close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY4143

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(19)
BY (11) 4143
(13)
C1
7
(51) C 07H 19/06,
(12)
A 61K 31/70,
A 61P 35/00
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ПАТЕНТНЫЙ
КОМИТЕТ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ
(54)
N-ОКСИКАРБОНИЛЗАМЕЩЕННЫЕ 5'-ДЕОКСИ-5-ФТОРЦИТИДИНЫ И
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ ПРЕПАРАТ
(21) Номер заявки: 951
(22) 1993.12.17
(31) 92121538.0
(32) 1992.12.18
(33) EP
(46) 2001.12.30
(71) Заявитель: Ф. Хоффманн-ля Рош АГ (СН)
(72) Авторы: Мотохиро Арасаки, Хидео Ишитсука,
Исами Курума, Масанори Миуа, Чикако
Мурасаки, Нобуо Шимма, Исао Умеда (JP)
(73) Патентообладатель: Ф. Хоффманн-ля Рош АГ
(СН)
(57)
1. N-Оксикарбонилзамещенные 5'-деокси-5-фторцитидины общей формулы I:
BY 4143 C1
, (I)
в которой R1 - насыщенный или ненасыщенный прямой или разветвленный алкильный радикал с числом
атомов углерода в самой длинной прямой цепи от трех до семи или радикал формулы -(CH2)n-Y, где Y - циклогексил, когда n = 0-4, или Y - С1-С4-алкокси или фенил, когда n = 2-4;
R2 - водород или легко гидролизуемый в физиологических условиях ацильный остаток,
их сольваты или гидраты.
2. Соединения по п. 1, отличающиеся тем, что R 1 выбирают из группы, включающей н-пропил, 1изопропил-2-метилпропил, 1,1,2-триметилпропил, н-бутил, изобутил, 2-этилбутил, 3,3-диметилбутил, н-пентил,
изопентил, неопентил, 2-пропилпентил, н-гексил, 2-этилгексил, н-гептил, аллил, 2-бутен-1-ил, 3-бутен-1-ил,
3-пентен-1-ил, 4-пентен-1-ил, 3-гексен-1-ил, 4-гексен-1-ил, 5-гексен-1-ил, циклогексил, циклогексилметил,
2-циклогексилэтил, 3-циклогексилпропил, 4-циклогексилбутил, 2-метоксиэтил, 2-этоксиэтил, 3метоксипропил, 3-этоксипропил, 4-метоксибутил, 4-этоксибутил, фенэтил, 3-фенилпропил и 4-фенилпропил.
3. Соединения по п. 1, отличающиеся тем, что выбраны из группы, включающей:
5'-деокси-5-фтор-N4-(пропоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-(гексилоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-(изопентилоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-(неопентилоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-[(1,1,2-триметилпропокси)карбонил]цитидин,
5'-деокси-N4-[(3,3-диметилбутокси)карбонил]-5-фторцитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-[(1-изопропил-2-метилпропокси)карбонил]цитидин,
BY 4143 C1
5'-деокси-N4-[(2-этилбутил)оксикарбонил]-5-фторцитидин,
N4-[(циклогексилметокси)карбонил]-5'-деокси-5-фторцитидин,
5'-дeoкcи-5-фтop-N4-[(2-фeнилэтoкcи)кapбoнил]цитидин,
2',3'-ди-O-ацетил-5'-деокси-5-фтор-N4-(пропоксикарбонил)цитидин,
2',3'-ди-O-ацетил-N4-(бутоксикарбонил)-5'-деокси-5-фторцитидин,
2',3'-ди-O-бензоил-N4-(бутоксикарбонил)-5'-деокси-5-фторцитидин,
2',3'-ди-O-ацетил-5'-деокси-5-фтор-N4-(изопентилоксикарбонил)цитидин,
2',3'-ди-O-aцeтил-5'-дeoкcи-5-фтop-N4-(гeкcилoкcикapбoнил)цитидин,
2',3'-ди-O-ацетил-5'-деокси-N4-[(2-этилбутил)оксикарбонил]-5-фторцитидин,
2',3'-ди-O-ацетил-N4-[(циклогексилметокси)карбонил]-5'-деокси-5-фторцитидин,
2',3'-ди-O-ацетил-5'-деокси-5-фтор-N4-[(2-фенилэтокси)карбонил]цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-(изобутоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-[(2-пропилпентил)оксикарбонил]цитидин,
5'-деокси-N4-[(2-этилгексил)оксикарбонил]-5'-фторцитидин,
5'-дeoкcи-5-фтop-N4-(гeптилoкcикapбoнил)цитидин,
N4-[(2-циклогексилэтокси)карбонил]-5'-деокси-5-фторцитидин,
N4-[(3-циклогексилпропил)оксикарбонил]-5'-деокси-5-фторцитидин,
N4-(циклoгeкcилoкcикapбoнил)-5'-дeoкcи-5-фтopцитидин,
5'-дeoкcи-5-фтop-N4-[(3-фенилпропил)оксикарбонил]цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-[(2-метоксиэтокси)карбонил]цитидин,
N4-(бутоксикарбонил)-5'-деокси-5-фторцитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-(пентилоксикарбонил)цитидин.
4. Соединения по пп. 1, 2 или 3, обладающие противоопухолевой активностью.
5. Фармацевтический препарат, обладающий противоопухолевым действием, содержащий терапевтически эффективное количество активного компонента и фармацевтически приемлемый носитель, отличающийся тем, что в качестве активного компонента он содержит соединение общей формулы I по п. 1 или гидрат, или сольват этого соединения.
(56)
US 4966891 A, 1990.
SU 1736342 A3, 1992.
JP 6140239 A1, 1986.
JP 6223757 A2, 1987.
US 4340729 A, 1982.
EP 0184365 A2 1986.
Настоящее изобретение относится к производным N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-деокси-5фторцитидина и к содержащим их фармацевтическим препаратам для лечения опухолей.
Известно, что многие предшественники 5-фторурацила (5-ФУ) применимы в качестве противоопухолевых средств, но в целом эффективность их биоконверсии все еще остается недостаточной при лечении страдающих опухолями больных, и являются причиной желудочной токсичности и иммуносупрессорной токсичности, и такая токсичность в основном и ограничивает их дозировки.
В патенте США 4966891 раскрыты предшественники 5-ФУ, улучшенные с точки зрения вышеупомянутых эффективности биоконверсии и токсичности. Под действием ациламидаз эти предшественники превращаются в 5'-деокси-5-фторцитидин (5'-ДФЦТ), а под действием цитидиндезаминазы - в 5'-деокси-5фторуридин (5'-ДФУР) и затем под действием пиримидиннуклеотидной фосфорилазы - в 5-ФУ (in vivo), который преимущественно локализуется в печени, тонкой кишке и тканях опухоли. В ходе интенсивных исследований фармакокинетических показателей предшественников 5-ФУ, в частности производных N4(замещенный оксикарбонил)-5'-деокси-5-фторцитидина, создатели настоящего изобретения обнаружили, что
определенные специфичные предшественники под действием изофермента ациламидазы, преимущественно
обнаруживаемого в печени, но не в других органах человека, селективно превращаются в 5'-ДФЦТ и характеризуются лучшими фармакокинетическими показателями, чем другие испытанные соединения. Дальнейшие исследования, основанные на указанном открытии, позволили создателям настоящего изобретения выяснить, что особые производные N4-(замещенные оксикарбонил)-5'-деокси-5-фторцитидина (далее N4(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ) вышеприведенной общей формулы I отличаются улучшенными фармакокинетическими показателями селективности на обезьянах, а именно в 4-7 раз более высокой максимальной концентрацией (Смакc) 5'-ДФУР и в 4 раза большей площадью под кривой (ППК) в крови по сравне-
2
BY 4143 C1
нию с другими соединениями и меньшей кишечной токсичностью, в результате чего и возникло настоящее
изобретение.
Объектом изобретения являются N-оксикарбонилзамещенные 5'-деокси-5-фторцитидины общей формулы I:
, (I)
в которой R1 - насыщенный или ненасыщенный прямой или разветвленный алкильный радикал с числом
атомов углерода в самой длинной прямой цепи от трех до семи или радикал формулы -(CH2)n-Y, где Y - циклогексил, когда n = 0-4, или Y - С1-С4-алкокси или фенил, когда n = 2-4;
R2 - водород или легко гидролизуемый в физиологических условиях ацильный остаток, их сольваты или
гидраты.
Предпочтительно R1 выбирают из группы, включающей н-пропил, 1-изопропил-2-метилпропил, 1,1,2триметилпропил, н-бутил, изобутил, 2-этилбутил, 3,3-диметилбутил, н-пентил, изопентил, неопентил, 2пропилпентил, н-гексил, 2-этилгексил, н-гептил, аллил, 2-бутен-1-ил, 3-бутен-1-ил, 3-пентен-1-ил, 4-пентен1-ил, 3-гексен-1-ил, 4-гексен-1-ил, 5-гексен-1-ил, циклогексил, циклогексилметил, 2-циклогексилэтил, 3циклогексилпропил, 4-циклогексилбутил, 2-метоксиэтил, 2-этоксиэтил, 3-метоксипропил, 3-этоксипропил, 4метоксибутил, 4-этоксибутил, фенэтил, 3-фенилпропил и 4-фенилпропил.
Рекомендуемые соединения выбраны из группы, включающей:
5'-деокси-5-фтор-N4-(пропоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-(гексилоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-(изопентилоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-(неопентилоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-[(1,1,2-триметилпропокси)карбонил]цитидин,
5'-деокси-N4-[(3,3-диметилбутокси)карбонил]-5-фторцитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-[(1-изопропил-2-метилпропокси)карбонил]цитидин,
5'-деокси-N4-[(2-этилбутил)оксикарбонил]-5-фторцитидин,
N4-[(циклогексилметокси)карбонил]-5'-деокси-5-фторцитидин,
5'-дeoкcи-5-фтop-N4-[(2-фeнилэтoкcи)кapбoнил]цитидин,
2',3'-ди-O-ацетил-5'-деокси-5-фтор- N4-(пропоксикарбонил)цитидин,
2',3'-ди-O-ацетил-N4-(бутоксикарбонил)-5'-деокси-5-фторцитидин,
2',3'-ди-O-бензоил-N4-(бутоксикарбонил)-5'-деокси-5-фторцитидин,
2',3'-ди-O-ацетил-5'-деокси-5-фтор-N4-(изопентилоксикарбонил)цитидин,
2',3'-ди-O-aцeтил-5'-дeoкcи-5-фтop-N4-(гeкcилoкcикapбoнил)цитидин,
2',3'-ди-O-ацетил-5'-деокси-N4-[(2-этилбутил)оксикарбонил]-5-фторцитидин,
2',3'-ди-O-ацетил-N4-[(циклогексилметокси)карбонил]-5'-деокси-5-фторцитидин,
2',3'-ди-O-ацетил-5'-деокси-5-фтор-N4-[(2-фенилэтокси)карбонил]цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-(изобутоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-[(2-пропилпентил)оксикарбонил]цитидин,
5'-деокси-N4-[(2-этилгексил)оксикарбонил]-5'-фторцитидин,
5'-дeoкcи-5-фтop-N4-(гeптилoкcикapбoнил)цитидин,
N4-[(2-циклогексилэтокси)карбонил]-5'-деокси-5-фторцитидин,
N4-[(3-циклогексилпропил)оксикарбонил]-5'-деокси-5-фторцитидин,
N4-(циклoгeкcилoкcикapбoнил)-5'-дeoкcи-5-фтopцитидин,
5'-дeoкcи-5-фтop-N4-[(3-фенилпропил)оксикарбонил]цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-[(2-метоксиэтокси)карбонил]цитидин,
N4-(бутоксикарбонил)-5'-деокси-5-фторцитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-(пентилоксикарбонил)цитидин.
3
BY 4143 C1
Соединения по изобретению обладают противоопухолевой активностью.
Другим объектом изобретения является фармацевтический препарат, обладающий противоопухолевым
действием, содержащий терапевтически эффективное количество активного компонента и фармацевтически
приемлемый носитель, в котором в качестве активного компонента содержится соединение общей формулы
I по изобретению или гидрат, или сольват этого соединения.
Выражение: радикал формулы -(CH2)n-Y, где Y - циклогексил, когда n = 0-4, или Y - С1-С4-алкокси или
фенил, когда n = 2-4, предпочтительно означает диклогексил, циклогексилметил, 2-циклогексилэтил, 3циклогексилпропил, 4-циклогексилбутил, 2-метоксиэтил, 2-этоксиэтил, 2-пропоксиэтил, 3-метоксипропил, 3этоксипропил, 4-метоксибутил, 4-этоксибутил, фенэтил, 3-фенилпропил, 4-фенилбутил и т.п.
В наиболее рекомендуемом варианте соединений настоящего изобретения R1 представляет н-пропил, нбутил, н-пентил, изопентил, неопентил, 3,3-диметилбутил, н-гексил, 2-этил-бутил, фенэтил и циклогексилметил.
Расшифровка R2 .
R2 представляет атом водорода или ацетат остатка, легко гидролизуемый в физиологических условиях.
Приведенное выше выражение "ацетат остатка, легко гидролизуемый в физиологических условиях" предпочтительно означает ацетил, пропионил, бензоил, толуоил, β-аланил, валил и т.п.
Из вышеперечисленных соединений особенно рекомендуются следующие N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ настоящего изобретения:
5'-деокси-5-фтор-N4-(пропоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-(изопентилоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-(гексилоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-N4-[(2-этилбутил)оксикарбонил]-5-фторцитидин,
5'-дезокси-5-фтор-N4-(неопентилоксикарбонил)цитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-[(3,3-диметилбутокси)карбонил]цитидин,
5'-дeoкcи-5-фтop-N4-[(2-фенилэтокси)карбонил]цитидин,
N4-[(циклогексилметокси)карбонил]-5'-деокси-5-фторцитидин, особенно
N4-(бутоксикарбонил)-5'-деокси-5-фторцитидин,
5'-деокси-5-фтор-N4-(пентилоксикарбонил)цитидин,
а также их гидраты или сольваты и т.п.
N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ общей формулы I, а также их гидраты или сольфаты могут
быть получены пеакцией соединения общей формулы (II):
, (II)
в которой R4 представляет радикал для защиты гидроксигруппы, такой как ацетил, бензоил, триметилсилил,
трет-бутилдиметил-силил и т.п., с соединением общей формулы III:
R1COCl ,
1
в которой R принимает вышеуказанные значения с последующим, если необходимо, удалением защитного
радикала.
Соединения вышеприведенной общей формулы (II) могут быть получены 2',3'-ди-O-ацилированием или силилированием 5'-деокси-5-фторцитидина (J. Med. Chem, 22. 1330 (1979)) по методике, приведенной в патенте США 4966891, или прямым соединением 5-фторцитозина с 1,2,3-три-O-ацетил-5-деоксифуранозой по
методике, аналогичной методике, приведенной в литературе (Synthesis, 748 (1981)).
Реакция соединения вышеприведенной общей формулы II с соединением вышеприведенной общей формулы III может быть проведена в растворителе, таком как пиридин, диоксан, тетрагидрофуран, ацетонитрил,
хлороформ, дихлорметан и т.п., в присутствии акцептора кислоты, такого как триэтиламин, пиридин, пиколин, 4-(N,N-; диметиламино)пиридин, лутидин и т.п. Реакция может быть проведена в температурном интервале 0-30 °С.
Защитный радикал может быть, если необходимо, удален по окончании реакции по известным специалисту методикам (Защитные группы в органическом синтезе, Джон Вили и сыновья, Нью-Йорк, Can. J. Chem.,
49, 493 (1971) и патент США 4966891), например щелочным или кислотным гидролизом.
4
BY 4143 C1
Соединения вышеприведенной формулы I могут существовать как в несольватированном, так и в сольватированном виде, в том числе в гидратированной форме. Гидратация может быть осуществлена в ходе процесса приготовления или же может произойти постепенно вследствие гигроскопичных свойств первоначально безводного продукта. Сольваты с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как этанол,
могут быть получены, например, в ходе кристаллизации.
Производные N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ общей формулы I, так же как сольваты или гидраты соединений общей формулы I по изобретению, проявляют активность по отношению к ксенотрансплантантам рака ободочной кишки человека CXF280 и рака желудка GXF97, карциномы 26 ободочной кишки мышей, легочной карциномы Льюиса мышей и т.п. на мышах в очень широком интервале дозировок, как
перорально, так и парентерально, вследствие чего применимы в качестве противоопухолевых средств. Под
действием изофермента ациламидазы эти соединения успешно превращаются в 5'-ДФЦТ, под действием цитидиндезаминазы - в 5'-ДФУР и затем под действием пиридин-нуклеозидной фосфорилазы превращаются в
активный метаболит 5-ФУ.
N4-(Замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ настоящего изобретения могут быть введены пероральным путем или непероральным путем человеку различными обычными методами введения. Кроме того, N4(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ настоящего изобретения используют в чистом виде или вводят в состав с совместимыми фармацевтическими носителями. Такой носитель может представлять собой органический или неорганический инертный материал, пригодный для энтерального, чрескожного или парентерального введения, такой как вода, желатин, гумиарабик, лактоза, крахмал, стеарат магния, тальк, растительные
масла, полиалкиленгликоли или петролатум. Фармацевтический препарат может быть приготовлен в твердом виде (например, в таблетках, драже, таблетках с желудочным покрытием, гранул, свеч, капсул или желудочных капсул), в полужидком виде (например, в виде мазей) или в жидкой форме (например, в виде растворов, суспензий или эмульсий). Фармацевтический препарат может быть стерилизован и/или может
содержать дополнительные вспомогательные добавки, такие как стабилизаторы, консерванты, осадители,
эмульгаторы, улучшающие вкус добавки, соли для изменения осмотического давления или действующие в
качестве буфера вещества. Фармацевтический препарат может быть получен обычным путем.
N4-(Замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ настоящего изобретения могут быть использованы по отдельности или в виде смеси двух или более различных N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ, при этом количество N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ составляет 0,1-99,5 %, предпочтительно 0,5-95 % в пересчете
на массу фармацевтического препарата.
Фармацевтический препарат настоящего изобретения может быть приготовлен в сочетании с другими
обычными противоопухолевыми средствами.
Подверженность действию ациламидазы N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ настоящего изобретения и их фармакокинетические показатели приведены ниже.
1. Подверженность действию ациламидаз обезьяны и человека.
N4-(Замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ настоящего изобретения инкубируют 60 мин при 37 °С с сырыми экстрактами печени обезьяны и человека в присутствии в качестве ингибитора цитидиндезаминазы
тетрагидроуридина (0,4 Мм). Затем в качестве продукта с помощью ВЭЖХ выделяют 5'-ДФЦТ и подверженность к действию фермента подсчитывают по количеству продукта. Как видно из табл. 1, соединения настоящего изобретения в высшей степени подвержены действию ациламидазы печени человека, что предполагает их эффективное биопревращение в 5'-ДФЦТ в человеке (см. в конце описания).
2. Фармакокинетические показатели на обезьянах.
Соединения настоящего изобретения вводят перорально группе из 2-5 циномолгичных обезьян (3-4 кг).
Через различное время после введения отбирают плазму на определение в крови концентрации непревращенных молекул и их активного метаболита (5'-ДФУР).
С помощью ВЭЖХ из плазмы выделяют метаболиты и подсчитывают их концентрацию. Как видно из
табл. 2, соединения настоящего изобретения характеризуются высоким уровнем Смакc и ППК активного метаболита 5'-ДФУР в плазме. Полученные результаты показывают, что соединения настоящего изобретения
могут быть эффективно использованы для лечения различных опухолей человека (см. в конце описания).
Противоопухолевая активность соединений изобретения показана ниже.
3. Противоопухолевые испытания на ксенотрансплантанте CXF280 рака ободочной кишки человека.
Опухоль CXF280 (размером 2х2 мм) имплантируют подкожно мышам линии BALB/c nu/nu (21-22 г) в
день 0. Когда размер опухоли достигает 100 мм3 (примерно на 14-й день), мышам ежедневно в течение 3 недель перорально вводят соединения настоящего изобретения. В один из дней после последнего введения
подсчитывают объем опухоли.
Приведенный в табл. 3 (см. в конце описания) процент ингибирования роста опухоли подсчитывают по
формуле:
% ингибирования = {1 - (Т - V0)/(C – V0)} • 100, где V0 - объем опухоли перед началом лечения, Т - объем
опухолей в подвергаемой лечению группе, С - объем опухоли из контрольной группы.
5
BY 4143 C1
Как видно из табл. 3, соединения настоящего изобретения характеризуются безопасным введением, не вызывают при этом кишечной токсичности и гораздо более эффективны, чем 5-ФУ.
4. Противоопухолевая активность и активность против общего истощения по отношению к карциноме 26
ободочной кишки мышей.
Противоопухолевую активность представительного соединения (пример 13) настоящего изобретения определяют следующим образом. Мышам (CDF1) подкожно инокулируют карциному 26 ободочной кишки (106
клеток) в день 0. Через 21 день, когда зверьки находятся в состоянии общего истощения, им ежедневно 7 раз
дают испытуемое соединение. В день после последнего введения определяют прирост массы опухоли, прирост массы остова, массу жировой ткани, концентрацию глюкозы и острого фазового реагента ИКБ (иммуносупрессивного кислотного белка) в сыворотке. Как видно из табл. 4 (см. в конце описания), мыши, получавшие носитель, были ненормальны с точки зрения общего истощения, характеризующегося такими
параметрами, как масса жировой ткани, содержание в сыворотке глюкозы и ИКБ, в то время как лечение соединением примера 13 подавляет рост опухоли и ведет к улучшению параметров общего истощения.
Токсичность (ЛД50) представительных соединений (примеры 13, 14 и 17) настоящего изобретения выявлялась при пероральном введении ежедневно в течение 21 дня на мышах. Характерные значения ЛД50, полученные в таких опытах, составляют более 500 мг/кг/день.
Суточная дозировка больному N4-(замещенный оксикарбонил)-5'-ДФЦТ настоящего изобретения может
меняться в зависимости от массы и состояния больного, но, как правило, находится в интервале 0,5-500 мг
на 1 кг массы, предпочтительно 2-200 мг. Следует отметить, что для соединений настоящего изобретения
можно ожидать в 3-5 раз более высокой активности при лечении человека по сравнению с соединениями,
раскрытыми в патенте США 4966891, если эту активность рассматривать с точки зрения Смакc и ППК для 5'ДФУР после перорального введения соединений настоящего изобретения обезьяне. По той же причине можно ожидать, что соединения настоящего изобретения покажут достаточную активность при дозировках, в 3-5
раз более низких по сравнению с дозировками соединений указанного патента США. Настоящим изобретением может быть получен фармацевтический препарат с высоким уровнем безопасности.
Нижеследующие примеры предназначены для более подробной иллюстрации настоящего изобретения,
но ни в коей мере для ограничения его объема.
Ссылочный пример. Получение исходных соединений.
Получение 2',3'-ди-O-ацетил-5'-деокси-5-фторцитидина.
(а) Из 5'-деокси-5-фторцитидина.
В сухом пиридине (1,3 мл) растворяют 5'-деокси-5-фторцитидин (50 мг). К раствору при перемешивании
при 0 °С добавляют уксусный ангидрид (39 мл). Реакционную смесь перемешивают 3 ч при 0 °С. После удаления при пониженном давлении растворителя остаток распределяют между этилацетатом и охлажденной
льдом водой. Этилацетатный слой сушат над сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле с элюированием смесью дихлорметанметанол (9:1) и после перекристаллизации из изопропанола получают 37 мг 2',3'-ди-O-ацетил-5'-деокси-5фторцитидина, т.пл. 191,5-193 °С, ББА-МС m/z 330 (МН+).
(б) Из 5-фторцитозина и 1,2,3-три-O-ацетил-5-деокси-β-D-рибофуранозы.
Раствор иодида натрия (3,6 г) и хлорметилсилана (794 мл) в сухом ацетонитриле (15 мл) перемешивают
молекулярными ситами 4А (200 мг) при 0 °С в течение 5 мин (при перемешивании осаждается бесцветный
хлорид натрия). Добавляют 1,2,3-три-O-ацетил-5-деокси-β-D-рибофуранозу (2,0 г) и смесь перемешивают
при 0 °С в течение 30 мин. Затем добавляют при 0 °С свежеприготовленный из 5-фторцитозина (1,12 г)
раствор триметилсилилованного 5-фторцитозина в сухом ацетонитриле (5 мл) и продолжают перемешивание в течение 3 ч при комнатной температуре. Смесь фильтруют, фильтрат концентрируют в вакууме и остаток распределяют между дихлорметаном и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Водный
слой экстрагируют смесью CH2Cl2/MeOH (10:1). Объединенные органические слои сушат над безводным
сульфатом натрия и испаряют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на силикагеле с
применением в качестве элюента смеси CH2Cl2/MeOH (10:1) с последующей рекристаллизацией из изопропанола с получением 1,24 г 2',3'-ди-O-ацетил-5'-деокси-5-фторцитидина.
Пример 1.
Получение 2',3'-ди-O-aцeтил-5'-дeoкcи-5-фтop-N4-(пpoпoкcикapбoнил)-цитидина.
К раствору 2',3'-ди-O-ацетил-5'-деокси-5-фторцитидина (2 г) СН2Сl2 (15 мл) и сухом пиридине при перемешивании и охлаждении в бане со льдом по каплям добавляют п-пропилхлорформат (957 мл). После перемешивания в течение 30 мин при комнатной температуре смесь испаряют досуха при пониженном давлении. Остаток распределяют между эфиром и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия.
Органический слой промывают рассолом, сушат над безводным сульфатом натрия и фильтруют.
Испарением фильтрата получают 2',3'-ди-O-ацетил-5'-деокси-5-фтор-N4-(пропоксикарбонил) цитидин (2,5
г) Е1-МС m/z 415 (М+). 1Н-ЯМР (ДМСО-d6) δ: 0,92 (3Н, т, J = 7,3 Гц), 1,37 (3Н, д, J = 6,3 Гц), 1,63 (2Н, секс,
J = 7,3 Гц), 4,06-4,14 (3Н, м), 5,11 (1Н, т, J = 6,3 Гц), 5,47 (1Н, дв. д. J = 4,6 и 6,3 Гц), 5,81 (1Н, д, J = 4,6 Гц),
8,31 (1Н, ш. с), 10,63 (1Н, ш. с).
6
BY 4143 C1
Нижеприведенные соединения (табл. 5) получены по методике, аналогичной методике примера 1 (R1 и R2
принимают значения, указанные для общей формулы I). Соединение примера 9 получено из известного 2',3'ди-O-бензоил-5'-деокси-5-фторцитидина (патент США 4966891) по методике, аналогичной методике примера 1.
Пример 10.
Получение 5'-деокси-5-фтор-N4-(пропоксикарбонил) цитидина.
К раствору 2',3'-ди-O-ацетил-5'-дезокси-5-фтор-N4-(пропоксикарбонил) цитидина (2,5 г) в СН2Сl2 (17 мл)
при перемешивании и охлаждении в бане со льдом по каплям прибавляют 1 н. NaOH (17 мл). После перемешивания 1 ч при 0 °С к смеси добавляют МеОН (0,9 мл). Добавлением концентрированной НСl в реакционной смеси устанавливают рН 6 и слои разделяют. Водный слой экстрагируют смесью растворителей CH2Cl2MeOH (95:5) (40 мл × 10). Соединенные органические слои сушат над безводным сульфатом натрия и
фильтруют. Раствор испаряют и кристаллизацией из этилацетата получают 5'-деокси-5-фтор-N4(пропоксикарбонил)цитидин (1,6 г, выход 79,8 %), т. пл. 125-126,5 °С. Е1-МС m/z 331 (М+).
Нижеприведенные соединения (табл. 6) получены по методике, аналогичной методике примера 10 (R1 и
2
R принимают значения, указанные для общей формулы I.
Пример 19.
Получение N4-(циклогексилоксикарбонил)-5'-деокси-5-фторцитидина.
В 20 мл сухого пиридина растворяют 5'-деокси-5-фторцитидин (2,5 г), к раствору по каплям при 0 °С добавляют триметилсилилхлорид (3,4 мл) и смесь перемешивают 30 мин при комнатной температуре. Одной
порцией при 0 °С к реакционной смеси добавляют циклогексилхлорформат. После перемешивания смеси 1 ч
при комнатной температуре пиридин испаряют при пониженном давлении. Остаток затем распределяют между насыщенным водным раствором NaHCO3 и эфиром. Органический слой промывают рассолом, сушат
над безводным МgSO4 и концентрируют при пониженном давлении. К остатку добавляют лимонную кислоту
(2 г) и метанол (50 мл). Смесь перемешивают примерно сутки при комнатной температуре. После удаления
растворителя при пониженном давлении остаток растворяют в смеси CH2Cl2-MeOH (95:5) и нейтрализуют
водным раствором NaOH. Органический слой сушат над безводным Na2SO4 и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией на силикагеле с применением в качестве элюента смеси
CH2Cl2-MeOH (20:1) и после перекристаллизации из этилацетата получают N4-(циклогексилоксикарбонил)5'-деокси-5-фторцитидин (3,47 г, выход 92 %), т.пл. 134 - 136 °С. ББА-МС m/z 372 (МH+).
Нижеприведенные соединения (табл. 7) получены по методике, аналогичной методике примера 19 (R1 и
2
R принимают значения, указанные для общей формулы I).
Пример 28.
Получение 5'-деокси-5-фтор-N4-(неопентилоксикарбонил)-цитидина.
В 15 мл сухого дихлорметана растворяют 5'-деокси-2',3'-ди-O-ацетил-5-фторцитидин (1,5 г) и сухой пиридин (0,74 мл). К полученной смеси при 0 °С по каплям прибавляют толуольный раствор неопентилхлорформата (3 экв.) и перемешивают 1 ч при комнатной температуре. После удаления растворителя при пониженном давлении остаток распределяют между эфиром и насыщенным водным раствором карбоната натрия.
Органический слой последовательно промывают водой и рассолом, сушат над безводным сульфатом натрия
и концентрированием при пониженном давлении получают сырой 2',3'-ди-O-ацетил-5'-деокси-5-фтор-N4(неопентилоксикарбонил)цитидин в виде бледно-желтого масла. Сырой продукт растворяют в этаноле (15
мл) и охлаждают в бане со льдом. При температуре ниже 15 °С по каплям прибавляют 1 н. водный раствор
гидроокиси натрия. По окончании прибавления реакционную смесь нейтрализуют при 0 °С конц. соляной
кислотой. Раствор концентрируют при пониженном давлении и концентрат распределяют между водой и
смесью растворителей CH2Cl2-MeOH (95:5). Водный слой вновь экстрагируют десять раз смесью CH2Cl2MeOH (95:5) по 20 мл каждый раз. Все органические слои объединяют, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Очисткой остатка хроматографией на колонке с силикагелем с применением в качестве элюента смеси CH2Cl2-MeOH (20:1) в виде аморфного порошка 1,37 г (выход
84 %) 5'-деокси-5-фтор-N4-(неопентилокси-карбонил)-цитидина. ББА-МС m/z 360 (МН+). 1Н-ЯМР (ДMCOd6) δ: 0,93 (9Н, с), 1,31 (3Н, д, J = 6,3 Гц), 3,68 (1Н, к, J = 5,9 Гц), 3,81 (2Н, ш. с), 3,87-3,92 (1Н, м), 4,04-4,09
(1Н, м), 5,05 (1Н, д, J = 5,9 Гц), 5,41 (1Н, ш. д, J = 5,3 Гц), 5,67 (1Н, дв. д, J = 1,3 и 3,6 Гц), 8,04 (1Н, ш. с),
10,53 (∼ 1Н, ш. с).
Пример 29.
5'-деокси-N4-[(3,3-диметилбутокси)карбонил]-5-фторцитидин.
Заглавное соединение получено по методике, аналогичной методике примера 28, за исключением того,
что в качестве ацилирующего средства используют 3,3-диметилбутилхлорформат, аморфный порошок (выход 71 %), ББА-МС m/z 374 (МН+). 1Н-ЯМР (ДМСО- d6) δ: 0,93 (9Н, с), 1,31 (3Н, д, J = 6,3 Гц), 1,55 (2Н, т,
J = 7,3 Гц), 3,68 (1Н, к, J = 5,9 Гц), 3,84-3,93 (1Н, м), 4,03-4,09 (1Н, м), 4,15 (2Н, т, J = 7,3 Гц), 5,05 (1Н, д,
J = 5,9 Гц), 5,4 (1Н, ш. д, J = 5,3 Гц), 5,67 (1Н, дв. д, J = 1,3 и 4 Гц), 8 (1Н, ш. с), 10,53 (∼1Н, ш. с).
Нижеследующие примеры иллюстрируют фармацевтические препараты, содержащие соединение настоящего изобретения.
7
BY 4143 C1
Пример А.
Замкнутые желатиновые капсулы, каждая из которых содержит нижеперечисленные компоненты, получают известными методами.
100 мг
N4-(бутоксикарбонил)-5'-деокси-5-фторцитидин
зерновой крахмал
20 мг
двуокись титана
385 мг
стеарат магния
5 мг
пленка
20 мг
ПЭГ 6000
3 мг
тальк
10 мг
543 мг.
Пример В.
Таблетки, каждая из которых содержит нижеперечисленные компоненты, получают известными методами.
100 мг
N4-(бутоксикарбонил)-5'-деокси-5-фторцитидин
лактоза
25 мг
зерновой крахмал
20,2 мг
гидроксипропилметилцеллюлоза
4 мг
стеарат магния
0,8 мг
пленка
10 мг
ПЭГ 6000
1,5 мг
тальк
4,5 мг
166 мг.
Пример С.
Сухие парентеральные дозировочные формы приготовляют известными методами.
(1) В общей сложности 5 г N4-(бутоксикарбонил)-5'-деокси-5-фторцитидина растворяют в 75 мл дистиллированной воды, раствор подвергают бактериологическому фильтрованию и затем в асептических условиях
разливают по сосудикам. Затем раствор сушат вымораживанием с получением в каждом сосудике по 500 мг
стерильного сухого твердого вещества.
(2) Чистый N4-(бутоксикарбонил)-5'-деокси-5-фторцитидин в количестве 500 мг на сосудик или ампулу
герметизируют в сосуде и стерилизуют нагреванием.
Указанные сухие дозировочные формы перед употреблением восстанавливают добавлением приемлемого стерильного водного растворителя, такого как вода для инъекций, или изотонического раствора хлорида
натрия, или 5 %-ной декстразы для парентерального введения.
8
BY 4143 C1
Таблица 1
Подверженность действию ациламидазы в печени человека и обезьяны
Соединение (пример
№)
11
12
13
14
15
16
17
20
21
22
24
25
26
27
28
29
Активность ациламидазы (ммоль/мг белка/ч)
Печень обезьяны
Печень человека
20
71
29
190
47
220
32
74
23
210
33
210
22
160
19
320
26
82
43
110
18
64
<13
160
20
560
59
110
25
52
22
50
Таблица 2
Фармакокинетические показатели на обезьянах
5’-ДФУР в плазме
Соединение (пример №)
Cмакс (Мкг/мл)
ППК (мкг.ч/мл)
10
1,44
2,03
11
1,57
2,06
12
2,10
2,90
13
1,50
1,96
14
1,80
2,40
15
2,60
2,89
16
1,40
2,52
17
1,65
2,66
28
1,00
1,40
29
2,00
2,09
9
BY 4143 C1
Таблица 3
Противоопухолевое действие фторированных пиримидинов на мышей линии ВАLВ/с nu/nu,
несущих карциному СХГ280 ободочной кишки человека
Соединение (пример №)
Опыт 1
Носитель
12
13
24
Ссылочное соед.
5-ФУ
Опыт 2
Носитель
10
11
14
27
Ссылочное соединение
5-ФУ
Дозах21
(ммоль/кг/день)
Ингибирование роста, %
Характер фекалий*
68
69
86
86
96
59
66
79
91
94
37
64
75
83
89
H
0,13
0,3
0,67
1,0
1,5
0,13
0,3
0,67
1,0
1,5
0,13
0,3
0,67
1,0
1,5
0,089
0,13
0,2
28
59
79
H
H
П
39
56
75
86
93
46
72
84
95
100
68
68
85
94
100
26
72
84
94
103
Н
0,13
0,3
0,67
1,5
2,25
0,13
0,3
0,67
1,5
2,25
0,13
0,3
0,67
1,5
2,25
0,13
0,3
0,67
1,5
2,25
0,089
0,13
0,2
НЭ
20
58
НЭ - не эффективно.
*Характер фекалий (Н - нормальные фекалии, П - понос).
10
Н
H
H
Н
Н
Н
Н
Н
Н
Н
Н
П
BY 4143 C1
Таблица 4
Улучшение вызванного опухолью общего истощения фторированными пиримидинами у мышей,
несущих аденокарциному 26 ободочной кишки
Соед. (пр.№)
Носитель
13
Дозах7
(ммоль/кг)
(мкг/мл)
0,125
0,25
0,5
1
Изменение
массы опухоли (г)
1,65
1,24
0,91*
0,79*
0,006
Изменение
массы опухоли (г)
-1,5
1,6*
3,4*
4,2*
5,6**
Масса жировой ткани
(мг)
11
22*
42*
63*
85*
Глюкоза сыворотки
(мг/дл)
91
118*
120*
147*
127*
*R < 0,05 относительно соответствующей величины для группы, получавшей носитель.
11
ИКБ
сыворотки
1167
1195
1020
805*
795*
BY 4143 C1
Таблица 5
Пример
№
2
R1
R2
н-бутил
ацетил
3
н-пентил
ацетил
4
н-гексил
ацетил
5
изопентил
ацетил
6
2-этилбутил
ацетил
7
циклогексилметил
ацетил
8
фенэтил
ацетил
9
н-бутил
бензоил
1
H-ЯМP (в растворителе или 2)
ББА-МС (m/z)
δ(1): 0,87 (3Н, т, J = 7,3 Гц), 1,36 (5Н, м), 1,59 (2Н, м), 2,05 (3Н, с), 2,07 (3Н, с), 4,12 (3Н, м),
5,11 (1Н, ш. т), 5,47(1Н, ш. т), 5,81 (1Н, д, J = 4,3 Гц), 8,34 (1Н. ш. с), 10,6 (1Н, ш. с)
δ(1): 0,88 (3Н, т, J = 7,3 Гц), 1,31 (5Н, м), 1,36 (3Н, д, J = 6,3 Гц), 1,61 (1Н, м), 2,06 (3Н, с),
2,07 (3Н, с), 4,07-4,14 (3Н, м), 5,11 (1Н, т, J = 6,3 Гц), 5,47 (1Н, дв. д, J = 6,3 и 4,6 Гц),
5.8 (1Н, д, J = 4,6 Гц), 8,28 (1Н, ш. с), 10,63 (1Н, ш. с)
δ(1): 0,87 (3Н, т, J = 6,9 Гц), 1,3 (6Н, м), 1,36 (3Н, д, J = 6,3 Гц), 1,59 (2Н, м), 2,06 (3Н, с),
2,07 (3Н, с), 4,07-4,14 (3Н, м), 5,11 (1Н, т, J = 6,3 Гц), 5,45 (1Н, дв. д, J = 6,3 и 4,6 Гц),
5,8 (1Н, д, J = 4,6 Гц), 8,28 (1Н, ш. c), 10,63 (1H, ш. с)
δ(1): 0,9 (6Н, д, J = 6,9 Гц), 1,36 (3Н, д, J = 6,3 Гц), 1,51 (2Н, к, J = 6,9 Гц), 1,68 (1Н, м), 2,06
(3Н, с), 2,07 (3Н, с), 4,09-4,2 (3Н, м), 5,11 (1Н, т, J = 6,3 Гц), 5,46 (1Н, дв. д, J = 6,3 и 4,3 Гц),
5,8 (1Н, д, J = 4,3 Гц), 8,28 (1Н, ш. с.), 10,63 (1Н, ш. с)
δ(1): 0,87 (6Н, т, J = 7,3 Гц), 1,23-1,45 (7Н, м), 1,51 (1Н, м), 2,06 (3Н, с), 2,07 (3Н, с),
4,04 (2Н, ш. д), 4,12 (1Н, т, J = 6,3 Гц), 5,11 (1Н, т, J = 6,3 Гц), 5,46 (1Н, дв. д, J = 6,3 и 4 Гц),
5,81 (д, J = 4,6 Гц), 8,32 (1Н, ш. с), 10,61 (1Н, ш. с)
δ(1): 1 (2Н, м), 1,11-1,29 (4Н, м), 1,36 (3Н, д, J = 6,3 Гц), 1,57-1,77 (5Н, м), 2,06 (3Н, с),
2,07 (3Н, с), 3,92 (2Н, ш. с), 4,12 (1Н, м), 5,11 (1Н, т, J = 6,3 Гц), 5,46 (1Н, дв. д, J = 6,3 и 4 Гц), 5,81 (1Н, д, J = 4
Гц), 8,33 (1Н, ш. с), 10,67 (1Н, ш. с)
δ(1): 1,36 ЮЗН, д, J = 6,3 Гц), 2,06 (3Н, с), 2,07 (3Н, с), 2,94 (2Н, т, J = 6,8 Гц), 4,12 (1Н, м),
4,32 (2Н, ш. т), 5,11 (1Н, т, J = 6,3 Гц), 5,46 (1Н, дв. д, J = 6,3 и 4,3 Гц), 5,81 (1Н, д, J = 4,3 Гц), 7,16-7,37 (5Н, м),
8,32 (1Н, ш. с), 10,67 (1Н, ш. с)
δ(2): 0,95 (3Н, т, J = 7,3 Гц), 1,42 (2Н, м), 1,58 (3Н, д, J = 6,3 Гц), 1,68 (2Н, м), 4,16 (2Н, ш. с),
4,52 (1Н, дв. к, J = 5,8 и 6,3 Гц), 5,4 (1Н, т, J = 5,8 Гц), 5,65 (1Н, дв. д, J = 4,6 и 5,8 Гц),
6,16 (1Н, д, J = 4,6 Гц), 7,35-7,98 (11H, м), 11,9 (1H, ш. с)
430 (МН+)
ЯМР: растворитель 1 - ДМСО-d6, растворитель 2 - CDC13 .
12
444 (МН+)
458 (МН+)
444 (МН+)
458 (МН+)
470 (МН+)
478 (МН+)
554 (МН+)
BY 4143 C1
Таблица 6
Пр. №
R1
R2
Т. пл., °C
11
12
13
14
15
16
17
18
н-бутил
н-пентил
н-гексил
изопентил
2-этилбутил
циклогексилметил
фенэтил
аллил
Н
H
H
H
H
H
H
H
119-120
110-121
114-116
119-120
аморфно*
126-127
144-145
118,5-120
Р-ритель
перекристал.
АсОЕf
АсОЕf Е1
AcOEf Е1
АсОЕf
АсОЕf
АсОЕf-МеОН
АcОЕf
ББА-МС m/z
346 (МН+)
359 (М+)
373 (М+)
360 (МН+)
374 (МН+)
386 (МН+)
394 (МН+)
330 (МН+)
* 1Н-ЯМР (ДМСО-d6) примера 15 δ: 0,87 (6Н, т, J = 7 Гц), 1,25-1,45 (7Н, м), 1,53 (1Н, м), 3,68 (1Н, к, J = 6
Гц), 3,89 (1Н, ш. т, J = 6 Гц), 4,02 (2Н, д, J = 6 Гц), 4,1 (1Н, м), 5,05 (1Н, д, J = 6 Гц), 5,4 (1Н, д, J = 6 Гц), 5,67
(1Н, д, J = 3 Гц), 8 (1Н, ш. с), 10,55 и 11,6 (всего 1Н, ш. с каждый).
Таблица 7
Пр. №
R1
R2
Т. пл., °C
20
21
22
23
24
25
26
27
2-циклогексилэтил
3-циклогексилпропил
3-фенилпропил
2-метоксиэтил
изобутил
2-пропилэтил
2-этилгексил
н-гептил
Н
H
H
H
H
H
H
H
128-129,5
аморфно*
120-121
аморфно**
132-134
116-118
аморфно***
115,5-117,5
Р-ритель
перекристал.
ÀñÎÅf
AcOEf
AcOEf
ÀñÎÅf
АcОЕf
ББА-МС m/z
400 (МН+)
414 (МH+)
408 (МH+)
348 (МН+)
346 (МН+)
402 (МН+)
402 (МН+)
388 (МН+)
*1Н-ЯМР (ДМСО-d6) для примера 21 δ: 0,78-0,93 (2Н, м), 1,15-1,27 (6Н, м), 1,31 (3Н, д, J = 7 Гц), 1,591,75 (7Н, м), 3,68 (1Н, к, J = 6 Гц), 3,89 (1Н, ш. т, J = 6 Гц), 4,01-4,14 (3Н, м), 5,04 (1Н, д, J = 6 Гц), 5,4 (1Н, д,
J = 6 Гц), 5,67 (1Н, д, J = 2 Гц), 8 (1Н, ш. с), 10,03 и 10,53 (всего 1Н, ш. с каждый).
**1Н-ЯМР ДМСО-d6 для примера 23 δ: 1,31 (3Н, д, J = 5,9 Гц), 3,28 (3Н, с), 3,56 (2Н, ш. т), 3,69 (1Н, т,
J = 6 Гц), 3,89 (1Н, м), 4,06 (1Н, м), 4,22 (2Н, ш. т), 5,05 (1Н, д, J = 6 Гц), 5,4 (1Н, ш. с), 5,67 (1Н, д, J = 3 Гц),
8,06 (1Н, ш. с), 10,65 (1Н, ш. с).
***1Н-ЯМР (ДМСО-d6) для примера 26 δ: 0,85-0,88 (6Н, м), 1,27-1,38 (11Н, м), 1,57 (1Н, ш. д, J = 6 Гц),
3,68 (1Н, к, J = 6 Гц), 3,89-4,02 (4Н, м), 5,05 (1 Н, ш. с), 5,41 (1Н, ш. с), 5,67 (1Н, д, J = 3 Гц), 8,06 (1Н, ш. с),
10,52 (1Н, ш. с).
Государственный патентный комитет Республики Беларусь.
220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.
13
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
1
Размер файла
231 Кб
Теги
by4143, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа