close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

907

код для вставкиСкачать
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
^
МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА СССР
МОСКОВСКАЯ ОРДЕНА ЛЕНИНА
И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ
СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ имени К. А. ТИМИРЯЗЕВА
На правах рукописи
БЫСТРИЦКАЯ Валентина Николаевна
УДК 633.832:632.24.952
РАЗВИТИЕ РЕЗИСТЕНТНОСТИ У
ВОЗБУДИТЕЛЯ ФУЗАРИОЗНОГО УВЯДАНИЯ
ГВОЗДИКИ РЕМОНТАНТНОЙ К ФУНГИЦИДАМ
И ЕЕ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ
Специальность 06.01.11 — Защита растений
от вредителей и болезней
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
. кандидата биологических наук
МОСКВА—1985
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
l//Ct-*T2-')
-
PDAJ
•
L>
C'-,f
Работа вы/полнена в отделе озеленения городов Академии
-коммунального хозяйства им. К. Д. Памфилова.
Научный руководитель — доктор сельскохозяйственных на­
ук, .профессор, член-кор;реапо.ндент ВАСХНИЛ Н. М. Голышин.
•
Официальные оппоненты—доктор биологических наук,
профессор Ю. Т. Дьяков; кандидат биологических наук, до­
цент В. А. Шкаликов.
Ведущее учреждение — Всероссийский научно-исследова­
тельский институт защиты растений.
Защита состоится
. 1985 г. в «
час. «$<?» мин. .на заседании Специализированного совета
К-120.35.03 в Московской сельскохозяйственной академии име­
ни К. А. Тимирязева.
'
Адрес: .127650, Москва, ул. Тимирязевская, 47, Ученый со­
вет ТСХА.
С диссертацией можно ознакомиться в ЦНБ ТСХА.
Автореферат (разослан « /-SV .КЛ^фгЗ.
1985 г.
Ученый секретарь
v Специализированного совета —
доцент
<ГТГ7~
.
. А-*-"^
Н. К. Торянская
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Одной из самых вредоносных болезней
гвоздики-(ремонтантной в - защищенном г.рунте является стеб­
левой^ фузариоз. Потери;.вызываемые этим заболеванием, до­
стигают .20—50%.. (Щурова;, 1979). Возбудитель стеблевого
фузариоза—Fusariumoxiyaporum' (Wr) Sn. et Hans- (Bilai) —
почвенный патоген, долифаг, .существующий в почве любого
типа; Быстрому его накоплению •< способствуют особенности
технологии выращивания- гвоздики, а защищенном. грунте —
•монокультура, высокая.влажность и температура. В .комплек­
се защитных мероприятий гвоздики пока .наиболее действен­
ным остается химический .метод.
Однако с (внедрением в нашей стране в широкую практику
системных фунгицидов избирательного действия (бенлат, фундозол, топе-ия-М) появилась проблема развития к ним устой­
чивых форм патогена и, как следствие этого, потеря их эффек­
тивности.- В связи с чем изучение причин и особенностей раз­
вития резистентности у. F. oxysporum r к фунгицидам, а также
способов ее предупреждения определяют актуальность данной'
работы,
.
••
Цель и задачи исследований! В задачу наших исследова­
ний входило изучение следующих вопросов:
— Установление уровня резистентности>,к фунгицидам при­
родных форм F. oxysporum в цветоводческих хозяйствах Мо­
сквы и Московской области в зависимости от технологии при­
менения средств /борьбы с болезнями.
— Изучение биологических особенностей устойчивых форм
патогена, возможности и характера» развития /резистентности
к различным фуншцищ,а'м в лабораторных-условиях.
— Сравнительная характеристика-, резистентности штам­
мов^ сформировавшихся в природных условиях и полученных
in-vitro. • . - • - . • • • •
' —- На основании полученных данных разработка- путей;
предупреждения или локализации устойчивости, включая со­
вершенствование ассортимента • фунгицидов.
Научная новизна. Впервые в нашей стране на гвоздике в
защищенном грунте, обнаружены резистентные к фундозолу:
j
ЦЕмП'АГ.оМАН
НАУЧНАЯ Б; ::,Г:Г -.ОТЕКА
Ь'.еск. СОГ.ЬСЛОАЛ а-гадемии
иа. К. Л . Тимирязева
Инн. № ^ . . Г < ^ ^ ' ^
^
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
(беномил) штамме F. oxysporum. Детально прослежено фор­
мирование устойчивости к фунгицидам из разтшх химических
групп, определена скорость, уровень устойчивости к селектиру­
ющему препарату, ее стабильность и спектр перекрестной ус­
тойчивости. Изучена сравнительная патогенность и конкурен­
тоспособность чувствительных и резистентных штаммов фузариума. Исследовано влияние чередования и смеси неродствен­
ных фунгицидов на скорость развития резистентности.
Практическая ценность и реализация результатов исследо­
вания. На основании.установленных особенностей формирова­
ния резистентности у возбудителя стеблевого фузариоза гвоз­
дики определены наиболее эффективные способы защиты,
сдерживающие развитие устойчивости к фунгицидам. Эти спо­
собы включают чередование обработок неродственными; фун­
гицидами и применение их в смеси, дифференцирование норм
расхода препарата в зависимости от поражаемости сортов
гвоздики.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены на
симпозиуме стран—членов СЭВ. «Изучение механизма фунгицидных соединений, включая системные фунгициды, и разработка методов их применения» (Ленинград, 1982); на заседа­
нии технического совета отдела, озеленения городов. АКХ
(1984); на объединенном заседании кафедры фитопатологии и
станции защиты растений.ТСХА (1984)..
Публикации. По теме диссертации опубликовано 3 работы,.
одна из них в соавторстве.. .
-.:.-.
. .
- Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на
136,страницах машинописного текста, состоит из введения, 5i
глав и выводов. Работа содержит. 21 таблицу, 11 рисунков, 9
приложений. Список литературы включает 179 источников, в
том:числе 130 зарубежных авторов.
•.
. СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Обзор литературы
Обзор посвящен биологии возбудителя; вредоносности фузариозного увядания: гвоздики и методам борьбы с ним. Приве­
дены характеристики фунгицидов и действие их на возбудите­
ля. Основное внимание уделено вопросам развития резистен­
тности в лабораторных и полевых условиях и методам ее лока­
лизации. На основании критического обзора литературы сфор->
мулированы. задачи исследований:
..
. Материалы и методы
. Работа проводилась в 1980-—1983 гг. в отделе озеленения
городов Академии коммунального хозяйства им..К. Д. Памфи-2
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
лова^и в-совхозе «Оранжерейный* комплеко-Московской- об­
ласти.
Из 6 цветоводческих хозяйств Москвы и Московской обла­
сти, отличающихся интенсивностью применения фундозола в
системе защиты гвоздики от фузариозз, были взяты образцы
больных растений. Выделение возбудителя в чистую культуру
проводили, на подкисленном картофельно-глюкозном агаре
/КГА/ по общепринятой методике. Всего было выделено 10
штаммов возбудителя. Все штаммы в результате идентифика­
ции были отнесены к Fusarium oxysporum.
Существующий в данных хозяйствах уровень устойчивости
к фундозолу определяли путем высева свежевыделенных штам­
мов гриба на.КГА", содержащий следующий набор концентра­
ций этого фунгицида: 60; 40; 30; 35; 20; 15, 7, 3, 1, 5, 0,7, 0,4,
0,2 м кг/мл д. в. При этом графически, методом пробит-анализа определяли СКБО — концентрацию, вызывающую 50%-ное
подавление роста колоний. Показатель резистентности /ПР/
находили из отношения CKso резистентного штамма /РфУН/ к
соответствующим значениям чувствительного штамма /ЧфУН/.
Для определения длительности сохранения устойчивости
штаммы пассировали на КГА без фунгицида. Определение
уровня устойчивости у конидий проводили путем проращива­
ния их в суспензии препаратов в различных концентрациях по
методике Н. М.. Голышина. Процент торможения прорастания
конидий рассчитывали по формуле Эббота.
Концентрацию спор определяли в счетной"камере Горяева
по общепринятой методике.
Патогенность и конкурентоспособность резистентных и чув­
ствительных штаммов гриба изучали методом искусственного
заражения черенков гвоздики по методике Дженкинса /Genkins, 1959/. Опытные растения разных по восприимчивости к
фузариозу сортов гвоздики после инокуляции высаживали в
горшки со стерильным перлитом по 4 растения в каждый, в 6
повторностях.
Работа по изучению характера формирования резистентно­
сти in vitro к различным фунгицидам и способов ее локализа­
ции; проводилась на. трех штаммах фузариума, значительно
отличающихся по исходному уровню чувствительности к фун­
дозолу, при этом штаммы селектировались по трем схемам.
Первая схема — пересевы гриба на КГА с постоянно повы­
шающимися концентрациями фунгицидов, подавляющих .рост
колоний от 50 до 80%.
Вторая схема — чередование таких высоких доз фунгици­
дов с постоянной низкой дозой, обеспечивающей подавление
роста на 10—20%.
Третья схема — выращивание штаммов на: КГА с постоян­
ной' низкой'КОнцентрацией, подавляющей рост на-10—20%.
.3
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Изменеиия'уровня устойчивости проверяли через 5 и 10 пас- т
сажей, путем определения CKso " ПР. Опыты в 6 повторностях;
Оценку эффективности новых препаратов для •борьбы с фузариозом на гвоздике проводили в условиях опытной теплицы
и на производственных посадках маточников культуры в сов­
хозе «Оранжерейный комплекс». Первичный отбор .фунгици­
дов проводили путем определения минимальной токсической
концентрации in vitro по методике Н. М. Голышина /1970/.
Изучение оптимальных схем применения фунгицидов с це­
лью локализации развития резистентности проводили в лабо­
раторных условиях и на производственных посадках гвоздики
на разных по восприимчивости к фузариозу сортах гвоздики:
сравнительно устойчивом сорте Даннло и восприимчивом —
Вильям Сим, в,3-кратиой повторности. Размер опытной де­
лянки — 5 м2, размещение методом рендомнзации. В опыте
была.изучена также возможность применения дифференциро­
ванной обработки гвоздики фунгицидами в зависимости от ус­
тойчивости сорта к болезни. На сорте Данило фундозол при­
меняли в 0,1% концентрации, ТМТД в 0,3%, на сорте Вильям
Сим соответственно—.0,2% и 0,6%. При этом из растений с
опытных делянок выделяли возбудителя и определяли уровень
его устойчивости к фундозолу.
' .
Математическая обработка данных проводилась методом
регрессивного анализа по П. В. Попову /1965/ и стандартны­
ми методами с использованием критерия Съюдента и НСР
/Р = 95%/ /Миикевич, Захарова, 1981/.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
. Для выявления резистентности у возбудителя фузариозного увядания гвоздики в защищенном грунте нами были ото­
браны образцы пораженных-растений из цветоводческих хо­
зяйств Москвы н области. При этом.учитывали интенсивность
применения в системе защитных мероприятий фундозола в дан­
ном хозяйстве. В чистую культуру было выделено 10 штаммов
возбудителя, которые в результате определения были отнесены
к роду Fusarium секции Flegans виду F, oxysporum.
Штаммы патогена обнаружили значительную вариабель­
ность по чувствительности к фундозолу и разделены по этому
признаку на 3 группы: устойчивые, CKso составляет 20—30
мкг/мл д. в., среднеустойчивые, CKso — 5—10 мкг/мл и чувст­
вительные, CKso — 0,3 мкг/мл (табл. 1)....
При этом нами установлена прямая зависимость уровня
устойчивости возбудителя фузариоза к фундозолу от интенсив­
ности применения этого препарата в хозяйстве, где были взя­
ты образцы растений. Так, резистентный штамм ОК был вы­
делен из больного растения маточника гвоздики, выращенио;4
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
го пна участке, где в течение 3-х лет систематически применяли
0,2 /о фундозол без смены почвы перед новыми посадками
культуры. Чувствительный штамм 6 выделили из растения, не
имевшего контакта с фундозолом за время вегетации. Среднеустойчивые штаммы 16, 17 и 12 изолированы из растений, ко­
торые в течение вегетации обрабатывались фундозолом, но пе­
ред посадками растительный грунт либо стерилизовали паром,
либо заменяли новым.
Таблица 1
Исходная чувствительность к фундозолу: штаммов F. oxysporum,
выделенных из гвоздики:
Доверительный Показатель ре­ Скорость ли­
CKsa. мкг/мл интервалдля
зистентности нейного роста,
Штаммы
д.. в..
СК.5Л. МКГ/МЛ
/ПР/
мм/сут.
ЗЛ
СК
13
30
30
20
13 4-69,0
15.84-57,0 •
7,14-56,0
100
100
67
8,9 ±0,3
10,5±0,9
П,8±0,1
16
17
12
10
5
5
4,04-25,0
2,0-1-12.0
2.14-11,5.
33
17
17
10.0 ±0,1
11,3±0,1
9,2 ±0.3
1
10,8±0,7
6
0,31
0,14-0,9
Оба Рфун штамма показали высокую степень перекрестной
резистентности к топсину-М: CKso этого препарата составило
для штамма 3JI — 700 мкг/мл д. в.,.для штамма ОК превыси­
ла 1200 мкг/мл д. в., тогда как рост чувствительных штаммов
фузариума полностью подавлялся концентрациями 3,5 мкг/мл
д.в. Полученные результаты указывают также на индуцирова­
ние фундозолом более высокого уровня резистентности к тиофанатметилу, в частности, штамм ЗЛ в 200 раз более резистен­
тен к топсину-М, чем к фундозолу, штамм О К — более чем в
400 раз.
Не было обнаружено перекрестной устойчивости кТМТД—
фунгициду контактного действия из класса дитиокарбаматов,
что свидетельствует о специфичности? резистентности у
F» oxysporum к веществам с аналогичным строением и меха­
низмом действия и неспецифичности к фунгицидам иной хими­
ческой группы, метаболизма и механизма действия на фитопатогены.
Для более детального изучения особенностей формирова­
ния резистентности у фузариума в лабораторных условиях мы
отобрали три штамма: чувствительный к фундозолу и не имев­
ший контакта с ним в природе штамм 1 (CKso=0,16 мкг/мл
д. в.); штамм ОК, потерявший первоначально высокий уровень
устойчивости без воздействия* фунгицида-селектанта, (CKso=
5
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
f
2,8 мкг/мл д. в.) и штамм ЗЛ, отличающийся стабильностью
резистентности (CKso=15 мкг/мл д. в.).
В результате десяти пересевов н а среды с фундозолом все
три штамма обнаружили быстрое возрастание уровня устой­
чивости при селектирующих концентрациях, вызывающих 50—
80%-ное подавление роста колоний. Селектнрование низкими
концентрациями, обеспечивающими 10—20%-ное подавление
роста, не привели к изменению первоначального уровня устой­
чивости к фундозолу (табл. 2). При этом штаммы ОК и ЗЛ
постепенно повышали уровень резистентности и ПР увеличил­
ся соответственно в 8 и 6 раз. штамм 1 обнаружил ступенча­
тый характер.развития устойчивости. Существенное повыше­
ние СКм от исходного штамма наблюдалось только при селектироваиин на средах с повышающимися концентрациями фундозола: ПР = 8, перенос же штамма на низкие дозы не способ­
ствовал возрастанию устойчивости. •
При селекции этих же штаммов и а средах с ТМТД уста­
новлено отличие в процессе развития устойчивости. Так, штамм
1 и ЗЛ одинаково быстро увеличили устойчивость за первые
пять пересевов соответственно в 10 и 7 раз (рис. 1). Однако
это был предельный уровень устойчивости, и в течение следую­
щих пяти пересевов устойчивость не возрастала и даже снизи­
лась для штамма Гс 13,2.мкг/мл до" 12,8 мкг/мл, для штамма
ЗЛ с 10,4 мкг/мл до 7,8 мкг/мл. Причем эта тенденция отчет­
ливей проявилась при селектированни патогена с чередовани­
ем повышающихся и низкой концентраций ТМТД (рис. 1).
Штамм ОК намного медленнее адаптировался к ТМТД за
10 пассажей превысил исходную чувствительность в 4 раза.
Вероятно, этого времени было мало, чтобы определить пре­
дельный уровень устойчивости для этого штамма. Таким обра­
зом, резистентность у возбудителя стеблевого фузариоза гвоз­
дики к ТМТД развивается незначительно и длительно не со­
храняется.
- '
. •
•
Известно, что при возникновении форм грибов с повышен­
ной устойчивостью к фунгицидам наблюдается изменение та­
ких важных свойств для фитопатогенов, как жизнеспособность
и патогенность. Нами были изучены сравнительная патогенность и конкурентоспособность у резистентного и чувствитель­
ного штаммов фузариума. С этой целью черенки гвоздики инокулировали суспензией конидий этих штаммов. Опыты прово­
дились на разных по восприимчивости к стеблевому фузариозу
сортах гвоздики' (Данило — сравнительно устойчивый; Виль­
ям Сим— восприимчивый) и включали следующие варианты:
инокуляцию.отдельно резистентным и чувствительным штам­
мами, последовательную инокуляцию через 3 дня и инокуля­
цию смесью этих штаммов.. Данные, полученные в результате
этого эксперимента показали.что при заражении резистентным
-б
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
\ .
Пересевы
Рис Л . Изменение устойчивости y J T оъудрошт к ТМТД при
селекции по схеме 1(A) и по схеме 2 (Б)
штамм I ;
- - - - штаны ОК; — — • штамм ЗЛ
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
i
Таблица 2
Развитие устойчивости у F. oxysporum к фундозолу in vitro
X
*"г?
ПР
s
V-
5-й пересев
ч доверит, ин­
s
s"£" тервал для ПР
CKso
ч
s
ПР
о
доверит, ин­
тервал для
CKs» '.'
0,2
ОД +0,26
0.3
0,14-0,9
3,0
1,0-1-7,6
21,8
10,4^-47,8
15,3
7,54-30
64,4
32,24-128,8
Схема 3
5-й пересев 10-й пересев
ПР
ПР
CKso
мкг/мл
ч
Схема 2
10-й пересев
CKso
мгл/мл
5-й пересев
Штаммы
Схема 1
10-й пересев
CKso
мкг/мл
-
ПР
• Штамм 1
Исходный
Селектиро­
ванный
0,16
0.16
1
0,2
0,14-0,26
1,5
0,7+3,2
0.16
8
0,3
1.8
0.16
1,5
0.16
0,2
1
0,22
1
V
Штамм ОК
Исходный
Селектиро­
ванный
2.8
7.5
3
3.0
1,04-7,6
20,4
10,2ч-40,8
2,8
7
8,2
3 '
9.0
2,8
8
2,8
I
9.0
1
Штамм ЗЛ
Исходный
.Селектиро' ванный
15.0
47,0
3
15,3
7,54-3,0
86,0
30,74-24,0
15,0 '
6 29,5
2 '.
15,3
15,0
4
16,2
1
16,0
1
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
штаммом черенки.погибали от болезней в 1,5—2 раза быстрее,
чем при заражении чувствительным штаммом (табл. 3). Это
i
Таблица
Развитие стеблёвого фузариоза'на черенках, гвоздики >
при заражении их резистентными.нечувствительными штаммами
F. oxysporum ,
Штамм и способ инокуляции
•
Инокуляция отдельными штаммами
Чфун
• -
Рфун
Последовательная инокуляция чеЧфув—Рфун,
•
*.+
Рфуи-Чфуй"
- Совместная инокуляция
Рфуя+Чфуа.
Контроль
3
Время от инокуля­
ции до полного>
Инфекционная на­ увядания (дни)
грузка, кон/мл
сорта гвоздики
Вильям
Данило
Сим
. 7ХЛ05
- 1X1053
7X10
' "1ХЮ 5
23
42
14
26
w
20
35
12
23
'J
... — . 5
7ХЮ —7X10'
1ХЮ5—1ХЮ5
7X105—7X10*
IX 10s—1X105
• 20 •
- 35
- 14
.25
1ХЮ5+1ХЮ5
0.5ХЮ5+0.5Х105
"
••
—
14
21
15
20
12
20
',.
14
23
увяданий нет
наблюдалось при разных инокулюмных нагрузках и на разных
сортах гвоздики. Следовательно, резистентные к- фундозолу
штаммы, фузариума более патогенны, чем чувствительные. Это
подтвердили и результаты последовательных инокуляций, так
как.призаражении сначала устойчивым, а затем чувствитель­
ным штаммом черенки погибали быстрее, чем при заражении
в обратной последовательности.
При заражении смесью разных по чувствительности к фун­
дозолу штаммов сроки увядания черенков близки к таковым
при заражении одним устойчивым штаммом, что опять четко
повторилось и при разных инфекционных нагрузках и на раз­
ных, сортах. Это происходит, вероятно, вследствие большего
преимущества резистентного штамма перед чувствительным в
процессе заражения растения, значит он более конкурентоспо­
собен. -. — .
- • _.- .
•а
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Установлено, что смесь разных по чувствительности к фун-"
дозолу штаммов фузариума* обладает синергитическим пато­
генным действием на растение-хозяина.
Проведенные, исследования позволяют сделать вывод, что
резистентность возбудителя стеблевого увядания гвоздики К
фундозолу представляет серьезное препятствие для традици­
онного использования его в практике зашиты, вследствие того,
что резистентность к этому препарату достигает высокого уров­
ня и отличается стабильностью. Резистентные формы гриба
обладают большей патогенностью и конкурентоспособностью,
поэтому имеют возможность быстро накапливаться в популя­
циях гриба.
Нами была изучена эффективность двух вариантов приме­
нения фундозола и ТМТД с целью локализации устойчивости
у F. oxysporum: чередование обработок этими фунгицидами и
обработка их смесью.
'
- - -<
Опыты проводили в лабораторных опытах и в мелкоделяночных опытах в условиях производства.
В результате селектирования штаммов фузариума in vitro
было установлено! что применение смеси препаратов не изме­
нило первоначального уровня чувствительности штаммов- пато­
гена к фундозолу.
-' " ;
Чередование же фунгицидов только в 2 раза сдерживало на­
растания устойчивости по сравнению с применением ! одного
фундозола.
' '
Эти способы были испытаны в условиях производственного
выращивания посадочного материала гвоздикн-в совхозе
«Оранжерейный комплекс». Опыты проводили на среднеустойчивом сорте Данило, сильно восприимчивом сорте Вильям Сим.
На устойчивом сорте Данило фунгициды применяли в меньших
из рекомендуемых на гвоздике в защищенном грунте концен­
трациях с целью изучения возможности дифференцированной
обработки. Одновременно с наблюдениями за развитием бо­
лезни проводили выделение возбудителей и определение уров­
ня устойчивости к фундозолу. Опыт продолжался 11 месяцев,
при этом было проведено 8 обработок фунгицидами. Схема и
результаты опыта представлены в таблице 4. Максимальное
развитие стеблевого фузариоза наблюдалось в конце авгу­
ста— сентябре. "Активизации возбудителя в это время способ­
ствует ослабление растений высокими температурами и сбора­
ми черенков, которое не только ослабляет маточники, но и по­
вышает опасность заражения растений через свежие ранки
сломов.
• . . - • •
Лучший защитный эффект был получен при применении
смеси фундозола и ТМТД.на обоих сортзх. На сорте Данило
эффект к необрабатываемому контролю составил при этом 90%,
на сорте Вильям Сим — 86%, тогда как обработка одним фун9-
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
.
.
3
.
.
.
. .
•
•
ч. . Влияние разных приемов обработки фундозолом и ТМТД .
на пораженность гвоздики стеблевым фузариозом и уровень
резистентности у возбудителя болезни
.. [ Варианты опыта
1. Смесь фундозола и
ТМТД
2.
Чередование фундо1
зола и ТМТД
3. ТМТД
4. Фундозол (эталон)
5. Контроль (без об­
работок)'
"HCPos к эталону '
• HCPoi к эталону
Более устойчивый сорт'Данило •
Концентра­
ции я, %
п
а
Эффек­
тивность
CKso,
к контро­ мкг/мг
лю,' %'
0,1+0,3
90
0,4
0,14-0.3
0,1 и 0,3
0,3
16
И
65
76
0,6
1,3
0,3-г 1,0 0,2 и 0,6
0,6
0,84-1.9
0,1
19
60-'
"М
6,4
.
'
Довери­
Довери­
Эффек­
тельный Концент­ Развитие тивность
тельный
CKso,
интервал рация. % болезни, к контро­ м кг/мл интервал
для CKso,
для CKso,
' %
лю, %
Р=0,05
Р=0,05
5
5,8 .• 2,74-14,5
0,8
Таблица 4
Восприимчивый сорт Вильям Сим
0,05+0,15
46
. .
0,44-1,6
11
""17"
36
34
75
'
86
1,2
0,54-3.0
77
4,0
1,0
1,74-9.2
0.3+.2.9
5,0
2,54-10,0
52
- 55
' 0.6
0,24-1,7
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
дозолом сдерживала развитие болезни на 60 и 55% соответст­
венно по сортам (табл. 4). Чередование обработок разными
фунгицидами уступало по эффективности смеси, но было дей­
ственней, чем применение одного фундозола.
В результате определения устойчивости к фундозолу у изолятов F. oxysporum, выделенных из больных растений гвозди­
ки с опытных делянок, установлено, что наиболее устойчивы­
ми изоляты были в варианте, где проводили обработку одним
фуидозолом: CKso превышала в7—8 раз СКзд Для изолятов с
контроля. Применение смеси фундозола и ТМТД сдерживало
развитие резистентности в 14,5 раза на устойчивом сорте и в
4 раза на восприимчивом сорте по сравнению с применением
одного фундозола. Чередование было в этом плане эффектив­
но только на устойчивом сорте Данило. Статистическими ме­
тодами установлено, что между сортами, обрабатывающимися
большими и меньшими концентрациями фунгицидов, сущест­
венных различий по уровню чувствительности у возбудителя
стеблевого фузариоза нет. Следовательно, дифференцирован­
ная обработка разных по восприимчивости сортов гвоздики
возможна. Этот прием снизит селективное давление фунгици­
дов на патоген и положительно скажется на санитарно-гигие­
нических нормах в теплицах.
С целью расширения ассортимента препаратов и изыскания
новых эффективных против фузариозного увядания гвоздики
фунгицидов нами были проведены испытания и оценка ряда
препаратов системного и контактного действия.
:
Первичный отбор проводился in vitro путем определения
минимальной фунгитокснческой концентрации. Для дальней­
шего изучения отбирали препараты, МТК которых была мень­
ше или-равна 0,2% д.,в. Затем отобранные фунгициды испы*
тывали в вегетационной теплице, где наибольшую эффектив­
ность показали тачнгарен и:топсин-М.
• Полученные результаты были проверены на производст­
венных посадках маточников гвоздики сорта Скання в совхозе
«Оранжерейный комплекс». Размер опытных делянок 5 м2, повторность 3-кратная, все фунгициды применялись в концент­
рации— 0,2% д. в. Обработка растений проводилась путем по­
лива почвы водной суспензией. Эффективность препаратов оп­
ределялась по отношению к эталону — фундозолу. Результаты
опыта представлены в таблице 5.
-•• Несмотряна то, что первая обработка фунгицидами была
профилактической, болезнь развивалась эпифитотийно на об­
ширном участке, включая и опытные делянки. В результате
чего через 2 месяца после появления болезни контроль был
поражен на 100%. Даже на таком высоком инфекционном фо­
не тачигарен и топснн-М значительно сдерживали болезнь и.
превысили эффективность эталона на 22 и 4% соответственно.
W'
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Статистически достоверно от эталона отличался лишь тачнга­
рен при НСРо5=16% (табл. 5). Контактные препараты цинеб
(80% с. п.), дитан-М (80% с. п.) и баситак (75% с. п.)'были
неэффективны в борьбе со стеблевым фузариозом на гвоздике.
Лишь даконил (75% с. п.) был наиболее близок по эффёктив-
№.Y».
пп
1
2
3
4
5
6
7
8
Фунгициды
по
по
д. в. препа­
рату
Тачнгарен, 70% с. п.
Топсин-М. 70% с п .
Даконил, 75%. с п. .
Цинеб, 80% с п .
Дитан-М, 80% с п .
Баситак, 75% с. п.
Фундозол, 50% с. п.—
эталон
. . . . . .
Контроль (без обработок)
Урожай че­
ренков с
делянки, шт.
Средний
вес че- '
рейка, г
Норма рас­
хода (%)
Развитие болез­
ни на последнюю
дату учета, %
Разница
к эталону,
Таблица 5
Влияние-обработок фунгицидами-на развитие стеблевого фузариоза;
маточников.гвоздики и урожай черенков.
0,20.2
0.2
0,2
0.2
0,2.
.0,3
0.3
0,3
0.3
0,3
0,3
ЗГ
47
.58
82
94
96
+22:
+4
—5
—29
—41
—43
311
269 .
282
294
259253
4,84.8
4,2.
4,1
4,3 >
5,4:
0,2
0,4
53
100
—47
286
261
4,8
3.3
НСР05
16
HCPoi
21,9
ности действия к эталону (фундозолу). Таким образом, в ре*
зультате проведенной нами первичной оценки ряда препара­
тов для борьбы со стеблевым фузариозным: увяданием гвозди*
к» для дальнейшего изучения можно рекомендовать системный
фунгицид тачнгарен (70% с; п.) и. контактный фунгицид да­
конил (75% с;.п.).
Выводы
1. Впервые в нашей стране на гвоздике в защищенном грун­
те обнаружены резистентные к фундозолу штамма: F.. oxysporum — возбудителя стеблевого фузариоза. Резистентные штам­
мы выделены из растений, которые выращивались на участке,.
где в течение 3-х л е т применяли систематическую обработку
0,2% фундозолом; без смены растительного грунта. Резистент­
ные штаммы фузариума переносили в 100 раз большую кон­
центрацию фундозола; чем чувствительные.
2. Установлено,.что.возникшая в природе резистентность у
12
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
F. oxysporum к фундозолу потенцирует более высокую степень
кросс-резистентности к топсину-М, т. е. она специфична к ве­
ществам аналогичного строения и механизма действия и не спе­
цифична к фунгицидам из другого класса химических соеди­
нений, в частности к ТМТД.
3. Установлена стабильность устойчивости F. oxysporum к
фундозолу. В течение 15 недель пересевов на свободные от
фунгицида среды и 14 месяцев хранения РфУН штамм ЗЛ сни­
зил показатель резистентности лишь в 2 раза.
4. При селектировании патогена в лабораторных условиях
быстрое развитие резистентности к фундозолу шло при кон :
цеитрациях, подавляющих рост колоний от 50 до 80%. При
этом за 10 пересевов показатель резистентности возрастал в
6—8 раз. Селектирование F. oxysporum низкими концентра­
циями фундозола, подавляющими рост колоний на 10—20%,
не привели к изменению первоначального уровня чувстви­
тельности..
5.,Устойчивые штаммы фузарнума обнаружили в 1,5—2 ра­
за большую патогенность и конкурентоспособность, чем чувст­
вительные штаммы. При заражении черенков гвоздики
смесью
таких штаммов при инфекционной нагрузке 1Х105 кон./мл на­
блюдался синергитический эффект.
• 6. Таким образом, резистентность возбудителя стеблевого^
фузариоза гвоздики к фундозолу развивается в производствен­
ных условиях при систематическом применении этого препа­
рата, что представляет серьезную преграду для дальнейшего
его использования в практике защиты, вследствие того, что ре­
зистентность достигает высокого уровня и отличается стабиль-"
ностью. Кроме того, резистентная форма возбудителя обладает
большей патогенностью и конкурентоспособностью в процессе
заражения в сравнении с чувствительными.
7. Установлено, что к контактному препарату ТМТД у F.
oxysporum in vitro не формировалась значительная резистент­
ность, более того, обнаружено снижение достигнутого уровня
даже в присутствии фунгицида — селектанта, что указывает
на возможность применения ТМТД в дальнейшем в практике
защиты от стеблевого фузариоза гвоздики без риска развития
к этому фунгициду практически значимой резистентности.
8. Наиболее эффективным приемом для предупреждения
резистентности у F. oxysporum к фундозолу оказалось приме­
нение смеси фундозола и ТМТД, при этом полностью тормози­
лось развитие устойчивости у патогена in vitro. Обработка
гвоздики смесью этих фунгицидов в производственных посад­
ках сократила нарастание резистентности от 4 до 14,5 раза в за­
висимости от сорта и уменьшила развитие стеблевого фузари­
оза более чем в 4 раза в сравнении с применением одного фун­
дозола, Чередование применения этих фунгицидов лишь в 2
раза сдерживало резистентность in vitro и в 10 раз на произ13
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
вбдствённых посадйах на сравнительно устойчивом к фузариозу сорте гвоздики. На восприимчивом к болезни сорте этот
прием оказался неэффективным.
9. Изучена возможность применения меньших из рекомен­
дованных концентраций фунгицидов на.более устойчивых-.: .к
фузариозу сортах гвоздики, в частности фундозола в 0,1%
концентрации, ТМТД — в 0,3% концентрации,-Принтом была
найдена высокая^ эффективность подавления болезни, соответ­
ственно 90 и 60% в сравнении с контролем и не наблюдалось
усиления развития резистентности у F. oxysporum.
10. Определена техническая эффективность ряда препара­
тов с целью применения их для защиты гвоздики от фузариоза.
Наиболее перспективными для дальнейшего изучения найдены
фунгицид системного действия: тачигарен (70% с. п.) и кон­
тактного действия— даконил:(75% с. п.).
Список работ, опубликованных по теме диссертации*
1. Б ы с т р и ц, к а я В.. Н . Устойчивость различных штаммов возбуди­
теля фузариоза гвоздики ремонтантной к фунгицидам. В сб. Вопросы со­
вершенствования агротехники в зеленом строительстве и хозяйстве. Науч­
ные труды АКХ, М., 1982. с. 84—89.
2. В ы с т р и ц к а я В. Н., Г о л ы ш и н Н. М.. Развитие резистентно­
сти у возбудителя фузариоза гвоздики ремонтантной в результате примене­
ния фундозола в защищенном грунте. Доклады ВАСХНИЛ, 9, 1982, с. 31 —
32.
- 3. Б ы с т р н ц к а я В. Н. Развитие резистентности у возбудителя фу­
зариоза гвоздики ремонтантной к фунгицидам. В сб. Генетические послед­
ствия использования химических средств защиты растений и пути преодо­
ления резистентности вредных организмов с учетом задач охраны окружа­
ющей среды. Тезисы докладов Шестого совещания (16—20 апреля), Рига,
1984, с. 109—ПО.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Л-76203 29/Х—85 г.
Объем 1 п. л.
Заказ 2669.
Тираж 100
Типография Московской с.-х. академии им. К- А. Тимирязева
127550, Москва И-550, Тимирязевская ул., 44
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Беспмпо
i
t
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
2
Размер файла
795 Кб
Теги
907
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа