close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY4023

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(19)
BY (11) 4023
(13)
C1
(51)
(12)
7
A 61B 5/14,
G 01N 33/48
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ
КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ
(54)
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ У
ДЕТЕЙ
(21) Номер заявки: 970585
(22) 1997.10.31
(46) 2001.09.30
(71) Заявитель: Научно-исследовательский
клинический институт радиационной медицины и
эндокринологии Минздрава РБ (BY)
(72) Авторы: Воронцова Т.В., Кучинская Э.А.,
Шаврова Е.Н., Дударенко О.И. (BY)
(73) Патентообладатель: Научно-исследовательский
институт
радиационной
медицины
и
эндокринологии Минздрава РБ (BY)
(57)
Способ диагностики заболеваний щитовидной железы у детей путем определения в крови популяции Тлимфоцитов с использованием нагрузочного индикатора, отличающийся тем, что в качестве нагрузочного
индикатора используют раствор тиреоглобулина в концентрации 100-200 нг в объеме 10 мкл на пробу и при
повышении числа Т-лимфоцитов на 10-15 % от исходного уровня судят о доброкачественных заболеваниях
щитовидной железы (эндемическом зобе, узловом зобе, аутоиммунном тироидите), а при отсутствии увеличения числа Т-лимфоцитов судят о злокачественном заболевании щитовидной железы.
(56)
BY 960026 A, 1997.
SU 764182, 1981.
US 4677061, 1987.
BY 950995 A, 1997.
BY 950996 A, 1997.
BY 2654 A, 1997.
BY 2655 A, 1997.
BY 2656 A, 1997.
Макар Р. Д. // Врачебное дело. - 1991, № 10. - С. 16-19.
Сачек М. Г. и др. Иммунологические аспекты хирургической инфекции. - Витебск, 1994. -С. 34-37.
Изобретение относится к медицине, к разделам иммунологии, лабораторной диагностики и эндокринологии.
Известны клинико-инструментальные, радиометрические, рентгенологические, ультразвуковые и цитологические способы диагностики заболеваний щитовидной железы (ЩЖ) у детей [1, 2, 3].
Известно применение нагрузочных тестов в иммунологии с целью выявления различных заболеваний и
патологических состояний иммунной системы, а также определения индивидуальной чувствительности и
восприимчивости к воздействию ряда иммунокорректоров. Так, например, оценка Т-лимфоцитов с помощью
проведения in vitro проб с тималином, декарисом и теофиллином позволяет выявить особенности и механизмы иммунодефицита, определить оптимальный вариант иммунокоррекции с последующей оценкой ее эффективности [4]. С помощью нагрузочного теста с использованием левамизола показаны различия в розеткообразующей способности клеток здоровых доноров, больных хроническим бронхитом в фазах ремиссии и
обострения и больных острой пневмонией [5].
Однако для диагностики заболеваний ЩЖ использование нагрузочных иммунологических тестов авторами не выявлено.
BY 4023 C1
Задачей заявляемого способа диагностики является дифференциация характера патологического процесса
в ЩЖ у детей с помощью нагрузочной пробы с тиреоглобулином (ТГ).
Поставленная задача достигается тем, что предложен способ диагностики заболеваний ЩЖ у детей путем
определения в крови популяции Т-лимфоцитов с использованием нагрузочного индикатора, отличающийся
тем, что в качестве индикатора используют раствор тиреоглобулина (ТГ) в концентрации 100-200 нг/мл в
объеме 10 мкл на пробу и при повышении числа Т-лимфоцитов на 10-15 % и более от исходного уровня судят о доброкачественных заболеваниях щитовидной железы (эндемическом зобе, узловом зобе, аутоиммунном тироидите), а при отсутствии увеличения числа Т-лимфоцитов судят о злокачественном заболевании
щитовидной железы.
Поскольку онкопроцесс ингибирует в организме функциональную активность иммунокомпетентных клеток, в том числе и Т-лимфоцитов, отсутствие отвечаемости или пролиферации последних на воздействие ТГ
in vitro позволяет судить о наличии специфического злокачественного процесса, так как ТГ проецируется
эпителиальными клетками ЩЖ.
Методика постановки нагрузочного теста с ТГ. Кровь забирают из вены в силиконированные пробирки с
гепарином в концентрации 20-30 ЕД/мл. Суспензию лимфоцитов получают по общепринятой методике в
градиенте плотности фиколл-верографина [6]. Затем в чистые силиконированные центрифужные пробирки
помещают 0,1-0,2 мл отмытой взвеси лимфоцитов в концентрации 2 млн. клеток в 1 мл суспензии; 0,1-0,2 мл
0,5 % суспензии эритроцитов барана и 10 мкл раствора ТГ в концентрации 100-200 нг/мл. Выдерживают 1015 мин в термостате при 37 °С, центрифугируют 5 мин при 1000 об/мин и оставляют в холодильнике на 1824 часа при 4 °С, после чего пипетируют осадок и считают (в камере Горяева) число розеткообразующих
клеток. Параллельно оценивают пробы и без добавления ТГ.
В табл. 1 приведены результаты постановки нагрузочного теста по заявляемому способу диагностики, где
видно, что у детей с диагнозом "рак ЩЖ" не произошло увеличения количества Т-лимфоцитов после воздействия ТГ in vitro, в то время как у детей с узловым зобом, эндемическим зобом и аутоиммунным тироидитом зарегистрировано увеличение числа Т-лимфоцитов от 11 до 15 %.
Пример выполнения (табл. 2).
1. Больная Атрашкова Е.В., 1986 года рождения.
Диагноз: аутоиммунный тироидит?
Берут кровь из вены в силиконированные пробирки с гепарином в концентрации 20-30 ЕД/мл. Суспензию
лимфоцитов получают путем центрифугирования в градиенте плотности фиколл-верографина при 2000
об/мин в течение 15 мин. Затем в одну силиконированную пробирку помещают 0,1-0,2 мл отмытой взвеси
лимфоцитов в концентрации 2 млн. клеток в 1 мл суспензии; 0,1-0,2 мл 0,5 % суспензии эритроцитов барана
и 10 мкл раствора ТГ в концентрации 100-200 нг/мл, а в другую пробирку - 0,1-0,2 мл отмытой взвеси лимфоцитов в той же концентрации и 0,1-0,2 мл 0,5 % суспензии эритроцитов барана. Выдерживают 10-15 мин в
термостате при 37 °С, центрифугируют при 1000 об/мин и оставляют в холодильнике на 18-24 часа при 4 °С,
после чего считают в осадке, помещенном в камеру Горяева, число розеткообразующих клеток параллельно
в двух пробах. В 1-й пробирке с ТГ процент Т-лимфоцитов составил 42 %, во 2-й - 25 %, изменения в процентах составили 17. Контроль цитологический (пункционная биопсия) подтвердил диагноз аутоиммунного
тироидита.
2. Козлова А.А., 1982 года рождения.
Диагноз: рак щитовидной железы?
Берут кровь из вены в силиконированные пробирки с гепарином в концентрации 20-30 ЕД/мл. И далее по аналогии с примером 1. Результат постановки: в 1-й пробирке с ТГ процент Т-лимфоцитов составил 36 %, во 2й - 34 % (табл. 2). Контроль гистологический (постоперационный) подтвердил диагноз: рак щитовидной железы.
Таким образом, заявляемый способ позволяет без значительных материальных затрат получить достоверную информацию о характере патологического процесса в щитовидной железе. Не требует использования
дорогостоящих реактивов и оборудования. Может быть использован в эндокринологических отделениях
больниц и специализированных клиниках.
2
BY 4023 C1
Таблица 1
Изменение относительного количества Т-лимфоцитов в нагрузочном тесте с ТГ у детей с патологией щитовидной железы
Т-лимфоциты, %
X±m min-max
Узловой зоб
36,4±0,88
n = 77
18-52
Эндемический зоб
39,8±0,88
n = 17
17-52
АИТ
37,4±1,29
n = 30
20-56
Рак
36,9±0,9
n = 50
23-49
Контроль
39,9±1,38
n = 34
24-55
* - достоверность различий, p<0,05.
** - достоверность различий, р<0,001.
^ - достоверность различий, р<0,1.
Т-лимфоциты, % / ТГ
X±m min-max
42,6±l,05**
28-64
44,9±2,2*
27-56
41,9±2,04*
22-62
36,6±1,35
17-57
43,1±1,63^
22-61
Диагноз
Изменение, %
15
11
11
0
7
Таблица 2
Индивидуальные изменения относительного количества Т-лимфоцитов у детей с патологией щитовидной железы
№ п/п
ФИО
Год рождения
Диагноз
% Т-лф безТГ
% Т-лф сТГ
1
2
3
4
Атрашкова Е.В.
Гойко Г.В.
Кныш И.В.
Козлова А.А.
1986
1985
1982
1982
АИТ
эндемич. зоб
узловой зоб
рак ЩЖ
25
29
47
34
42
39
60
36
Изменение
в%
17
10
13
2
Источники информации:
1. Макар Р.Д. Актуальнi пiтання дiагностики раку щитовiдноi залози // Врачебное дело. - 1991. - № 10. -С.
16-20.
2. BY А 61В 10/00, G 01N 33/48. Способ диагностики злокачественных новообразований ЩЖ / Кириллов
В.А., Ющенко Ю.П. - № 2655 А, 1997.
3. BY А 61В 10/00, G 01N 33/48. Способ диагностики рака ЩЖ / Ющенко Ю.П., Кириллов В.А. - 950995
А; 1997.
4. Успенский В.М., Ващенков В.М. Значение проб с тималином, декарисом и теофиллином при оценке Тлимфоцитов // Лабораторное дело. - 1984. - № 6. - С. 332-335.
5. Понякина И.Д. Нагрузочные тесты в розеткообразовании // Лабораторное дело. - 1984. -№ 10. - С. 606609.
6. Новиков Д.К., Новикова В.И. Клеточные методы иммунодиагностики. -Минск, 1979.-211 с.
Государственный патентный комитет Республики Беларусь.
220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.
3
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
132 Кб
Теги
патент, by4023
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа