close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

7128

код для вставкиСкачать
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ГОУ ВПО «Оренбургский государственный университет»
Кафедра «Медико-биологической техники» Оренбургский
филиал ФГУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н.
Федорова Росмедтехнологии»
ЮУНЦ РАМН Оренбургский филиал ПНИЛ
«Экспериментально-гистологическое изучение
биотрансплантатов в офтальмохирургии»
В.Н. Канюков, Р.Н. Подопригора, О.М. Трубина,
Р.Ш. Тайгузин, А.Д. Стрекаловская
Методы консервации донорских
тканей в офтальмологии
(учебное пособие)
Оренбург 2009
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
УДК 617:615.387 (075.8)
ББК 51.1(2)2Я73
К19
Рецензент:
профессор, доктор экономических наук, заведующий
кафедрой гистологии, цитологии, эмбриологии Оренбургской
государственной медицинской академии А.А. Стадников.
Авторы: В.Н. Канюков, Р.Н. Подопригора, О.М. Трубина,
Р.Ш. Тайгузин, А.Д. Стрекаловская
Канюков В.Н., Подопригора Р.Н., Трубина О.М., Тайгузин
Р.Ш., Стрекаловская А.Д.
Методы консервации донорских тканей (учебное пособие). Под редакцией профессора Канюкова В.Н. - Оренбург, 2009.79с.
В пособии описан механизм энергетического обмена в изолированных
тканях в норме и при гипоксии. Обоснованы варианты пролонгирования
энергетического обмена в тканях при гипоксии.
Изложены традиционные методы консервации донорских тканей.
Описан метод консервации в условиях гипербарической оксигенации. Дана
сравнительная оценка существующим способам консервации донорских тканей.
Методическое пособие предназначено для студентов ОГУ по
специальности 200402.65 «Инженерное дело в медико-биологической практике»
на кафедре «Медико-биологической техники», для аспирантов, инженеров
медицинской техники, врачей.
УДК 617:615.387 (075.8)
ББК 51.1(2)2Я73
©Канюков В.Н., Подопригора Р.Н.,
Трубина О.М., Тайгузин Р.Ш.,
Стрекаловская А.Д., 2010
© ГОУ ОГУ, 2010
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Содержание
Введение.......................................................................................... 5
1. Консервация тканей, как пролонгация сроков их
умирания ......................................................................................... 7
2. Механизмы интеграции и дезинтеграции клеточного
обмена в тканях ............................................................................ 12
3. Энергетический обмен в изолированных тканях в норме
и при гипоксии ............................................................................. 16
4. Пролонгирование энергетического обмена в
изолированных тканях при гипоксии.......................................... 18
5. Трансплантационная терминология....................................... 20
6. Консервациядонорских тканей, основанная на применении
гипотермии………………………………………………………...25
7. Консервация донорских тканей во влажной камере при
гипотермии .................................................................................... 28
8. Консервациядонорских тканей, основанная на применении
фармакологических средств (химические
способы консервации).................................................................. 30
9. Физическиеметоды консервации донорских тканей............. 34
10. Гипербарическая оксигенация и гипотермия как метод
лечения заболеваний .................................................................... 42
11. Консервацияорганов и тканей в условиях гипербарической
оксигенации при гипотермии ...................................................... 47
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Заключение ................................................................................. .56
Приложение 1 .............................................................................. 73
Приложение 2 .............................................................................. 74
Приложение 3 .............................................................................. 75
Приложение 4 .............................................................................. 76
Приложение 5 .............................................................................. 77
Приложение 6 .............................................................................. 78
Приложение 7 .............................................................................. 79
Приложение 8 .............................................................................. 80
Приложение 9 .............................................................................. 81
Приложение 10 ............................................................................ 82
Приложение 11 ............................................................................ 83
Приложение 12 ............................................................................ 84
Приложение 13 ............................................................................ 85
Приложение 14 ............................................................................ 86
Приложение 15 ............................................................................ 87
Приложение 16 ............................................................................ 88
Приложение 17 ............................................................................ 89
Приложение 18 ............................................................................ 90
Приложение 19 ............................................................................ 91
Приложение 20 ............................................................................ 92
4
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Введение
Пересадка тканей - это способ замещения дефектов,
образующихся вследствие иссечения тканей.
Первоначальный
этап
развития
клинической
трансплантации пришелся на середину и вторую половину 20го века. В это время в стране был высокий уровень развития
как фундаментальной, так и прикладной медицинской науки, и,
в частности, хирургии как в ее теоретическом, так и
практическом аспектах.
Неоценимый
вклад
внесли
в
клиническую
трансплантологию такие выдающиеся теоретики и практики
трансплантологии, как профессора В.П.Демихов,
В.П. Филатов, В.И.Шумаков.
Клиническая трансплантология наряду с такими
дисциплинами, как кардиология, онкология, является
неотъемлемой частью системы здравоохранения любого
развитого государства.
Правовое
регулирование
клинической
трансплантологии в настоящее время переживает этап своего
развития и совершенствования.
В офтальмохирургии при восстановительных операциях
на глазном яблоке и придаточном аппарате глаза широко
используются донорские ткани (трансплантаты) - роговая
оболочка глаза, склера, аорта, твердая оболочка головного
мозга, перикард, реберные хрящи, сухожилия, фасции, кожа и
т.д.
Потребность в донорском материале ежегодно
возрастает, что связано как с экологической и криминальной
обстановкой, так и с локальными военными действиями.
В Российской Федерации почти в каждом регионе
имеются Глазные банки, целью которых является создание
запаса разнообразных донорских тканей. Для осуществления
5
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
этой цели применяются различные методы консервации
тканей.
Описание способов консервации изложено в пособии в
исторической последовательности с тем, чтобы отдать
должное многим поколениям ученых и практиков, внесших
свой вклад в развитие трансплантологии.
6
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
1. Консервация тканей, как пролонгация сроков их
умирания
Трансплантология состоит из двух основных частей:
общей и частной (клинической). Общая трансплантология
решает
проблемы
источников
трансплантатов,
консервирования,
трансформации
пересаженного
биологического материала, трансплантационного иммунитета.
В частной трансплантологии разрабатываются проблемы
клинических пересадок органов и тканей (Коваленко П.П.,
1975).
В последние годы клиническая трансплантология
активно занимается созданием искусственных органов и тканей
(искусственное сердце, печень, роговая оболочка и т.д.).
Трансплантационная хирургия в мире развивается
настолько быстро, что число различных пересадок органов и
тканей достигло 40 тысяч в год, и в ближайшие десятилетия
будет составлять 50% всех операций.
Развитие трансплантационной хирургии шло по трем
этапам.
Первый этап - это заместительная хирургия, когда
оперативное вмешательство выполнялось исключительно с
целью замещения дефекта тканей. Трансплантат подбирался
соответственно формируемому тканевому ложу (Нигматуллин
Р.Т., 2003). Трансплантат должен был обладатьадекватнымипластическими
биомеханическими свойствами.
Второй этап - это регенеративная хирургия, когда на
месте трансплантата формируется регенерат с характерными
свойствами. Качество регенерата зависит от свойств
заготавливаемого трансплантата, на что влияет возраст донора,
причина смерти, что выявляется при детальной экспертизе
трупа-донора.
Трансплантат
должен
соответствовать
адекватности функциональной нагрузки при замещении
7
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
дефектов различных анатомических структур.
Третий этап трансплантационной хирургии - это
ответная реакция организма. Трансплантат оказывает
системное влияние на организм, в котором участвует нервная,
эндокринная и иммунная система.
В результате неблагоприятных условий переживания
при консервации в тканях накапливаются биологически
активные вещества - биогенные стимуляторы, которые
усиливают рост и размножение клеток. Эта концепция о
биогенных стимуляторах и репаративной регенерации
(тканевая терапия), выдвинутая В.П.Филатовым в 1933г. актуальна по сей день.
Теория тканевой терапии построена на изменениях
биохимического состава донорских тканей в процессе
криоконсервации, их пластических свойствах и особенностях
структуры (Нигматуллин Р.Т., 2003).
С появлением теории В.П.Филатова возросли
требования к качеству заготавливаемых тканей. В этот период
- конец 20-х, начало 30-х годов XX века по инициативе
академика В.П.Филатова возникла служба заготовки и
консервации тканей при Одесском научно- исследовательском
институте глазных болезней. За рубежом создание банков
тканей происходило несколько позднее. В последующем,
тканевые банки объединялись в научные Ассоциации. К
наиболее известным из них относится Европейская
Ассоциация Глазных банков, в которую входит Лаборатория
трансплантологии с Глазным тканевым банком ФГУ МНТК
«Микрохирургия глаза» им.акад.С.Н.Федорова (Москва).
А первый закон о трансплантации тканей был принят,
благодаря академику В.П.Филатову. Это первый в истории
законодательный акт, регламентирующий их использование
юридически. В.П. Филатов перенес трансплантологию из
экспериментального этапа в клиническую практику (Нигма-
8
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
туллин Р.Т., 2003). Позже профессор Коваленко П.П.
организовал службу трансплантации тканей в нашей стране,
создал сеть тканевых банков, которые решали проблему
заготовки донорских тканей, селекции трупа-донора,
тестирования донорских тканей и подготовки их для
пересадки, что взято на вооружение современными
исследователями.
Исследования, выполненные в нашей стране и за
рубежом, позволили определить требования к заготавливаемым
донорским тканям, как на этапе заготовки, так и в ходе
консервации.
Развитие службы заготовки донорских тканей
напрямую зависит от уровня развития базовых теорий
тканевых пересадок.
Для трансплантации имеет значение правильный
подбор трупа-донора. Ответственность за решение этого
вопроса возлагается на медицинские учреждения, где
находится труп и производится операция заготовки
трансплантатов.
Существуют судебно-медицинские и клинические
противопоказания к изъятию донорского материала. К судебномедицинским относятся случаи:
- экспертиз трупов по делам об убийствах;
- с неустановленной причиной, видом и родом смерти;
- смерти неопознанных лиц;
- когда хирургические операции по изъятию
трансплантатов
затрудняют
последующую
судебномедицинскую диагностику;
- если хирургические манипуляции приводят к
обезображиванию тела, прежде всего лица покойного.
Клинические противопоказания к изъятию донорского
материала:
- давность смерти свыше 1 суток, наличие признаков
гниения;
9
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
- возраст трупа свыше 70 лет;
системные
инфекционные
заболевания,
туберкулез, венерические заболевания, сепсис, перитонит,
пиелонефрит, новообразования,
лейкозы,
гепатит,
подозрение на СПИД и ВИЧ-инфицирование и др.
В настоящее время отбор донорского материала
затрудняется в связи с резко
возросшей
частотой
заболеваний гепатитом «В», «С», СПИДом. Это приводит к
браковке до 25% материала.
Для трансплантации донорских тканей имеет значение:
- адекватные методы их консервации;
- правильное хранение консервированных тканей;
- морфологическое тестирование трансплантатов.
Проблема консервации
донорских
тканей
представляет большой интерес, как с медицинской, так и с
биологической точки зрения. Поиск средств защиты тканей от
кислородного голодания проводился еще в прошлом столетии
и был ничем иным, как попыткой пролонгировать их
переживание в неблагоприятных условиях. Консервация
гомостатических тканей (кожа, кости, хрящи, сухожилия,
аорта, твердая оболочка головного мозга, перикард),
выполняющих в организме механическую функцию, сводится
лишь к защите их от разложения (Клен, 1962).
Это не может относиться к консервированной роговой
оболочке, используемой при сквозной пересадке роговицы.
Для этих целей роговица должна сохранять жизнеспособность,
так как от этого зависит результат ее приживления, что
напрямую влияет на функциональную способность органа
зрения.
Таким образом, сохранение и продление сроков
жизнеспособности консервированных донорских тканей
остается одной из основных проблем современной
трансплантологии.
10
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Для использования консервированных тканей в
клинической практике возникла необходимость в разработке и
внедрении принципиально новых, более надежных критериев
оценки жизнеспособности тканей. Все это стало возможным
благодаря тесным контактам со специалистами смежных наук инженерами,
математиками,
биологами,
морфологами,
гистологами.
Многочисленные исследования посвящены сохранению
жизнеспособности пересаживаемых тканей и преодолению
барьера тканевой несовместимости. Отсюда и большое
разнообразие методов консервации тканей, целью которых
является длительное сохранение нативной структуры
трансплантатов и снижение их антигенных свойств. Для
полноценного структурного и функционального замещения
дефектов при пластических операциях трансплантация тканей
рассматривается как биологический метод стимуляции
репаративной регенерации.
Современные исследования в области биохимии,
биофизики, молекулярной биологии, генетики и др.,
основанные на методах кибернетики, теории информации,
теории регулирования, дают возможность глубже понять
диалектический
характер
физико-химических
закономерностей в живых и трупных тканях. Реакции в
донорских тканях рассматриваются в неразрывной связи с их
структурой, а скорость и направление этих реакций - как
комплекс обратных связей, которые обеспечивают устранение
или максимальное ограничение действия факторов внешней
среды. Тенденция донорских тканей к сохранению постоянства
своей структуры составляет их главную особенность наравне с
живыми тканями.
Оценить степень жизнеспособности донорских тканей
необходимо на уровне их отдельных клеток и клеточных
систем.
11
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
2. Механизмы интеграции и дезинтеграция клеточного
обмена в тканях
Интеграция клеточного обмена в живых тканях
осуществляется на уровне ее мембранных образований. То же
самое происходит в донорских тканях, взятых от трупов в
сроки от 2-х часов до 72 часов.
Электронная
микроскопия
позволила
выявить
существование не только наружной мембраны, но и большого
количества внутриклеточных мембранных образований,
которые разделяют клетку на относительно изолированные
друг от друга пространства.
Известно, что клеточные органеллы (митохондрии,
микросомы, лизосомы и т.д.) представляют собой сложные
мембранные образования.
Мембраны, разделяя клетку и ее органеллы на
относительно
изолированные
пространства,
создают
предпосылки для регулирования скорости ферментативных
реакций, проходящих в тканях, путем перемещения веществ из
одних пространств клетки в другие (Дж. Робертсон, 1964).
Быстрота химических реакций в клетке обусловлена тем, что
большинство из них протекает на мембранах,
на
высокоспециализированные
ферментные
системы
в
определенной последовательности.
Транспорт веществ через клеточные мембраны связан
с изменением их механических свойств. Так, накопление К+
митохондриями
сопряжено
с
ускорением
реакций
окислительного фосфорилирования и ведет к сжиманию
митохондрий, выход же К+ сопряжен с набуханием
митохондрий и разобщением фосфорилирования и дыхания в
них. Иа поверхности мембран белковые молекулы за счет
энергии АТФ катализируют процессы активного трансмембранного транспорта. Ферментативная природа процессов
активного
12
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
транспорта зависит от pH среды, от температуры (Johnstone,
1964). Это обстоятельство учитывается при консервации
тканей.
С другой стороны, следует учитывать, что внутренний
слой мембран составляют липиды. Липиды мембран
связываются
с
ее
белком
электростатическими
и
поляризационными связями типа гидрофобных, которые
участвуют в изменении конфигурации мембраны и степени ее
плотности.
Таким образом, клеточный обмен в тканях
осуществляется мембранными структурами на основе
взаимосвязи между отдельными клеточными органеллами.
Механизм передачи информации от одной органеллы к другой
осуществляется как химическим (за счет изменений
концентрации метаболитов, коферментов и т.д.), так и
конформационным способом. В реализации последнего
способа передачи информации важная роль принадлежит
внутриклеточной воде, которая имеет преимущественно
кристаллическое
строение
и
обладает
анизотропией
физических свойств. Интегрируя обмен посредством мембран,
клетка за счет кристаллических свойств внутриклеточной
воды, способна поддерживать свою структуру. При разрыве
внутримолекулярных связей по типу гомолиза образуются
свободные радикалы и без дополнительной энергии
организованных структур в тканях не происходит.
Гипоксия - причина нарушения метаболизма в тканях.
Независимо от вида гипоксии, в основе характерных для нее
нарушений
лежат
энергодефицит
и
активация
свободнорадикальных процессов.
Расстройства гипоксического и свободнорадикального
генеза по мере их нарастания ведут к деструкции клеток.
Прекращение доставки кислорода к клеткам вызывает
сдвиг окислительно-восстановительного равновесия в них.
13
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Прекращение выработки энергии аэробным путем побуждает
клеточную метаболическую машину активировать анаэробный
путь обмена. Единственным источником энергии в
анаэробных условиях является гликолиз. По мере углубления
гипоксии активность ферментов гликолиза подавляется и
накапливаются недоокисленные продукты обмена в виде
молочной, ацетоуксусной и других кислот.
Процессы дезинтеграции клеточного обмена начинаются с повреждения мембран. Из клеточных элементов
митохондрии и микросомы наиболее чувствительны к
гипоксии. Пусковым механизмом нарушения мембранных
структур является действие гидролитических ферментов
лизосом, активизирующихся в условиях внутриклеточного
ацидоза, а также свободно радикальное окисление липидов
фосфолипидных мембран.
По мере нарастания гипоксии в тканях отмечаются
деструктивные изменения, выражающиеся в их отеке,
набухании, в конечном итоге приводящие к гибели клеток.
Таблица 1
Пути дезинтеграции обмена при умирании клеток
14
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В здоровых клетках всегда присутствует достаточное
количество
антиоксидантов-ингибиторов
радикальных
реакций, которые блокируют активные радикалы, тормозя
развитие цепных реакций. К таким веществам относятся:
серотонин, каталаза, витамин Е, витамин С, а-токоферол и др.
По данным Т.Б.Сусловой с соавт. (1968) ионы Fe+2 в больших
концентрациях
также
действуют
как
антиоксиданты
перекисного окисления липидов.
При консервации тканей важным является сохранность
их жизнеспособности. В качестве критериев гибели тканей
использовалась энзиматическая активность клеток. Однако
даже при наличии гистологических признаков некроза в тканях
активность отдельных ферментов (лактатдегидрогеназа,
сукцинатдегидрогеназа и т.д.) может сохраняться. Тканевое
дыхание,
гликолиз,
используемые
для
оценки
жизнеспособности тканей, также являются недостаточно
информативными показателями, поскольку
обломки
гомогенизированных клеток могут при многих обстоятельствах
дышать и продолжать накапливать молочную кислоту
(Ю.М.Лопухин и др., 1969).
К настоящему времени разработаны и внедрены в
практику
новые
методы
оценки
жизнеспособности
консервированных тканей, в частности, роговой оболочки
(С.Н. Федоров, С.А.Борзенок, З.И.Мороз, Ю.А.Комах, 1993).
Предложенный авторами скрининговый неинвазивный
тест (адреналиновая проба) является наиболее чувствительным
и
информативным
методом,
контролирующим
и
прогнозирующим функциональную жизнеспособность роговицы как пластического материала.
15
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
3. Энергетический обмен в изолированных тканях
в норме и при гипоксии
Основным источником энергии в клетке является
глюкоза или гликоген, окисление которых происходит либо
по пути цикла Кребса, либо по пути пептозного цикла. При
повышении энергозатрат в клетке активируется цикл Кребса.
Активация пептозного цикла создает клетке покой, что
обеспечивает сохранение ее структуры.
Между обоими метаболическими путями должно
поддерживаться состояние динамического равновесия. На
окислительно-восстановительные процессы в тканях влияет
уровень катехоламинов. В анаэробных условиях процесс
регуляции энергетического баланса в клетках затруднен.
Таблица 2
Последовательность нарушений энергетического обмена в
тканях при гипоксии
16
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Дефицит энергии в клетках ведет к нарушению свойств
ее белков (ферментов), что вызывает накопление свободных
радикалов, усугубляющих повреждение клеток.
При консервации тканей мероприятия по пролонгированию их жизнеспособности должны быть направлены на
снижение расхода энергии и, прежде всего, потребности клеток
в энергосубстратах и кислороде.
17
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
4. Пролонгирование энергетического обмена в
изолированных тканях при гипоксии
В условиях нарастающего дефицита энергии в тканях
при гипоксии с целью регулирования путей метаболизма
необходимо обеспечить клеткам функциональный покой и,
таким образом, замедлить скорость накопления энергетического долга.
При консервации донорских тканей, как известно,
применяются различные фармакологические препараты.
Оценка их влияния на жизнеспособность тканей проводится
по мембранной проницаемости препаратов. Известны
вещества,
способные
либо
стабилизировать,
либо
лабилизировать клеточные мембраны, повышая их проницаемость. Лабилизация мембран наступает под влиянием
средств, способствующих образованию
свободных радикалов, таких, как цистеин, глютатион, витамин
А. Все эти соединения вызывают необратимое набухание и
лизис митохондрий, лизосом, микросом и других мембранных
структур
клетки.
Аналогичное
действие
оказывают
пирогенные стероиды, стрептолизин, изолейцин. В то же
время противовоспалительные
стероиды:
гидрокортизон, кортизон, преднизолон,
дексаметазон и др. оказывают на мембраны стабилизирующее
влияние. В связи с этим, приемлемым считается обработка
донорских тканей противовоспалительными гормонами перед
основным процессом консервации. Защитным действием на
клеточные мембраны тканей обладает метиленовый синий,
бриллиантовый зеленый, некоторые хиноны (витамины Е и К),
серотонин, ГОМК (гамма-оксимасляная кислота) и др.
Механизм
защитного действия ГОМК на ткани заключается
в способности этой жирной кислоты образовывать соли с
железом - катализатором образования перекисей липидов.
18
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Таким образом, переориентация путей метаболизма с
помощью препаратов, стабилизирующих мембранные структуры клеток, ведет к пролонгированию жизнеспособности
консервированных изолированных тканей.
19
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
5. Трансплантационная терминология
По существующей Международной трансплантологической терминологии различают 5 разновидностей трансплантатов:
аутологичные, изогенные, аллогенные, ксеногенные и эксплантаты.
Таблица 3
Таблица 3.
Международная трансплантологическая терминология (Вена,
1967 г,)
Вид
Т рансплантации
Наименование вида пересадки
Наименование
трансплантатов
Старое
Новое
ауто
ауто
генный
логич
Старое
ауто-
Новое
ауто-
трансплан-
трансплан-
тация
тация
Пересадка тканей или
органов между
организмами
идентичными в
генетическом отношении
изотрансплантация
изотрансплантация
изогенный
изогенный
Пересадка органов или
тканей между организмами
одного вида
гомотрансплантация
аллотрансплантация
гомо
генный
аллогенный
гетеро-
ксено-
трансплан-
трансплан-
гете
рологи
чный
ксеногенный
тация
тация
Пересадка тканей или
органов в
ный
пределах одного
организма
Пересадка органов или
тканей между
организмами различных
видов
20
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Продолжение таблицы 3
Пересадка
небиологического
субстрата
аллотрансплантация
экс
плантация
аллогенный
эксплан-тат
Всеобщее признание получило применение
в
клинических условиях аллогенных тканей для трансплантации.
Аллогенные
ткани
являются
ценным
пластическим
материалом, применение их приносит в большинстве случаев
положительный клинический результат. В офтальмологии из
аллогенных тканей используются: роговая оболочка, аорта,
твердая мозговая оболочка, перикард.
Ткани считаются полноценными, если в них
сохранились
первоначальные
свойства
(пластические,
структурные,
биологические).
Перед
трансплантацией
донорские ткани нуждаются в создании определенных условий,
именуемых консервированием.
При консервации тканей должны выполняться
следующие условия:
1) соблюдение стерильности,
2) снижение или приостановление аутолиза,
сохранение пластических, структурных,
3)
биологических и функциональных свойств.
Соблюдение стерильности достигается путем
применения физических или химических методов, а также
соблюдением асептики и антисептики. Все это позволяет
защитить донорские ткани от микробного разложения. Перед
пересадкой
стерильность
тканей
контролируется
бактериологическими методами.
Замедление
или
приостановление
аутолиза
(ферментативного процесса) в тканях может быть достигнуто
применением или антисептических растворов, или физических
методов - низкие температуры (Коваленко П.П., 1975).
21
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
С целью сохранности структуры и биологических
свойств консервированных тканей при их трансплантации для
получения оптимальных функциональных результатов должны
быть приемлемы лишь те методы консервирования, при
которых в тканях сохраняются или восстанавливаются их
первоначальные качества.
В настоящее время в РФ с учетом современных
достижений офтальмологии и трансплантологии, биофизики и
биохимии, молекулярной биологии и патофизиологии
сотрудниками ФГУ МНТК «Микрохирургия глаза»им.акад.С.Н
разработана оригинальная медико-технологическая система
донорской службы (С.Н.Федоров с соавт., 1993). Обоснована
правовая база деятельности Глазных тканевых банков РФ.
Реализована проблема легитимности забора и заготовки
трупных тканей и органов человека для трансплантации в РФ,
в том числе, путем издания Приказа Минздравсоцразвития
России и РАМН № 357/40 от 25.05.2007г. «Об утверждении
Перечня органов и/или тканей человека - объектов
трансплантации, Перечня учреждений здравоохранения,
осуществляющих трансплантацию органов и/или тканей
человека
и
Перечня
учреждений
здравоохранения,
осуществляющих забор и заготовку органов и/или тканей
человека».
Основой медико-технологической системы Глазного
банка является система фармакологической защиты сквозного
трансплантата роговицы, начиная от отбора и консервации
донорского материала до метаболитной коррекции пациентов
в послеоперационном периоде. Данное обстоятельство
позволило снизить процент возникновения осложнений после
проведения кератопластик с 36% до 17% и заметно повысить
реабилитационный эффект от различных видов кератопластик
(З.И.Мороз с соавт., 2007).
22
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Пересадка донорских тканей - это многоуровневый
процесс, который подчинен медико-биологической системе
«донор-реципиент» (В.Н.Канюков с соавт., 2001), З.И. Мороз с
соавт., 2007).
Таблица 4.
Медико-биологическая система «Донор-реципиент»
23
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В Оренбургском филиале ФГУ «МНТК «МГ»
им.акад.С.Н. Федорова разработана многофакторная система
информации о состоянии Глазного банка донорской ткани для
обеспечения подбора, обеспечивающего оптимальные условия
«донор- реципиент» (В.Н.Канюков с соавт., 2005).
Возникающая
при
трансплантации
реакция
биологической тканевой несовместимости донорских тканей
диктует необходимость их консервации.
24
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
6. Консервация донорских тканей, основанная на
применении гипотермии
Трансплантационные свойства донорских тканей
находятся в тесной связи с видом консервации, их сроков от
забора до операции.
На эффективность реконструктивных операций влияют
и гистогенетические особенности совмещаемых тканей
(трансплантационный материал и «ложе» реципиента). Достичь
полноценное структурное и функциональное восстановление
органа зрения возможно при оптимизации регенераторных
потенций клеток и тканей глазного яблока и его
вспомогательного аппарата.
На сегодняшний день существует множество методов
консервации трупных тканей, но ни один из них не является
оптимальным. Они или кратковременны, или вызывают потерю
жизнеспособности тканей, или дорогостоящие. А при
консервации
должна
быть:
простота,
доступность,
универсальность, надежность и дешевизна.
Целью любой консервации является торможение
процессов аутолиза и ослабление антигенных свойств
трансплантатов. Следствием аутолиза являются продукты
перекисного окисления липидов - диеновые конъюгаты,
шиффовые основания и др., которые вызывают энергетический
дисбаланс в консервированных тканях. Исходя из этого, при
консервации необходимо ткань ввести в состояние длительного
анабиоза, когда в клетках сохраняется ферментативный
процесс.
До 1990-х годов бывший СССР по праву считался
мировым лидером в разработке проблемы трансплантации
трупных тканей человека.
Широкое применение трупных тканей и органов
человека в СССР составляло неоспоримый приоритет
советской медицины.
25
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Идея создания первого в мире Глазного банка
донорских тканей «безоговорочно принадлежит
В.П.Филатову и навсегда будет связана с его именем» (F.S.
Brightbill, 1993). Понятие банка биологических тканей связано
с возможностью сохранить донорский материал путем его
консервации.
С увеличением количества больных, нуждающихся в
пересадке роговой оболочки с 30-х г.г. XX века благодаря
работам академика В.П. Филатова началось широкое
применение консервированной трупной роговицы человека.
Эффективность различных консервантов значительно
увеличивается в сочетании их с физическими защитными
факторами и в первую очередь с гипотермией.
Методы консервирования тканей с использованием
гипотермии преследуют одну цель - ввести ткани в состояние
длительного анабиоза с сохранением их структурных,
пластических и биологических свойств. В клетках таких
тканей сохраняется интенсивный углеводный, белковый,
ферментативный
обмен.
В
зависимости
от
вида
консервированной ткани время сохранности их - различное.
Изменения, наступающие в тканях при гипотермии, носят
обратимый характер, так как обменные процессы в клетках
тканей сохраняются. Температура и длительность гипотермии
оказывают различное влияние на клеточные структуры тканей.
Метаболическая и функциональная деятельность
клеток наилучшим образом осуществляется лишь в довольно
узком интервале температур, который носит название
«биокинетическая зона». Для целостных организмов эта зона
лежит в пределах -10°С -45°С (Лозина-Лозинский Л.К., 1972).
Для изолированных органов, в частности, глазного
яблока, оптимальной температурой при консервации
26
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
является умеренная гипотермия +2°С, +4°С (В.П.Филатов,
1945).
Вне этого интервала клетки повреждаются тем сильнее,
чем больше повышается или понижается температура, при
которой находятся ткани.
При гипотермии концентрация всех компонентов в
полиферментной
системе
(ферменты,
субстраты,
промежуточные
и
конечные
продукты)
находится
определенный промежуток времени в стационарном состоянии.
При выходе системы из стационарного состояния в ней
наступает сдвиг, обусловленный изменением температуры или
временем нахождения тканей при консервации в условиях
гипотермии.
В основе защитного действия гипотермии лежит
снижение функциональной активности тканей, ведущее к
торможению обменных процессов и снижению потребности
кислорода. Сама по себе гипотермия не предотвращает, а
только пролонгирует сроки умирания клеток, сохраняя их
жизнеспособность
на
определенный
период.
Метод
консервации тканей при гипотермии прост, эффективен, не
требует сложного оборудования, является общедоступным.
Однако более эффективно гипотермия действует на ткани в
сочетании с антиоксидантами, с различными химическими
средствами, в условиях гипербарической оксигенации и
другими способами консервации, приводящими к торможению
метаболического дисбаланса в клетках.
27
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
7. Консервация донорских тканей во влажной камере
при гипотермии
В 1934 году академиком В.П.Филатовым предложена
консервация трупной роговицы человека во влажной камере
при
умеренной
гипотермии.
Методика
консервации
заключалась в следующем: целое глазное яблоко после
обработки дезинфицирующими средствами помещалось в
бюкс с плотно притертой крышкой. Бюксы укладывались на
полки бытового холодильника с температурным режимом
(+2°С, +4°С).
Этот метод относится к физическим. До сих пор способ
консервации В.П.Филатова является самым распространенным.
Для роговичной ткани эта методика наиболее щадящая.
К тому же, в процессе консервации снижается антигенная
активность белков трансплантата. А накопление биогенных
стимуляторов в трансплантатах приводит к оптимальным
биологическим результатам при пересадке роговицы.
Простота и доступность метода В.П.Филатова
способствовали тому, что он вышел за пределы
офтальмологии и нашел широкое применение в отечественной
и зарубежной хирургии.
Главная цель, которая преследуется при консервации
тканей - это максимальное сохранение их жизнеспособности.
По характеру воздействия на биологические свойства
роговичной ткани метод консервации
В.П.Филатова позволяет сохранять ткани жизнеспособными не
более недели. На 5-6-е сутки роговица, пропитываясь влагой
передней камеры, теряет свою прозрачность, в ее ткани
наступают деструктивные изменения, она становится
непригодной для пересадки. Таким образом, кратковременность сроков хранения
28
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
донорского материала во влажной камере можно считать
существенным недостатком метода В.П.Филатова, а это не
позволяет заготовить пластический материал впрок, а,
следовательно, удовлетворить потребность для трансплантационных целей.
С целью удлинения сроков хранения роговицы
предлагалось заменить влагу передней камеры трупного глаза
воздухом, кислородом, гидрокортизоном. Однако наиболее
простой и эффективный путь удлинения сроков консервации
установлен во влажной камере изолированных роговиц
(отдельно от глазного яблока). Жизнеспособность таких
роговиц сохраняется до 10 дней, так как их ферментативные
структуры претерпевают минимальные изменения (С.Е.Стукалов, 1968, А.Г.Цвелева с соавт., 1972).
29
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
8. Консервация донорских тканей, основанная на
применении фармакологических средств (химические
способы консервации)
К химическим способам относится консервация тканей
в различных жидкостях - это цельная кровь реципиента
(В.П.Филатов,
Л.П.Шмульян,
1936),
цельная
или
гемолизированная кровь донора (И.А.Вассерман, 1939,
Н.С.Глазко, 1955), лизоцим (Т.И. Брошевский, 1961), водный
раствор бриллиантовой зелени, физиологический раствор,
раствор Рингера (Е.А. Петросянц, 1940).
Среда АБР - белок куриного яйца, разведенный
раствором Рингера и альбуцида (Н.И. Шпак, 1955).
Консервация донорских тканей, особенно роговицы, в
различных растворах ведет к явлениям набухания, которые
наступают из-за пропитывания тканей консервирующей
жидкостью, вследствие чего трансплантационные свойства их
не высоки.
К химическим методам консервации донорских тканей
относится сохранение их в маслянистых веществах вазелиновом масле (В.П.Рощин, 1943), в масляном растворе
тамбуканской грязи (препарат А.Л.Шинкаренко).
Маслянистые
вещества
в
меньшей
степени
пропитывают ткани и не вызывают их утолщения и мацерации,
что способствует более длительным срокам их жизнеспособности.
Изучалась консервация донорских тканей, в частности
роговой оболочки, в меде (В.Г.Абрамов, 1978). Прозрачность
роговицы в меде сохранялась до 4-х месяцев, но происходило
ее уплотнение, она становилась упругой и была непригодна
для пересадки.
Kuwabara V. (1962) предлагалась для консервации
сыворотка крови реципиента при температуре +2°С, +4°С. В
процессе консервации подобным методом ткани находятся в
условиях, близких к естественным, что
30
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
уменьшает явления тканевой несовместимости, так как
происходит иммунологическое сближение реципиента с
тканью донора. Однако возможности данного метода весьма
ограничены и не могут обеспечить запас донорского
материала.
Определенный интерес представляют исследования по
использованию в качестве консерванта раствор формалина
(О.И.Шершевская, 1961), но такой пластический материал
является «заведомо мертвым» и может выполнять только
функцию «каркаса».
С увеличением числа пациентов с близорукостью,
нуждающихся в оперативном вмешательстве (склероукрепляющие операции) широко используется такой донорский
материал, как аорта, твердая мозговая оболочка, перикард.
Консервация этих тканей проводится в спиртовом растворе
тимола (М.В.Зайкова, 1976). Подобные аллотрасплантаты не
оказывают отрицательного воздействия на биологические
объекты при трансплантации, обеспечивают высокую
эффективность корригирующих склероукрепляющих операций.
Консервация тканей в растворе тимола имеет
следующие преимущества:
- мощный и быстрый бактерицидный эффект;
быстро нарастает и стабилизируется
консервирующий эффект;
- короткий цикл предоперационной подготовки;
- механическая устойчивость тканей к условиям
хранения и транспортировки.
- универсальность и возможность использования
донорских тканей в экстремальных ситуациях.
Аорта - это коллагеново-эластический каркас. Обладая
высокой прочностью, эластичностью, низкой антигенной
активностью, устойчивостью к инфекциям аорта применяется
при склероукрепляющих операциях на глазном яблоке по
поводу близорукости.
31
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Используется
консервированная
аорта
и
при
пластических операциях на веках, патологии орбиты и др.
Ценными пластическими свойствами обладает и
консервированная в тимоле твёрдая мозговая оболочка.
Высокой прочностью и эластичностью обладает
аллогенный перикард. Пересаженный, консервированный в
тимоле перикард, хорошо переносится больными, не вызывает
никаких побочных реакций. Перикард содержит малоактивные
антигены, а поэтому при трансплантации он вызывает слабые
иммунные реакции, что позволяет широко применять его в
восстановительной хирургии.
Практическое использование рёберного хряща обусловливается его ценными физиологическими особенностями. Хрящевая ткань относится к бессосудистым тканям,
устойчива к инфекции и хорошо переносит перерывы в
доставке питания, что обеспечивает её жизнеспособность в
условиях трансплантации.
Кроме того, хрящ обладает слабыми антигенными
свойствами. 0,2 % водный раствор тимола, обладая
антисептическим и консервирующим свойством, позволяет
длительно, до нескольких лет, сохранять его без явлений
деструкции. Применяется хрящ для создания подвижной
культи после удаления глазного яблока, для восстановления
формы век, глазницы и т.д. (Зайкова М.В., 1980г.).
Антисептические растворы: спирт, формалин, тимол
- доступны, экономически выгодны, консервация в них
проста. Но они приводят к необратимым процессам в тканях:
дегидратация их приводит к денатурации белка. Ткани теряют
свои физические свойства - плотность, прочность и др.
Нарушается морфологическая структура, теряется их
пластичность. Такой пластический материал является не
жизнеспособным. Метод консервации не пригоден для такой
идеально прозрачной оболочки глаза, как роговица.
32
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Использование антисептических растворов ведет к
разрушению ферментативных систем, вследствие чего процесс
аутолиза в тканях прекращается, и возникают необратимые
изменения в тканях. Поэтому для консервации роговой
оболочки глаза его применение нецелесообразно, так как вновь
восстановить ферментативный процесс невозможно.
Существуют исследования по консервации глазных
тканей в среде Борзенка - Мороз и в модифицированной
консервационной среде Борзенка - Мороз с карнозином
(Г.В.Джавришвили,
2004).
За
счет
повышения
антиокислительных свойств и стабилизации клеточных
мембран авторами получены высокие биологические
результаты кератопластики при применении роговицы,
консервированной в предложенных средах.
Однако эти методы нельзя считать общедоступными изза дороговизны сред и кратковременности сроков хранения в
них
тканей
(роговая
оболочка
сохраняет
свою
жизнеспособность до 6 дней).
Изучалась консервация роговой оболочки при
температуре от 0°С до +4°С в гамма - глобулине в сроки от 12
часов до 3-х месяцев (Т.И.Ерошевский, Н.МЛхина, 1975).
Доказано, что консервация роговицы донора в гамма
- глобулине значительно ослабляет и предупреждает явления
тканевой несовместимости, о чем свидетельствовало отсутствие
(прорастание сосудами) донорского трансплантата у больных.
Однако дефицит гамма - глобулина не позволяет считать
данный метод общедоступным.
33
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
8. Физические методы консервации донорских тканей.
Замедление
или
приостановление
аутолиза
(ферментативного процесса) в тканях может быть достигнуто
применением физических методов (низкие температуры). С
помощью охлаждения и замораживания, ткани вводятся в
состояние «анабиоза». Метод консервации считается
приемлемым, так как при нем возможно восстановление в
тканях первичного ферментативного процесса.
Замораживание имеет преимущества перед охлаждением. Для замораживания тканей апробированы различные
температурные режимы: -25°С, -50°С, -70°С (жидкая
углекислота), -183°С (жидкий кислород), - 196°С (жидкий
азот) и -269°С (жидкий гелий).
Метод замораживания возник в результате изучения
влияния на клетки холода, вызывающего анабиоз, а также
средств защиты от разрушающего действия низких
температур. При этом оказались важными следующие три
обстоятельства.
- Во-первых, замораживание вызывает в клетках
тканей состояние глубокого анабиоза с полным или почти
полным прекращением ферментативных процессов, которые
при определенных условиях можно восстановить.
- Во-вторых, тканевая жидкость при быстром и
глубоком замораживании переходит в аморфное или
мелкокристаллическое состояние.
- В третьих, в размороженных тканях можно
восстановить структуру, пластичность и биологические
качества путем быстрого согревания при температуре +40°С
(Коваленко П.П., 1975).
Замораживание делят на 2 вида: обыкновенное
замораживание (до - 20°С) и глубокое замораживание (от 79°С до -196°С).
34
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Не менее важна скорость замораживания тканей (очень
медленно, быстро и очень быстро). Глубина замораживания
определяется скоростью замерзания тканей в секундах и
полученной низкой температурой.
Различные виды тканей и клеток по разному переносят
воздействие низкой температуры.
Целесообразность применения низких температур для
консервации обосновывается значительным понижением
процессов обмена веществ в охлажденной ткани. Используется
температура от -5°С до -269°С. Ткани для пластики
замораживаются в автоматических криогенных установках.
Однако в процессе замораживания в тканях образуются
кристаллы льда, что приводит к нарушению структуры
консервируемой ткани. Для устранения этого недостатка
замораживание тканей проводится под защитой 15-20%
раствора глицерина, обезвоживающего ткани, таким образом,
задерживается начало и скорость кристаллизации межтканевой
жидкости. При этом лучше сохраняется морфологическая
структура тканей, снижается в них антигенная активность,
длительно сохраняется их жизнеспособность (Н.М.Савушкина,
1962; С.Е.Стукалов, 1978; В.В.Волков с соавт., 1981).
Консервирование
замораживанием
позволяет
создать
достаточный запас тканей, предназначенных для последующей
трансплантации с достаточно большим сроком хранения. В
этом важное достоинство метода.
Однако метод замораживания широкого применения в
практике не нашел. Это объясняется сложностью самого
процесса консервации, необходимостью в дорогостоящем
специальном оборудовании, сложностью его технического
обслуживания.
К физическим методам консервации относится
лиофилизация.
35
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Лиофилизация
в
переводе
с
греческого
обезвоживание. Это один из методов длительной консервации
тканей.
При
лиофилизации
происходит
быстрое
замораживание и сублимация - высушивание в специальных
аппаратах под вакуумом. Переход воды из замороженного
состояния непосредственно в водяные пары, (минуя жидкое
состояние), называется возгонкой.
Замораживание производится в смесях сухого льда со
спиртом или ацетоном, в жидком азоте или в
низкотемпературных холодильниках. После высушивания в
вакуумных аппаратах ткани хранятся в герметически закрытой
посуде.
Приоритет в создании аппаратуры для высушивания
тканей из замороженного состояния принадлежит Г.И.ЛаппаСтарженецкому, который в 1921 году получил патент на
«Способ консервирования растений и трупов животных или их
частей обезвоживанием при помощи сублимации». В
последующем аппараты для лиофилизации тканей описали:
Kreuz, П.П.Коваленко с соавт., Е.Н.Саутин, Komender,
Ostrowski и др.
Принцип работы лиофилизаторов состоит в следующем. Трупные ткани в стерильном состоянии помещаются в
специальные ампулы, затем осуществляется глубокое
замораживание тканей при температуре -183° или -196°С.
Затем ампулы с замороженными тканями переносят в
холодильник, в котором поддерживается температура - 40°С
или - 60°С. Ампулы при помощи резиновых трубок
присоединяются к вакуумному аппарату. При лиофилизации
влага, находящаяся в тканях, минуя жидкое состояние,
возгоняется и адсорбируется в специальных «ловушках», в
которых
находится
или
серная
кислота,
или
дегидратированный гипс. Продолжительность процесса
лиофилизации зависит от свойств и величины самой ткани, а
также от степени разрежения. Чем меньше размеры взятой
ткани и более высокий вакуум, тем
36
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
быстрее происходит отнятие воды. Лиофилизация обычно
заканчивается при наличии остаточной влажности от 2% до
10% (в зависимости от биологических особенностей ткани). В
тканях, помещенных в вакуум, значительно снижаются или
прекращаются ферментативные процессы. При этом степень
снижения аутолитических процессов прямо пропорциональна
степени обезвоживания. Так, если в лиофилизированных
тканях влага остается в пределах 2%-3%, то ферментативные
процессы почти прекращаются. В тех же случаях, если в
тканях влажность в пределах 10%, то в них еще сохраняются
обменные
процессы.
Эти
показатели
зависят
от
гистогенетического характера и размера ткани, а также от
возраста донора (П.П.Коваленко, 1975; А.С.Леонтюк,
Б.А.Слука, 2000).
После окончания процесса лиофилизации, ампулы с
тканями отключаются от лиофилизатора. Запаивание их
производится рядом с аппаратом, что позволяет не нарушать
ни вакуума, ни стерильности тканей. После маркировки
ампулы переносятся в обычный шкаф для постоянного
хранения при комнатной температуре. Перед клиническим
использованием лиофилизированные ткани подвергаются
регидратации в физиологическом растворе с антибиотиками в
течение 2-6 часов. К этому моменту процент влаги в тканях
достигает исходных величин, восстанавливается пластичность
и эластичность тканей.
Преимущество лиофилизации тканей перед методом
глубокого замораживания состоит в следующем:
лиофилизированные ткани могут годами храниться при
комнатной температуре, при правильном режиме регидратации
можно восстановить физико-химические, пластические и
структурные качества таких тканей, как перикард, аорта,
твердая мозговая оболочка.
Однако методика лиофилизации сложна и громоздка.
Рабочий цикл лиофилизации от 5 до 14 суток.
37
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Эти ткани более хрупкие, чем замороженные. А роговая
оболочка, теряя жизнеспособность, не обладает пластическими свойствами и не может быть использована для
восстановления зрения.
Существует метод обезвоживания донорских тканей
над силикагелем. Метод предложен в 1959 году Раугап и
Pouliguen. Силикагель - высушенный гель двуокиси кремния.
Силикагель - химическое соединение, обладающее
пористостью,
благодаря
чему
способно
поглощать
определенный процент влаги к сухому весу ткани. Методика
заключалась в заворачивании роговицы с каймой склеры в
стерильный целлофан и помещении в герметически
закрывающийся сосуд, содержащий силикагель (Раугап, 1960).
Н.Г.Гольдфельд (1967) предельно упростила методику
консервации над силикагелем и сделала ее доступной даже в
условиях периферийного глазного стационара.
По методу автора роговица с широкой каймой склеры
укладывалась на алюминиевый блок и помещалась в бюкс с
силикагелем. Подобная роговица сохранялась прозрачной до
3-х лет, однако, она становилась не жизнеспособной и не
могла быть использована для всех видов операций на
роговице.
Позже В.К.Степанов (1972) модифицировал методику
Н.Г.Гольдфельд. Роговица с каймой склеры укладывалась на
полусферу из органического стекла. Радиус кривизны
полусферы соответствует радиусу кривизны человеческого
глаза. Уложенная таким образом донорская ткань помещалась
в бюкс с прокаленным силикагелем. Крышка бюкса заливалась
парафином.
Метод длительной консервации тканей над силикагелем применяется до сих пор. К неоспоримым преимуществам метода относится возможность
38
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
использования трансплантатов после нескольких лет
консервации (3-5 лет). В ургентных ситуациях такой донорский
материал для лечебных целей является незаменимым.
Исследования многих авторов свидетельствуют об
улучшении антигенной характеристики роговицы при
длительном ее хранении в силикагеле (Н.Г.Гольдфельд, 1967;
В.К.Степанов, 1972).
Однако на этот счет существует и другая точка зрения.
По мнению С.Е.Стукалова, роговица, высушенная в силикагеле
и регидратированная, будучи не жизнеспособной, не в
состоянии
вызвать
трансплантационный
иммунитет,
отсутствие которого при пересадке не всегда оказывается
благоприятным признаком.
Донорские ткани, консервированные обезвоживанием,
требуют разного времени для регидратации в зависимости от
способа высушивания. Обезвоженная роговица для регидратации должна находиться в физиологическом растворе от 10 до
30 минут. С удлинением времени регидратации происходит
изменение структуры роговой оболочки, что вызывает в
послеоперационном периоде отек трансплантата, а это
сказывается на результатах приживления.
При применении роговицы, консервированной над
твердыми обезвоживающими средствами (силикагелем,
ангидроном, циалитом), возникает определенная трудность при
наложении швов. Однако, несмотря на недостатки, метод
консервации позволяет сохранять донорские ткани пригодными для трансплантации в течение нескольких лет.
Из физических методов имеет право на существование
альтернативный способ консервации тканей в условиях вакуума (В.Н.Канюков, 2005).
39
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Упоминаний
о
применении
вакуума
для
консервации донорских тканей в офтальмохирургии в литературе нет.
Однако вакуум широко применяется в медицине при
лечении
ряда
заболеваний:
инфаркта
миокарда,
остеохондроза, артрита (А.М.Жибриль, 1990), бронхиальной
астмы, хронических риносинуситов (С.К. Жуков, 1998), в
терапии раневых процессов (Ю.А.Давыдов, 1975) и т.д.
Вакуумная система (Приложение 1) изготовлена
фирмой Zepter в Menfe Jndustria, Sp.A (Италия), основана на
современных высоких промышленных технологиях. Это
уникальная, всемирно известная система нашла широкое
применение в пищевой промышленности для подготовки,
хранения и быстрого здорового приготовления любого вида
продуктов. При сроке хранения от 10 дней до года в
продуктах сохраняются все питательные вещества (белки,
минеральные вещества и т.д.), сохраняется их внешний вид и
органолептические свойства.
Это дает основание полагать, что в условиях
вакуума возможна длительная сохранность и донорских
тканей, что обеспечивается предотвращением размножения
бактерий и замедлением процессов аутолиза и перекисного
окисления липидов цитологических структур.
Система представляет собой вакуумный насос для
откачивания воздуха (Приложение 2) и контейнера для
хранения материала (Приложение 3). Эргономичная форма
насоса удобна в обращении, он имеет легко переносимую
удобную подставку. Контейнер представляет собой
стеклянную ёмкость, он снабжен специальной сеткой
(Приложение 4), изготовленной из эластомера.
40
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Сетка выполняет не только функцию подставки для
размещения емкостей с донорскими тканями, но и служит для
отделения влаги из тканей. Максимальное разряжение,
которое можно получить при использовании данной системы
0,5 бар. Герметичность емкости контейнера обеспечивается
клапаном в центре крышки и силиконовой прокладкой,
проходящей по её краю. Крышка универсальна, изготовлена
из ударопрочного нетоксичного поликарбоната LEXAN. Она
имеет календарное кольцо (Приложение 5) для установки
даты вакуумирования.
Ёмкость практична, безопасна, удобна в обращении,
легка, устойчива к нагреванию и холоду, легко моется. Её
можно стерилизовать, она не взаимодействует с химическими
веществами.
Получен Патент «Способ консервации донорских
тканей для офтальмохиругии» (Приложение 6).
Способ консервации донорского материала в
вакууме осуществляетсяиследующей последовательностью
операций:
1. Донорский материал (трансплантат) укладывают на
специальные подставки (Приложение 7, 8), которые
устанавливают на сетку, расположенную на дне
пластмассового контейнера с крышкой с силиконовой
прокладкой. В центре крышки имеется отверстие с
клапаном, к которому присоединяется вакуумный насос.
2. Откачивают воздух из контейнера до 0,5 атм.
3. Отсоединяют контейнер от насоса и помещают его в
бытовой холодильник, где поддерживают температуру
порядка (+)2°С - (+)4°С.
Проведенные
исследования
позволили
выявить
сохранность гистоструктуры и жизнеспособности в вакуумированных тканях. К тому же метод вакуумной консервации
прост и экономически выгоден.
41
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
9. Гипербарическая оксигенация и гипотермия
как метод лечения заболеваний
Гипербарическая оксигенация нашла широкое применение в лечении как соматических, так и глазных заболеваний.
Насыщение тканей кислородом благоприятно действует на
различные патологические состояния организма.
Основоположником метода гипербарической оксигенации является выдающийся голландский ученый J.Boerema
(1956), который доказал, что при условии повышенного
барометрического давления кислорода (Р=3 атм) и гипотермии
повышается безопасность операций на сердце. В СССР
пионером лечебного использования гипербарической оксигенации является К.М.Рапопорт (1959, 1971). Он изучал действие гипербарической
оксигенации при лечении отравлений окисью углерода и
аэроэмболии. Основной областью клинического применения
гипербарической оксигенации становится профилактика
кислородного голодания и его купирование.
Метод гипербарической оксигенации основывается на
физических законах растворимости газов в жидкостях и
предусматривает
насильственное
увеличение
запасов
кислорода в организме.
Лечебный аффект повышенного давления кислорода
основывается на двух факторах: повышение напряжения
кислорода в артериальной крови, которое имеет значение
заместителя гемоглобина, и метод создания значительных
запасов кислорода в организме. Гипероксигенация тканей
открыла
перспективу
этиопатогенетического
лечения
анаэробной инфекции (Boerema, Brummelkamp, 1960). В
условиях
гипербарической
оксигенации
кислород
в
значительных количествах поступает в пораженные ткани и
угнетает действие бактерий (К.Тенев, 1970; С.Н.Ефуни,
Т.Н.Гиоргобиани, Л.А.Сергеев, 1973; E.Burchard, 1971;
42
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
G.Blaise,1977; M.Lamy, 1977). Метод гипербарической
оксигенации эффективен при лечении столбняка, на что
указывают (Ю.Н.Белокуров,Ю.А.Водолазов, Н.Каменный,
1971; H.Kreuscher, 1972), при отравлении угарным газом
(Г.Л.Ратнер, Н.В.Левашов, А.А.Ненашев и др., 1969; Б.В
.Петровский, С.Н. Ефуни, 1975), цианидами и барбитуратами
(К.П.Иванов, 1959; Ю.Н.Белокуров, И.Кружилина и др., 1971).
Немало работ посвящено лечению гипербарической оксигенацией неотложных состояний сердечно-сосудистой системы и
кровообращения (Э.Н.Лернер, И.П.Березин и В.А. Пигарев,
1969; В.С.Тюмкин, 1970; А.Н.Каменный, 1971; Г.Л.Ратнер,
Д.Измайлова,
1972; В.В .Российская с
G.
соавт., 1978; A.N. Smith, 1961; D.Steward, 1977; R.E.Loder,
1977; L.V.Vanina, 1977).
Г ипербарическая оксигенация повышает безопасность
операций на сердце, особенно в хирургии врожденных пороков
синего типа (В.И.Бураковский, Л.А.Бокерия, 1973; Б.В.Петровский, С.Н.Ефуни, 1978).
Описаны результаты лечения гипербарической оксигенацией хронической коронарной и легочной недостаточности, мозговой комы различной этиологии. С успехом
гипербарическая оксигенация применяется при циррозе
печени, почечной коме (С.Н.Ефуни, Ю.И.Бочаров, А.И.Голубев, М.Д.Гинодман, 1973; С.Н.Ефуни, 1977). Весьма перспективна методика применения гипербарической оксигенации
в комплексном лечении облитерирующих заболеваний сосудов
нижних конечностей (Н.П.Бащук, 1968; Т.Е.Гнилорыбов с
соавт., 1970; Б.В.Петровский, С.Н.Ефуни, В.Л.Лукич и др.,
1971; J.Besznyak, E.Somogyi, Nemes, 1970).
Широко
проводится
реанимация
в
условиях
гипербарической оксигенации (Б.В.Петровский, А. Н.Ефуни,
1970; Г.Л.Ратнер, 1971; В.Л.Лукич с соавт., 1975).
43
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В области онкологии гипербарическая оксигенация
также занимает прочное место. Широко проводится
радиотерапия в сочетании с гипербарической оксигенацией
при различных локализациях рака (Ю.Н.Белокуров с соавт.,
1972; М.А.Волкова с соавт., 1973; S. Dische, F. Senanayake,
1972; Н.Р. Plenk, 1977; J.Schewell, 1977; S. Dische, 1977). На
применение
гипербарической
оксигенации
в
нейрохирургической клинике указывают М.В.Эверте, Г.Н. Андреев,
А.А.Грислитис, 1972; при черепно-мозговых травмах, аневризмах сосудов мозга, нейроинфекции, опухолях мозга. В.Н.
Fischer
(1969)
проводил
лечение
менингомиэлоцеле
повышенным давлением кислорода.
Есть сообщения Г.А.Жвания с соавт. (1971) о
применении гипербарической оксигенации в педиатрии при
асфиксии новорожденных, бронхиальной астме, врожденных
пороках сердца и др. заболеваниях. P.O. Barr, W. Enfors,
G.Eriksson (1972) сообщили о лечении кислородом под
давлением в дерматологии.
Что касается применения метода гипербарической
оксигенации в офтальмологии, то сообщения по этому
вопросу немногочисленны.
Б.М.Вовси (1966) применил этот метод при лечении
прободных ран роговой оболочки в эксперименте. Автор
установил замедление развития волокнистых структур
роговичного рубца.
Е. Sindlerova (1970, 1973) отметила, что гипербарическая оксигенация у больных со спазмом ретинальных
сосудов увеличивала продолжительность сохранения остроты
зрения при прекращении ретинальной циркуляции. Описаны
случаи лечения больных с различными формами ретинопатий
(G.E. Jayle, 1969). Подобные исследования были проведены
P.Navratil (1970). Им же изучалось действие гипербарической
оксигенации при ожогах роговицы известью, при глаукоме.
Автором
44
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
отмечено благоприятное воздействие на поле зрения при
глаукоме и на заживление обожженной роговицы. Результаты
наблюдений
P.Navratil
при
глаукоме
подтверждают
К.М.Рапопорт, Е.Е.Розов, Б.А.Хейфец- Тетельбаум (1971).
О возможностях баротерапии в офтальмологии
сообщают также И.А.Веллер (1973, 1981) - при герпетическом
кератите,
кератоувеитах,
травматическом
кератоирите,
иридоциклите; A.M. Simoes (1973) - при герпетическом
кератите; H.Viallefout, C.Boudet, G. Gailar (1969)
- при
герпетическом кератите и тромбозе центральной артерии
сетчатки.
На положительный эффект баротерапии при заболеваниях сетчатки и зрительного нерва указывают Б.В.Петровский
и С.Н.Ефуни, 1978. М.П.Елинский, А.М.Рафиков (1975)
отмечают хороший эффект гипербарической оксигенации при
нарушении зрения после ангиографии.
О результативности гипербарической оксигенации при
лечении больных с метилалкогольным амаврозом, с диабетической ретинопатией, глаукомой, атрофией зрительного нерва
сообщают Г.А.Андреев, Г.Р.Дамбите с соавт. (1978).
О лечении некоторых форм сосудистой патологии глаза
пишут О.Д.Кузьминов, Е.Н.Кадышева, Л.Л.Николаев (1980),
Л.П.Догадова, Ю.Г.Гребенец (1983), Э.Ф.Нескреба, Д.И.Атанов
(1983).
О геронтологических аспектах применения гипербарической оксигенации в офтальмологии сообщает С.И.Харлап с
соавт., 1980.
Метод гипербарической оксигенации находит широкое
применение в комплексной терапии при высокой осложненной
близорукости, дегенерации сетчатой оболочки, частичной
атрофии зрительного нерва (Н.М.Митрохина, И.В.Сизова,
1982), при поражениях макулярной области глаз (С.И.Харлап,
45
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Э.Б.Вернекин, 1977), при лечении диабетической ретинопатии
(Л.К.Дудникова, С.П.Молоканова, 1983).
Ю.Н.Ласкаржевским (1980, 1982) проведена работа по
кислородному обеспечению роговичного аллотрансплантата в
условиях гипербарической оксигенации. Автор отмечает
положительный эффект данного метода, выражающийся в
уменьшении васкуляризации трансплантата, что, вероятно,
связано с иммунодепрессивным действием кислорода под
повышенным давлением.
Новые перспективы открыло применение метода
гипербарической оксигенации для консервации органов и
тканей с целью их пересадки.
46
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
11.
Консервация органов и тканей в
гипербарической оксигенации при гипотермии
условиях
Метод гипербарической оксигенации основан на
диффузии кислорода в толщу тканей. Сочетание гипербарической оксигенации с гипотермией позволяет усилить действие
каждого из них в отдельности, так как гипотермия (+2° С, +4°
С)
уменьшает
токсическое
влияние
кислорода
на
изолированные органы и снижает метаболизм до 2%-4% от
исходного уровня (Г.И.Лыскин, Г.М.Соловьев, 1968; J.H.Bloch
et al., 1964; W.G.Manax et al., 1965; C.M.Bamard, J.R.W.
Ackerman, 1966). Таким образом, одновременное применение
гипотермии и барооксигенации действует на трансплантат в
двух направлениях: с одной стороны, гипотермия уменьшает
окислительные процессы, и тем самым, увеличивает время
жизнеспособности тканей, с другой стороны, оксигенация
позволяет ликвидировать кислородную недостаточность и
предотвратить развитие обменных процессов по анаэробному
пути.
Гипербарическая
оксигенация
с
гипотермией
используется для сохранения органов с 1964 года.
Гипербарическая оксигенация, как метод защиты
сердца, легких, почек, печени широко апробируется в
эксперименте на всех этапах консервации (J.Feemster с соавт.,
1970).
На литературных данных известно сообщение
W.G.Manax с соавт. (1965) об успешной пересадке почек у
собак после 24 часового хранения in vitro. Авторы успешно
консервировали сердце, легкие, печень собак в течение суток в
специальных камерах с повышенным давлением. Ими же
подчеркивается пролонгирование сроков консервация при
увеличении давления кислорода с 3-х до 7 атм.
47
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Исследованиями L. Ladaga, D. Nabseth (1967)
разработан достаточно простой метод консервации почки
собак. Почку, лишенную на 24 часа кровоснабжения, в
условиях гипотермии и гипербарической оксигенации,
консервировали и реимплантировали донору, затем через 2-3
недели удаляли противоположную почку. Хранение в течение
суток и аутотрансплантация единственной почки в
значительном проценте случаев длительно обеспечивала
нормальную почечную функцию животного. С помощью
органа, консервированного более суток, длительную
удовлетворительную почечную функцию достигать не
удавалось. Авторами сделан вывод, что метод представляется
подходящим для применения трансплантации почки трупа.
Они же высказали мысль о возможной организации почечного
банка. По данным авторов увеличение давления кислорода не
оказывает существенного влияния на результаты консервации.
Подобного же мнения придерживается М.В.Биленко,
Л.Г.Манагадзе (1970), L.E.Rudolf, S.Mandel (1968).
Изучена функциональная жизнеспособность изолированных трупных почек собак, консервированных в условиях
гипербарической оксигенации и гипотермии в течение 12, 24,
48 часов при длительной нормотермической перфузии
(Ю.М.Лопухин с соавт., 1969). Авторами сконструирован
аппарат по типу экспериментальной лабораторной установки
переносного типа, позволяющей проводить оксигенацию под
повышенным давлением.
Консервация проводилась при давлении кислорода
3 - 3,5 атм, при температуре - 5°С. Результаты исследований
показали, что функция трупных консервированных почек, хотя
несколько и снижена, но остается достаточной при перфузии в
течение 12 часов для использования их при пересадке.
Н.А.Барышниковой, Э.Г.Шифриным, Э.М.Коган (1970)
проведены морфо-функциональные параллели при изучении
48
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
почек, консервированных в условиях гипотермии в
гипербарии. Исследования проводились в барокамере при
давлении 3,5 атм, температуре +4°С. Почки выдерживались
предварительно в физиологическом растворе в среде Хенкса
12, 24, 48, 72 часа. Авторами отмечено снижение
функциональной способности почек через 12 часов. Через 24
часа происходят значительные функциональные нарушения.
Функционально нежизнеспособной становится почка через 48
часов. Через 72 часа наступает полное разрушение почечной
ткани. В контрольных же почках произошли значительно
большие изменения, нежели, помещенных в условия
гипербарии в те же сроки. Таким образом, данные авторов
подтверждают благоприятное воздействие гипербарической
оксигенации на органы при их консервации.
Что касается мнения зарубежных авторов по вопросу о
консервации почки, то большинство из них: A.Tiefengraber,
1973; J.Kamper, 1973; R.Pieper, 1973 и др. считают, что
гипербарическая оксигенация при гипотермии продлевает
сроки консервации. После трансплантации такая почка
функционирует как единственная, сохраняя жизнь животным.
Существует немало работ, посвященных консервации
сердца в условиях гипербарической оксигенации.
Так, К.С. Митин, Г.В.Савельев, Н.М.Клейманова и др.
(1971) изучили морфологию состояния ультраструктуры и
степень активности ферментных систем изолированногосердца,
вышеуказанным способом. Авторами отмечено, что после 4
часов
консервации
мышечные
клетки
сохраняют
жизнеспособность. При консервации в течение 8-12 часов
происходят изменения, свидетельствующие о дистрофических
явлениях, по-видимому, обратимого характера. Через 20 часов
наступает распад и лизис цитоплазмы, указывающие на необ-
49
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ратимые процессы в миокарде. Результаты исследования
предполагают
наличие
окислительных
реакций
и
пластического обмена в миокарде при его консервации в
условиях сочетания гипотермии и гипербарической оксигенации.
Подобного же мнения в смысле сроков консервации
сердца (4 часа) в условиях гипербарической оксигенации
придерживаются
на
основании
своих
исследований
А.Н.Макаров (1970), А.А.Чумаков с соавт. (1972) и др.
По вопросу о консервации других органов методом
гипербарической
оксигенации
данные
литературы
немногочисленны. Так, В.А.Емельянов (1967), П.П.Коваленко,
В.А.Емельянов (1968), проводили консервацию печени при
температуре +8°С методом непрерывной перфузии с
одновременной оксигенацией раствора. Авторы пришли к
мнению об удлинении биологической активности печени после
удаления ее из организма. Подобное мнение существует и у
A.G.Ridell, A.Hinchliffe, 1972.
Таким образом, исходя из вышеизложенного, метод
консервации органов и тканей в условиях гипербарической
оксигенации при гипотермии, является весьма перспективным.
Консервация тканей глазав условиях гипербарической
оксигенации при гипотермии до семидесятых годов не
проводилась.
Впервые в условиях эксперимента гипербарическая
оксигенация для консервации, в частности, роговицы стала
применяться в глазной клинике Оренбургского медицинского
института (Д.Я. Винникова, В.К.Черкасов, 1972).
Авторами
была
сконструирована
специальная
барокамера – модификация СОУД-1(Ю.М. Лопухин, Э.Г.Шифрин, Б.М.Чекнев, (1969)), в которую донорские глаза
помещались в специальных тигельках из нержавеющей стали
50
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
или в обыкновенных лабораторных бюксах на горизонтальной
подставке.
Предварительно
производилась
аспирация
внутриглазной жидкости с замещением ее кислородом. Вся
установка помещалась в рефрижератор с температурой +2°С,
+4°С, давление в камере поддерживалось 2 атм.
Описанным способом авторами проведена консервация
28 кроличьих глаз. Было показано, что в сроки до 45 суток
консервации, роговицы оставались прозрачными, нормальной
толщины. Первые результаты, полученные авторами, дали
основание полагать, что консервация роговицы в оксигипербарической среде может удлинить сроки сохранности
последней.
Предложенная специальная барокамера отличалась
громоздкостью и сложным техническим оборудованием.
Дальнейшая работа авторами не проводилась.
В 1973 году (Л.Ф.Линник, Р.Н.Подопригора) сконструирована барокамера для проведения исследовательских работ
по консервации донорских глаз в условиях гипербарической
оксигенации и гипотермии: «Барокамера для консервации
роговицы оксигенацией». (Удостоверение на рационализаторское предложение № 113 от 11.07.1973). Барокамера из
нержавеющей стали. Материал биологически инертный,
допускающий применение антисептических средств, легко
очищается от загрязнений.
В конструкцию камеры, по сравнению с предложенной
в 1972 г. установкой, внесены значительные элементы
упрощения: полностью устранена система трубопроводов,
ухудшающая условия герметизации камеры, несущая
конструкция, уменьшено количество манометров. В установке
отсутствуют перекрывающие краны, значительно изменена
крышка барокамеры, что упрощает ее изготовление.
51
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
В 2005 году (В.Н.Канюков, Р.Н.Подопригора) в
барокамере заменен ряд технических узлов.
Благодаря конструктивным изменениям достигнуто
значительное уменьшение веса и габаритов камеры, а также
улучшены эксплуатационные качества при консервации
донорских
тканей.
Барокамера
надежно
сохраняет
герметичность, значительно дешевле в изготовлении по
сравнению с другими образцами.
Уменьшение габаритов камеры позволяет удобно
помещать ее в бытовой холодильник.
Имеется патент: «Барокамера для консервации
донорских тканей» (№ 62810 от 18.01.2007) см. (Приложение
9).
Техническая характеристика барокамеры
Барокамера состоит из толстостенного цилиндра из
нержавеющей стали объемом 5,0 литров, крышки с пазом, в
котором запрессована уплотняющая резиновая прокладка, и
фиксирующих болтов с гайками. В стенки цилиндра встроены
2 вентиля для заполнения камеры кислородом и стравливания
его, а также манометра для определения давления кислорода
внутри камеры. Размеры барокамеры: высота - 190 мм, диаметр
- 197 мм, вес - 10 кг (Приложение 10, 11, 12).
В полость камеры помещаются плексиглазовые
перфорированные полочки, соединенные для удобства
манипуляций по центру металлическим стержнем в
своеобразный блок (Приложение 13). На полочки помещаются
донорские ткани и ртутный термометр.
Для консервации из донорского глаза иссекается
роговица с каймой склеры, укладывается на специальные
полусферы и помещается в барокамеру (Приложение 14,
15,16).
52
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Полусферы выполнены из полиметилметакрилата
(ПММА), с множеством перфораций диаметром 1,5 мм.
Радиус полусферы соответствует радиусу внутренней
поверхности роговой оболочки человека, что обеспечивает
абсолютную
конгруэнтность
внутренней
поверхности
роговицы и полусферы. Имеющиеся отверстия способствуют
лучшему газообмену, что имеет значение при длительной
консервации донорских тканей.
Для консервации склеры имеется специальное
устройство в виде четырех «лепестков» (Приложение 17), что
позволяет сохранять ее форму (Приложение 18). Имеется
Патент на полезную модель: «Емкость для консервации
донорской склеры» (В.Н.Канюков, 2004). (Приложение 19).
Перед заполнением кислородом крышка барокамеры
герметизируется накидными винтами, верхний вентиль
соединяется шлангом с системой для подачи кислорода. В
течение 2х-3х минут производится продувка камеры
кислородом, поступающим от больничной газовой сети, после
чего закрытием нижнего вентиля достигается нужное давление
кислорода в камере, и шланг после закрытия верхнего вентиля
отсоединяется. Барокамера помещается на полку бытового
холодильника (Приложение 20). Используется давление - 2-3
атм. Температура в камере составляет +2°С, +4°С.
Декомпрессия камеры проводится в два этапа: сброс
давления путем открытия обоих вентилей на камере, открытие
крышки после предварительного отвинчивания накидных
винтов.
Особенности эксплуатации.
В барокамере создаются предпосылки не только для
сохранения жизнеспособности донорской ткани, но и не менее
выгодные условия для сохранения микроорганизмов, что чрев-
53
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ато опасными последствиями для организма реципиента в
послеоперационном периоде. Для предотвращения этих
осложнений проводится тщательная обработка пустой
барокамеры перед закладкой донорской ткани. В качестве
дезинфицирующих средств используются современные
растворы, не оказывающие на донорскую ткань отрицательного воздействия, после чего внутренняя поверхность
протирается насухо и заполняется материалом для консервации.
Не менее важным является соблюдение режима
гипероксигенации. С этой целью проводятся регламентные
работы по контролю за правильностью показаний манометра,
определяющего давление кислорода внутри барокамеры.
Избыточная оксигенация (ГЪО) в сочетании с
гипотермией дает возможность резко замедлять процессы
перекисного окисления липидов в клетках, что ведет к
сохранности не только гистоструктуры, но и жизнеспособности тканей (от 3-х до 9 месяцев), а это расширяет
показания к оперативным вмешательствам на органе зрения и
его придаточном аппарате.
Преимущества консервации донорских тканей в условиях
гипербарической оксигенации при гипотермии.
Преимущества консервации донорских тканей в
условиях гипербарической оксигенации при гипотермии
1. Гипербарическая оксигенация позволяет ликвидировать
кислородную недостаточность в консервированных
тканях.
2. Гипотермия уменьшает окислительные процессы,
происходящие в тканях при консервации.
3. Гипербар ическая оксигенация в сочетании с
гипотермией позволяет усилить действие каждого из
54
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
них в отдельности, так как гипотермия (t+2°C, +4°С)
уменьшает токсическое влияние кислорода на
изолированные консервированные ткани и снижает
метаболизм в них до 2% - 4% от исходного уровня.
4. Донорские ткани, консервированные в условиях
гипербарической оксигенации при гипотермии не
только длительно сохраняют свою структурную
характеристику (до нескольких лет), но остаются
жизнеспособными, а это открывает возможность
широко использовать их в офтальмохирургии при
различной патологии, как органа зрения, так и его
придаточного аппарата.
55
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Заключение
Проблема трансплантации - одна из сложных в
хирургии, она может быть решена путем тщательного изучения
не только медицинских, но и юридических, социальных и
нравственных аспектов.
На современном этапе научно разработаны методы
консервирования
донорских
тканей
в
течение
продолжительного времени. Это способствует обеспечениютрансплантолог
пластическим
материалом
и
создает
условия
для
функционирования «тканевых банков».
Учитывая большую потребность для клиники в роговой
оболочке, как донорской ткани, экспериментально и
клинически обоснована возможность применения новых
способов длительной консервации роговицы в условиях
вакуума и гипербарической оксигенации.
Проведенный анализ отечественной и зарубежной
литературы по вопросам кератопластики позволяет подойти к
нему проблемно и выделить три основных аспекта:
I. Общегосударственная значимость проблемы —► она определяется частотой поражения роговой
оболочки из-за ее заболеваний и травм. В настоящее время
насчитывается 50 тысяч инвалидов по зрению с патологией
роговицы.
—► экономическим ущербом - это потеря рабочего
времени при поражениях роговой оболочки.
—► финансовыми потерями, которые несет государство
при оплате больничных листов по лечению этой категории
больных.
II. Социальный аспект - заболевания роговицы зачастую
приводят к ее помутнению, а, следовательно, к снижению или
потери зрения, что неизбежно ведет к потере профессии, а для
семьи - потери кормильца.
56
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
III. Медицинский аспект заставляет переосмыслить подход к
проблеме заготовки, консервации и показаниям пересадки
роговицы.
Развитие
новых
технологий
в
пластической
офтальмохирургии тесно связано с изучением особенностей
пролиферации и цитодифференцировок трансплантируемых
объектов. Для успешной трансплантации ведущим является
сохранение фибриллоархитектоники в трансплантатах.
Для мировой трансплантологии ближайшей перспективой развития пересадки органов и тканей является ксенотрансплантация и дальнейшая разработка искусственных
органов и тканей. Это позволит решить острую проблему
нехватки донорских органов и тканей, и этическую проблему
донорства.
57
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Термины трансплантологии
аллергия (гр. alios друшй+ergon действие) —
измененная реактивность организма к повторным введениям
чужеродных белков
аллогенный (гр. alios друшй+genos род) —
принадлежащий в генетическом отношении к другому
организму, но одного и того же вида
аллотрансплантация (гр. alios другой+transplantatio
пересадка) — пересадка тканей или органов между
организмами одного вида
анабиоз (гр. ап отрицание+dios жизнь) — способ
существования организма (органа, ткани, клеток) в условиях
резкого снижения обменных процессов
анаэробный гликолиз (гр. ап отрицание + аёг воздух +
glykys сладкий-i- lysis растворение) — расщепление углеводов
без участия кислорода
антиген (гр. anti против+genos род) — белковое
вещество, вызывающее образование антитела
антигенность — свойство веществ вызывать в
организме образование антител
ареактивность (гр. а отрицание + ге против + actio
действие) — отсутствие обычного ответа организма на
раздражение (чужеродный агент)
аутолиз (гр. autos свой + lysis растворение) — распад
клеток и тканей под воздействием собственных ферментов
аутологичный (гр. autos свой) — собственный; синоним
— аутогенный
аутотрансплантация (гр. autos свой + transplantatio
пересадка) — пересадка тканей в пределах одного и того же
организма
«банки органов» (фр. banque хранилище) —
лаборатории заготовки и консервирования органов
58
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
барьер тканевой несовместимости (фр. barriere
заграждение) — невозможность длительного приживления
чужеродных тканей и органов вследствие различного
антигенного состава белков
витальный (лат. vitalis жизненный) — относящийся к
жизни.
гетеротопическая
трансплантация
(гр.
heteros
друшй+thopos место) — пересадка органа в несвойственное
для него место
гипербарическая оксигенация (гр. hyper повышенная +
oxys кислый) — способ консервирования органов в атмосфере
повышенного парциального давления кислорода гипотермия
(гр. hypo под+thermos теплый) — способ консервирования при
пониженной температуре
гистосовместимость (гр. histos ткань) — тканевая
совместимость:
- по системе АВО — совместимость тканей донора и
реципиента по групповым эритроцитарным антигенам;
- по системе HL-A — совместимость тканей донора и
реципиента по лейкоцитарным антигенам
дегидратация (лат. de отделение+hydor вода) —
удаление влаги из ткани; синоним — сублимация
денатурация (лат. de отделение+natura природа)—
разрушение природных свойств биологического субстрата
дефростация (англ. defroster размораживание) — размораживание
донор (лат. donare дарить) — организм, у которого
берется ткань или орган для трансплантации
изогенные (гр. isos одинаковый+genos род)—
идентичные в генетическом отношении
изотрансплантация (гр. isos одинаковый+transplantatio
пересадка) — пересадка тканей или органов между
организмами, идентичными в генетическом отношении
59
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
иммунитет (лат. immunitas невосприимчивость) —
невосприимчивость
иммунодепрессивная терапия (лат. immunitas невосприимчивость+depressio
подавление+therapeia
лечение)
—
подавление трансплантационного иммунитета у реципиента с
целью продления сроков приживления и функционирования
пересаженных органов и некоторых тканей
кератопластика (гр. keratos роговица+plastike лепка)
— пересадка роговицы
клон (гр. Klonos движение) — потомство клеток консервирование (лат. conservatio сохранение) — обработка
тканей и органов различными агентами с целью сохранения их
в состоянии, необходимом для трансплантации
криобиология (гр. kryes холод+bios жизнь+logos
учение) — наука о консервировании жизни холодом
криофилактик (гр. kryes холод+philos любящий) —
вещество, предохраняющее клеточные
структуры
от
разрушающего действия низких температур; синоним —
криопротектор (гр. protector — предохранитель)
ксеногенный (гр. xenos чужой+genesis происхождение)
— относящийся к организму другого вида сенотрансплантация
(гр. xenos чужой+transplantatio пересадка)—пересадка органов
или тканей между организмами разных видов
культура тканей (лат. cultus возделывание) — метод
выращивания клеток путем помещения их в биологически
активную среду
лиофилизация тканей (гр. 1уб растворяю+рЫ1еб
люблю) — способ консервирования тканей с помощью
высушивания из замороженного состояния; синоним —
сублимация тканей (лат. sublimatio возгонка)
миграция (лат.migratio переселение) — перемещение
60
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
ортотопическая трансплантация (rp. orthos прежнийчtopike место) — пересадка органов и тканей в свойственное
для них место
пластика (гр. plastike лепка) — хирургическое
восстановление формы и функции органа
реваскуляризация (лат. ге обратно - vascularisatio
кровоснабжение) — восстановление кровообращения в органе
или ткани
регенерат (лат. regenerates перерожденный) — одна из
морфологических фаз трансформации тканевого трансплантата
регенерация (лат. regeneratio восстановление) —
восполнение и замена погибших клеток и тканей
- физиологическая — естественное восстановление
тканей в процессе постоянного самообновления:
- репаративная (лат. reparatio возмещение) —
восстановление органов и тканей, пострадавших от
патологических процессов
регидратация (лат. ге обратно+hydor вода) — обратное
присоединение воды к высушенным тканям
резорбция (лат. ге обратно+вогЬёге поглощать) —
рассасывание
реципиент (лат. recipiens принимающий) — организм,
которому производится пересадка органа или ткани
толерантность
(лат.
tolerantia
терпимость)
—
способность организма воспринимать чужеродный белок
(ткани, органы) без развития кризов отторжения
трансплантация (лат. transplantatio пересадка) —
пересадка тканей или органов на другую часть тела того же
организма или на другой организм
трансформация (лат. transformatio преобразование)
— процесс перестройки трансплантата (ткани, клеток)
61
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
эксплантация (лат. ex вне+plantatio посадка) —
хирургическое вмешательство с введением в организм
синтетического пластического материала.
62
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Список использованных источников
1. Актуальные проблемы офтальмологии.Материалы
конференции. Ижевск: АНК 2003. - 320с.
2. Глаукома: проблемы и решения: Всероссийская
научно-практическая конференция: Сб. науч. ст. - М.,
2004. - 508с., ил.
3.
Брошевские
чтения:
Труды Всероссийской конферен-ции, посвященные
105-летию со дня рождения Героя Социалистического
Труда, лауреата Государственной премии СССР,
профессора Тихона Ивановича Брошевского / Под ред.
Г.П.Котельникова, Г.И.Гусаровой, В.М.Малова. Самара: ООО «Офорт, 2007. - 728с.
4. К 20-летию Калужского филиала МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н.Федорова: Сб. избранных науч. тр. / Под ред. Х.П.Тахчиди. - Калуга, 2008. 464с., ил.
5. Кански Д.Ж. / Клиническая офтальмология: систематизированный подход. Пер. с англ. / Д.Кански. - М.:
Логосфера.2006. - 744с.: ил.: 21,9см.
6. Канюков В.Н., Стадников А.А. / Экспериментальногистологические и клинические аспекты реконструктивной офтальмохирургии (новые подходы с позиций
доказательной медицины). - Оренбург: ГОУ ОГУ. 2006. - 128с.
7. Канюков В.Н., Стадников А.А., Трубина О.М.
«Биологическое и экспериментально-гистологическое
обоснование новых технологий в офтальмохирургии»
//Москва, «Медицина». 2005 - 160с., ил.32.
63
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
8. Новые технологии в офтальмологии. Матер-лы VI
Западно-Сиб. регион, науч.-практич. конф. Новосибирск. - Изд-во ООО «Альфа-Виста», 2006. - 180с.
9. Новые технологии в офтальмологии. Всероссийская
научно-практическая конференция, посвященная 20летию Чебоксарского филиала ФГУ МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н.Федорова: Сб. науч. ст. Чебоксары: Чувашия, 2007. - 295с., ил.
10. Реферативно-информационный журнал «Новое в
офтальмологии» №4, 2007г. - 84с.
11. Фёдоров С.Н., Мороз З.И., Борзенок С.А., Комах Ю.А.,
Медико - технологическая система Глазного банка
МНТК «Микрохирургия глаза» // Офтальмохирургия. 1993. - №3. - С.64 - 66.
12. Канюков В.Н., Стадников А.А., Трубина О.М.
Аллотрансплантация
аортой
в
пластической
офтальмохирургии. - М.: Медицина. - 2001. - 142с.
13. Мороз З.И., Борзенок С.А., Комах Ю.А. Роль Глазного
тканевого банка в трансплантации роговицы // Вестник
Российской АМН -2007. - №8. - С.20 - 25
14. Канюков В.Н., Трубина О.М., Подопригора Р.Н., Мурашов А.Д. Современные информационные технологии в
науке, образовании и практике //Материалы четвертой
Всероссийской научно - практической международной
конференции, посвященной 10 - летию Оренбургского
Государственного Университета. - Оренбург, 2005.
- С. 331 - 332.
15. Филатов В.П. Роговица трупа, как материал для
пересадки // Вестник офтальмологии. - 1934, т.4. №2,
- С.222 - 224.
16. Стукалов С.Е. Пересадка роговой оболочки, консервированной изолированно при низких температурах //
64
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
Офталь мол. журнал. - 1968. - №3. - С. 237 - 238.
17. Цвелёва А.Г. О консервации глазного яблока во
влажной камере по данным исследования лактатдегидрогеназы (ДЦГ) // Тр. Военно- медиц.акад. им.
С.М. Кирова, 1972. - вып.191. - С.15.
Брошевский Т.И. Пересадка роговицы // Куйбышев:
Кн. изд., 1961. - 327с.
Абрамов В.Г. Использование пчелиного мёда для
консервации роговицы // Тезисы докл. межд. конф. по
кератопластике и кератопротезированию. - Одесса,
1978. - С.57 - 58.
Kuwabara V.H. Heterotransplantation of. corneas // Amer.
Ophthal. - 1962. - Vol.53. - №6. - P.911.
Шершевская О.И. К вопросу о формалинизации
кератопластического материала // Труды 3- го съезда
глазных врачей Украины, 1961. - С. 235.
Джавришвили Г.В. Современные аспекты хирургического лечения ожоговых бельм // Автореферат
диссерт. ... д.м.н., Москва, 2004. - 50с.
Брошевский Т.И., Яхина Н.М. О Глазных банках для
целей кератопластики //Вестник офтальмологии.
- 1975. - №4. - С.60-63.
Савушкина Н.М. Новый метод консервации роговых
оболочек // Тр. Куйбышев мед. института. - Куйбышев,
1962. - Т.21. - С.275 - 276.
Стукалов С.Е. Пересадка роговицы, консервированной
методом замораживания //В кн.: Тезисы докладов
международной конференции по кератопластике и
кератопротезированию. - Одесса, 1978. - С.78 - 79.
Гольдфельд
Н.Г.
Наша
модификация
метода
высушивания и иссечения трансплантата из роговицы
донора при частичной послойной кератопластике //
65
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
27.
28.
29.
31.
32.
33.
34.
66
Тр. Пермского мед. ин - та. - Вопросы офтальмологии. 1967. - Т.67. - Вып.З. - С.183 - 192.
Степанов
В.К.
Изучение
метода
длительной
консервации роговой оболочки силикодессикацией:
Автореф. дис.... канд. мед. наук. - Куйбышев, 1972. С.16.
Линник Л.Ф., Подопригора Р.Н. Барокамера для
консервации роговицы и других тканей глаза в
кислородной среде // Вестник офтальмологии. - 1976. №3.-С.66-67.
Нигматуллин Р.Т. Очерки трансплантации тканей. Уфа, 2003.-С. 156.
30. Андреев Г.Н., Дамбите Г.Р. использование
индивидуальной клинической системы
гипербарической оксигенации в комплексном лечении некоторых
заболеваний органа зрения.- Офтальмол. журн., 1978. № 3. - С.191-195.
Белокуров Ю.Н., Водолазов Ю.А., Каменный А.Н.
Ингаляция кислорода под повышенным давлением при
столбняке. - Казан. Мед.журн. - 1971. - № 5. - С.93.
Белокуров Ю.Н., Кружилина В.И., Мельников Е.Н.
Оксибаротерапия в комплексном лечении отравлений.В кн.: Гипоксия и наркоз. Ярославль, 1971. - С.95-97.
Белокуров Ю.Н., Грицман Ю.Я., Максимов В.А. Опыт
леченая больных неоперабельным раком легкого
повышенными дозами циклофосфана в сочетании с
гипербарической оксигенацией. - В кн.: Тез.докл.
Костром, обл. онколог, конф. Кострома. – 1971.
- С.31-32.
Бураковский В.И., Бокерия Л.А. Первый опыт
применения гипербарической оксигенации в кардиохирургии. - Тр.6 Пленума правл. Всерос. науч. мед.
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
о-ва хирургов. Орджоникидзе. - 1973. - С.399 - 402.
35. Вассерман И. А. Кератопластика при гнойных язвах
роговой оболочки.- В кн.: Сб. тр. Укр. эксперим. ин- та
глазных болезней. М. - 1947. - С.205-208.
36. Веллер И.А. О возможностях баротерапии в офтальмологии. - Воен.- мед. журн.- 1973. - №6. - С.33-36.
37. Винникова Д.Я., Черкасов В.К. Метод консервации
донорских роговиц в условиях гипотермии и гипербарической оксигенации. - В кн.: Актуальные вопросы
офтальмологии. Куйбышев. - 1972. - С.162-167.
38. Вовси Б.М. Заживление прободных ран роговой
оболочки у кроликов в барокамере. - В кн.: Материалы
науч. конф. Таджик, мед. ин-та. Душанбе. - 1966. С.20.
39. Догадова Л.П., Гребенец Ю.Г. Гипербарическая
оксигенация в комплексном лечении сосудистой
патологии органа зрения. - В кн.: Физиология и
патология механизмов адаптации органа зрения.
Владивосток. - 1983. -т.З. - С144-147.
40. Дудникова JI.K., Молоканова С.П. Гипербарическая
оксигенация как метод противогипоксического лечения
диабетической ретинопатии. - В кн.: Физиология и
патология механизмов адаптации органа зрения.
Владивосток. - 1983. - т.З. - С. 149- 151.
41. Ефуни С.Н., Гиоргобиани Т.Н., Сергеев ДА. Центр
гипербарической оксигенации.- Мед.техника. - 1973.
- 6. - С.24 - 28.
42. Жвания Г.А., Хепуриани Д.С., Давитая Г.Ш.
Перспективы применения гипербарной оксигенотерапии в педиатрии. - В кн.: Материалы науч.-практ.
конф., посвящ. 50-летию установления
67
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Сов. власти в Абхазск. АССР, Сухуми. - 1971. - С.332.
43. Иванов К.П. О потреблении кислорода и терморегуляции при гипоксии. - Физиол.журн.СССР им.Сеченова. - 1959. - т.45. - № 3. - С.320-325.
44. Клен Р. Заготовка и консервирование тканей. - Прага:
Гос. изд-во мед. лит. - 1962. - 211с.
45. Консервация органов / Под ред. В.И. Шумакова.- М.:
Тбилиси. - 1975. - 266с.
46. Ласкаржевский Ю.Н. Кислородное обеспечение
роговичного аллотрансплантата в условиях гипербарической оксигенации.- В кн.: IV Всероссийский съезд
офтальмологов. М. - 1982. - С.145.
47. Лернер Э.Н., Березин И.П., Пигарев В.А. Лечебное
действие кислорода под повышенным давлением при
острых нарушениях мозгового кровообращения: Обзор
литературы. - Журн.невропатологии и психиатрии
им.Корсакова. - 1969. - Т.69. - вып.8. - С.1250-1255.
48. Лопухин Ю.М., Шифрин Э.Г., Чекнев Б.М. Консервация органов в условиях гипотермии и гипербарической оксигенации. - В кн.: Актуальные проблемы
пересадки органов. М. - 1969. - С. 168- 185.
49. Митрохина Н.М., Сизова И.В. Метод гипербарической
оксигенации в комплексной терапии при заболевании
органа зрения. - В кн.: IV Всероссийский съезд
офтальмологов. М. - 1982. - С.399-400.
50. Нескреба Э.Ф., Атанов Д.И. Лечение флеботромбозов
сетчатки. - Офтальмол. журн. - 1978. - №5. - С.375-378.
51. Петросянц
Е.А.
Экспериментальное
изучение
пригодности гетерогенной консервированной ткани
68
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
52.
53.
54.
55.
56.
57.
58.
для трансплантации. - В кн.: Сб. тр. Укр. ин-та
эксперим. офтальмологии. - 1940. - Т.1. - С.121.
Ратнер Г.Л., Левашов Н.В., Ненашев А.А. О
клиническом
применении
гипербарической
оксигенации. - Клинич. медицина. - 1969. - Т.47. - №8.
Российская В.В., Шляпников В.Н., Углова М.В.
Морфофункциональные
аспекты
влияния
гипербарической оксигенации на миокард здорового
организма в эксперименте. - Арх. патологии. - 1978.
- Т.40. - Вып. 1.-С.49-54.
Тенев К. Клинический опыт с гипербарной
кислородной терапией .- Науч. тр. ИСУЛ, София. 1970. - 17. - 1. - С.369-372.
Филатов В.П., Шмульян Л.П. Дальнейшие материалы к
вопросу о пересадке роговой оболочки от трупа. - В
кн.: Сб. науч. работ глазной клиники Одес. ин-та. 1936. - Т.1. - Вып.2. - С. 16-33.
Филатов В.П. Оптическая пересадка роговицы и
тканевая терапия. - М.: Медгиз. - 1945. - 232с.
— Леонтюк А.С., Слука Б.А. Основы возрастной
гистологии. — Минск «Вышэйшая школа», 2000.
- 415 с.
Саутин Е.Н. К методике хранения лиофилизированных
тканей. Ортопед., травмат., протез., 1960, 6, 81—82.
Лозина-Лозинский Л. К. Очерки по криобиологии.
Адаптация и устойчивость организмов и клеток к
низким и сверхнизким температурам. Л., «Наука»,
1972, 288 с.
69
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
59. Суслова Т. Б., Оленев В. И., Владимиров Ю. А. О роли
ионов железа в хемилюминесценции липидов.—
«Биофизика», 1968, т. 13, с. 723—726.
60. Barnard С.М., Ackermann J.R.W. Successful storage of
kidneys. - Brit. J. Surg., 1966, №53, p.525.
61. Barr P.O., Enfors W., Eriksson G. Hyperbaric oxygen in
dermatology. - Brit. J. Dermat., 1972, vol.86, №6, p.631635.
62. Behandlung des experimentellen Extramittatengangrans mit
hyperbarem Sauerstoff. / I. Besznyak, E.Somogyi,
А. Nemes et al. - Acta Chir. Hung., 1970, vol. 11, №4,
p.303-311.
63. Boerema J. et al. High atmospheric pressure as an aid to
cardiac surgery. - Arch. Chir. Neurol., 1956, vol.8, p.193.
64. Boerema J., Meijne N.Y., Brummelkamp W.H. Life
without blood. A study of the influence of high atmospheric
pressure and hypothermia on dilution of blood. - J.
Cardiovasc. Surgery, 1960, vol.l, №2, p.133.
65. Feemster J. et al. The use of hypothermia, hyperbaria and
metabolic inhibition in organ preservation. - Vase. Surg.,
1970, №4, p/141-150.
66. Fischer B.H. Hyperbaric oxygen treatment. - Develop.
Med. a. Child. Neurol., 1969, vol. 11, №6, p.712-717.
67. Kamper G. Konservierung von Hundenieren mittels
maschineller Perfusion in der Vickers Gewebe und
Organspeicheranlage unter Sauerstoffuberdruck und
Hypothermie. - Boon, 1973, 56S.
68. К reuse her H. Die Behandlung mit hyperbaren Sauer stoff (OHP). - Med. Technik, 1972, Bd.92, №6, S.259- 263.
69. Kuwabara V. Heterotransplantation of corneas. - Amer. J.
Ophthal., 1962, vol.53, №6, p.911.
70
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
70. Ladaga L., Nabseth D. et al. Консервирование почки в
условиях гипотермии и гипербарической оксигенации.
- Kiserl. Orvostud., 1967, 19, 2, 122- 127.
71. Lamy М. Gas gangrene: importance of early diagnosis and
hyperbaric oxygen therapy. - Rev. Med. Liege, 1977,
32(19): p.589-593.
72. Loder R.E. Hyperbaric oxygen in acute ischeamia. Anaesthesia, 1977, 32(7), p.677-678.
73. Navratil P. Возможность использования гипербароксии
в глазной медицине. - Ceskoslov. Oftalm., 1970, 26, №
66, s.344-347.
74. Payrau P., Pouliquen V. Un precede pratique de
conservation des cornees et des scleres. - Bull. Soc.
Ophthal. France, 1959, №3, p.209.
75. Peyrau P., Pouliquen V. Conservation dec cornees et des
scleres. - Ann. Oculist., 1960, vol. 193, №4, p.309.
76. Shewell J. et al. Combined therapy of the spontaneous
mouse mammary tumour: methotrexate and hyperbaric
oxygen radiation. - Europ. J. Cancer, 1977, 13(9), p.977984.
77. Sindlerova E. Наш опыт лечения глазных болезней при
помощи гипербароксии. - Ceskoslov. Oftalm., 1970, 26,
6, 339-343.
78. Steward D. et al. Hypothermia on conjunction with
hyperbaric oxygenation in the treatment of massive air
embolism during cardiopulmonary bypass. - Ann. Thorac.
Surg., 1977, 24(6), p.591-593.
79. Clinical transplants // ed. Cecka J. М., Terasaki P.I. //
UCLA Immunogenetics Centre Los Angeles, California
2000.
80. Sade R. M. // Cadaveric organ donation: rethinking donor
motivation // Arch Intern Med., 1999; 159:438 - 446.
71
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
81. Komender J. [e t al.]. Gewebekonserven. Herstellung und
Anwendung, 11, Berlin, 1965, 352—356.
82. Johnstone R. M. Evidence for the existence of
transport carriers based on inhibition studies.—
«Canad. J. Biochem.», 1964, v. 42, p. 925—931.
83. (Robertson J.) Робертсон Дж. Мембрана живой
клетки.— В кн.: Структура и функция клетки. М., 1964,
с. 159—173.
72
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 1
Вакуумная система (общий вид).
73
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 2
Вакуумный насос для откачивания воздуха
74
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 3
Контейнер для хранения донорских тканей
75
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 4
Сетка в контейнере
76
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 5
Календарное кольцо в центре контейнера
77
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 6
Патент «Способ консервации донорских тканей для
офтальмохирургии»
78
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 7
Методика консервации изолированной роговицы в
условиях вакуума
79
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 8
Методика консервации склеры в условиях вакуума
80
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 9
Патент «Барокамера для консервации донорских тканей»
81
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 10
Барокамера для консервации донорских тканей (общий вид)
82
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 11
Барокамера для консервации донорских тканей (внутренний
вид)
83
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 12
Крышка барокамеры
84
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 13
Плексиглазовые перфорированные полочки
85
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 14
Перфорированные полусферы
86
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 15
Методика консервации изолированной роговицы
87
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 16
Донорская роговая оболочка в барокамере
88
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 17
Устройство для консервации донорской склеры (1каркас, 2 - подставка)
89
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 18
Методика консервации донорской склеры
90
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 19
Емкость для консервации донорской склеры
91
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Приложение 20
Расположение барокамеры в холодильнике
92
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Для заметок
93
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
10
Размер файла
5 332 Кб
Теги
7128
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа