close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

ИЛС представляет мониторинг лечения инфекций

код для вставки
Мониторинг лечения инфекции, вызванной Mycoplasma genitalium с помощью методов ПЦР в количественном формате и НАСБА с детекцией в реальном времени от ИнтерЛабСервис.
Мониторинг лечения инфекции, вызванной Mycoplasma genitalium с помощью методов ПЦР в
количественном формате и НАСБА с детекцией в реальном времени
Авторы: Гущин А.Е., Бурцев О.А., Гомберг М.А., Цеслюк М.В., Шипулин Г.А.
Источник: ФГУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, ФГУ ЦНИКВИ Росмедтехологий
Введение
Mycoplasma genitalium – микроорганизм, который впервые был выделен от мужчин с
негонококковым (НГУ) и нехламидийным уретритом (НХУ) Tully JG и Taylor-Robinson D в 1980 г. На
данный момент M. genitalium – самый мелкий из известных в природе свободно живущих
микроорганизмов, размер его генома составляет 580 тыс.п. осн. является паразитом человека,
колонизирующим слизистые оболочки уроганитального тракта и вызывающим развитие
воспалительных процессов. В настоящее время M.genitalium рассматривается, как безусловнопатогенный микроорганизм, являющийся самостоятельным этиологическим агентом
воспалительных заболеваний органов репродукции человека. В нескольких независимых
исследованиях было показано, что M.genitalium вызывает слизисто-гнойный цервицит в
отсутствие N.gonorrhoeae и C.trachomatis [Uno M., 1997, Manhart LE, 2003, Falk L, 2005, Pepin J, 2005].
При этом, клинические проявления цервицита, вызванного M.genitalium практически не
отличаются от цервицита хламидийной этиологии [Falk L, 2005]. Кроме того, было показана
связь M.genitalium с воспалительными заболеваниями верхних отделов органов репродукции
женщин. В модельных экспериментах на обезьянах была показана
способность M.genitalium вызывать сальпингит [Moller BR., 1985], а позднее M.genitalium была
обнаружена в биописийном материале трубного эпителия при остром сальпингите у женщин
[Cohen CR, 2005]. Несколько ранее было показано, что инфицирование M.genitalium слизистой
эндометрия сопровождается клинической и морфологической картиной острого эндометрита
[Cohen CR, 2002]. Прямая связь M.genitalium с ВЗОМТ также была показана в работе [Simms I,
2003].
У мужчин M.genitalium является этиологическим агентом острого и хронического уретрита [Horner
P., 2001], при этом в отличие от уреаплазм практически не встречается у здоровых людей. Более
того, уретрит, вызванный M.genitalium протекает в манифестной форме чаще, чем хламидийный
уретрит [Falk L., 2005]. По данным разных авторов доля уретритов, вызванных M.genitalium,
составляет от 10 до 25%.
Диагностика M.genitalium невозможна с использованием методов, традиционно применяемых для
выявления других возбудителей ИППП – микроскопии, в следствие чрезвычайно малых размеров
возбудителя; бактериологического посева, вследствие низкой скорости деления клеток микоплазм
и высоких требований к составу сред; ИФА в следствие того, что M.genitalium обладает низкими
иммуногенными свойствами, а кроме того несет родовые антигены, встречающиеся у других
представителей молликут, колонизирующих человеческий организм. В связи с этим
единственными доступными методами лабораторной диагностики инфекции,
вызванной M.genitalium являются методы амплификации нуклеиновых кислот (МАНК). Наиболее
широко применяются тесты на основе ПЦР в реальном времени, позволяющие определять не
только возбудитель, но и его концентрацию в клиническом материале [Jensen J., 2002]. Помимо
этого был описан тест на основе реакции транскрипционной амплификации ТМА (Gene-Probe Inc,
США). Благодаря использованию в качестве мишени многокопийных РНК-мишеней
чувствительность ТМА по сравнению с ПЦР оказалась выше [Hardick J., 2006].
Целью настоящего исследования явилось изучение использования ПЦР в реальном времени в
количественном формате и НАСБА в реальном времени при мониторинге терапии мужчин с
негонококковым уретритом, вызванным M.genitalium.
Материалы и методы
Было обследован 241 мужчина, посетившие клиники дермато-венерологического профиля с
жалобами и клиническими проявлениями уретрита. От каждого пациента были получены мазки из
уретры, для микроскопического исследования с окраской по Граму и мазки для исследования
методом ПЦР на возбудители ИППП (C.trachomatis, N.gonorrhoeae, T.vaginalis, HSV1/2),
включая M.genitalium. В данное исследование были включены пациенты с положительными
результатами ПЦР на M.genitalium и отрицательными результатами на другие ИППП,
давшие информированное согласие. Пациентам было назначено лечение препаратом
джозамицин (Вильпрафен, «Астеллас Фарма»), в дозировке 500 мг х 3раза в день, 10 дней.
Мониторинг лечения включал проведение микроскопического исследования мазка,
количественного исследования ДНК и качественного исследования РНК M.genitalium в мазке и
первой порции мочи (ППМ) в 1-й день терапии (Д0, до начала приема антибиотика), на 3-й день
(Д3) и на 8-й день (Д8) лечения Вильпрафеном. Кроме того были проведены два контроля лечения
указанными методами на 2-й (Д2 п/л) и на 38 (Д38 п/л) дни после окончания терапии.
Результаты
На этапе скрининга методом ПЦР ДНК M.genitalium была обнаружена в мазках из уретры у 24
пациентов (11%), из них 13 дали согласие и были включены в исследование. У всех пациентов
были жалобы на дизурию, при этом у 10 (77%) наблюдались выделения – у 3 (23%) слизистые, у 5
(38) слизисто-гнойные и у 2 гнойные. При микроскопии мазка из уретры повышенное содержание
лейкоцитов (более 10 в поле зрения) являющееся лабораторным признаком уретрита, было
обнаружено у всех пациентов, при этом у 4 (30%) пациентов воспалительная картина
сопровождалась высоким лейкоцитозом (все поле зрения), характерным больше для гонококковой
инфекции.
Исследование мазка из уретры и ППМ до начала терапии методами ПЦР в количественном
формате и НАСБА в реальном времени у всех пациентов выявило ДНК и РНК как в уретральном
мазке, так и в ППМ. Концентрация ДНК M.genitalium в соскобном материале варьировала от 104 до
106 ГЭ/мл, и в моче - от 103 до 10 5 ГЭ/мл (Рисунки 1 и 2, концентрация
ДНК M.genitalium выражена в lg ГЭ/мл, от 0 до 7).
Рисунок 1. Динамика элиминации ДНК M.genitalium в соскобе из уретры в процессе лечения
Вильпрафеном (Пациенты Р1-Р13).
Рисунок 2. Динамика элиминации ДНК M.genitalium в ППМ в процессе лечения Вильпрафеном
(Пациенты Р1-Р13).
В процессе терапии на 3-й день лечения концентрация ДНК M.genitalium снизилась до
недетектируемого уровня у 6 пациентов, в то время как у 3-х из них в ППМ ДНК еще
обнаруживалась. К 8-му дню терапии ДНК M.genitalium обнаруживалась у 2-х пациентов в соскобе
уретры и у 3-х ППМ. Наконец, на 2-й день после окончания лечения только у 1 пациента
обнаруживалась ДНК в соскобе уретры и ППМ. На 13-й день после окончания терапии у данного
пациента наблюдался рост концентрации ДНК M.genitalium в моче и соскобе уретры,
сопровождающийся рецидивом клинических проявлений уретрита. Исследование динамики
элиминации РНК M.genitalium показало, что у всех пациентов с положительными результатами на
ДНК M.genitaliumрезультаты РНК были также положительны как в соскобе уретры, так и в ППМ.
Кроме того у одного пациента (не считая пациента с рецидивом инфекции) на 13 день после
окончания терапии РНК продолжала определяться в ППМ, в то время как ДНК к этому сроку уже не
определялась.
Заключение.
В результате проведенного исследования клинический и микробиологический ответ при лечении
джозамицином (Вильпрафеном) был получен у 12 из 13 (92%) пациентов, что оказалось выше, чем
при использовании других макролидов (азитромицина) и препаратов тетрациклинового ряда
[Gambini D., 2000; Falk L., 2005; Jensen J. 2006]. У большинства пациентов ДНК и
РНК M.genitalium уже не определялись до окончания терапии джозамицином. Элиминация
нуклеиновых кислот возбудителя в первой порции мочи происходила позже по сравнению с
материалом из уретры, при этом элиминация ДНК происходила раньше, чем элиминация РНК.
Таким образом, методы ПЦР в реальном времени в количественном формате и НАСБА в реальном
времени являются эффективными инструментами изучения инфекции, вызванной M.genitalium.
Автор
vladilen.ho
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
14
Размер файла
59 Кб
Теги
мониторинг, interlabservice, ИЛС, интерлабсервис
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа