close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY2968

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(19)
BY (11) 2968
(13)
C1
6
(51) A 61K 38/11
(12)
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ
КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ
(54)
ИНГИБИТОР ВИРУСА ЗАПАДНОГО НИЛА
(21) Номер заявки: 1021
(22) 1993.11.26
(46) 1999.09.30
(71) Заявитель: Белорусский
научно-исследовательский институт эпидемиологии и
микробиологии МЗ РБ (BY)
(72) Авторы: Азарова И.А., Мишаева Н.П.,
Вотяков В.И., Зубович И.К. (BY)
(73) Патентообладатель: Белорусский
научноисследовательский институт эпидемиологии и
микробиологии МЗ РБ (BY)
(57)
Применение окситоцина в качестве ингибитора вируса Западного Нила.
(56)
1. Азарова И.А.., Мишаева Н.П., Вотяков В.И., Головнева Г.П. Поиск ингибиторов вируса Западного Нила среди антибиотиков // Ж. Антибиотики и химиотерапия. - 1992. - №8. - C. 29-31.
2. Виноград И.А., Чумаченко С.С., Омельченко А.А., Лозинский И.Н. Выявление арбовирусных инфекций в Украинской ССР // Сб. Арбовирусы. - Таллин. - 1984. - C. 14-15.
3. Машковский М.Д. Лекарственные средства. 1993. - Т. 1. - С. 470-471.
4. Мирзоева И.М. Итоги изучения арбовирусных инфекций в Азербайджане // Сб. Арбовирусы. - М.1978. - С. 27-31.
5. Корешкова Г. В., Фролова М.П., Маленко Г. В. и др. Вирус Западного Нила - возможный этиологический агент хронических нейроинфекций // Сб. Вирусы и вирусные инфекции человека. - М.- 1981, - С. 197198.
6. Курлаев П.П. Экспериментально-клиническое обоснование применения окситоцина в комплексной
антибактериальной терапии гнойных заболеваний мягких тканей. Автореф... канд. мед. наук.- Пермь., 1986. С. 24.
7. Самойлова Т.Н., Большунова Л.А., Мишаева Н.П. Изучение антивирусной активности препаратов, применяемых в медицинской практике // Сб. Антивирусные вещества. - Мн., 1984. - С. 60-61.
8. Самойлова Т. И. О гиподиагностике арбовирусных инфекций в Белоруссии. Мат-лы YIII объединенного съезда гигиенистов, микробиологов, эпидемиологов и паразиологов (г. Пинск, 26-27 сентября 1991г.). Мн., 1991. - С. 125-126.
9. Руководство по зоонозам/Под ред. Покровского В.И. -М.: Медицина, 1983. - С. 320.
10. Уманский К.Г., Дроздов С.Г., Семенов Б.Ф. Энцефалиты комариные (БМЭ.- М., т. 28. - С. 152-154.
Изобретение относится к вирусологии, а именно к способам ингибирования вирусов, патогенных для человека и животных, в частности для ингибирования вируса Западного Нила (ЗН).
Вирус ЗН широко распространен в странах Европы, Азии и Африки. Он патогенен для людей, птиц и животных. Передается через укус кровососущих комаров и клещей [9, 10]. Возможно заражение людей от
больных домашних животных (лошадей, коров, овец, собак, уток и др.) [4].
У человека вирус ЗН вызывает, в основном, остролихорадочное заболевание, реже - поражение ЦНС и
органов пищеварения [2]. Кроме того, возбудитель ЗН способен к персистенции и может иметь отношение к
этиологии подострых и хронических заболеваний ЦНС [5].
В Беларуси вирус ЗН встречается повсеместно, о чем свидетельствуют находки антител у людей, домашних и диких животных, птиц, членистоногих, а также выделение вируса из комаров, птиц и из крови лихорадящих больных [8].
BY 2968 C1
Несмотря на важную роль лихорадки ЗН в патологии человека, вакцины против нее не разработаны, нет
также средств для лечения этой инфекции. В нашей стране и за рубежом ведется интенсивный поиск эффективных средств подавления размножения вируса ЗН.
Известно ингибирующее действие канамицина (0-3-Амино-3-дезокси-а-D-глюкопиранозил (1→6)-0-16амино-6-дезокси-а-Д-глюкопиранозил-(1→4)-2-дезокси-Д-стрептамин) на вирус ЗН. В экспериментах на белых
мышах, инфицированных 100 LD 50 вируса ЗН, установлено, что под действием канамицина, вводимого по
лечебной схеме, выживаемость животных увеличилась на 40 % по сравнению с контролем [1].
Недостатком данного препарата является недостаточно высокий защитный эффект.
Известно, что ингибирующее действие на вирус ЗН оказывает виразол (рибавирин-1-β-Д-рибафуранозил1,2,4-триазол-3-карбоксамид). Имеет широкий спектр действия, обладает эффективностью против ДНК- и
РНК-содержащих вирусов. В экспериментах на белых мышах, зараженных невысокими дозами вируса ЗН,
выживаемость животных увеличивалась на 50 % по сравнению с контролем [7].
Недостатком виразола как ингибитора вируса ЗН является его невысокая эффективность.
Наиболее близким по свойствам является антибиотик гентамицина сульфат (представляющий смесь гентамицинов С 1, С 2 и С 1а), который эффективен в отношении вирусов гриппа, ВЭЛ, а также вируса ЗН [1].
При инфицировании животных невысокими дозами вируса ЗН выживаемость их в опыте по сравнению с
контролем повышалась на 40-70 %., в остальных случаях, животные выживали полностью, а при инфицировании высокими дозами (100 LD 50) вируса выживаемость животных составляла не более 40-50 %.
Недостатком гентамицина как ингибитора вируса ЗН является его недостаточно высокая эффективность
при инфицировании организма высокими заражающими дозами.
Цель изобретения - повышение эффективности ингибирования вируса Западного Нила.
Цель достигается путем ингибирования вируса ЗН окситоцином.
Окситоцин - пептидный гормон (нанопептид) задней доли гипофиза. Состоит из гексапептидного цикла и
боковой цепи из остатков трех аминокислот.
Препарат оказывает влияние на мембраны клеток миометрия и обычно применяется для вызывания и
стимулирования родовой деятельности [3]. В последние годы на основании экспериментальных и клинических исследований показана целесообразность применения ок-ситоцина в комплексной антибактериальной
терапии гнойных заболеваний мягких тканей [6].
Антивирусные свойства окситоцина ранее не были известны.
Применение окситоцина отличается новизной, поскольку ранее никем не описана возможность ингибирования вирусов в системе ин витро и ин виво с помощью указанного препарата.
Предложенное решение отличается неочевидностью, так как из известных свойств окситоцина с очевидностью не вытекает, что его можно использовать для подавления вирулентности вируса или для защиты животных от вирусной инфекции, вызванной вирусом ЗН.
Наличие ингибирующего действия подтверждается следующими примерами:
Пример 1. Исследовали ингибирующее действие разных доз окситоцина на течение экспериментального
энцефалита, вызванного вирусом Западного Нила у белых мышей. В опыт брали белых мышей массой 5-6
грамм. Животных заражали подкожно 100 LD 50 вируса ЗН, затем им вводили разные дозы окситоцина - от
0,5 до 0,01 ME в сутки в течение 4-х дней (лечебная схема). На каждую дозу препарата брали по 10 животных. Контролем служила группа зараженных животных (10 экземпляров), которым вводили по 0,2 мл физраствора подкожно (по такой же схеме). Установлено, что все исследуемые дозы препарата оказывали протективное действие, повышая выживаемость белых мышей в опыте по сравнению с контролем на 20-80 %.
Наиболее высокий защитный эффект получен при введении белым мышам дозы препарата 0,02 МЕ/сутки в
течение 4-х дней. ХТИ препарата более 50.
Пример 2. Исследовали эффективность применения окситоцина по лечебной схеме. С этой целью препарат в дозе 0,02 МЕ/сутки вводили животным спустя 1 час после заражения их вирусом ЗН (100 LD 50). Следующая инъекция препарата осуществлялась через 24, 48 и 72 часа. Всего животные получали по 0,08 ME в
течение 4-х суток. В контроле белые мыши, не получавшие окситоцин, погибли в течение 7-13 суток. В опыте выживаемость белых мышей на 7-е сутки составила 100 %, на 14-е сутки - 50 %, средняя продолжительность жизни возросла в 2 раза. При снижении заражающей дозы вируса до 5-10 LD 50 эффективность от
применения препарата возросла до 70 % и выше.
2
BY 2968 C1
Пример 3. Защитное действие окситоцина возрастало при использовании его по лечебнопрофилактической схеме, по которой первую инъекцию осуществляли за 24 и 2 часа до заражения вирусом,
а затем через 24 и 48 часов после заражения один раз в сутки. Контрольных животных инфицировали такой
же дозой вируса ЗН, а вместо окситоцина вводили физраствор по такой же схеме. На 7-14 сутки все животные в контроле погибли. В опыте выживаемость животных на 7-е сутки составила 100 %, а на 14 - 80 %.
Средняя продолжительность жизни белых мышей в контроле составляла 9,9 суток, а в опыте - 20 суток, т.е.
увеличивалась более чем в 2 раза. Снижение заражающей дозы вируса до 2-10 LD 50 приводило к увеличению защитного эффекта окситоцина, вводимого по лечебно-профилактической схеме, до 85-95 %.
Пример 4. Изучали вирулицидное действие окситоцина на вирус ЗН. Для этого окситоцин в концентрации 5 МЕ/мл смешивали в равных объемах с 10 %-ной вируссодержащей суспензией мозга белых мышей,
погибших от Западнонильского энцефалита. Контролем служила вируссодержащая суспензия (10 %) смешанная 1:1 с физраствором. Смесь инкубировали в холодильнике при 4 °С в течение 18 часов, после чего
титровали интрацеребрально на белых мышах массой 5-6 г. Установлено, что обработка вируса ЗН окситоцином снижала его титр на 2,75 lg LD 50/0,03 мл по сравнению с контролем. Различия между опытом и контролем статистически достоверны (Р<0,001).
Пример 5. Препарат проявляет четко выраженное ингибирующее действие и в культуре клеток Vero. Так,
внесение на монослой клеток различных доз окситоцина (от 0,1 до 0,05 МЕ/мл) за 1 час до заражения ее 10
LD 50 вируса ЗН приводило к сохранению монослоя клеток на 75-100 %, в то время как в контроле наблюдалось полное разрушение монослоя клеток. Наиболее эффективной была доза окситоцина, равная 0,05 МЕ/мл.
Из приведенных в примерах 1-5 данных видно, что окситоцин обладает четко выраженным ингибирующим действием в отношении вируса Западного Нила как в системе ин виво, так и в системе ин витро.
Таким образом, впервые установлено наличие у окситоцина антивирусного действия в отношении вируса
Западного Нила. Препарат обладает вирулицидным действием, снижая титр вируса на 2,75 lg LD 50/0,03 мл.
Он подавляет развитие вирусного энцефалита у лабораторных животных и ингибирует цитопатическое действие вируса в культуре клеток Vero. Выживаемость белых мышей, зараженных вирусом ЗН и получавших в
качестве лечебного препарата окситоцин, возрастала по сравнению с контролем на 70-80 % при инфицирующей дозе вируса 100 LD 50 и на 85-95 % при применении более низких доз.
Следовательно, поставленная цель - повышение эффективности ингибирования вируса Западного Нила достигнута путем применения окситоцина. Впервые выявлено вещество, антивирусное действие которого
превышает действие известных ингибиторов вируса ЗН. Препарат, проявивший такое высокое защитное
действие в отношении вируса ЗН, является фармакопейным средством, доступным для широкого использования и дает эффект при применении короткого курса лечения.
Следует отметить, что применение окситоцина существенно не влияет на артериальное давление или несколько повышает его. Это очень важно для отбора препаратов при лечении больных лихорадкой ЗН, при
которой артериальное давление несколько снижается. Препарат дает слабый антидиуретический эффект [3].
Учитывая, что химиотерапия ЗН не разработана, окситоцин можно рассматривать как кандидат в антивирусные препараты для этиотропного лечения заболеваний, вызванных вирусом ЗН. Как фармакопейный препарат он может быть применен для превентивного лечения больных в инкубационном периоде, например
при лабораторном заражении вирусом, учитывая, что применение его в эксперименте по профилактической
схеме дает более высокий защитный эффект благодаря наличию вирулицидного действия.
Благодаря отсутствию белков и пептидов окситоцин можно вводить не только внутримышечно, но и
внутривенно без риска анафилактического и пирогенного действия [3].
Государственный патентный комитет Республики Беларусь.
220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.
3
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
138 Кб
Теги
патент, by2968
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа