close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY2870

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(19)
BY (11) 2870
(13)
C1
6
(51) A 61K 9/52
(12)
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ
КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ
(54)
КОМПОЗИЦИЯ В ФОРМЕ МИКРОСФЕР ДЛЯ ПРОЛОНГИРОВАННОГО
И КОНТРОЛИРУЕМОГО ВЫСВОБОЖДЕНИЯ ПЕПТИДНОГО
ЛЕКАРСТВЕННОГО ВЕЩЕСТВА И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ
(71) Заявитель: АСТА
МЕДИКА
АКТИЕНГЕЗЕЛЬШАФТ (DE)
(72) Авторы: Фредерик Хеймгартнер (CH), Пиеро
Орзолини (СН)
(73) Патентообладатель: АСТА
МЕДИКА
АКТИЕНГЕЗЕЛЬШАФТ (DE)
(21) Номер заявки: 1535
(22) 1994.03.15
(86) PCT/СН92/00146, 1992.07.15
(31) 2178/91
(32) 1991.07.22
(33) CH
(46) 1999.06.30
(57)
1. Композиция в форме микросфер для пролонгированного и контролируемого высвобождения пептидного лекарственного вещества, содержащая нерастворимую в воде соль пептида в виде памоата, танната,
стеарата или пальмитата и биоразлагающийся полимер - сополимер молочной и гликолевой кислоты, при
содержании соли пептида, равном по меньшей мере 5% от массы биоразлагающегося полимера, отличающаяся тем, что в качестве пептида она содержит соединение формулы I
Ac-D-Nal-D-pClPhe-R3 -Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2,
где R3 - D-Pal или D-Trp,
а в качестве биоразлагающегося полимера полилактид, полигликолид или сополимер молочной и гликолевой
кислоты.
2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что сополимер молочной и гликолевой кислоты представляет
собой сополимер L- или D,L- молочной кислоты, содержащей 45-90 мол.% звеньев молочной кислоты и 1055 мол.% звеньев гликолевой кислоты.
3. Композиция по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что она содержит в качестве соли памоат пептида, а
качестве полимера сополимер молочной и гликолевой кислоты при молярном соотношении их звеньев соответственно 75 : 25.
4. Способ получения композиции в форме микросфер для пролонгированного и контролируемого высвобождения пептидного лекарственного вещества, заключающийся в смешении нерастворимой в воде соли
пептида в виде памоата, танната, стеарата или пальмитата и биоразлагающегося полимера - сополимера молочной и гликолевой кислот, отличающийся тем, что в качестве пептида используют соединение формулы
I, смешение осуществляют добавлением соли пептида в раствор биоразлагающегося полимера, в качестве
которого используют полилактид, полигликолид или сополимер молочной и гликолевой кислот, в органическом растворителе с образованием суспензии соли пептида, полученную суспензию диспергируют в водной
среде с образованием эмульсии типа «масло в воде», вводят эмульсию в избыток водной среды и отделяют
микросферы от жидкой фазы.
5. Способ по п. 4, отличающийся тем, что перед введением эмульсии в избыток водной среды частично
выпаривают органический растворитель, входящий в состав масляной фазы.
6. Способ по п. 4, отличающийся тем, что в качестве сополимера молочной и гликолевой кислот используют сополимер L- или D,L- молочной кислоты, содержащий 45-90 мол.% звеньев молочной кислоты и
10-55 мол.% звеньев гликолевой кислоты.
(56)
1. DE 4023134 А1, МКИ5 A 61K 9/16, 1991.
1
BY 2870 C1
Изобретение относится к композиции для пролонгированного и контролируемого высвобождения пептидного лекарственного вещества и способу ее получения.
Известна композиция в форме микросфер для пролонгированного и контролируемого высвобождения
пептидного лекарственного вещества, содержащая нерастворимую в воде соль пептида в виде памоата, танната, стеарата или пальмитата и биоразлагающийся полимер-сополимер молочной и гликолевой кислот, при
содержании соли пептида в композиции по меньшей мере 5 % от массы полимера [1].
Известную композицию получают путем измельчения нерастворимой в воде соли пептида в виде памоата, танната или пальмитата и биоразлагающегося полимера-сополимера молочной и гликолевой кислот,
смешения их частиц размером менее 200 мк, последующей компрессии смеси и ее экструзии. После этого
проводят распыление образовавшегося продукта при низкой температуре (криогенным распылением).
Предложенный способ получения композиции требует сложного и дорогостоящего оборудования. При
этом он не обеспечивает возможность получения композиции в виде микрочастиц сферической формы с заранее определенными их размерами.
Кроме того, получаемая композиция не обеспечивает достаточно длительного и равномерного выделения
активного ингредиента - соли пептида.
Задачей изобретения является разработка композиции для высвобождения пептидного лекарственного
вещества и способа ее получения, лишенных указанных выше недостатков.
Решение задачи согласно изобретения достигается композицией в форме микросфер для пролонгированного и контролируемого высвобождения пептидного лекарственного вещества, содержащей нерастворимую
соль пептида в виде памоата, танната, стеарата или пальмитата и биоразлагающийся полимер-полилактид,
полигликолид или сополимер молочной и гликолевой кислоты, причем количество соли пептида составляет
по меньшей мере 5 % от массы биоразлагающегося полимера, а в качестве пептида композиция содержит
соединение формулы I
Ac-D-Nal-D-pClPhe-R3-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2,
где R3-D-Pal или D-Trp.
Такие пептиды являются аналогами лютеинизирующего гормона, высвобождающего гормон (ЛГВГ), и
предпочтительно могут применяться для терапевтического лечения гармонально зависимых нарушений.
В приведенной выше формуле, по крайней мере, если нет других указаний, аминокислоты обозначены
условно и имеют конфигурацию L, D-Nal означает D-3-(2-нафтил)-аланин и D-Pal означает D-3(3-пиридил)аланин.
В качестве биоразлагающегося полимера композиция может содержать полилактид, полигликолид или
сополимер молочной и гликолевой кислот, предпочтительно сополимер L-или D, L-молочной кислоты и
гликолевой кислот, содержащей 45-90 моль. % звеньев молочной кислоты и 10-55 моль. % гликолевой кислоты. Предпочтительно, чтобы в сополимере молочной и гликолевой кислот молярное соотношение их
звеньев составляло соответственно 75:25.
В качестве соли пептида композиция может содержать по меньшей мере 5 % от массы биоразлагающегося полимера памоат, таннат, стеарат или пальмитат, предпочтительно памоат пептида формулы I.
Композицию в виде микросфер применяют для приготовления суспензии, предназначенной для перентерального введения, например, путем внутримышечных или подкожных инъекций.
Повышенное содержание в композиции соли пептида обеспечивает длительное контролируемое и равномерное выделение пептида, например в течение нескольких суток после ее перентерального введения человеку или животному.
Композицию получают следующим образом.
Приготавливают суспензию нерастворимой в воде соли пептида формулы I в растворе биоразлагающегося полимера в органическом растворителе, полученную суспензию диспергируют в водной среде с образованием эмульсии типа «масло в воде», вводят эмульсию в избыток водной фазы и отделяют микросферы от
жидкой фазы.
Получение эмульсии типа «масло в воде» и введение ее в избыток водной среды по способу согласно
изобретения позволяет избежать недостатков известных способов.
Для получения композиции можно использовать водорастворимую соль пептида формулы I, которую
превращают в соль пептида, нерастворимую в воде. Это дает возможность использовать разницу растворимостей применяемых ингредиентов, в частности, разницу между «растворителями» и «не растворителями»,
используемых в способе согласно изобретения.
При использовании водорастворимой соли пептида формулы I, ее превращают в соль пептида, нерастворимую в воде на первой стадии осуществления способа. Под «водорастворимой» понимают соль пептида,
имеющей растворимость в воде при 25 °С более 0,1 мг/мл, предпочтительно 1,0 мг/мл и более.
Под «нерастворимой» понимают соль пептида, имеющей растворимость в воде при 25 °С 0,1 мг/мл и
менее. Такими солями являются памоат, таннат, стеарат или пальмитат пептида.
2
BY 2870 C1
В качестве биоразлагающихся полимеров используют такие полимеры, как полилактид, полигликолид,
сополимер молочной и гликолевой кислот, предпочтительно сополимер L-или D, L-молочной кислоты, содержащий 45-90 моль. % звеньев молочной кислоты и 10-55 моль. % гликолевой кислоты.
В качестве растворителя биоразлагающегося полимера применяют такой растворитель, как например,
метиленхлорид, но, в любом случае, этот растворитель не должен быть растворителем по отношению к выбранному пептиду или его соли.
Полученную выше нерастворимую соль пептида суспендируют в органическом растворе полимера, вводят полученную суспензию в заранее определенное количество водной среды, в большинстве случаев, представляющей собой воду с добавкой подходящего поверхностно-активного вещества. Это делается с целью
быстрого образования гомогенной эмульсии типа «масло в воде», при этом водная среда обеспечивает непрерывную фазу. При приготовлении такой эмульсии следует учитывать различные факторы, которые оказывают влияние на размер или структуру микросфер, получаемых в результате этого процесса. Одним из
факторов, который следует учитывать, является скорость введения органического раствора в водную среду.
Другим таким фактором может быть температура или скорость перемешивания или энергия диспергирования (с помощью ультразвука), последний фактор, в частности, влияет на окончательный размер микросфер.
Выбор методов и условий эмульгирования, пригодных для достижения поставленной цели, находится в пределах возможностей специалистов в данной области.
При приготовлении эмульсии может оказаться выгодным изменение объемного соотношения составляющих ее фаз, в частности, уменьшение начального объема органической фазы по отношению к начальному объему водной фазы. В некоторых случаях, вследствие летучести используемых растворителей, например, метиленхлорида, испарения, протекающего спонтанно в ходе перемешивания, уже может оказаться
достаточным, в других случаях это желательное явление может быть ускорено путем осуществления частичного испарения растворителя при пониженном давлении.
После образования стойкой эмульсии, ее переносят в избыточное количество водной среды, в большинстве случаев в воду. Целью этой операции является интенсификация отверждения зародышевых микросфер,
образовавшихся в эмульсии, путем экстрагирования растворителя еще остающегося внутри микросфер. Эта
операция имеет также целью одновременное удаление следовых количеств поверхностно-активного вещества, которые могут оставаться в полимерной массе в ходе ее окончательного отверждения. Следует отметить,
что вода не является растворителем как для биоразлагающегося полимера, как например, сополимера D, Lмолочной и гликолевой кислот (СМГК), так и для соли пептида, содержащейся внутри указанных микросфер. Эта ситуация особенно благоприятна для необходимого извлечения остаточного количества растворителя полимера, как например CH2Cl2.
После перенесения эмульсии в избыток водной среды, выделяют отвержденные микросферы с использованием соответствующих методов, например, центрифугированием, фильтрованием или отстаиванием и последующей декантацией. Известные методы применяют и для операций промывки, очистки и сушки.
Применение описанного выше способа позволяет получать микросферы, размер которых может точно
контролироваться. Этот контроль осуществляют, в основном, в ходе приготовления эмульсии (например,
скоростью перемешивания). Другим преимуществом является достижение особенно высокого наполнения
пептидами, которое может составлять 5, 10 или 20 мас. % или более в зависимости от условий. Кроме того,
особенно высоким является выход операции введения пептида или соли пептида.
Микросферы, полученные из указанных ингредиентов, в дальнейшем применяют, после соответствующей стерилизации, для приготовления суспензий, предназначенных для перентерального введения, например, путем внутримышечных или подкожных инъекций.
Изобретение иллюстрируют следующие примеры.
Пример 1. 3 г ацетата аналога ЛГВГ формулы
Ac-D-Nal-D-pClPhe-D-Pal-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2
превращают в соответствующий памоат с помощью известных методов и обрабатывают таким образом, чтобы получить частицы со средними размерами примерно 19 микрон. Затем 0,317 г полученного памоата суспендируют в 20 мл CH2Cl2 и образовавшуюся суспензию добавляют к 20 мл CH2Cl2, содержащим 1,683 г
растворенного сополимера D,L-молочной и гликолевой кислот (СМГК) в их соотношении 75:25 (моль. %,
собственная вязкость 0,82 в гексафторизопропаноле).
Смесь готовят перемешиванием при комнатной температуре до образования полностью гомогенной суспензии. После этого полученную суспензию вливают в один прием в 500 мл воды, содержащей 0,075 % растворенной метоксицеллюлозы, и перемешивают смесь при комнатной температуре в течение 90 минут со
скоростью перемешивания 900 оборотов в минуту. Изменение состояния эмульсии периодически проверяют,
в среднем каждые 30 минут, путем отбора проб и исследования образовавшихся микросфер под микроскопом.
После окончания перемешивания (стабилизации уменьшения размеров микросфер), эмульсию переносят
в один прием в 2 л воды, поддерживаемой при температуре около 10 °С, и полученную смесь перемешивают
до ее гомогенизации.
3
BY 2870 C1
Микросферы СМГК отделяют от реакционной смеси и очищают путем последовательного центрифугирования, чередующегося с промывкой водой, затем отфильтровывают и сушат при пониженном давлении.
Получают таким образом 1,61 г СМГК микросфер (выход 80 %), содержащих более 94 % частиц диаметром
менее 100 микрон (максимальное количество размером 55-85 микрон).
Проведенный анализ (растворение твердого СМГК, извлечение и определение пептида с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии) показал, что содержание памоата в микросфере составляет 9,05
мас. % (расчетное содержание: 10 мас. %).
Полученные таким образом микросферы затем последовательно подвергают стерилизации гаммаизлучением и суспендируют в соответствующем стерильном носителе. Испытания in vivo (определение содержания тестостерона в крови крыс самцов) подтвердили равномерное выделение активного вещества.
Пример 2. Опыт проводят аналогично примеру 1, но с использованием 0,634 г памоата аналога ЛГВГ и
1,366 г СМГК в соотношении 75:25.
Количество микросфер СМГК составило 1,70 г (выход 85 %), содержание памоата в микросферах составило 18,3 мас. % (расчетное содержание: 20 мас. %).
Полученные таким образом микросферы подвергают стерилизации гамма-излучением и суспендируют
в соответствующем стерильном носителе. Испытания in vivo (определение содержания сыворотки крови
самцов крыс) подтверждают равномерное выделение биологически значимого количества активного вещества, по меньшей мере, в течение 24-х суток.
Результаты выделения активного вещества во времени представлены в таблице.
Время, сутки
0+3 часа
1
2
3
6
8
10
14
16
20
24
Содержание пептида, нг/мл
47,1
48,9
52,2
46,9
50,4
40,1
42,1
29,8
33,5
33,0
25,6
Эти результаты были также подтверждены анализами животных, забитых через 30 суток: потеря массы
тестикулов составила, по меньшей мере, 80 %, потеря массы семенных пузырьков, по меньшей мере, 90 %.
Пример 3.
Опыт проводят аналогично примеру 1, но с использованием 3 г ацетата аналога ЛГВГ формулы
Ac-D-Nal-D-pClPhe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2.
После превращения этого ацетата в соответствующий памоат и операций обработки, описанных в примере 1, получают микросферы, имеющие такие же характеристики, что и полученные в предшествующих примерах.
Государственный патентный комитет Республики Беларусь.
220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.
4
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
134 Кб
Теги
патент, by2870
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа