close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

884

код для вставкиСкачать
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
(
На правах рукописи
Березовикова
Ирина Павловна
МЕХАНИЗМЫ КОРРЕКЦИИ НАРУШЕНИЙ ЛИПИДНОГО
ОБМЕНА КОМПОНЕНТАМИ СЕМЯН MEDICAGO SATIVA
И ДЛИННОЦЕПОЧЕЧНЫМИ ЖИРНЫМИ КИСЛОТАМИ
14.00.16 — патологическая физиология
03.00.04 - биохимия
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
доктора биологических наук
НОВОСИБИРСК 2003
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
На правах р\копией
Березовикова
Ирина Павловна
МЕХАНИЗМЫ КОРРЕКЦИИ НАРУШЕНИЙ ЛИПИДНОГО
ОБМЕНА КОМПОНЕНТАМИ СЕМЯН MEDICAGO SATIVA
И ДЛИННОЦЕПОЧЕЧНЫМИ ЖИРНЫМИ КИСЛОТАМИ
14.00.16 - патологическая физиология
03.00.04 - биохимия
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
доктора биологических наук
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Работа выполнена в Государственном учреждении Научноисследовательский институт терапии Сибирского отделения Российской
академии медицинских наук (г. Новосибирск)
Научные консультанты:
доктор медицинских наук,
профессор
доктор медицинских наук,
профессор
Официальные оппоненты:
доктор биологических наук,
профессор
доктор биологических наук,
профессор
доктор медицинских наук,
профессор
Симонова Галина Ильинична
Куликов Вячеслав Юрьевич
Селятицкая Вера Георгиевна
Мошкин Михаил Павлович
Шарапов Виктор Иванович
Ведущая организация:
Государственное
учреждение
Научно-исследовательский
институт
медицинских проблем Севера Сибирского отделения Российской академии
медицинских наук (г. Красноярск)
Защита состоится
2003 г. в ^ часов на заседании
диссертационного совета Д 001.048.01 в Государственном учреждении
Научный центр клинической и экспериментальной медицины Сибирского
отделения Российской академии медицинских наук по адресу: ул. Академика
Тимакова, 2, г. Новосибирск, 630117, тел/факс 8(3832) 33-64-56
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГУ Научный центр
клинической и экспериментальной медицины СО РАМН
Автореферат разослан тЩ)м 2003 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета, д.б.н.
С.Н.Кутина
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы. Нарушения липидного обмена занимают ве­
дущее место в генезе сердечно-сосудистых заболеваний у жителей большинст­
ва экономически развитых стран (Доклад ВОЗ, №57, 1994, NCEP Expert Panel,
2002). Важнейшим компонентом в коррекции нарушений липидного обмена
является диета. Диетическое вмешательство нацелено на уменьшение концен­
траций общего холестерина сыворотки крови и холестерина,липопротеинов
низкой плотности. Специалистами рекомендована пошаговая диетотерапия
(диеты А1 и А2), последовательно ограничивающая поступление общего жира,
насыщенных жирных кислот и холестерина в рационе. В контролируемых ис­
следованиях показано, что применение диеты А1 сопровождается снижением
концентраций общего холестерина и холестерина липопротеинов низкой
плотности лишь на 7-9% (NCEP Expert Panel, 1993, 2002), поэтому актуальной
является проблема повышения липидкорригирующего эффекта диет.
В последние годы опубликованы результаты исследований, согласно ко­
торым эффективность диеты А1 может быть повышена добавлением к ней раз­
личных пищевых компонентов: соевого белка, пищевых волокон, полиненасыщениых жирных кислот семейства со-3 и других веществ (Anderson J.W.,
1995; Anthony M.S. et al., 1997; Wilson T.A. et al., 1998). Источниками этих ве­
ществ являются в первую очередь бобовые культуры - семена сои и гуара (Суamopsis Tetragonolobus).
Механизм липидкорригирующего действия семян зернобобовых связы­
вают с содержащимися в них вязкими ферментируемыми пищевыми волокна­
ми, обладающими гельформирующими свойствами (Anderson J.W. et al., 1990,
1995, 1999; Glore S.R. et al., 1994). Попадая в просвет тонкого кишечника,
они снижают долю абсорбции нутриентов, в частности, пищевого холестери­
на. Вязкий полисахарид гуара - галактоманнан, образуя при контакте с водой
высоковязкие гели, способствует снижению концентрации холестерина крови
(Todd P.A., et al., 1990). Помимо гуара, галактоманнан обнаружен и в некото­
рых других бобовых культурах (Anderson E., 1949). Семена Medicago Sativa со­
держат галактоманнан с уникальным соотношением галактозы и маннозы
(Hirst E.L. et al., 1947, Степаненко Б.П., 1978).
Гиполипидемические свойства сырых семян Medicago Sativa показаны в
-ряде исследований (Malinow M.R. et al., 1977, 1980, 1984, Molgaard J. et al.,
1987). Поскольку, как и в других бобовых культурах, в них содержатся антипи­
тательные вещества, то требуется предварительная обработка - автоклавирование (Bell E.A. et al., 1960). В связи с этим, остается открытым вопрос о сохран­
ности липидкорригирующих компонентов семян Medicago Sativa и их свойст­
вах.
Воздействие семян Medicago Sativa на метаболизм холестерина может
проявляться в снижении абсорбции желчных кислот. Пищевые волокна, связы­
вая желчные кислоты, увеличивают их экскрецию с калом; для поддержания
необходимого пула желчных кислот, увеличивается их синтез из холестерина,
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
что приводит к снижению его содержания в желчи. Одновременно происходит
повышение холато-холестеринового коэффициента. Таким образом, одним из
ведущих звеньев в механизме липидкорригируюшего действия семян Medicago
Sativa могут быть их сорбционные свойства. До настоящего времени они оста­
ются неизученными, поэтому представляется важным исследовать сорбцион­
ные свойства семян Medicago Sativa по отношению к солям холевых кислот,
влияние их потребления на концентрацию холестерина желчи и холатохолестериновый коэффициент.
Регулирующая роль в ослаблении синтеза холестерина в печени отводит­
ся коротко-цепочечным летучим жирным кислотам - продуктам ферментации
компонентов пищевых волокон: некрахмальных вязких полисахаридов и рези­
стентного крахмала (Anderson J.W., 1995, 1999, Topping D.L., 2001). Резистент­
ный крахмал образуется в семенах бобовых, независимо от способа их термо­
обработки (V'ecna A. ct a)., Cheung P.C. et a)., 1998), однако, количество обра­
зующегося при термообработке семян Medicago Sativa резистентного крахмала,
неизвестно. В связи со сказанным, для установления механизма липидкорригирующего действия семян Medicago Sativa, является актуальной задача опреде­
ления в них не только общего содержания пищевых волокон, но и резистентно­
го крахмала.
Липопротеины низкой плотности в первую очередь из всех классов липопротеинов подвергаются окислительной модификации (Климов А.Н., 1995;
NCEP Expert Panel, 2002), которая, согласно современным представлениям, иг­
рает ведущую роль в атерогенезе (Berliner J.A. et al., 1995; Jialal 1. et al., 1992).
В семенах Medicago Sativa содержатся витамины-антиоксиданты: токоферол и
каротиноиды (Зелепухина В.Ф., 1977), которые могут препятствовать окисли­
тельной модификации липопротеинов низкой плотности. Неизвестно, что про­
исходит с антиоксидантами семян Medicago Sativa в процессе термообработки.
В этой связи представляет интерес изучение устойчивости липопротеинов низ­
кой плотности к окислению при использовании в качестве антиоксиданта термообработанных семян Medicago Sativa.
Дислипидемии часто выявляются у лиц с гипертензией и избыточной
массой тела (ВОЗ, 1990). Одним из способов коррекции как артериального
давления, так и гиперлипидемий является снижение массы тела (Hovell M.E.,
1982, MacMahon S.W. et al., 1985, N1H, 1998, Flynn M.M. et al., 1999, NCEP Ex­
pert Panel, 2002). Гипотензивный эффект оказывает и включение в диету жиров
морских рыб - источников ш-3 полиненасыщенных жирных кислот (Harris W.S.
et al., 1990, Appel L.J. et al., 1993, Morris M.C. et al., 1993, Титов В.Н., 1999).
Однако их прием сопровождается преимущественно снижением концентрации
триглицеридов сыворотки крови, а содержание холестерина липопротеинов
низкой плотности повышается (Harris W.S., 1995, Nestel P.J., 2000). Сочетанное
влияние на липидный обмен редуцированной по калорийности и содержанию
жиров диеты, обогащенной со-3 полиненасышенными жирными кислотами
остается неизученным.
4
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Цель работы: Изучить роль компонентов семян Mcdicago Sativa и длинноцепочечных жи"рных кислот в коррекции нарушений липидного обмена у
лиц с гиперхолестеринемией.
Задачи исследования:
1. Изучить состояние липидного обмена у пациентов с гиперхолестери­
немией при использовании диеты А1 2500 ккал (NCEP, 1993), усиленной се­
менами Mcdicago Sativa.
2. Разработать гипокапорийную диету с включением длинноцепочечных
полиненасыщенных жирных кислот семейства ш-3 и изучить состояние липид­
ного обмена у пациентов с гиперхолестеринемией на фоне ее применения.
3. Изучить состояние липидного обмена у пациентов с гиперхолестери­
немией на фоне применения диеты А1 2500 ккал (NCEP, 1993), усиленной ш-3
длинноцепочечными полиненасыщенными жирными кислотами.
4. В семенах Medicago Sativa определить компоненты, обладающие липидкорригирующим действием.
5. Изучить антиоксидантные, сорбционные и реологические свойства
семян Medicago Sativa и их вязкого полисахарида in vitro.
Диссертация выполнена в соответствии с планом научноисследовательских работ ГУ НИИ терапии СО РАМН, тема "Изучить механиз­
мы энтеросорбции и разработать новые способы коррекции нарушений липид­
ного обмена", номер государственной регистрации № 019.40001993. В 19911995 гг. работа была поддержана грантом Научного совета по Государствен­
ной научно-технической программе России "Национальные приоритеты в ме­
дицине и здравоохранении", направление "Атеросклероз", №127.
Научная новизна. Впервые показано, что при использовании семян
Medicago Sativa у пациентов с гиперхолестеринемией липидкорригирующий
эффект достигается за счет снижения абсорбции холестерина в кишечнике,
усиления элиминации желчных кислот и синтеза холестерина в печени. Этот
эффект более выражен, чем при традиционной диетотерапии. Показано, что
замедление абсорбции холестерина связано с гельформирующими свойствами
вязкого полисахарида Medicago Sativa, а элиминация желчных кислот - с их
сорбционными свойствами семян.
Показана способность семян Medicago Sativa снижать окисляемость липопротеинов низкой плотности in vitro за счет содержания жирорастворимых
антиоксидантов (токоферола и каротиноидов) и лигнина.
Впервые показано, что в составе пищевых волокон термообработанных
семян Medicago Sativa повышается содержание резистентного крахмала, био­
логические эффекты которого связывают с образованием летучих жирных ки­
слот и блокированием синтеза холестерина.
Впервые показано, что у пациентов с гиперхолестеринемией снижение
концентраций общего холестерина и холестерина липопротеинов низкой плот­
ности, без изменения содержания холестерина высокой плотности, достигается
в результате применения гипокалорийной диеты 1800 ккал с включением
5
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
длинноцепочечных полиненасышенных жирных кислот семейства <о-3. В от­
личие от диеты А1, эти эффекты проявляются через один месяц диетотерапии.
Практическая значимость. Усиление эффективности гипокалорийной
диеты А1 1800 ккал введением ш-3 ПНЖК жиров морских рыб позволяют ре­
комендовать ее для профилактики и коррекции факторов риска сердечно­
сосудистых заболеваний: избыточной массы тела и ожирения, артериальной
гипертензии и нарушений липидного обмена, в частности, высокой концентра­
ции холестерина липопротеинов низкой плотности. Диета, обогащенная ш-3
ПНЖК жиров морских рыб рекомендована для использования в лечебном пи­
тании в санаторно-курортных учреждениях (Организация лечебного питания в
санаторно-курортных учреждениях. Методическое пособие. Утв. Управлением
социальной зашиты Администрации Новосибирской области. - Новосибирск,
2002).
Полученные результаты свидетельствуют, что холестеринснижающий
эффект диет, усиленных семенами Medicago Sativa и длинноцепочечными
жирными кислотами, достигается в более короткие сроки, по сравнению с дие­
той А1 и позволяют рекомендовать такие диеты для немедикаментозной кор­
рекции нарушений липидного обмена у пациентов с гиперхолестеринемией.
Разработанный способ выделения вязкого полисахарида из семян Medicago
Sativa может быть использован для получения камеди. Сведения о повышении
эффективности диетотерапии у пациентов с нарушениями липидного обмена
используются в образовательном процессе студентов Новосибирской государ­
ственной медицинской академии.
Положения, выносимые на защиту:
1. Липидкорригирующий эффект диеты А1 2500 ккал повышается при
дополнении ее семенами Medicago Sativa. Липидкорригирущее действие диеты
А1 2500 ккал, модифицированной семенами Medicago Sativa, связано со спо­
собностью пищевых волокон семян повышать вязкость содержимого желудоч­
но-кишечного тракта, снижать реабсорбцию желчных кислот и синтез холе­
стерина в печени у пациентов с гиперхолестеринемией.
2. Семена Medicago Sativa обладают анитиоксидантными свойствами, ко­
торые проявляются в снижении окисляемости липопротеинов низкой плотно­
сти in vitro, за счет содержащихся в семенах жирорастворимых антиоксидантов
и лигнина.
3. Замена со-6 полиненасышенных жирных кислот на длинноцепочечные
полиненасыщенные жирные кислоты семейства ш-3 в гипокалорийной диете
1800 ккал у пациентов с гиперхолестеринемией приводит к достоверному сни­
жению концентрации общего холестерина, холестерина липопротеинов низкой
плотности, без снижения содержания холестерина высокой плотности сыво­
ротки крови.
Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на научнопрактической конференции "Новые методы диагностики и лечения заболе­
ваний, медицинская техника" (Новосибирск, 1993), 5-й научно-практической
конференции "Актуальные вопросы современной медицины" (Новосибирск,
6
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
1995), II Российском национхтьном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва.
1995), научной конференции "Питание в профилактике заболеваний населения
Севера" (Красноярск, 1995), Международном симпозиуме "Полиненасыщен­
ные жирные кислоты ю-6 и со-3 семейств: медико-биологические, биохимиче­
ские и биотехнологические аспекты" (Владивосток, 1995), Международной
конференции "International perspectives of the North Karelia project. 15 years of
International Visitors Programs" (Финляндия, Иоенсу, 1995), Сибирской кардио­
логической конференции "Диагностика, лечение и профилактика сердечно­
сосудистых заболеваний" (Новосибирск, 1996), Втором международном сим­
позиуме "Питание и здоровье: биологически активные добавки к пище"
(Москва, 1996), III международном симпозиуме "Питание и здоровье. Биологи­
чески активные добавки к пище в лечении и профилактике наиболее распро­
страненных заболеваний" (Тюмень, 1997), Международной конференции "Вто­
ричная профилактика ИБС: достижения и перспективы" (Тюмень, 1997), V
Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва, 1998), IV
Международном симпозиуме "БАД: XXI век" (Санкт-Петербург, 2000), V Ме­
ждународном симпозиуме "Биологически активные добавки к пище и пробле­
мы здоровья семьи" (Красноярск, 2001), VI Международном симпозиуме "БАД
к пище и проблемы оптимизации питания" (Сочи, 2002).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 47 работ, в том
числе получено 2 патента Российской Федерации на изобретение:
1. Способ получения холестеринснижающих веществ: Патент РФ
№2052960 / Ю.П.Никитин, И.П. Березовикова.- опубл.27.01.96 - Изобретения.1996.-ЖЗ.
2. Способ немедикаментозной коррекции факторов риска ишемической
болезни сердца: Патент РФ№ 2164409 / Ю.П. Никитин, И.П. Березовикова,
Г.В.Спиридонова.- опубл. 27.03.01.- Изобретения,- 2001.- №9.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 260 страни­
цах машинописного текста. Состоит из введения, литературного обзора, мате­
риалов и методов исследования, четырех глав собственных исследований, об­
суждения результатов, выводов. Диссертация иллюстрирована 35 таблицами и
30 рисунками. В списке литературы приведены 95 отечественных и 355 ино­
странных источников.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исследование механизмов коррекции нарушений липидного обмена
компонентами семян Medicago Sativa и длинноцепочечных жирных кислот
проводилось в три этапа.
На первом этапе исследовался химический состав семян Medicago
Sativa, проводилась оценка изменений нутриентов, обладающих гиполипидемическими свойствами, при их термообработке.
На втором этапе проводилась сравнительная оценка основных свойств
семян Medicago Sativa, которыми можно объяснить ее липидкоррнгирующиее
7
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
действие: сорбционных, антиоксидантных, реологических, в модельных систе­
мах in vitro.
На третьем этапе изучалось состояние липидного обмена у пациентов с
гиперхолестеринемией на фоне применения диет А1 2500 ккал (NCEP, 1993) и
диет 1800 ккал с различными липидкорригирующими компонентами.
Для характеристики химического состава семян Medicago Sativa опреде­
ляли: содержание сухих веществ - методом высушивания до постоянной массы
при 105°С (Ермаков А.Н., 1987); общий азот (N) определяли методом Къельдаля (ИСО, 1971). Количество белка рассчитывали по содержанию общего азота
умножением на пересчетный коэффициент 6.25 (N х 6,25) (Покровский А.А.,
1976); аминокислотный состав белков, состав углеводов - методом ВЖЭХ на
хроматографе "Милихром" (Россия); триптофан - колориметрическим методом,
после щелочного гидролиза (Ермаков А.Н., 1972); оценку качества белка про­
водили методом аминокислотного скора (ВОЗ, 1973). Общие липиды опреде­
ляли по Folch J.et al. (1957); спектр жирных кислот - методом газожидкостной
хроматографии на газовом хроматографе 5890А фирмы "Хьюлетт-Паккард"
(Япония).
Исследование перевариваемых углеводов: моно- и дисахариды определя­
ли методом Бертрана (Бурштейн А.И., 1963); крахмал - методом кислотного
гидролиза (Ермаков А.И., 1987). Энергетическую ценность оценивали расчет­
ным путем с использованием калорических коэффициентов 4,0 - для белков,
9,0 - для жиров и 4,0 - для углеводов (Покровский А.А., 1976).
Суммарное содержание пищевых волокон и их состав - гравиметриче­
ским методом по Gocririg H.K.,Van Soest PJ. (1970). Содержание резистентного
крахмала оценивали ферментативным гравиметрическим методом по Englyst
H.N. et al. (1992). Общее количество золы определяли гравиметрически, с озолением вещества при 400-450°С (Бурштейн А.И., 1963). Суммарное содержание
сапонинов - по Ермакову А.И. (1987); медикагеновую кислоту (агликон) мето­
дом ВЭЖХ на хроматографе "Милихром" (Россия). Содержание L-канаванина
определяли качественной реакцией, основанной на специфической цветной ре­
акции аминокислоты L-канаванина с тринатриевой солью пентацианаммония
железа (Na3[Fe(CN)5NH3]) no Bell E.A.( 1960).
Анализ содержания витаминов - антиоксидантов (токоферолов) проводи­
ли с использованием обращенно-фазной распределительной хроматографии на
микроколоночном хроматографе "Милихром 1-А" (Россия) (Микичур Н.И.,
Сафронов И.Д., 1988), каротиноидов - экстракцией ацетоном с последующим
колориметрированием (Ермаков А.И. и др., 1972).
Изучение сорбционных свойств проводили в модельных опытах с холатом натрия. Определение концентрации холата натрия производили по реакции
Петтенкоффера, фотометрирование при 580 нм.
Антиоксидантные свойства сырья и препаратов изучали, используя ме­
тод определения резистентности ЛНП к окислению in vitro (Рагино Ю.И.,
Душкин М.И., 1998) (отв. исп. - д.м.н. Рагино Ю.И.). Реологические свойства
растворов вязких полисахаридов в концентрациях 0,5% и 1% исследовали с
8
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
помощью капиллярного вискозиметра типа ВПЖ-1; определяли кинематиче­
скую вязкость при температуре 22 ± 3°С.
Оценка эффективности гиполипидемическон диеты, усиленной
термообработанными семенами Medicago Sativa.
Для оценки эффективности гиполипидемической диеты А1, а также дие­
ты, дополненной термообработанными семенами Medicago Sativa , проведено
клиническое открытое, контролируемое, рандомизированное (простая рандо­
мизация с использованием строк случайных чисел) исследование общей про­
должительностью 8 недель. Исследование проводилось в 1995-1997гг на базе
2-го терапевтического отделения клиники ГУ НИИ терапии СО РАМН (зав.
отделением и ответственный исполнитель клинической апробации Словикова
И.Б.). В исследовании приняло участие 50 пациентов - добровольцев, мужчин и
женщин в возрасте 30-59 лет. Критерием отбора служила гиперхолестеринемия: концентрация ОХС в сыворотке крови 200 - 300 мг/дл (NCEP, 1993). Про­
тивопоказаниями для участия в исследовании являлись: вторичная гиперлипидемия (сахарный диабет, заболевания щитовидной и поджелудочной желез,
нефротический синдром), активные заболевания печени, хроническая почечная
недостаточность, подагра, инфаркт миокарда или оперативное вмешательство
на сердце за предыдущие 6 месяцев, хронический алкоголизм, острые заболе­
вания и/или состояния (инфекции, травмы, обострения хронических заболева­
ний), прием гиполипидемических препаратов в течение 2-х месяцев до начала
исследования, непереносимость бобовых. Все пациенты были рандомизированы на 2 группы, не отличающиеся между собой по исходным клиникобиохимическим показателям (табл.1).
Обследуемые групп получали гиполипидемическую диету Al (NCEP,
1993) с содержанием общего жира не более 30%, насыщенных жирных кислот
(НЖК) не выше 10% калорийности рациона, общего холестерина - до 300
мг/сутки. Энергоценность 2200-2500 ккал. Группа 1 (Диета Al+Medicago
Sativa) получала дополнительно к диете семена Medicago Sativa термостатиро­
ванные измельченные 15 г/сутки (3 раза в день по 5 г). Участники группы 2
(Диета А1) получали только базовую диету А1. Общая продолжительность на­
блюдения составила 8 недель, в том числе 3 недели - в условиях стационара и
5 недель - амбулаторно. Через 2 недели амбулаторного наблюдения пациенты
приглашались для осмотра с целью контроля соблюдения диеты и переноси­
мости растительной добавки к диетам. Оценка диеты проводилась методом 24часового суточного воспроизведения затри дня (Мартинчик А.Н., и др.,1996).
Оценку антропометрических показателей производили стандартными
методами, в 1-й, 21-й и 56-й дни исследования. Индекс массы тела оценивали
по формуле: ИМТ = масса тела (кг) /рост ( м2). Избыточная масса тела и ожи­
рение принимались при значениях индекса>25кг/м2 (NIH, 1998).
Взятие крови осуществляли натощак с 07 до 08 часов, в 1-й, 21-й и 56-й
дни исследования. Концентрации ОХС, ХС ЛВП, ТГ в сыворотке крови опре­
деляли ферментативным методом с использованием наборов фирмы "Biocon"
(Германия) на анализаторе FP 901.
9
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица I
Клиннко-биохимическая характеристика исследуемых групп
(гиполипидемические диеты с растительными компонентами, М±т)
Показатели
Средний возрастает
Мужчины,%
Женщины, %
САД, мм рт ст
ДАД, мм рт ст
Рост, м
Масса тела, кг
ИМТ, кг/м2
Глюкоза, ммоль/л
Мочевая кислота, ммоль/л
ОХС, мг/дл
ХС-ЛНП, мг/дл
ХС-ЛВП, мг/дл
Триглицериды, мг/дл
Коэффициент атерогенности
(ОХС-ХС ЛВП)/ХС ЛВП
Холестерин пузырной желчи, г/л
Диета А1
+ Medic ago Sativa
n=25
48,8+ 1,6
52
48
138,6 ±2,9
91,1±2,1
1,69 ±0,02
78,5 + 2,3
27,4 + 0,5
5,1 ±0,2
0,33 ±0,01
250,4 ± 3,6
166,5 ±4,7
54,2 ± 3,6
161,5 ±13,4
4,1 ±0,4
2,0 ±0,1
Холестерин печеночной желчи,
г/л
Холато-холестериновый
Коэффициент
1,0 ±0,1
Диета A1
n=25
47,4 ± 1,5
52
48
140,2 ±3,0
90,2 ±2,1
1,71 ±0,02
81,8 + 3,4
27,9 ± 0,7
5,0 ±0,1
0,33 ±0,01
244,4 ± 4,7
163,4± 4,9
51,5 ± 2,5
153,5 ± 10,0
4,0 ±0,3
1,9 ±0,1
1,0 ±0,1
14,8 ± 1,0
12,6 ±0,7
Примечание: различий в показателях между группами нет, р>0,05, t критерий Стьюдента
Холестерин липопротеинов низкой плотности (ХС ЛНП) рассчитывали
по формуле Friedcwald W. (1972), коэффициент атерогенности по формуле
Климова А.Н. (1995). В 1-й и 56-й дни исследования проводили минутированное
дуоденальное зондирование (МДЗ). Содержание холестерина и литогенные
свойства желчи определяли, исследуя пузырную (IV фаза МДЗ) и печеночную
желчь (V фаза МДЗ). Концентрацию холестерина в желчи определяли методом
Златки-Зака в модификации Мирошниченко В.П. (1983); холато- холестерино­
вый коэффициент - по отношению общего количества желчных кислот к об­
щему холестерину. Концентрацию глюкозы определяли в сыворотке крови орто-толуидиновым методом (Тиц Н.У., 1986). Все биохимические исследования
сыворотки крови и желчи проводились в лаборатории биохимических исследо­
ваний ГУ НИИ терапии СО РАМН (отв. исп. н.с. Иванова М.В.).
10
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Для проведения исследований было изготовлено 3 опытных партии термообработанных измельченных семян Medicago Sativa. Оценка каждой партии
по санитарно-химическим показателям и микробиологическим показателям
безопасности производилась в соответствии с "Медико-биологическими требо­
ваниями и санитарными нормами качества продовольственного сырья в пище­
вых продуктах" №5061-89 и СанПиН 2.3.2560-96 "Гигиенические требования к
качеству и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов".
Все пациенты были ознакомлены с целями исследования и подписывали ин­
формированное согласие на участие в нем.
Оценка липидкорригирующего действия диет, усиленных ПНЖК
семейства ш-З.
Оценка липидкорригирующих свойств диет, усиленных ПНЖК семейст­
ва со-3, изучалась на базе клиники НИИ терапии СО РАМН (главный врач и от­
ветственный исполнительФлейшман Г.В.), в 1994-98гг. Продолжительность
диетотерапии - 4 недели. Были использованы диеты А1 2500 ккал (NCEP,
1993) с включением различных доз <и-3 ПНЖК в составе капсул жира лососе­
вых ("Омега-3", Nutra Source, США), а также оригинальные гипокалорнйные
диеты 1800 ккал с включением ПНЖК семейства ш-З и без них. В исследова­
ние включено 49 добровольцев в возрасте 30-59 лет. Критерием отбора явля­
лась артериальная гипертензия (диастолическое давление 90-105 мм рт ст;
ВОЗ, 1993). Все испытуемые были разделены на 4 группы, не различающиеся
по исходным клинико-биохимическим показателям (табл.2).
Таблица 2
Исходные клинико-биохимические показатели
в исследуемых группах (М± т )
Показатели
Диета 1
Диета 2
Численность
Возраст, лет
Рост, см
Масса тела, кг
ИМТ, кг/м2
САД, мм рт ст
ДАД, мм рт ст
ОХС, мг/дл
ХСЛНП, мг/дл
ХС ЛВП, мг/дл
ТГ, мг/дл
15
42,2± 2,0
1,74± 1,3
95,0+4,1
31,2±1,2
150,312,3
97,7± 1,1
255,7± 14,9
178,0+ 12,6
46,9+ 4,0
143,7+19,7
12
43,7+ 2,3
1,74+ 2,3
94,0+ 5,9
30,7±1,3
155,7±8,1
101,513,6
229,61 10,1
150,219,2
51,3±3,2
140,3+13,8
Диета 3
Диета 4
7
15
55,912,4
44,5+ 2,6
1,741 1,9
1,6814,4
87,6+ 3,2
81,1+3,6
28,7+1,1
28,81 1,1
148,612,7
153,913,1
96,81 1,1
92,9+4,8
227,019,2 226,3115,7
133,61 11,0 141,3114,4
55,413,8 . 58,415,1
190,4139,2 133,0122,8
Примечание: различий в показателях между группами нет, р>0,05, LSDкритерий
11
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Пациентам группы I (Диета П назначалась оригинальная гипокалорийная диета А1 - 1800 ккал, разработанная автором, в которую ежедневно вклю­
чалось 4,4г ПНЖК о-."? {б т.ч. 3,6 г ЭПК и ДГК) в виде 75г рыбных консервов
"Сельдь иваси натуральная" (Россия). Второй группе (Диета 2) предлагалась
вышеуказанная диета, не содержащая и-3 ПНЖК. Пациенты третьей группы
(Диета 3) в период исследования получали гиполипидемическую диету А!
2500 ккал и 12 капсул жира лососевых "Омега-3" (Nutra Source), что соответст­
вовало 3,6г ЭПК и ДГК. Пациенты четвертой группы (Диета 4) получали диету
А1 2500 ккал и 3 капсулы "Омега-3" {0,9г ЭПК и ДГК). Все пациенты в допол­
нение к диете получали а-токоферола ацетат 200мг/день. Пациенты не прини­
мали липидснижающих и гипотензивных препаратов, были ознакомлены с це­
лями исследования и подписывали информированное согласие иа участие в
нем.
Взятие крови для анализов осуществляли натощак с 07 до 08 часов, в 1-й
и 28-й дни курса диетотерапии. Спектр жирных кислот определяли на газовом
хроматографе 5890А фирмы "Хьюлегт-Паккард" (отв.исп. д.х.н.А.И.Резвухин).
Статистический анализ. Статистическую обработку данных проводили с
использованием пакета программ SPSS 9.0-11.5 и "Statistics 6.0". Применялись
параметрические (критерий Стьюдента, простой и парный) и непараметриче­
ские тесты (Уилкоксона, Манн-Уитни), однофакторный дисперсионный анализ
(ANOVA, Крускал-Уэллис), множественное сравнение средних (LSDкритерий), корреляционный анализ (Спирмена и Пирсона), унивариантный
анализ GLM. Значения р<0,05 считали достоверными.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Оценка липидкорригирующих компонентов
семян Medicago Sativa Medicago sativa
Изучение химического состава нативных семян Medicago Sativa показа­
ло, что большая часть сухих веществ представлена углеводами, как усвояемы­
ми - 11,8+2,1%, так и неусвояемыми (пищевыми волокнами) - 33,8+0,8%. От­
мечено высокое содержание белка - 36,7+5,2% на сухое вещество. Концентра­
ция липидов сравнительно невысока- 12,510,5%. Энергетическая ценность се­
мян составила 284,2+2,9 ккал /100г. Как и все бобовые культуры, белки семян
Medicago Sativa характеризуются высоким содержанием лизина и низкой кон­
центрацией серусодержаших аминокислот. Для семян Medicago Sativa харак­
терна высокая концентрация аминокислот, обладающих гипопипидемическими
свойствами: глицина (3520 ± 101,6 мг%), аргинина (3861+222,1 мг%) и аспарагиновой кислоты (1980 ± 103,3 мг%). 8 масле семян содержится алиноленовая кислота семейства w-З в концентрации 27,9 ± 2,0%
В общем количестве пищевых волокон содержится 35,6 % гемицеллюлоз,
8,9% - резистентного крахмала, 38,5% - целлюлозы. Заслуживают внимания
данные о количестве лигнина, содержание которого составило 17% от общей
12
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
суммы пищевых волокон, или 30% суммы кислотно-детергентных волокон, что
значительно выше, чем в семенах других бобовых культур (табл.3). Эти ре­
зультаты представляются очень важными в связи с тем, что лигнин является
одним из главных компонентов пищевых волокон, с которым связывают сорб­
цию желчных кислот. Кроме того, они обладают антиоксидантными свойства­
ми (Lu F.J. et al., 1998). Гемицеллюлозы семян Medicago Sativa, как и в других
бобовых культурах, являются основным компонентом вязких полисахаридов,
формирующих вязкие гели и играющих важную роль в снижении концентра­
ций липидов и глюкозы сыворотки крови. Концентрация сапонинов в семенах
Medicago Sativa составила 0,25+0.01%. В сапонинах семян обнаружено 9,6%
агликонов, в составе которых присутствует медикагеновая кислота - 0,0012%
от массы.
Таким образом, в семенах Medicago Sativa сорта "Сибирская" были оп­
ределены следующие липидкорригирующие компоненты: пищевые волокна, алиноленовая кислота, аргинин, глицин, аспарагиновая кислота, сапонины. В
семенах Medicago Sativa, как и в других семенах бобовых культур содержатся
антипитательные вещества. В данном объекте они представлены аргининоподобной аминокислотой - L-канаванином (Bell E.A., 1960). Поэтому при их
переработке для пищевых целей необходимо использовать методы, способст­
вующие удалению этого компонента. Надежными способами освобождения от
L-канаванина, являются проращивание семян или их автоклавирование (Bell
Е.А., 1960, Malinow M.R. et al.,1984). Поэтому нами для обработки семян
Medicago Sativa была принята схема, апробированная шведскими исследовате­
лями (Molgaard J. et al., 1987). Схема обработки семян включала в себя сле­
дующие этапы: автоклавирование (1 атм, 120°С, 3 часа), сушку с вентиляцией
(70°С, 1 час), измельчение и последующее тестирование (177°С, 10 мин).
Известно, что величина частиц вещества во многом определяет его фи­
зиологическое действие. Особенно это относится к эффектам пищевых воло­
кон: влагоудерживающей способности, их ферментированию микроорганиз­
мами толстого кишечника, сорбционным свойствам. Степень измельчения
влияет и на гипохолестеринемический эффект семян Medicago Sativa (Malinow
M.R. et al., 1980). Поэтому в отличие от схемы, предложенной Molgaard J. et al.,
нами был получен тонкоизмельченной продукт (размер частиц 50-100 мкм),
для чего были использованы современные вихревые технологии. Термообра­
ботка семян способствовала удалению антипитательного вещества Lканаванина, о чем свидетельствовала отрицательная качественная реакция.
Термообработка не изменяла концентраций большинства активных ком­
понентов семян Medicago Sativa (ПНЖК, белков, аминокислот). Основные из­
менения выявлены в количестве и составе пищевых волокон: их содержание
возросло до 42,2±0,9%. Разные компоненты пищевых волокон отличаются по
физико-химическим и физиологическим свойствам, поэтому очень важными
являются результаты определения отдельных составляющих пищевых волокон
семян (табл.3).
13
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 3
Пищевые волокна семян Medicago Sativa (г/100г. M±m)
Семена Medicago
Sativa
термообработанные
Семена Medicago
Sativa
нативные
Пищевые волокна
Нейтрально-детергентные
(общие ПВ)
Резистентный крахмал
Кислотно-детергентные,
всего
в т.ч. целлюлоза
лигнин
Примечание: * - р<0.05, парный тест
31.2 ± 0.8
2,8 ±0,3
17.3 ±0.5
42.2 ± 0.9*
14,7±0,6*
16.4 ±0.6
12.0 ±0.2
5.3 ±0,5
11.3 ±0.3
5.1 ±0,2
Уилкоксона
Кислотно-детергенгная фракция волокон, представленная целлюлозой и
лигнином не изменялась. Увеличение на 35% общего количества пищевых во­
локон произошло за счет образования резистентного крахмала, физиологиче­
ские свойства которого подобны эффектам растворимых пищевых волокон:
ферментирование в толстой кишке с образованием летучих короткоцепочечных жирных кислот, и, воздействие, таким образом, на метаболизм липидов
посредством блокирования синтеза холестерина в печени (Veena A. et al.,1995,
Jenkins DJ.A. et al., 1998).
Поскольку гиполилидемические эффекты бобовых растений в большой
степени связаны с наличием в них гельформирующих полисахаридов, была
решена задача выделения их из семян Medicago Sativa. Сравнительная характе­
ристика химического состава полученного нами полисахарида "Альфагам" и
очищенной камеди бобов гуара - "Гуарем" (Орион, Финляндия), который ис­
пользуется для коррекции гиперлипидемий, приведена в табл.4.
Таблица 4
Химический состав вязких полисахаридов семян Medicago Sativa и Гуарема
(%, М± т )
Сухие
вещества
Белок
Гуарем
86,9±0,01
Альфа­
гам
89,8 ±0,08
3,81
±0,05
10,9
±0,06
ЛипиДЫ
0,0
0,3
±0,03
Углево­
ды
(по раз­
ности)
83,1
79,2
Примечание: * р<0,05, тест Уилкоксона
14
Зола
Угле­
род
Водо­
род
0,0
39,03
±0,04
44,82
±3,8*
6,87
±0,07
6,47
±0,12*
1,67
±0,49
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Содержание галактоманнана в полученном нами полисахариде составило
78,3±0,3% (в Гуареме - 82,5+0,6%). Соотношение галактозы и маннозы в Альфагаме составило 4:1, а в Гуареме 1,25:1. Отмечено, что различные соотноше­
ния галактозы и маннозы в галактоманнанах семян бобовых обуславливают их
различные вязкостные свойства (Sprenger M., 1990). Представлялось важным
сравнить эти свойства у полученного нами полисахарида "Альфагам" со свой­
ствами "Гуарема", т.к. одним из вероятных механизмов гипохолестеринемического действия гельформирующих волокон является снижение абсорбции хо­
лестерина в тонком кишечнике за счет повышения вязкости. На рис.1 и 2 пред­
ставлены результаты изучения реологических свойств вязкого полисахарида,
выделенного из семян Medicago Sativa в сравнении с гуаровои камедью "Гуарем" и семенами подорожника, которые, как и гуаровая камедь, снижают кон­
центрации ОХС и ХС ЛНП, без изменения концентраций ТГ и ХС ЛВП (Ander­
son J.W. et al., 2000).
Таким образом, изучение свойств камеди семян Medicago Sativa показа­
ло, что ее вязкостные свойства сопоставимы с гуаровои камедью и выше, чем
у известного коммерческого липидснижающего препарата пищевых волокон семян подорожника. Поэтому одним из вероятных механизмов гипохолестеринемического действия семян Medicago Sativa является абсорбции холестерина
в тонком кишечнике вследствие образования вязких гелей.
3
2,7
2,4
2,1
1,8
1,5
1,2
0,9
0,6
0,3
£
у
*
.-»-*
/
У-'
• Гуарем
— Альфагам
0,5
1
2
3
4
8
12
24
25
Время экспозиции, час
Рис.1. Кинематическая вязкость 0,5%-х водных растворов вязкого поли­
сахарида семян Medicago Sativa - Альфагам и Гуарема, 25 С
Примечание: * - р<0.05, тест Манн-Уитни
15
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Альфагам — - - Подорожник
" 4
2 -
0,5
1
2
3
4
8
12
Время экспозиции, час
24
25
Рис.2. Кинематическая вязкость 1,0%-х водных растворов вязкого поли­
сахарида семян Medicago Sativa и подорожника, 25 С
Примечание: * - р<0.05, тест Манн-Уитни
Сорбционные свойства семян Medicago Sativa Medicago Sativa
Энтеросорбция, как один из методов коррекции нарушений липидного
обмена, привлекает внимание специалистов своей физиологичностью и мень­
шим проявлениям побочных эффектов. Одним из возможных механизмов гипохолестеринемического действия органических сорбентов - стеринов, сапо­
нинов, пищевых волокон, является их возможность связывать метаболиты хо­
лестерина - желчные кислоты, снижать реабсорбцию и повышать фекальную
экскрецию последних, прерывая, энтерогепатический цикл их обмена. Как бы­
ло показано выше, в семенах Medicago Sativa присутствуют потенциальные
сорбенты стеролов и желчных кислот. Эффективность связывания холата на­
трия семенами Medicago Sativa нативными измельченными, термообработанными измельченными, изолированным вязким полисахаридом изучена в срав­
нении с известными секвестрантами желчных кислот - холестирамином, вазозаном, пектином, а также коммерческими препаратами очищенных раствори­
мых волокон - "Гуаремом" и "Прополом". Кроме того, для исследования были
использованы семена Medicago Sativa после удаления из них сапонинов
(рис.3).
16
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Вачтан.
А 105,7 /
Хо.чеетнрамин
Л
Ьп
Пектин
68
Medicago Sativa** '
В
\
63,6
Подорожник
\
Medicago Sativa* '
о
56,5
32,6 £
' Колестид
59,4
Medicago Sativa
49,7
С
В
Рис.3. Сорбция холата натрия различными препаратами относительно
холестирамина (%).
Примечание: * - Семена Medicago Sativa после удаления сапонинов,
** - семена Medicago Sativa термообработанные; буквами обозначены меж­
групповые различия, р<0,05, LSD-тест.
Наиболее эффективными из изученных сорбентов оказались холестирамин и вазозан (холестирамин, обогащенный пектином). В одинаковой степени
связывали соль желчной кислоты семена Medicago Sativa нативные и термооб­
работанные, семена Medicago Sativa без сапонинов и пектин яблочный (рисЗ).
Связывающая способность семян Medicago Sativa и пектина была в 1,3 раза
выше, чем у коммерческого секвестранта желчных кислот "Колестида". В
табл.5 приведены результаты количественной оценки сорбции соли холевой
кислоты различными препаратами, при различных условиях сорбции.
Проведенные исследования показали высокую сорбционную способ­
ность семян Medicago Sativa, как нативных, так и термообработанных. Полу­
ченные результаты показывают, что воздействие семян Medicago Sativa на ме­
таболизм холестерина при добавлении к гиполипидемической диете может
проявляться повышением выведения желчных кислот и синтеза их из холесте­
рина, и как следствие, снижением концентрации холестерина в желчи и крови.
17
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 5
Сорбция холата натрия различными препаратами (%, М+т)
Масса продукта, необОбразец препарата
Сорбция холата, мг/г холимого для сорбции
I г холата, г
100 мг сорбента, 0.4 мг/мл холата натрия в буферном растворе, рН=8, t=37 С,
1 час, 5 мл фосфатного буфера
Вазозан
17,1 ± 0,5А
59,4 ± 1,9"
Холестирамин
16,2±0,4 А
62,1 + l,5d
Пектин яблочный
П,0±0,2 В
92,3 + 2,0е
B
Семена Medicago Sativa
10,3±0,5
98,5 ± 4,4е
термообработаные
Семена Medicago Sativa
9,6+ 0,3В
105,1+3,5°
нативные
Колестид
8,0 ± 0,4е
130,3 ± 6,9Ь
D
МКЦ
2,0 ± 0,2
554,4 ± 59,0'
100 мг сорбента, 0.4 мг/мл холата натрия в буферном растворе, рН=8, t=37 С,
1 час, 10 мл фосфатного буфера
Холестирамин
29,0+ 0,1Л
34,7 ± 0,8rf
е
Пектин яблочный
22,9+ 1,1
45,4 ± 2,6Г
е
Семена
9,4 ± 0,4
106,5 ±4,1*
подорожника
Альфагам
2,8 ± 0,3°
369,0 ± 36,5я
Гуарем
3,1 ± 0,3°
390,7 ± 66,2я
Пропол
2,6 ± 0,3°
404,6 ± 37,5"
Примечание: разными буквами обозначены достоверные межгрупповые
различия, р<0,05,LSD-тест.
Антиоксидантные свойства семян Medicago Sativa Medicago Sativa
Учитывая важность процессов окисления липопротеинов низкой плотно­
сти (ЛНП) в развитии атеросклероза, была проведена оценка антиоксидантных
свойств нативных и термообработанных семян Medicago Sativa in vitro.
В табл.6 представлены результаты изучения антиоксидантов семян
Medicago Sativa. Несмотря на многоступенчатый процесс их обработки, изме­
нений в концентрации витаминов-антиоксидантов не произошло. Содержание
токоферолов в семенах Medicago Sativa (нативных и термообработанных) со­
ставило в среднем 37+1,4% от рекомендуемой дозы потребления, а каротиноидов (в пересчете на ретиноловый эквивалент) - 200± 10,6 %.
Инкубация ЛНП с ионами меди (контроль) повысила окисленность ЛНП
до 76,5 + 0,01 нмоль/мг белка ЛНП. Добавление в среду инкубации раститель­
ных препаратов - нативных или термообработанных семян Medicago Sativa,
приводило к достоверному снижению окисленности ЛНП уже в минимальной
концентрации - 0,1 мг/дл. В этой концентрации снижение было одинаковым
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
для всех препаратов - 7,1% по отношению к инкубированным без антиоксидантов ЛНП (табл.7, рис.4).
Таблица 6
Антиоксидантные компоненты семян Medicago Sativa (M± m)
Антиоксидант
Семена
Семена
Medicago Sativa Medicago Sativa
p*
нативные
термообработанные
Токоферол, мг/100г%
3,54 ± 0,24
3,84 + 0,14
>0,05
Каротиноиды (РЭ),
>0,05
1,82 ±0,07
2,18 + 0,13
мг/100г
Сумма витаминов АО
>0,05
5,36 ±0,31
6,02 ± 0,26
Лигнин, г/ЮОг
5,3 ± 0,5
5,1 ±0,2
>0,05
Примечание: * - парный тест Уилкоксона
Повышение концентрации препаратов от 0,1 до 10 мг/мл приводило к
дальнейшему снижению окисленности ЛНП. Антиоксидантные свойства нативных и термообработанных семян не различались и зависели от их дозы в
среде инкубации (рис.4).
=
70
•=.
го
g 65
s во
= 55 л
с:
о
Щ 50 45
40 ^~
Концентрация препарата, ыг/нл
—о—Семена Medicago Sativa натианые — -о— • Семена Medicago Satva т/о
Рис.4. Антиоксидантная активность семян Medicago Sativa
Примечание: * - р<0,05, тест Уилкоксона относительно ЛНП, инкубиро­
ванных с ионами меди без антиоксиданта
19
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 7
Влияние антиоксидантов на окисляемость ЛНП в среде инкубации с ионами
меди (М±т)
Окисляемость
Препарат
Антиоксидант
Концентрация
ЛИП, нмоль/мг
(АО)
АО, мг/мл
белка ЛНП
Неинкубированные
нет
13,2+0,2
ЛНП
Инкубированные ЛНП
нет
76,5±0,01*
(контроль)
Инкубированные ЛНП
БГТ
0,02
14,9+0,2*
Инкубированные ЛНП
БГТ
0,04
14,0±0,2*
Примечание: *- р<0,05, тест Уилкоксона, относительно неинкубированных ЛНП
Результаты согласуются с данными о содержании антиоксидантов в ис­
ходном сырье и термообработанных семенах Medicago Sativa (табл. 6).
Таким образом, можно сделать вывод о том, что семена Medicago Sativa
могут оказывать разностороннее влияние на липиды крови: снижать концен­
трацию общего холестерина, липопротеинов низкой плотности; препятствовать
окислительной модификации липопротеинов низкой плотности. Проведенная
работа послужила основанием для включения термообработанных семян
Medicago Sativa в рацион питания пациентов с гиперхолестеринсмией.
Состояние липндного обмена у пациентов с гиперхолестеринемией
при использовании диеты А1 (2500 ккал), усиленной
семенами Medicago Sativa
Средняя энергетическая ценность рационов в обеих группах составляла
2446+108 ккал. Помимо рекомендованного снижения количества общего жира
до 30% калорийности рациона, насыщенных жирных кислот <10% и холесте­
рина <300 мг/сутки, диета характеризовались высоким содержанием пищевых
волокон - 29,6±2,3 г/день. Добавление термообработанных семян Medicago
Sativa вносило в рацион дополнительно 6,3+0,1 г пищевых волокон.
Снижение концентрации ОХС сыворотки крови наблюдалось в обеих
группах уже к третьей неделе (рис.5). В последующий период диетотерапии в
группе "Диета Al+Medicago Sativa" отмечено снижение концентрации ОХС
еще на 6%, в то время как в группе "Диета А1" концентрация холестерина по­
сле 21-го дня не изменялась (рис.4).
Таким образом, по завершении всего периода диетотерапии во всех
группах было получено значимое снижение концентрации холестерина сыво­
ротки крови на 13,0+1,2% и 5,9±0,9%, соответственно, в группе 1 и группе 2.
На фоне диетотерапии концентрация ХС ЛНП во всех группах через 3 недели
изменялась в равной степени (рис.4). Эффект, достигнутый в группе "Диета
А1" к 21 дню, в дальнейшем не изменялся и составил 6,7+2,5%. В группе, ис-
20
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
пользовавшей семена Medicago Sativa, снижение концентрации ХС ЛНП на­
блюдалось в течение всего 8-недельного периода диетотерапии и достигало
17,0±3,1%. Помимо этого, в группе, сочетавшей диету Л1 с семенами Medicago
Sativa, отмечено уменьшение концентрации ТГ на 16,6+2,8% (р<0,05). Важно
отметить, что концентрация ХС ЛВП не изменялась ни в одной из групп паци­
ентов. Установлено, что степень изменения концентраций холестерина зависе­
ла от исходной величины (г=0,77, и г=0,75, р<0,05, для групп 1 и 2, соответст­
венно).
Коэффициент атерогенности уменьшался на протяжении всего периода
исследования во всех группах, однако, значимым изменение оказалось только
при использовании диеты Al+Medicago Sativa к 56-му дню диетотерапии. В
этой группе значения коэффициента стали равными 3,2+ 0,3.
Таким образом, диеты снижали концентрации ОХС и ХС ЛНП сыворот­
ки крови у пациентов с гиперхолестеринемией. Однако, усиление диеты А1
термообработанными семенами Medicago Sativa сопровождалось дополнитель­
ным снижением концентраций ОХС, ХС ЛНП. Кроме того, усиление диеты А1
семенами Medicago Sativa сопровождалось уменьшением концентрации триглицеридов сыворотки крови и коэффициента атерогенности.
Влияние диет на концентрацию липидов желчи
Наряду со снижением концентраций общего холестерина и ХС ЛНП при
использовании семян Medicago Sativa у пациентов гиперхолестеринемией, на­
ми отмечены изменения концентраций холестерина пузырной и печеночной
желчи, а также холато-холестеринового коэффициента, что подтверждает один
из возможных механизмов гипохолестеринемического действия семян
Medicago Sativa: увеличение пула желчных кислот за счет их синтеза из холе­
стерина, вследствие выведения секвестрантами желчных кислот.
У пациентов, дополнявших диету А1 приемом семян Medicago Sativa, на­
блюдалось снижение концентраций пузырной и печеночной желчи, на
25,1 ±2,9% и 35,6±4,0%, соответственно. Одновременно с этим холатохолестериновый коэффициент увеличился на 26,8+5,4%. Этот эффект связан с
представленными выше сорбционными свойствами и свидетельствует о по­
вышении синтеза желчных кислот из эндогенного холестерина (рис.2, табл.3).
У пациентов, использовавших в качестве средства коррекции гиперхолестеринемии только диету, значимых изменений этих показателей отмечено не было.
Влияние диет на другие метаболические показатели
Помимо воздействия на липидный обмен, отмечено влияние диеты А1, а
также диет, усиленных растительными компонентами, на углеводный обмен.
Исходная концентрация глюкозы во всех группах не превышала рекомендуе­
мые физиологические величины и составляла в среднем 5,1+0,1 ммоль/л. Соче­
тание диеты А1 с семенами Medicago Sativa сопровождалось снижением кон­
центрации глюкозы уже через 3 недели диетотерапии.
21
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
I 260
S
180
250
о
X 240
О
s 230
Э
Э- 220
2 0
170 -
к
о
160 •
X
S
150 -
я
га
о.
I'
«
С
X
200
0
21
56
г
!
о
Ьс!
_§
0
J: 170 * 160 и
к 150 ~
СЛВ
21
*
56
61 -1
S 59 -
Концентр
^^^w^
Дни исследования
с 57
I
. -X
s
Дни исследования
ю
ю
* —
*
140
Я
Я 130
<U
*
^Ч.
U
J
55 53 51 -
•'" '"--J
I ° ""
I 130
49 -
W 120 —
47 45
W......T
И
1
Г '
о
21
56
Дни исследования
21
56
Диета Al-tMedicago Sativa — - - Диета Al
Дни исследования
Рис.5. Изменение концентрации липидов сыворотки крови при использовании диет А1 2500 ккал у пациентов
с гиперхолестсринемией. Примечание: *- р<0,05, t-критерий, относительно исходных значений
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В последующие 5 недель в этой группе отмечалось дальнейшее ее
уменьшение: до 4,1±0,1 ммоль/л в группе 1 и 4,6+0,1 ммоль/л в группе 2. Ги­
погликемия ни в одной из обследованных групп не развивалась. Употребление
семян бобовых часто сопровождается повышением концентрации мочевой ки­
слоты. В нашем исследовании этот эффект не наблюдался.
Для выявления механизмов липидкорригирующего действия диет был
проведен корреляционный анализ. Изучение причинно-следственных отноше­
ний влияния различных диет на состояние липидного обмена показало, что в
группе 1 установлены корреляции между изменениями концентраций ОХС, ХС
ЛНП и ХС пузырной и печеночной желчи и холато-холестеринового коэффи­
циента (табл.8).
Таблица 8
Связи между изменениями липидных показателей крови и желчи
Показатели
ДХХК
ДХС пузырной
ДХС печеночной
желчи
желчи
ДОХС
-0,47
0,56
0,46
ДХС ЛНП
-0,48
0,55
0,43
Примечание: корреляции Пирсона, р<0,05
На основании полученных результатов и литературных сведений нами
была разработана схема возможного механизма липидкорригирующего дейст­
вия семян Medicago Sativa в сочетании с диетой А1 (рис.6).
Состояние липидного обмена у пациентов с гиперхолестеринемией
при использовании диет, усиленных длннноцепочечными ПНЖК жиров
морских рыб
Известно, что введение длинноцепочечных со-3 ПНЖК в диету пациен­
тов с гиперхолестеринемией сопровождается повышением концентраций ОХС
и ХС ЛНП, независимо от дозы (Radack K.L. et al., 1990; Harris W.S., 1996,
1997; Kris-Etherton P.M. et al., 2002). На рис.8 представлены результаты диети­
ческого вмешательства у пациентов 4-х групп с разной энергоценностью ра­
циона и дозой со-3 ПНЖК, на состояние липидного обмена. Диета значимо
влияла на изменение концентрации ОХС (Н=20,5, р<0,001) и ХС ЛНП крови
(Н=18,6,р<0,001.
Только гипокалорийная диета в сочетании с ш-3 ПНЖК способствовала
снижению коэффициентов атерогенности (ХС ЛНП/ХС ЛВП и (ОХС-ХС
ЛВП)/ХС ЛВП) до 3,0± 0,3 и 3,5± 0,4, соответственно.
На фоне диетотерапии изменился спектр жирных кислот сыворотки кро­
ви пациентов. Концентрация эйкозапентаеновой кислоты повышалась во всех
группах, сочетавших диету с приемом со-3 ПНЖК. Следует отметить, что эти
изменения определяла исходная концентрация ЭПК (Н=12,2; р<0,05) и было
более выраженным при ее меньшем исходном уровне (табл.9). Содержание
докозагексаеновой кислоты увеличивалось в группе "Диета 1" и "Диета 4". Это
представляется важным, так как в литературе последних лет показано, что ДГК
23
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Антиоксиданты
[Семена Medicago Saliva
О
II
Пищевые
волокна
(в т.ч. резистентный
•О-
а
Гелъформирующие
свойства
Сорбционные свойства
а'
Снижение
всасывания
И
холестерина в
кишечнике
Л
О
У.
Липт)кпрригирун>щий\
чффект
И
Ишибмронанме
синтеза ХС в печени
Повышение захвата ЛН
и выведение их из
кровотока
Повышение
Снижение окнсленности
ЛНП
Замена НЖК
на ПНЖК
Образование летучих
жирных кислот
Пропионопая.
уксусная, масляная
Компенсаторное
повышение рецепторов
к ЛИП
Снижение продукции
апоВ ЛНП
Ферментация
в
Повышение экскреции
желчных кислот
Повышение синтеза
желчных кислот из ХС
lt=>
кр&хмал)
активности рецепторов
ЛНП
г
Снижение содержания
1
юхс
С=>
Диета
А1
^£> Снижение НЖК
п рационе
Рис. 6. Возможный механизм липидкорригирующсго действия семнн люиернм
в сочетании с диетой Л1
24"
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 9
Спектр жирных кислот сыворотки крови при использовании различных диет (% от общего содержания, М* т )
Ж[ирные кислоты
Диета 1
Диет;»2
Диета 3
Дне-га 4
До
После
Д о " "После
После
"Но ~" После
курса
курса
курса
курса
курса
Kvpca
курса
курса
1,52* ^ 0 3 * ^
С14:0
Миристиновая
4,18* 0,б4 4,0б± 0,73 4,33±0,82
4,04*
3,43*
4,76±
0,64
0,45
0,42*
0,22
0,09*
4,47*
1,74*
5,74*
С16:1 Пальмитолеиновая 5,39* 0,82 5,09*1,1 4,96* 0,68
5,72:4:
7,33* 1,4*
0,28
0,51
2,8!
1,93
С 16:0
Пальмитиновая
23,2*2,18
19,54*
24,56*
23,08±
16,3*
22,64*
20,71*
23,87*
5,95
1.84
2,42
1,36
1,06*
2,64
0,63
0,44±
0,84*
0,55*
1,36*
С18:3
а-Лииоленовая
0,5* 0,24 0.8± 0,27 0,75* 0,29
1,25*0,16
0,10
0,14
0,2
0,27
С18:2
Линолевая
15,72*
17,6*1,68
19,07*
19,14*
15,04*
17,89*
21,0*
17,92*
1,51
1,09
0,94
1,21
0,73*
1,28
0,33
С18:1
Олеиновая
17,45±
17,0* 1,34
19,42±
20,88*
21,53*
21,83*
26,79±
23,88*
7,17
1,57
1,58
0,76*
1,87
0,75
1,9
С18:0
Стеариновая
10,83±
7,19* 0,9* 8,79± 0,6
9,5*
4,5 8*
5,91*
8,2* 0,97
9,02*
0,79
0,73
0,24
0,40*
0,16
С20;4
Арахидоновая
6,51*0,55 6,92± 0,98 5,16±0,6
4,67*
4,99±
3,31*
4,48*
3,96*
0,3!
0,65
0,3 7*
0,55
0,32*
С20:3
Дшчжо-у2,47* 0,42 2,34* 0,38 1,79*0,46
1,86*
1,95*
0,97*
1,35*
0,78*
линоленовая
0,28
0,39
0,17*
0,35
0,04
С20:2
1,08±0,26 1,03*0,19 0,74±0,16
0,93*
0,82±
0,61*
0,42*
0,45*
0,18
0,13
0,09*
0,14
0,05
0,87*
0,43*
1,18±
С20.0
Арахиновая
1,47*0,33 1,31±0,19 1,24*0,29 0,77*
1,04*0,15
0,04
0,09
0,25
0,19*
С20:5 Эйкозапентаеновая 0,19*0,07
1,96*
0,17± 0,09
0,26*
0,84±
1,66*
0,34*
2,62*
0,37*
0,07
0,11
0,22*
0,11
0,5*
С22:5 Докозапеитаеновая
0,97*0,3 1,56*0,29 0,66*0,15
0,61±
1,09* .
1,32*
0,8!*
1,77*
0,13
0,16
0,14*
0,19
0,18*
2,72*
2,48±
3,84*
С22:6 Докозагексаеновая 2,97* 0,34 5,2* 0,56* 2,15± 0,46
2,6* 0,27 1,39*0,3
0,41*
0,46
0,26
С22:2
0,2*0,14 0,5* 0,24 0,10*0,04
0,32*
0,36*
0,35*
0,61*
озз*
0,09*
0,08
0,08*
0,05
0,1*
С22:1
Эруковая
1,19*0,38 1,13*0,27 0,3 5* 0,16 0,62±
0,17*
0,27*
0,38*
0,61*
0,16
0,03
0,05*
0,15
0,12*
Примечание: *- р<0,05, парный тест Уи лкоксона, относительно исходного уровня
—и^
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
и ЭПК по-разному влияют на метаболизм ЛВП и ЛИП (Grimsgaard S. et al.,
1997, Mori T.A. et al., 2000). Следует отметить, что снижение как систолическо­
го, так и диастолического артериального давления происходило во всех груп­
пах до оптимальных уровней АД, согласно классификации ВОЗ/МОАГ (1999).
Величина систолического артериального давления не зависела от вида приме­
няемой диеты (табл.10).
Таблица 10
Изменение антропометрических показателей и артериального давления
в результате диетотерапии (М ± т )
Показатели
АМасса тела,
Кг
о2
После курса диетотерапиии
Диета
1
-4,8± 0,5*
АИМТ, кг/м
-1,6±0,2*
ДСАД, мм рт
ст
ДДАД, мм рт
ст
-30,7±
3,1*
-19,0+
2,2*
Диета
2
-4,8+
0,5*
-1,6+
0,2*
-32,6±
3,5*
-22,2+
2,5*
Диета
3
-4,5±
05*
-0,5±
0,2*
-22,б±
3,1*
-11,9+
2,2*
Эффект диеты
Диега
4
-1,9+
0,7*
-0,7±
0,2*
-23,9±
4.6*
-6,8± 3,2
Н
(3,N=49)
23,5
<0.001
21,5
<0,001
7,1
>0,05
17,4
<0,001
Р
Примечание: * - р<0,05, парный тест Уилкоксона, относительно исходно­
го уровня
На фоне диетотерапии происходило снижение соотношения <о6/шЗ
ПНЖК. Во всех группах, дополнявших диету приемом w-З ПНЖК в различных
видах (рыба или капсулы рыбьего жира), этот коэффициент изменялся от ти­
пичных для западных популяций до характерного для популяций коренных
жителей прибрежных северных регионов Гренландии, Чукотки, Канады (DyerbeTg J., 1989; Nikitin Yu.P. et al., 1991; Rode A. et al., 1995) (рис.7).
14
]
12
I
10
С
T
T
CD
6
4h
T
i
1
T
T
•i
2
0 !
Диета 1
Диета 2
Диета 3
Диета 4
DO дней Ш28 дней
Рис.7. Изменение соотношения соб/шЗ ПНЖК сыворотки крови
у пациентов с гиперхолестеринемией при использовании различных диет
Примечание: * - р<0,05, парный тест Уилкоксона
26
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
30
Ш
ЕЙ
41
Диета 1
Диета 2
:
;!;
j\\,
Диета 3
Диета 4
Диета 1
А*
Диета 2
Диета 3
Диета 4
I
ЁИ '
о»
•I'"
f
&
а
Ф
Щ"
CD
ah
а
.
2
Диета 1
Диета 2
Диета 3
Диета 4
^
Диета 1
Диета 2
Диета 3
Диета 4
Рис.8. Изменение концентрации липидов сыворотки крови при использовании диет с ш-3 ПНЖК.
Примечание: строчными буквами обозначены межгрупповые различия, р<0,05, тест Манн-Уитни
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Следует отметить, что не только вид диеты влиял на изменение ОХС и
ХС ЛНП, но и снижение потребление жира по сравнению с типичной диетой
Анализ рационов питания показал, что у всех пациентов изменился характер
питания, в соответствии с требованиями дипидкорригирующей диеты. Из всех
диетических факторов на состояние липидного обмена повлияло уменьшение
содержания жира в рационе с 39±0,5% на 9,1±0,6% (F=12,2, p<0,05 и F=7,l,
р<0,05, соответственно, для ОХС и ХС ЛНП).
Таким образом, в результате диетического вмешательства было уставле­
но, что наиболее эффективной по влиянию на концентрацию липидов сыворот­
ки крови оказалась гипокалорийная диета с включением со-3 ПНЖК (3,6г ЭПК
и ДГК): отмечено снижение концентраций ОХС на 23,9±2,6% и ХС ЛНП на
29,7±4,6%. Гипокалорийная диета без ПНЖК ш-3 снижала содержание ОХС
менее эффективно: на 11,1±3,4 (Н=3,8, р<0,05). Использование капсулированных препаратов Омега-3 (3,6 и 0,9г ЭПК и ДГК) в сочетании с диетой А1 2500
ккал не влияло на состояние липидного обмена у пациентов с гиперхолестеринемией. Ни в одной из исследуемых групп не было получено характерного для
использования ПНЖК ш-3 снижения концентрации ТГ. Это связано с исходно
нормальным содержанием ТГ в крови у пациентов (табл.2).
Для выявления механизма липидкорригирующего действия гипокалорийных диет был проведен унивариантный GLM-анализ. Для снижения кон­
центрации общего холестерина сыворотки крови значимыми факторами ока­
зались: повышение содержания ПНЖК (F=8,4, p=0,01), уменьшение концен­
трации ю-6 ПНЖК (F=7,l, р=0,02), снижение массы тела (F=5,7, p=0,03). Глав­
ным фактором, влияющим на уменьшение концентрации холестерина липопротеинов низкой плотности оказалось повышение содержания суммарного
количества ПНЖК (F=5,5, р=0,03).
Полученные результаты анализа согласуются с литературными данными
и позволяют представить механизм гипохолестеринемического действия этих
диет следующим образом: за счет редукции общего жира в рационе, сокраща­
ется поступление в организм насыщенных жирных кислот и пищевого холесте­
рина. В результате этого повышается активность рецепторов ЛНП. Повышение
потребления ПНЖК, взамен НЖК диеты, способствует снижению продукции
апоВ - липопротеинов (Stone N.J., ct al., 1996). Вследствие этого наблюдается
снижение концентрации липопротеинов низкой плотности в крови. Примене­
ние гипокалорийной диеты сопровождается снижением массы тела и подавле­
нием синтеза эндогенного холестерина (Buono M.D., 1999). Кроме того, длинноцепочечные ПНЖК семейства со-3 также подавляют синтез холестерина и
могут снижать абсорбцию холестерина (Nestel P.J. et al., 1990).
ВЫВОДЫ
1. Повышение липидкорригирующего эффекта диеты А1 2500 ккал за
счет ее модификации семенами Medicago Sativa связано со снижением абсорб­
ции холестерина в кишечнике, повышением элиминации желчных кислот и
снижением синтеза холестерина в печени у пациентов с гиперхолестеринеми28
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ей. Этот эффект проявляется в дополнительном снижении концентрации обще­
го холестерина, триглицеридов крови, без изменения содержания липопротеинов высокой плотности.
2. Гиполипидемический эффект диеты AI 2500 ккал, модифицированной
семенами Medicago Sativa, обусловлен содержанием в них комплекса липидкорригирующих веществ - полиненасыщенных жирных кислот, аминокислот,
сапонинов, пищевых волокон, содержащих резистентный крахмал, и их спо­
собностью к сорбции желчных кислот и образованию вязких гелей.
3. Термообработанные измельченные семена Medicago Sativa за счет со­
держания в них жирорастворимых антиоксидантов (а-токоферола и каротиноидов) и лигнина обладают способностью к дозозависимому снижению Сииндуцированной окисляемое™ липопротеинов низкой плотности сыворотки
крови человека in vitro.
4. Применение гипокалорийной диеты 1800 ккал пациентами с гиперхолестеринемией приводит к выраженному снижению концентрации общего хо­
лестерина и холестерина липопротеинов низкой плотности сыворотки крови,
без изменения содержания холестерина липопротеинов высокой плотности че­
рез четыре недели диетотерапии, по сравнению с диетой А1.
5. Применение пациентами с гиперхолестеринемией гипокалорийной
диеты, в которой со-6 полиненасыщенные жирные кислоты заменены на длинноцепочечные полиненасыщенные жирные кислоты семейства со-3, усиливает
снижение концентрации общего холестерина сыворотки крови и уменьшает
соотношение холестерина атерогенных форм липопротеинов к неатерогенным,
без изменения содержания холестерина высокой плотности.
6. Применение пациентами с гиперхолестеринемией изокалорийной дие­
ты А1 2500 ккал, модифицированной длинноцепочечными ПНЖК семейства
(й-3 в низких и средних дозах, в течение четырех недель, не влияет на состоя­
ние липидного обмена, но снижает артериальное давление у пациентов с гипертензией.
7. Выраженное снижение концентрации холестерина липопротеинов низ­
кой плотности у пациентов с гиперхолестеринемией достигается за восемь не­
дель применения изокалорийной диеты А1 2500 ккал, модифицированной се­
менами Medicago Sativa, или за четырехнедельный курс гипокалорийной диеты
1800 ккал, модифицированных длинноцепочечными полиненасышенными
жирными кислотами семейства со-3.
8. Нарушения липидного обмена сопровождаются формированием ус­
тойчивой патологической функциональной системы, которая выводится из
равновесного состояния пшолипидемической диетотерапией. Модификация
диет биологически активными компонентами позволяет направленно корриги­
ровать липидный обмен.
9. Список работ, опубликованных по теме диссертации
1. Березовикова И.П., Никитин Ю.П., Симонова Г.И., Парух И.Г. Семена
Medicago Sativa как источник холестеринснижающих средств // Новые методы
29
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
диагностики и лечения заболеваний, медицинская техника: Тез. докл. Науч­
но - практ. конф.- Новосибирск, 1993.- С. 12.
2. Березовикова И.П., Ядрышникова Е.К., Симонова Г.И. и др.Новые
направления в профилактике и лечении нарушений липидного обмена и ожи­
рения // Актуальные вопросы профилактики неинфекционных заболеваний:
Тез. научно-практ. конф. с международным участием, 14-16 дек. 1993г., том
2.-М, 1993.-С.304.
3. Эфендиева Д.Б., Мамлеева Ф.Р., Березовикова И.П., Рывик Р., Сигновская Э. Сравнительная характеристика питания различных популяций, обсле­
дованных по программе ВОЗ "Моника" // Бюллетень Сибирского отделения
российской академии медицинских наук.-1993.-№3.-С.30-37.
4. Березовикова И.П., Парух И.Г. Сырьевая база Сибири как основа из­
менения питания населения // Актуальные вопросы современной медицины:
Тез. докл. юбилейной пятой научно-практической конференции, том 2.- Ново­
сибирск, 1995.-С.330-331.
5. Березовикова И.П., Парух И.Г., Шалаурова И.Ю., Иванова М.В., Резвухин А.И. Семена Medicago Sativa как источник фармакологически активных
вешеств //И Российский национальный конгресс "Человек и лекарство": Тез.
докл.-М, 1995-С.392.
6. Никитин Ю.П., Спиридонова Г.В., Березовикова И.П., Шалаурова
И.Ю., Резвухин А.И., Казакова Г.Г., Парух И.Г. Влияние со-3 жирных кислот в
сочетании с гипокалорийной диетой на липиды крови и артериальное давле­
ние// II Российский национальный конгресс "Человек и лекарство": Тез. докл.М.1995-С.395.
7. Березовикова И.П., Парух И.Г. Семена Medicago Sativa в качестве био­
логически активных добавок для профилактики и коррекции липидных нару­
шений //Новые биологически активные добавки (нутрицевтики) в лечении и
профилактике наиболее распространенных заболеваний: Мат. межд. симп. Тюмень, 1995.- С.130-133.
8. Березовикова И.П., Бобарева Л.Я., Парух И.Г. и др. Перспективы ис­
пользования семян Medicago Sativa в питании // Питание в профилактике забо­
леваний населения Севера: Мат. научной конф.- Красноярск, 1995.- С.6-7.
9. Спиридонова Г.В., Березовикова И.П., Парух И.Г., Резвухин А.И., Ша­
лаурова И.Ю. Диета с включением ы-З жирных кислот для немедикаментозной
коррекции артериальной гипертензии // Питание в профилактике заболеваний
населения Севера: Мат. научной конф.- Красноярск, 1995.- С.51-52.
lO.Nikitin Yu., Spiridonova С , Bcrezovikova I., Parukh I., Rezvukhin A.,
Shalaurova I. The influence of hypocaloric diet riched with N-3 and N-6 fatty acids
on some clinical-biochemical indices // Полиненасыщенные жирные кислоты N-6
и N-3 семейств: Медико-биологические, биохимические и биотехнологические
аспекты: Тез. докл. симпозиума.- Владивосток, 1995- С.76.
11 .Mamleeva F., Simonova С , Bcrezovikova I. Nutrition of Novosibirsk adult
population and approaches to improved diet (epidemiological data) // International
30
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
perspectives of the North Karelia project. 15 years of International Visitors Pro­
grams.- Yoensuu, North Karelia, Finland, 15-16 December, 1995,- P.20.
12.Березовикова И.П., Словикова И.Б., Спиридонова Г.В. Биологически
активные добавки как средства коррекции липидных нарушений //Питание и
здоровье: биологически активные добавки к пище: Тез. второго междуна­
родного симпозиума.- Москва, 22-27 апреля 1996,- С. 11 -12.
О.Никитин Ю.П., Близневская Е.В., Слепченко Н.В., Березовикова И.П.,
Спиридонова Г.В. Выявление и коррекция дислипопротеидемий на базе город­
ского липидного центра.// Ill Российский национальный конгресс "Человек и
лекарство": Тез докл. - Москва, 16-20 апреля 1996.-С. 174.
14.Словикова И.Б., Березовикова И.П. Растительные энтеросорбенты в
профилактике сердечно-сосудистых заболеваний //Сибирская кардиологиче­
ская конференция. Диагностика, лечение и профилактика сердечно-сосудистых
заболеваний. Новосибирск, 25-26 сентября 1996г.: Тезисы докладов.- Новоси­
бирск, I996.-C.197-198.
15.Никитин Ю.П, Березовикова И.П. Способ получения холестеринснижающих веществ: Патент РФ №2052960.- опубл.27.01.96 //Изобретения.- 1996.№.3.
16.Березовикова И.П., Эфендиева Д.Б., Мамлеева Ф.Р., Парух И.Г.,
Сухинина С.Ю., Бобарева Л.Я. Политика в области питания в регионах Сиби­
ри и Крайнего Севера как фактор профилактики сердечно-сосудистых заболе­
ваний //Сибирская кардиологическая конференция. Диагностика, лечение и
профилактика сердечно-сосудистых заболеваний. Новосибирск, 25-26 сентяб­
ря 1996г: Тез. докл..- Новосибирск, 1996.- С.16-18.
17.Использование традиционных продуктов питания народов Севера в
дошкольных и школьных учреждениях (Реальность. Проблемы. Рекомендации)
/Коллективная монография под. ред. В.Т.Манчука. - Красноярск (в соавт.),
1996г.-380 с.
18.Резвухин А.И., Березовикова И.П., Шалаурова И.Ю., Никитин Ю.П.
Жирнокислотный состав масла семян Medicago Sativa //Химия природных со­
единений, 1995.-№4.-С.618.
19.Спиридонова Г.В., Березовикова И.П., Резвухин А.И., Парлкж Ю.Б.
Омега-3 в комплексной терапии основных неинфекционных заболеваний
//Актуальные вопросы современной медицины: Тез. докл. седьмой научнопракт. конф. врачей, 21 - 22 мая 1997г., т.2.-Новосибирск, 1997,-С. 12-13.
20.Словикова И.Б., Березовикова И.П. Результаты клинической апроба­
ции препаратов пищевых волокон из Medicago Sativa // Актуальные вопросы
современной медицины: Тез. докл. седьмой научно-практ. конф. врачей, 21 - 22
мая 1997г:,т.2.- Новосибирск, 1997.- С.9-10.
21.Спиридонова Г.В., Березовикова И.П., Резвухин А.И., Парлкж Ю.Б.
Омега-3 в комплексной терапии основных неинфекционных заболеваний //IV
российский национальный конгресс "Человек и лекарство": Тез. докл.- М., 8-12
апр.-1997г.-С.543.
31
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
22.Березовикова И.П., Словикова И.Б., Иванова М.В. Роль питания во
вторичной профилактике ИБС // Вторичная профилактика ИБС: достижения и
перспективы. 19-20 нояб. 1997г. Тюмень: Тез. межд. конф. - Тюмень, 1997.- С 30-32.
23.Спиридонова Г.В., Березовикова И.П., Резвухин А.И. Омега-3 ПНЖК
в терапии ИБС // Вторичная профилактика ИБС: достижения и перспективы.
19-20 нояб. 1997г. Тюмень: Тез. межд. конф. - Тюмень, 1997.- С.55-56.
24.Березовикова И.П., Словикова И.Б., Иванова М.В. Растительные энтеросорбенты холестерина // Природные минералы на службе человека (мине­
ральная среда и жизнь): Тез. международной научно-практ. конф. 23-24 окт.
1997г. - Новосибирск, 1997.- С.23-25.
25.Березовикова И.П., Спиридонова Г.В., Словикова И.Б., Филатова Н.В.,
Иванова М.В. Биологически активные добавки к пище в коррекции факторов
риска хронических заболеваний // III международный симпозиум "Питание и
здоровье. Биологически активные добавки к пище в лечении и профилактике
наиболее распространенных заболеваний". 25-26 ноября 1997г: Тез докл. - Тю­
мень, 1997.-С-77-78.
26.Березовикова И.П. Место биологически активных добавок к пище в
современном питании // Сборник материалов Международной выставки "Здо­
ровье шахтера-97. Медицина катастроф". 25-28 нояб. 1997г.- Кемерово, 1997.С - 45-47.
27.Спиридонова Г.В., Березовикова И.П., Никитин Ю.П. Омега-3 ПНЖК
в коррекции "мягких" форм артериальной гипертензии //Артериальные гипер­
тензии: патогенез, патогенетическая терапия, поражение органов. Междуна­
родный симпозиум 15-17 дек 1997г: Тез. докл.- М, 1997.- С.73.
28.Mamleeva F., Efendieva D., Berezovikova I.,Bragina О. Et al. Nutrition of
Novosibirsk adult population: 10-year trends and approaches to improved diet (epi­
demiological data)// Asian-Pacific congress on vascular disease prevention, 11-15
March 1996.- Singapore, Abstr. No.347.
29.Березовикова И.П., Словикова И.Б., Никитин Ю.П., Мамлеева Ф.Р.
Использование природного растительного сырья Сибири для создания биоло­
гически активных добавок к пище // V Росс.нац.конгресс "Человек и лекарст­
во": Тез.докл.- Москва, 1998. - С.348.
ЗО.Никитин Ю.П., Спиридонова Г.В., Березовикова И.П., Резвухин А.И.,
Шалаурова И.Ю., Парух И.Г. Оценка возможности использования гипокалорийной диеты обогащенной со-3 полиненасыщенными жирными кислотами для
немедикаментозной коррекции мягкой артериальной гипертензии // Новые
биомедицинские технологии с использованием биологически активных доба­
вок: Сборник материалов Российской, науч. конф.- Владивосток, 1998.- С. 106112.
31.Спиридонова Г.В., Березовикова И.П., Никитин Ю.П. Изменения липидного спектра сыворотки крови под влиянием гипокалорийной диеты с со-3
ПНЖК // V Росс.нац.конгресс "Человек и лекарство": Тез. докл.- Москва, 1998.С.409.
32
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
32.Спиридонова Г.В., Березовикова И.П., Никитин Ю.П., Иванова М.В.,
Резвухин Л.И. Влияние гипокалорийной диеты с добавкой ш-3 полиненасы­
щенных жирных кислот на липидный профиль сыворотки крови у пациентов с
мягкой артериальной гмпертензией // Новые биомедицинские технологии с ис­
пользованием биологически активных добавок: Сборник материалов Россий­
ской научной конф.-Владивосток, 1998.-C.J 12-115.
33.Березовикова И.П., Мамлеева Ф.Р. Современное питание: роль биоло­
гически активных добавок к пище //Фармацевтическое дело.- 1998,- №12.С.103-104.
34.Денисова Д.В., Березовикова И.П., Никитин Ю.П. Основные факторы
риска развития атеросклероза и фактическое питание у детей Крайнего Севера
// Профилактика заболеваний и укрепление здоровья.- 1999. - №3.- С.19-20, 2931.
35.Березовикова И.П,.Спиридонова Г.В, Словикова И.Б. и др. Возможно­
сти использования новых направлений диетокоррекции в реабилитации паци­
ентов с различной хронической неинфекционной патологией // Мат. конф. Белокуриха, 1999.-С.57-59.
36.Березовикова И.П., Словикова И.Б., Спиридонова Г.В. Повышение
эффективности липидкорригирующей диетотерапии с помощью биологически
активных добавок к пише // БАД: XXI век: Тез. докл. IV Международного
симпозиума - Спб, 2000. - С.26-27.
37.Григорьева И.Н., Мамлеева Ф.Р., Брагина О.М., Березовикова И.П.,
Малютина С.К. Потребление пищевых волокон у женщин с желчнокаменной
болезнью // Сибирский журнал гастроэнтерологии и гепатологии.- 2000.- №1011-С.140-141.
38.Григорьева И.Н., Мамлеева Ф.Р., Брагина О.М., Березовикова И.П.
Общий жир в питании женщин с желчнокаменной болезнью // Сибирский жур­
нал гастроэнтерологии и гепатологии.- 2000.- №10-11 - С.141-142.
39.Никитин Ю.П,. Березовикова И.П,.Спиридонова Г.В. Способ немеди­
каментозной коррекции факторов риска ишемической болезни сердца: Патент
РФ№ 2164409.- опубл. 27.03.01 // Изобретения.- 2001.- №9.
40.Березовикова И.П., Словикова И.Б. Биологически активные добавки
из семян Medicago Sativa и их гиполипидемические свойства // Биологически
активные добавки к пище и проблемы здоровья семьи: тез. V Международного
симпозиума. - Красноярск, 2001. - С.29-30.
41.Флейшман Г.В., Березовикова И.П. Длинноцепочечные полиненасы­
щенные жирные кислоты семейства со-3: их эффекты на концентрацию холе­
стерина в крови и артериальное давление // Биологически активные добавки к
пище и проблемы здоровья семьи: Тез. V Международного симпозиума. Красноярск, 2001.- С.269.
42.Berezovik.ova 1., Mamleeva F. Traditional foods in the diet of Chukotka
natives//Circumpolarhealth. -2001. - V.60.-P.138-142.
43.Флейшман Г.В., Березовикова И.П., Резвухин А.И. Гипокалорийная
диета и ш-3 ПНЖК: оценка эффективности сочетанного действия на артери33
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
альное давление и липиды крови у пациентов с "мягкой" артериальной гипертензией // Актуальные проблемы заболеваний терапевтического профиля в Си­
бири: Труды юбилейной научной сессии НИИ терапии СО РАМН. - Новоси­
бирск, 2001.-С.242-247.
44.Березовикова И.П., Словикова И.Б., Иванова MB., Щербакова Л.В.
Бобовые растения в коррекции липидных нарушений: семена Medicago Sativa //
Актуальные проблемы заболеваний терапевтического профиля в Сибири: Тру­
ды юбилейной научной сессии НИИ терапии СО РАМН. - Новосибирск, 2001.С.248-255.
45.Влощинский П.Е., Березовикова И.П., Рыбакова Т.М.Питание совре­
менного человека и способы его коррекции// Новые химические системы и
процессы в медицине : Сборник материалов Международной конференции.Новосибирск, 2002.- С.51-56.
46.Березовикова И.П. Новая биологически активная добавка - источник
пищевых волокон /7 БАД к пище и проблемы оптимизации питания: Тез. VI
Международного симпозиума.- Сочи, 2002. - С. 155.
47.3юбина Л.Ю, Нестеров В.И., Новоселова Т.И., Березовикова И.П. и
др. Организация лечебного питания в санаторно-курортных учреждениях / Ме­
тодическое пособие. Утв. Управлением социальной защиты Администрации
Новосибирской области.- Новосибирск.- 2002. - 84с.
Принятые сокращения:
АОБГТГПБ ДАДДГКИМТМНЖКНЖКНЭХСОХСПНЖКСАДТГХС ЛВПХС ЛНПХХКЭПК-
антиоксидант
бутирил-гидрокситолуол
гепато-биллиарная система
диастолическое артериальное давление
докозагексаеновая кислота
индекс массы тела
мононенасыщенные жирные кислоты
насыщенные жирные кислоты
неэстерифицированный холестерин
общий холестерин
полиненасыщенные жирные кислоты
систолическое артериальное давление
триглицериды
холестерин липопротеидов высокой плотности
холестерин липопротеидов низкой плотности
холато-холестериновый коэффициент
эйкозапентаеновая кислота
И.П.Березовикова
Соискатель:
34
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Лицензия ИД № 01102 от 01.03. 2000
Подписано в печать 13.11.2003. Формат 60x84/16. Бумага офсетная.
Тираж 100 экз. Печ.л. 2,5. Уч.-изд.л. 2,32. Заказ № 1297.
Типография Сибирского университета потребительской кооперации.
630087, Новосибирск, пр.К.Маркса,26.
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
5
Размер файла
926 Кб
Теги
884
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа