы 2 - 6 мкг/кг стимулируют рост животных, бактерицидную активность сыворотки крови и увеличение общего белка в крови.
Предпосевная обработка семян нанопорошками железа в концентрации
0,001 % положительно влияло на энергию прорастания, однако увеличение
концентрации до 0,01 % приводило к подавлению прорастания. Была рассчитана оптимальная доза предпосевной обработки (2 - 6 мг на 1 га), дающей от
5 до 30 % повышения урожайности и улучшения товарного вида растительной продукции (Л. Коваленко, Г. Фолманис, 2006).
Низкая токсичность суспензии оксида железа γ-Fe2O3 в комплексе с
гуминовыми кислотами была показана на клеточной культуре фибробластов
человека.
Слабая токсичность, биосовместимость и магнитные свойства железа
позволили создать маркер на основе Fe2O3, стабилизированного декстраном и
цитратом натрия для онкодиагностики (торговое название Синерем). Исследования острой токсичности на крысах и собаках показало, что Синерем проявляет остротоксические свойства в дозах превышающих 400мг/кг. Изучение
34
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
хронической токсичности выявило увеличение активности АЛТ и АСТ в
крови, ассоциированных с цитоморфологическими изменениями в печени.
Синерем не обладал генотоксичностью. Тем не менее были обнаружены некоторые тератогенные эффекты и эмбриотоксичность (Report EMEA. CHMP
London. 11527., 2008).
Ингаляционное воздействие наночастиц оксида железа размерами 22 и
280 нм на крыс линии Sprague Dawley в дозах 0,8 и 20 мг/кг вызывало индукцию активных форм кислорода в клетках, гиперемию, гиперплазию и фиброз
тканей легких. Также было выявлено нарушение системы свертывания крови.
Иная картина, в сравнении с наночастицами железа, представляется с
другими металлами и их оксидами. Исследования токсичности наночастиц
кадмия, хрома, меди, никеля и цинка на водной культуре дафний (Daphnia
magna) показали, что медь и цинк проявляют схожую токсичность, с усилением при низких значениях рН. Добавление ЭДТА в среду снижало токсическое воздействие обоих металлов, тогда как тиосульфат натрия лишь меди.
Зависимость проявления токсических свойств для других металлов также зависело от значений рН среды (Van Sprang P.A., Janssen C.R.,2001).
Сравнительное изучение токсичности наночастиц меди (23,5 нм), микрочастиц меди (17 микрон) и ионов (CuCl2) на мышах при пероральном введении позволило рассчитать параметры острой токсичности (ЛД50): 413,
5000 и 110 мг/кг (Ч. Пул, Ф. Оуэнс, 2006). Органами - мишенями токсического воздействия оказались печень, селезенка, почки. При этом масса тела животных не изменялась.
Фитотоксические исследования свойств наночастиц цинка и его оксида
на кукурузе (Zeamays L.), редисе (Raphanus sativus), рапсе (Brassica napus
napus), огурце (Cucumis sativus) показали, что их концентрация 2000 мг/л отрицательно действует на прорастание семян кукурузы и подавляет удлинение
корней. Была рассчитана пятидесяти процентная ингибиторная концентрация
(IC50) для редьки, которая составила 50 мг/л, рапса – 20 мг/л (Ч. Пул, Ф.
Оуэнс, 2006). Воздействие различных концентраций суспензий микрочастиц,
35
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
наночастиц и ионов цинка на водные культуры дафний (Daphnia magna) и
бактерий (Vibrio fischeri) выявило летальные концентрации (ЛК50) – 8,8, 3,2
и 6,1 мг/л для дафний и 1,8, 1,9 и 1,1 мг/л для бактерий, соответственно.
Различия в токсичности наночастиц и микрочастиц цинка также были
показаны на взрослых мышах. Причем микрочастицы цинка оказались токсичнее, чем наночастицы. В обоих случаях наблюдалось поражение почечной
функции, также нано-цинк вызывал анемию и нарушение системы свертывания крови (B. Wang, 2006).
Наиболее широко используемым, как в чистом виде, так и в составе
наноматериалов является оксид титана. Токсикологические исследования
тонких (250 нм) и ультратонких (20 нм) TiO 2 при ингаляционном введении
крысам показали, что частицы размером 20 нм способны накапливаться в
лимфоидных тканях, обладают повреждающим действием по отношению к
ДНК лимфоцитов и клеток мозга. Эффект развивается за счет индицирования
реактивных форм кислорода, окислительного стресса и накопление малонового диальдегида (Ч. Пул, Ф. Оуэнс, 2006). Основным механизмом токсического действия наночастиц оксида титана оказалась индукция активных форм
кислорода, причем реактивность зависит не только от размеров наночастиц,
но от того какой структурой представлен TiO2, кристаллической или аморфной.
Сильными токсическими свойствами обладают наночастицы алюминия, которые способны подавлять синтез м-РНК. вызывать пролиферацию
клеток, индуцировать проатерогенное воспаление, нарушение функций митохондрий и т.д. (А.В. Глушкова, А.С. Радилов, В.Р. Рембовский, 2007).
Наночастицы оксида ванадия размером менее 30 нм в концентрации
выше 10 мкг/мл обладают сильными каталитическими свойствами и способны генерировать ОН- - радикалы, который в дальнейшем окисляет липиды.
Из представленных данных видно, что токсические свойства наночастиц металлов сильно зависят от их размеров и структурной организации. В
тоже время одним из основных механизмов токсического действия является
36
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
окислительный стресс, который обуславливается активными формами кислорода, генерируемыми наночастицами.
1.6 Особенности железа в ультрадисперсном состоянии
Современная тенденция к миниатюризации показала, что вещество может
иметь совершенно новые свойства, если взять очень маленькую частицу этого вещества. Частицы, размерами от 1 до 100 нанометров обычно называют
«наночастицами». Так, например, оказалось, что наночастицы некоторых материалов имеют очень хорошие каталитические и адсорбционные свойства.
Другие материалы показывают удивительные оптические свойства, например, сверхтонкие пленки органических материалов применяют для производства солнечных батарей. Такие батареи более дешевы и могут быть механически гибкими. Удается добиться взаимодействия искусственных наночастиц
с природными объектами наноразмеров - белками, нуклеиновыми кислотами
и др. Тщательно очищенные, наночастицы могут самовыстраиваться в определенные структуры. Такая структура содержит строго упорядоченные наночастицы и также зачастую проявляет необычные свойства (М. Ратнер, Д. Ратнер, 2006).
В настоящее время все больше внимания уделяется ультрадисперсным
порошкам металлов. Все чаще они находят свое применение в медицине и
сельском хозяйстве. В данной работе рассматривается ультрадисперсный порошок железа.
Наночастицы металлов покрыты оксидной оболочкой толщиной от 2 до
10 нм, а их стабильность по отношению к окислению определяется устойчивостью двойного электрического слоя, обладающего псевдоемкостью. Основным окисляющим агентом в этом случае являются протоны, образующиеся при диссоциации молекул воды на поверхности наночастиц. Электрохимические потенциалы наночастиц отличаются от стандартных величин и
смещены, таким образом нанопорошок железа может проявлять восстанови37
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
тельные свойства (А. П. Ильин, А. В. Коршунов, Л. О. Толбанова, А.П. Астахова, 2008).
По данным Г. Э. Фолманиса и Л. В. Коваленко (1998), нанопорошок железа представляет собой совокупность частиц металлического незаряженного
железа размером от 7,6 до 20,5 нм.
Ультрадисперсный порошок железа был получен с помощью метода низкотемпературного водородного восстановления
Для того чтобы перевести наночастицы порошка железа в активное с остояние, и придать им биологически активные свойства, необходимо воздействовать на них ультразвуком в водной среде (Г.В. Павлов, Г.Э. Фолманис,
1999). Ультразвуковое воздействие на порошок и водную среду приводит к
созданию неупорядоченной системе, в которой обнаруживается присутствие
множества свободных активных реагентов, вступающих непосредственно в
прямые реакции, протекающие в клетке, или служащих катализаторами некоторых из них (Г.В. Павлов и др., 1999).
1.7 Биологическое применение ультрадисперсного порошка железа
Биологическая активность ультрадисперсных порошков обусловлена малыми размерами частиц и возможностью проникновения их в организм благодаря легкости образования взвесей через органы дыхания, пищеварения и
через кожу. Нанопорошки металлов находятся в метастабильном состоянии и
поэтому имеют повышенную химическую и биологическую активность. Они
активно взаимодействуют с биологическими жидкостями и дают соответствующие продукты в зависимости от рН среды и компонентного состава
(Г.Э. Фолманис, Л.В. Коваленко, 1999; Г.Э. Фолманис, В.С. Иванова, 2002;
Т.А. Лобаева, 2002; А. В. Коршунов, А.П. Ильин, 2007).
Действие нанопорошков проявляется, прежде всего, в присутствии наночастиц как инородных тел на клеточном и макромолекулярном уровне, а
также в токсическом действии продуктов взаимодействия наночастиц с био38
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
логическими жидкостями (А. П. Ильин, А. В. Коршунов, Л. О. Толбанова, А.
П. Астакова, 2008). Основные особенности влияния наночастиц на организм
заключаются в следующем. Во-первых, существуют области ростостимулирующего и токсического действия наночастиц железа. Во-вторых, токсичность наночастиц в 7-50 раз меньше токсичности соответствующих сернокислых солей. В-третьих, наночастицы, введенные в организм в дозах 4,5- 49
раз меньше порогов токсического действия (МПД – максимально переносимая доза), проявляют свойства биотиков, то есть стимулируют рост животных. В-четвертых, наночастицы, введенные в организм оказывают пролонгированное действие. И, в-пятых, формирование качественно иных ответов на
введение наночастиц металлов в отличие от других химических форм связано
со способностью частиц оказывать воздействие на клеточном уровне, уровне
биосистем (в первую очередь, систему регуляции микроэлементов) и на молекулярном уровне (Н.Н. Глущенко, И.П. Богословская, И.П. Ольховская,
2002). Установленные закономерности действия нанокристаллических металлов на организм определили предпосылки для разработок нового поколения лекарственных средств, в частности, стимулирующих регенерационные
процессы кожи.
Учеными (Н.Н. Глущенко, Т.А. Байтукалов, О.А. Богословская, И.П. Ольховская, 2000) установлено, что наночастицы железа в вазелиновом масле
влияют на кинетику изменения площади ран, наиболее эффективно уменьшая площадь ран в течение первых 4-5 суток после операции по сравнению с
не леченой группой животных и животных, леченных вазелиновым маслом.
Через 5 суток после проведения операции площадь ран не леченых животных
составляла 85 %, леченых вазелиновым маслом – 82 %, леченых наночастицами железа в концентрациях 0,11 % и 1,1 % - 64 % и 43 % соответственно.
По кинетике изменения площади ран наиболее эффективно действуют наночастицы железа в концентрации 1,1 % в вазелиновом масле. Этот вывод подтверждает расчет значений времени полузаживления ран.
39
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Токсические свойства ультрадисперсного порошка железа изучены в опытах на белых мышах (А. П. Ильин, А.В. Коршунов, 2001). Исследователи
установили, что нанопорошок железа относится к группе малотоксичных веществ. Согласно приведенным результатам нанопорошок железа за период
эксперимента не привел к летальному исходу ни одного животного, в отличие от порошков меди и серебра, летальные дозы которых были установлены. Еще одним аспектом применения ультрадисперсного порошка железа в
медицине стал опыт Л. В. Коваленко и Г. Э. Фолманис (2006) на морских
свинках. Использование нанопорошка железа в форме суспензии, вводимой в
корм и в форме инъекций морским свинкам показало, что он способс твует
активации лимфоидных образований иммунокомпетентных органов в различные сутки исследований, нормализует гемопоэз в красном костном мозге,
оказывает определенное влияние на Т- и В-систему клеточного иммунитета,
на выработку интерферона и фактора некроза опухоли (Н.Н. Глущенко, И.П.
Богословская, И.П. Ольховская, 2002). В сельском хозяйстве ультрадисперсный порошок железа находит свое применение как стимулятор роста или
биологическая добавка в рацион кормления животных и птиц.
К примеру, опыты по введению в рацион цыплят-бройлеров 15-ти дневного возраста доказали, что к 60-ти дневному возрасту происходит повышение
живой массы в опытных группах по сравнению с контролем. Гематологические показатели у птиц оставались в пределах физиологической нормы.
Оценка органолептических и физико-химических показателей мяса значительных изменений не выявила. В опытах на птицах использовали дозировку
нанопорошка равную 4 мкг/кг корма (С. Кузнецов, А. Кузнецов, 2003).
Среди высокоэффективных препаратов, содержащих ультрадисперсное
железо можно выделить К-Ульдиферрит (Н.А. Морш, Т.С. Королевская, Л.В.
Коваленко, Г.Э. Фолманис, 1999; Л.В. Коваленко, Г.Э. Фолманис, 2000).
Данный препарат применяют с целью повышения общей неспецифической
резистентности у сельскохозяйственных животных и птицы. Препарат хорошо всасывается, стимулирует деятельность лимфоидных органов, синтез
40
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
белка, способствует повышению естественной резистентности (М. Горшков,
В. Мусатова, Л. Коваленко и др., 2000). Препарат К-Ульдиферрит относится
к новому классу фармакологических веществ, основу которого составляет
порошок железа в ультрадисперсном состоянии. При определенных условиях
помещения его в водную среду и обработку ультразвуком получают суспензию, в состав которой входят электроны, атомы Fe, ионы, одно -, двух- и
трехвалентные формы железа, а также незначительное количество анионных
комплексов (Г. Павлов, 2001). Исходя из этого, большой научный интерес
представляет использование нового класса препаратов при анемии животных
(G.V. Pavlov, G.E. Folmanis, 1999).
В трудах Л.Е. Амплеевой (2006) отражена возможность применения ультрадисперсного порошка железа в качестве биологически активного вещества. Изучалось влияние травы, используемой в рационах кроликов, семена
которой были обработаны нанопорошком железа. Было установлено, что вика, обработанная перед посевом ультрадисперсным порошком железа, также
имеет выраженные биологически активные свойства. Так количество эритроцитов, в крови кроликов, увеличилось в опытной группе по сравнению с контролем на 16-26%, гемоглобина – на 11-13%.
Изучалось также влияние ультрадисперсного порошка железа на физиологическое состояние молодняка крупного рогатого скота (А.А. Назарова,
2009). Эксперимент показал, что введение в рацион молодняка крупного р огатого скота ультрадисперсного порошка в количестве 0,08 мг/кг живого веса
позволяет увеличить привесы на 19%. Физиологические показатели на протяжении всего эксперимента находились в норме. Введение нанопорошков не
оказало резкого влияния на морфо - биохимические показатели крови, что
говорит о безопасности применения нанопорошка железа для организма животных.
Анализ литературных данных обосновал возможность применения ультрадисперсного порошка железа в качестве биологически активной добавки в
рацион животным. Биологическая активность нанопорошка железа рассмот41
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
рена и доказана на лабораторных и сельскохозяйственных животных. В доступной нам литературе мы не встретили данных о влиянии УДП железа на
физиологическое состояние свиноматок и поросят в подсосный период, что и
послужило основанием для выбора темы наших исследований.
42
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ГЛАВА 2. ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ НА
ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ
ОПТИМАЛЬНОЙ КРАТНОСТИ ВВЕДЕНИЯ НАНОРАЗМЕРНОГО
ПОРОШКА ЖЕЛЕЗА
Наноразмерный (ультрадисперсный порошок железа УДПFe) порошок
железа - мелкодисперсный однородный порошок черного цвета без посторонних включений, представляющий собой совокупность частиц металлического незаряженного железа размером от 7,6 до 20,5 нм (Г.Э. Фолманис и
Л.В. Коваленко, 1998).
Получают низкотемпературным водородным восстановлением железосодержащего сырья.
Способ введение УДП железа в организм животного – энтерально, в
смеси с основным рационом.
Для создания биологически активной ультрадисперсной системы
(суспензии) данного металла его подвергают ультразвуковой обработке в
водной среде в течение 15 минут. При введении в рацион животных проводят
опрыскивание сухого корма суспензией металла из расчета 0,08мг действующего вещества на 1 килограмм живой массы животного.
Рисунок 2.1 – Приготовление суспензии УДП железа в ультразвуковой
ванне
43
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
При проведении опытов на животных использовался ультрадисперсный порошок железа, полученный в институте стали и сплавов и институте
металлургии и материаловедения имени А.А. Байкова РАН. Средний размер
частиц металла составил 10-20 нм, поэтому целесообразным является использование в тексте работы определений: нанопорошок, ультрадисперсный
порошок, нанокристаллический металл.
Ориентируясь на ранее отработанную безопасную дозировку (А.А. Назарова, 2009) для определения оптимальной кратности введения в рацион исследуемого материала были сформированы 4 группы животных, в каждую из
которых входило по 5 кроликов. Опыт продолжался 30 дней. Схема опыта
приведена в таблице 2.1
Рацион, используемый для кормления кроликов контрольной и опытных
групп, представлен в таблице 2.2
Таблица 2.1 - Схема опыта по определению кратности введения УДП железа
Группы
Количество
животных в
группе, голов
Рацион
Контроль
5
Основной рацион (ОР)
1 опытная
2 опытная
5
5
ОР+УДП железа 0,08 мг/кг ежедневно
ОР+УДП железа 0,08 мг/кг 1 раз в 7 дней
3 опытная
5
ОР+УДП железа 0,08 мг/кг 7 дней в месяц
ежедневно.
44
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 2.2 - Рацион кормления кроликов при комбинированном типе
кормления (в расчете на одну голову в возрасте 30-60 дней)
Показатели
1
Зерновые (ячмень, пшеница), г
Отруби пшеничные, г
Жмых подсолнечный, г
Сено (злаково-бобовое), г
Дрожжи кормовые, г
Корнеплоды, г
Зеленый корм (кукуруза), г
Соль поваренная, г
Трикальцийфосфат, г
В рационе содержится:
Кормовых единиц, г
Обменной энергии, МДж
Сухого вещества, г
Сырого протеина, г
Переваримого протеина, г
Сырой клетчатки, г
Кальция, г
Фосфора, г
Железа, мг
Меди, мг
Цинка, мг
Марганца, мг
Каротина, мг
Период года
зимний
2
25
20
30
50
5
150
0,5
1,5
126
1,3
130
28
21
21
1,14
0,8
20
1,2
5,6
7,1
7,4
Опыт был проведен в период с 28 декабря 2008 года по 27 января 2009
года и включал в себя лабораторные исследования на кроликах в условиях
вивария РГAТУ им. П.А. Костычева, за время проведения которых были
определены:
1. Оптимальная кратность введения УДП железа в рацион животных.
2. Действие нанокристаллического порошка железа, на физиологическое состояние, прирост живой массы и морфобиохимические
показатели крови животных.
45
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Объектами исследования служили кролики породы «Советская шиншилла»
в количестве 20 голов (по 5 голов в группе) в возрасте 30 дней. Формирование
групп
животных проводилось по принципу сбалансированных групп-
аналогов с учетом пола, возраста, живой массы, породы, которые находились
в одинаковых условиях содержания и рациона кормления.
Морфологические, иммунологические и биохимические показатели
крови определялись в лаборатории НИИ Детской гематологии (г. Рязань) и в
биохимической лаборатории Рязанского Государственного Агротехнологического Университета им. П.А. Костычева.
На протяжении всего эксперимента осуществляли наблюдения за общим
состоянием, аппетитом и активностью животных. Возраст животных на
момент начала опыта составлял 30 дней. Животные содержались в стандартных условиях вивария, в клетках при свободном доступе к воде. Введение в рацион кроликов нанопорошка железа осуществлялось путем обработки сухой части рациона суспензией препарата (А.А. Назарова, 2009).
В данной серии опытов определяли оптимальную кратность дачи препарата нанокристаллического железа, оказывающую положительное влияние на физиологическое состояние животных и прирост живой массы.
Таблица 2.3 – Влияние УДП железа на живую массу кроликов, г (n=5)
Живая масса (ЖМ) кроликов, г
Среднесуточн
ый
прирост ЖМ
Группа
До
опыта
Прирост
ЖМ
10 дней 20 дней 30 дней за 30 дней
Контроль
848,4±
2,66
1010,6±
1,63
1143±
2,12
1262,2±
1,28
413,4±
3,12
13,78 ± 0,97
1 опытная
845,4±
5,71
1098,4±
2,66**
1205±
3,54**
1340±
6,12**
494,6±
9,35**
16,5 ± 0,53*
2 опытная
850,4±
1,63
1038±
2,17**
1160±
2,77**
1286,2±
1,16**
435,8±
0,58**
14,52 ± 0,19
3 опытная
845,8±
5,35
1099±
1,76**
1197±
3,08**
1296,4±
4,37**
450,8±
1,33**
15,03 ± 0,54
46
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Исследования были проведены на кроликах породы «Советская шиншилла» в условиях вивария РГAТУ им П.А.Костычева. Для определения
оптимальной кратности введения УДПFe были сформированы 4 группы, в
каждую из которых входило по 5 кроликов. Опыт продолжался 30 дней.
Каждые 10 дней опыта проводилось контрольное взвешивание.
Влияние УДПFe на прирост живой массы животных в контрольной и
опытных группах отражено в таблице 2.3
Животные всех 4-х групп планомерно набирали живую массу, были достаточно активны, обладали хорошим аппетитом. Положительные результаты введения ультрадисперсного железа стали заметны через 10 дней после
начала введения.
Как видно из приведенной выше таблицы, введение нанокристаллического железа в рацион кроликов, в различной кратности, оказывало положительное влияние на прирост живой массы животных в течение всего периода эксперимента. Особенно ярко эффект стимуляции прироста живой
массы был выражен в 1-ой и 3-ей опытных группах. Показатели прироста
живой массы за период эксперимента в данных группах по сравнению с контролем составили 19,6 и 9,5% соответственно.
Оптимальной кратностью введения нанопорошка железа можно считать
ежедневное его введение, так как данный режим способствовал повышению
живой массы за 30 дней учетного периода до 19,6% в сравнении с контрольной группой через 30 дней после начала введения препарата. Остальные
отрабатываемые кратности введения дали меньший эффект: во второй опытной группе прирост живой массы увеличился на 5,4%, а в третьей на 9,5%,
чем аналогичный показатель у животных контрольной группы.
В ходе эксперимента был подтвержден эффект, выявленный ранее при
проведении опытов по отработке дозировок нанокристаллических металлов
(А.А. Назарова, 2009): при прекращении введения УДПFe в организм кроликов тенденция к увеличению живой массы сохранилась и наблюдалась даже
спустя 10 дней.
47
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Морфологические и биохимические показат ели крови
Параллельно с изучением влияния УДП железа на физиологическое
состояние и прирост живой массы изучалось действие препарата на мо рфологические и биохимические показатели крови лабораторных животных. Отбор крови с целью исследования гематологических показателей
проводился каждые десять дней до утреннего кормления. До начала опыта
были отобраны и происследованны фоновые пробы крови, с целью о пределения физиологического состояния животных.
Морфологические и биохимические показатели фоновых проб крови у
животных во всех группах были в пределах физиологической нормы (Б.И.
Антонов, 1991; Р.Я. Гильмутдинов, Р.З. Курбанов, 1999; А.А. Кудрявцев,
1974). Данные по морфологическим показателям крови лабораторных животных представлены в таблице 2.4
Таблица 2.4 – Морфологические показатели крови кроликов (n=5)
Показатель
Группа
До опыта
10 дней
20 дней
30 дней
Контроль
4,9±0,63
5,0±0,47
4,9±0,17
4,9±0,14
Эритроциты, 1 опытная
*1012 /л
2 опытная
3 опытная
4,7±0,60
5,1±0,14
5,6±0,10**
5,6±0,10**
4,8±0,10
4,9±0,70
5,0±0,17
5,2±0,13
5,1±0,53
5,4±0,63
5,2±0,47
5,4±0,83
Контроль
111±2,20
112±2,00
110±1,60
113±2,42
Гемоглобин, 1 опытная
г/л
2 опытная
3 опытная
110±0,55
112±2,20
111±0,66
114±1,10
114±1,10
115±1,14
118±0,96**
115±1,14
116±0,83**
Контроль
6,7±0,47
6,6±0,50
6,8±0,23
119±0,73*
114±0,51
117±0,75
6,7±0,13
Лейкоциты, 1 опытная
*109 /л
2 опытная
6,8±0,74
7,1±0,56
7,4±0,32
7,8±0,47*
6,5±0,47
6.9±1,10
6,8±0,97
7,1±0,83
3 опытная
6,9±0,10
7,2±0,24
7,3±0,12*
7,2±0,60
Контроль
168±2,43
170±2,08
166±1,55
172±2,20
Тромбоциты, 1 опытная 170±2,17
172±1,03
171±0,87
тыс.
2 опытная 171±2,12
173±2,03
170±2,12
3 опытная 167±1,5
169±1,22
168±0,83
Примечание: достоверно при -*Р < 0,05,**Р < 0,01;
174±0,58
172±2,08
170±1,03
48
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В ходе проведения анализа полученных результатов выяснилось, что за
период 30 дней опыта у кроликов, получавших в качестве биологически активной добавки нанокристаллическое железо, наблюдалась тенденция к увеличению содержания эритроцитов и гемоглобина.
Нанопорошок железа через 30 дней опыта повлиял на повышение содержание эритроцитов в первой опытной группе на 14,3% и гемоглобина - на
5,3% по сравнению с контролем. Повышение аналогичных показателей во
второй опытной группе было незначительным и составило 6,1 и 0,9% соо тветственно. Результаты третьей опытной группы были сравнимы с данными
опытной группы 1 и составили: в сравнении с контролем по количеству эритроцитов результат был выше на 10,2%, по содержанию гемоглобина 3,5%,
что положительно сказалось на физиологическом состоянии животных. Также увеличилось содержание лейкоцитов к концу опыта: в первой опытной
группе на 16,4%, во второй на 5,9% и в третьей на 7,5% по сравнению с аналогичным показателем контрольной группы животных. Такой морфологич еский показатель как содержание тромбоцитов в цельной крови во всех опытных группах за время эксперимента изменялся незначительно.
При оценке данных таблицы 2.5 видно, содержание сывороточного железа в опытной группе 1 на 22,2% выше аналогичного показателя в группе контроля на конец проведения опыта. Также повышение значения данного показателя отмечалось в опытной группе 3 и составляло 5,6% в сравнении с ко нтрольной группой. Рост показателя в опытной группе 2 был незначительным
и составил 0,9%.
Такие показатели, как содержание кальция и фосфора в сыворотке крови
на протяжении всего периода опыта были стабильными и находились в пр еделах физиологической нормы. Содержание кальция в опытной группе 1 достоверно снизилось к 30-тому дню исследования на 3,4% по сравнению с
контрольной группой, что вероятно связано с антагонистическим действием
железа на усвоение данного минерального элемента.
49
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
При проведении анализа тенденция к увеличению содержания сахара в
сыворотке крови опытных животных наблюдалась во всех опытных группах,
и рост на тридцатый день опыта составил по сравнению с контролем в опытной группе 1 - 9,6%, во второй 1,4% и в третьей 5,6%.
Содержание общего белка в крови опытных кроликов за период проведения исследования оставалось на уровне фоновой пробы и находилось в пр еделах физиологической нормы.
Таблица 2.5 – Биохимические показатели крови кроликов (n=5)
Показатель
Группа
До опыта
10 дней
20 дней
30 дней
Контроль
105±1,20
107±1,12
106±0,70
108±0,70
Сывороточное 1 опытная
железо, мкг% 2 опытная
3 опытная
110±1,69
108±0,58
106±0,68
Контроль
Кальций
(сыв.), мг% 1 опытная
2 опытная
9,2±0,11
9,4±0,47
9,0±0,10
9,0±0,17
9,2±0,35
8,8±0,14
9,3±0,17
9,0±0,22
8,9±0,47
9,1±0,13
8,8±0,17
9,2±0,13
3 опытная
9,3±0,48
8,9±1,02
9,0±0,14
9,2±0,15
Контроль
8,1±0,07
8,3±0,50
8,0±0,12
7,9±0,12
1 опытная
Фосфор
(сыв.), мг% 2 опытная
8,0±0,60
8,2±0,90
8,3±0,07*
8,1±0,14
8,2±0,35
8,4±1,17
8,5±0,33
8,1±0,07
3 опытная
8,0±0,63
8,2±0,17
8,1±0,07
8,2±0,49
Контроль
7,1±0,18
7,1±1,03
7,0±0,19
7,2±0,17
Сахар (общ.), 1 опытная
мг%
2 опытная
7,3±0,16
7,6±0,24
7,9±0,30*
8,0±0,17**
7,0±0,18
7,1±0,22
7,2±0,17
7,3±0,10
3 опытная
7,3±0,12
7,3±0,53
7,5±0,07*
7,6±0,10*
Контроль
94±1,82
93±0,97
96±1,12
95±1,90
Общий белок, 1 опытная
г%
2 опытная
92±1,52
92±1,30
93±1,05
94±0,99
91±0,99
92±1,03
92±0,70*
93±1,20
93±0,67
92±0,95
118±1,17** 124±1,14** 132±1,51**
112±0,44** 108±0,35*
109±0,55
115±1,13** 116±1,00** 114±1,14**
3 опытная 93±1,87
92±0,55
Примечание: достоверно при -*Р < 0,05,**Р < 0,01;
50
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ГЛАВА 3. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ НАНОРАЗМЕРНОГО ПОРОШКА
ЖЕЛЕЗА В ПРОЦЕССЕ ВОСПРОИЗВОДСТВА СВИНЕЙ
3.1 Материал и методы исследований
Проведение первой части эксперимента осуществлялось в условиях свинокомплекса ООО «Рязанский бекон» Пронского района Рязанской области в
период с 21 апреля по 4 июля 2009 года.
Объектами исследования являлись свиноматки 2-го опороса помесные
(крупная белая × дюрок), в количестве 15 голов.
Каждое животное находилось в индивидуальной клетке в помещении
свинарника-маточника, рассчитанном на 100 голов свиноматок. Освещение в
помещение смешанное, достаточное, вентиляция приточно-вытяжного типа.
Полы в клетке бетонные, с небольшим уклоном по направлению к навозному
желобу. В качестве подстилки используются опилки лиственных пород деревьев.
В каждой клетке оборудовано отделение для отдыха поросят-молочников
с деревянным настилом и дополнительным обогревом при помощи инфр акрасных ламп типа ИКЗ-40.
Кормление осуществляется вручную, 2 раза в день, тип кормления концентратный. Рацион кормления был сбалансирован по питательным веществам и полностью удовлетворял основным потребностям свиноматок (табл.
3.1). Анализ рациона кормления был проведен в соответствие с нормами по
питательности и энергетической ценности (А.П. Калашников, 2003). Поение
вволю, из автоматических сосковых поилок. Уборка навоза проводится вручную и с помощью навозоуборочного транспортера скрейперного типа.
Продолжительность первой серии опытов составила 75 дней. В первые 30
дней опыта (последняя треть супоросности) определяли влияние УДП железа
на физиологическое состояние свиноматок. Были проведены наблюдения за
опоросом свиноматок, взвешивание поросят при рождении. Далее в после-
51
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
дующие 45 дней (период лактации) исследовались показатели воспроизводительной функции, продуктивности и химический состав молока.
Таблица 3.1 – Рацион кормления свиноматок в последние 30 дней супоросности и период лактации, гол/сутки
Технологический период
Показатели
30 дней до опороса
0,6
1,2
0,45
0,75
1
110
47
Пшеница, кг
Ячмень, кг
Горох, кг
Овес, кг
Сыворотка молочная, л
Фелуцен С 1-4, г
Фелуцен №574, г
Дикальцийфосфат, г
лактация
1,2
2,4
0,9
1,5
1
200
93
Согласно схеме (табл. 3.2) отобранные животные были сформированы в 2
группы – контрольная и опытная. Формирование групп проводили по методу
сбалансированных пар-аналогов. Помимо возраста, живой массы и продуктивности, учитывалось происхождение животных, согласно данным журнала
случек-опоросов за 2006-2007 гг. Для опыта были отобраны животные, не
имевшие осложнений после опоросов.
Таблица 3.2 – Схема кормления свиноматок в период опыта
Группы
Количество животных,
голов
Рацион
Контрольная
5
Основной рацион
Опытная
10
ОР+УДП железа 0,08 мг/кг
Контрольная группа получала основной хозяйственный рацион. В рацион
опытной группы свиноматок в период последней трети супоросности вводили УДП железа в количестве 0,08 мг на 1 кг живой массы (ЖМ).
52
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В указанный период отмечали общее физиологическое состояние свиноматок, проводили морфологические, биохимические исследования крови,
изучали химический состав молока. Также были определены показатели воспроизводительной функции и продуктивности, такие как динамика живой
массы свиноматок, их многоплодие, крупноплодность, молочность, а также
сохранность поросят.
Для определения влияния УДП железа на физиологическое состояние,
обмен веществ и иммунобиологический статус поросят-молочников, в период с 20 мая по 4 июля 2009 года, был проведен научно-хозяйственный опыт,
в котором было задействовано 3 группы поросят-молочников – одна контрольная и две опытные.
В контрольную группу входили поросята, полученные от свиноматок
контрольной группы, опыт 1 и опыт 2, соответственно – потомство опытной
группы свиноматок.
Все поросята, включенные в эксперимент, были пронумерованы. Для этого, с помощью антисептического аэрозоля – «Чеми-спрей» и трафарета на
область спины им наносился порядковый номер.
Поросята содержались совместно со свиноматками в специально оборудованных клетках. В отделении для приплода оборудована металлическая
кормушка для подкормки. Поение поросят осуществлялось при помощи автопоилок. Гигиеническая обработка боксов для поросят проводилась 2 раза в
день. При этом осуществлялась замена подстилки, в качестве которой использовались опилки из лиственных пород деревьев, очистка кормушек,
уборка навоза.
Важно отметить, что выращивание молодняка свиней требует тщательного соблюдения зоогигиенических параметров в помещении. Для этого ос уществляют контроль температурно-влажностных показателей, а также периодически проводят исследование проб воздуха на количество аммиака и с ероводорода (Ф.Г. Торпаков, 1969; Д. Устинов, 1976; А.И. Нетеса, 1986; Ю.
53
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Симарев, 1999; А.Н. Негреева, А.И. Завражнов, В.С. Сушков, 2000; А. Старков, К. Девин, Н. Пономарев, 2004).
Поросята с момента рождения и до 5-ти дневного возраста получали исключительно молоко свиноматок, затем в их рацион постепенно начали вводить подкормку согласно схеме отраженной в таблице 3.3
При формировании групп учитывали также происхождение животных.
Отбирали наиболее близких по генотипу свиней, что является немаловажной
предпосылкой к получению достоверных результатов.
По мнению Овсянникова А.И. (1976), максимальная аналогичность, в том
числе по генотипу, подопытных животных, сходство предшествующих условий развития не только в смысле действия исходных факторов на формирующихся животных, но и сохранности их действия на развивающийся, а соответственно и изменяющий свои реактивные способности организм, являются
неотъемлемой частью достоверного эксперимента.
Таблица 3.3 – Рацион подкормки поросят в подсосный период, гол/сутки
Возраст,
дни
5-15
16-20
21-25
26-30
31-35
36-40
41-45
Вид корма
УВМД, г
Зерносмесь,
г
С 2-1 С 2-2 С 2-3
20
30
20
50
20
150
30
300
30
450
20
650
20
750
Молоко коровье
пастеризованное, мл
150
150
200
200
250
250
Все поросята, начиная с 5-ти дневного возраста, получали подкормку согласно нормам основного хозяйственного рациона, но в подкормку поросят
второй опытной группы согласно схеме исследований (табл. 3.4), добавляли
УДП железа.
54
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Дозировка 0,08 мг на 1 кг живой массы была ранее отработана в опытах
на кроликах и рекомендована как наиболее оптимальная (А.А. Назарова,
2009).
Таблица 3.4 – Схема второго научно-хозяйственного опыта
Группа
Количество животных,
голов
Рацион
25
Основной рацион
(ОР)
25
ОР
25
ОР +УДП железа,
0,08 мг/кг
Контроль
(Потомство свиноматок контрольной группы)
Опыт 1
(Потомство свиноматок, получавших УДП железа)
Опыт 2
(Потомство свиноматок, получавших УДП железа)
Благодаря данной схеме эксперимента мы смогли рассмотреть особенности трансплацентарного воздействия УД железа на организм поросятмолочников (опыт 1) и непосредственного влияния добавки при введении её
в рацион поросят (опыт 2).
Исследования продолжались в течение 45 дней – с момента рождения до
отъема. За данный период были проведены клинические и физиологические
исследования, отражающие особенности воздействия УДП железа на организм поросят-молочников.
В первый день исследований проводили взвешивание животных, и отбор
проб крови для морфологических исследований. Для определения влияния
УДП железа на прирост живой массы контрольное взвешивание поросят проводили на 10-й, 20-й, 30-й и 45-й дни эксперимента.
У новорожденных поросят кровь отбирали в малом количестве (1,2 мл).
Далее исследование крови проводили на 10-й, 20-й, 30-й и 45-й день в полном объеме.
55
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Во второй серии опытов нами были определены такие показатели, как количество эритроцитов, гемоглобина, тромбоцитов и лейкоцитов, а также
СОЭ, цветной показатель. При биохимическом исследовании крови мы определяли количество общего белка и соотношение белковых фракций, активность аминотрансфераз, интенсивность обмена глюкозы, кальция, фосфора и
железа.
Для оценки иммунобиологического статуса поросят-молочников проводили анализ лейкограммы, определяли количественный состав популяции
лимфоцитов, бактерицидную и лизоцимную активность сыворотки крови, а
также функциональную и метаболическую активность нейтрофилов (НСТтест). Исследования крови проводили в рязанском филиале НИИ ДГ и в гематологической лаборатории РГАТУ.
3.1.1 Методы исследования гематологических показателей
Отбор проб крови животных проводили по общепринятой методике, с огласно особенностям для свиней, описанным Кондрахиным И. П. (2004).
У поросят-молочников взятие крови осуществляли из хвостовой вены.
Пробы отбирали за 1 час до утреннего кормления в вакуумные пробирки:
для проведения морфологических исследований – с антикоагулянтом, для
биохимических и иммунологических исследований – с активатором свертывания.
Морфологический анализ проводился с помощью автоматического гематологического анализатора «Abacus Junior Vet». Были определены такие показатели как количество эритроцитов, гемоглобина, лейкоцитов, лимфоцитов
и тромбоцитов. Биохимический анализ крови проводили с использованием
автоматического биохимического и иммуноферментного анализатора «Chem
Well 2902V» и спектрофотометра «Spectrum» фирмы «Abbot», по унифицированным методикам клинических лабораторных исследований (В.В. Меньшиков, Л.Н. Делекторская, Р.П. Золотницкая и др., 1987).
56
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В результате были получены данные по количеству АЛТ, АСТ, глюкозы,
кальция, фосфора, железа в сыворотке крови, а также определены показатели
железосвязывающей способности (ЖСС) сыворотки крови.
Количество общего белка определяли биуретовым методом. Количество
альбуминов – по реакции с бромкрезоловым зеленым. Глобулины определяли
методом электрофоретического разделения на пленках из ацетата целлюлозы
(И. П. Кондрахин, 2004).
Бактерицидную активность сыворотки крови определяли фото нефелометрическим методом по Мишелю и Трефферс (1956) в модификации Храбустовского и Ю.М. Маркова (1974) с использованием суточной агаровой культуры Е. coli (Е.С. Воронин, А.М, Петров, М.М, Серых, Д.А. Девришов, 2002).
Лизоцимную активность сыворотки крови определяли фотоэлектрокалориметрическим методом (И.Ф. Храбустовского и Ю.М. Маркова, 1974; С.И.
Плященко и В.Т. Сидоров, 1979) с суточной агаровой культурой Micrococcus
lisodeicticus в 0,5%-ном растворе хлорида натрия.
При изучении клеточного иммунитета определяли такие показатели как
общее количество Т-лимфоцитов (СД3), количество Т-хелперов (СД4), Тцитотоксических лимфоцитов (СД 8), натуральных киллеров (СД16), Влимфоцитов (СД20).
Изучение количественного состава субпопуляций лимфоцитов в периферической крови выполнялось на проточном цитометре «Facscan» фирмы
«Becton Dickinson» (США) с использованием тройных комбинаций прямых
моноклональных антител.
Для определения фагоцитарной и метаболической функции нейтрофилов
проводили НСТ-тест. Для оценки кислородзависимой биоцидности нейтрофилов крови применяли спонтанный НСТ-тест (СпонНСТ-тест) в модификации Д.Н. Маянского.
Методика основана на реакции восстановления нитросинего тетразолия до
нерастворимой формы – диформазана, и отложении его гранул внутри и на
57
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
поверхности фагоцитов. Количество выпавшего осадка служило критерием
интенсивности реакции.
Результат выражали в количестве диформазан положительных нейтрофилов (в процентах от общего количества подсчитанных клеток).
Для определения функционального резерва нейтрофилов использовали
индуцированный НСТ-тест (СтимНСТ-тест). Индуцированный НСТ-тест
проводили так же как и спонтанный, но в среду инкубации дополнительно
добавляли суспензию зимозана (конечное разведение – 10 мкг/100 мкл).
Результат выражали в количестве (в %) диформазан положительных
нейтрофилов на 100 нейтрофилов.
Также принимали во внимание индекс стимуляции, который рассчитывали
как отношение значений СтимНСТ-теста к СпонНСТ-тесту.
3.1.2 Методы исследования показателей продуктивности
Показатели продуктивности имеют первостепенное значение в качественной оценке животных. В условиях свиноводства большое значение имеет
тенденция к максимальному повышению продуктивности животных, начиная
с рождения и до окончания срока использования (В. Токарь, А. Файнов, 2004;
А. Ухтверов, 2004; И. Фролова, В. Дунина, Е. Джунельбаев, 2005).
В данном разделе рассматриваются методики оценки показатели воспроизводительной способности и продуктивности свиноматок, а также продуктивность поросят в подсосный период.
Среди показателей репродуктивности свиноматок наиболее значимый показатель это крупноплодность. Не смотря на это, при браковке свиноматок
зачастую их оценивают исключительно по многоплодию, однако чаще всего
данный показатель сопровождается недостаточной массой поросят при рождении (В. Рядчиков, Н. Соколов, А. Мироненко, 2003; С.Н. Хохрин, 2004).
Из всего вышесказанного следует, что наиболее объективная оценка складывается при учете всех показателей продуктивности в целом.
58
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
3.1.2.1 Определение репродуктивных функций свиноматок
Относительная молочность определялась по весу помета в 21-дневном
возрасте и характеризовалась способность свиноматки к вскармливанию поросят от рождения до 21-дневного возраста.
Оценка молочности по массе поросят именно в 21 день, а не в 30 дней как
ранее, обусловлена тем, что именно с этого возраста поросята переходят на
более интенсивное использование подкормки (В.Д. Кабанов, 2001; В. Севрюгин, 2003; А.И. Нетеса, 2005).
Для определения крупноплодности поросят проводили взвешивание сразу
после опороса с помощью электронного безмена с точностью до 1 г. Крупноплодность выражалась в средней живой массе помета на момент рождения.
При определении многоплодия отмечалось количество поросят в помете.
Также вели учет жизнеспособных и мертворожденных поросят.
3.1.2.2 Определение интенсивности роста поросят
Для определения среднесуточных приростов в подсосный период проводили поголовное контрольное взвешивание поросят каждые 10 дней до
утреннего кормления.
Для объективной оценки роста поросят вычисляли абсолютный и относительный прирост массы (С. Броди, 1945; Л.П. Тельцов, 2004; А.С. Крамской,
2005).
3.1.3 Методы исследования химического состава молока свиноматок
Для проведения лабораторных исследований на 10-е сутки лактации от
свиноматок из каждой группы отобрали по 80-100 мл молока. Сдаивание молока проводилось в период кормления поросят, периодически, из свободных
сосков.
59
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Количество сухих веществ и влаги определялось по результатам высушивания проб при 102±20С, согласно ГОСТ 3626-73, путем сравнения массы
навески до и после высушивания.
Количество белка определялось с помощью метода измерения массовой
доли общего азота по Кьельдалю, с последующим математическим расчетом
(ГОСТ 23327-98).
Для определения содержания жира применяли кислотный метод, основанный на выделении жира из молока под действием концентрированной серной
кислоты и изоамилового спирта (ГОСТ 5867-90).
Железо в молоке определяли колориметрическим методом, в соответствие
с ГОСТ 26928-86.
60
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
3.2 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.2.1 Первая серия опытов
Целью первой серии опытов было изучение влияния УДП железа на физиологическое состояние, продуктивность, воспроизводительную спосо бность свиноматок, а также на сохранность поросят в подсосный период.
3.2.1.1 Гематологические показатели свиноматок
Морфологические показатели крови свиноматок
На фоне научно-хозяйственного опыта проводился физиологический, в
процессе которого мы определяли особенности потребления корма, клинические и гематологические показатели свиноматок.
В течение опыта животные всех групп находились под ежедневным
наблюдением. Было установлено, что свиноматки охотно поедают корм, поведение умеренно активное, свойственное животным на поздних сроках супоросности.
При анализе клинических показателей никаких отклонений выявлено не
было, животные были клинически здоровы.
В результате гематологических исследований мы установили, что у всех
животных на протяжении эксперимента морфологические показатели крови
находились в пределах физиологической нормы (табл. 3.4).
Как видно из таблицы, у свиноматок опытной группы в процессе эксперимента наблюдалась тенденция к увеличению количества эритроцитов и гемоглобина.
Количество красных кровяных клеток в крови опытных животных, по
сравнению с контрольными, к 10-му дню эксперимента оказалось достоверно
выше на 6,3%, а количество гемоглобина, в свою очередь, увеличилось на
3,8%.
61
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Разница с контролем оказалась статистически достоверна в 95% случаев,
что немаловажно.
Таблица 3.4 – Морфологические показатели крови супоросных свиноматок
(M±m, n=5)
Показатель
Группа
Периодичность исследований, дни
До опыта
10
20
Гемоглобин,
г/л
Контроль
97,8±1,56
97,4±1,60
99,4±1,07
Опыт
97,9±1,29
101,1±1,24*
104,6±1,59**
Эритроциты,
1012/л
Контроль
6,63±0,21
6,52±0,19
6,65±0,23
Опыт
6,65±0,20
6,93±0,12*
7,11±0,15*
Цветной показатель
Контроль
0,963±0,04
0,974±0,04
0,976±0,04
Опыт
0,967±0,02
0,954±0,05
0,958±0,02
СОЭ, мм/час
Контроль
4,4±0,7
4,6±0,6
4,2±0,4
Опыт
4,3±0,6
4,0±0,9
3,9±0,6
Лейкоциты,
109/л
Контроль
9,98±0,42
10,04±0,37
10,24±0,22
Опыт
9,75±0,48
9,98±0,47
10,83±0,34*
Тромбоциты,
109/л
Контроль
208,2±3,3
208,6±5,8
209,4±6,6
Опыт
207,8±4,3
207,4±4,1
209,4±4,6
Примечание: здесь и далее – *р<0,05; ** р<0,01 по отношению к контрольной
группе
К 20-му дню опыта количество эритроцитов и гемоглобина в крови опытных животных также было выше по сравнению с контролем на 6,9 и 5,2%,
соответственно.
Графически динамика изменения количества эритроцитов и гемоглобина в
крови контрольных и опытных животных отображена на рисунке 3.1.
62
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
г/л
Б
120
118
116
114
112
110
108
106
104
102
100
98
96
94
92
90
0 дней
10 дней
20 дней
Рисунок 3.1 – Динамика количества эритроцитов (А) и гемоглобина (Б) в
крови свиноматок
Что касается цветного показателя крови, то на протяжении опыта у всех
животных он был достаточно стабилен, что отражено на рисунке 3.2.
Как видно на рисунке, цветной показатель крови у животных всех групп
находился на верхней границе нормы. В опытной группе данный показатель
к 20-му дню опыта снизился на 1,9%, по сравнению с контролем, однако разница оказалась не достоверна.
63
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Рисунок 3.2 – Цветной показатель крови супоросных свиноматок
При исследовании СОЭ было отмечено, что во всех группах наблюдалось
незначительное снижение данного показателя. В итоге перед опоросом в
крови опытных животных, по сравнению с контрольными, СОЭ было ниже
на 7,7%.
По-видимому, это объясняется увеличением количества молодых эритроцитов, и, как следствие, снижением среднего показателя объема эритроцита в
крови (А.А. Покровский, А.А. Абраров, 1964).
Количество тромбоцитов в крови контрольных и опытных животных на
всем протяжении опыта находилось в пределах физиологической нормы (рис.
3.3). Однако к 20-му дню эксперимента во всех группах наблюдалось незначительное их увеличение, что, по-видимому, связано физиологическими особенностями супоросных животных. Так, по сравнению с фоновым показате64
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
лем, количество тромбоцитов в контрольной и опытной группе возросло на
0,6 и 0,8%, соответственно.
Рисунок 3.3 – Динамика количества тромбоцитов в крови свиноматок
Как известно, кроме того, что тромбоциты имеют более десятка факторов
отвечающих за свертывание крови, они также обладают защитной функцией,
которая проявляется в их способности к адгезии и фагоцитозу (Е.С. Воронин,
Г.В. Сноз, М.Ф. Васильев и др., 2006).
В динамике лейкоцитов также наблюдается повышение их количества к
20-му дню эксперимента, но в данном случае картина несколько другая (рис.
3.4).
65
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В опытной группе на 20-й день эксперимента обнаружилось достоверно
большее количество белых кровяных клеток, на 5,8%, по сравнению с контрольной.
Исходя из этого, можно предположить, что повышение уровня лейкоцитов
и тромбоцитов к концу срока супоросности является естественным сво йством организма свиноматок, вследствие усиления функции иммунной системы перед опоросом (М.Ф. Васильев, Е.С. Воронин, Г.Л. Дугин, и др.,
2004).
Рисунок 3.4 – Количество лейкоцитов в крови свиноматок
66
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Биохимические показатели крови свиноматок
Биохимический статус крови животных во многом отражает картину общего физиологического состояния. В отличие от морфологического состава
крови биохимический анализ дает возможность проанализировать состояние
обмена веществ в целом, с учетом энергетических запасов организма, количества и активности ферментов, процессов выведения побочных продуктов.
При определении количества белка в сыворотке крови контрольных и
опытных свиноматок наблюдалась четкая тенденция по увеличению его количества у животных опытной группы (табл. 3.5).
Количество общего белка в контрольной группе на протяжении эксперимента находилось приблизительно на одном уровне. Что касается опытных
животных, то к 10-му дню опыта общий белок сыворотки крови был достоверно выше на 9%, по сравнению с контрольными.
67
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 3.5 – Показатели белкового обмена крови подопытных свиноматок
(M±m, n=5)
Показатели
Периодичность исследований, дни
Группа
До опыта
10
20
Общий белок,
Контроль
64,4±0,22
68,0±0,30
66,4±0,27
г/100 мл
Опыт
64,3±0,18
74,1±0,30*
75,5±0,33**
Контроль
40,4±1,26
41,4±0,61
41,5±0,50
Опыт
40,5±1,12
41,0±2,59
40,2±0,34*
Контроль
17,6±0,08
17,8±0,19
17,9±0,12
Опыт
17,2±0,07
17,9±0,10
18,9±0,08*
Контроль
18,1±0,12
18,3±0,11
18,3±0,08
Опыт
18,0±0,08
18,4±0,13
19,2±0,14*
Контроль
23,9±0,07
22,5±0,12
22,3±0,12
Опыт
24,3±0,08
22,7±0,11
21,7±0,10
Альбумины, %
α
Глобулины, %
β
γ
В дальнейшем, также наблюдалось стабильное увеличение данного показателя в опытной группе, и к 20-му дню разница с контролем составила
13,6% .
По мнению ученых (Е.С. Воронин, Г.В. Сноз и др., 2006), наиболее информативным, при оценке состояния белкового обмена, является определение соотношения белковых фракций.
В связи с этим, нами был проведен анализ процентного соотношения альбуминов и глобулинов в крови контрольных и опытных животных.
68
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В целом можно сказать, что соотношение белков в организме свиноматок
всех групп находилось в пределах физиологической нормы. Следует отметить, что в крови как контрольных, так и опытных животных наблюдалось
некоторые изменения в уровне альбуминов (рис. 3.5).
Рисунок 3.5 – Динамика альбуминов в сыворотке крови свиноматок.
Как видно из таблицы, на 10-й день эксперимента процент содержания
альбуминов в контрольной группе по сравнению с фоновым показателем
увеличился на 2,5%, а в опытной на 1,2%.
К 20-му дню опыта в контрольной группе свиноматок количество альбуминов было выше уже на 2,7%. В то же время, в опытной группе наблюда-
69
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
лось некоторое снижения данного показателя, по сравнению с показателем до
опыта, на 0,7%.
В итоге, в сравнении с контрольной группой в опыте к 20-му дню процент
содержания альбуминов в сыворотке крови был ниже на 3,2%. При этом разница оказалась статистически достоверна при p<0,05.
При исследовании сывороточных глобулинов нами были проанализированы 3 фракции – α, β и γ.
Рисунок 3.6 – Динамика количества α - глобулинов в сыворотке крови свиноматок, %
Что касается α-глобулинов, то на всем протяжении опыта, как в контрольной, так и в опытной группах наблюдалось некоторое увеличение их количества. На рисунке 3.6 видно, что в опытной группе сохранялась тенденция к
более активному росту α-глобулинов. За 10 дней до опороса в сыворотке
70
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
крови опытных свиноматок α-глобулинов было больше, чем у контрольных,
на 5,6%.
При исследовании количества β-глобулинов наблюдалась аналогичная
картина (рис. 3.7). У свиноматок, получавших с рационом ультрадисперсное
железо, данный показатель к 20-му дню эксперимента был выше, чем в контрольной группе, на 4,9%.
Как известно (И.П. Кондрахин, 2004), γ-глобулины относят к иммунным
белкам, в связи с тем, что основа данной фракции представлена иммуноглобулинами (IgG, IgA, IgM, IgD, IgE).
Рисунок 3.7 – Динамика количества β - глобулинов в сыворотке крови свиноматок, %
71
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В результате определения количества γ-глобулинов в крови свиноматок,
мы обнаружили, что у всех групп животных наблюдалась тенденция к некоторому их снижению. Данные биохимического исследования крови свидетельствуют о том, что у животных, получавших ультрадисперсное железо,
снижение проходило несколько активнее. Это наглядно представлено на рисунке 3.8.
Видно, что до опыта количество γ-глобулинов у опытных свиноматок было выше, чем у контрольной на 1,7%. На 10-й день применения УДП железа
данный показатель снизился, по сравнению с фоновым, в контрольной группе на 6,2%, а в опытной – на 7,0%.
Через 20 дней применения УДП железа γ-глобулинов в крови свиноматок,
в рацион которым вводили ультрадисперсное железо было меньше, чем в
контрольной, на 2,8%.
Рисунок 3.8 – Динамика количества γ - глобулинов в сыворотке крови свиноматок, %
72
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
О заметных сдвигах углеводного обмена у подопытных свиней можно судить по изменению уровня содержания глюкозы. Известно, что глюкоза – основной источник энергии, необходимый для нормального функционирования
основных биохимических процессов в живом организме. На ее долю приходится более 90% всех низкомолекулярных углеводов (Я. Кольман, К.-Г. Рем,
2000).
В случае применения УДП железа видно, что у свиней опытной группы
концентрация этого важнейшего метаболита была выше, чем в контроле, что
наиболее ярко заметно на 20-й день исследований (табл. 3.6).
Таблица 3.6 – Показатели углеводного и минерального обмена подопытных
свиноматок (M±m, n=5)
Показатели
Глюкоза, ммоль/л
Кальций, мг%
Фосфор, мг%
Резервная щелочность, об. % СО 2
Группа
Периодичность исследований, дни
До опыта
10
20
Контроль
3,94±0,13
4,05±0,09
4,12±0,09
Опыт
3,93±0,11
4,25±0,11*
4,36±0,08*
Контроль
11,8±0,14
11,6±0,08
11,7±0,13
Опыт
11,1±0,09
11,5±0,13
12,2±0,15*
Контроль
5,23±0,08
5,21±0,16
5,28±0,07
Опыт
5,53±0,10
5,60±0,05
5,67±0,12*
Контроль
49,26±1,32
50,24±0,71
50,46±0,64
Опыт
50,24±0,93
49,42±0,72
48,68±0,78*
73
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
У животных, получавших УДП железа, количество глюкозы увеличилось
на 5,8%, по сравнению с контрольной группой. Разница оказалась статистически достоверна в 95% случаев, что немаловажно. При исследовании кальция и фосфора сыворотки крови мы выяснили, что у всех свиноматок содержание этих минеральных веществ находилось в пределах физиологической
нормы.
Однако у животных, получавших с рационом УДП железа, наблюдалась
некоторая тенденция к увеличению количества общего кальция и неорганического фосфора в сыворотке крови по сравнению с контролем.
Так, на 10-й день эксперимента количество общего кальция у свиноматок
опытной группы было ниже, чем в контрольной на 0,9%.
К 20-му дню количество этого важного макроэлемента возросло и оказалось выше на 4,3%, в сравнении с контролем (p<0,05).
Количество неорганического фосфора, в свою очередь, через 20 дней применения УДП железа в опытной группе было выше, чем в контрольной, на
7,4% (p<0,05).
74
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Рисунок 3.9 – Соотношение кальция и фосфора в крови контрольных (А) и
опытных (Б) животных
На рисунке 3.9 представлена динамика изменения соотношения кальция и
фосфора в крови животных перед началом опыта и на 20-й день.
Как видно, у свиноматок контрольной группы данный показатель фактически не изменился и на протяжении периода гематологических исследова75
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ний составлял 2,2/1. В свою очередь у опытных животных мы наблюдали некоторые изменения. А именно, в опытной группе соотношение кальция к
фосфору в сыворотке крови до опыта составляло 2,0/1, а после 20-ти дней
применения УДП железа – 2,1/1.
В целом можно сказать, что в крови опытных животных, в сравнении с
контрольными, увеличилось содержание кальция (+4%) и фосфора (+7%), но
повышение уровня общего кальция проходило более активно, в связи с этим
изменилось соотношение этих элементов в сыворотке крови.
Еще одним важным показателем нормального состояния обмена веществ в
организме животных является резервная щелочность. Данный показатель, в
сущности, характеризует запас бикарбонатов крови, определяемый по общему количеству углекислого газа, наибольшая часть которого находится в составе бикарбонатов крови и лишь 1/20 часть в растворенном и свободном состоянии (И.П. Кондрахин, 2004).
При определении резервной щелочности мы обнаружили, что введение в
рацион УДП железа оказывает влияние на данный показатель (рис. 3.10).
В контрольной группе свиноматок наблюдалось незначительное увеличение щелочного резерва сыворотки крови. По сравнению с фоновым показателем, к 20-му дню эксперимента этот показатель увеличился в среднем на
2,4%.
У животных опытной группы наблюдалось некоторое снижение резервной
щелочности сыворотки крови. В итоге на 20-й день опыта данный показатель
в опытной группе был ниже, чем в контроле на 3,7%.
Данный факт также может объяснять снижение СОЭ у свиноматок опытной группы, отмеченное при морфологическом исследовании крови (п.
3.1.1.1).
76
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Рисунок 3.10 – Динамика изменения щелочного резерва крови свиноматок
Среди показателей обмена железа в организме свиноматок нами были исследованы такие, как количество сывороточного железа, общая железосвязывающая способность, латентная железосвязывающая способность сыворотки
крови и процент насыщения сыворотки трансферрином.
Общая железосвязывающая способность сыворотки крови (ОЖСС) – показатель, характеризующий способность сыворотки крови к связыванию железа. Иными словами, поскольку за основной транспорт железа в организме
отвечает трансферрин, то количество железа, которое способен максимально
присоединить этот белок, называют общей железосвязывающей способностью. В целом ОЖСС отражает концентрацию трансферрина в сыворотке
крови. Латентная железосвязывающая способность сыворотки (ЛЖСС) – показатель, используемый для выявления дефицита железа в организме. ЛЖСС
77
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
– представляет собой разность между общей железосвязывающей способностью и реальным насыщением трансферрина и вычисляется по формуле:
ЛЖСС = ОЖСС – сывороточное железо.
Коэффициент насыщения трансферрина железом – выраженное в процентах отношение железа сыворотки крови общей железосвязывающей способности.
Результаты исследования метаболизма железа в организме супоросных
свиноматок отражены в таблице 3.7.
Таблица 3.7 – Показатели обмена железа (M±m, n=5)
Показатели
Сывороточное
железо, мкмоль/л
ОЖСС, мкмоль/л
Процент насыщения трансферрином, %
ЛЖСС, мкмоль/л
Группа
Периодичность исследований, дни
До опыта
10
20
Контроль
33,6±0,21
32,8±0,11
30,1±0,09
Опыт
33,0±0,12
32,7±0,17
31,9±0,21*
Контроль
58,9±1,2
60,3±0,9
63,7±1,6
Опыт
59,4±1,8
60,4±1,4
62,8±1,3*
Контроль
57,0±0,2
54,4±0,8
47,3±1,2
Опыт
55,6±1,2
54,2±1,5
50,8±0,8*
Контроль
25,3±0,4
27,5±0,2
33,6±0,5
Опыт
26,4±0,7
27,7±0,6
30,9±0,7*
В процессе исследований мы обнаружили, что количество сывороточного
железа в крови свиноматок всех групп уменьшалось. Однако у животных
опытной группы снижение данного показателя проходило менее интенсивно.
78
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Согласно данным, количество железа в сыворотке крови контрольных животных снизилось к 10-му дню эксперимента на 2,4%, а к 20-му – на 11,6%,
что существенно.
В крови свиноматок опытной группы данный показатель снизился через
10 дней опыта на 0,9%, а спустя 20 дней на 3,4%.
В итоге, за 10 дней до опороса в сыворотке крови опытных свиноматок
оказалось достоверно большее количество железа, на 6%, чем у контрольных
животных.
Что касается ОЖСС, то данный показатель в крови всех свиноматок повышался, пропорционально тому, как понижалось количество железа, что для
здоровых животных естественно (рис. 3.11).
79
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
мкмоль/л
Б
65
64
63
62
61
60
59
58
57
56
55
До опыта
10 дней
20 дней
Рисунок 3.11 – Содержание железа (А) и общая железосвязывающая способность (Б) сыворотки крови свиноматок
В целом за 20 дней эксперимента железосвязывающая способность сыворотки крови контрольных животных повысилась на 8,1%, а у животных
опытной группы на 5,7%. В сравнении с контролем в опытной группе данный
показатель к 20-му дню был ниже на 1,4%, соответственно.
В связи с тем, что такие показатели как процент насыщения трансферрина
и латентная связывающая способность сыворотки крови напрямую зависят от
ОЖСС и сывороточного железа, мы видим закономерную тенденцию к их
изменению. Процент насыщения трансферрином сыворотки крови у животных всех групп уменьшался. На 20-й день эксперимента у животных контрольной группы данный показатель снизился на 20,5%, а у опытных – на
9,4%.
80
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
По сравнению с показателем до опыта ЛЖСС в опытной группе повыс илась на 17%. В свою очередь в контрольной группе наблюдалось увеличение
данного показателя на 32,8%.
Для исключения сомнений о возможном негативном воздействии нанопорошка железа на функциональное состояние печени нами проведено изучение активности ферментов аминотрансфераз (АсАТ и АлАТ), участвующих в
переносе аминокислот к кетокислотам (табл. 3.8).
Таблица 3.8 – Активность аминотрансфераз в сыворотке крови подопытных
свиней, ммоль/ч·мл (M±m, n=5)
Периодичность исследований
Показатели
Группы
До опыта
10 дней
20 дней
Контроль
0,390,05
0,370,05
0,410,07
Опыт
0,410,04
0,390,03
0,450,05
Контроль
0,600,05
0,580,08
0,610,05
Опыт
0,590,02
0,600,05
0,630,03
Коэффициент
Контроль
1,530,11
1,570,07
1,490,12
де Ритиса
Опыт
1,440,08
1,540,11
1,400,09
АлАТ
АсАТ
Представленные в таблице данные свидетельствуют, что применяемый
препарат не оказал неблагоприятного воздействия на печень, о чем говорят
показатели этих метаболически важных ферментов.
На рисунке 3.12 видно, что как в контрольной, так и в опытной группе активность аминотрансфераз изменялась сравнительно одинаково. У всех животных на 10-й день наблюдалось незначительное снижение активности
81
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ферментов, которое компенсировалось к 20-му и несколько превысило фоновые значения.
мкмоль/ч·мл
Б
0,8
0,75
0,7
0,65
0,6
0,55
0,5
0,45
0,4
0,35
0,3
0,25
0,2
До опыта
10 дней
20 дней
Рисунок 3.12 – Активность аланинаминотрансферазы (А) и аспартатаминотрансферазы (Б) в сыворотке крови свиноматок
В целом в контрольной группе количество АлАТ и АсАТ увеличилось к
20-му дню на 5,1 и 1,7%, а в опытной – на 9,8 и 6,8%, соответственно. Согласно данным видно, что в опытной группе данные показатели повышались
несколько активней.
Коэффициент де Ритиса, как у контрольных, так и у опытных животных,
на протяжении опыта незначительно снижался, более активно (в среднем на
1,6%) в опытной группе. Это объясняется повышением обмена белка в крови
82
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
животных, получавших УДП железа, и, соответственно, большей нагрузкой
на печень (Т.Е. Костина, 1982).
3.2.1.2 Химический состав молока свиноматок
Показатели молочности и скорости роста поросят до отъема во многом зависят от химического состава молока свиноматок.
Как показали результаты исследований, включение в рацион УДП железа
в период последней трети супоросности оказало положительное влияние на
химический состав молока в лактационный период.
Как видно из таблицы 3.6 молоко свиноматок опытной группы содержало
большее количество сухого вещества и золы, по сравнению с контролем. На
момент исследования разница с контролем по данным показателям составила
2,2 и 3,4%, соответственно.
Таблица 3.9 – Химический состав молока свиноматок (M±m, n=5)
Показатели
Группа
Контроль
Опыт
Вода, %
82,52±0,12
82,12±0,09
Сухое вещество,%
16,61±0,14
16,98±0,11*
Зола,%
0,87±0,02
0,90±0,04
Белок, %
4,98±0,04
5,79±0,05**
Жир, %
6,04±0,08
6,48±0,02*
СОМО, %
17,8±0,12
19,6±0,09*
Железо, мкг/%
7,90±0,23
8,01±0,29
83
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Говоря о питательной ценности молока свиноматок, следует отметить, что
у животных, получавших с рационом УДП железа, наблюдается более высокое содержание белка, который в свою очередь влияет на сухой обезжиренный молочный остаток (СОМО), и жира.
В опытной группе количество белка в молоке превышало аналогичный
показатель у контрольных животных на 16,3%, что существенно. Содержание
молочного жира в опытной группе также было больше на 7,3%, чем в ко нтроле. Заметной оказалась разница и в количестве сухого обезжиренного молочного остатка (СОМО). Так в опытной группе данный показатель был выше на 10,1%, в сравнении с контролем.
На рисунке 3.13 представлена динамика показателей питательной ценности молока контрольных и опытных животных.
Рисунок 3.13 – Химический состав молока свиноматок
84
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Что касается количества железа, то достоверных различий между контрольными и опытными животными отмечено не было. Однако следует о тметить, что в опытной группе содержание данного микроэлемента было несколько выше, чем у контрольных животных. По этому показателю средняя
разница составила 1,5%.
В целом можно сказать, что введение УДП железа в рацион свиноматок
существенно меняет картину химического состава крови, в особенности по
общему количеству белка.
3.2.1.3 Динамика живой массы свиноматок
Взвешивание животных проводили до опыта, за 3-5 дней до опороса, через
5 дней после опороса, за 5 дней до отъема.
Живая масса свиноматок это важный показатель, наиболее ярко отражающий их способность, как к оплодотворению, так и выращиванию приплода.
Данный показатель играет немаловажную роль при корректировке времени
отъема поросят.
Динамика изменения живой массы супоросных и лактирующих свиноматок отражена в таблице 3.10.
85
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 3.10 – Динамика живой массы свиноматок, кг (M±m, n=5)
Показатели
Контроль
Опыт
До опыта
169,8±1,1
169,3±1,9
За 3-5 дней до опороса
191,2±1,2
194,7±1,6*
Прирост за 30 дней супоросности
21,4±1,1
25,4±1,4*
Через 5 дней после опороса
181,6±1,6
185,9±2,4
9,6±0,9
8,8±0,3*
За 5 дней до отъема
169,4±1,9
174,3±2,4
Потери за подсосный период
12,2±0,6
11,6±0,7
Потери массы за опорос
Как видно из таблицы, при взвешивании за 3-5 дней до опороса, свиноматки, получавшие УДП железа с кормом, имели достоверно большую живую массу, по сравнению с контрольными животными (О. Шахбазова, 1995).
Так, масса животных опытной группы превышала массу контрольных в
среднем на 1,8% (p<0,05). Прирост живой массы свиноматок за 30 дней супоросности в опытной группе был больше, чем у контрольных на 4 кг (p<0,05).
При анализе потерь живой массы за опорос и первые 5 дней лактации мы отметили, что у опытных свиноматок сохранялась тенденция к лучшему сохранению массы. Данный показатель у них был ниже на 9,1% (p<0,05), чем в
контроле. Потеря массы за подсосный период у свиноматок опытной группы
была меньше на 2,9 % (p<0,05), что отражается на последующем использовании свиноматок. Как известно, взрослые матки приходят в охоту уже через 57 дней после отъема (В.Д. Кабанов, 2001), и поэтому особое внимание следует уделять живой массе именно в этот период.
86
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
3.2.1.4 Воспроизводительная способность и продуктивность свиноматок
Как известно, при оценке воспроизводительной способности свиноматок
обращают внимание на многоплодие, молочность, крупноплодность, а также
число поросят в гнезде, их среднюю массу и общую массу гнезда при отъеме.
Анализ результатов воспроизводительной способности свиноматок показал, что многоплодие животных опытных и контрольных групп не имело
значительных отличий (табл. 3.11). У свиноматок контрольной группы, среднее количество поросят при опоросе составило 10,2 голов, а у животных
опытной группы – 10,3 голов. У всех животных опорос проходил нормально,
патологий при изгнании плодов отмечено не было.
Что касается крупноплодности свиноматок, то при проведении взвешивания новорожденных поросят было отмечено, что данный показатель у опытных свиноматок был достоверно выше, чем в контрольной группе. Как видно
из таблицы, крупноплодность свиноматок контрольной группы сос тавила
0,895 кг, а опытной 0,923 кг, что на 3,1% выше. Средняя масса гнезда в день
опороса в опытной группе была выше на 4,2% (p<0,05), чем в контроле.
Молочность свиноматок опытной группы превышала аналогичный показатель в контроле на 5,5% (p<0,05).
87
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 3.11 – Показатели репродуктивной способности свиноматок
(M±m, n=5)
Показатели
Контроль
Опыт
Многоплодие, гол
10,2±0,49
10,3±0,45
Масса гнезда в день опороса, кг
9,13±0,11
9,51±0,23
Крупноплодность, кг
0,895±0,012
0,923±0,02*
Молочность, кг
51,24±1,26
54,05±2,94
Масса гнезда в день отъема (45 дней), кг
86,02±1,60
100,1±0,63*
Средняя живая масса поросенка в день отъема, кг
9,35±0,11
10,25±0,13*
Количество поросят в день отъема, гол
9,2±0,4
9,8±0,4
Сохранность поросят, %
90,2±1,1
95,1±0,9*
Как показал анализ результатов, величина живой массы поросят в день
отъема находилась в прямой зависимости от живой массы поросят при ро ждении. Так, поросята от свиноматок опытной группы обладали более высокой
скоростью роста, о чем свидетельствуют данные взвешивания их перед отъемом. Средняя живая масса поросят от опытных свиноматок, при отъеме,
превысила данный показатель у поросят, полученных от свиноматок контрольной группы на 9,6%. При этом разница оказалась достоверна в 95%
случаев.
Важным показателем при характеристике эффективности выращивания
молодняка является сохранность. Согласно нашим исследованиям УДП железа способствовал повышению данного показателя.
В целом на протяжении опыта потери молодняка возникали вследствие
заболеваний желудочно-кишечного тракта (приложение 4).
88
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В итоге, сохранность поросят контрольной группы составила 90,2%, а
опытных – 95,1%.
Таким образом, применение УДП железа способствовало увеличению общей массы гнезда опытной группы свиноматок на 16,4%, что существенно.
3.2.2 Вторая серия опытов
Во второй серии опытов цель наших исследований была направлена на
определение особенностей воздействия УДП железа на общее физиологическое состояние, гематологические показатели, иммунобиологический статус
и на интенсивность роста поросят в подсосный период. Также был проведен
опыт по изучению влияния данного вещества на переваримость и использование поросятами основных питательных веществ корма.
3.2.2.1 Общее физиологическое состояние и гематологические показатели
поросят-молочников
В течение опыта мы тщательно отслеживали особенности физиологического состояния животных, задействованных в эксперименте.
Обращали внимание на подвижность, активность поросят, состояние кожного и волосяного покрова, цвет слизистых. Регулярно проводили термометрию, определение частоты сердечных сокращений и дыхания (приложение
5).
В процессе исследования мы отметили, что как контрольные, так и опытные животные были физиологически здоровы, каких либо отклонений в поведении и развитии отмечено не было.
89
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Исследуемые показатели клинического состояния сердечнососудистой и
дыхательной системы соответствовали возрастным особенностям организма
поросят.
Важно отметить, что по сравнению с контрольными животными поросята
опытных групп отличались более активным поведением.
После включения в состав их рациона концентратной подкормки мы
наблюдали лучшую её поедаемость у поросят опытных групп. На 30-й день
эксперимента и в момент отъема опытные животные имели равномерно розовый цвет кожного покрова, в то время как среди поросят контрольной
группы в большей степени преобладал бледно-розовый цвет.
Морфологические показатели крови поросят-молочников
В результате анализа морфологического состава крови нами было установлено, что все исследуемые показатели находились в пределах физиологической нормы (табл. 3.9).
При определении количества эритроцитов мы обнаружили, что в крови
как контрольных, так и опытных животных в течение всего подсосного периода наблюдалась четкая тенденция к их повышению (рис. 3.14).
При этом следует отметить, что с наибольший процент увеличения эритроцитов наблюдался в период перехода поросят от молозивной формы питания к молочной, то есть в первые 10 дней.
Так, в крови контрольных животных на 10 день научно-хозяйственного
опыта количество красных кровяных клеток повысилось на 11,3%, а в опытных группах на 15,7 и 12,3%, соответственно, по сравнению с показателем,
полученным в суточном возрасте.
90
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
У поросят контрольной группы количество эритроцитов в целом за по дсосный период увеличилось на 23,1%, в 1-й опытной группе – на 33,8, а во 2й – на 44,5%.
В конце эксперимента разница по данному показателю между контрольными и опытными животными была существенна и составила 10,8 (p<0,05) и
18,4% (p<0,01), в 1-й и 2-й опытных группах соответственно.
При сравнении количества эритроцитов в крови поросят-молочников
опытных групп мы заметили, что у животных опытной группы 2 эритропоэз
на всех этапах исследований проходил с большей интенсивностью.
Так, в 10-ти дневном возрасте количество эритроцитов в крови поросят 2й опытной группы было ниже, чем в 1-й на 4,2%. Однако, после 10-ти дневного применения УДП железа в составе подкормки для молодняка 2-й опытной группы, данный показатель был выше на 2,1%, чем у аналогов опытной
группы 1. К концу эксперимента количество эритроцитов в крови животных
2-й опытной группы было выше на 6,9%, чем в 1-й опытной.
Что касается гемоглобина, то в динамике изменения данного показателя
наблюдалась аналогичная картина (рис. 3.14).
По сравнению с показателем у новорожденных поросят количество гемоглобина в 10-ти дневном возрасте возросло в контрольной группе на 12,6, в
1-й опытной на 10,5, а во 2-й – на 11,2%. Как видно, в опытных группах повышение количества данного пигмента в раннем постэмбриональном периоде проходило менее интенсивно. Это, по-видимому, связано с более активным эритропоэзом.
Не смотря на это, к моменту отъема, количество гемоглобина в крови
опытных поросят было выше, по сравнению с контролем, на 10,9 (p<0,05) и
16,8% (p<0,01), соответственно.
91
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 3.12 – Морфологические показатели крови поросят-молочников (M±m, n=25)
Показатель
Группа
Периодичность исследований, дни
До опыта
87±1,12
86±1,83
89±2,02
4,68±0,09
4,77±0,06
4,72±0,04
Контроль
Гемоглобин, г/л
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
Эритроциты,
Опыт 1
1012/л
Опыт 2
Контроль
0,84±0,05
Цветной показаОпыт 1
0,85±0,02
тель
Опыт 2
0,85±0,04
Контроль
5,4±0,13
СОЭ, мм/час
Опыт 1
5,7±0,09
Опыт 2
5,9±0,15
13,83±0,34
Контроль
Лейкоциты,
13,61±0,31
Опыт 1
109/л
13,38±0,23
Опыт 2
Контроль
197,6±4,1
Тромбоциты,
Опыт 1
198,2±3,5
109/л
Опыт 2
199,1±3,6
Примечание: здесь и далее * р<0,05;
10
98±3,11
95±2,68
99±2,73
5,21±0,15
5,52±0,16
5,30±0,19
20
97±1,73
102±1,69*
104±1,87*
5,37±0,12
5,69±0,08
5,91±0,11*
30
100±0,93
106±2,62*
111±3,11*
5,5±0,11
6,02±0,09*
6,48±0,15*
45
101±1,73
112±2,51*
118±1,78**
5,76±0,06
6,38±0,08*
6,82±0,16**
0,85±0,05
0,77±0,03
0,84±0,02
5,5±0,21
5,5±0,14
5,4±0,18
13,75±0,24
13,46±0,31
13,18±0,27
0,81±0,04
0,78±0,03
0,79±0,02
5,6±0,17
5,2±0,15
5,0±0,14
13,68±0,18
12,59±0,23
12,07±0,17
0,82±0,05
0,79±0,02
0,77±0,04
5,3±0,19
4,9±0,28
4,7±0,12*
13,55±0,2
11,16±0,1
10,17±0,2
0,78±0,03
0,79±0,04
0,78±0,02
5,2±0,22
4,7±0,27*
4,5±0,19*
12,38±0,3
10,65±0,2
9,77±0,3
198,2±3,1
197,6±4,2
198,0±3,7
** р<0,01
92
196,3±2,8
198,6±5,3
199,4±6,3
195,8±3,1
197,2±4,1
199,6±4,5
197,1±3,4
197,6±4,2
199,2±4,3
по отношению к контрольной группе.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
г/л
Б
119
116
113
110
107
104
101
98
95
92
89
86
83
80
0 дней
10 дней 20 дней 30 дней 45 дней
Рисунок 3.14 – Динамика количества эритроцитов (А) и гемоглобина (Б) в
крови поросят-молочников
Немаловажное значение при исследовании морфологического состава
крови имеет и относительное содержание гемоглобина в эритроцитах, то есть
цветной показатель.
Нами было установлено, что под влиянием УДП железа, наряду со значительными изменениями в количестве эритроцитов и гемоглобина у опытных
животных, существенного отклонения по данному показателю не наблюдалось, но во всех группах в течение научно-хозяйственного опыта наблюдалось некоторое его снижение.
К 45-ти дневному возрасту, по сравнению с фоновым значением, в контрольной группе цветной показатель снизился на 7,7, в 1-й опытной – на 7,6,
а во 2-й – на 9,0%. Согласно этим данным можно предположить, что повы93
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
шение количества эритроцитов во 2-й опытной группе сопровождалось некоторым снижением содержания в них гемоглобина.
При исследовании скорости оседания эритроцитов мы установили, что во
второй опытной группе в момент отъема этот показатель был ниже, чем в с уточном возрасте на 25%, что существенно. В контрольной и 1-й опытной
группах, также за весь период исследований, СОЭ снизилось на 3,8 и 9,6%,
соответственно.
В 45-ти дневном возрасте СОЭ у поросят опытной группы 1 было на
10,6% (p<0,05) ниже, чем у контрольных животных, а во 2-й – на 15,5%
(p<0,05).
По-видимому, такая тенденция может объясняться активизацией эритропоэза, в связи с чем, в кровяное русло поступает значительное количество
молодых эритроцитов, имеющих меньший объем. Это приводит к тому, что
эритроциты
адсорбируют меньшее количество белков плазмы, соответ-
ственно, агломерация и оседание их протекает медленнее.
В количественном содержании тромбоцитов достоверной разницы между
контрольными и опытными группами нами обнаружено не было. Исследования показали, что во всех группах наблюдались периоды незначительного
снижения и возрастания количества тромбоцитов. А именно, по сравнению с
результатами на момент начала опыта, на 20-е сутки данные показатель снизился в крови контрольных животных на 1,1, а у поросят опытных групп – на
1,7 и 1,8%, соответственно. В последующие дни наблюдалось некоторое повышение содержания тромбоцитов. При исследовании в 45-ти дневном возрасте мы установили, что в конечном итоге их количество несколько возросло, в контрольной группе – на 1,8, в 1-й опытной – на 1,6, а во 2-й опытной –
на 1,7%.
Довольно яркая картина наблюдалась при анализе исследований содержания лейкоцитов в крови поросят-молочников.
94
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В суточном возрасте, количество белых кровяных клеток у поросят всех
групп находилось на достаточно высоком уровне. Повышенное, а нередко и
выходящее за пределы физиологической нормы количество лейкоцитов, некоторые авторы (Е.С. Воронин, Г.В. Сноз, М.Ф. Васильев и др., 2006) наз ывают физиологическим лейкоцитозом.
При изучении динамики лейкоцитов в крови поросят-молочников, мы обнаружили, что у контрольных животных достаточно высокий их уровень сохранялся вплоть до 30-ти дневного возраста, и к моменту отъема наблюдалось снижение на 11,7%. При этом понижение уровня этого показателя происходило сдержанно, в среднем на 3% каждые 10 дней.
В крови поросят, полученных от свиноматок, которым в последние 30
дней в рацион вводили УДП железа, наблюдалось более интенсивное снижение количества белых клеток крови, в среднем на 6,4% подекадно. А в целом
за опыт, в этой группе данный показатель снизился на 27,8%, что существенно.
У поросят, которым УДП железа вводили дополнительно в подкормку,
наблюдалось еще более активное снижение количества лейкоцитов – 8,4%
каждые 10 дней. К концу эксперимента их количество снизилось у животных
данной группы на 36,9%, то есть почти в 1,5 раза.
В итоге перед отъемом в крови поросят опытных групп количество лейкоцитов было ниже, чем у контрольных животных, на 16,2 и 26,7%, соответственно.
Более детальное изучение причин достаточно высокого содержания белых
кровяных клеток в крови как контрольных, так и опытных животных, позволяет анализ лейкоцитарной формулы (табл. 3.13).
95
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 3.13 – Лейкоцитарная формула крови поросят-молочников (M±m, n=5)
Показатели
Моноциты, %
Лимфоциты, %
Сегментоядерные
нейтрофилы, %
Палочкоядерные
нейтрофилы, %
Юные нейтрофилы, %
Базофилы,%
Эозинофилы,%
Группа
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Возраст, дни
Новорожденные
10
20
30
45
3,5±0,08
3,9±0,11
4,1±0,09
43,0±0,9
42,6±1,32
41,5±1,12
47,3±0,4
47,2±0,3
47,8±0,2
2,3±0,08
3,4±0,18
3,3±0,23
1,91±0,03
1,39±0,07
1,55±0,09
1,05±0,02
0,53±0,03
0,72±0,04
0,94±0,03
0,98±0,02
1,03±0,03
3,4±0,07
4,2±0,13
3,8±0,17
46,0±2,2
45,3±1,51
47,7±1,05
44,5±0,3
44,8±0,2
43,8 ±0,4
2,6±0,01
2,7±0,15
2,5±0,17
1,65±0,01
1,41±0,01
1,48±0,02
0,83±0,03
0,51±0,01
0,72±0,02
1,02±0,02
1,08±0,01
1,21±0,02
4,1±0,11
3,9±0,12
4,2±0,18
45,0±1,3
45,8±1,26
47,2±1,32
44,7±0,1
45,1±0,3
44,2±0,7
2,4±0,04
2,4±0,21
2,6±0,12
1,73±0,07
1,21±0,07
1,12±0,08
0,89±0,04
0,47±0,03
0,68±0,04
1,18±0,05
1,12±0,03
0,99±0,02
4,2±0,12
4,4±0,13
4,9±0,06*
45,0±1,2
8
46,6±1,48
46,4±1,52
44,3±0,2
44,6±0,2
45,0±0,4*
2,3±0,03
2,2±0,09
2,2±0,11
1,87±0,03
0,71±0,01
0,91±0,01
0,82±0,02
0,57±0,02
0,59±0,02
1,12±0,02
0,92±0,01
0,83±0,03
3,6±0,15
4,2±0,11*
4,5±0,13*
45,0±1,1
45,1±2,4
44,0±2,6
45,8±0,4
46,0±0,2
46,9±0,1*
1,8±0,02
2,4±0,12
2,1±0,15
1,81±0,04
0,94±0,01
0,88±0,02
1,03±0,02
0,49±0,01
0,71±0,02
0,96±0,01
0,87±0,02
0,91±0,01
96
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В результате анализа данных, полученных при составлении лейкограммы,
мы установили, что у поросят всех групп достаточно высокое содержание
лейкоцитов наблюдалось вследствие большого количества нейтрофилов.
Основную
массу
нейтрофилов
в
крови
поросят
представляют
сегментоядерные клетки. Однако в их процентном соотношении мы
отмечали наименьшую тенденцию к изменению во время исследований. У
животных контрольной группы их количество в течение эксперимента
несколько снижалось и, в общем, к отъему было ниже на 3,3%, чем при
рождении. У поросят первой опытной группы также наблюдалась тенденция
к снижению количества сегментоядерных нейтрофилов, но менее активная –
в целом на 2,6%.
У поросят второй опытной группы количество сегментоядерных
нейтрофилов практически не изменилось (1,9%) по отношению к показателю
при рождении, что является предпосылкой к более активному и
продолжительному фагоцитозу (А. Ройт, Дж. Простов, Д. Мейл, 2000).
Наиболее яркие изменения наблюдались в относительном количестве
палочкоядерных и юных нейтрофилов. При рождении в крови поросят
опытных групп палочкоядерных нейтрофилов было больше, чем у
контрольных животных на 47,8 и 43,5%, соответственно. В контрольной
группе количество палочкоядерных нейтрофилов снизилось на 27,8%, а в
опытных на 41,7 и 57,1%, соответственно, по сравнению с аналогичным
показателем у новорожденных поросят. В 45-ти дневном возрасте количество
палочкоядерных нейтрофилов в первой опытной группе было выше на 33,3%,
а во второй опытной – на 16,7%, чем в контрольной. Что касается юных
нейтрофилов, то их количество в опытных группах снизилось на 47,9 и
76,1%, соответственно, в то время как в контрольной группе данный
показатель снизился лишь на 5,5%.
В целом, при анализе лейкоцитарной формулы мы установили, что
снижение количества нейтрофилов в крови поросят-молочников было
компенсировано
некоторым
увеличением
лимфоцитов (рис. 3.15).
97
количества
моноцитов
и
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
- лимфоциты;
- базофилы;
- нейтрофилы.
- эозинофилы;
- моноциты;
Рисунок 3.15 – Динамика процентного соотношения лейкоцитов
98
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В контрольной группе их количество увеличилось на 2,9 и 4,7%, в первой
опытной – на 7,7 и 5,9%, во второй опытной – на 9,8 и 6,0%, соответственно.
Количество базофилов и эозинофилов в крови контрольных и опытных
животных также снижалось в течение всего периода исследований. В
контрольной группе эти показатели были ниже на 1,9 и 2,1%, в 1-й опытной
на 8,2 и 12,6%, а во 2-й – на 1,4 и 13,2%, соответственно, по сравнению с
данными, полученными в первый день жизни поросят.
Как видно из приведенных данных наиболее значительное изменение
процентного соотношения клеток белой крови произошло у поросят второй
опытной группы, получавших в течение подсосного периода УДП железа в
составе подкормки.
Биохимические показатели крови поросят-молочников
Как известно (А. Уайт, Ф. Хендлер и др., 1981), белки крови выполняют
ряд жизненно важных функций. За счет них происходит поддержание постоянства онкотического давления, рН крови, уровень катионов крови. Также
они играют важную роль в образовании иммунитета, комплексов с углеводами, липидами, гормонами и другими веществами.
Для определения состояния белкового обмена мы исследовали динамику
количественного содержания общего белка в сыворотке крови поросят, а
также процентное соотношение белковых фракций (табл. 3.14) в возрасте 10,
20 и 45 дней.
Анализ динамики количества общего белка сыворотки крови показал, что
у поросят опытных групп белковый обмен протекал более интенсивно. Так к
отъему (45 дней) в первой опытной группе данный показатель был выше, по
сравнению с контролем, на 12,5% (p<0,01), а во второй – на 21,1% (p<0,01).
При сопоставлении результатов определения белковых фракций мы
установили, что значительных изменений в сыворотке крови поросят как
99
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
контрольной, так и опытных групп, в течение периода исследований, не
произошло.
Во фракции альбуминов установлено, что у поросят контрольной группы
их количество снизилось на 0,22%, в первой опытной – на 1,3, а во второй –
на 0,23%. Достоверной разницы в содержании альбуминов в сыворотке крови
контрольных и опытных животных обнаружено не было.
Таблица 3.14 – Показатели белкового обмена крови поросят-молочников
(M±m, n=5)
Показатели
Группа
Общий белок,
г/100 мл
Альбумины, %
α
Глобулины, %
β
γ
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
10
52,8±0,22
54,2±0,28
55,3±0,18
43,7±1,26
45,3±0,94
44,5±1,12
15,4±0,08
15,3±0,11
14,9±0,07
18,1±0,12
17,2±0,08
17,9±0,10
22,8±0,07
22,2±0,11
22,7±0,08
Возраст, дни
20
53,5±0,30
56,6±0,33*
60,9±0,30*
43,4±0,61
44,8±0,34
44,1±2,59
15,8±0,19
15,5±0,10
14,9±0,23*
18,3±0,11
17,1±0,03
17,2±0,13*
22,5±0,12
22,6±0,05
23,8±0,11*
45
54,4±0,27
61,2±0,25**
65,9±0,33**
43,6±0,50
44,7±0,36
44,4±0,34
16,1±0,12
15,1±0,08*
14,8±0,13*
18,6±0,08
17,3±0,06*
16,7±0,14*
21,7±0,12
22,9±0,10*
24,1±0,09*
Процентное соотношение глобулинов в сыворотке крови у животных как
контрольной, так и опытных групп изменилось в большей степени.
Достоверные различия с контрольными животными отмечались в первой
опытной группе в возрасте 20-ти и 45-ти дней, а во второй только в 45-ти
дневном возрасте.
100
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В сыворотке крови контрольных животных количество α-глобулинов
увеличилось на 4,5%, β-глобулинов – на 2,8%, а содержание γ-глобулинов
снизилось на 5,1%, по сравнению с данными исследования крови поросят
суточного возраста.
У животных первой опытной группы количество α-глобулинов снизилось
на 1,3%. В свою очередь несколько возросло количество β- и γ-глобулинов –
на 0,6 и 3,2%, соответственно.
У поросят второй опытной группы количество α- и β-глобулинов
снизилось на 0,7 и 7,2%, а содержание γ-глобулинов повысилось на 6,2%.
Интегрирующим показателем обмена углеводов в организме поросят
служит содержание глюкозы в сыворотке крови (табл. 3.15).
При анализе данного показателя у поросят-молочников мы установили,
что во всех группах прослеживалась тенденция к увеличению её количества,
однако в опытных группах концентрация данного метаболита повышалась
значительно активнее.
Таблица 3.15 – Показатели углеводного и минерального обмена поросятмолочников (M±m, n=5)
Показатели
Группа
Глюкоза,
ммоль/л
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Кальций, мг%
Фосфор, мг%
Резервная щелочность, об.
% СО2
Периодичность исследований, дни
10
20
45
3,32±0,03
3,28±0,05
3,43±0,02
3,34±0,02
3,37±0,04
3,82±0,04*
3,41±0,04
3,45±0,05
4,11±0,03*
9,73±0,05
9,76±0,07
9,75±0,09
9,64±0,08
9,89±0,06
10,11±0,07*
9,58±0,07
10,04±0,09
10,65±0,04*
4,83±0,03
5,17±0,02
5,42±0,06
4,79±0,02
5,11±0,01
5,56±0,02*
4,76±0,02
5,13±0,04
5,73±0,03*
41,3±0,4
42,8±0,03
42,7±0,04
44,2±0,5
45,7±0,07*
46,5±0,02*
44,7±0,7
45,4±0,04*
47,1±0,03*
101
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Для сравнения, можно отметить, что в 10-ти дневном возрасте у поросят
опытных групп количество глюкозы в крови было на 0,02 и 0,09 ммоль/л
больше, чем у контрольных животных. При этом разница была статистически
недостоверна. В конце научно-хозяйственного опыта мы обнаружили
достоверно большую разницу с контролем в первой опытной группе в 95, а
во второй 99% случаев, что соответствует 11,4 и 19,8%, соответственно.
Также в сыворотке крови опытных животных, по сравнению с контролем,
перед отъемом наблюдалось достоверно большее содержание общего
кальция и неорганического фосфора – в 1-й опытной на 3,7 и 2,6 %, а во 2-й
на 9,2 и 5,7%, соответственно. Графически разница в динамике содержания
общего кальция и фосфора в сыворотке крови поросят-молочников отражена
на рисунке 3.16.
Рисунок 3.16 – Динамика общего кальция в сыворотке крови поросятмолочников
102
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
О более активном метаболизме кальция и фосфора у животных опытных
групп говорит и тот факт, что в 10-ти дневном возрасте количество кальция у
них было ниже на 0,9 и 1,6%, а фосфора на 0,8 и 1,5%, чем в контрольной
группе, соответственно (рис. 3.17).
Если сравнивать данные опытных групп, то у поросят второй группы
наблюдается более активное повышение глюкозы, кальция и фосфора на
протяжении всего эксперимента.
Рисунок 3.17 – Динамика неорганического фосфора в сыворотке крови
поросят-молочников
Резервная щелочность сыворотки крови с момента рождения и до отъема в
контрольной группе повысилась на 3,4%, а в опытных на 5,2 и 5,4%,
соответственно. В 45-ти дневном возрасте разница с контролем составила в
первой опытной группе 8,9% (p<0,05), а во второй – 10,3% (p<0,05).
Известно, что одной из наиболее распространенных патологий у поросят,
в особенности в подсосный период, является дефицит железа. Эта
103
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
закономерность связана, прежде всего, с недостаточным поступлением
данного металла с молоком свиноматок.
Для характеристики
железодефицитных состояний, кроме изучения
особенностей количественного
используют
такие
показатели
состава эритроцитов и гемоглобина,
как
сывороточное
железо,
общая
железосвязывающая способность сыворотки крови (ОЖСС), процент
насыщения
сыворотки
крови
трансферрином,
а
также
латентная
железосвязывающая способность сыворотки крови (ЛЖСС). В связи с этим,
при изучении особенностей метаболизма железа в крови поросятмолочников, мы использовали именно вышеперечисленные показатели (табл.
3.16), определение которых проводили в возрасте 10, 20, 30 и 45 суток.
104
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 3.16 – Показатели обмена железа в организме поросят-молочников
(M±m, n=5)
Показатели
Сывороточное
железо,
мкмоль/л
ОЖСС,
мкмоль/л
Процент насыщения трансферрином, %
ЛЖСС,
мкмоль/л
Группа
Периодичность исследований, дни
10
20
30
45
Контроль
25,3±0,04
23,6±0,08
23,3±0,07
22,1±0,04
Опыт 1
25,9±0,09
24,4±0,03
24,8±0,05
23,7±0,02
Опыт 2
26,4±0,11
26,9±0,04* 29,9±0,06* 32,1±0,04*
Контроль
51,3±0,12
53,5±0,10
57,4±0,11
58,2±0,08
Опыт 1
50,2±0,11
50,0±0,07
51,4±0,13
53,8±0,11
Опыт 2
51,1±0,08
48,4±0,09
46,1±0,14
41,7±0,12
Контроль
49,3±0,12
44,1±0,17
40,6±0,12
37,9±0,28
Опыт 1
51,6±0,14
48,8±0,15* 48,2±0,14* 44,1±0,21*
Опыт 2
51,7±0,09
55,6±0,11* 64,9±0,12* 76,9±0,09*
Контроль
26,0±0,04
29,9±0,06
34,1±0,03
36,1±0,05
Опыт 1
24,3±0,07
25,6±0,04
26,6±0,07
30,1±0,04
Опыт 2
24,7±0,09
21,5±0,03
16,2±0,04
9,6±0,06
При изучении полученных данных нами было установлено, что
железодефицитных состояний у контрольных и опытных животных выявлено
не было. Как видно из таблицы, в сыворотке крови поросят контрольной и
первой опытной групп количество железа снижалось, в особенности в период
с 10-ти до 20-дневного возраста. В целом за подсосный период данный
показатель у животных этих групп снизился на 14,5 и 9,3%, соответственно.
Во второй опытной группе в процессе исследований наблюдались более
контрастные изменения. У поросят, получавших с подкормкой УДП железа,
количество данного микроэлемента в сыворотке крови повысилось, по
105
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
сравнению с данными, полученными в суточном возрасте, на 21,6%, что
существенно.
ОЖСС сыворотки крови у животных контрольной и первой опытной
групп в течение научно-хозяйственного опыта повысилась на 13,5 и 7,2%.
Как известно, данный показатель характеризует количество железа, которое
может связываться с трансферрином, и чем меньше фактическое количество
сывороточного железа, тем выше данный показатель.
Во второй опытной группе наблюдалась четкая тенденция к снижению
ОЖСС в течение эксперимента, и к моменту отъема показатель снизился на
22,5%. В динамике ЛЖСС наблюдалась сходная картина, так как этот
показатель отражает разность между ОЖСС и количеством сывороточного
железа.
Процент насыщения сыворотки крови трансферрином в контрольной
группе снизился на 30,1, а в первой опытной группе на 17,0%. Во второй
опытной данный показатель увеличился на 48,7%, что характеризует
достаточно высокое содержание сывороточного железа. Принимая во
внимание тот факт, что данный показатель фактически характеризует
количество трансферрина, связанного с железом, то можно с уверенностью
сказать о значительном положительном воздействии УДП железа на обмен
данного металла в организме поросят.
Для анализа функционального состояния печени мы определяли
активность аспаргиновой и аланиновой трансфераз (табл. 3.17).
106
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 3.17 – Активность аминотрансфераз в сыворотке крови поросятмолочников, ммоль/ч·мл (M±m, n=5)
Показатели
АлАТ
АсАТ
Коэффициент
Периодичность исследований
Группы
10
20
30
45
Контроль
0,24±0,06
0,26±0,03
0,28±0,04
0,24±0,02
Опыт 1
0,26±0,03
0,25±0,01
0,26±0,05
0,27±0,03
Опыт 2
0,23±0,02
0,24±0.05
0,27±0,02
0,32±0,01
Контроль
0,36±0,01
0,38±0,05
0,42±0,06
0,37±0,08
Опыт 1
0,39±0,02
0,36±0,07
0,38±0,08
0,36±0,05
Опыт 2
0,36±0,08
0,37±0,04
0,35±0,02
0,40±0,04
Контроль
1,500,03
1,460,09
1,500,02
1,540,01
Опыт 1
1,500,07
1,440,08
1,460,06
1,330,09
Опыт 2
1,570,05
1,540,03
1,300,04* 1,250,08*
де Ритиса
Это важнейшие ферменты обмена аминокислот, а их соотношение даёт
достаточно полный объём информации о состоянии важнейших звеньев
метаболизма в органах и тканях животных и человека (И.П. Кондрахин и др.,
1985; И.М. Рослый, С.В. Абрамов, 2003; Д. Мейер, Д. Харви, 2007).
Кроме активности данных ферментов нами было проанализировано их
соотношение – коэффициент де Ритиса (АсАТ/АлАТ). В клинической
биохимии принято считать в норме величину коэффициента де Ритиса в
пределах 1,4 – 1,5. Его высокие значения (>2) указывают на то, что поражена
сердечная мышца, низкие (<1) – печень (В.В. Меньшиков, 1987; В.С.
Камышников, 1999).
107
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Полученные нами данные свидетельствуют о том, что у всех животных
активность АлАТ и АсАТ находилась в пределах физиологической нормы.
Однако при анализе коэффициента де Ритиса мы установили, что у опытных
поросят наблюдалась тенденция к его снижению. Данный факт указывает на
то, что у животных отмечалось некоторое усиление функции печени (С.С.
Абрамов и [др.], 2007). Это, по-видимому, объясняется более интенсивным
белковым обменом у поросят 2-й опытной группы.
3.2.2.2 Иммунобиологический статус поросят-молочников
Для
оценки функциональной активности иммунной системы мы
исследовали бактерицидную, лизоцимную активность сыворотки крови,
проводили количественный анализ факторов клеточного иммунитета, а также
оценивали функциональную и метаболическую активность нейтрофилов
(НСТ-тест) (И.М. Карпуть, 2009).
Иммунобиологические показатели определяли в 10-ти, 20-ти и 45-ти
дневном возрасте.
В результате исследований нами было установлено, что у всех животных
наблюдались сравнительно низкие показатели бактерицидной и лизоцимной
активности сыворотки крови (табл. 3.18).
108
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 3.18 – Бактерицидная и лизоцимная активность сыворотки крови
поросят молочников, % (M±m, n=5)
Показатели
Возраст,
дни
Бактерицидная активность
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Лизоцимная активность
Контроль
16,1±0,18 13,5±0,42
Опыт 1
Опыт 2
13,1±0,43
13,7±0,21
10
15,7±0,11 15,9±0,22
20
16,9±0,21 16,8±0,16 17,7±0,12* 14,2±0,27
14,6±0,18 14,9±0,12*
45
17,3±0,12 17,8±0,18 18,4±0,21* 15,1±0,22
14,8±0,17 16,5±0,24*
Наиболее высокие результаты наблюдались у поросят второй опытной
группы. Как видно из таблицы у животных данной группы бактерицидная и
лизоцимная активность на всех этапах исследования сыворотки крови
превышали аналогичные показатели у контрольных животных. Так, в 10-ти,
20-ти и 45-ти дневном возрасте бактерицидная активность была выше 2,5, 4,7
(p<0,05) и 6,4% (p<0,05), соответственно. В свою очередь лизоцимная
активность в тот же период превышала аналогичный показатель у поросят
контрольной группы на 1,5, 4,9 и 9,3%, соответственно. У животных первой
опытной группы в 10-ти дневном возрасте бактерицидная активность была
выше 1,3, а в 45 дней – на 2,9%, чем у контрольных. Что касается
лизоцимной активности, то у животных контрольной группы данный
показатель на всем протяжении эксперимента был несколько выше, чем в
первой опытной, однако разница оказалась статистически недостоверна.
При исследовании показателей клеточного иммунитета (табл. 3.19) мы
заметили, что во всех группах наблюдается тенденция к более активному
росту количества Т-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-киллеров (рис. 3.18, 3.19 и
3.20).
109
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 3.19 – Количественный состав популяции лимфоцитов, %
(M±m, n=5)
Показатели
СД3 (Т-лимфоциты)
СД4 (Т-хелперы)
СД8
(Т-цитотоксические)
СД16 (Т-киллеры)
СД20 (В-лимфоциты)
Возраст, дни
Группы
10
20
45
Контроль
63,70,21
65,20,37
65,70,31
Опыт 1
61,40,28
65,10,29
65,90,43
Опыт 2
59,90,34
64,80,23
67,10,27*
Контроль
28,80,49
28,50,76
29,30,85
Опыт 1
29,60,35
30,20,66
32,10,73*
Опыт 2
32,90,22
34,50,29*
36,70,42*
Контроль
34,90,34
38,70,54
38,50,59
Опыт 1
35,20,76
35,40,43
36,70,42
Опыт 2
34,80,58
38,50,56
38,30,29
Контроль
27,10,67
26,30,64
28,30,81
Опыт 1
28,40,58
27,40,55
28,70,73
Опыт 2
27,30,56
29,80,47*
31,40,55*
Контроль
6,20,12
6,60,13
7,20,14
Опыт 1
5,90,11
6,70,10
6,90,17
Опыт 2
6,40,15
6,80,12
7,30,13
Согласно нашим данным в наибольше степени это наблюдалось у поросят,
получавших УД железо с подкормкой. Если давать общую характеристику
динамики увеличения данных показателей, то к отъему, по сравнению с 10-ти
дневным возрастом, в этой группе наблюдался рост на 12, 11,5 и 15%,
соответственно.
110
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Рисунок 3.18 – Динамика количества Т-лимфоцитов в крови поросятмолочников
Рисунок 3.19 – Динамика количества Т-хелперов в крови поросятмолочников
111
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Рисунок 3.20 – Динамика количества Т-киллеров в крови поросятмолочников
В то же время в контрольной группе эти показатели выросли 3,1, 1,7 и
4,4%. В итоге, разница между контрольной и второй опытной группой в 45ти дневном возрасте по Т-лимфоцитам составила 2,1%, по Т-хелперам –
25,3%, а по Т-киллерам – 10,9%, с достоверностью в 95% случаев. Что
касается первой опытной группы, то достоверная разница с контролем
наблюдалась только по количеству Т-хелперов и составила 9,6%.
По результатам спонтанного НСТ-теста (табл. 3.20) мы установили, что
как в контрольных, так и в опытных группах наблюдалось сравнительно
высокая активность нейтрофилов. При этом достоверных различий между
группами обнаружено не было. Возрастная динамика данного показателя за
период исследований в контрольной группе составила 3,6%, в первой
опытной – 5,6, а во второй – 5,1%.
При анализе данных стимулированного НСТ-теста мы обнаружили, что во
второй опытной группе фагоцитарная функция нейтрофилов на 20-й и 45-й
112
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
дни исследований выражена более активно, чем в контрольной. Так, в
сравнении с контрольными животными, данный показатель в 20-ти дневном
возрасте был выше на 6 (p<0,05), а в 45-ти дневном на 16,4% (p<0,05), что
существенно.
Таблица 3.20 – Показатели функциональной и метаболической функции
нейтрофилов (M±m, n=5)
Показатели
СпонНСТ,%
СтимНСТ,%
ИС (индекс
стимуляции)
Группы
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
Опыт 1
Опты 2
Периодичность исследований, дни
10
20
45
19,7±0,31
19,1±0,34
20,4±0,27
19,5±0,23
19,7±0,41
20,6±0,17
19,8±0,17
19,4±0,14
20,8±0,21
41,3±0,71
41,7±0,38
41,5±0,43
41,7±0,52
42,3±0,32
43,1±0,64*
41,4±0,45
44,2±0,41*
48,3±0,52**
2,09±0,09
2,18±0,11
2,03±0,07
2,13±0,05
2,14±0,06
2,09±0,10
2,19±0,07
2,27±0,04
2,32±0,09*
В первой опытной группе данный показатель также был выше, чем в
контрольной. Однако достоверная разница в 3,9% (p<0,05) отмечалась только
на 45-й день эксперимента.
На рисунке 3.21 видно, что индекс стимуляции в контрольной и первой
опытной группах на 20-й день имел тенденцию к повышению, но в
последствие снизился до первоначальных данных. В то же время во второй
опытной группе наблюдался стабильный рост данного показателя, что
характеризует повышение фагоцитарной активности нейтрофилов по
отношению к антигену.
113
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Рисунок 3.21 – Индекс стимуляции нейтрофилов
В целом можно сказать, что ежедневное введение УДП железа в состав
подкормки поросят-молочников значительно улучшает состояние иммунной
системы, что проявляется в значениях клеточных и функциональных
резервов.
3.2.2.3 Интенсивность роста поросят в подсосный период
Важнейшим критерием, характеризующим интенсивность роста поросят и
эффективность используемых рационов, является динамика живой массы.
Для контроля динамики живой массы поросят осуществляли поголовное
взвешивание на электронных весах. Молодняк взвешивали при рождении, а
также в возрасте 10-ти, 20-ти, 30-ти и 45-ти дней. В таблице 3.21 приведены
данные по каждой группе.
114
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 3.21 – Динамика живой массы поросят-молочников (M±m, n=5)
Возраст, дни
Группа
Контрольная
Опыт 1
Опыт 2
При рождении
0,895±0,012
0,930±0,008
0,916±0,005
10
1,985±0,034
2,116±0,043*
2,112±0,055
20
4,564±0,095
4,887±0,045**
4,982±0,086**
30
6,945±0,110
7,492±0,114*
7,724±0,118**
45
9,350±0,089
10,083±0,130** 10,423±0,171**
Как видно из таблицы, живая масса новорожденных поросят опытных
групп превышала массу животных контрольной группы на 3,8 и 2,3 % соответственно, а через 10 дней опыта разница составила 6,2 и 6,0%.
Это характеризует тот факт, что введение УДП железа способствовало
более активному росту плода, что в свою очередь явилось предпосылкой к
рождению более активного и жизнеспособного молодняка.
Разница между показателями живой массы поросят 1-й и 2-й опытных
групп составила при рождении 1,5%, а на 10-й день – 0,2%, однако данные
оказались статистически недостоверными. Такой результат, по-видимому,
объясняется тем, что свиноматки опытных групп получали одинаковое количество УДП железа. Однако после включения нанопорошка железа в состав подкормки поросят 2-й опытной группы разница в живой массе с животными 1-й опытной группы на 20-й, 30-й дни увеличилась на 1,9 и 3,0%,
соответственно, а к концу эксперимента составила 3,7% (рис. 3.22).
115
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Рисунок 3.22 – Динамика живой массы поросят-молочников
В опытных группах, в сравнении с контролем, в 20-ти дневном возрасте
разница составила в 1-й опытной группе 7,1%, а во 2-й – 9,2% (p<0,01).
В дальнейшем поросята опытных групп также более интенсивно набирали
живую массу. На 30-й день средняя масса поросят 1-й опытной группы превышала массу контрольных животных на 7,9% (p<0,05), однако на 45-й день
разница несколько сократилась и составила 7,8% (p<0,01).
Во второй опытной группе на протяжении всего эксперимента процент
разницы с контрольной группой поросят стабильно увеличивался. В 30-ти
дневном возрасте он составил 11,2% (p<0,01), а к отъему – 11,5% (p<0,01).
Для анализа интенсивности роста поросят расчетным методом определяли
среднесуточные приросты – абсолютный и относительный (табл. 3.22), а
также коэффициент увеличения живой массы (К).
116
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 3.22 – Показатели интенсивности роста поросят-молочников
(M±m, n=5)
Группа
Возраст, дни
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Коэффициент увеличения живой массы (К)
10
2,22±0,06
2,28±0,04
2,31±0,05
20
5,10±0,07
5,26±0,09
5,44±0,12*
30
7,76±0,04
8,06±0,11*
8,43±0,09*
45
10,45±0,15
10,84±0,12*
11,38±0,11*
Прирост живой массы
Валовый, кг
8,455±0,21
9,153±0,32*
9,507±0,18*
188±3
203±5*
211±3*
165,1±0,8
166,2±0,1*
167,7±0,4*
Среднесуточный
абсолютный, г
относительный,%
Показатель абсолютного прироста – это наиболее простой и удобный показатель скорости роста животных, который выражается как их живая масса
в определенном возрасте и величина прироста в единицу времени.
Анализируя интенсивность роста поросят-молочников мы заметили, что
исследуемые показатели в опытных группах были выше, чем в контрольной.
В целом за подсосный период у поросят контрольной группы живая масса
увеличилась на 8,455 кг. У животных 1-й опытной группы валовый прирост
был на 8,3, а во 2-й опытной на 12,4% выше, чем в контроле.
В свою очередь абсолютный среднесуточный прирост поросят опытных
групп за весь учетный период был достоверно выше на 8 и 12,2% соответственно, в сравнении с контрольными животными.
117
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Однако важно отметить, что абсолютные показатели прироста (в том числе валовый абсолютный прирост) не в полной мере отражают степень интенсивности роста и не определяют взаимоотношений между величиной растущей массы тела животного и скоростью их роста (А.И. Нетеса, 2001; Ю. Петрушенко, 2005; Р. Сусол, 2005). В связи с этим нами были рассчитаны коэффициент кратности увеличения живой массы и относительный среднесуточный прирост.
Согласно результатам исследований видно, что поросята-молочники
опытных групп опережают по кратности увеличения живой массы животныханалогов контрольной группы.
Коэффициент увеличения живой массы у животных всех групп стабильно
повышался. У поросят опытных групп в течение всего учетного периода данный показатель был несколько выше, чем в контрольной группе. При этом в
10-ти дневном возрасте в опытных группах разница с контролем составляла
2,7 и 4,1%, соответственно, однако была статистически недостоверна. Достоверную разницу при определении коэффициента увеличения живой массы в
20-ти дневном возрасте мы отмечали у поросят, получавших УДП железа с
подкормкой (опыт 2). По сравнению с контрольными животными, во 2-й
опытной группе разница по исследуемому показателю имела тенденцию к
стабильному увеличению, и к концу учетного периода составила 8,9%
(p<0,05).
Что касается 1-й опытной группы, то до 30-ти дневного возраста мы
наблюдали увеличение разницы с контролем, которая к этому времени составила 3,9%, а при анализе в 45 дней разница сократилась до 3,7%.
Относительный среднесуточный прирост живой массы у животных опытных групп был достоверно выше, чем в контроле на 1,1 (p<0,05) и 2,6%
(p<0,05), соответственно, что в целом характеризует более активную скорость роста поросят-молочников опытных групп.
118
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
3.2.2.4 Переваримость и использование питательных веществ рациона
поросятами
На фоне научно-хозяйственного эксперимента, по результатам которого
нами были получены данные характеризующие положительное влияние УДП
железа на гематологические показатели и интенсивность роста поросятмолочников, мы провели балансовый опыт. Его цель заключалась в изучении
особенностей влияния УДП железа на процесс переваривания и использования основных питательных веществ рациона поросятами.
В результате анализа переваримости питательных веществ рациона животными было установлено, что обогащение его ультрадисперсным порошком железа способствовало повышению переваримости основных питательных веществ (табл. 3.23).
Коэффициент переваримости по сухому веществу, в целом, в первом и
втором опыте был достоверно выше на 8,94% и 3,17% соответственно. Также
отчетливо заметен эффект УДП железа в увеличении переваримости сырого
протеина и БЭВ. В опытных группах количество переваренного сырого пр отеина выше на 7,09% и 5,59%, а БЭВ – на 7% и 3,51%, соответственно.
119
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 3.23 – Коэффициенты переваримости питательных веществ рациона, % (M±m, n=9)
Показатель
Группа
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Сухое вещество
70,88±0,16
77,22±0,16**
73,13±0,10*
Сырой протеин
64,56±0,63
69,14±0,13*
68,11±0,11**
Сырой жир
73,64±0,34
75,11±0,10*
74,68±0,33
Сырая клетчатка
43,76±0,30
47,92±0,15**
43,12±0,43
БЭВ
80,24±0,26
85,86±0,14**
83,06±0,39*
Коэффициент переваримости жира и клетчатки был достоверно выше по
сравнению с контролем в первой опытной группе – на 1,99% и 7,39%, соответственно. Во второй опытной группе переваримость сырого жира и клетчатки возросла на 1,41% и 0,84%, однако данная разница оказалась статистически недостоверной.
Введение в рацион поросят-отъемышей УДП железа способствовало более
эффективному использованию азота корма (табл. 3.24). В результате исследований было установлено, что баланс азота во всех группах животных был
положительным. В организме подсвинков опытных групп азота отложилось
больше по сравнению с животными контрольной группы на 0,62 (p<0,05) и
0,28 г, соответственно.
Использование азота от принятого у молодняка свиней опытных групп
было выше, соответственно, на 5,66 (р<0,01) и 0,84% по сравнению с контрольной группой.
У животных групп использование азота от переваренного его количества,
по сравнению с аналогами контрольной группы, также было выше на 4,08
(p<0,01) и 0,14%, соответственно.
120
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 3.24 – Эффективность использования азота (M±m, n=9)
Показатель
Группа
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Баланс азота (на 1 голову в сутки)
Принято с кормом, г
30,88±0,16
30,87±0,17
30,28±0,21
Выделено в кале, г
8,27±0,48
7,93±0,36*
7,82±0,49
Переварено, г
22,60±0,11
22,94±0,13
22,32±0,15
Выделено в моче, г
11,64±0,86
11,36±0,92
11,48±0,79
Отложено в организме, г
10,96±0,61
11,58±0,43*
11,24±0,51
Коэффициент использования, %
35,52±0,71
36,81±0,54*
36,26±0,82
Отложено от принятого, %
35,50±0,33
37,51±0,81**
35,8±0,33
Отложено от переваренного, %
48,50±0,77
50,48±0,15**
48,57±0,34
При анализе результатов использования кальция и фосфора рациона нами
было установлено, что, как и при исследовании азота, достоверные различия
наблюдались между животными контрольной и первой опытной группы. Во
второй опытной группе данные отличались в незначительной степени, со
сравнительно большой ошибкой средней арифметической величины (табл.
3.25).
В первой опытной группе, то есть при ежедневном введении УДП железа
в указанной дозировке, кальция усвоилось на 4,6 (p<0,05), а фосфора на
15,6% (p<0,05) больше, по сравнению с контрольной.
Это происходило, как показали данные, за счет меньшего (на 14,4 и 16,2%,
соответственно) выделения данных веществ с калом.
121
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 3.25 – Эффективность использования кальция и фосфора
(M±m, n=9)
Группа
Показатель
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Баланс кальция (на 1 голову в сутки)
Принято с кормом, г
11,52
11,41
11,38
Выделено в кале, г
2,78±0,14
2,38±0,17*
2,61±0,12
Переварено, г
8,74±0,12
9,03±0,16
8,77±0,11
Выделено в моче, г
0,27±0,03
0,17±0,01
0,21±0,02
Отложено в организме, г
8,47±0,11
8,86±0,16*
8,56±0,13
Отложено от принятого, %
73,52±1,38
77,65±1,17*
75,22±1,10
Отложено от переваренного, %
96,91±0,61
98,12±0,75*
97,61±0,64
Баланс фосфора (на 1 голову в сутки)
Принято с кормом, г
10,25
10,21
10,31
Выделено в кале, г
3,87±0,22
3,33±0,28*
3,76±0,41
Переварено, г
6,38±0,41
6,88±0,36
6,55±0,28
Выделено в моче, г
2,34±0,11
2,21±0,12
2,32±0,18
Отложено в организме, г
4,04±0,22
4,67±0,34*
4,23±0,21
Отложено от принятого, %
39,41±1,25
45,08±1,31*
41,03±1,34
Отложено от переваренного, %
63,32±1,14
67,88±1,39*
64,58±1,18
Во второй опытной группе кальция было усвоено на 1,1, а фосфора на
4,7% больше, чем в контроле, однако данные были достоверны лишь в 50%
случаев (p<0,5), что не достаточно для биологических исследований.
122
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Глава 4. Влияние наноразмерного порошка железа на физиологические
показатели, продуктивность свиней и качество продуктов убоя
4.1 Материал и методы исследований
С целью изучения воздействия данного препарата на организм свиней в
период доращивания и откорма и отработки оптимальной кратности дачи на
кроликах, ориентируясь на ранее проведенный опыт по определению доз ировки, она была в количестве 0,08 мг на один килограмм живой массы животного.
Экспериментальная работа проводилась в период со 2 апреля 2009 г ода по 2 июля 2009 года в хозяйстве ООО «Рязанский бекон» Пронского
района Рязанской области и включала в себя научно -хозяйственные исследования на свиньях в период доращивания и откорма, за время которых
были изучены:
1. Влияние нанопорошка железа на физиологическое состояние свиней в период доращивания и откорма (живая масса, среднесуточный и валовой приросты животных).
2. Действие
УДП железа
на
морфологические, биохимические
показатели крови и сыворотки крови опытных животных.
3. Действие УДП железа на органолептические, физико-химические
и биохимические показатели мышечной и жировой ткани.
4. Влияние ультрадисперсного железа на гистологическое строение мышечной ткани и ткани печени подопытных животных.
Для проведения данной серии опытов были сформированы три группы
свиней в возрасте 3,5 месяцев в количестве 24 голов (по 8 голов в группе).
Контрольный убой подопытных животных и отбор образцов тканей
проводился в условиях убойного пункта ООО «Рязанский бекон» Пронского района Рязанской области с соблюдением существующих правил и
методик. Минеральный состав мышечной ткани подопытных животных
определялся в испытательной лаборатории продукции при ФГУ «Рязанский
123
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ЦСМ», г. Рязань.
Приготовление и исследование гистологических срезов проводилось в
условиях лаборатории ФГОУ ВПО РГAТУ им. П.А. Костычева.
Третья серия опытов (физиологический опыт) проводилась в период с 20 ноября 2009 года по 10 января 2010 года и включала в себя опыт по исследованию влияния препарата железа на переваримость основных питательных веществ корма свиньями.
Опыт был поставлен на трех головах свиней - аналогов в возрасте 4-х месяцев, которые находились в условиях ООО «Рязанский бекон».
Исследование проб корма и проб кала при проведении балансового
опыта выполнялись в биохимическом отделе лаборатории при ГУ «Рязанская областная ветеринарная лаборатория».
4.2 Результаты исследований
4.2.1 Влияние наноразмерного порошка железа на прирост живой
массы свиней в период доращивания и откорма
Для изучения влияния нанопорошка железа на физиологическое состояние помесных свиней в период доращивания и откорма были сформированы
три группы по восемь голов в каждой. Возраст животных в контрольной и
опытных группах на начало проведения эксперимента составлял 3,5 месяцев.
Контрольное взвешивание животных проводилось в период 10, 20, 30, 60,
90, и 120 дней. На протяжении всего опыта велись наблюдения за общим
состоянием и физиологическими показателями свиней. Все животные
находились в свинарнике в одинаковых условиях содержания и кормл ения.
Животные контрольной группы не получали исследуемый препарат,
а содержались исключительно на общехозяйственном рационе кормл ения; вторая группа (опыт 1) помимо общехозяйственного рациона, п олучала в качестве биологически активной добавки УДП железо в доз и124
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ровке 0,08 мг на килограмм живой массы семь дней в месяц; третья
группа животных (опыт 2) также как и первая опытная группа получала
УДПFe в той же дозировке, но ежедневно.
На протяжении всего времени проведения эксперимента животные
во всех группах были здоровы, активны и отличались хорошим аппет итом. Данные по изменению живой массы и среднесуточному приросту
ее представлены в таблице 4.1.
Анализируя данные таблицы 4.1, нами был сделан вывод, что прирост
живой массы у животных опытных групп на протяжении всего эксперимента
стабильно превосходил аналогичный показатель в контрольной группе. В
частности введение нанопорошка железа в основной рацион опытных свиней
способствовало увеличению живой массы на 60-й день опыта в первой
опытной группе на 8,2% и во второй опытной группе на 11,5% по сравнению
с аналогичным показателем контрольной группы.
Таблица 4.1 – Изменение живой массы подопытных свиней за период
проведения опыта, кг (n=8)
Дни опыта
Группы
Опытные
Контрольная
1
290,22
35,50,38
420,24
480,19*
660,70**
811,03*
До опыта
30 0,28
10
36 0,34
20
41 0,63
30
46 0,60
60
610,53
90
770,49
Предубойная
940,62
970,92
живая масса
Среднесуточный
0,533
0,566
прирост
Примечание: достоверно при -*Р < 0,01,**Р < 0,001
125
2
290,21
360,47
420,40
490,27**
680,71**
83,50,34**
1020,78**
0,600
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
На время окончание проведения опыта средняя живая масса животных
первой опытной группы была на 3,2% выше живой массы животных контрольной группы. Максимальное влияние ультрадисперсного порошка железа на прирост живой массы животных наблюдалось во второй опытной группе. Животные данной группы в среднем превзошли по данному показателю
контрольных животных на 8,5%.
Графическое отображение изменения живой массы свиней за период
эксперимента отображено на рисунке 4.1.
Рисунок 4.1 – Изменение живой массы свиней.
Можно предположить, что положительное влияние нанопорошка ж елеза на прирост живой массы опытных животных объясняется спосо бностью данного препарата катализировать биохимические процессы в
организме, что, в свою очередь, усиливает переваримость и усвоение питательных
веществ
рациона,
повышает
активность
восстановительных реакций и обмен веществ.
126
окислительно -
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Данные предположения подтверждаются клиническими и биохимическими исследованиями крови контрольных и опытных животных, опытом по изучению влияния нанокристаллического железа на переваримость
основных питательных веществ рациона свиней (таблица 11), а также ранее
проведенными исследованиями ученых по данному вопросу (Л.Е. Амплеева,
2006; Л.В. Коваленко, Г.В. Павлов, Г.Э. Фолманис, 1998; А.А. Назарова,
2009).
4.2.2 Влияние наноразмерного железа на гематологические
показатели
С целью исследования влияния нанокристаллического порошка жел еза на морфологические показатели крови подопытных свиней проводили
морфологический, иммунологический и биохимический анализ крови.
Отбор крови осуществлялся из ушной вены по общепринятой методике в
период 10, 30, 60 и 120 дней проведения опыта. Показатели крови (количество эритроцитов, гемоглобина, тромбоцитов, лейкоцитов, лейкоцитарная
формула) определялись по унифицированным методикам клинической диагностики. До эксперимента все животные имели показатели в пределах физиологической нормы, соответствующие их возрасту. Результаты морфологического исследования крови животных приведены в таблице 4.2.
Как видно из данной таблицы у животных, получавших ультрадисперсный порошок железа в качестве биологически активной добавки к основному
рациону, наблюдался значительное увеличение количества эритроцитов и
гемоглобина на протяжении всего периода исследования.
Количество эритроцитов за период опыта увеличилось на 19% в первой
опытной группе и на 28,5% во второй опытной группе; гемоглобина - на 9,8%
и 9,2% соответственно. В сравнении с контролем рост количества эритроцитов на 120 день проведения исследования в опытной группе 1 составил 25%,
в опытной группе 2 - 35%; гемоглобина на 1,5 и 7,6%, соответственно.
127
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Вероятно, одна из причин повышения содержания гемоглобина и эритроцитов при введении УДП железа - это непосредственное участие железа,
как микроэлемента в гемопоэзе (П.Е. Радкевич, 1964). Также известно, гемоглобин содержащийся в эритроцитах отвечает за перенос газов, а следовательно и клеточное дыхание (В.Г. Скопищев, 2004). Стимулирующее влияние нанопорошка железа, оказываемое на кроветворную функцию организма,
на прямую влияет на скорость окислительно - востановительных реакций в
живом организме (С.Ю. Зайцев, 2004).
В процессе проведения опыта значительно выросло количество тромбоцитов в крови животных обеих опытных групп, в сравнении с контрольными животными. Данный показатель на 120-й день опыта в первой
опытной группе был выше на 13,2% аналогичного показателя контрольной
группы, во второй опытной группе на 20,7%.
Данный рост обусловлен катализирующим действием ультрадисперсного железа на гемопоэз (А.А. Назарова, 2009) проходящий в красном
костном мозге, в том числе и на синтез мегакариоцитов и тромбоцитопоэтинов, усиливающих рост мегакариоцитов и отщепление тромбоцитов от
них. Увеличение содержания тромбоцитов повышает защитные возможности организма. Тромбоциты способны к передвижению за счет образования псевдоподий и фагоцитозу инородных тел, вирусов, иммунных комплексов, тем самым, выполняя защитную функцию.
Также наблюдалось повышение содержания лейкоцитов - на 120-й день
опыта на 3,5% в первой опытной группе и на 3,6% во второй опытной группе
по сравнению с началом опыта. Данные изменения подтверждают повышение защитных функций иммунной системы животного организма, так
как основная функция лейкоцитов - защитная, (фагоцитоз, выработка антител или защитных иммуноглобулинов). Лейкоциты - это главный защитный фактор в борьбе организма животного с различными болезнями.
Эти клетки содержат специальные ферменты, способные «переваривать»
микроорганизмы, связывать и расщеплять чужеродные белковые вещества
128
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
и продукты распада, образующиеся в организме в процессе жизнедеятельности. Кроме того, некоторые формы лейкоцитов вырабатывают антитела
- белковые частицы, поражающие любые чужеродные микроорганизмы,
попавшие в кровь, на слизистые оболочки и другие органы и ткани организма живого существа (А.А. Кудрявцев, 1974; В.Г. Скопищев, 2004).
Данные таблицы 4.3 подтверждают вышесказанные предположения об
активизации иммунной системы организма свиней в опытных группах.
Оценивая изменения количественного состава Т - лимфоцитов в крови
опытных свиней четко просматривается рост количества данных клеток, а
именно Т - лимфоцитов группы хелперов. Рост количества лимфоцитов,
относящихся к хелперам по сравнению с контролем, в первой опытной
группе составил 15,8%, а во второй 21%. Тот же показатель за время пр оведения исследования в первой и второй опытных группа увеличился на
10,0 и 9,5% соответственно. Клетки иммунной системы Т-хелперы вырабатывают хелперный фактор клеточного иммунитета. Его функция заключается в усилении цитотоксического действия и дифференцировки (созр евания) киллеров, увеличении противоопухолевой активности макрофагов.
Т - хелперы играют исключительно важную роль, определяя направление
и силу иммунного ответа.
Также в таблице 4.3 ярко просматривается усиление стимулированной
активности нейтрофилов (НСТ - стимулированная) в крови свиней входящих в опытные группы, т.е. активности с использованием активатора фагоцитоза. Данный факт на фоне отсутствия изменений в показателе спонтанной
активности (без предварительной активации клеток) нейтрофилов свидетельствует о повышении критерия фагоцитарной активности нейтрофилов в критических ситуациях. При этом индекс стимуляции (ИС) в ходе исследования
увеличился в первой опытной группе на 44,4%, а у животных второй опытной группы на 42,1%.
НСТ тест - тест с нитросиним тетразолием является одним из наиболее
распространенных тестов, отражающих кислородзависимый метаболизм
129
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
нейтрофилов. Принцип метода заключается в том, что, сталкиваясь с активированным нейтрофилом, НСТ восстанавливается в диформазан, который в
виде гранул, нерастворимых в воде и большинстве органических растворителей, откладывается внутри или на поверхности клеток. Количество выпавшего диформазана служит критерием интенсивности реакции. Кроме нейтрофилов НСТ восстанавливается в моноцитах и тромбоцитах, однако их влияние
на учет результатов исключают, контрастируя ядра любым красителем, который по цвету отличается от диформазана. Нейтрофилы крови в норме находятся в неактивированном состоянии, поэтому в основном не восстанавливают НСТ. Число нейтрофилов, содержащих диформазан, у здоровых людей
и животных не превышает 10 - 15 %. Этот показатель называется спонтанным НСТ-тестом. Для оценки функциональных резервных возможностей
нейтрофилов используют НСТ-тест в присутствии различных стимуляторов.
Такой тест называется индуцированным (стимулированным) НСТ-тестом.
Существенным достоинством НСТ - теста является то, что он выявляет компоненты, которых нет (или почти нет) в покоящемся нейтрофиле. Они возникают только при стимуляции и поэтому дифференцируют интактные и активированные нейтрофилы.
130
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 4.2 – Морфологические показатели крови свиней
Дни исследования
Показатели
До опыта
10
30
60
Группы
Контроль
1281,24
1302,38
1302,05
1281,63
Гемоглобин,
Опыт 1
1221,19
1261,44
1341,30
1341,24**
г/л
Опыт 2
1301,97
1381,73*
1481,51**
1461,35**
Контроль
4,20,09
4,00,05
4,40,12
4,20,09
Эритроциты,
Опыт 1
4,20,16
4,60,13*
4,80,08*
5,20,15*
1012/л
Опыт 2
4,20,12
5,20,09**
5,20,08**
5,60,14**
Контроль
5,00,07
5,20,10
5,20,08
5,00,06
СОЭ
Опыт 1
5,50,15
5,40,12
5,40,10
5,30,10*
Опыт 2
5,00,08
5,00,17
4,80,12
5,20,10
Контроль
8,00,11
8,20,09
8,20,12
8,10,09
Лейкоциты,
Опыт 1
8,60,07
8,80,13**
8,90,17**
8,80,24
109/л
Опыт 2
8,40,12
8,90,15**
8,90,12**
8,90,17**
Контроль
0,650,03
0,650,03
0,650,02
0,650,03
Цветной поОпыт 1
0,750,04
0,750,04
0,750,04**
0,750,03**
казатель
Опыт 2
0,650,03
0,700,03*
0,750,03**
0,800,03*
Контроль
962,63
1023,26
1063,26
1023,26
Тромбоциты,
Опыт 1
1105,12
1264,86**
1284,17**
1264,86**
тыс.
Опыт 2
892,90
1142,63**
1404,90*
1324,22**
Примечание: достоверно при -*Р < 0,05,**Р < 0,01;
131
120
1321,93
1341,51
1420,97*
4,00,05
5,00,14*
5,40,13**
50,08
5,40,12
5,20,11
8,10,12
8,80,20**
8,70,17*
0,650,02
0,750,04*
0,800,07
1062,06
1204,23*
1283,90**
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 4.3 – Показатели неспецифического иммунитета.
Показатели
Группы
До опыта
Контроль
640,45
СД3 %
Опыт 1
640,38
(Т-лимфоциты)
Опыт 2
640,76
Контроль
381,09
СД4 %
Опыт 1
400,65
(Т-хелперы)
Опыт 2
421,22
Контроль
281,44
СД8 %
Опыт 1
260,96
(Т-цитотоксические)
Опыт 2
281,13
Контроль
120,76
СД16 %
(Натуральные килле- Опыт 1
120,85
ры)
Опыт 2
140,53
Контроль
30,19
СД20 %
Опыт 1
30,13
(В-лимфоциты)
Опыт 2
30,19
Контроль
1,350,11
ИРП
Опыт 1
1,410,06
(индекс)*
Опыт 2
1,470,10
Контроль
240,76
НСТ спонтанная
(активность нейтро- Опыт 1
250,50
филов) %
Опыт 2
221,07
401,13
НСТ стимулированная Контроль
(активность нейтро- Опыт 1
420,85
филов) %
Опыт 2
400,88
Контроль
1,670,07
ИС (индекс стимуляОпыт 1
1,680,11
ции)
Опыт 2
1,810,09
Примечание: достоверно при -*Р < 0,05,**Р < 0,01;
Дни исследований
30
120
640,38
620,59
620,59
640,53
640,76
640,70*
380,96
380,85
401,46
441,69**
441,50*
461,44**
281,44
280,59
251,07
261,22
281,36
261,09
120,76
130,38
140,45*
160,40**
160,50**
160,50
40,13
40,19
30,13
30,19
30,19
30,19
1,360,07
1,420,09
1,520,11
1,510,10
1,760,03
1,780,14
250,50
220,65
220,36
240,38**
230,92
230,85
401,13
420,93
440,65*
510,79**
420,53
490,85**
1,600,10
1,910,10
2,00,07
2,130,13
1,830,07
2,130,05*
В крови животных постоянно циркулирует целый комплекс химических
веществ: ферментов, белков, углеводов, жиров, пигментов, низкомолекулярных азотистых оснований, гормонов, электролитов. Содержание перечислен132
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ных веществ характеризуется определенным постоянством и его изменение
может иметь информационное значение при изучении воздействия того, или
иного вещества на живой организм, а также с целью проведения мониторинга
эффективности использования. В сочетании с другими лабораторными исследованиями биохимические показатели крови в последнее время являются
неотъемлемой частью исследовательской работы. Особенностью биохимии
крови является то, что она позволяет достоверно выявить изменения показателей крови уже при функциональных нарушениях органов, т.е. когда еще
нет явных симптоматических проявлений, возникающих при нарушении работы органов и систем (С.Ю. Зайцев, 2004; А.И. Кононский, 1980).
Проведение лабораторных исследований биохимического состава крови
контрольных и опытных животных проходило параллельно с морфологическими исследованиями. Отбор крови осуществлялся от тех же животных
одновременно с отбором проб для исследования морфологических показателей крови.
Результаты биохимического анализа крови контрольных и опытных
животных представлены в таблице 4.4.
Введение железа в ультрадисперсном состоянии заметно активизир овало ферменты крови. Так, содержание АЛТ к концу опыта в первой и
второй группе опытных животных увеличилось на 6,4% и 19,2%, a AСT на 4,7% и 16,3%. По сравнению с контролем количество АЛТ в крови свиней первой опытной группы было выше на 2,0%, АСТ на 4,7%, во второй
группе данные были выше на 26,5% и 19,0% соответственно.
Активизация данных ферментов в крови опытных животных, вероятно,
связана с усилением белкового обмена что, в свою очередь, приводит к интенсивному накоплению живой массы (Р. Досон, 1991; Ф. Коэн, 1986; Т.М. Околелова, 2001).
133
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 4.4 – Биохимические показатели крови подопытных свиней
Показатели
1
Группы
2
Контроль
Общий белок, г/л
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
Опыт 1
Альбумины,%
Опыт 2
Контроль
α
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
β
Глобулины,%
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
γ
Опыт 1
Опыт 2
Период исследования, дни
До опыта
10
30
60
3
4
5
6
72,01,3 76,01,6
75,01,09
2
8
73,41,0 83,01,0
70,02,28
5*
4**
75,01,2 85,03,5
72,51,13
9**
8*
Белковые фракции
38,91, 38,41,3
38,31,75
38,22,0
66
0
37,21, 33,42,0
37,61,80
34,40,9
88
9
37,81, 37,91,2
39,01,21
38,22,1
03
6
14,71,
16,11,1
15,90,92
15,72,2
1
5
14,60,
11,80,7
14,71,0
13,31,6
92
2
16,10,
16,31,15
14,90,4 13,01,1
4
12,60,
12,50,45
11,91,1 12,30,8
16
13,01,
12,760,
13,252,0
13,00,8
3
1
13,00,
13,10,9
12,80,8 12,80,7
7
31,60, 34,21,1
31,91,68
35,81,4
04
4
30,40,
30,70,12
31,50,7 34,00,2
8
32,01,
29,00,5
34,21,1 37,62,5
15
134
90
7
78,01,18
83,01,64
*
84,03,32
37,91,94
36,41,77
38,61,61
16,40,82
11,20,9
13,20,4
12,40,6
12,70,15
13,01,6
36,02,0
38,62,2
40,60,18
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Продолжение таблицы 4.4
Кон0,420, 0,420,0 0,430,0 0,420,0
0,400,04
троль
03
3
2
2
Аланинаминотрансфе0,440, 0,430,0 0,460,0 0,440,0
Опыт 1 0,420,02
раза (АЛТ),
03
2
2
3
ммоль/л·ч
0,440, 0,470,0 0,490,0 0,500,0
Опыт 2 0,430,02
01
2
2
2
Кон0,520, 0,510,0 0,510,0 0,490,0
0,530,03
троль
03
4
2
3
Аспартатаминотрансфе0,480, 0,490,0 0,510,0 0,500,0
Опыт 1 0,470,03
раза, (AСT),
04
3
3
2
ммоль/ л·ч
0,570, 0,590,0 0,600,0 0,620,0
Опыт 2 0,520,02
02
2
1*
2
Кон- 124,721, 122,02 121,80, 121,20, 118,52,
троль
19
,2
05
4
4
117,20 119,02, 118,90, 119,60,
Креатинин,
Опыт 1 116,52,0
,8
0
55
12
мкмоль/л
120,40 122,11, 122,00, 123,02,
Опыт 2 119,80,5
,7
9
3
5
Кон12,40,6 120,6
120,8
131,4 12,60,8
троль
11,71,
Опыт
1
11,71,0
11,81,2 11,62,0 11,61,8
Кальций, мг%
8
Опыт 2
Фосфор, мг%
Резервная щелочность,
об.%СО2
Мочевина
ммоль/л
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Контроль
12,01,2
122,1
11,91,2
11,71,6
11,60,6
7,90,2
8,41,2
8,20,8
8,00,5
7,90,5
8,50,4
7,60,2
8,91,1 9,21,3
8,00,6 8,40,8
43,70,
44,20,6
5
45,90,
46,40,6
6
44,70,
45,20,4
4
9,81
9,60,6
9,61,1
9,80,4
44,00,4
43,50,3
46,20,8
45,40,4
45,00,2
45,50,4
*
4,961,2
4,92,1
43,30,2
Опыт 1
46,20,9
Опыт 2
45,20,4
Контроль
5,610,17
5,52,0
135
5,61,1
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Окончание таблицы 4.4
6,162, 6,210,0 6,790,0
Опыт 1 6,120,8
6,72,2
0
6
4
6,00,12
Опыт 2 5,451,9 5,82,0 5,981,2
6,40,7
*
Кон6,0
5,46 
5,72 
6,0 
6,1  1,1
троль
1,17
1,03
1,04
1,04
Глюкоза,
5,38 
5,77 
5,90 
5,96 
5,96 
Опыт 1
ммоль/л
1,09
0,71
0,87
1,1
1,1
5,37 
5,88 
6,11 
6,08 
6,08 
Опыт 2
1,44
1,14
1,44
1,4
1,4
Примечание: достоверно при -*Р < 0,05,**Р < 0,01;
Анализируя таблицу 4.4 также можно отметить, что в процессе проведения опыта наблюдалось повышение количество мочевины в крови животных
обеих опытных групп. На последний день исследования в первой опытной
группе данный показатель был выше на 39,6%, а во второй на 33,3% выше
аналогичного показателя у животных в контрольной группе. Также на 120-й
день исследования значение содержания креатинина возросло в опытных
группах по отношению к контролю на 0,9 и 3,8% соответственно. Данные
вещества являются продуктами обмена белков и входят в группу ост аточного азота. Повышение содержания данных веществ в крови здор овых животных на фоне четкого нормированного кормление (с учетом
отсутствия белкового перекорма) связано с усилением интенсивности
белкового обмена в организме животных (С.Ю. Зайцев, 2004; А.Г. Малахов,
1984), что в свою очередь является одним из условий интенсивного накопления живой массы.
Показатель резервной щелочности на протяжении всего опыта у животных контрольной и опытных групп изменялся не значительно, и её величина
находилась в пределах физиологической нормы, что являлось положитель-
136
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ным результатом, говорящим о нормальной работе желудочно-кишечного
тракта и обменных процессов в ходе нейтрализации кислых продуктов.
Содержание общего белка в крови свиней за период исследований изменялось во всех группах (в том числе и контрольной), что возможно было
связано с возрастными изменениями. Учитывая данный факт, следует сказать, что данный показатель в контрольной группе вырос лишь на 4,0%, тогда как рост в первой опытной группе составил 18,6% , а во второй 16,7%. В
значительной степени данный рост обусловлен повышением количества
глобулинов в конце опыта по сравнению с показателем фоновых проб на
25,7% в первой опытной группе и на 40,0% в опытной группе 2, что подтверждает повышение иммунобиологической реактивности, так как γ глобулины представляющие собой антитела, обеспечивают гуморальную
иммунную защиту организма от инфекций и чужеродных веществ.
Рисунок 4.2 – Изменение содержания γ-глобулинов в крови свиней.
137
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Также следует отметить факт снижения количества β – глобулинов на
4,3% в опыте 1 и 0,8% в опыте 2 к концу исследования. Общее снижения количества β – глобулинов в крови опытных свиней напрямую связано со снижением насыщения крови трансферрином, по сути β - глобулином прочно, но
обратимо связывающим ионы железа (табл. 4.4).
Содержание в крови животных альбуминов за период проведения опыта
оставалось практически неизменным. Данный факт может свидетельствовать
об отсутствии отрицательного влияния нанопорошка железа на функциональную работу таких внутренних органов как печень, почки и кишечник, так как
большинство острых и хронических патологических процессов в вышеперечисленных органах сопровождаются снижением альбуминов в крови.
Изучение минерального состава плазмы крови по кальцию и фосфору
контрольных и опытных животных проводилось одновременно с мо рфологическими и биохимическими исследованиями крови.
Минеральные вещества участвуют во всех биохимических процессах,
протекающих в организме, являются необходимым компонентом всех органов и тканей. Так, кальций составляет основу костей скелета, медь и железо
необходимы для транспортировки белков и углеводов через клеточные мембраны, железо обеспечивает перенос газов кровью. Минеральные вещества в
крови содержатся в свободном состоянии или в виде отдельных ионов.
Физиологические колебания содержания минеральных веществ в крови
обусловлены питанием, возрастом, продуктивностью животных и их физиологическим состоянием (А.В. Автаев, 1975; Т.П. Белехов, 1960; А.Р.
Вальдман, 1993; А.М. Гурьянов, 2005). Содержание фосфора и кальция в сыворотке крови, контрольных и опытных животных до начала опыта было
примерно одинаковым, в пределах физиологической нормы (И.А. Касирский, 1970; А.А. Кудрявцев, 1974).
Содержание минеральных веществ в крови животных, получавших
нанопорошок железа, представлено в таблице 4.5. Спустя 120 дней после
начала эксперимента в крови животных, получавших нанопорошок железа,
138
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
повысилось содержание фосфора на 8,2% в первой и 25,6% во второй опытной группе. При сопоставлении результатов контрольных и опытных живо тных можно сделать вывод, что содержание фосфора в сыворотке крови животных первой опытной группы было выше на 20,5% чем в группе контроля.
Во второй группе опытных животных содержание фосфора было выше на
22,7%. Количество кальция в крови животных первой опытной группы за
время проведения опыта практически не изменилось, но наблюдалось не значительное снижение показателя во второй опытной группе и составило 6%
по сравнению с показателем фоновой пробы.
Общеизвестно, что глюкоза - основной источник энергии для многих клеток организма. На ее долю приходится более 90% всех низкомолекулярных
углеводов. В крови свиней опытных групп концентрация этого важнейшего
метаболита была выше, чем в контроле, особенно в крови животных третьей
группы.
Как видно, введение испытуемой добавки положительно сказалось на
этом основном показателе обмена углеводов и, следовательно, на связанные
с ним физиологические процессы.
Изучая влияние нанокристаллического порошка железа на показатели
крови необходимо просмотреть динамику изменения таких показателей как
содержание сывороточного железа в сыворотке крови, железосвязывающую
способность сыворотки крови, процент насыщения трансферином и латентную связывающую способность сыворотки крови. С целью определения этих
показателей проводился отбор крови, для получения сыворотки, одновременно с отбором крови для изучения морфологии и биохимии крови ко нтрольных и опытных животных.
Уровень железа в сыворотке изменяется в течение суток (наиболее высок
он утром). У новорожденных в течение нескольких часов после родов отмечается падение уровня железа. Средние показатели железа у самок ниже, чем
у самцов, но и у тех и у других с возрастом показатель железа падает. Ко нцентрация железа у самок также связана с половым циклом (максимальное
139
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
содержание - в лютеиновую фазу, самое низкое - после течки). Недостаток
сна и стрессы, выраженная физическая нагрузка также вызывают снижение
этого показателя (Л.И. Идельсон, 1985; В.А. Кокорев в соавт., 1991; М.Г. Николадзе, 2002).
Несмотря на нестабильность уровня железа в сыворотке, исследование
этого параметра важно для скрининга, дифференциальной диагностики железодефицитных и других анемий, а также оценки эффективности использования минеральных подкормок содержащих в своем составе одну из форм железа.
140
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 4.5 – Показатели обмена железа в крови подопытных свиней
(n=8)
Дни исследований
Показатели
Группы
До
10
30
60
120
опыта
Контроль 320,5 300,9 280,7 281,1 300,9
Сывороточное
железо, мкмоль/л
ЖСС (железосвязывающая способность),
мкмоль/л
Процент насыщения трансферрином, %
Опыт 1
360,7
381,3
Опыт 2
300,9
362,2
Контроль 450,3
450,1
Опыт 1
Опыт 2
500,3
500,9
*
390,9
*
402,0
413,1
370,9
412,1
*
9
401,3
400,9
421,3
491,9
482,4
472,7
421,1
410,7
*
*
581,0
581,5
451,1
470,6
440,4
Контроль 562,2
541,1
561,4
Опыт 1
521,9
520,7
510,8
Опыт 2
541,3
530,6
501,8
ЛСС (латентная Контроль 130,3 150,5 121,0
связывающая
Опыт 1 140,7 120,7 100,6
способность),
Опыт 2 151,1 110,9 90,3
мкмоль/л
Примечание: достоверно при -*Р < 0,05,**Р < 0,01;
500,7
*
412,4
510,9
511,1
491,3
*
*
120,6
120,9
100,8
111,0
90,5
80,2*
Проведя анализ полученных данных можно с уверенностью сказать о достоверном увеличении, в ходе проведения опыта, содержания железа в крови
свиней опытных групп. На 120-й день опыта рост сывороточного железа в
первой опытной группе, по сравнению с результатом фоновой пробы, соста141
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
вил 13,9%, в опытной группе 2 рост показателя был более значительным и
составил 37,0%. При сравнении показателей в контрольной и опытных группах видно, что в первой опытной группе на последний день опыта с одержание сывороточного железа было выше на 37,0%, во второй опытной группе
на 37,0%. Необходимо отметить, что за время проведения исследования
наиболее интенсивный рост показателя на всем протяжении опыта наблюдался во второй группе опытных свиней, но разницы в результатах с одержания сывороточного железа между первой и второй опытными группами в
конце опыта не наблюдалось.
Одним из показателей избытка или недостатка содержания железа в крови животных и человека является процент насыщения трансферрина железом
(отношение концентрации сывороточного железа к максимальной железосвязывающей способности трансферрина сыворотки, выраженное в процентах).
Синтез трансферрина осуществляется в печени и зависит от ее функционального состояния, от потребности в железе и резервов железа в организме.
Трансферрин участвует в транспорте железа от места его всасывания (тонкая
кишка) до основных мест его использования или хранения (костный мозг,
печень, селезенка), препятствуя накоплению токсичных ионов железа в крови. Избыток железа, сопровождающийся значительным увеличением процента насыщения трансферрина железом, может вызывать патологию печени и
селезенки (В.В. Меньшиков, 1987).
По данным нашего исследования, влияние ультрадисперсного железа на
уровень насыщения трансферрина вызвало незначительное снижение данного показателя в крови животных первой опытной группы. Максимальное
снижение уровня насыщения трансферрина наблюдалось во второй опытной
группе (ежедневное введение нанопорошка железа в рацион животных) и составило 10,2%, что является следствием повышения количества сывороточного железа крови.
Показатель железосвязывающей способности (ЖСС) характеризует способность сыворотки крови к связыванию сывороточного железа. По данным
142
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
нашего опыта уровень железосвязывающей способности, а также и показатель латентной связывающей способности (ЛСС), характеризующий ЖСС
без сывороточного железа, за время исследования в контрольной группе
оставался на прежнем уровне, в группах опыта наблюдалось снижение ЛСС
за счет снижения содержания свободного трансферрина в крови свиней (Л.И.
Идельсон, 1985; В.В. Меньшиков, 1987). Рост показателя ЖСС в 8,9%
наблюдался во второй опытной группе и 4,0% в первой опытной группе, что
вероятно связано с резким повышением сывороточного железа в крови свиней опытных групп.
Отметив отсутствие резкого падения показателей ЖСС и ЛСС можно с
уверенностью утверждать об отсутствии токсического или иного отрицательного влияния нанопорошка железа (резкое повышение уровня ЖСС
наблюдается при железодефицитной анемии, латентном дефиците железа,
резкое снижение показателей наблюдается при белковых нарушениях патологии печени, почек, онкологических заболеваниях) на организм опытных
животных.
4.2.3 Влияние наноразмерного железа на переваримость основных
питательных веществ рациона
Органическое вещество кормов представляет собой основной фактор, в
кормлении, так как с ним поступают в организм все питательные и многие
биологически активные вещества.
Питательные вещества, прежде чем перейти в кровь или лимфу и поступить в клетки организма, должны в пищеварительном тракте подвергнуться
гидролизу. При этом из сложных соединений (полисахариды, жиры, белки)
получаются легкорастворимые в воде вещества: моносахариды, глицерин,
мыла и аминокислоты. Переваримость - косвенный признак доступности питательных веществ для вовлечения в обмен, но все же по ней можно судить
об использовании корма животными. Иногда к переварившимся относят ве143
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
щества, исчезающие из пищеварительного тракта без видимых химических
изменений, как, например, кальций и фосфор. Хотя переваримость веществ
изучают давно, фактическая доступность их полностью не выяснена. Почти
каждый опыт по кормлению сопровождается определением переваримости
(В.Г. Вранчан, 1977; В.А. Головин, 1967; А.С. Крамской, 2005).
Как видно из нижеприведенной таблицы повышение коэффициентов переваримости наблюдалось по всем показателям.
Таблица 4.6 – Коэффициенты переваримости основных питательных веществ рациона, % (n=9)
Группы
Показатели
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Сухое вещество
71,00±0,61
77,13±0,31**
72,86±0,48*
Сырой протеин
65,63±0,58
69,43±0,34**
67,05±0,50
Сырой жир
73,33±0,41
74,40±0,35*
73,47±0,29
Сырая клетчатка
44,03±0,59
47,06±0,21**
44,73±0,47
БЭВ
80,23±0,37
83,23±0,55**
84,60±1,22**
Примечание: достоверно при -*Р < 0,05,**Р < 0,01;
У животных опытных групп наблюдалось повышение коэффициента переваримости органического вещества по сравнению с контролем за счет
лучшего переваривания сырого протеина на 5,8% и 2,16%, сырого жира на
1,5 и 0,2% , сырой клетчатки на 6,9 и 1,6% и БЭВ на 3,7 и 5,4%.
Коэффициент переваримости сухого вещества у свиней 1-ой опытной
группы на 1,7 % были больше по сравнению с животными контрольной
группы, и на 0,8 % больше по сравнению с животными 2-ой опытной группы.
Протеин, как и энергия, является одним из основных лимитирующих
элементов питания для молодняка свиней. Интенсивность преобразования
азотистых веществ корма в белки тела зависит от возраста животных и сбалансированности рациона по аминокислотному составу (А.С. Крамской,
144
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
2005; В.И. Матяев, 1980). Введение в рацион молодняка свиней опытных
групп ультрадисперсного железа способствовало более эффективному использованию азота корма, чем в контрольной группе (таблица 4.7).
Рисунок 4.3 – Переваримость свиньями основных питательных веществ
рациона, %.
145
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 4.7 – Баланс и использование азота и минеральных веществ корма подопытными животными (n=9)
Группы
Показатели
Принято с кормом, г
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
70,4±0,50
68,9±0,34*
69,6±0,87
Выделено с калом, г
18,3±0,14
17,2±0,12**
17,7±0,07**
Выделено с мочой, г
25,9±0,27
24,8±0,24*
25,8±0,20
Отложено в теле всего, г
26,2±0,30
26,9±0,09*
26,1±0,14
Отложено в теле %:
37,2±0,29
39,0±0,19**
от принятого.
Примечание:
достоверно при -*Р < 0,05, **P<0,01;
37,5±0,07*
Анализируя данные таблицы 4.7 можно сделать вывод, что использование
УДП железа в качестве биологически активной добавки способствовало более высокому отложению азота в организме молодняка свиней опытных
групп и это связано не только с лучшей переваримостью азотистых веществ,
но и с сокращением потери азота с мочой и калом. Использование полученного азота повысилось с 37,2% в контрольной группе, до 37,5% во второй
опытной группе и 39,0% в первой опытной группе получавшей УДПFe на
протяжении всего учетного периода.
146
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 4.8 – Баланс и использование кальция и фосфора рационов подопытными свиньями (n=9)
Группы
Показатели
Принято с кормом, г
Выделено с калом, г
Выделено с мочой, г
Контроль
Опыт 1
Баланс кальция
13,2±1,01
13,3±1,17
4,62±0,09
4,59±0,14
0,26±0,07
0,28±0,07
Опыт 2
13,1±0,86
4,60±0,09
0,25±0,09
Отложено в теле всего, г
8,32±0,70
8,43±0,24
8,25±0,50
Отложено в теле %:
от принятого.
63,03±1,17
63,38±2,05
62,97±0,96
11,20±1,22
11,13±0,24
Выделено с калом, г
6,74±0,29
6,62±0,30
Выделено с мочой, г
0,25±0,07
0,24±0,07
Отложено в теле всего, г
4,22±0,12
4,34±0,09
Отложено в теле %:
37,64±1,44
38,75±0,90
от принятого.
Примечание: достоверно при - *Р < 0,05, **P<0,01;
6,69±0,70
0,24±0,03
4,20±0,17
Баланс фосфора
Принято с кормом, г
11,21±1,01
37,74±1,17
Ощутимых различий в использовании минеральных элементов (Ca и P) не
наблюдалось. Можно лишь отметить тенденцию к увеличению степени использования принятого с кормом фосфора (таблица 4.8) у свиней опытных
групп. Вероятно, данный факт можно объяснить тем, что ультрадисперсное
железо сохраняет ряд свойств металлического железа и является синергистом
для фосфора, при этом яркого антагонистического влияния на кальций оно не
оказывает. Полученные в ходе проведения физиологического опыта данные
свидетельствуют, что использование ультрадисперсного порошка железа, в
качестве биологически активной добавки, способствовало стимуляции пищеварительных процессов у свиней в период откорма: коэффициенты переваримости основных питательных веществ повышались на 0,2 - 5,8%. Также,
введение в организм животных данного препарата стимулировало обменные
147
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
процессы в организме животных и способствует задержанию в организме
азота с использованием его на продуктивные цели.
Контроль 63,03
Опыт 2-37,74
Кальций
Фосфор
Контроль 37,64
Опыт 1-63,38
Опыт 2-62,977
Рисунок 4.4 – Баланс усвоения фосфора и кальция контрольными и опытными животными, %.
4.2.4 Влияние наноразмерного железа на минеральный состав мышечной ткани свиней
Свинина является важнейшим продуктом питания населения страны и
сырьем для мясоперерабатывающей промышленности. Мировой опыт показывает, что за последние годы увеличение производства мяса происходит за
счет говядины только на 13,0%, в то время как свинины - на 19,0%. Эти тенденции в изменении темпов производства мяса свинины связаны с биологическими и технологическими возможностями свиней обеспечить быстрое
наращивание производства высококачественного мяса при низких затратах
кормов и труда на единицу продукции.
148
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Мясо свиней богато полноценным белком, содержащим все незаменимые
аминокислоты, а также минеральными веществами и витаминами группы
«В». По сравнению с мясом других сельскохозяйственных животных в свинине меньше таких неполноценных белков, как коллаген и эластин. Внутримышечный и подкожный жир свиней - важный источник поступления в организм человека незаменимых полиненасыщенных жирных кислот, что вызывает повышенный интерес к этим продуктам со стороны медицинской науки.
По сравнению с мышечной тканью животных других видов в мышечной
ткани свиней содержится больше жизненно необходимых полиненасыщенных жирных кислот (М.Ф. Боровков, 2007).
Употребление в пищу 30 - 60 г свиного жира обеспечивает суточную потребность человека в незаменимых полиненасыщенных жирных кислотах,
составляющую, по данным Института питания Академии наук СССР, 3 - 6 г.
В противоположность крупному рогатому скоту и овцам свиньи отличаются
биологической особенностью накапливать в мышечной ткани значительное
количество витамина В1. По содержанию этого витамина мясо свиней превосходит такие признанные его источники, как черный и серый хлеб (В.Г.
Вранчан, 1977; В.А. Головин, 1967; А.С. Крамской, 2005).
Одним из показателей, характеризующих высокую пищевую ценность
свинины, является содержание в ней значительного количества минеральных
веществ, многие из которых входят в состав ряда биологически активных соединений и оказывают влияние на жизнедеятельность организма человека.
Содержание основных минеральных веществ в мясе контрольных и
опытных животных представлено в таблице 4.9.
Результаты минерального исследования мышечной ткани животных
показывают, что нанокристаллический порошок железа способствует изменению содержания минеральных веществ. Так, применение нанопорошка
железа привело к повышению содержание кальция в мышечной ткани животных первой и второй опытных групп на 63,6 и 18,2% соответственно по
сравнению с данным показателем мяса животных контрольной группы.
149
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Рост содержания фосфора в мышечной ткани опытных свиней в сравнении с содержанием данного микроэлемента в мышцах контрольных животных оказался также значительным и во второй опытной группе составил
6,0%, в первой опытной группе 15,2%.
Таблица 4.9 – Состав основных зольных элементов мышечной ткани,(n=3)
НД на меПогрешность
Ед. измеРезультат
тодику
измерения
Группы
рения
измерения
испытания
%
Физико-химические показатели
3,3
Контроль
0,0080
Массовая до- ГОСТ Р
3,8
Опыт 1
0,0082
ля фосфора
51482-99
г/кг
3,5
Опыт 2
0,0082
0,44
Контроль
0,03
Массовая до- ГОСТ 100,72
Опыт 1
0,03
ля кальция
044-94
г/кг
0,52
Опыт 2
0,03
Наименование
показателя
Массовая
концентрация
железа
ГОСТ
26928-86
5,9
7,4
9,0
мг/кг
150
29,5
37,0
45,0
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Рисунок 4.5 – Содержание минеральных веществ в исследуемых пробах.
Данные макро- и микроэлементы играют важную роль в обмен веществ,
и накопление этих веществ явилось следствием усиленного усвоения питательных веществ рациона, как следствие воздействия ультрадисперсного
железа.
Что касается содержания железа в мышечной ткани контрольных и
опытных свиней, то анализируя данные таблицы можно сделать вывод что,
ультрадисперсное железо, при ежедневном применении в качестве биологически активной добавки, приводит к интенсивному накоплению железа,
находящегося в организме животного, в мышечной ткани. Данному факту
свидетельствует повышение содержания данного микроэлемента на 52,5%
(даже с учетом погрешности 9,0%) по сравнению с аналогичным показателем в мышцах контрольных животных.
151
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Высокое содержание железа в мясе свиней опытных групп, скорее всего,
связано с повышением содержания гемопротеинов (гемоглобин, миоглобин,
пероксидаза) в мышечной ткани этих животных, что подтверждается выс оким коэффициентом экстинции. Учитывая, что повышение показателя не
вышло за пределы физиологической нормы его можно принять как положительный факт воздействия УДП железа на минеральный состав мышечной
ткани. Высокое содержание гемосодержащих белков в мясе повышает его
биологическую ценность, как продукта питания для человека. Белки мяса
обладают высокой биологической ценностью, так как имеют хорошо сбалансированный аминокислотный состав, наиболее близкий к составу аминокислот белков человека. Белки мяса служат для построения его тканей, ферментов, гормонов. В связи с высоким содержанием белков мясо и мясные продукты стимулируют рост, половое созревание, рождаемость потомства и его
выживаемость, усвояемость других компонентов пищи и снижает общие потребности в ней, активизирует обмен веществ в организме человека.
4.2.5 Влияние УДП железа на санитарные показатели мяса и
доброкачественность жира
При использовании инновационных биологических добавок в кормлении
животных важным показателем является санитарное благополучие и доброкачественность получаемого продукта. В качестве объекта исследования выступала созревшая мышечная и жировая ткань опытных свиней.
В таблице 4.10 представлена оценка органолептических показателей
доброкачественности мяса контрольных и опытных животных.
Все образцы, полученные, в результате контрольного убоя, отвечали необходимым требованиям правил санитарной оценки и были признаны свежими, пригодными к реализации без ограничений.
152
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 4.10 – Органолептические показатели мяса свиней
Группы
Наименование
показателя
Контроль
Показатель
Опыт 1
Опыт 2
Имеет корочку
Имеет корочку
подсыхания крас-
подсыхания крас-
ного цвета
ного цвета
Слегка влажные,
Слегка влажные,
Слегка влажные,
цвет свойствен-
цвет свойствен-
цвет свойствен-
ный данному ви-
ный данному ви-
ный данному ви-
ду мяса
ду мяса
ду мяса
На разрезе мясо
На разрезе мясо
На разрезе мясо
плотное, упругое,
плотное, упругое,
плотное, упругое,
ямка образующа-
ямка образующа-
ямка образующа-
яся при надавли-
яся при надавли-
яся при надавли-
вании быстро вы-
вании быстро вы-
вании быстро вы-
равнивается
равнивается.
равнивается.
Специфический,
Специфический,
Специфический,
свойственный
свойственный
свойственный
данному виду мя-
данному виду мя-
данному виду мя-
са
са
са
Имеет белый
Имеет белый
Имеет белый
Состояние
цвет, мягкий и
цвет, мягкий и
цвет, мягкий и
жира
эластичный
эластичный
эластичный
Состояние су-
Сухожилия упру-
Сухожилия упру-
Сухожилия упру-
хожилий
гие, плотные.
гие, плотные.
гие, плотные.
Прозрачность
Прозрачный,
Слегка мутнова-
Слегка мутнова-
и аромат буль-
ароматный
тый, ароматный
тый, ароматный
Внешний вид
Имеет
и цвет поверх-
подсыхания
ности туши
Мышцы на
разрезе
Консистенция
Запах
корочку
бледно-розовая
она
153
свежести
свежее
свежее
свежее
свежее
свежее
свежее
свежее
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 4.11 – Показатели интенсивности окраски и водосвязывающей
способности мышечной ткани свиней, (n=3)
Показатели
Интенсивность окраски (коэффициент экстинции х 100)
Контроль
85,53,35
Группы
Опыт 1
86,23,35
Водосвязывающая спо71,41,37
72,32,16
собность, % от массы мяса
Примечание: достоверно при -*Р < 0,05,**Р < 0,01;
Опыт 2
89,21,67
72,11,75
Как следует из таблицы 4.11 наиболее интенсивной окраской и водосвязывающей способностью мышц выделялись все опытные группы, а в особенности вторая опытная группа. Показатель интенсивности окраски во второй
опытной группе был на 4,3% выше, чем в группе контроля и на 3,5% выше,
чем в первой опытной группе. Данный показатель напрямую связан с содержанием железа в белках мышечной ткани, что и подтверждает наши предположения о стимулирующем влиянии наножелеза на рост и накопление в
мышцах гемопротеинов.
Изучая физико-химические, показатели мышечной ткани (таблица 4.12)
было выяснено, что мясо как опытных, так и контрольных животных, отвечало всем требованиям, и было признано годным к реализации без огранич ения.
Подкожный и внутренний жир свиней как с включением в рационы нанопорошка железа, так и без его включения был белого цвета при температуре
15-20?С, без постороннего запаха и привкуса, мазеобразной консистенции,
прозрачный в расплавленном состоянии.
О качестве мяса судят не только по органолептическим показателям, но и
по кислотному, йодному и перекисному числам жира. Данные показатели
представлены в таблице 4.13.
154
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 4.12 – Физико-химические и бактериологические показатели мяса свиней, (n=3)
Показатели
Группы свиней
Вид
ткани
Контроль
Бактериоскопия
мазка отпечатка
(количество микроорганизмов в 1
поле зрения)
мышцы
РН мяса,
через 24 часа
мышцы
Опыт 1
Опыт 2
Выявлены единичные микроорганизмы (в
основном кокковая микрофлора)
5,9 ± 0,09
6,0 ± 0,07
Реакция на
+
+
пероксидазу
мышцы
Реакция с 5% сернокислой медью мышцы
Примечание: достоверно при -*Р < 0,05,**Р < 0,01;
5,9 ± 0,04
+
-
Таблица 4.13 – Показатели доброкачественности жира свиней, (n=3)
Показатели
Кислотное число, мг
КОН
Йодное число
Перекисное число, %
йода
Группы
Контроль
Опыт 1
Внутренний жир
0,730,02
0,640,03
57,192,05
0,0340,004
55,922,76
0,0460,004
Опыт 2
0,760,03
56,311,59
0,0240,004
Подкожный жир
0,760,02
0,670,03
0,530,01
56,341,38
53,493,64
56,001,92
Перекисное число, %
0,0390,004
0,0400,004
йода
Примечание: достоверно при -*Р < 0,05,**Р < 0,01;
0,0370,004
Кислотное число, мг
КОН
Йодное число
155
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Лабораторные показатели также характеризовали свежесть жира. Кислотное число подкожного и внутреннего жира подопытных животных с оставляло 0,670,03 - 0,530,01 и 0,640,03 - 0,76±0,03 соответственно; перекисное число - 0,040±0,004 - 0,037±0,004 и 0,046±0,004 - 0,024±0,004. В контроле эти величины были близкими по значениям.
Йодное число является важнейшим химическим показателем. Оно позволяет судить о степени ненасыщенности жирных кислот, входящих в состав
жира. Чем выше содержание насыщенных жирных кислот, тем ниже значение йодного числа (М.Ф. Боровков, 2007). Йодное число колебалось в пределах: в опытных группах 53,493,64 - 56,311,59, в контроле - 56,341,38 57,192,05.
Таким образом, значения кислотного, йодного и перекисного чисел были
характерными для жира, пригодного в пищу без ограничений. Физико химические исследования показали, что ультрадисперсный порошок железа
не влияет отрицательно на химический состав, кислотное, йодное и перекисное числа жира, даже, наоборот, во всех опытных группах наблюдалась тенденция к снижению показателя йодного числа, указывающая на накопление
именно насыщенных полноценных жирных кислот.
4.2.6 Органолептические исследования мяса свиней
Физико-химические методы исследования позволяют выявить химический состав мяса и технологические свойства, но нежность, сочность, вкус,
аромат, возможно, установить лишь органолептически после тепловой обработки натурального продукта. С целью установления вкусовых качеств мяса
4 апреля 2009 года нами была проведена его комиссионная дегустация.
После убоя свиней и разделки туш мясо было помещено в холодильную
камеру для дозревания. После чего проводили органолептическую оценку
мяса (как наиболее ценного продукта) и бульона, от каждого животного в соответствии с ГОСТ 9959-91. Мясо клали в кастрюли с холодной водой (соот156
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ношение воды и мяса 3:1), закрывали крышкой, доводили до кипения и варили 1,5 часа. За полчаса до окончания варки клали соль – 1,0% от массы воды.
После окончания варки мясо вынимали из бульона и охлаждали до 3040оС. Остывшее мясо разделяли на кусочки и оценивали по 9-и балльной системе. Всего оценивали 3 пробы мяса. Номера проб были закодированы.
Затем проводилась дегустационная оценка бульона. Бульон не фильтровали, разливали в стаканчики по 50 мл и определяли качество по нескольким
показателям (внешний вид, запах, вкус, наваристость, общая оценка качества) по 9-и балльной системе. Всего оценивали 3 пробы бульона. Номера
образцов бульона были закодированы аналогично пробам мяса.
Оценка органолептических показателей бульона и вареного мяса приведена в таблице 4.14 и таблице 4.15.
Средний балл оценки бульона был наивысшим у мяса свиней второй
опытной группы и составлял 8,2 балла, при этом превышал контрольную на
0,05балла и на 0,1 балла первую опытную группу соответственно. В целом,
оценка по бульону для всех групп была приблизительно одинаковой и находилась на достаточно высоком уровне.
Аналогичная ситуация была при оценке мяса свиней. Самый высокий
балл получило мясо свиней из 2-ой опытной группы (выше контрольной
группы на 0,28 балла).
Таблица 4.14 – Дегустационная оценка бульона
(9-балльная шкала оценки)
Группа свиней
Внешний
вид
Запах,
аромат
Вкус
Наваристость
Общая
оценка
Контрольная
8,4
8,0
7,8
8,4
8,15
Опыт 1
8,2
8,0
8,0
8,2
8,1
Опыт 2
8,6
8,0
8,0
8,2
8,2
157
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 4.15 – Дегустационная оценка мяса свиней
(9-балльная шкала оценки)
Группа сви- Внешний Запах,
Общая
Консистенция Вкус Сочность
ней
вид
аромат
оценка
8,16
Контрольная
8,0
8,6
8,0
8,4
7,8
Опыт 1
8,2
8,4
8,2
8,2
7,8
Опыт 2
8,2
8,6
8,8
8,8
7,8
8,16
8,44
Таким образом, исходя из результатов дегустации, можно сделать вывод,
что дегустационные оценки бульона и мяса свиней всех групп были достаточно высокими и очень близкими по значению, средний балл был почти
равнозначный, следовательно, применение нанопорошка железа не ухудшило
органолептические показатели качества продуктов.
4.2.7 Влияние УДП порошка железа на гистологическое строение мышечной ткани и ткани печени животных
Влияние УДП порошка железа на гистологическое строение мышечной
ткани и ткани печени животных.
Свойства мяса в известной мере зависят от соотношения тканей, с учетом
их химического состава и строения, а стабильность свойств обуславливает
степень возможных изменений пищевой ценности и безвредности продукта.
Мышечная ткань – основная ткань, определяющая пищевую ценность мяса. Она состоит из вытянутых до 15 см в длину многоядерных клеток – волокон; толщина волокна составляет 10 – 100 мкм. Между ними находятся тонкие прослойки межклеточного вещества в виде рыхлой соединительной ткани. Поверхность волокна покрыта эластичной оболочкой – сарколеммой.
Внутри клетки расположены активные сократительные волокнистые струк158
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
туры – миофибриллы, погруженные в саркоплазму. Каждая миофибрилла содержит толстые белковые нити из миозина, а также тонкие – из актина, тропонина, тропомиозина. Миофибриллы окружены разветвленной структурой
мембранных каналов (саркоплазматическим ретикулумом), по которому происходит перенос веществ и накопление их запаса.
Мышечные волокна образуют пучки, покрытые оболочкой. Первичные
пучки объединяются во вторичные, которые в свою очередь образуют тр етичные пучки и т. д. Группа пучков образует отдельную мышцу. Мышцы покрыты плотными соединительными пленками – фасциями.
Гистологический метод дает возможность без проведения каких-либо дополнительных испытаний определить биологическую ценность и степень
свежести мяса по состоянию структуры ядер, поперечной и продольной исчерченности мышечных волокон (В.Л.Быков, 1997)
Морфологическое описание мышечной ткани
Контрольная группа животных. В световом микроскопе определялись
крупные пучки мышечных волокон, окруженные волокнистой соединительной тканью, содержащей сосуды и нервы (перимизий). От перимизия отходят
тонкие прослойки соединительной ткани, содержащие отдельные фибробласты, немного аморфного межклеточного вещества и редкие коллагеновые волокна. Эти пластинки, образующие сеть между всеми мышечными волокнами, называемые эндомизием, богаты капиллярами, нервными волокнами, иннервирующие мышечные клетки. Толщина мышечного волокна составляла в
среднем 50 мкм. При сравнении морфологического строения мышечной ткани и ткани печени в контрольной группе животных и экспериментальных
группах использовался метод описательной морфологии и метод морфометрического анализа.
159
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Пропорциональное соотношение мышечной ткани к соединительной (эндомизий) в первой опытной группе составляло 6: 1.
При сравнении строения мышечной ткани в опытной группе 2 с
опытной группой 1, определялось достоверно визуальная гипертрофия мышечных волокон за счет гиперплазии ультраструктур и ядер, а также гипертрофия межмышечной соединительной ткани. Мышечные волокна в группе
опыта 2 более крупных размеров, содержали большее число ядер, достигающие до 10 и более в каждой из клеток (поперечный срез). Ядра более крупных размеров, овально-округлой формы, располагались по периферии цитоплазмы.
Прослойки перемизия и эндомизия в опытной группе животных 2 по
сравнению с опытной группой 1 были значительно шире и богаче клеточными элементами: фибробластами, фиброцитами, гистиоцитами, а также большим числом крупных кровеносных и лимфатических сосудов и капилляров.
Пропорциональное соотношение мышечной ткани к соединительной (эндомизий) в группе опыта 2 составляло 8: 1.
Морфологическое описание ткани печени
В препарате ткань печени свиньи с характерными шестиугольными
дольками, разделенными прослойками рыхлой соединительной ткани или
междольковыми перегородками.
Вариант нормы наблюдался в группе контроля и в опытной группе 1.
В гистологических срезах ткани печени от животных второй опытной
группы в гепатоцитах, расположенных преимущественно по периферии долек,
цитоплазма клеток выглядела набухшей или мутной, получая как бы
запыленный вид. При этом в цитоплазме проявлялись в большем или меньшем количестве эозинофильные зерна.
160
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Рисунок 4.1 – Феномен «белковой зернистой метаморфозы» (Опыт 2),
окраска гематоксилин-эозином, Ув. х420.
Из вышесказанного следует, что в гистологических срезах печени от свиней второй опытной группы (ежедневное введение УДПFe в рацион свиней)
наблюдались признаки зернистой дистрофии или феномена «белковой зернистой метаморфозы» (рисунок 4.1). Рассматривая механизм и саму сущность
зернистой дистрофии, ориентируясь на данные ученых (E.Rubin, J.L.Farber,
1988), есть все основания считать, что понятие «мутное набухание» собир ательное. Мутное набухание включает различные изменения клетки с образованием в ее цитоплазме разных белковых гранул (зерна, шаровидные образования, сотовидные структуры) с помощью различных механизмов. Одним из
них и притом ведущим в патогенезе мутного набухания следует считать
набухание и деструкцию крист митохондрий, что ведет к потере ферментов
энергетического обеспечения клетки и последующему «гидропическому отеку» ее цитоплазмы в результате нарушения механизма контроля концентрации внутриклеточных электролитов, главным образом натрия.
161
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Вероятно причиной возникновения зернистой дистрофии в нашем случае
являлась функция УДПFe ускорять обменные процессы (т. е. поступление
избыточного количества питательных веществ в клетки печени стимулировало формирование дополнительного числа митохондрий и увеличение их размера вследствие депонирования питательных веществ).Зернистая дистрофия
носила компенсаторно-приспособительный характер, как правило, не влекущий за собой функциональной недостаточности печени и являющийся обратимым процессом.
162
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Глава 5. Расчет экономической эффективности использования УДП
железа в качестве биологически активной добавки
Экономическая эффективность применения УДП железа
(свиноматки и поросята)
Для расчета экономической эффективности применения УДП железа согласно методике, предложенной нами, мы использовали экспериментальные
данные,
характеризующие
продуктивность
свиноматок
и
поросят-
молочников.
В основу расчетов легли многоплодие свиноматок, сохранность поросят, а
также среднесуточный и валовый прирост поросят за подсосный период
(табл. 5.1).
Основным критерием при расчете была выбрана стоимость 1 кг живой
массы поросенка-молочника при реализации на рынке, которая на момент
исследований, в среднем по региону, составляла 145 рублей.
Таблица 5.1 – Показатели, использованные при расчете экономической
эффективности
Показатели
Многоплодие, гол
Сохранность,%
Среднесуточный прирост, г
Валовый прирост, кг
Группы
Продуктивность свиноматок
Контроль
Опыт
10,2
10,3
90,2
95,1
Продуктивность поросят-молочников
Контроль
Опыт 1
Опыт 2
188
203
211
9,555
9,910
10,464
Проведение расчетов, для наглядности, осуществлялось на 100 голов свиноматок.
163
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В результате нами были получены данные, отражающие эффективность
применения УДП железа в качестве биологически активной добавки в рационах супоросных свиноматок и поросят-молочников (табл. 5.2).
Таблица 5.2 – Экономическая эффективность применения УДП железа
Группы
Контроль Опыт 1
Количество деловых поросят, гол
920,0
979,5
Валовый прирост, кг
8791,0
9707,1
Дополнительный прирост, кг
916,1
Стоимость дополнительного прироста, руб.
132834,5
Расход УДП железа, г
43,6
Затраты на УДП железа, руб.*
1047,2
Стоимость дополнительных затрат, руб.
57940
Общее количество затрат, руб.
58987,2
Экономический эффект, руб.
73847,3
Эффективность на 1 рубль затрат, руб.
1,25
Примечание: * на основании ориентировочной рыночной стоимости
сяч рублей за 1 кг.
Показатели
Опыт 2
979,5
10249,5
1458,5
211482,5
56,4
1354,3
68800
70154,3
141328,2
2,01
– 24 ты-
Согласно этим данным, применение УДП железа в рационе супоросных
свиноматок (опыт 1) способствовало повышению количества продукции, в
сравнении с контролем, на 5,7%, а дополнительное введение данной добавки
в подкормку поросят-молочников (опыт 2) дает дополнительно 18,8%.
В соответствие с этим экономический эффект от введения УДП железа в
1-й опытной группе составил 40650 рублей 80 копеек, а во 2-й – 160557 рублей 30 копеек. В целом экономическая эффективность применения нанопорошка железа составила в первой опытной группе 1,25, а во второй – 2,01
рубля, что на 60,8% больше.
164
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Экономическая эффективность применения УДП железа
(свиньи на откорме)
В результате осуществления мероприятий нами получены данные отображенные в таблице 5.3.
Таблица 5.3 – Экономическая эффективность применения УДП железа
Группы животных
Показатель
Контроль
Опыт 1
1
2
3
Кол-во свиней в
8
8
начале опыта, гол.
Сохранность, %
100
100
Средняя живая масса
94
97
в конце опыта, кг
Среднесуточный
533
566
прирост, г
Данные в расчете на 1000 голов свиней
Сохранность, гол
1000
1000
Валовый прирост, кг
64000
68000
Дополнительный прирост
4000
по сравнению с контролем, кг
Стоимость дополнительного
224000
прироста в ценах 2011 г, руб.*
Расход препаратов, г
163
Стоимость затраченных
3912
препаратов, руб.**
Стоимость дополнительных
51000
затрат, руб
Доход от применения
169088
препаратов, руб.
Экономический эффект
3,07
на 1 руб.затрат , руб
Примечание: Стоимость 1 кг живой массы - 56 руб.*
Стоимость 1кг УДПFe – 24000 руб.**
165
Опыт 2
4
8
100
102
600
1000
73000
9000
504000
726
17424
108000
378576
3,02
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таким образом, учитывая все показатели экономической эффективности при применении ультрадисперсного железа в качестве биологически активной добавки, нами была рассчитана экономическая эффективность на 1
рубль затрат. В первой опытной группе (использование УДПFe в дозировке
0,08 мг/кг живой массы семь дней в месяц на протяжении опыта) она составила 3,07 рубля, во второй опытной группе (ежедневное использование
УДПFe в дозировке 0,08 мг/кг живой массы) - 3,02 рубля.
166
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Глава 6. Выводы и предложения производству
1. Включение УДП железа в рацион свиноматок в дозе 0,08 мг на 1 кг живой массы ежедневно в период последней трети супоросности способствовало стимуляции обменных процессов и улучшению общего физиологического
состояния. Количество эритроцитов в крови увеличилось на 6,9%, гемоглобина – на 5,2%, общего белка – на 13,7%. В результате улучшения гематологических показателей наблюдалось сокращение потерь живой массы за подсосный период на 9%, повышение крупноплодности на 3% и сохранности
поросят на 5,4%.
2. Поросята-молочники, полученные от опытных свиноматок в сравнении
с контролем, имели более высокие гематологические показатели. Количество
эритроцитов у них было выше на 10,8%, гемоглобина на 10,9%, общего белка
на 13% и глюкозы на 11,4%.
3. Введение ультрадисперсного железа непосредственно в рацион поросят-молочников способствовало увеличению числа эритроцитов на 18,4%,
гемоглобина на 16,8%, общего белка на 21% и глюкозы на 19,8%, по сравнению с контролем.
4. Ежедневное включение ультрадисперсного железа в рацион поросятмолочников в дозе 0,08 мг на 1 кг живой массы стимулировало повышение
количества сывороточного железа на 45,2%.
5. Повышение
иммунобиологического
статуса поросят-молочников
наблюдалось при ежедневном введении в подкормку УДП железа в указанной дозировке. При этом бактерицидная активность сыворотки крови возрастала на 6,4%, активность лизоцима на 9,3%, а стимулированная активность
нейтрофилов – на 16,4%.
6. Оптимальная кратность введения нанопорошка железа в рационы свиней в период доращивания и откорма ежедневно в течение семи дней в месяц
в дозировке 0,08 мг/кг живой массы животного. Она оказала существенное
влияние на гематологические показатели, обмен веществ и позволила повысить прирост живой массы свиней на 3,2%.
167
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
7. Выявлено достоверное повышение содержания в крови эритроцитов на
19,0%, гемоглобина на 9,8%, тромбоцитов на 13,2%, общего белка на 18,6%,
мочевины на 39,6% и креатинина на 0,9%, что свидетельствовало об усилении обменных процессов в организме животных.
8. Питательные вещества рациона при оптимальной кратности введения
препарата усваивались свиньями лучше за счет лучшего переваривания сырого протеина на 5,8% , сырого жира на 1,5% , сырой клетчатки на 6,9% и
БЭВ на 3,7% в сравнении с животными контрольной группы.
9. Биохимическими исследованиями мышечной и жировой ткани опытных свиней подтверждено положительное влияние нанопорошка железа.
Йодное число жира - снизилось на 2,27%, за счет повышения содержания
насыщенных жирных кислот. Изменился и минеральный состав мышечной
ткани, отмечено более высокое содержание таких важных для организма человека элементов как кальций на 63,6%, фосфор на 15,2% и железо на 52,5%
соответственно.
10. В мясе животных получавших УДП железо отсутствовали органолептические пороки, ухудшающие кулинарные характеристики продукта.
11. Экономическая эффективность использования ультрадисперсного порошка железа в кормлении свиней составила 3,07 рубля на 1 рубль затрат.
Предложения производству
1. Для улучшения физиологического состояния, повышения продуктивности свиноматок рекомендуется использовать УДП железа в качестве биологически активной добавки к рациону в дозировке 0,08 мг на 1 кг живой
массы ежедневно в период последней трети супоросности.
2. С целью профилактики железодефицитных состояний, улучшения иммунобиологического статуса поросят-молочников, а также для повышения
приростов массы рекомендуется ежедневное включение УДП железа в состав
подкормки, начиная с 5-ти дневного возраста, в дозировке 0,08 мг на 1 кг живой массы.
168
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
3. В результате полученных данных исследований целесообразно рекомендовать использование нанопорошка железа ежедневно семь дней в месяц
в дозировке 0,08 мг/кг живой массы животного в сутки в качестве биологически активной добавки в период доращивания и откорма свиней с целью повышения продуктивности животных, улучшения физиологического состояния и повышения качества получаемой продукции.
169
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Абрамов С.С. Перекисное окисление липидов и эндогенная интоксикация
(значение в патогенезе болезней животных, пути коррекции): монография
/ С.С. Абрамов и [др.]. Витебск: УО «ВГАВМ», 2007. – 193с.
2. Админа, Л.Я. Как составить рационы для свиней /Л.Я. Админа, В.И.
Скорятина. // Справочная книга. – М.: Колос, 1979. – 95 c.
3. Айгунов, И.Г. Влияние уровня протеина в рационе помесных подсвинков
на откормочные качества / И.Г. Айгунов. – Дагестан.: Тр. ДагНИИСХ. –
1969, т. 6. - С. 46-49.
4. Алиев,
А.А.
Профилактика
нарушений
обмена
веществ
у
сельскохозяйственных животных / Пер. со словац. К. Богданова, Г. А..
Терентьевой; Под ред. и с предисл. А.А. Алиева.- М.: Агропромиздат,
1986. - 384 с.
5. Амплеева, Л.Е. Физиологическое состояние кроликов при введении в
рацион вики, выращенной с использованием ультрадисперсных порошков
железа и кобальта: автореф. дис… канд. биол. наук. / Л.Е. Амплеева. Рязань, 2006. – 25 с.
6. Андреева, В.А. Фермент пероксидаза: участие в защитном механизме
растений / В.А. Андреева. – М.: Лесная пром-сть, 1988. – 72 с.
7. Антина, Е.В. Химические основы жизни / Е.В. Антина, Е.В. Румянцев,
Ю.В. Чистяков. – М.: КолосС, 2007. – 60 с.
8. Афонский, С.И. Биохимия животных / С.И. Афонский. – М.: Высшая
школа, 1970. – 612 с.
9. Бажов, Г.М. Практическое свиноводство / Г.М. Бажов, Л.А. Бахирева. –
Краснодар.: Печат. двор Кубани, 2002. – 155 с.
10.
Баранников, А.И. Актуальные проблемы развития свиноводства в
Российской Федерации / А.И. Баранников, Н.В. Михайлов, Ю.А. Колосов
// Актуальные проблемы производства свинины в Российской Федерации:
матер. 15-го заседания межвуз. координац. совета по свиноводству и
междунар. науч.-производ. конф. Персиановский: ДГАУ, 2006. С. 4–13.
170
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
11.
Карпуть, И.М. Белковый состав крови у здоровых и больных анемией
поросят / И.М. Карпуть, М.Г. Николадзе // Международный аграрный
журнал: Ежемесячный научно-производственный журнал для работников
агропромышленного комплекса. – 2001. – N5. – С. 37-41.
12.
Березин, Б. Д. Металлопорфирины / Б. Д. Березин, Н. С. Ениколопян. –
М.: Наука, 1988. –159 с.
13.
Броди, С. Биоэнергетика и рост / С. Броди. – Нью-Йорк, 1945. – 442 с.
14.
Васильева, Е.А. Клиническая биохимия сельскохозяйственных животных. / Е.А. Васильева. – М.: Россельхозиздат, 1982. – 254 с.
15.
Ведомственная
целевая
программа
"Развитие
свиноводства
в
Российской Федерации на период 2006–2010 годов и до 2015 года" :
проект / М-во сел. хоз-ва Рос. Федерации, Федер. агентство по сел. хоз-ву,
Рос. акад. с.-х. наук, Союз рос. производителей свинины; сост.: В.И.
Черноиванов [и др.]. – Москва, 2005. – 79 с.
16.
Ветпрепарат нового поколения / М. Горшков [и др.] // Птицеводство. –
2000. – N2. – С. 36-40.
17.
Викторов, П.И. Методика и организация зоотехнических опытов:
метод. пособие для высш. с.-х. учеб. заведений / П.И. Викторов, В.К.
Менькин. – М.: Агропромиздат, 1991. – 112 с.
18.
Вирясов, Г.П. Использование сапропелей и отходов некоторых
производств в животноводстве / Г.П. Вирясов: Тез. докл. международного
симпозиума. – Минск, 2002. – С. 185-186.
19.
Внутренние болезни животных / Под общ. ред. Г.Г. Щербакова, А.В.
Коробова. – СПб.: Изд-во «Лань», 2002. – 736 с.
20.
Волкова, Е.С. Методы научных исследований в ветеринарии / Е.С.
Волкова, В.Н. Байматов. – М.: КолосС, 2010. – 183 с.
21.
Георгиевский, В.И. Физиология сельскохозяйственных животных /
В.И. Георгиевский. – М.: Агропромиздат, 1990. – 511 с.
22.
Георгиевский,
В.И.
Минеральное
питание
животных
/
В.И.
Георгиевский, Б.Н. Аненков, В.Т. Самохин. – М.: Колос, 1979 – 470 с.
171
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
23.
Гильмутдинов, Р.Я. Физиология крови / Р.Я. Гильмутдинов, Р.З.
Курбанов. – Казань.: изд-во Тат. гос. гуман. ин-та, 1999. – 183 с.
24.
Глущенко, Н.Н. Физико-химические закономерности биологического
действия высокодисперсных порошков металлов: автореф. дис... д-ра
биол. наук: 03.03.01 / Н.Н. Глущенко. М., 1988 – 50 с.
25.
Глущенко, Н.Н. Сравнительная токсичность солей и наночастиц
металлов и особенность их биологического действия / Н.Н. Глущенко,
О.А. Богословская, И.П. Ольховская // Материалы Международной
научно-практической конференции "Нанотехнологии и информационные
технологии – технологии XXI века". – М., 2006. – С. 93-95.
26.
Голиков, А.Н. Физиология сельскохозяйственных животных / А.Н.
Голиков [и др.] – М.: Агропромиздат, 1991. – 432 с.
27.
Гурин, В.Н. Физиология человека и животных: Практикум: учеб.
пособие / В. Н. Гурин. – Мн.: БГУ, 2002. – 120 с.
28.
Двинская, Л.М. Определение переокисления липидов тканей с
помощью теста с 2-тиобарбитуровой кислотой / Л.М. Двинская, Л.Н.
Никифорова // Изучение липидного обмена у сельскохозяйственных
животных: Методические указания. – Боровск, 1980. – С. 37-40.
29.
Диксон, М. Ферменты. В 3 т. Т. 2. / М. Диксон, Э. Уэбб.; под общ. ред.
В.К. Антонова, А.Е. Браунштейна; пер. с англ. Л.М. Гинодмана, М.И.
Левянт. – М., 1982. – С. 692-713.
30.
Дмитроченко, А.П. Методы нормирования кормления сельскохозяйственных животных /А.П. Дмитроченко [и др.] – Л.: Колос, 1970. –
284 с.
31.
Евстигнеева,
Р.П.
Химия
липидов
/
Е.А.
Звонкова,
Г.А.
Серебрянникова, В.И. Швец. – М:. Химия, 1983. – 296 с.
32.
Елисеев,
животных.
А.П.
/ А.П.
Анатомия
Елисеев,
и
физиология
сельскохозяйственных
И.А. Сафонов, В.И. Бойко. – М.:
Агропромиздат, 1991. – 493 с.
172
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Емельяненко, П. А. Иммунология животных в период внутреннего
33.
развития. М.: Агропромиздат, 1987. – 215 с.
Заика, Л.А. Особенности иммунного статуса новорожденных поросят и
34.
их коррекция гуморальными факторами тимуса: Автореф. дис. ... канд.
биол. наук: 03.03.01 / Л.А. Заика. – Киев, 1989. – 21 с.
Иванов, Д.П.
35.
поросят-сосунов.
Значение
//
Пути
микроэлементов при
увеличения
выращивании
производства
продуктов
животноводства в колхозах и совхозах БССР. – Минск: «Звезда», 1958. –
С. 342-352.
Идельсон, Л.И. Железодефицитные анемии. В кн.: Руководство по
36.
гематологии / Л.И. Идельсон. – М.: 1985. – С. 5-22.
Ильин,
37.
А.П.
Электрохимические
свойства
электровзрывных
энергонасыщенных порошков меди и серебра / А.П. Ильин, Л.Ф. Трушина,
Н.Г. Родкевич // Физика и химия обработки материалов. – 1995. – N3. – С.
122–125.
Ильин,
38.
А.
П.
Структура,
свойства
и
проблемы
аттестации
нанопорошков металлов [Электронный ресурс] / А. П. Ильин, А. В.
Коршунов, Л. О. Толбанова. – Электронные текстовые данные (1 файл:
384 Кб) // Известия Томского политехнического университета / Томский
политехнический университет. – Томск, 2009. – Т. 314, № 3: Химия. С. 3540.
39.
Иммунитет и его коррекция в ветеринарной медицине / П. А. Красочко
[и др.]. – Смоленск, 2001. – 323 с.
40.
Иммунология / Е.С. Воронин [и др.] – М.: Колос-Пресс, 2002. – 408 с.
41.
Кабанов, В.Д. Свиноводство / В.Д. Кабанов. – М.: Колос, 2001. – 431 с.
42.
Кабанов, В.Д. Рост, развитие и продуктивность свиней / В.Д. Кабанов //
Свиноводство. – 2002, №3. – С. 27-28.
43.
Кабанов, В.Д. Интенсивное производство свинины / В.Д. Кабанов. –
М., 2003. – 430 с.
173
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Кабанов, В.Д. Практикум по свиноводству / В.Д. Кабанов. – М.:
44.
КолосС, 2008. – 311 с.
Казюкова, Т.В. Клиническая фармакология и терапия Т. 9. Новые
45.
возможности ферротерапии железодефицитной анемии / Т.В. Казюкова [и
др.] М., 2000. – С. 88–91.
Кальницкий, Б.Д. Минеральные вещества в кормлении животных / Б.Д.
46.
Кальницкий. – Ленинград.: Агропромиздат, 1985 – 204 с.
Камышников, В.С. Клинические лабораторные тесты от А до Я и их
47.
диагностические профили / В.С. Камышников. – Минск: Беларуская
навука, 1999. – 415 с.
Кебец,
48.
А.П.
Применение
комплексного
соединения
железа с
витаминами В3 и С в птицеводстве / А.П. Кебец, Н.М. Кебец, В.Н.
Бочкарев // Зоотехния. – 2004. – N11. – С. 20–21.
Коваленко, Л.В. Высокоэффективные биопрепараты нового поколения
49.
/ Л.В. Коваленко, Г.Э. Фолманис. – М.: ИМЕТ РАН, 2000. - №4/5. – С. 20.
Коваленко, Л.В. Биологически активные нанопорошки железа / Л.В.
50.
Коваленко, Г.Э. Фолманис. – М.: Наука. – 2006. – 124 с.
Колесов, С.Н. Материаловедение и технология конструкционных
51.
материалов / С.Н. Колесов. – М.: Высшая школа, 2007. – 535с.
Кононский, А.И. Биохимия животных / А.И. Кононский. – М.: Колос,
52.
1992. – 526 с.
Коровина, Н.А. Железодефицитные анемии у детей (руководство для
53.
врачей) / Н.А. Коровина, А.Л. Заплатников, И.Н. Захарова. – М., 1999. – 64
с.
54.
Коршунов, А. В. Электрохимические свойства электровзрывных
ультрадисперсных порошков меди / А. В. Коршунов, А. П. Ильин //
Физика и химия обработки материалов. – 2007. – N 3. – С. 70-75.
55.
Кособудский, И.Д. Введение в химию и физику наноразмерных
объектов. / И.Д. Кособудский, Н.М. Ушаков, Г.Ю. Юрков. – Саратов:
Сарат. техн. ун-т, 2006. – 182с.
174
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Коссе, Г. Дифференцированное кормление свиноматок / Г. Коссе, В.
56.
Блинов, С. Краснокутский. // Животноводство России. Спец. выпуск. –
2005. – 41 с.
Костин, А.П. Физиология сельскохозяйственных животных / А.П.
57.
Костин, Ф.А. Мещеряков, А.А. Сысоев. – М.: Колос, 1983. – 479 с.
Костина, Т.Е. Физиологические особенности функциональных систем у
58.
свиней (учебное пособие) / Т.Е. Костина. – Казань: изд-во КВИ, 1982. – 81
с.
59.
Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии: Справочник /
И.П. Кондрахин [и др.]. – М.: Агропромиздат, 1985. – 287 с.
60.
Клиническая
лабораторная
диагностика: методы исследования
(учебное пособие) / И.А. Зупанец [и др.]. – Харьков: Изд-во НФаУ:
Золотые страницы, 2005. – 200 с.
61.
Клиническая диагностика с рентгенологией: учебник для вузов / Е.С.
Воронин [и др.]. – М.: КолосС, 2006. – 516 с.
62.
Кнорре, Д. Г. Биологическая химия / Д.Г. Кнорре, С.Д. Мызина. – М.:
Высшая школа, 2000 – 479 с.
63.
Кольман, Я. Наглядная биохимия / Я. Кольман, К.-Г. Рем; под общ. ред.
П.Д. Решетова; пер. с нем. Л.В. Козлова. – М.: Мир, 2000. – 469 с.
64.
Крамской, А.С. Особенности роста, развития и формирования мясной
продуктивности молодняка свиней крупной белой породы при различных
технологиях кормления и содержания: автореф. дис... канд. с/х наук:
06.02.10 / А.С. Крамской. – Оренбург, 2005. – 23 с.
65.
Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник / В.В.
Меньшиков [и др.]. – М.: Медицина, 1987. – 368 с.
66.
Лабораторные исследования в ветеринарии: Справочник
/ Б.И.
Антонов [и др.]. – М.: Агропромиздат, 1991. – 320 с.
67.
Лактобифадол для стимуляции продуктивности дойных коров / Н.В.
Данилевская [и др.] // Ветеринария – 2003. – N2 – С. 50-55.
175
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
68.
Лемперт, М.Д. Биохимические методы исследования / М.Д. Лемперт. –
Кишинев.: Картя Молдовеняскэ, 1964. – 295 с.
69.
Ленинджер, А. Основы биохими: в 3 т. / А. Ленинджер; под общ. ред.
В.В. Борисова, М.Д. Гроздовой, С.Н. Преображенского; пер. с англ. В.А.
Энгельгардта, Я.М. Варшавского. – М.: Мир, 1985. – Т 1-3.
70.
Лобаева,
Т.А.
Ранозаживляющие
свойства
композиций
с
наночастицами металлов / Т.А. Лобаева [и др.] // Материалы III
международной
научно-практической
конференции
"Здоровье
и
образование в XXI веке". – Москва, 2002. – С. 260.
71.
Логинова, В. Работа с молодняком начинается со свиноматок / В.
Логинова // Животноводство России. – 2004. – №2. – C. 22-23.
72.
Луговская, С. А. Гематологический атлас: атлас / С. А. Луговская, М. Е.
Почтарь;
Российская
медицинская
академия
последипломного
образования. – 2-е изд., перераб. и доп. – М.: Триада, 2008. – 296 с.
73.
Матяев, В.И. Изменение переваримости и использования питательных
веществ рациона у подсвинков под влиянием длительной нагрузки
жиром и микроэлементами / В.И. Матяев, С.А. Лапшин // Межвуз.
тематич. сб. науч. тр. – Саранск, 1980. – С. 103-108.
74.
Матяшов,
Е.Ю.
Продуктивные
и
некоторые
биологические
особенности свиней разных генотипов при использовании биокомплексов:
автореф. дис... канд. с.-х. наук: 06.02.10 / Е.Ю. Матяшов. – Персиановка. –
2000. – 24 с.
75.
Махаев, Е.А. Энергетическая ценность прироста и качество мяса у
свиней мясного типа при разных уровнях кормления / Е.А. Махаев //
Зоотехния. – 2003. – N9. – С. 17-18.
76.
Мейер, Д. Ветеринарная лабораторная медицина. Интерпретация и
диагностика / Д. Мейер, Д. Харви; под общ. ред. ред. Ю. М. Кед; пер. с
англ. Л. А. Певницкий. – М.: Софион, 2007. – 458 с.
176
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Мергель – природный источник минеральных веществ в рационах
77.
поросят – отъемышей: Л.Н. Гамко [и др.] // Свиноводство. – 2002. – N4. –
С. 17-18.
Методы
78.
ветеринарной
клинической лабораторной диагностики:
Справочник / Под ред. проф. И.П. Кондрахина. – М.: КолосС, 2004. – 520
с.
79.
Методические рекомендации по повышению продуктивных качеств
свиноматок / Н.А. Лобан [и др.]. – Минск, 2008. – 20 с.
80.
Мецлер, Д. Биохимия. Химические реакции в живой клетке: в 3 т. / Д.
Мецлер; под общ ред. А. Е. Браунштейна, Л. М. Гинодмана, Е. С.
Северина; пер. с англ. – М.: Мир, 1980. – Т. 1-3
81.
Мичурин, В. Состояние основных пород в России / В. Мичурин //
Свиноводство. – 2000, №2. – С. 2-3.
82.
Молекулярная биология клетки / Б. Албертс [и др.]; под общ. ред. Г.П.
Георгиева, Ю.С. Ченцова; пер. с англ. Т.Н. Власик, В.П. Коржа, В.М.
Маресина, Г.В. Крюкова. – М.: Мир, 1994. – 517 с.
83.
Молочкина, Е.М. Модификация липидного компонента нейрональных
мембран антиоксидантом как способ управления их функциональной
активностью / Е.М. Молочкина, Н.В. Боровок, Е.Б. Бурлакова //
Биологические мембраны. – 1991. – т.8. – N11. – С. 1146-1147.
84.
Морш, Н.А. Новые ультрадисперсные биопрепараты / Н.А. Морш, Т.С.
Королевская, Л.В. Коваленко, Г.Э. Фолманис // Птицеводство. – 1999. –
N4. – С. 10.
85.
Мэттьюз, Ф. Мир материалов и технологии: композиционные
материалы. Механика и технология / Ф. Мэттьюз, Р. Ролингс. – М.:
Техносфера, 2004. – 408с.
86.
Мысик, А. Состояние и перспективы развития свиноводства в России /
А. Мысик. // Свиноводство. – 2001 – N1. – С. 2-3.
87.
Назарова,
A.A.
Действие
на
кроликов
железа
и
меди
в
ультрадисперсной форме при их введении в организм животных с кормом
177
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
/ А.А. Назарова [и др.] // Кролиководство и звероводство. – 2008 – N6 – С.
8-10.
Назарова, А.А. Влияние нанопорошков железа, кобальта и меди на
88.
физиологическое состояние молодняка крупного рогатого скота: автореф.
дис… канд. биол. наук: 03.03.01 / А.А. Назарова. – Рязань, 2009. – 21 с.
Негреева, А.Н. Производство свинины в фермерских хозяйствах /А.Н.
89.
Негреева, А.И. Завражнов, В.С. Сушков. // Учебное пособие. – М.: Колос.
– 2008. – 168 с.
Нетеса, А.И. Производство свинины в пригородных хозяйствах
90.
Московской области / А.И. Нетеса. – М.: Колос, 1986. – 180 с.
Нетеса, А.И. Свиноводство / А.И. Нетеса. – М.: ЭКСМОЛикпресс. –
91.
2001. – 207 с.
Нетеса, А.И. Разведение свиней / А.И. Нетеса. – М.: Астрель: АСТ. –
92.
2005. – 223 с.
Николадзе, М. Г. Диагностика и профилактика алиментарной анемии и
93.
иммунной недостаточности у поросят: автореферат дис... канд. вет. наук:
16.00.02 / М. Г. Николадзе. – Витебск, 2002. – 20 с.
Ноздрин, Н.Т. Обмен веществ и энергии у свиней / Н.Т. Ноздрин, А.Т.
94.
Мысик. – М.: Колос, 1975. –240 с.
Нормы и рационы кормления сельскохозяйственных животных.
95.
Справочник / А.П. Калашников [и др.]. – 3-е изд. доп. и перераб. – М.,
2003. – 456 с.
Овсянников, А.И. Основы опытного дела в животноводстве / А.И.
96.
Овсянников. – М.: Колос, 1976. – 304 с.
Овчинников, А. Варианты скрещивания и продуктивность свиноматок /
97.
А. Овчинников, А. Соловых. // Животноводство России. – 2005. – N9. – 31
с.
98.
Павлов, Г. Оценка терапевтической эффективности К-ульдиферрита в
сравнении с Феррум Лек при гипохромной анемии овец / Г. Павлов,
178
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Окпаттах Годвин Агбеко Куджо, Л. Зубкова // Международный
сельскохозяйственный журнал. – 2001. – N3. – С. 60-62.
99.
Петров, В.Н. Физиология и патология обмена железа / В.Н. Петров. Л., 1982. – 224 с.
100. Петрухин, И.В. Биологические основы выращивания поросят / И.В.
Петрухин. – М.: Россельхозиздат, 1976. – 288 с.
101. Петрухин, И.В. Корма и кормовые добавки: Справочник / И.В.
Петрухин. – M.: Росагропромиздат, 1989. – 526 с.
102. Петрушенко, Ю. Недокормишь поросенка – будешь в убытке / Ю.
Петрушенко // Животноводство России. Спец. выпуск. – 2005. – 40 с.
103. Плохинский, Н.А. Руководство по биометрии для зоотехников / Н.А.
Плохинский. – М.: Колос, 1969. – 225 с.
104. Покровский,
А.А.
К
вопросу
о
перекисной
резистентности
эритроцитов. Вопрос питания / А.А. Покровский, А.А. Абраров. – 1964. –
С. 44-49.
105. Покровский, А.А. Биохимические методы исследования в клинике /
А.А. Покровский. - М.: –1969. – 652 с.
106. Помогайло, А.Д. Нано - частицы металлов в полимерах / А.Д.
Помогайло, А.С. Розенберг, И.Е. Уфлянд. – М.: Химия, 2000. – 672с.
107. Практикум по клинической диагностике болезней животных: учеб.
пособие для вузов / М.Ф. Васильев [и др.]; под общ. ред. Е.С. Воронина. –
М.: КолосС, 2004. – 268 с.
108. Преображенский, Н.А. Химия биологически активных природных
соединений: в 2 ч. Ч. 1 / Н.А. Преображенского, Р.П. Евстигнеевой. – М:.
Химия, 1970. – 512 с.
109. Прудников, В.С. Стимуляция иммунного ответа натрия тиосульфата
при вакцинации свиней против сальмонеллеза / В. С. Прудников, Е. И.
Большакова // Международный аграрный журнал. – 1998. – N5. – С.55-56.
110. Прудников, В.С. Влияние иммуностимуляторов на напряженность
иммунитета у свиней, вакцинированных против классической чумы / В. С.
179
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Прудников, В. П. Жалдыбин // Проблемы аграрной отрасли в начале ХХI
века: матер. междунар. науч.-практ. конф. Смоленск, 12–13 марта 2002 г.
Смоленск, 2002. Ч. 1. С. 203–206.
111. Ратнер, М. Нанотехнология: простое объяснение очередной гениальной
идеи / Ратнер Д; пер.с англ. – М.: Вильямс, 2004. – 240с.
112. Рекомендации по применению иммунокорректоров для повышения
резистентности
и
профилактики
болезней
молодняка
сельскохозяйственных животных и птиц / И.М. Карпуть [и др.]. Витебск:
ВГАВМ, 2009. – 56 с.
113. Рогожин, В. В. Пероксидаза как компонент антиоксидантной системы
живых организмов / В. В. Рогожин. – СПб.: ГИОРД, 2004. – 240 с.
114. Ройт, А. Иммунология: пер. с англ. / А. Ройт, Дж. Простов, Д. Мейл. –
М.: Мир, 2000. – 592 с.
115. Рокицкий, П.Ф. Биологическая статистика / П.Ф. Рокицкий. Минск:
Вышэйш. шк. - 1973. – 320 с.
116. Роко, М.К. Нанотехнология в ближайшем десятилетии. Прогноз
направления исследований / М.К. Роко; под общ. ред. М.К. Роко, Р.С.
Уильямса, П. Аливисатоса; пер. с англ. – М.: Мир, 2002. – 292с.
117. Рослый, И.М. Особенности биохимической адаптации при вирусных
гепатитах / И. М. Рослый, С. В. Абрамов //Эпидемиология и
инфекционные болезни. – 2003. – N4 . – С. 45-52.
118. Румянцев, А. Г. Эритропоэтин: биолог. свойства, возрастн. регуляция
эритропоэза, клин. применение / А. Г. Румянцев, Е. Ф. Морщакова, А. Д.
Павлов. - М.: Гэотар-мед, 2002. - 399 с.
119. Рядчиков, В. Г. Аминокислотное питание свиней. Рекомендации / В. Г.
Рядчиков, М. О. Омаров, Б. Д. Кальницкий, В. В. Щеглов. – М., 2000
120. Рядчиков,
В.
Продуктивность
свиней разных генотипов
при
нормированном и ограниченном кормлении / В. Рядчиков, Н. Соколов, А.
Мироненко. //Свиноводство. – 2003, №5. – С. 11-12.
180
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
121. Савицкий, П.А. Существование центра связывания индолил-3-уксусной
кислоты в пероксидазах растений. Структурное сходство пероксидаз и
ауксин – связывающих белков / П.А. Рожков [и др.] // Биохимия. – 1998. –
Т. 63. – 6. – С. 749-754.
122. Свечин, К.Б. Введение в зоотехнию: учебник / К.Б. Свечин. – М.:
Агропромиздат, 1986. – 120 с.
123. Севрюгин, В. Сравнительная оценка свиней по воспроизводительным
качествам при двухпородном скрещивании / В. Севрюгин // Свиноводство.
– 2003, №3. – С. 6 - 7.
124. Серых, М.М. Общая и экологическая иммунология / М.М. Серых, О.Н.
Макурина, А.М. Петров [и др.]. – Самара: Изд-во «Самарский
университет», 2000. – 175 с.
125. Симарев, Ю. Влияние окружающей среды на физиологическое
состояние свиней / Ю. Симарев // Свиноводство. – 1999. – N4. – С. 23–26.
126. Симон, Ж. Молекулярные полупроводники / Ж. Симон, Ж. Ж. Андре. –
М.: Мир, 1998. – 379 с.
127. Симонян, Г.А. Ветеринарная гематология / Г.А. Симонян, Ф.Ф.
Хосамутдинов. – М.: Колос, 1995. – 256 с.
128. Скопищев, В.Г. Физиология животных и этология / В.Г. Скопищев [и
др.]. – М.: КолосС, 2004. – 720 с.
129. Мусил, С. Современная биохимия в схемах: монография / Я. Мусил, О.
Новакова, К. Кунц; пер. с англ.: С. М. Аваева, А. А. Байков. - 2-е изд. – М.:
Мир, 1984. – 216 с.
130. Горлов, И.Ф. Способы повышения эффективности производства
свинины и улучшения её качества: рекомендации / И.Ф. Горлов, В.И.
Водянников, А.И. Сивко [и др.]. – М.: Вестник РАСХН, 2005. – 25 с.
131. Старков,
А.
Влияние
условий
содержания
на
здоровье
и
продуктивность животных / А. Старков, К. Девин, Н. Пономарев //
Свиноводство. – 2004. – N6. – С. 30–31.
181
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
132. Степанов, В.М. Молекулярная биология. Структура и функции белков:
учеб. для биол. спец. вузов / В.М. Степанов; под. ред. А.С. Спирина. – М.:
Высш. шк., 1996. – 335 с.
133. Строев, Е. А. Биологическая химия / Е.А. Строев. – М.: Высшая школа,
1986. – 479 с.
134. Сусол, Р. Скороспелость генотипов крупной белой породы / Р. Сусол. //
Животноводство России. – 2005. – N9. – 31 с.
135. Тельцов, Л.П. Концепция выращивания животных и увеличение
продуктивности животноводства в 2-3 раза / Л.П. Тельцов // Современные
наукоемкие технологии. М., 2004. С. 27–32.
136. Темираев, В. И. Свиньи растут быстрее, и мясо вкуснее / В. Темираев,
В. Тибилов // Животноводство России. – 2003. – N12. – C. 28-29.
137. Теппер, Н.М. Питание свиней: теория и практика / Н.М. Теппер; пер с
англ. – М.: Агропромиздат, 1987. – 313 с.
138. Токарь, В. Совершенствование технологии кормления поросят / В.
Токарь, А. Файнов. // Свиноводство. – 2004. – N3. – С. 12-14.
139. Торпаков, Ф.Г. Гигиена содержания свиней / Ф.Г. Торпаков. – М.:
Колос, 1969. – 128 с.
140. Трончук, И.С. Кормление свиней / И.С. Трончук, Б.Е. Фесина, Г.М.
Почерняева. – М.: Агропромиздат, 1990. – 175 с.
141. Уайт, А. Основы биохимии. В 3 т. Т. 1. / А. Уайт [и др.]; под общ. ред.
Ю.А. Овчинникова; пер. с англ. В.П. Скулачева, Л.М. Гинодмана, Т.В.
Марченко. – М.: Мир, 1981. – 534 с.
142. Уайт, А. Основы биохимии. В 3 т. Т. 2. / А. Уайт [и др.]; под общ. ред.
Ю.А. Овчинникова; пер. с англ. В.П. Скулачева, Э.И. Будовского, Л.М.
Гинодмана. – М.: Мир, 1981. – 617 с.
143. Уайт, А. Основы биохимии. В 3 т. Т. 3. / А. Уайт [и др.]; под общ. ред.
Ю.А. Овчинникова; пер. с англ. Л.М. Гинодмана. – М.: Мир, 1981. – 726 с.
144. Уайтсайдс, Дж. Нанотехнология в ближайшем десятилетии / Дж.
Уайтсайдс, Д. Энглер, Р. Андерс; под общ. ред. М. К. Роко, Р. С.
182
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Уильямса и П. Аливисатоса; пер. с англ. А.В. Хачояна. – М.: Мир, 2002. –
292с.
145. Устинов, Д. Стресс – факторы в промышленном животноводстве / Д.
Устинов. – М.: Россельхозиздат, 1976. – 360 с.
146. Ухтверов, М.П. Сравнительная оценка чистопородного и помесного
молодняка свиней / М.П. Ухтверов. // Свиноводство. – 2000, №4. – С. 1420.
147. Физико-химические
закономерности
биологического
действия
высокодисперсных порошков металлов / Н.Н. Глущенко [и др.]
//
Химическая физика. – 2002. – Т. 21(4). – С. 79-85.
148. Фисинин, В. И. Достижения и перспективы зоотехнической науки / В.
И. Фисинин, В. В. Калашников // Птица и птицепродукты. – 2004. – N3. –
C. 12-17.
149. Фисинин, В. Успехи и проблемы российского животноводства / В.
Фисинин // Животноводство России. - 2008. – N1. – С. 4-6.
150. Фолманис, Г.Э. Ультрадисперсные металлы в сельскохозяйственном
производстве / Г.Э. Фолманис, Л.В. Коваленко. – М.: ИМЕТ РАН, 1999. 80 с.
151. Фолманис, Г.Э. Микрометаллургия нанокристаллического железа / Г.Э.
Фолманис, В.С. Иванова // Металлург. – 2002. – N8. – С. 47-49.
152. Фролова, И. Откормочные и мясные качества двух и трех породных
помесей /И. Фролова, В. Дунина, Е. Джунельбаев. // Свиноводство. – 2005,
N6. – 20 с.
153. Харитонова, И. Г. Функциональное состояние иммунной системы и
поиск способов повышения резистентности молодняка свиней: автореф.
дис. … канд. биол. наук: 03.03.01 / И.Г. Харитонова. – Боровск, 1992. – 21
с.
154. Холод, В.М. Клиническая биохимия: учеб. пособие: в 2 ч. / В.М. Холод,
А.П. Курдеко. Витебск: УО «ВГАВМ», 2005. Ч. 1. С.160–186.
183
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
155. Хохрин, С.Н. Корма и кормление животных /С.Н. Хохрин. - СПб: Лань.
–2002. – 512 с.
156. Хохрин, С.Н. Кормление сельскохозяйственных животных /С.Н.
Хохрин. - М.: Колос, 2004. – 692 с.
157. Храбустовский, И.Ф. Методические рекомендации по определению
естественной резистентности животных в условиях интенсивного их
использования / И.Ф. Храбустовский, Ю.М. Марков, В.В. Никольский [и
др.]. – Харьков: УкрНИИ экспериментальной ветеринарии, 1974. – 32 с.
158. Чернавина, И. А. Физиология и биохимия микроэлементов / И.А.
Чернавина. – М.: Высшая школа, 1970. – 310 с.
159. Чурилов, Г.И. Эколого-биологические эффекты нанокристалических
металлов: автореф. дис… док. биол. наук / Г.И. Чурилов. – Балашиха,
2010. – 42 с.
160. Шапиро, Д.К. Практикум по биологической химии / Д.К. Шапиро. –
Минск: Вышэйшая школа, 1976. – 288 с.
161. Шапиро, Д. К. О биологически активных веществах пыльцы / Д.К.
Шапиро, М. Ф. Шеметков, Л. В. Анихимовская [и др.] // Пчеловодство. –
1979. – N2. – С. 26-27.
162. Шапочкин, В. Состояние и перспективы развития животноводства в РФ
/ В. Шапочкин. // Свиноводство. – 2002. Спец. выпуск. – N1. – С. 2-4.
163. Шахбазова,
О.
Связь
биохимических
показателей
крови
с
продуктивностью / О. Шахбазова. // Свиноводство. – 1995. – N1. – С. 2334.
164. Шкункова, Ю.С. Кормление свиней на фермах и комплексах / Ю.С.
Шкункова, А.П. Пустовалов. – Л.: Агропромиздат. – 1988. – 255 с.
165. Шульга, Н. Сохранность новорожденных поросят / Н. Шульга //
Свиноводство. – 2005. – N3. – C. 28-29.
166. Шутов, Э. Г. Фармакологическая коррекция железодефицитных
анемии, стрессов и диареи у поросят раннего возраста: автореф. дис...
184
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
канд. вет. наук. 16.00.04 / Шутов Э.Г.; М-во сел. хоз-ва Рос. Федерации,
С.-Петерб. гос. вет. акад. – СПб, 1994. – 21с.
167. Элиот, В. Биохимия и молекулярная биология / В. Элиот, Д. Элиот; под
общ. ред. А. И. Арчакова, М. П. Кирпичникова, А. В. Медведева, В. П.
Скулачева; пер. с англ. – М.: МАИК «Наука/Интерпериодика», 2002. –
446 с.
168. Эйхгорн, Г. Неорганическая биохимия. В 2 т. Т. 1 / Г. Эйхгорн; под
общ. ред. М.Е. Вольпина, К.Б. Яцимирского; пер. с англ. – М.: Мир, 1978.
– 711 с.
169. Эйхгорн, Г. Неорганическая биохимия. В 2 т. Т. 2 / Г. Эйхгорн; под
общ. ред. М.Е. Вольпина, К.Б. Яцимирского; пер. с англ. – М.: Мир, 1978.
– 736 с.
170. Янченко, В. Недокорм отъемышей компенсировать невозможно /В.
Янченко. // Животноводство России. Спец. выпуск. – 2005. – 42 с.
171. Яхин, А. Кормовая добавка для откорма свиней / А. Яхин, М. Кирилов,
А. Боголюбов, Н. Суменкова, А. Абдрафиков, Б. Чернуха, Н. Ушакова, М.
Бабурина // Комбикорма. – 2003. – N2. – С. 59.
172.
Andrews, N. Iron is hot: an update on the pathophysiology of hemochroma-
tosis / N. Andrews, J. Levy // Blood. – 1998. – Vol. 92. – P. 1845-1851.
173.
Andrews, N. The iron transporter DMT1 / N. Andrews // J Biochem Cell
Biol. – 1999. – Vol. 31. – P. 991-994.Aschoff L. Patologische Anatomic. Jena,
1923. Bd 2.
174.
Cindy, N. Roy. Iron homeostasis: new tales from the crypt / N. Roy. Cindy,
A. Enns. Caroline // Blood. – 2000. – Vol. 96. – P. 4020–4027.
175. Conrad, M. A concise review: iron absorption-the mucin-mobilferrinintegrin pathway: a competitive pathway for metal absorption / М. Conrad, J.
Umbreit // Am J Hematol. – 1993. – Vol. 42. – N4 – P. 67-73.
176. Cohnheim J. Allgemeine Pathologic. Berlin, 1877. Bd 2.
177. Corradini, F. Ferrara, Ra. Jones, O. Castro, O. Onyekwere [et al.] // Blood
Cells Mol Dis. – 2003. Vol. 31. P. 299-304.
185
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
178. Clementi, F. Intestinal capillaries. I. Permeabiliti to peroxidase and ferritin /
F. Clementi, C.E. Palade // J. Cell. Biol. – 1969. – Vol.41, N1. – P. 33-58.
179.
Clementi, F., Palade, G.E. Intestinal capillaries. Permiability to peroxidase
and ferritin. - J. Cell. Biol., 1969, vol.41, p. 33-38.
180. Chiu - Wing Lam, James John T, Mc Cluskey R. et al. Pulmonary toxicity of
single-wall carbon nanotubes in mice 7 and 90 days after intratracheal instillation // Toxicol. Science. – 77. – 126-134.
181. Chen Z., Meng H., Xing G. et al. Acute toxicological affects of copper nanoparticles in vivo // The journal of physical chemistry. Toxicology letters,
2006. – 163. – 109-120.
182.
Domellof, M. Iron supplementation of breast-fed Honduran and Swedish
infants from 4 to 9 months of age / M. Domellof, R. J. Cohen, K. G. Dewey [et
al.] // J Pediatr. – 2001 – Vol. 138 – P. 679–687.
183.
Fujihara, T. Lactoferrin inhibits herpes simplex virus type-1 (HSV-1) infec-
tion to mouse cornea / T. Fujihara, K. Hayashi // Arch Virol. – 1995 – Vol. 140.
– N8 – P. 1469-1472.
184. Fridovich, I. Superoxide dismutase / I. Fridovich // Advances in Enzymology. – 1986. – Vol. 58. – P. 61-97.
185. Gordeuk, Vr. Iron overload in Africans and African-Americans and a common mutation in the SCL40A1 (ferroportin 1) gene / Vr. Gordeuk, A. Caleffi,
E.
186. Jacobs A., Worwood M.f eds., Iron in Biochemistry and Medicine, Academic Press, New York, 1974.
187.
Jacobs, A. Iron in Biochemistry and Medicine, / A. Jacobs, M. Worwood. //
Academic Press New York. – 1974. – Vol. 290. – N22. – P. 1213-1216.
188.
Jarkov S.M., Titarenko Ya.N., Churilov G.N. Electron microscopy studies
off FCC carbon particles // Carbon, 1998. V. - 36. № 5-6. – P. 595-597.
189.
Joshua M. Baughman, Vamsi K. Mootha. 2006. Buffering mitochondrial
DNA variation // Nature genetics 38, 11, 1232-1233.
186
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
190.
Hallberg, L. Iron absorption from the whole diet in men: how effective is
the regulation of iron absorption? / L. Hallberg, L. Hulten, E. Gramatkovski //
Am J Clin Nutr. – 1997. – Vol. 66. - P. 347-356.
191.
Halliwell, B. Can oxidative DNA damage be used as a biomarker of cancer
risk in humans? Problems, resolutions and preliminary results from nutritional
supplementation Studies / B. Halliwell // Free Radic. Res. – 1998. – Vol. 29. –
N 6. – P. 469-486.
192. Hoet P.M., Bruske-Hohlfeld I., Salata O.V Nanoparticles – known and unknown health risks // Journal of Nanobiotechnology, 2004. - 2:12.
193. Kagan V.E., Bayir H. Shvedova A.A. Nanomedicing and nanotoxicology:
two sides of the same coin // Nanomedicine: nanothecnology, biology and medicine, 2005. - 1. – 313-316.
194. Kawabata, H. Regulation of expression of murine transferrin receptor 2 / H.
Kawabata, R. S. Germain, T. Ikezoe, X. Tong, E. M. Green, A. F. Gombart, H.
P. Koeffler // Blood – 2001. – Vol. 98, N6. – 1949-1954.
195.
Kawabata, H. Molecular cloning of transferrin receptor A new member of
the transferrin receptor-like family / H. Kawabata, R. Yang, T. Hiramа [et al.] //
J Biol Chem. – 1999. – Vol. 274. – P. 20826-20832.Keilin D. // The history of
cell respiration and cytochromes. Cambr. Univ. Press. 1966, 416 р.
196. Oberdorster G., Oberdorster E., Oberdorster J. Nanotoxicology: An Emerging Discipline Evolving from Studies of Ultrafine Particles // Environmental
Health Perspectives, 2005. - 7 (113). – 823-839.
197. Pavlov G. V., Folmanis G.E. The uses of ultra disperse powders in the agriculture. Moskov: Center of problems of the quality of specialists, 1999. – 72 p.
198. Pavlov, G.V. The uses of ultra-disperse powders in agriculture / G.V. Pavlov, G.E. Folmanis. – Moscow: Centr of problems of the quality of specialists,
1999. – P. 72.
199. Prince, R.C. The proton pump of cytochrome oxidase / R.C. Prince // Trends
Biochem. Sci. – 1988. – Vol. 13. – P. 159-160.
187
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
200. Reis C.P., Neufeld R.I., Ribeiro A.J. et al. Nanoencapsulation II. Biomedical
applications and current status of peptide and protein nanoparticulatedelivery
systems // Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine, 2006. - 2. –
53-65.
201.
Slater, E.С. The Q Cycle, an ubiquitous mechanism of electron transfer /
E.C. Slater // Trends Biochem. Sci. - 1983. - Vol. 8. - P. 239-242.
202.
Smith, M. Apotransferrin is internalized and routed differently from Fe-
transferrin by caco-2 cells: a confocal microscopy study of vesicular transport in
intestinal cells / M. Smith, X. Alvarez-Hernandez, J. Glass // Blood. – 2000. –
Vol. 95. – P. 721-723.
203.
Roy CN, Enns CA. Blood 2000; 96: 4020-7.
204. Sahoo S.K., Parveen S., Panda J.J. The present and future of nanotechnology
in human health care // Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine,
2007. - 3. – 20-31.
205. Schrand A.M., Huang H., Carlson C. et al. Are Diamond Nanoparticles Cytotoxic // The journal of physical chemistry. Toxicology letters, 2007. — 111. 2-7.
206.
Virchow R., Die Cellular-Pathologie In Wгег Begriindung auf physiolo-
gische u. pathologische Gewebelehre dargestellt, В., 1871.
207. Wang J., Zhou G., Chan C. et al. Acute toxicity and biodistribution of different sized titanium dioxide particles in mice after oral administration // The journal of physical chemistry. Toxicology letters, 2007. - 168. – 176-185.
208. Warheit D.B., Laurence B.R., Reed K.L. et al. Comparative pulmonary assessment of single-wall carbon nanotubes in rats // Toxicol. Science. — 77. 117
- 125.
188
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Бумага офсетная. Гарнитура Times. Печать лазерная
Усл. печ. л 11,2
Тираж 500экз. Заказ №939
подписано в печать 29.04.2013
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение
высшего профессионального образования
«Рязанский государственный агротехнологический университет
имени П.А.Костычева»
390044 г. Рязань, ул. Костычева, 1
Отпечатано в издательстве учебной литературы и
учебно-методических пособий
ФГБОУ ВПО РГАТУ
390044 г. Рязань, ул. Костычева, 1
Отпечатано с оригинала макета заказчика
189
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа