close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

590

код для вставкиСкачать
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
На правах рукописи
АРУШАНОВА Елена Сергеевна
ВИРУСНЫЕ БОЛЕЗНИ НАРЦИССА
(NARCISSUS L.)
И МЕРЫ БОРЬБЫ С НИМИ
Специальность 06.01.11—защита растений
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
МОСКВА 1999
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
СП''
Диссертация выполнена на кафедре защиты растений
Р< свинского Университета дружбы народов
Наушые руководители
доктор
сельскохозяйственных
i'j\ л, профессор Ю. И. Помазков, кандидат биологических
HJVK, старший научный сотрудник Л1. А. Келдыш
Официальные оппоненты доктор биологических navK
В. В. Мазин; кандидат биологических наук О. О. Белошапкииа.
Ведущее предприятие — Всероссийский институт защиты
растепли, г Санкт Петербург, Пушкин
Защита диссертации состоится «-Л»
umct
1999 г
з < II* > час на заседании диссертационного совета Д 120 35 09
в Московской сельскохозяйственной академии им К А ТимиАдрес 127550, Москва, \л Тимирязевская, 49 Ученый
ЧСХА
С диссертацией можно ознакомиться в ЦНБ МСХА
Автореферат разослан « {<L-s> илоЛ .
.
1999 г
Ученый секретарь
диссертационного совета—
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
. . ОК1ЦАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАКОТЫ
Актуальность исследований. В настоящее время OIMCIUWTC* тенденции
возрастания внимания к качеству цветоводческой продукции, а также мерам
но обеспечению ее фигосанш арной безопасное! и. особенно при женорге
растительного материала. И мире доход от продажи декоративных растений
составляет около 50 миллиардов долларов, ич них 12 приходится на Западную
Европу и 6 - па США и Японию. В 1'кроне лидерами являются Нидерланды
(50 % мировой продукции цветоводства), а также Данин. Кельтия, Германия,
Италия, Израиль (l.avvson, 1946). Луковичные культуры приобретают все
большую популярность благодаря не юлько их замечакмьным декоративным
свойствам и незаменимостью при создании ланлшафюв в ранневесенний
период, но и тем, что они относятся к категории важнейших ныгоночных
культур, позволяющих получать высококачественную продукцию ишмм'ч;
время (Вылов, Зайцева. 1990).
Среди декоративных луковичных растений нарциссы занимают одно и»
ведущих мест, уступая лишь тюльпанам по разнообразию окраски цветка.
Увлечение
згой
культурой
началось
в
• XIX
веке, когда в Англии, были получены многочисленные гибриды между
трубчатыми п крупнокорончагымн нарциссами. Современные сорта сложные
гибриды, многие из них полиплоиды. Коллекция ГНС РАН им. II. I). Цицина
насчитывает 265 крушюкороичатых сортов; Кб - трубчатых; 47 -.
мелкокорончатых; 34 - разрешокорончагых; 2ft - махровых и 26 - из всех
прочих групп. "•',-•
•
Промышленная основа цветоводства имеет свою специфику, которая
подразумевает. широкую интродукцию посадочного материала, его
вегетативное размножение и монокультуру, что способствует интенсивному
развитию болезней и расширению их ареала (Бойко, 1990).
. Сдерживающим фактором промышленного цветоводства являются
инфекционные болезни, среди которых вирусные занимаю! наибольший
удельный вес (Макутенайте. 1992). Они вызывают потерю декоративных
качеств, ухудшение физиологического состояния растений и, в конечном
счете, причиняют значительный экономический" ущерб. Интенсификация
процессов производства усиливает вредоносность вирусных болезней и
особенно смешанных вирусных инфекций. Особенностью вирусных болезней
растений является гетерогенность вирусных Популяций, представленных
различными вирусами и их штаммами с разнообразными биологическими
свойствами. Отрицательное влияние вирусов на репродуктивную способность
растений приводит к фенотяпическому изменению признаков сорта.
, ЦЕНТРАЛЬНАЯ
НАУЧНАЯ ЕГ-SJtttOTEKA
Моск.
им. К.
ИНВ. №
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
снижению vpo/ная
(скор iiiiKiuin ниыочноп про I\KHIIM на 40-70
нырож luniio i«iui[iiiiiM4iiiiii\ к nupvt. i\i соршн (V1inpo<|) пиша \l)42)
"a
II
1'с<срнаЦ|1Я lllip\v.llll 1ШС1ОЧН11Ч К\ 1Ы\р » K\Ll jpitllkOHMX II U) ЮНЫХ II
ICCHIIX
ipciieciiMx paciciuiux ciioeoiicniVei
HI iskiiHaiuiio и Шфк\ 1Я1ИШ
вшГл in к. н и
lie lOLiaioiuocu
cue iciiiiii о eoeianc и paeitpocr ранении
mipvcon e южноеII. n\ inailiifciiiKii oieMeliuie' мер оорьоы с ними e ie ia.ui
ак1\.Ы1.пмм шчченпе мои I p\шп i naioieiioii
Цен.
и i цачи nee ie ижапин
\II,LIIH
iiiiepai\pin i\
iaiuii>i\ и
lipe IBapiile ii.iu.ie nee ie% юн шия проно шмие n I 1>С РЛ11 eiui leie n.eiBVior о
широком распространении Blip\eoii
p и m'llli.ix |акеоиомичеекн\ rpvilll в
K O I ieKi[iioiiiiij\ II.IC.I* leiiiDix leKopanmiiiIN ЦНСШЧНМЧ К\ n.np
И екнш е ним i i 1кже lie [oeiaiouiioii щччеппоеп.ю I.IFMKIKI вопроса
кошнкаег iieoiixo IIIMOCII (ю ice ici LIMIOIO щччепня ннр\сон ltd pat нгшыч
npc iLi.mnie wx
N truwis
I
Ценно
наших
псе ie KiRaiuiii
являюсь
oiKieiioii шпе мер oopi t>i.i с внр\енымп taoo и-нлипямп на ынной к\ ibivpc H
спя in с >шм емки 1пс1> е ie' (мощие* ia.ui'iii
1 !1<\чпп. ciciieiii. раепросiранения и харакир енмпюмов
iat">o leiiaiiiiii в ко i icMinoiniMx насаж юнпях Narcis>us I
Hiipvciihix
2 Olipe ic llllk ми юной соеiаи нирчеов и Псрспосчпко» и BMte'iiiH.
lOMiiiiiipvioiuiic i шп • инфекции на нарциссах а киокс на рапнчных
npc lciaBiiic |ях поря ika
I iliales про ician ICHIIUX u ко i ICKIIUHX
фон loiHiii оранжереи I laniioio (хианнческою caia
^ Paipaooraib ш м и н ы спсюмы o i юров юння Narcissus I
для
v iv чтения
качееша
юкорашвпой
цве-ючпои
нрол>кшш
и
сохранения ви юною и сортовою рапкюбрашя колпекиий
Научная
почини
paooibi
Па
нлрциесах
днап юстированы
нсемононенпме моп к\ |ычре внр\сы Bean >ello\\ mosaic virus ( B Y M V )
Potato virus Y ( P V Y ) Carnation latent virus ( C m l V ) Carnation mottle virus
( C r n M V ) Iobacco necrosis vims (TobNV) Arabis mosaic virus ( A M V ) Tomato
ringspol virus (lomRSV) ЛИ alia mosaic virus (Л1 MV) Raspberrv nngsput virus
(RRSV) Tulip breaking virus (TBV) I obacco rattle virus, (FobrfV) Всего
выявлено 16 вош\'днre icft прннатежатих к 10 таксономическим группам
(Potv- Potex- Л1 MV-group Tobamo- Nepo- Cucumo- Carmo-, Carla-. CannoFobra- Tobacco nee-osis group)
И»>ченне характера распространения вирусов на различных сортах
Narcissus L и представите 1я\ фонической и субтропической флоры порядка
Liliales
выявило
наличие смешанных
инфекций
доминирующими
компонентами которых являются Tobacco mosaic virus (TMV) и Cucumis
mosaic virus (CMV) Число компонентов комплексной инфекции достигает 6
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
(сорт Pastelina). Пока WHO, что частога встречаемое™ AMV; RRSV; TobNV;
lomRSV: BYMV; TobRV составляет 18: 7; I I : 5 - 6; 12 и 5.3 %
соответственно для каждого вируса
В результате проведенных исследовании, показана возможность
передачи на нарциссы CMV двумя нсспсцифичсскнми нидамп глей:
.Macrosiphum rosae (I..) и My/us cerasi (I'.): BYMV - Aphis labae Scop., a I'VY A. labae Scop, и My/us omatus l.aing.
Проведена оценка устойчивости-.растений Narcissus I.. (12 сортов) к 5
видам глей, регулярно выявляемых и посадках нарцисса. Лпалт
устойчивое! и различных сортов не выявил образной, обладающих
абсолютной устойчивостью.
Определены размеры жепданта. обеспечивающие )ффсктнв»юс1ь
оздоровления от комплекса вирусов при максимальном выходе растении:
составы питательных сред для получения алкснтинных побегов и индукции
ризогенеза.
'•
Впервые в растениях Narcissus 1.. и некоторых представителях порядка
l.ilialcs диагностирован вирус, серологически родственный Х-вирусу шалота
(ХВ111: ShXV) п прннадлежттш. как мы предполагаем, к ipyinie XB1IIподобных вирусов (Вишничснко, Лрушанова. Келдыш и др., I9W).
Практическая значимость работы, В результате комплексных
вирусологических исследований на культуре Narcissus I,. получены данные по
видовому составу вирусов, характеру их сочетаний в составе комплексной
инфекции, особенностям распространения. Они являются обоснованием для
ра<работки и усовершенствования комплекса профилактических мероприятий
в создании системы противовирусной защиты коллекционных насаждений
Narcissus L.
*
На основании экспериментальных. данных с учетом имеющихся
сведений разработана методика оздоровления нарциссов от комплекса
• вирусов, Определен оптимальный размер , жеплапга для получения
освобожденных от вирусов растений.
Идентифицирован новый ХВШ-подобный вирус на p. Narcissus L. и
некоторых представителях порядка l.ilialcs. .
• Апробация работы. Материалы доложены на XYII Международном
симпозиуме (23 - 27 June, 1997. Beihesda. USA): на HI Международной
.конференции «Цветоводство -сегодня и завтра» (Москва, 1998).
Публикации. Основные результаты исследований опубликованы в 8
печатных работах.
•
Объем и содержание работы. Диссертация изложена на 147 страницах
машинописного текста и состоит из введения, 15 глав, выводов и заключения.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
1 со кр/Мп 2U I.IO inn , и i иоыриропаиа 9 <|)o101 рафиями и рисунками
Список iinipaivpi.i нк IH)4JCI 2lW панмишнанпн in коюрмх 220 па
иноыр nun i\ чшкач
(О
(Н'ЖЧШИ
1Ч1.О1Ы
I «>Ь U )l> ,1И 11 1>Л I У1'Ы ПО I f Ml
I) uowpc нмсраирм прнкс KIII.I мчГыиклции not ie uw\ юг. лающие
чарам (.рнсшкл ocnouiu.iM инрчсным taoo юнанпям поражающий рол
Narussib I особспноыям urn» IOI им к\ 1Ы\ры lloipoono рассмотрены и
обсуж к и и распространение и »pi. юное нос 1Ь ннр\спы\ |або ювапин,
поражающих ш р ц и и ы
ИМИ p.icnpocip ШСПНЯ нирмон
мсн>1Ы и\
иссле тиамин и оиюшшс прием и HIIICI рмронашкш ирогнвокир\спон
1.НЦН1Ы
мериекм
ОсоГнк.
11IMIM.1IIIH. \ 1С ICIIO I1LIIO IM0H.1IIIIH) кЛ 1ЬГ>рЫ
allllkdLlbllblX
как uii<oio m нажнепших мего юв освобождения растении от
ЙИр\СМОН ИнфскЦПН
2 УСЛОВИЯ МЛН РИАЛЫ И Ml [ОДЫИСС'И ДОВЛНИИ
')кик.риме1па.1М1ан работа пронолп мсь на кафелре taiuinы растений
Российскою Унинсрсшоа ф^жбы народов и в оглею laiuiriы растений
Г явного 6oiaiin>K(.koio ca.ia им II 13 Циаина в течение 1995-1999 i г
Основными оГ)1л;мамп пес кмований яв1Я1Ись прелаавитепи порядка
Lihalcs семспс|ва Amarxllidaceae рол Narcissus L , также проводили
скринпиш на «араженность вирусами среди различных представителей
тропической и с\ бтроинческон флоры
Л I» выявления и идентификации вирусов испотьзовали общепринятые
схемы со сгащаргным набором шиикаторных расгеиий ( Fulton.1960, 1967,
Murant I')70a 11ома(кон. 1978 Починков Келдыш 1979, Келдыш, Помазков,
1980 Index оГ , 1983)
Оценка устойчивости форм, сортов и видов к возбудителям,
переносчикам и векторный перенос проводили по стандартным методикам
(Помазков, Келды.и, 1979, Втасов и др , 1990)
Испытание чкепериментальных растений посредством
переносчиков
проводили в боксах при оптимальной температуре 1 8 - 2 3 °С (Bnggs, 1959,
Келдыш, 1967) Применяли naipyiKy от 1 до 100 особей Обособленные
популяции глей-переносчиков в отношении которых проводится оценка на
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
устойчивость, поддерживали на основном кормовом растении под
изолятором. Наблюдения за характером поведения переносчика проводили
в течение 24 часов. Учитывали число особен, оставшихся после подсадки.
Если череч сутки на исследуемых <1юрмах не остается пи одной особи, то их
относят к иммунным. Растения, на которых остается исходное количество
.тлей или более, считаются восприимчивыми и. могут рассматриваться в
качестве кормовых растений. Растения, на которых сохранилось меньше
исходного числа особсй,относят к заселяемым (Келдыш. Помачков, 1980).
Все /женеримешгальные работы по инфицированию и тестированию
растений проводились и контролируемых
условиях,
исключающих
возможность вторичного и перекрестного заражения.
Биологическое тестирование выполнялось по типоным для изучаемых
групп вирусов методикам. В набор травянистых растсний-индикаюров ;щя
механической передачи входили виды: Nicotiaita tabacum; N.ruslica; N.
glutinosa: Petunia hybrida; Datura stramonium: Cucumis sativus; Chenopodium
amaranticolor; Ch.quinoa: Phaseolus vulgaris.
;
. ; ' .
Для приготовления инокулюма использовали 0,02 М фосфатный буфер
рН 7,5-8,0 с добавлением различных стабилизирующих соединений: кофеина,
ДИЭКА, 2 М1-, никотннсудьфата, активированного угля, аскорбиновой
кислоты и iip.(Cadman, 1956; Fulton, I960; 1967; Picrpoint, Harrison, 1963;
Lister, 1964; Метьют.' 1973; Гиббс. Харрисон, 1978). В качестве абразива
использовали целит или карборунд: непосредственно после инокуляции
листья промывали водой, что способствовало увеличению
числа
образующихся местных поражении, а затем растения помешали в затененные
условия на несколько часов для повышения восприимчивости^ Holmes, 1929;
Bawrden, Roberts, 1948). В качестве инфекционного матсрихта использовали
листья Narcissus l.., травянистых индикаторов с признаками заболеваний.
Очистку ; и концентрирование препаратов выполняли с помощью
•дифференциального
центрифугирования
но
схемам,
которые
рассматриваются
»
соответствующих
разделах
данной
работы.
' Инфскционность препаратов контролировали методом биологического
, тестирования на травянистых индикаторах, применяемых'для диагностики и
идентификации определенных вирусов
.
* - • Видовой состав тлей в биоценозе декоративных луковичных растений
'.определяли методом желтых чашек Мерике (Moericke. 1951).
При диагностике и идентификации вирусов, поражающих Narcissus L.,
использовались: визуальная . оценка зараженности, серологический тест
(двойная иммунодиффузия в агаровом геле по Ouchterlony (1953)),
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
иммупофсрмшгнми JIMJIHI f I ISA (Clark Adams 1977 Ьобкова. Чирков,
1ЧХ1 Гпутова. I48S AT.HK.KOB I4SS I angveld !«W6 Beck, Husted 19%) с
IICIIOJK.«поищем геы-сисгсч прошводства Ml У ПИИКХ, НПО «Ьиочар»
Л 1я постановки сероло! ическич реакции испо1ыова.ш 1акже сыворотки и
антшены, но юченные ш \чреждепми Ьодгарнн I о ишнлпн I ермапин США
Кроме гою, примени шсь отечес шейные сыворогкн и лишены m Института
бшюр|-аничсскои химии им Шемякина, 1СХА НИИКХ
Регистрацию регультагов нммупоферментного анализа проводили на
адсорбциометре фирмы «f)>nattch» модечь HR-700 «Microplate Rcadcn>
Ссролш ическому
aiiaiiiuy
метошм
иммуноблоттиша
подвергали
распгге 1ьные жстракты после низкоскоростпого центрифугирования (10 000
\ g 30 мин ) и очищенные прспарагы Экстракты по 1>чали in свежих ичи
замороженных щетьев исследуемых сортов Листья гомо1сшг1нровали на
холоде в ступке в присутствии эксграгирчютего 0 2 М ка.нш-фосфагно1 о
буфера. рИ 8 5
Иммупоблоттинг
проводили
в
соответствии
с
протоколом,
исполыуемым в качестве стандартною (Пшнннчсико и др
1996,
Vishnichcnko et al, 1994) В работе исполыовались ангисыворотки против
рекомбипактно! о
капсилною
бе 1ка
ЧВШ
(As
37)
и
рротив
высокоочншенною препарата интактных вирусных.частиц ХВШ (As I 4)
'Электронно-микроскопические исслечования проводили в ччектронном
микроскопе ЕМ-301 (Philips) Кшпрочь осуществлялся как в очищенных
препаратах, так и прямым методом (Brandcs |Ч57, Проиенко 1966)
Методы
нммуносорбции
и
декорирования
пеполмовалн
в
модификациях Вишниченко В К , Стельмащук В Я , Завркева С К (1996)
Пассаж ХВШ-подобного вируса ш Narcissus L (сорт Super Star)
проводили на 2-х недельные сеянцы шалота A ascalomcum (cr Creation)
методом механической инокуляции при температуре 25°С и отнооггечьной
влажности 70% Тест-растения содержались в контролируемых условиях в
течений 3-4 недель Присутствие в них капсилного белка ХВШ-подобного
регистрировали на основании результатов нммуноблотинга с использованием
As I 4
Оздоровление растений от вирусных болезней проводили методом
культуры
апикальных
меристем
Поверхностная
стерилизация
осуществлялась 0,1 % раствором сулемы или 0 I % раствором диацида, время
зкепозиции 7 минут (Высоцкий, Шершень, 1993) Апексы выделяли при
помощи препаровальной и п ы и малого глазного скальпеля Техника
приготовления питатепьных сред, стерилизация бокса, инструментов,
табораторной посуды, растительного материала, методика вычленения и
-6-
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
посадки апексов, а также выращивание растений-регснсрантов общепринятые
(Бугснко, 1964; Калинин. 1980; Трофимец, Остапенко, Бойко, 1985).
Основная питательная среда содержала макро- и микроэлементы по
Мураснге-Скугу (Murashige, Scoog, 1962), сачарочу 30 г/л; агар-агар 7 г/л: рН
среды
5,6-5,8.
Размер
экспланта
контролировали
с
помощью
окулярмпкрометра.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Симптоматический анализ чаболсваний, вычываемых вирусами
на рачличных сортах NARCISSUS L.
,
.
Таблица I.
Симптоматический анализ чаболсваний на некоторых
сортах Narcissus L.
Тип симптомов
Свстло-челеная крапчатость
Ь'слесая крапчатость
•...,. >.'
Сорт
She; Gipantic Star; I.ady Luck
Yellow Star; Selebrito;
Artist's Model; Sioux •
Желто-челсная полосчатость
. • • KissprolT; Bridal Rose; Shane's
Cas'le; Ullimus; Romi Barrow; .
Lord Nelson; Vivex
Желто-белая полосчатость
Fxplorer; Victory; Credo;
Spectacular
Scarlett О' Нага; Lime Chiffon;
.
Желто-челеная штриховатость
Biscaine; Gigantic Star
Am bergate. Explorer,
Светло-челеная илриховатость
White Plum
Краевой хлороз
• Lord Nelson, Walt Disney,
Carlton
Undertone, Soldier Brave, Credo,
Деформация (морщинистость),
Selebrito, Honic Tires
краевой хлороз
Гофрнрованность листовой пластинки Ambergate, Scarlett О' Нага
Daydream, Spectacular,
.
Пестролепестность цветков ;
Lemon Show, Artist's Model
Credo, Patriarch,
Измельчение растений, отсутствие
Feeling ducky. Kindled
цветения
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Исосшнания iipomi ШМЫС нами в IW^-1998 г г, свидетельствуют о
широком
pticiipocip.iiK.Mnn
и
накоплении
вирчеов
pa зычных
ыксоиомическич ipyini мл про leonine IH\ сем Amaryllidaccac в жосистемах
Г ЬС Раысния с нрншаками нирченон инфекции выяв 1с'ны во всех
коллемшоннмч насажденпяч
Н реч\ ibiaie обе ic um.iniiii КОЛЛСКЦИОННЫЧ насаждений Narcissus L В
течение |ЧЧ*-1ЧУ8 i i \ciaiiouiciio что внешние пришакн вирусных
заболеваний варьирмог По пш\ симптомов их можно рдиыигь на
неско ibko ipymi (laui I)
Основной спектр симиюмов - MOIJIIMI иолосатос1ь шгрнчонаюсть,
песгро iciicciiiocib
цветков
деформация лиыьсн
краевой viopo-»,
измельчение pacieunn
oicMcmiie цвепенпя —отмечен _
нами на
коллекшюнныч поса.1кач нарциссов
Установлено, "то нреоо иыаюишмн на ку|ылрс являются прильнем
жечю-ic leiioH по юсагости и ^формация (моршиннсюсть)
11а некоторых copiax 01 мечено сочетание симптомов, например,
деформация шегьев и ипрнчоваюыь
(Scarlett О liar* Ambergate),
деформация и iiiMc н.чение растении (Credo), красной хлороз и желго-«лен<1яполосатость (1 ord Nelson)
Количественный учет больных растений в динамике свидетельствует о
том. что уве шчнваегся и пропет поражения сортов (габл 2), причем данная
тенденция отмечена не только на культуре Narcissus L . но и на других
луковичных культурах
Таблица 2
Распространение вирусных болезней в культуре Narcissus L
по годам изучения
Период
изучения
(года)
Культура
1986
1995-96
1997-98
Нарциссы
Нарциссы
Нарциссы
Количество сортов (шт )/ % от общего числа
сортов
Обсле% пораженных растений в сорте
довано
10-50
>50 %
100 %
до 1 0 %
сортов
%
457/100
386/84,4
36/7,9
6/1,3
25/5,5
239/100
45/18.8
30/12.6
79/33.1 85/35.6
239/100
20/8,4
16/6.7
42У17.6 161/67,4
-2-
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Из данных таблицы следует, что вирусологическая ситуация в
коллекционных насаждениях за период с 1986 г. Иретерпсла значительные
изменения. Сорта, в которых было поражено 1 0 0 % растений, в 1986 г.
составляли лишь незначительную долю от всей коллекции ( 5,5 % ) . К 1998
году больше половины обследованных сортов нарциссов оказались
пораженными на 100%.
В связи с данными по расширению спектра хозяев вирусов,
поражающих Narcissus L., за период 1996 - 1997 гг. были проведены
исследования, в частности, визуальная диагностика, на представителях
порядка Liliaies (открытый и закрытый ipyirr).
•
.
.'
Визуальный анализ и обследования растений из различных семейств
порядка l.iliales показали наличие растений
с симптомами вирусных
заболеваний.
Таким образом, отмечена тенденция распространения н увеличения
степени поражения, а также стабильное присутствие вирусной инфекции, в
целом типичное для большинства сортов.
Мониторинг распространения вирусов в коллекциях нарциссов.
Методом двойной диффузии в. геле было испытано 9 сывороток к
различным вирусам и проанализировано более 100 сортов Narcissus L. с
выраженными вирусоподобными симптомами.
Согласно полученным данным, в коллекционных насаждениях
открытого грунта из основных возбудителей, зарегистрированных на
нарциссах, нами выявлены: Tobacco mosaic virus (TMV) - на 5 сортах;
Cucumis mosaic virus (CMV) - на 9 сортах. Из несвойственных возбудителей
выявлены: Carnation mottle virus (CrnMV) - на 13 сортах; Soybean mosaic virus
(SMV) - на 19 сортах; Chrysanthemum virus В (ChrVB) - на 18 сортах.
• По данным ДДА уровень распространения на изучаемых сортах таких
вирусов, как CrnMV, SMV, ChrBV, TMV и CMV составляет соответственно
54,2; 79,1; 75,0; 20,8 и 57,5 %.
Согласно данным . серологического анализа, проведенного : методом
двойной диффузии, в коллекционных насаждениях преобладают: SMV;
CrnMV и ChrVB.
Растения различных сортов Narcissus были также проанализированы с
помощью ИФА (ELISA), как одного из наиболее чувствительных и точных
методов. В результате анализа, проведенного в культуре Narcissus L. были
выявлены: Narcissus mosaic virus (NMV) - на 5 сортах; TBV - на 3 сортах;
TMV - на 14 сортах; ALMV - на 6 сортах; AMV - на 1 сорте; C M V - H a l 6
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
юртах, Cml V - на 15 сортах CmMV - на 3 сортах TobRV - на 2 сортах
Potato virus S (PVS) - на 1 сорте, PVY - на 7 сортах, lobNV - на 4 сортах
TotnRSV - на 2 сортах Hean yellow mosaic virus (BYMV) - на 4 сортах RRSV
- на 2 сортах
IJKIIM образом но данным ИФА, на ьол юкцнонных насаждениях
Narcissus I к числу доминирующих можно отнести TMV, CMV и Cml V
Таблица 3
Распространение вир) сов па Narcissus I и раыичных представите 1ях
порядка 1 lhales
[ pyuiui вирусов
Ro {будиre in
S видов
Pol\-
PVY, FBV, BYMV
13 сортов
3
Л1 MV-
AIMV
1
4
1
5
1 obacco Nccrosis-
lobNV
Potex-
NMV
6
ГоЬапю-
TMV
4
9
Nepo-
11
Cucumo-
RRSV, TomRSV,
AMV
CMV IAV
16
4
Carla-
CrnLV, PVS
Carmo-
CmMV
Tobra-
TobRV
Количество видов/сор гов
Lilialcs*
Marcissus L **
6
i
14
15
3
1
2
* - H I пртсстнроваиных 16 видов
** - in прпгесгированиых »4 сортов
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
На представителях тропической и субтропической флоры по нашим
данным были зарегистрированы: TBV - на 3 видах (Polianthes tuberosa;
Tupistm sp.; Amaryllis beladonna); NMV - на Semele androgina; CrnLV - на 4
видах (Crinum asiaticum; Chlorophytum sp., I; Polianthes tuberosa; Amaryllis
beladonna); ALMV - на 3 видах; CMV - на 10 видах; TMV - на 6 видах;
Tomato aspermy virus (TAV) на Asparagus setaceus; AMV - на видах; TobNV на Tupistra sp.; TobRV - на Zcphyranthes Candida; TomRSV на Chlorophytum
sp.2; BYMV - на 2 видах.
Таким образом, по данным H<t>Ai на растениях сем. Liliales также
преобладают TMV и CMV.
•
На культуре Narcissus L. и представителях порядка Liliales обнаружены
основные: NMV, TMV, CMV и несвойственные вирусы: CmLV, CmMV,
RRSV, TomRSV, PVY, PVS, TBV, BYMV, AMV, принадлежащие к
различным таксономическим группам (Табл. 3).
Изучение характера распространения вирусов на различных сортах
Narcissus L., а также в пределах видов порядка Liliales, в коллекциях выявило
преобладание смешанных инфекций (табл. 4).
Таблица 4.
Распространение смешанной инфекции на Narcissus L. и
видах порядка Liliales по результатам ИФА
Количество сортов и видов со смешанной
Число
'
инфекцией/%
сортов и видов
моноинболее 3-х
фекция 2 возбудителя 3 возбудителя возбудите-лей
Narcissus L;
6/17,6
8/23,5
11/32,4
9/26,5
34 сорта
3/18,8
1/6,3
порядок Liliales
5/31,3
5/31,3
16 видов
Показано, что, как правило, в составе комплексной инфекции
присутствуют от 2 (сорта Undertone, Credo) до 6 (PasteUna) компонентов у
Narcissus L. и от 2 (Veltheimia viridifolia, Asparagus setaceus) до 4 (Polianthes
tuberosa) у видов из порядка Liliales.
Присутствие TMV, CMV, NMV, PVY, TobRV было подтверждено
данными биологического тестирования. Иэоляты NMV, CMV, TobRV и
TomRSV, выделенные из нарциссов, в некоторой мере отличаются по
физическим показателям и эффективности передачи от типовых штаммов, а
. / ;
'
•"
;
'
••
•
- и -
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
также июлягов н« бобовых к\льг>Р юмагов и тюльпанов ( Волощ\к, 1985,
Зитикаите 1488 Тертяк 1490)
Но морфоло! ическим свойствам мрегнырнрована идентичность
типовых штаммов (по pew штатам яектронпой микроскопии)
4. И1УЧ1ПИЕ РОЛИ ПИ И В РАСПРОСТРАНЕНИИ ВИРУСОВ
НА NARCISSUS I
Извиню, чго распространение фитовирусов тесно свжано с
ра1лнчными переносчиками которые являннея )ффективнымн факторами их
передачи в прирохе (Развя шша, 1475 I иббе Харрисон 1978) Исхош lit
»гого для разработки мероприятий по ищите раосний от вирусной инфекции
необходимо шучение фпны переносчиков и их выимоотношепии с
вирусами Наиболее активную и чногочиеченную фуппу переносчиков
вирусов растениП представляют I m (Aphididae)
Нами в экосистемах текоративных ЛУКОВИЧНЫХ кутыур выявлено 15
видов i.iL-и Данные полученные на основании исполыования жсл1ых чашек
Мерике, свидетсльстн\ют о наличии в составе сборов ви юв г icft
приуроченных к pat шчным кульivрам (Aulacorthum solani (Kail) M>/us cerasi
(F), Hyalopieras pruni CJCOITT D\;.aphi!> ы>гЫ Kalt ) наряду с вшами,
характерными для цветочных растений (D\saphis tulipac Ud Ь Macrosiphum
rosae(l ), Macrobiphum Iih (L ) My/us ornatus I amg)
По речу чьтатам вщуальных набпюдений (в динамике) на нарциссах
зарегистрированы - Myzus percicae Su!z A solani
Таким образом, отмеченные вилы глей правомерно рассматривать в
качестве потенциальных векторов вирусов на тучаемых кучьтурах
В современной чкологической обстановке наблюдается усиление
вредоносности и распространения несвойственных ряду культур рапичных
вирусов Огому способствуют номейетвия стрессовых, а1ггропогснных
факторов и приемов, используемых при интенсивных технолошяч (Келдыш,
Помазков
1985. Кетдыш
1995)
При этом формирование новых
патологических комплексов происходит на фоне количественного и
качественного изменения динамики распределения вирусов переносчиков и
состояния их ПОПУЛЯЦИЙ Векторы (переносчики) яв1яюгся одним ш
существенных факторов изменения видового сос-ава и расширешгя круга
растений-чозясв вирусов (Келдыш Помажов Червякова, Арушанова, 1998)
Результаты жепериментов по изучению роли тлей в распространении
вирусов на нарциссы претставлены в таблице 5
-12-
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
l.]f> мша 5
И<>чение векторной негк, ычн вирусов на Narcissus 1
1 переносчика |
Bupve
| ')ффск|ив|шс1ь , Koinpo iwioe
пере ычн
К, pcrsicae Sul/
[
С MV
__ ^
4Х
Mac rosae (I )
M cerasi (I )
CMV
4»
JVIJIUSIJUIC Sul/ _ J
IJYMV
I
1
Л labacScop
*
M регмеас Sul/ J
PVY
I _
22
I
»
Л labaeScop
M omatus 1 aign
J
I
I'VY
PVY
Jf
L
26
П
f
i
-
~ -1-
••
В poiv ii.idic нронсленпыч >KciicpiiMciiiOH HiiKaiano ч ю наряд с
lUHCiTHMM переносчиком M pi,rsit.ie ы н ш ш и iitpe ыча u.i napiiiitchi CMV
двумя iiccnatiu|)ii4ttKii" < ii ни lavin i itn M rosat и M itrasi HYMV - Л fabac
a IJVY - Л labat и M uniatut причем н|)фскшн|икгь перешчи
in.ciiciuuLinnipiiHjnni 1ми ни lavui i ILK tociaii IH ы П - 40 "o
1аким обра (ом
мнимая » tip\M\pc афи юфа\пы i\honii4iiu\
лскорагивных кук.гур танин 1ьное ч ш о они \ioi\i шр.иь оире ш ICIIIIMO
ро 1Ь в иерешчс инфекции PVY BW1V и CMV Причем ия ни ы М terasi
была показана tnotoonocib к пере ыче CMV HI OUIOKIIOIO Минина как
крылатыми так и бхкрылымн (.та.шями
Исполыопание еортов и BICIOB об ia.iaiomii\ чсюичиноегью к векторам,
пре'лставпяст наиболее (ффекшвиый способ (апшгы pacieiniii от паюгенов
вир)спой >гиоло1ии причем оеоб>ю ценность ия пракшкн пре ктавляют
topTa и В1ЫЫ об 1алающпс фчпповой чеюйчивоел i ю
Нами npoBoaii.iaci. paGoia по оценке \еюичнвосги 12 еоргов Narcissus к
S видам пей регулярно выяв шемых в поеалкач нарцисса
Анализ устойчивости рашичпыч сортов нарциссов не выявил обра}цон.
облаланшшх абсолютно!! УСТОЙЧИВОСТЬЮ (табт 6)
Реакция нарциссов на все т\чаемые вп ил г км в не н>м выровнена, на
всех сортах тли способны питаться в |счснпе перио ы лослагочною JL\X
инфицирования Исключение сосчавляеч ниш. I) sorbi коюрая на всех сортах
нарциссов присутствовала не более I часа
Таким образом все 1есшр\емые topia Narcissus L опюсягся к
(асе (яемым а сорта Ноше Ьгсь и I ord Nelson являкпея кормовыми для М
ccrasi и Л Fabac В pci\ n.iaic nccie ювашш нылс ICHM уешичипые к
-/3-
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
населению различными видимп rjieii-псреносчиков: M.persicae - 3 сорта: II.
pruni - 4; М ccrasi - 3.
-
Таблица 6.
Оценка у с т й ч и н о е т пско'юр'мх сорюн Narcissus L. к тлям-нереноечикам
Тестируемым
Число сохранпншихся in 5 подсаженных особей
черсч 1/3/24 часа
сорт
M.persicae
Л.ГаЪае
D.sorbi
II.pruni
М. ccrasi
Super Siar
(Ionic 1 ires
Bridal Rose
Ambcrjiaie
Undertone
Credo
Lord Nelson
l.imcChilTon
Daydream
Patriarch
Tedstone
Sentinel
5/5/4
6/6/2
• 3/3/2
6/4/3
5/4/0
6/4/2
5/5/4
5/5/1
4/3/0
5/4/1
5/1/0
2/1/0
2/2/7
2/1/У
1/2/1
3/4/2
4/2/6
2/0/0
4/3/1
4/1/0
3/2/0
4/1/1
3/2/0
1/1/0
0/0/0
0/0/0
2/0/0
0/0/0
1/1/0
1/0/0
2/1/0
1/1/1
0/0/0
1/0/0
4/3/1
2/2/2
4/2/0
5/1/0
6/4/0
2/3/2
2/2/2
2/1/1
6/4/2
5/3/0
2/2/1
2/1/0
2/2/7
2/1/9
1/2/1
3/4/2
4/2/6
5/2/1
5/3/1
1/1/0
2/2/1
1/0/0
n
5. идштиФИКл! 1ия i шевойс mi:i и ibix ВИРУСОВ I IA КУЛЬТУРЕ
NARCISSUS L.
Наряду с традиционными вирусами нами выявлены и несвойственные
возбудители на видах, входящих в семейство Amaryllidaceae, порядок Liliales
(Amaryllis L., Narcissus I..)Задачей нашего , исследования был поиск вирусов, серологически
родственных ХВШ на представ1ггелях таксонов эволюшюнно близких роду
Allium. В результате проведенных исследований в растениях ряда видов,
принадлежащих к семействам Liliaceae и Amaryllidaceae, был обнаружен
вирус, серологически родственный ХВШ - первый представитель ХВШподобных вирусов, инфицирующих растения, не принадлежащих к роду
Allium . Антиген, серологически родственный капсндному белку ХВШ, был
обнаружен в двух видах рода Chlorophytum, в нескольких сортах Lilium L., :
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
dsupit uiiium и нарциссов
Д|я
alumina распространения
X1H1I на KV н.прс
Narcissus (
itcno (ыовали 2 aiiniCbiBopoiMi к HJIIUI UIOVIV бе IKV - As >7 it As I 4 - к
lunakTHMM вирионам в очищенном upcnapaic
Чналш нрово ныи с 7 lopi.ivui Narcissus I
\\j рис
IЛ it Ib
про ician ILIII.I имм>нобло|Ы ж е ф а м о в (рис 1А1 и копненфированпых
препаратов(рис 1Ь)
В жефактах и конциприроианпых препарат* ирису ICIBMOI 2 к lacca
вирусного капси шого белка с мо ICK\ |ярнымм массами 47 кДа и 28 кДа
Причем ее ш в Ь сортач приемсшонл,! н> 1ько (к юк 28 кДа (рис 1 Л, Ь
лорожкн 1-4 и 6-7) н copie Super Star ( шрожка ^) оЛнару-женм "ба класса
калек ним о бе жа
Максимальная коннешраиия UIHHOIO анипсна наб по юлась н шеи.ях
нарциссов в фаю цветения
IIOMDMV
IUIIIMII p i c i m e ч.нын Maicpiiui
испо 1ыова.1ся .vi» нол\чсния омишеннпч нир\C1U.I4 ирснар.пон В таких
препаратах прис\ icntoiia^ui 2 к lacca вирчепою кансн пни о б е ж а с
мо1скмярными массами 2К кДа и ^7 кДа (рис 2А) Aiiliici niopoiKa прошв
рекомбинацию!о капси llioi о бе |ка \BIIl \ s 37 peai npon.ua с бетком 28 кДа
(рис 2b) lot ia как антнемнорожа полученная прошн иысоюючшцепных
1
•37*4 а -
— I
•Ziru.IL-
67
Ь 9
С
5 а о
Ь
в 9
Рис
I
И м м м ю б т о т т н г жеграктов и концентрированных
препаратов ХШП-подобною иир\еа нарписсон Дорожки I - 7 сортообраэиы Narcissus I (Davdreain Sentinel I ord Nelson
Credo Super Star 12 5 12 2")
юрожки 8
Q - контр» ib
(проана.Ш1ированные ранее ж ы р а м м i\Ka-ina.iora)
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
препарат» XBIII As 1.4 реагировала с белками обоих классов (рис. 2В). В
результате обработки -экстрактов листьев Narcissus L. неионным летергекгом
Тритон х 100 освобождался и селимеш провал в стандартных условиях
11ситрнф> гиропашм (SW 2Х, 25 000 об/мин. 2.5 ч) реагирующий с As 37 белок
с молекулярной .массой 55 кДа (рис. 21).
Рис. 2. Элекгрофоретнческни и серологический ana.ni»
очищенных препаратов XIUII-модобного >*вируса нарциссов: А
- -электрофорез вирусного препарата в 10 % ИААГ; В, В иммуноблопинг препарата, полученного с использованием
соответственно As37 и Asl.4 : Г- иммупоблоттинг препарата,
полученного с использованием пененного дегергента тритон X100, As37; Д - иммуноблоттинг очищенного препарата
выделенного стандартным методом.
По-видимому, данный белок представляет собой димер капищного
белка с молекулярной массой 28 кДа, однако механизм их образования и
структура в настоящее время неизвестны. Неясно также, какие различия в
первичной структуре 28 кДа и 37 кДа капсидных белков ХВШ-подобного
вируса нарциссов обуславливает столь существенную разницу их кажущихся
молекулярных масс. Существование двух классов капсклного белка ХВШподобного вируса нарциссов может быть связано с гетерогенностью молекул
капсидного белка этого вируса по степени гидрофильное™, однако, трудно
объяснить, почему при серологическом анализе методом иммуноблотинга 37
кДа калсидный белок реагирует с антисывороткой Asl.4 и не реагирует с
антисывороткой As 37.
•
.
Исследование очищенных вирусных препаратов из листьев Narcissus L.
методами иммуноэлектронной микроскопии выявило наличие в них массы
гибких частиц длиной около 800 нм и диаметром 12 нм (рис 3).
Однако на основании факта декорирования незначительной части
вирусных частиц можно сделать вывод о достаточно низкой степени
-/е-.
• • • • - - . • ' " • • : , . • : • ; . . • , . • ;
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Рис З Иммупо1лск1ронная фотография очищенных ирспаратон
ХВШ-полобиого вируса нарцисса
ссроло! нческого родства выявленного вируса XBL1J
Результаты (.вилетсльствуюг о том, что в растениях нарциссов,
амариллисов присутствует вирус, серологически родственный XDU1 и
принадлежащий, как мы полагаем, к ХВШ-подобным фитовирусам Наши
исследования показали, что данный вирус легко передается механически и
способен репродуцироваться в сеянцах тало i а в условиях моновирусной
инфекции и накапливаться в них в значительных концентрациях
6 РАЗРАБОТКА ЭЛЕМЕНТОВ ОЗДОРОВЛЕНИЯ NARCISSUS L
МЕТОДОМ КУЛЬТУРЫ ТКАНИ
При разработке методов получения безвирусного растительного
материала необходимо учитывать влияние генетических, физиологических,
гормональных и физических факторов
По данным наших экспериментов наибольший выход безвирусных
растений (до 75 % при культивировании экешгантов в 0,2 мм) наблюдали у
сорта Super Star Приживаемость эксплантов малого размера была
значительно ниже по сравнению с более крупными Оздоровительный эффект
(по данным ИФА и ЭМ) был выше и достигал 57,1 - 75,0 % от числа
регенерировавших Данные таблицы 7 свидетельствуют и о сортовой разнице
в приживаемости эксплантов и в выходе безвирусных растений по трем
размерам, хотя зависимость от размера экспланта сохраняется по сортам
Согласно модели «Скуга-Миллера» (Scoog, Miller, 1957), образование
побегов стимулируется при
наличии преобладающих концентраций
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таблица 7.
Влияние размера жеиланта па выход безвпрусных
pacicitiiii Narcissus L.
Pil'iMCp
Регенерировано
Сорт
жеплашов.* •
icero '
Бечвирусных
MM
Го
%
HIT.
шт.
X
0.2
26,6
6
75.0
Super Star
13
43.3
23,1
0.3
3
- 0,5
50.0
1
6,6
15
57,1
0.2
7 -j
23.3
4
30.0
Patriarch
10
33.3
0.3
3
0
0
0,5
13
43,3
X
26.6
62,5
. 0.2
•
5
Lord Nelson
12
40.0
25,0
0,3
3
15,3
13
43,3
0.5
•- 30 'жеплантов меристема!ической iканн.
цитокимииа но отношению к ауксину, гогла как обратное соотношение
способствует образованию корней. Данная модель приемлема для большого
числа растений, н о . ее нелыя считать универсальной. Концентрации
гормонов, необходимые для органогенеза, широко варьируют и для каждого
вида определяются эмпирически (табл. 8).
При повышения концентрации а-нафтилуксусной кислоты до 5 мг/л
сильно возрастает процент образования кадлусной ткани ( 31,0 % у сорта Lord
Nelson), что является нежелательным из-за генетической нестабильности
(Balzan, 1978, Williams, Coll in, 1976) и достаточно трудно добиться
контролируемого морфогенеза (Катаева. Австисов, 1981).
В результате проведенных "кепернментов показано, что оптимальные
концентрации гормонов для сортов Narcissus L.: БАП - 10 мг/л, ПУК - I мг/л,
при которых получено наибольшее количество растений-регенерантов (до
40,3 % у сорта Super Star), при этом процент каллусообразовапия невысок (до
6,2 %)(табл. 9).
Таким образом, проведенные- исследования показали, что
приживаемость эксплаптов разного размера и выход безвирусных растенийрегенерантов зависит от многих условий: сортовых особенностей, состава
среды, физических факторов выращивания. Однако, увеличить выход
безвирусных растений возможно путем сочетания метода культуры •
.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Liu
HUM8
Морфогсне-i ме'рнсгсм Narcissus I на pa «личных ере ia\
Сорт
I
ДЛИ IНО Ilipo
ванных
MtpiltlCM*
|
|
Состав ере И•
(MI/0
Super Маг _ J
I фиююрмоиои
Super Star
MC <
ЬЛП 10 0
Patriarch
I ord Nelson
11УК 0 5
Super Slar
MC ЬЛП 10 0
Patriarch
1 ord Nelson
ПУК 1 0
MC tSuper Star
Patriarch
ЬЛП 10 0
Lord Nelson
11УК s о
noiKiMili
пе-
i
II lit)
ПоIV
IVMCHO
Чарамер
npiaiioicfic la
i
]
pacicmiii
KOil ive
peieiieI
INCH lairra
I
(K.I
фимнорMOHOB
1
MC 1-
ЬЛП 10 0 1
'
НУКО^
MC +
1 ЬЛП 10 0 i
1 ПУК 1 0
MC ~
1
' ЬЛП 10 0
1 НУКso
20 4
174
П
44 1
43 4
M) 4
4S X
40 0
16 7
1
\
I
1
1
00
00
00
21
00
S 1
il*2 *Г
1
23 I
10 H
14 4 —1
17 9
21 2
40 1
38 7
30 4
14
18
24
i 21 9 1
, 30 4 1
00
, 3 1 0 X 00
II 2
* - 20 "жсшшшов меристема!ическои ткани
Сорт
Табчииа 9
Pel операционная способноегь меристем Narcissus I
Погибло апексов •
Характер
opiaiioieHcia"
I10TV4CIIO
от инфек- в процессе побеги in
ка.1 ivc
растенмнций.
жепланга
культивиpei енерантов.
рования.
"'о
Super Star
Patriarch
Lord Nelson
57
42
43
|
pjiiion
43 2
49 4
56 9
|
4-> 8
40 0
36 7
53
62
23
* - i n 20 жеплатов
* * - cpeja содержащая ЬЛП - 10 мг/ I П У К - 1,0 M I / I
-iS-
|
|
40 1
38 7
30 4
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
апикальных меристем с хемо- и термотерапией. Устойчивость сортов к
инфекции также, несомненно, оказывает влияние на результативность
оздоровления рода Narcissus L. от вирусов.
ВЫВОДЫ
1. Вирусные заболевания выявлены на 239 сортах Narcissus L. различного
происхождения в насаждениях коллекционного типа, а также на 33 видах
представителей тропической и субтропической флоры.
Отмечена устойчивая тенденция их распространения по сравнению с
1986 годом. Заражение комплексом вирусов отмечено практически на-100 %
изучаемых сортов Narcissus L. Комплексная вирусная инфекция доминирует и
на обследованных видах порядка Liliales, причем число компонентов
вирусного комплекса варьирует от. 2 д о 6, .
.
2. Доминирующими симптомами в насаждениях Narcissus • I-. являются
мозаика,
полосатость, краевой
хлороз, пестроленестность
цветков,
деформация листьев, измельчение растений. На изученных представителях
тропической и субтропической флоры порядка Liliales доминировала
мозаичность. .
.
-,>• . "' " ~" *'3.
Данные
симптоматического,
серологического,
индикаторного
и
электронно-микроскопического
анализов свидетельствуют о
широком
распространении TMV; CMV; CmMV; PVY; CrnLV; NMV; AMV; RRSV;
TobNV; TomRSV; BYMV и TobRV на культуре Narcissus L.
4. Установлено, что большинство возделываемых сортов поражены
комплексом вирусов; 23,5 *Л сортов поражены 2-мя возбудителями, 32,4 %
сортов - 3-мя возбудителями, а на 26,5 % сортов обнаружено более 3-х
в о з б у д и т е л е й .
'"••. '• ' . < . - ' " " " '
..л-,*
- *
" / ,- ;'
, ., ' -. • •••
.'.-'••
5.
В насаждениях Narcissus L. установлен состав комплексных инфекций,
видовой состав возбудителей, выявлено широкое ^ варьирование,- и
трансформаиия признаков Проявления вирусных комплексов. Наибольшая'
стабильность проявления симптомов характерна для сортов: Lord Nelson,
Scarlett ОНага, Super Star, Patriarch.
6. Среди обследованных сортов Narcissus L. не было выявлено
представителей, обладающих комплексной устойчивостью к возбудителям..
Показана тенденция расширения ареала меспеиифическнх возбудителей
(PVY;
ShVX; C m t V ;
CroMV), что обуславливает необходимость
оздоровленияхозяйсткенио-иенныхсортовNswcissusL..»
"
;' • . ! : 7
7. Все тестируемые сорта нарциссов относятся к заселяемым, а сорт Honic
Tires и Lord Nelson являются кормовыми для М. cerasi и A.fabae. В результате
'.
•
'
*
'•-
"•'
' - >
- г о -
. "
-' ; ' ; . : ' ' , . ' . " . ; . ; - ; ' . " ' " . . ; :
•"
" - : :
;
:
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
исследований выделены устойчивые к заселению различными видами тлейперсиосчикон, М persicae - 3 сорта Л fabae - 4 сорта, Н pruni - 4 сорта, М
cerasi 1 сорта Выживаемость тлей на различных сортах значительно
колеблется
8 В результате проведенных исследований в растениях ряда видов,
принадлежащих к семейстшам Liliaccae и Amaryllidaceae был обнаружен
вирус, серологически родственный ShVX
Антиген,
серологически
родственный капсидному белку ХВШ обнаружен в fleyv видах Chlorophytum,
4 сортах Amaryltis и 14 сортах Narcissus L
9 В экстрактах и концентрированных препаратах присутствовали 2 класса
вирусного капенлиого белка с молекулярными массами 37 и 28 кДа
Исспедованив очищенных вирусных препаратов ш листьев нарциссов
методами иммуноэлектроннои микроскопии показало наличие в них массы
гибких нитевидных частиц длиной ~ 800 им и диаметром ~ 12 нм XBI1Iполобный вирус легко перелается механически и способен репродуцироваться
в растениях шалота и нарцисса в условиях моноинфекции
10 С целью получения оздоровленных растений был апробирован метод
культуры апикальных меристем Оптимальная величина экспланта составляла
0,2 мм для получения безвирусных растений, а концентрация
гормонов БАП - 10 мг/л, НУК - 1 мг/л. при этом процент каллусообразования
составлял ~ 6 2 % Для индукции ризогенеза уменьшали вдвое содержание
минеральных солей в среде МС, концентрация НУК составляла 0,5 мг/л
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
При разработке системы защиты цветочных культур, и, в частности,
Narcissus L, от вирусов необходимо учитывать особенности их
эпидемиологии в условия коллекций и экспозиций Исходная позиция
заключается в квалифицированной оценке экологической и фигосанитарной
обстановки (состав вирусов и их переносчиков, состояние их популяций,
биолого-экологические свойства растений хозяев и уровень взаимодействия
между ними) Вирусы являются неотъемлемыми сочленами любой
экосистемы, в этой связи, очевидно, нереально содержание во времени в
коллекциях «безвирусных» линий, клонов и форм растений Оптимальная
методология противовирусной защиты на современном этане ориентируется
на формирование агроценозов, в которых реализуется возможность
механизмов регуляции плотности вредных организмов и включает
следующие основные этапы
• направленное формирование коллекций, экспозиций, ограничивающих
-«?•-
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
уровень распространения и непрерывность циркуляции традиционных и
«новых» вирусов и переносчиков (введение устойчивых сортов и видов, в
том числе с латентной реакцией);
.
• внедрение системы оздоровления при производстве посадочного и
семенного материала (тестирование, термо (химио-) терапия, культура
. меристемы);
• оздоровление отдельных сортов, представляющих ценность лпя генофонда,
• удаление из коллекций и экспозиций восприимчивых видов и сортов,
перевод ценного материала в генные банки;
.
• проведение
профилактических
мероприятий
(фитосанитарное
тесгирование, биологический и химический контроль переносчиков,
соблюдение карантинных требований).
.
В результате таких подходов реализуется возможность создания
экосистем, ограничивающих вредоносность вирусов и их переносчиков.
Синеок работ, опубликованных но теме диссертации:
1. Келдыш М.Л., Червякова О.П., Лрушанова Е.С. Вирусные заболевания
новых нетрадиционных культур// Тез. докл. Всерос. съезда по защите
растений,- Пушкин. - 1995. С. 570-571.
•*
2. Keldish -M., Arushanova E., Pomazkov Y., Cervyakova О. Incidence of pome
fruil viruses in ornamentals // XYU int. Symp. on virus diseases of Fruit trees. 1997. -p.« 174.
о
3. Keldish M, Pomazkov Y., Cervyakova O., Arushanova E. Vectors as a factor in
widening host range for viruses of stone fruit trees // XYU int. Symp. on virus
diseases of Fruit trees. - 1997.-p. 171 •
4. Арушанова E.C., Тимохнна Е.Т., Байкалова О.С. Фнтосаннтарное
состояние коллекционных посадок Narcissus L. и перспективы его
оптимизации // Тез. докл. Ill межд. конф.- 1998.- с. 26-27."
5. Арушанова Е.С, Келдыш , М.А., Червякова О.Н. Роль декоративных
растений в распространении вирусов на садовых культурах // Тез. докл.
Всерос. совещ.: Актуальные вопросы теории и практики зашиты растений в
условиях многоукладное™ с.-.х.- 1998. -с. 261-263.
•
6. Келдыш М.А., Помазков Ю.И., Червякова О.Н., Арушанова Е.С. Векторы
как фактор изменения видового состава и расширения круга растенийхозяев вирусов плодовых культур // Тез. докл. Всерос. совещ.: Актуальные
-22-
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
вопросы теории и практики laniuihi растений в условиях чноюуклалносш
i , . 4 . |99Х -с 261-261
,
7 Kcldish М , Pomazkov Y , Arushanova L , Cervyakova О Vectors as a factor in
widening host rangt for viruses ot Iruit trees and ыпа11 fruit crops (some Ijctors
of virus tpidemiology)// Aua horticulture -472 -v I -p 23-26
8 Вишниченко В К , Арушаноиа С С Ке |дыш М А Калошин А А Заврие»
С К Сероло1ичсски родственный X вирусу шалота (XB11I) гибкий
питспнлнми вирус, не приншшежашип к роду Allium // Докл PACXII 1994 -№2 - t 23-26
-23-
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Объем i 5 п л
Заъ,аз 342
Типография Издательства V\CXA
127550, М о с к в а И 550, Т и м и р я з е в с к а я у ч , 4 4
Тираж 100
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
5
Размер файла
978 Кб
Теги
590
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа