close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY4141

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(19)
BY (11) 4141
(13)
C1
7
(51) C 07D 305/14
(12)
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ
КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ
(54)
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 10-ДЕЗАЦЕТИЛБАККАТИНА III
BY 4141 C1
(21) Номер заявки: 950382
(22) 1995.03.17
(86) PCT/FR 93/00971, 1993.10.04
(31) 92/11745
(32) 1992.10.05
(33) FR
(46) 2001.12.30
(71) Заявитель: РОН-ПУЛЕНК РОРЕ С.А. (FR)
(72) Автор: Родольф МАРГРАФ (FR)
(73) Патентообладатель: РОН-ПУЛЕНК РОРЕ С.А.
(FR)
(57)
1. Способ получения 10-дезацетилбаккатина III экстракцией различных частей тисса (Taxus sp.) экстрагентом, отличающийся тем, что измельченные части тисса обрабатывают водой, отделяют водный раствор, содержащий 10-дезацетилбаккатин III, от суспензии растительной массы, экстрагируют 10дезацетилбаккатин III из водного раствора с помощью органического растворителя, отделяют полученный
органический экстракт, содержащий 10-дезацетилбаккатин III, от водной фазы, удаляют растворитель из
отделенного органического экстракта, селективно кристаллизуют 10-дезацетилбаккатин III из полученного
остатка в органическом растворителе, после чего выделяют 10-дезацетилбаккатин III в виде очищенного вещества.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что измельченные и при необходимости высушенные части тисса
перемешивают с водой при 20 - 65 °C.
3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что измельчение и при необходимости сушку частей тисса осуществляют до, после или в процессе их возможного замораживания и размораживания.
4. Способ по п. 2, отличающийся тем, что используют 2-10 л воды на 1 кг измельченных и высушенных
частей тисса.
5. Способ по любому из пп. 2 - 4, отличающийся тем, что используют деминерализованную воду.
6. Способ по любому из пп. 2 - 4, отличающийся тем, что обработку водой измельченных частей тисса
осуществляют с использованием ультразвука.
7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что водный раствор, содержащий 10-дезацетилбаккатин III, отделяют от суспензии растительной массы путем фильтрования, центрифугирования или отстаивания.
8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что водный раствор, содержащий 10-дезацетилбаккатин III, экстрагируют органическим растворителем, выбранным из простых или сложных алифатических эфиров.
9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют метилтрет-бутиловый эфир, этил-трет-бутиловый эфир, метил-н-бутиловый эфир, метил-н-амиловый эфир, этилтрет-амиловый эфир, трет-бутилизопропиловый эфир, этилизобутиловый эфир, трет-бутил-н-пропиловый
эфир, этил-н-гексиловый эфир, этилацетат, пропилацетат, изопропилацетат, н-бутилацетат, третбутилацетат, метил-трет-бутилацетат, трет-бутилпропионат или трет-амилацетат.
10. Способ по п. 8, отличающийся тем, что в качестве растворителя используют метил-трет-бутиловый
эфир, этил-трет-бутиловый эфир, этилацетат или н-бутилацетат.
11. Способ по п. 8, отличающийся тем, что используют водный раствор с рН < 7.
12. Способ по п. 8, отличающийся тем, что используют водный раствор с рН < 6.
13. Способ по п. 1, отличающийся тем, что органический экстракт, содержащий 10-дезацетилбаккатин
III, отделяют от водного раствора путем отстаивания.
BY 4141 C1
14. Способ по п. 1, отличающийся тем, что растворитель из органического экстракта, содержащего 10дезацетилбаккатин III, при необходимости промытого водным раствором слабого основания или воды, удаляют путем дистилляции.
15. Способ по п. 14, отличающийся тем, что удаление растворителя из органического экстракта осуществляют путем дистилляции при пониженном давлении.
16. Способ по п. 1, отличающийся тем, что селективную кристаллизацию 10-дезацетилбаккатина III из
остатка, полученного после удаления растворителя, осуществляют в органическом растворителе или в смеси
органических растворителей.
17. Способ по п. 16, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют алифатический нитрил, при необходимости в смеси с алифатическим спиртом, алифатическим эфиром или алифатическим кетоном.
18. Способ по п. 17, отличающийся тем, что в качестве алифатического нитрила используют ацетонитрил или пропионитрил.
19. Способ по п. 17, отличающийся тем, что в качестве алифатического спирта используют метанол,
этанол, пропанол, изопропанол или н-бутанол.
20. Способ по п. 17, отличающийся тем, что в качестве сложного алифатического эфира используют
этилацетат, изопропилацетат, н-бутилацетат или трет-бутилацетат.
21. Способ по п. 17, отличающийся тем, что в качестве алифатического кетона используют ацетон, метилэтилкетон, метилпропилкетон, метил-н-бутилкетон или метилизобутилкетон.
22. Способ по п. 17, отличающийся тем, что селективную кристаллизацию осуществляют в ацетонитриле, возможно в смеси с этанолом и/или этилацетатом или н-бутилацетатом и/или ацетоном.
23. Способ по п. 1, отличающийся тем, что 10-дезацетилбаккатин III выделяют путем фильтрования, отстаивания или центрифугирования.
24. Способ по любому из пп. 1 - 23, отличающийся тем, что 10-дезацетилбаккатин III получают из коры,
ствола, корней или листьев тисса.
25. Способ по любому из пп. 1 - 23, отличающийся тем, что 10-дезацетилбаккатин III получают из листьев тисса.
26. Способ по любому из пп. 24-25, отличающийся тем, что используют следующие разновидности тисса: Taxus baccata, Taxus brevifolia, Taxus canadensis, Taxus cuspitata, Taxus floridana, Taxus media или Taxus
wallichiana.
(56)
WO 92/07842 A1.
US 4814470 A, 1989.
Изобретение относится к способу получения полезных промежуточных веществ для приготовления полусинтетическими способами таксола и таксотера или их аналогов из различных частей растений, содержащих
эти промежуточные вещества.
В частности, изобретение относится к избирательному получению 10-дезацетилбаккатина III из коры,
ствола, корней и листьев различных пород тиса.
Таксол и таксотер, а также их аналоги, имеющие нижеследующую общую формулу:
(I)
и проявляющие высокоэффективное антираковое и антилейкемическое действие, являются химикотерапевтическими препаратами для эффективного лечения целого ряда раковых заболеваний, например рака
молочной железы, рака простаты, толстой кишки, желудка, почек, рака яичек и, в особенности, рака яичников.
В общей формуле I Ar может представлять замещаемый фенильный радикал, R - атом водорода, ацетиловый радикал или карбомиловый N-замещенный радикал, R' является атомом водорода или карбомиловым Nзамещенным радикалом, a R1 может представлять фениловый радикал или R2-O- радикал, где R2 представляет алкил, алкилен, алкинил, циклоалкил, циклоалкилен, бициклоалкил, фенил или гетероциклил.
2
BY 4141 C1
Таксол соответствует препарату, в общей формуле I которого Аr и R1 представлены фениловым радикалом, R - ацетиловым радикалом, a R' является атомом водорода; таксотер соответствует препарату, в общей
формуле I которого Аr представлен фениловым радикалом, R и R' представлены атомом водорода, a R1 - тбутокси-радикал.
Таксол существует в природе в различных породах тисового дерева, однако в очень небольших количествах, причем его получение практически невозможно без полного разрушения растения. Так, таксол может
быть выделен по методу С.Н.О. HUANG и др. J.Natl.Prod, 49, 665 (1986), который заключается в обработке
измельченной коры тиса породы Taxus brevifolia с помощью метанола, в концентрировании экстракта, в
диспергировании остатка в смеси гексан-ацетон в соотношении по объему 1:1, в очистке растворимой части
методом хроматографии с помощью колонны Флоризиля. Полученный таксол-сырец очищается с помощью
последовательной рекристаллизации в смеси метанол-вода и гексан-ацетон, а затем с помощью хроматографии и повторной кристаллизации. Количество полученного таксола может составлять 0,005-0,017 % от части
использованного растения.
Таксотер в природе не существует, его можно получить путем полусинтеза из 10-дезацетилбаккатина III,
имеющего следующую формулу:
, (II)
используя способы, описанные, в частности в [1, 2], а также в [3].
Различные породы тиса, такие как Taxus baccata, Taxus brevifolia, Taxus canadensis, Taxus cupidata, Taxus
floridana, Taxus media, Taxus wallichiana, содержат производные таксана, основными из которых являются
таксол и 10-дезацетилбаккатин III, а также цефаломаннин, дезацетил-10-цефаломаннин и баккатин III, которые могут быть связаны с сахарами.
Если таксол, в основном, содержится в стволе и коре дерева, то 10-дезацетилбаккатин III - в листьях.
Следует отметить, что содержание 10-дезацетилбаккатина III в листьях, как правило, значительно выше содержания таксола, будь то в коре, древесине или в листьях.
Отсюда следует, что 10-дезацетилбаккатин III является наиболее важным источником получения таксола
по сравнению с его непосредственным выделением из тиса, а также для приготовления таксотера.
Получение 10-дезацетилбаккатина III из листьев различных пород тиса не требует разрушения дерева, и
после отрастания листвы она вновь может идти на переработку.
Как правило, известные способы получения производных таксана, содержащихся в различных частях тисового дерева, в частности в коре, древесине, корнях, листьях, требуют применения дорогостоящих и длительных методов хроматографии, которые, тем не менее, не обеспечивают полного выделения производных
таксана, содержащихся в растении.
10-дезацетилбаккатин III может быть получен из расчета порядка 300 мг на 1 кг листьев тиса породы Taxus
baccata с применением способа, в соответствии с которым используют процесс вымачивания игл в метаноле,
экстракцию органическим растворителем, в частности, хлористым метилом, и последовательные операции
хроматографии по методу, описанному в [1].
Различные составляющие производных таксана, содержащихся в различных частях дерева, могут быть
выделены с использованием способа, согласно которому используют хроматографию в жидкой фазе "реверс" и который описан в [4]. В соответствии с этим способом осуществляют обработку экстрактов тиса методом хроматографии в жидкой фазе "реверс" на адсорбенте, на котором осаждаются производные таксана,
затем производят извлечение адсорбированных производных таксана и их выделение. В соответствии с данным способом представляется возможным получить 200 мг 10-дезацетилбаккатина III с каждого килограмма
высушенных и измельченных листьев.
Задачей изобретения является создание простого способа получения 10-дезацетилбаккатина III из различных частей тиса, в частности листьев, с высокой избирательностью, высоким выходом конечного продукта и не требующего сложной хроматографической технологии.
Поставленная задача решается тем, что в способе получения 10-дезацетилбаккатина III экстракцией различных частей тиса (Taxus sp.) экстрагентом, согласно изобретению, измельченные части тиса обрабатывают
водой, отделяют водный раствор, содержащий 10-дезацетилбаккатин III, от суспензии растительной массы,
экстрагируют 10-дезацетилбаккатин III из водного раствора с помощью органического растворителя, отделяют полученный органический экстракт, содержащий 10-дезацетилбаккатин III, от водной фазы, удаляют
растворитель из отделенного органического экстракта, селективно кристаллизуют 10-дезацетилбаккатин III
3
BY 4141 C1
из полученного остатка в органическом растворителе, после чего выделяют 10-дезацетилбаккатин III в виде
очищенного вещества.
В соответствии с настоящим изобретением можно использовать любую часть тисового дерева, в частности кору, ствол, корни, листья. Основными породами тиса, используемыми в соответствии с настоящим
способом, являются Taxus baccata, Taxus brevifolia, Taxus canadensis, Taxus cupidata, Taxus floridana, Taxus
media и Taxus wallichiana. Наиболее предпочтительной частью используемого тисового дерева пород Taxus
baccata и Taxus brevifolia являются листья, которые, как правило, богаче содержанием 10дезацетилбаккатина III. Например, можно получить 800 мг 10-дезацетилбаккатина III на 1 кг листьев тиса
породы Taxus baccata. Размер измельченных частиц может быть от 0,5 мм до нескольких миллиметров. Наиболее удобно работать с материалом, частицы которого в среднем менее 1 мм.
Исходное готовое сырье тиса получают путем измельчения и сушки, которые могут осуществляться до
или после замораживания и размораживания свежего материала или в процессе замораживания или размораживания данного материала.
Обработка водой измельченного тисового материала осуществляется способами, известными среднему
специалисту. В частности, водный раствор, содержащий 10-дезацетилбаккатин III, получают путем перемешивания в воде при температуре 20-65 °С измельченного материала тисового дерева в течение 30 минут - 2
часов. Количество воды может выбираться в широких пределах, однако рекомендуется использовать от 2 до
10 литров в расчете на 1 кг измельченного и высушенного материала и преимущественно порядка 5 литров
на 1 кг обрабатываемого материала. Следует использовать деминерализованную воду и проводить обработку
с помощью ультразвука.
С целью повышения выхода продукта рекомендуется провести несколько обработок водой растительной
массы для получения водного раствора, из которого извлекают 10-дезацетилбаккатин III по нижеописанному
методу.
Водный раствор, в котором содержится 10-дезацетилбаккатин III, отделяют от растительной массы
обычными способами, например,фильтрацией, центрифугированием или отстаиванием.
Полученный водный раствор может охлаждаться, после чего осуществляют экстракцию 10дезацетилбаккатина III органическим растворителем в один или несколько приемов. Наиболее рекомендуемыми органическими растворителями являются эфиры, например метил-трет-бутиловый эфир, этил-третбутиловый эфир, метил-н-бутиловый эфир, метил-н-амиловый эфир, этил-трет-амиловый эфир, третбутилизопропиловый эфир, этилизобутиловый эфир, трет-бутил-н-пропиловый эфир, этил-н-гексиловый
эфир или алифатические эфиры, например, этилацетат, пропилацетат, изопропилацетат, н-бутилацетат,
трет-бутилацетат, метил-трет-бутилацетат, трет-бутилпропионат, трет-амилацетат. Наибольший интерес
представляют метил-трет-бутиловый эфир, этил-трет-бутиловый эфир, этилацетат и н-бутилацетат.
Экстракцию органическим растворителем ведут в водном растворе с рН ниже 7 и, как правило, ниже 6.
Органический экстракт, содержащий 10-дезацетилбаккатин III, отделяют от водной фазы известным способом, в частности отстаиванием.
Органический экстракт может промываться водным раствором со слабым основанием, например карбонатом натрия, или водой. После сушки органический растворитель удаляют из экстракта обычным методом,
в частности перегонкой, при необходимости под низким давлением для получения, как правило, твердого
осадка, из которого выделяют 10-дезацетилбаккатин III.
Избирательную кристаллизацию 10-дезацетилбаккатина III ведут из раствора, полученного путем растворения осадка в органическом растворителе или в смеси органических растворителей. В качестве растворителей, позволяющих осуществлять избирательную кристаллизацию 10-дезацетилбаккатина III, можно
использовать нитрилы, например ацетонитрил, пропионитрил или изобутиронитрил, при необходимости в
смеси с алифатическим спиртом, таким как метанол, этанол, пропанол, изопропанол, н-бутанол, с алифатическим эфиром типа этилацетат, изопропилацетат, н-бутилацетат, трет-бутилацетат или с алифатическим кетоном, например ацетоном, метилэтилкетоном, метилпропилкетоном, метил-н-бутилкетоном или
метилизобутилкетоном. Особенно хорошо процесс избирательной кристаллизации идет в ацетонитриле, в
том числе в присутствии этанола и/или этилацетата, а также н-бутила и/или ацетона.
Выпавший в осадок 10-дезацетилбаккатин III может быть выделен при помощи фильтрования, отстаивания или центрифугирования.
В соответствии с настоящим изобретением способ позволяет получить практически чистый 10дезацетилбаккатин III при выходе продукта, значительно превышающем выход, который обеспечивали ранее
известные способы.
10-дезацетилбаккатин III, полученный согласно заявленному способу, может использоваться для приготовления таксола и таксотера или их производных.
Ниже приводятся конкретные примеры осуществления способа в соответствии с настоящим изобретением.
Пример 1.
К 2,5 литрам деминерализованной воды, нагретой до 50 °С, добавляют 500 г высушенных и измельченных листьев тиса Taxus baccata с размером измельченных частиц менее 1 мм и содержанием 104
BY 4141 C1
дезацетилбаккатина III, определенным методом высокоточной жидкостной хроматографии, 0,08 % или 400
мг 10-дезацетилбаккатина III на 500 г листьев. В течение 1 часа и при температуре 50 °С ведут перемешивание, а затем осуществляют фильтрацию.
Фильтрат (1,8 литра) с содержанием рН 5,4 экстрагируют этилацетатом в 3 приема по 0,9 литра. Органическую фазу объемом 2,7 литра подвергают двукратному промыванию в одном литре содового раствора 0,1 М,
затем двукратному промыванию в 1 литре деминерализованной воды, после чего сушат на сульфате натрия.
После фильтрации и сухого обогащения получают твердый осадок (3,2 г), который обрабатывают 9 см3 ацетонитрила при температуре около 70 °C. После охлаждения в течение ночи при температуре порядка +4 °C осадок отделяют при помощи фильтрования. После сушки получают 245 мг кристаллов, содержащих в
соответствии с результатом анализа методом высокоточной жидкостной хроматографии 75 % чистого 10дезацетилбаккатина III или 183 мг. По результатам аналогичного анализа содержание 10-дезацетилбаккатина
III в маточном растворе составляет порядка 40 мг.
Растительную массу, содержащую 0,7 литра воды, экстрагируют два раза вышеописанным методом. Собранный водный фильтрат обрабатывают тем же способом, что и раньше, и получают 2,5 г твердого продукта.
Данный продукт помещают в 5 см3 ацетонитрила при температуре 70 °C. После охлаждения в течение ночи
при температуре около +4 °С методом фильтрации отделяют 169 мг кристаллов, в которых, согласно результату высокоточного анализа, проведенного методом жидкостной хроматографии, содержится 75 % чистого
10-дезацетилбаккатина III или 127 мг. По результатам аналогичного анализа в маточном растворе содержится 46 мг 10-дезацетилбаккатина III.
Общий вес 10-дезацетилбаккатина III, экстрагированного водой, составляет 183 + 40 + 127 + 47 + 397 мг,
т.е. практически 100 % результат.
Пример 2.
3 литра деминерализованной воды нагревают до 50 °C, затем добавляют 500 г высушенных и измельченных листьев тиса с размером измельченных частиц в среднем не более 1 мм и содержанием 10дезацетилбаккатина III, определенным методом высокоточной жидкостной хроматографии, 0,08 % или 400
мг в 500 г листьев. В течение 1 часа и при температуре 50 °С ведут перемешивание, затем осуществляют
фильтрацию. Содержание рН фильтрата объемом 1,97 литра снижают с 5,15 до 4,6 путем добавления концентрированной соляной кислоты, затем проводят фильтрацию с помощью фильтра Зейтца, содержащего мембрану из асбестосодержащего картона. В результате получают 1,8 литра фильтрата.
Фильтрат экстрагируют метил-терт-бутиловым эфиром 2 раза по 150 см3, а затем 4 раза по 60 см3. Полученный экстракт и концентрат дают 620 мг твердого продукта, который обрабатывают 3 см3 ацетонитрила
при температуре 70 °C.
После охлаждения в течение ночи при температуре +4 °С с помощью фильтрования выделяют 28 мг кристаллов с содержанием 10-дезацетилбаккатина III 90 %. Анализ проводится методом высокоточной жидкостной хроматографии. Согласно результатам анализа, полученным аналогичным методом, маточный раствор
содержит 12,8 мг 10-дезацетилбаккатина III.
Источники информации:
1. US 4814470.
2. US 4924012.
3. WO 92/09589.
4. WO 92/07842.
Государственный патентный комитет Республики Беларусь.
220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.
5
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
164 Кб
Теги
by4141, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа