close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY3720

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(19)
BY (11) 3720
(13)
C1
7
(51) A 61B 17/00,
(12)
A 61K 9/52,
A 61K 35/39
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ
КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ
(54)
СПОСОБ ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ САХАРНОГО ДИАБЕТА
(21) Номер заявки: 970413
(22) 1997.07.28
(46) 2000.12.30
(71) Заявитель: Романовский А.И., Шапель В.И. (BY)
(72) Авторы: Шотт А.В., Леонович С.И., Третьяк С.И.,
Романовский А.И., Дяшкевич В.М., Шапель В.И.
(BY)
(73) Патентообладатель: Романовский Александр
Иосифович, Шапель Владимир Иосифович
(BY)
(57)
1. Способ хирургического лечения сахарного диабета путем имплантации диффузионной миллипоровой
капсулы с культурой островковых клеток поджелудочной железы в организм реципиента, отличающийся
тем, что капсулу вводят и фиксируют в русле магистрального артериального кровеносного сосуда реципиента, при этом диаметр пор оболочки капсулы выбирают в пределах 0,18-0,28 нм.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве оболочки капсулы используют полисульфонкупрофановую пленку, в которую помещают от 300 до 500 тысяч островковых клеток на килограмм массы реципиента в зависимости от уровня гипергликемии последнего.
3. Способ по пп. 1 и 2, отличающийся тем, что коэффициент пористости оболочки капсулы выбирают в
пределах 40-60 процентов.
4. Способ по пп. 1, 2 и 3, отличающийся тем, что используют культуру клеток поджелудочной железы
плодов человека с 16-22 недель пренатального развития.
BY 3720 C1
(56)
1. RU 2008953 C1, МПК А 61 N 5/02, А 61 К 31/00, 1994.
2. RU 94033342 A1, МПК А 61 К 9/15, С 12 N 11/04, 1996.
3. Шумаков В.И., Блюмкин В.Н. и др. Трансплантация островковых клеток поджелудочной железы
(очерки). - М.: - Канон, 1995. - С. 136-137 (прототип).
4. Шотт А.В., Леонтюк А.С. и др. Необычная реакция на чужеродные ткани. - Минск.: Министерство
Здравоохранения Республики Беларусь. 1992. Ч. 1. - С. 58-59, Ч. 2. - С. 82-83.
5. Шумаков В.И., Блюмкин В.Н. и др. Проблемы эндокринологии. - М.: Медицина, 1981. Т. XXVII. ¹ 1. - С. 25-30.
6. WO 9716536 A1, 1997.
Изобретение относится к области медицины, а именно к лечению инсулинозависимого сахарного диабета
методом трансплантации островковых клеток поджелудочной железы (ПЖ) для устранения недостатка выработки инсулина в организме реципиента.
Известны способы хирургического лечения сахарного диабета путем свободной трансплантации островковых клеток в организме реципиента [1].
Недостатком способов свободной трансплантации островковых клеток ПЖ в различные ткани и органы
реципиента является весьма серьезный риск их отторжения организмом реципиента, несмотря на проведение
курса иммунодепрессивной терапии или применения физиотерапевтических приемов, например воздействия
на область размещения трансплантанта ультразвуком и т.п. Другой недостаток способов свободной трансплантации - незначительные сроки функционирования пересаженной культуры клеток.
BY 3720 C1
Предпочтительными являются способы трансплантации островковых клеток, заключенных в миллипоровую капсулу с селективно проницаемой оболочкой, т.е. с оболочкой, непроницаемой для элементов иммунной системы реципиента, но проницаемой для веществ, необходимых для питания островков, а также для
инсулина, вырабатываемого последними в соответствии с концентрацией глюкозы в крови [2]. При этом
капсула должна быть биосовместима и не вызывать неблагоприятных реакций в тканях и органах реципиента, составляющих зону имплантации.
К сожалению, биосовместимость таких капсул при их имплантации в подкожную или мышечную ткань, в
брюшную полость и другие ткани и органы реципиента вызывает воспалительные реакции, не способствующие увеличению срока функционирования культуры клеток в имплантированной капсуле, ограниченной
двумя-тремя месяцами, что является серьезным недостатком способа (пример 5).
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату является способ имплантации
культуры клеток поджелудочной железы, помещенной в диффузионные миллипоровые капсулы с диаметром
пор 0,45 мкм [3 ] (прототип).
Эти капсулы в 12 случаях имплантировали больным подкожно, в надлобковую область; одному больному
капсулу вводим в полость брюшины, в специально выкроенный карман. Через три месяца после подкожной
имплантации миллипоровых капсул с культурами клеток потребность в экзогенном инсулине исчезла полностью у двух больных (случаи №№ 1 и 2). После внутрибрюшинной имплантации одной капсулы лечебного
эффекта зарегистрировано не было. В остальных случаях (подкожная имплантация капсул с культивированными микрофрагментами ПЖ) потребность в экзогенном инсулине снизилась на 12,5-77,7 %. Поскольку при
дальнейшем наблюдении этот эффект в разной мере ослабевал - в части случаев капсулы, наполненные
трансплантационным материалом, иссекали и подвергали гистологическому изучению. Было установлено,
что вокруг капсул развивалась умеренная реакция соединительной ткани. Зона, непосредственно прилегающая к капсулам, оказалась хорошо васкуляризированной. При этом возле имплантата не было найдено лимфоцитарной инфильтрации. Длительное наблюдение за больными, которые значились по №№ 1, 3, 4, 5, 6, 7,
8, 9, 10 и 11, показало, что у них вновь нарушилась толерантность к глюкозе и восстановилась исходная потребность в экзогенном инсулине. Снизившаяся после имплантации капсул с культивированной островковой
тканью потребность в экзогенном инсулине в случаях №№ 12 и 13.
Основным недостатком данного способа является быстрое (спустя три месяца) ослабление положительного эффекта: повторное нарушение толерантности организма к глюкозе и восстановление исходной потребности в экзогенном инсулине.
Задачей данного изобретения является обеспечения длительного времени действия положительного эффекта имплантации путем улучшения ряда факторов, обеспечивающих долговременную и эффективную
жизнедеятельность островковых клеток, имплантированных в миллипоровых капсулах в организм реципиента.
Для решения этой задачи потребовалось удовлетворить ряд условий, основными из которых (по данным
наших экспериментов) являются: правильный выбор места имплантации, в котором отсутствует клеточная
реакция отторжения и созданы условия для длительного сохранения имплантата; обеспечение биологической совместимости капсулы и ее содержимого с зоной имплантации в организме реципиента; условием решения поставленной задачи является также оптимизация диффузионных свойств оболочки капсулы с тем,
чтобы обеспечивалось нормальное питание капсулированных клеток и выделение продуктов их жизнедеятельности, т.е. инсулина. Это условие (на ряду с правильным выбором места имплантации) обеспечивается
оптимальным размером пор оболочки капсулы, коэффициентом пористости, а также и качеством ее клеточного содержимого; существенным условием является также наличие антиагезивного свойства материала
капсулы, которое будет препятствовать развитию в зоне имплантации грубой фиброзной ткани, препятствующей нормальному функционированию имплантата.
Для решения поставленной задачи и соблюдения указанных выше условий в предлагаемом способе,
включающем трансплантацию диффузионной миллипоровой капсулы с культурой островковых клеток поджелудочной железы в соответствии с данным изобретением капсулу вводят и фиксируют в русле магистрального артериального кровеносного сосуда реципиента, при этом диаметр пор капсулы выбирают в пределах 0,18-0,28 нм.
Кроме того, в предложенном способе в качестве оболочки капсулы используют пленку из пористого полисульфонкупрофанового материала, в которую помещают от 300 до 500 тысяч островковых клеток на 1 кг
массы реципиента в зависимости от уровня гипергликемии последнего.
В оптимальном варианте реализации способа коэффициент пористости оболочки капсулы выбирают в
пределах от 40 до 60 %.
И наконец, при реализации оптимального варианта способа в качестве содержимого капсулы используют
культуру клеток поджелудочной железы плодов человека 16-22 недель пренатального развития.
2
BY 3720 C1
Реализуемость данного способа подтверждена нами серией хронических экспериментов на половозрелых
беспородных собаках. Методологической основой выбранного подхода послужил феномен необычной реакции на чужеродные ткани в сосудистом русле [4], суть которого состоит в длительном сохранении трансплантата в магистральных сосудах и камерах сердца реципиента. Все эксперименты проведены в строгом
соответствии с правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных.
Состояние хронической гипергликемии вызывалось внутренним однократным введением аллоксана в дозе 50-70 мг/кг веса животного. Развитие сахарного диабета происходило на 12-14 сутки и характеризовалось
устойчивым повышением концентрации глюкозы в диапазоне 12,8-14,6 ммоль/л сыворотки. Для операции по
трансплантации островковых клеток использовали культуру клеток островков Лангерганса ПЖ плодов человека 16-22 недель пренатального развития. Ксенотрансплантацию культуры проводили в миллипоровых полисульфонкупрофановых капсулах с диаметром пор 0,18-0,28 нм. В капсуле содержалось в среднем 10 млн.
клеток, т.е. по 300-500 тысяч на 1 кг массы животного и в зависимости от уровня гипергликемии.
Функциональная адекватность капсулы была при пересадке культуры мнеломных клеток в ушко левого
предсердия и просвет брюшной аорты (между бифуркацией и почечными артериями). Цитологический контроль путем витальной окраски трипановым синим, проведенный в различные сроки в течение трех месяцев
после вмешательства выявил от 70 до 80 процентов живых клеток.
Трансплантация клеточной культуры ПЖ проводилась после установления состояния хронической гипергликемии (на 14-15-е сутки). Операцию проводили под внутренним наркозом. После лапаратомии и бокового отжатия аорты проводили поперечную аортотомию и имплантацию капсулы с фиксацией в просвете
сосуда путем прошивания за фиксированные площадки, затем накладывали сосудистый шов на аорту и ушивали рану.
В послеоперационном периоде (на 2, 3 и 7 сутки) наблюдалось снижение гипергликемии до показателей,
близких к нормальным (3-4,5 ммоль глюкозы/л). Затем уровень гликемии стабилизировался и был прослежен при периодическом определении в течение 2 лет. Цитологический контроль, проведенный после снятия
животных с опыта через 1 и 3 месяца, а также через 1, 1,5 и 2 года с применением витальной окраски трипановым синим показал присутствие в капсульном содержимом через 1 месяц - 80 %, через 3 месяца - 70 %,
через 1 год - 58 %, через 1,5 и 2 года - 56 % жизнедеятельных островковых клеток поджелудочной железы.
Таким образом, полученные данные позволяют утверждать, что при реализации предложенного способа
достигнут результат существенного увеличения времени эффективной жизнедеятельности островковых клеток ПЖ, имплантируемых в миллипоровых капсулах в организме реципиента и обеспечивающих длительную
эугликемию и нормогликемию. Это позволило стабилизировать течение диабета, избавить реципиентов от
эпизодов глипергликемии и кетоацидоза, остановило наступление и прогрессирование поздних осложнений
сахарного диабета.
Государственный патентный комитет Республики Беларусь.
220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.
3
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
113 Кб
Теги
патент, by3720
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа