close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY1995

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(19)
BY (11) 1995
(13)
C1
6
(51) A 61K 37/18,
(12)
A 23J 1/06,
A 23J 3/12
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ
КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ
(54)
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИДРОЛИЗАТА БЕЛКОВ КРОВИ
(21) Номер заявки: 950228
(22) 04.05.1995
(46) 30.12.1997
(71) Заявители: Витебская
биофабрика,
Витебская
государственная академия ветеринарной медицины
(BY)
(72) Авторы: Зайцев В.В., Зелютков Ю.Г. (BY)
(73) Патентообладатель: Витебская биофабрика (BY)
(57)
1. Способ получения гидролизата белков крови, включающий разделение плазмы и эритроцитов крови,
разведение эритроцитов дистиллированной водой, прогревание и ферментолиз термокоагулята эритроцитов,
отличающийся тем, что ферментолизу подвергают смесь плазмы и термокоагулята эритроцитов в соотношении 0,70-0,75 : 1 в присутствии 10-20 см3/дм3 питьевой соды, 10-12 см3/дм3 хлороформа, 28-30 г/дм3 панкреатина или 280-320 г/дм3 поджелудочной железы в течение 96 часов при температуре 42-45°С, рН 7,8-8,2.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что плазму и эритроциты разделяют путем сепарации или центрифугирования.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что эритроциты разводят дистиллированной водой в соотношении
1 : 3 и прогревают в течение 40-60 минут при температуре 85-90°С.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что ферментолизат крови прогревают при температуре 85-90°С в
течение 40-60 минут в присутствии 7,5-10,0 см3/дм3 хлороформа.
(56)
1. А. с. СССР 1717072, МКИ A23J 1/06, 1992.
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к получению биологически активных веществ, которые могут найти использование в ветеринарии.
Известен способ получения гидролизата из форменных элементов крови, включающий разделение плазмы и эритроцитов крови, разведение эритроцитов дистиллированной водой, прогревание и ферментолиз
термокоагулята эритроцитов [1].
Однако этот способ сложен в осуществлении, а полученный гидролизат обладает недостаточной биологической активностью.
Задачей изобретения является упрощение способа, повышение биологической активности гидролизата за
счет рационального содержания микроэлементов, разномолекулярных пептидов и аминокислот.
Поставленная задача достигается тем, что в способе получения гидролизата белков крови, включающим разделение плазмы и эритроцитов крови, разведение эритроцитов дистиллированной водой, прогревание и ферментолиз термокоагулята эритроцитов, ферментолизу подвергают смесь плазмы и термокоагулята эритроцитов в соотношении
0,70-0,75: 1 в присутствии 10-20 см3/дм3 питьевой соды, 10-12 см3/дм3 хлороформа, 28-30 г/дм3 панкреатина или 280320 г/дм3 поджелудочной железы в течение 96 часов при температуре 42-45°С, рН 7,8-8,2. Причем плазму и эритроциты разделяют путем сепарации или центрифугирования, эритроциты разводят дистиллированной водой в соотношении 1:3 и прогревают в течение 40-60 минут при температуре 85-90°С, а ферментолизат крови прогревают при
температуре 85-90°С в течение 40-60 минут в присутствии 7,5-10,0 см3/дм3 хлороформа.
BY 1995 C1
Пример выполнения способа. Для разделения плазмы и форменных элементов, кровь центрифугируют
или сепарируют.
В ферменторе смешивают эритроциты и дистиллированную воду в соотношении 1:3. Полученную смесь
инкубируют при температуре 85-90°С в течение 40-60 минут.
Смешивают 1 дм3 термокоагулята эритроцитов и 0,7-0,75 дм3 плазмы (сыворотки). К 1 дм3 смеси, нагретой
до 45°С добавляют 10-120 см3 питьевой соды, 28-30 г панкреатина или 280-320 г поджелудочной железы. Ферментолиз осуществляют в течение 96 часов при температуре 42-45°С, рН 7,8-8,2. Ферментолизис завершают
при содержании в смеси аминного азота 900 мг% и более. Ферментолизат прогревают при 80-90°С в течение
16-20 часов, добавляют хлороформ 7,5-10 см3/дм3. Смесь инкубируют в течение 40-60 минут при температуре
100-120°С, охлаждают до 15-20°С, отстаивают 4-5 суток. Недостаток декантируют, устанавливают рН 6,8-7,4,
прогревают при 115-120°С в течение 30-40 минут, добавляют дистиллированную воду до содержания в гидролизате амминого азота 400-450 мг%, добавляют 40%-й стерильный раствор глюкозы до 2%-го содержания, центрифугируют.
Готовый продукт расфасовывают в стеклянные флаконы емкостью 200 см3, укупоривают резиновыми
пробками и обкатывают металлическими колпачками, стерилизуют при температуре 120±5°С в течение 3040 минут.
Сравнительные биохимические показатели гидролиза и гидролизата (ГБК) представлены в таблицах 1, 2,
3.
Таблица 1.
Биохимические показатели гидролизина и ГБК
Препараты
Гидролизин (биофабричный)
Гидрозилизат (предлагаемый)
Показатели
общий азот, мг%
1500±280
аминный азот, мг%
1250±200
триптофан
250±20
углеводы, %
-
1200±160
950±110
250±30
0,05±0,01
Таблица 2
Содержание фракций с различной молекулярной массой
Препараты
Гидролизин
Гидрозилизат
Молекулярная масса, дальтон в %
2000
1600
1000
18±1
10±1
20±1
20±1
10±1
5000
-
3000
-
200
16±3
10±1
100
56±3
40±3
Таблица 3
Содержание основных аминокислот
Аминокислоты
Фенилаланин
Триптофан
Тирозин
Аргинин
Гистидин
Лизин
Метионин
Треонин
Лейцин
Изолейцин
Валин
Аспарагиновая кислота
Глютаминовая кислота
Цистин + цистеин
Гидролизин
9,6±0,20
2,0±0,10
2,9±0,10
3,5±0,20
8,5±0,10
10,6±0,20
1,2±0,05
6,0±0,10
14,9±0,30
11,0±0,20
10,0±0,20
7,4±0,10
0,9±0,1
Гидролизат
8,1±0,20
1,6±0,10
4,2±0,20
4,5±0,30
6,1±0,20
11,2±0,10
1,1±0,15
6,2±0,10
13,7±0,20
2,45±0,2
10,4±0,20
11,2±0,20
15,4±0,35
5,1±0,10
Гидролизат содержит 5 фракций пептидов, причем фракции высокомолекулярных пептидов составляют
около 50% белкового состава, широкий набор аминокислот, микроэлементов. Отмечено высокое содержание
в ГБК глютаминовой кислоты, цистина, изолейцина.
Это подтверждает высокую биологическую активность гидролизата, его выраженное влияние на клинико-гематологические показатели.
2
BY 1995 C1
Таблица 4
Химический состав препаратов, полученных различными способами
Состав
Пептиды
Аминокислоты
Сахар
Натрий
Калий
Железо
Кальций
Магний
Хлор
Фосфор
Содержание, %
Гидролизин
20,1±4,2
72,2
1,1±0,10
0,2±0,05
0,36±0,06
0,005±0,001
1,5±0,10
0,5±0,10
Гидролизат
28,2±2,2
58,3±1,3
1,2±0,10
5,5±0,20
0,33±0,13
0,02±0,001
0,12±0,01
0,04±0,01
4,9±0,20
0,22±0,02
При подкожном введении ГБК телятам 2 раза через 7 дней в дозе 1 мл на кг снижалось количество альбумина и резко (на 5,4-12,1%) увеличилось количество гемоглобинов крови. Уровень бактерицидности сыворотки крови телят увеличивался в 2 раза. Поглотительная способность нейтрофильных лейкоцитов
возросла на 69%. Если введение гидролизина способствовало увеличению фагоцитарного числа и индекса в
первые дни, то ГБК вызывал достоверные изменения в течение 15-20 дней после последнего введения (за
счет присутствия в препарате высокомолекулярных пептидов).
ГБК положительно влияет на увеличение привесов телят, по сравнению с контрольными животными.
Эффективно применение ГБК в комплексном лечении бронхопневмонии у телят в дозе 1,5 мл/кг 1 раз в 6 дней.
Cоставитель А.И. Сорокин
Редактор В.Н. Позняк
Корректор Т.Н. Никитина
Заказ 7045
Тираж 20 экз.
Государственный патентный комитет Республики Беларусь.
220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
109 Кб
Теги
by1995, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа