close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY3838

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(19)
BY (11) 3838
(13)
C1
(51)
(12)
7
A 61K 31/70,
C 07H 17/00,
C 07H 15/252,
C 07C 47/542
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ
КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ
(54)
ПРИМЕНЕНИЕ 4'-ЙОДО-4'-ДЕОКСИДОКСОРУБИЦИНА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ
АМИЛОИДОЗА, СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ АМИЛОИДОЗА
(21) Номер заявки: 950431
(22) 1995.04.26
(86) РСТ/ЕР 94/02511, 1994.07.29
(31) MI 93A001800, MI 94A000621
(32) 1993.08.06, 1994.03.31
(33) IT
(46) 2001.03.30
(71) Заявители: Поликлинико Сан Маттео, Иституто
Ди Риковеро Э Кура А Караттере Шиентифико Ди
Диритто Публико, Иституто Национале Пер Ло
Студио Э Ла Кура Деи Тумори (IT)
(72) Авторы: МЕРЛИНИ, Джампаоло, ДЖАННИ,
Лука (IT)
(73) Патентообладатели:
Поликлинико
Сан
Маттео, Иституто Ди Риковеро Э Кура А
Караттере Шиентифико Ди Диритто Публико;
Иституто Национале Пер Ло Студио Э Ла Кура
Деи Тумори (IT)
(57)
1. Применение 4'-йодо-4'-деоксидоксорубицина и его фармацевтически приемлемых солей в качестве
средства индукции распада фибрилл амилоида и ингибирования фибриллогенеза при лечения амилоидоза.
2. Способ лечения амилоидоза за счет индукции распада фибрилл амилоида и ингибировании фибриллогенеза, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества 4'-йодо-4'деоксидоксорубицина или его фармацевтически приемлемых солей.
3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что 4'-йодо-4'-деоксидоксорубицин вводят пациенту внутривенно
при ежедневной дозировке, составляющей от 15 мг/м2 до 30 мг/м2 площади тела в виде раствора, содержащего фармацевтически приемлемые носители или разбавители, в течение периода времени в интервале от 2
до 4 недель.
(56)
1. US 4438105 A, 1984.
2. EP 0275966 A1, 1988.
3. EP 0502661 A2, 1992.
Данное изобретение относится к новому применению известного антрациклина с противоопухолевой активностью.
Более конкретно - изобретение относится к новому применению 4'-йод-4'-деоксидоксорубицина и его
фармацевтически приемлемых солей при лечении амилоидоза.
4'-йод-4'-деоксидоксорубицин (IDX) формулы
BY 3838 C1
описан в [1] Suarato и др. вместе со способом его получения.
Указанный антрациклин, который отличается от доксорубицина тем, что гидроксил сахара замещен в положении 4 одним атомом йода, обладает высокой противоопухолевой активностью.
Термин “амилоидоз” относится к различным болезненным состояниям, обладающим в качестве общей
характерной черты тенденцией определенных белков к полимеризации и осаждению во внеклеточном пространстве в виде нерастворимых фибрилл, вызывая структурные и функциональные повреждения органов и
тканей.
Хотя они содержат огромное разнообразие белковых субъединиц, тем не менее различные типы амилоидов имеют одинаковое ультраструктурное строение в виде переплетающихся β-пластов.
Фибриллы образуются из отдельных легких цепей моноклональных иммуноглобулинов многочисленных
других амилоидогенных белков таких, как протеин АА, транстиретин, β-2-микроглобулин, бета-протеин, которые вызывают амилоидоз.
Итак, неожиданно было установлено, что JDX, и, в частности, его гидрохлорид, является активным в том
смысле, что он вызывает разложение амилоидных фибрилл.
Взаимодействие лекарственный препарат/фибрилла является основой успешного клинического результата, наблюдаемого у пациентов, больных амилоидозом. В связи с тем, что известна структура их в виде бетапластов, общая для всех видов амилоидоза, 4'-йод-4'-деоксидоксорубицин представляется перспективным
для лечения всех видов амилоидоза.
Экспериментальные данные, относящиеся к соединению IDX с амилоидными фибриллами различных биохимических композиций.
Предварительно определенное количество амилоидных фибрилл (1 мг/мл) термостатировалось с различными концентрациями гидрохлорида IDX.
Инкубирование осуществлялось в физиологическом растворе в течение 2 часов, при этом система подвергалась постоянному спокойному перемешиванию.
Затем фибриллы центрифугировались при 5000 об/мин и проводилось определение оптической плотности всплывшей части при 478 нм.
Процедура промывания повторялась три раза.
После окончательного этапа центрифугирования осуществлялся количественный и качественный анализ
связи с фибриллами с использованием таблетирования.
Количественный анализ:
Таблетка суспендировалась в фосфатном буферном растворе (ФБР) и затем термостатировалась в течение ночи с ферментом протеазы. Такая обработка вызывает полный гидролиз белков.
Количество связанного фибриллами IDX может быть измерено в всплывшем слое жидкости спектрофотометрированием при 478 нм.
Испытания показали связывание 4 ± 1 мг IDX на 1 мг фибрилл.
Приведенные данные были получены при исследовании амилоидных фибрилл двух пациентов (ND и
CAT), страдающих амилоидозом.
Качественный анализ:
Качественный анализ, проведенный с использованием иммунофлюоресцентного микроскопа, был осуществлен с применением спектрофлюориметрических свойств IDX. Был определен состав из следующих фибрилл:
легкие иммуноглобулиновые цепочки (AL)
амилоид А (АА)
β2-микроглобулин (ABZM)
β-протеин (АВ)
транстиретин (Вар. Met 30) (ATTR).
Фибриллы инкубировались с 10-7 MIDX и с DOX в 0,15 М-ом растворе NaCl в течение 1 часа и экстенсивно промывались 0,15 М раствором NaCl. Характерная антрациклиновая флуоресценция оценивалась
возбуждением при 484 нм и отсчетом при 610 нм.
Все фибриллы, инкубированные с IDX, показали интенсивную флуоресценцию, в то время, как соответствующие фибриллы, термостатированные с DOX, не обнаружили заметной флуоресценции.
Ингибирование образования инсулиновой фибриллы “in vitro”.
10 мг коммерческого бычьего инсулина, суспендированного в 1 мл (1.74 х 10-3 М) 5 % уксусной кислоты,
инкубировались в течение двух часов при 85 °С до образования прозрачного геля. После замораживания при
-80 °С, нагревания до 37 °С и повторения этой процедуры 5 раз фибриллы подвергались центрифугированию
в микроцентрифуге.
Производилось добавление IDX и DX в различных молярных отношениях к фибриллярному белковому
предшествующему соединению (инсулину). (IDX-DX: инсулин; 1:1, 1:2, 1:4, 1:8).
IDX, а не DX, полностью ингибировал образование амилоидных фибрилл при молярных соотношениях
1:1 и 1:2 и частично при молярном отношении 1:4.
2
BY 3838 C1
Испытания показывают, что IDX ингибирует фибриллогенез “in vitro”.
Экстракция гликоламиногликанов (GaGs) из амилоидных фибрилл и оценка их связывания применением IDX.
GAGs выделялись из амилоидных фибрилл с применением ионообменной хроматографии в присутствии
6М мочевины. Метод осуществлялся с использованием жидкостной хроматографии быстрого разрешения с
колонкой Mono Q (Pharcmacia).
Фибриллы растворялись в 50 мМ фосфатного буфера с рН 5, содержащего СМ мочевины и 0,2 % CHAPS.
Выделение производилось при 0-5 молярном градиенте NaCl. При использовании этого метода белковые
фибрилльные компоненты выделялись из гликозаминогликанов (дерматан и гепаран сульфат) без какой-либо
необратимой денатурации.
Выделенный белковый компонент подтверждает высокое сродство для IDX, наблюдаемое в природных
фибриллах.
Результаты этих испытаний показывают, что гликозаминогликаны, хотя и являются наиболее распространенными компонентами амилоидных фибрилл, не являются необходимыми для связывания с IDX.
На основе полученных результатов можно сделать заключение, что IDX и его фармацевтически приемлемые соли могут успешно использоваться для лечения пациентов, страдающих от амилоидоза.
Прием осуществляется парентерально в виде соответствующих инъецируемых водных растворов.
Названные растворы могут быть получены с применением стандартного метода в присутствии обычных
носителей и/или разбавителей (см., например, публикацию L. Guanni и др. “Активность и токсичность 4'-йод4'-деоксидоксорубицина у пациентов с прогрессирующим раком грудной железы” Annals of Oncology 2:719725, 1991).
Дозы могут варьироваться от 5 до 150 мг/м2 площади тела в неделю при внутривенном введении. Предпочтительными вариантами дозировок являются от 15 мг/м2 до 30 мг/м2 площади тела в неделю при внутривенном введении в течение двух-четырех недель.
Ниже даются основные клинические данные, касающиеся 5 пациентов.
Пациент № 1.
Этот случай относится к пациенту мужского пола (DЕР) 45 лет, страдающему множественной миеломой
(IgAλ) и амилоидозом AL с широко распространенным кожным и мышечным разложением.
В июле 1991 г. он перенес аутогенную пересадку костного мозга.
Ему была назначена внутривенная дозировка IDX в 190 мг в течение 4 часов.
Уже на следующее утро у пациента наблюдалось значительное улучшение кожи и подвижности конечностей. В течение следующих дней наблюдалось большое количество выделяемых с мочой амилоидозных белковых фрагментов наряду со значительным снижением амилоидных отложений в коже и отложений на
уровне межжелудочковой сердечной перегородки (с 13 до 10 мм).
Ячеистое улучшение в подвижности конечностей и в амилоидных отложениях сохранялись в течение
следующих шести месяцев без дальнейшего лечения.
Пациент № 2.
Этот случай касается пациента мужского пола (MAN) 57 лет, страдающего от амилоидоза AL (IgAλ) с
обширным поражением желудочно-кишечного тракта (8-10 диарейных опорожнений в день), подвергшемуся
значительной потере веса в 15 кг за шесть месяцев (вес 64 кг) и с признаками нефротического симптомокомплекса (протеинурия 7 г/день).
Он подвергался лечению шестью циклами мельфалана и преднизона, закончившемуся в январе 1991 г без какого-либо результата. В феврале 1992 г. его пролечили двумя дозами (80 и 100 мг/м2) IDX.
Непосредственно после лечения наблюдались ячеичное ухудшение диареи, частично регулируемое соматоститином (зарегистрированный товарный знак), и протеинурии (41 г/день), однако в течение последующих
месяцев состояние внутренних органов брюшной полости постепенно улучшалось с ячеистым снижением в
кишечных опорожнениях (3-4 раза/день).
Пациент вновь восстановил вес (68 кг) и протеинурия восстановилась приблизительно до 4 г/день.
Общее состояние пациента значительно улучшилось до такой степени, что он имел возможность вернуться к работе.
Пациент № 3.
Этот случай относится к пациенту женского поля (GAB), страдающему от амилоидоза (IgAλ), главным образом, почечного расположения [нефротический симптомокомплекс с протеинурией (7 г/день)] и с селезеночным
расположением, диагносцированным в 1991 г.
С декабря 1991 г. по май 1992 г. пациент подвергался лечению алкилирующими агентами без какого-либо
улучшения. В июне пациенту было сделано сцинтиграфическое исследование на амилоидные отложения с
применением 131I-SAP, которое подтвердило их почечное и селезеночное расположение. В июле 1992 г. пациент подвергся лечению IDX при внутривенной дозе 30 мг/м2 в неделю в течение двух недель и 15 и 20
мг/м2 в последующие два приема.
3
BY 3838 C1
После первоначального повышения протеинурия снизилась до 6 г/день, и эта величина сохранялась в течение последующих шести месяцев.
Пациент № 4.
Этот случай относится, к пациенту мужского пола (GRO) в возрасте 70 лет, страдающему плазмацитомой
и амилоидозом АL (Ig GK).
Диагноз был поставлен в июле 1991 г., когда пациент начал жаловаться на интенсивную боль в крестцовой области, распространяющуюся на левую нижнюю конечность, такую, что создавалась трудность при хождении. Инструментальное исследование показало присутствие твердой массы диаметром около 10 см,
определяющей разрушение одной стороны крестца и левой подвздошной области, обладающей распространяющимся действием в тазовой полости, проникающей в позвоночный канал и пропитывающей ягодичные
мышцы.
Исследование биопсии показало наличие амилоидомы.
Между октябрем 1991 и январем 1992 г. пациент подвергался лечению кобальтом в количестве 75 сеансов с общим облучением 50 Грей, а в марте 1992 г. был начат цикл химиотерапевтического лечения циклофосфамидом при 500 мг/день в течение 5 дней в месяц с общим количеством в 6 циклов, однако без какогонибудь радиографически очевидного снижения размера амилоидомы или уменьшения болевой симптоматологии. В ноябре 1992 г. было проведено сцинтиграфическое исследование амилоидных отложений с применением 131I-SAP, которое подтвердило нахождение радиоизотопа в крестцовом отделе.
Затем пациент был подвергнут лечению с использованием IDX при внутривенной дозировке 30 мг/м2 в
течение двух недель и 20 мг/м2 в течение следующих двух недель, что привело к почти немедленному снижению в болевой симптоматологии, так, что это побудило его к отказу от приема анальгетиков.
Ультразвуковое диагностическое исследование, проведенное в январе 1993 г., показало снижение массы
ягодичного инфильтрата (с 12 см до 5 см), в то время как магнитный резонанс тазовой области показал снижение диаметра амилоидомы приблизительно с 10 см до 8 см.
Улучшение в болевой симптоматологии сохранялось в течение 14 месяцев после лечения IDX. Сцинтиграфическое исследование амилоидных отложений, проведенное с использованием 131I-SAP через месяц после лечения IDX и спустя 14 месяцев после него, показало постепенное, но полное рассасывание
амилоидных отложений.
Пациент № 5.
Этот случай относится к пациенту мужского поля (LUS) в возрасте 48 лет, страдающему амилоидозом AL
(CLLλ), размещенным, в основном, в почечной и селезеночной области. Нарушения начались в сентябре
1992 г. с появления опускающихся отеков. Биологическое исследование анализа тканевой жидкости показало присутствие большой протеинурии (12,6 г/день), дислипемии и электрофоретические серопротеиновые
симптомы, совместимые с нефротическим синдромом.
В течение сентября пациент подвергся исследованию с применением ультразвуковой почечной биопсии,
которая показала присутствие амилоидных скоплений на уровне клубочковых и интерстициальных сосудов.
Было начато лечение кортикостероидными препаратами, но вскоре оно было прервано из-за неэффективности. В январе 1993 г. пациент подвергся сцинтиграфическому обследованию на амилоидные отложения с
применением 131I-SAP, которое выявило значительное скопление радиоизотопа на селезеночном и почечном
уровнях.
В течение февраля пациент подвергся лечению IDX посредством внутривенных вливаний при дозировке
в 30 мг/м2 при общем назначении 4-х приемов.
К марту 1993 г. спускающиеся отеки явно уменьшились, измерения ежедневной протеинурии составили
приблизительно 6 г/день, а ультразвуковой контроль показал, что размеры селезенки снизились с 12,3 см
(продольный диаметр) до 11,3 см.
Государственный патентный комитет Республики Беларусь.
220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.
4
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
1
Размер файла
159 Кб
Теги
by3838, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа