close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY2656

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(19)
BY (11) 2656
(13)
C1
6
(51) C 12N 1/20,
(12)
A 23C 9/12
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ
КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ
(54)
КОНСОРЦИУМ МОЛОЧНОКИСЛЫХ БАКТЕРИЙ LACTOBACILLUS
ACIDOPHILUS, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ
КИСЛОМОЛОЧНЫХ ПРОДУКТОВ И БАКТЕРИАЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ,
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУХОЙ ЗАКВАСКИ АЦИДОФИЛЬНЫХ
МОЛОЧНОКИСЛЫХ БАКТЕРИЙ И СПОСОБ ПРОИЗВОДСТВА
КИСЛОМОЛОЧНОГО ПРОДУКТА
(21) Номер заявки: 960282
(22) 1996.06.04
(46) 1999.03.30
(71) Заявитель: Терещенко Н.Н. (BY)
(72) Автор: Терещенко Н.Н. (BY)
(73) Патентообладатель: Терещенко Николай Николаевич (BY)
(57)
1. Консорциум молочнокислых бактерий Lactobacillus acidophilus ВКПМ В-6551, Lactobacillus acidophilus
ВКПМ В-6552 и Lactobacillus acidophilus ВКПМ В-6553, используемый для приготовления кисломолочных
продуктов и бактериальных препаратов.
2. Способ получения сухой закваски ацидофильных молочнокислых бактерий, включающий подготовку
среды, ее стерилизацию, охлаждение до температуры заквашивания, заквашивание комбинацией ацидофильных культур, сквашивание, смешивание с сахарозожелатиновой защитной средой, разлив, сублимационную сушку, отличающийся тем, что заквашивание осуществляют консорциумом молочнокислых бактерий Lactobacillus acidophilus ВКПМ В-6551, Lactobacillus acidophilus ВКПМ В-6552 и Lactobacillus
acidophilus ВКПМ В-6553, сквашивание ведут до достижения кислотности 70-80°Т, а перед смешиванием с
защитной средой проводят нейтрализацию закваски до рН 6,5-6,8.
3. Способ производства кисломолочного продукта, веключающий приготовление молочной основы, нормализацию по содержанию сухих веществ, термическую обработку, гомогенизацию, охлаждение до температуры заквашивания, внесение закваски молочнокислых бактерий, сквашивание до образования сгустка,
охлаждение, разлив и доохлаждение готового продукта, отличающийся тем, что концентрацию сухих веществ при приготовлении молочной основы устанавливают 10-12,5 мас.%, в качестве закваски используют
закваску, приготовленную на основе консорциума молочнокислых бактерий Lactobacillus acidophilus ВКПМ
В-6551, Lactobacillus acidophilus ВКПМ В-6552 и Lactobacillus acidophilus ВКПМ В-6553.
(56)
1. Банникова Л.А., Королева Н.С., Семенихина В.Л. Микробиологические основы молочного производства. - М.: Агропромиздат, 1987. - С. 148-155 (прототип объекта по п. 2).
2. А.с. СССР 731946, А 23С 9/12, 1980 (прототип объекта по п. 3).
Изобретение относится к биотехнологии и молочной промышленности и предназначено для производства
кисломолочных продуктов и бактериальных препаратов.
Известна закваска, приготовленная на чистых культурах Lactobacillus acidophilus N K1, L.acidophilus N
K5 и L. acidophilus N K10, взятых раздельно или в сочетании. Использование ее для получения ацидофильного продукта обеспечивает повышенную биологическую ценность его, содержание ацидофильных бактерий
в 1 мл 108-109, высокий титр антибиотической активности по отношению к Escherichia coli 1:32 и Schigella
sonnei 1:16 [2].
Целью изобретения является создание консорциума культур Lactobacillus acidophilus, обладающего комплексом свойств, присущих отдельным штаммам. Штаммы Lactobacillus acidophilus, входящие в консорци-
BY 2656 C1
ум, обладают высокой кислотообразующей активностью (сквашивают молоко за 4-5 ч), биохимической и антагонистической активностью, т.е. способностью подавлять возбудителей кишечных заболеваний S.aureus, Sh.sonnli, Sh.flexneri, энтеропатогенные штаммы E.coli, что гарантирует подавление в кишечнике
патогенных микроорганизмов и нормализацию его микрофлоры, обладают устойчивостью к фенолу, желчи,
поваренной соли и антибиотикам - бензилпенициллину, левомицитину, тетрациклину, что характеризует способность их выживать и развиваться в кишечнике человека на фоне антибиотикотерапии.
Консорциум L.acidophilus ТНН-92 получен при сочетании трех штаммов L.acidophilus, отличающихся по
антагонистической активности и устойчивости к антибиотикам, штаммы, входящие в консорциум образуют
вязкие и сметанообразные сгустки, выделены из разных источников обитания. Из фекалий новорожденного был выделен штамм L.acidophilus Т-З и L.acidophilus Н-5, а штамм L.acidophilus Н-9 был выделен из фекалий взрослого человека,
Селекцию отобранных штаммов L.acidophilus для консорциума ТНН-92 проводили по физиологобиохимическим свойствам, а также по свойствам, характеризующим их лечебно-профилактический эффект:
кислотообразующая активность при 38-40°С; антибиотическая активность по отношению к кишечной палочке,
шигеллам Зонне, Флекснера, коагулазоположительным стафилококкам и др. ( гибель соответственно 99-100
% при совместном культивировании в течение 48 ч.); устойчивость к широкоиспользуемым антибиотикам
(бензилпенициллину, левомицитину, тетрациклину); устойчивость к 0,4-0,6 % фенола в молоке; устойчивость к 2 % NaCl в молоке; устойчивость к 20 % желчи в молоке: способность к росту при рН 8,3; влагоудерживающая способность 2-2,5 % мл/10 мл.
Характеристика наиболее важных производственных свойств отдельных штаммов и консорциума
L.acidophilus ТНН-92 представлена в табл. 1.
Консорциум ТНН-92 образует в молоке сгустки вязкой консистенции, активно свертывает молоко при 3740 °С до кислотности 80-100 °Т в течение 4-6 ч.
Таким образом, создан консорциум ТНН-92 из штаммов L.acidophilus Т-З, Н-5, Н-9, который хранится во
Всесоюзной коллекции микроорганизмов под номером ВКПМ В-6552 и отличается высокой энергией кислотообразования, устойчив к содержанию в среде фенола (0,4 %), NaCI (2 %), желчи (20 %) способностью к росту при рН 8,3, устойчивостью к бензилпенициллину (0,2 Е), левомицитину (10 мгк/мл), тетрациклину (50
мкг/мл), что гарантирует его прохождение через желудочно-кишечный тракт и подавление возбудителей
кишечных заболеваний (см. табл.2). Кроме того, консорциум обладает высокой антибиотической активностью к патогенной микрофлоре (S.aureus, Sh.sonnei, Sh.flexneri, E.coli), см. табл.З.
Консорциум ТНН-92 обеспечивает высокую скорость свертывания молока, умеренную кислотность готового продукта. Хорошо развивается в молоке при 37-40 °С. Факультативные анаэробы предназначены для
периодического способа культивирования. Консорциум ТНН-92 способен длительно сохраняться в лиофилизированном состоянии - в запаянных ампулах до 5 лет, во флаконах от 8 до 12 мес. и при субкультивировании в лабораторных условиях.
Для получения консорциума ТНН-92 в стерильное молоко петлей вносили соответственно штаммы Т-З,
Н-5, Н-9 и сквашивали культуры при 37-40 °С в течение 10-12 ч. Кислотность закваски должна быть в пределах 80-100 °Т. Полученные комбинированные закваски используют в количестве 1-5 % для заквашивания
молока при приготовлении лабораторной или производственной закваски. Производственную закваску в количестве 1-5 % используют для приготовления продуктов.
Закваска сквашивает молоко или другую молочную основу за 4-6 ч при внесении 1-5 % закваски с высокой антибиотической активностью, влагоудерживающей способностью 2-2,5 мл/10 мл, накапливающая
в молочной основе не менее 108/см3 живых клеток, образующая умеренную кислотность.
Предложенный консорциум ТНН-92 пригоден для применения при производстве любых ацидофильных
продуктов, как жидких, так и сухих, заквасок и бакпрепаратов, для лечебного и диетического питания.
Предложен также способ производства сухой закваски консорциума и кисломолочного продукта с его
использованием.
Известен способ производства сухих заквасок ацидофильных бактерий, который включает в себя составление закваски, стерилизацию обезжиренного молока, культивирование закваски в стерильном обезжиренном молоке до кислотности 78-94 °Т при оптимальной температуре и рН 5,7-6,0, выращенную комбинацию
культур, охлажденную до 3-10 °С, вносят в защитную среду (сахарозо-желатиновую смесь), тщательно перемешивают, разливают порциями и высушивают в режиме сублимационной сушки [1].
Целью изобретения является усовершенствование способа приготовления закваски путем нейтрализации
закваски, приготовленной на консорциуме Lactobacillus acidophilus ВКПМ В-6553, перед смешиванием с защитной средой до рН 6,5-6,8. Кислотность закваски составляет 70-80 °Т.
Предлагаемый способ получения закваски осуществляют следующим образом.
Обезжиренное молоко стерилизуют при 112 °С (0,5 ати) в течение 7 мин. Смесь охлаждают до 37-40 °С,
вносят в нее 0,1-0,5 % закваски, тщательно перемешивают и сквашивают при 37-38 °С в течение 8-10 ч до образования сгустка кислотностью 70-80 °Т. Закваску нейтрализуют 5 %-ным стерильным водным раствором ам2
BY 2656 C1
миака (30 см3 на 1 л закваски) до рН 6,5 ± 0,1, тщательно перемешивают и вносят желатозно-сахарную защитную среду. После чего перемешивают закваску с защитной средой, разливают в стерильные флаконы по
2-3 мл или лотки и помешают их в сублиматор, предварительно охлажденный до -35 °С. Закваску замораживают до -25 °С и выдерживают при этой температуре 3-5 ч, а затем сушат при +35 ° С в течение 16-18 ч.
Флаконы укупоривают стерильными резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками, а сухую биомассу
с лотков расфасовывают в специальные пакеты, обеспечивающие стерильность и герметичность.
Высушенная биомасса ацидофильных бактерий может применяться в качестве закваски и для непосредственного применения с профилактическими и лечебными целями.
Пример 1. Обезжиренное молоко разливают по колбам, стерилизуют при 112 °С в течение 7 мин, охлаждают до 40 °С, вносят 1 % закваски консорциума ТНН-92, тщательно перемешивают и сквашивают при
40 °С в течение 6 ч до образования сгустка кислотностью 80 °Т, закваску охлаждают до 4-6 °С, затем вносят
5 %-ный водный раствор аммиака до достижения рН 6,5 (30 мл на 1 л закваски), перемешивают, затем закваску смешивают с концентрированной сахаро-желатиновой средой в соотношении 1:1. Смесь тщательно перемешивают и разливают в стерильные пенициллиновые флаконы по 2 мл, помешают в сублиматор, который предварительно охлаждают до минус 35 °С. Закваску замораживают при этой температуре 3 ч, а затем
сушат при температуре 35 °С в течение 17 ч. Флаконы укупоривают стерильными резиновыми пробками и
алюминиевыми колпачками. Хранят закваску при 6±2 °С в течение 12 мес. В закваске содержится 108/см3
живых клеток.
Пример 2. Обезжиренное молоко разливают по колбам, стерилизуют при 112 °С в течение 7 мин, охлаждают до 40 °С, вносят 1 % закваски консорциума ТНН-92, тщательно перемешивают и сквашивают при
температуре 40 °С в течение 6 ч до образования сгустка кислотностью 75 °Т, закваску охлаждают до 4-6 °С,
затем вносят 5 %-ный стерильный раствор аммиака до достижения рН 6,5 (30 мл. на 1 л закваски). Закваску
смешивают с концентрированной сахаро-желатиновой средой в соотношении 1:1,5. Смесь тщательно перемешивают и разливают в стерильные лотки, которые помещают в сублиматор, предварительно охлажденный
до минус 35 °С, замораживают до минус 25 °С и выдерживают при этой температуре 3 ч, а затем сушат при
плюс 35 °С в течение 17 ч. Сухую биомассу фасуют в стерильные пакетики по 1-2 г. Хранят закваску при
6±2 °С 12 мес. Титр живых клеток L.acidophilus 108/см3.
Предложен также способ производства кисломолочного продукта с использованием описанного выше
консорциума молочнокислых бактерий Lactobacillus acidophilus ВКПМ В-6552.
Цель изобретения - создание кисломолочного продукта высокой биологической и лечебной ценности за
счет использования специально созданного консорциума L.acidophilus ТНН-92, обеспечивающего получение
продукта с высокой антибиотической активностью, повышенной устойчивостью к антибиотикам и содержащего повышенное количество белка (увеличение на 2-3 %).
Предлагаемый способ приготовления кисломолочного продукта осуществляют следующим образом.
В молоко цельное или обезжиренное вносят сухое обезжиренное молоко или белковый концентрат до содержания сухих веществ 13-14 %, гомогенизируют при температуре 68-70 °С и давлении 12,5 МПа, пастеризуют при 85-87 °С с выдержкой 10-15 мин или при 92 °С с выдержкой 2-8 мин, охлаждают до 37±2 °С и вносят закваску в количестве 1-5 %, состоящую из консорциума ТНН-92 культур L.acidophilus.
Сквашивание проводят при 37±2 °С в течение 4-6 ч до образования сгустка с рН 4,6-4,7, после чего продукт охлаждают до температуры 4-6 °С.
При производстве продукта в условиях, близких к асептическим, срок хранения продукта может составить 21-28 дней при температуре 4-6 °С.
Пример 3. В цельное коровье молоко с содержанием сухих веществ 11 % (белок 2,8 %) вносят белковый
концентрат до достижения сухих веществ 12,5 %, тщательно перемешивают, очищают, подогревают до 55 °С,
гомогенизируют при давлении 15,0 МПа, пастеризуют при 90 °С с выдержкой 3 мин, охлаждают до 38-40 °С,
вносят 3 % закваски консорциума ТНН-92. Сквашивание осуществляют до достижения кислотности 70 °Т,
после чего охлаждают до 20-25 °С, разливают и доохлаждают в камере до 4 °С. Кислотность готового продукта 110 °Т.
Пример 4. В обезжиренное молоко с содержанием сухих веществ 8 % (белок 2,9 %) вносят сухое обезжиренное молоко до достижения сухих веществ 10 %, перемешивают, подогревают до 45 °С, очищают, гомогенизируют при температуре 45 °С и давлении 12,5 МПа, пастеризуют при 87 °С с выдержкой 10 мин, охлаждают до 40 °С, вносят 2 % закваски консорциума ТНН-92. Сквашивание осуществляют до достижения
кислотности 80 °Т, охлаждают до 20 °С, разливают и доохлаждают в камере до 6 °С, кислотность готового
продукта 120 °Т.
Пример 5. В цельное коровье молоко с содержанием сухих веществ 12,5 % вносят 4,5 % сахара, предварительно просеянного и растворенного в нормализованном по жиру молоке. Нормализованную смесь подогревают до 45 °С, очищают, гомогенизируют при 85 °С и давлении 17,5 МПа, пастеризуют при 87 °С с выдержкой 10 мин, охлаждают до 42 °С вносят 3 % закваски консорциума ТНН-92. Сквашивание
3
BY 2656 C1
осуществляют до достижения кислотности 75 °Т, после чего охлаждают до 25 °С, вносят ароматизаторы, перемешивают, разливают и доохлаждают в камере до 4°С.
Таблица 1
Показатель
Номера штаммов
Т-3
Н-5
Время свертывания
молока при внесении
3 % закваски, ч
При внесении 5 %
закваски, ч
Кислотность, °Т
Влагоудерживающая способность, мл/10мл
L.аcidophilus
Н-9
Консорциум
ТНН-92
5,5
5,0
5,5
5,0
4,5
200
5,0
252
5,0
180
4,5
210
2,5
1,5
1,8
2,1
Таблица 2
Максимальная доза антибиотиков, при которой происходит рост L.acidophilus
Штамм
Т-3
Н-5
Н-9
Консорциум ТНН-92
Бензилпенициллин,
Е
0,2
0,2
0,1
02
Левомицетин,
мкг/мл
10
10
10
10
Тетрациклин,
мкг/мл
50
10
10
50
Таблица 3
Антибиотическая активность L.acidophilus по отношению к патогенной микрофлоре
Штамм
Т-3
Н-5
Н-9
Консорциум
ТНН-92
S.aureus
+
+
-
Sh.sonnei
+
+
±
Sh.flexneri
+
-
Примечание: + рост патогенной микрофлоры
- отсутствие роста патогенной микрофлоры
Государственный патентный комитет Республики Беларусь.
220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.
4
E.coli
-
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
148 Кб
Теги
by2656, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа