close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY4861

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(19)
BY (11) 4861
(13)
C1
(51)
(12)
7
A 61K 31/13,
A 61P 37/02
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
ПРИМЕНЕНИЕ ПРОИЗВОДНЫХ АМИНОАДАМАНТАНА
В КАЧЕСТВЕ ИММУНОРЕГУЛЯТОРОВ
(21) Номер заявки: a 19980244
(22) 1998.03.16
(86) PCT/EP96/03678, 1996.08.21
(31) 19531342.9
(32) 1995.08.25
(33) DE
(46) 2002.12.30
(71) Заявитель: Мерц Фармасьютикалс ГмбХ (DE)
(72) Автор: ЭЛСТНЕР, Эрих Ф. (DE)
(73) Патентообладатель: Мерц Фармасьютикалс ГмбХ
(DE)
(57)
1. Применение производных аминоадамантана общей формулы I:
R1
R4
R2
, (I)
R3
где R1, R2, R3, R4 независимо выбраны из -NR5R6, -NR5R6R7+, водорода, арила или гетероарила с кольцом
вплоть до 7-членного, С1-С20-алкила, С1-С20-алкенила и С1-С20-алкинила, где остатки алкил, алкенил и алкинил могут быть разветвленными, неразветвленными или циклизированными и возможно замещенными галогеном, арилом или гетероарилом с кольцом вплоть до 7-членного, при условии, что, по меньшей мере, один
из остатков R1, R2, R3, R4 представляет собой -NR5R6 или -NR5R6R7+; и
Фиг. 1
BY 4861 C1
R5, R6, R7 независимо выбраны из водорода, арила или гетероарила с кольцом вплоть до 7-членного, С1С20-алкила, С1-С20-алкенила и С1-С20-алкинила, где остатки алкил, алкенил и алкинил могут быть разветвленными, неразветвленными или циклизированными и возможно замещенными галогеном, арилом или гетероарилом с кольцом вплоть до 7-членного, или R5 и R6 вместе с атомом азота образуют гетероциклическую
группу с кольцом вплоть до 7-членного; в концентрации от 10-6 до 10-5 М в качестве средства для повышения
активности уже активированных нейтрофилов.
2. Применение производных аминоадамантана по п. 1, отличающееся тем, что производные аминоадамантана выбирают из группы, включающей
1-амино-3-этил-5,7-диметиладамантан,
1-амино-3-циклогексиладамантан,
1-амино-3-этиладамантан,
1-амино-3,5-диметиладамантан,
1-амино-3,5-диэтиладамантан,
1-N-метиламино-3,5-диметиладамантан и
1-N-этиламино-3,5-диметиладамантан.
3. Применение производных аминоадамантана по п. 1 или 2, отличающееся тем, что их применяют для
повышения активности нейтрофилов in vitro.
4. Применение производных аминоадамантана по п. 1 или 2, отличающееся тем, что их применяют для
повышения активности нейтрофилов при заболеваниях агрануломатозом (CGD), грануломатозом Вегенера
и/или заболеваниях, связанных с иммунодефицитом.
5. Применение производных аминоадамантана по п. 4, отличающееся тем, что заболеванием, связанным
с иммунодефицитом, является СПИД.
6. Применение производных аминоадамантана общей формулы I:
1
R
4
R
2
, (I)
R
3
1
2
3
R
4
где R , R , R , R независимо выбраны из -NR5R6, -NR5R6R7+, водорода, арила или гетероарила с кольцом
вплоть до 7-членного, С1-С20-алкила, С1-С20-алкенила и С1-С20-алкинила, где остатки алкил, алкенил и алкинил могут быть разветвленными, неразветвленными или циклизированными и возможно замещенными галогеном, арилом или гетероарилом с кольцом вплоть до 7-членного, при условии, что, по меньшей мере, один
из остатков R1, R2, R3, R4 представляет собой -NR5R6 или -NR5R6R7+; и
R5, R6, R7 независимо выбраны из водорода, арила или гетероарила с кольцом вплоть до 7-членного, С1С20-алкила, С1-С20-алкенила и С1-С20-алкинила, где остатки алкил, алкенил и алкинил могут быть разветвленными, неразветвленными или циклизированными и возможно замещенными галогеном, арилом или гетероарилом с кольцом вплоть до 7-членного, или R5 и R6 вместе с атомом азота образуют гетероциклическую
группу с кольцом вплоть до 7-членного;
в качестве активного ингредиента для изготовления лекарственного средства для регуляции активности уже
активированных нейтрофилов.
7. Применение производных аминоадамантана по п. 6, отличающееся тем, что их применяют для изготовления лекарственного средства, дополнительно содержащего активатор нейтрофилов.
8. Применение производных аминоадамантана по п. 7, отличающееся тем, что активатор выбирают из
Зимозана, N-формил-Met-Leu-Phe и А 23187.
9. Применение производных аминоадамантана общей формулы I:
1
R
4
R
2
R
3
R
2
, (I)
BY 4861 C1
где R1, R2, R3, R4 независимо выбраны из -NR5R6, -NR5R6R7+, водорода, арила или гетероарила с кольцом
вплоть до 7-членного, С1-С20-алкила, С1-С20-алкенила и С1-С20-алкинила, где остатки алкил, алкенил и алкинил могут быть разветвленными, неразветвленными или циклизированными и возможно замещенными галогеном, арилом или гетероарилом с кольцом вплоть до 7-членного, при условии, что, по меньшей мере, один
из остатков R1, R2, R3, R4 представляет собой -NR5R6 или -NR5R6R7+; и
R5, R6, R7 независимо выбраны из водорода, арила или гетероарила с кольцом вплоть до 7-членного, С1С20-алкила, С1-С20-алкенила и С1-С20-алкинила, где остатки алкил, алкенил и алкинил могут быть разветвленными, неразветвленными или циклизированными и возможно замещенными галогеном, арилом или гетероарилом с кольцом вплоть до 7-членного, или R5 и R6 вместе с атомом азота образуют гетероциклическую
группу с кольцом вплоть до 7-членного;
вместе с активатором в качестве средства для усиленной специфичной активации нейтрофилов in vivo или in
vitro.
10. Применение производных аминоадамантана по п. 9, отличающееся тем, что их применяют для усиленной специфичной активации нейтрофилов в образце, в котором определяют нейтрофилы.
11. Применение производных аминоадамантана по п. 9, отличающееся тем, что активатор выбирают из
Зимозана, N-формил-Met-Leu-Phe и А 23187.
(56)
DE 4014672 A1, 1991.
EP 0392059 A1, 1989.
Изобретение относится к применению производных аминоадамантана в качестве иммунорегуляторов, в
частности, для регулирования и модулирования уже активированных нейтрофилов.
Нейтрофилы, подкласс лейкоцитов, вовлечены в процессы иммунной защиты и другие реакции в кровеносной системе и окружающих тканях (Roitt, I.M., Leitfaden der Immunologie, Steinkopf-Verlag Darmstadt, 2nd
edition, 1984).
Нейтрофилы могут активироваться экзогенными веществами, например такими, как компоненты стенок
клеток (промышленно производимым продуктом является "Зимозан"("Zymosan")). В связи с этим образуются реакционноспособные частицы кислорода в так называемом респираторном взрыве.
На фиг. 1 показана упрощенная схема стимуляции нейтрофилов. После связывания лиганда (например,
Зимозана А) со специфичным рецептором мембраны нейтрофила активируется гуанозинтрифосфат (GTP),
который, в свою очередь, активирует специфичную к фосфатидилинозитол-4,5-бифосфату (РIР2) фосфолипазу C (PLC). Фосфолипаза С катализирует гидролиз фосфатидилинозитол-4,5-бифосфата до инозитол-1,4,5трифосфата (IР3) диацилглицерина (DG). Инозитол-4,5-трифосфат стимулирует выделение ионов Са2+ из
внутриклеточных запасов. Ионы Са2+ с диацилглицерином активируют протеинкиназу С (РКС), которая
фосфорилирует многие белки и таким путем активирует, в числе прочих, комплекс NADPH (восстановленный никотинамидадениндинуклеотидфосфат) и оксидазы. В свою очередь, комплекс NADPH-оксидаза катализирует реакцию:
2O2 + NADPH
2 + NADPH+ + H+ ,
−
в которой образуются реакционноспособные кислородные частицы O2 .
Хотя активированные нейтрофилы являются важными для функционирования иммунной защиты, в результате избыточных реакций, вызываемых в особенности реакционноспособными кислородными частицами, могут появляться симптомы заболевания, такие как острые или хронические воспаления или другие аллергические реакции. С другой стороны, активность нейтрофилов может быть слишком низкой или
недостаточной для успешной иммунной защиты при наличии общего иммунодефицита, например, как это
имеет место при СПИДе. Следовательно, существует потребность, в особенности с медицинской точки зрения, в возможности влиять на регулятивную и/или модулирующую активность нейтрофилов in vivo и in vitro.
В связи с этим активность нейтрофилов нужно повышать или понижать в зависимости от показаний, т.е.
нужно, чтобы ею можно было управлять произвольным образом.
Следовательно, задачей настоящего изобретения является разработка средства для регулирования и/или
модулирования активности нейтрофилов.
Неожиданно было установлено, что определенные производные аминоадамантана обладают регулятивным и/или модулирующим влиянием на активность нейтрофилов и настоящее изобретение связано с этим
открытием. При этом необходимо, чтобы нейтрофилы уже были активированы другими стимуляторами. Сами по себе производные аминоадамантана не проявляют какого-либо активирующего влияния на нейтрофилы.
Поставленная задача решается применением производных аминоадамантана общей формулы I:
3
BY 4861 C1
R1
, (I)
R4
R2
R3
где R , R , R и R независимо выбраны из -NR5R6, -NR5R6R7+ , водорода, арила или гетероарила с кольцом
вплоть до 7-членного, С1-С20-алкила, С1-С20-алкенила и С1-С20-алкинила, где остатки алкил, алкенил и алкинил могут быть разветвленными, неразветвленными или циклизированными и возможно замещенными галогеном, арилом или гетероарилом с кольцом вплоть до 7-членного, при условии, что, по меньшей мере, один
из остатков R1, R2, R3 и R4 представляет собой -NR5R6 или -NR5R6R7+; и
R5, R6 и R7 независимо выбраны из водорода, арила или гетероарила с кольцом вплоть до 7-членного, С1С20-алкила, С1-С20-алкенила и С1-С20-алкинила, где остатки алкил, алкенил и алкинил могут быть разветвленными, неразветвленными или циклизированными и возможно замещенными галогеном, арилом или гетероарилом с кольцом вплоть до 7-членного; для регулирования активности уже активированных нейтрофилов.
Известны производные аминоадамантана этого типа.
Так, 1-аминоадамантаны описаны в DE 2219256, DE 2856393, DE 2232735, US 3450761 и 4122193. Получение соединений формулы I обычно осуществляют известными методами, такими как, например, алкилированием галогенадамантанов. После дальнейшего галогенирования и алкилирования получают отдельные дии/или тризамещенные адамантаны. Патент ЕР 392 059, который приведен в качестве ссылки, относится к получению аминоадамантанов.
Производные аминоадамантана уже использовались для фармацевтических целей. Так, в ЕР 392 059 описывается применение производных аминоадамантана для лечения болезни Альцгеймера или повреждения
клеток головного мозга в результате церебральной ишемии. В патенте US 3450761 описываются аминоадамантаны с противовирусной активностью.
Происходит ли повышение или частичное или полное подавление активности нейтрофилов, зависит от
концентрации используемого производного аминоадамантана. Так, концентрации от 10-6 до 10-5 М повышают активность нейтрофилов. Установлено, что концентрация около 5.10-6 М особенно эффективна для повышения активности нейтрофилов, причем эта концентрация вполне может быть достигнута in vivo в плазме
крови. В противоположность этому, в результате повышения концентрации аминоадамантана происходит
торможение активности. Подходящая для этой цели концентрация составляет от 10-4 до 10-3 М.
Изобретение включает производные адамантана, замещенные одной или несколькими аминогруппами,
среди которых моноаминоадамантаны являются предпочтительными. Следовательно, подходящими соединениями формулы I являются те, в которых R1 представляет собой аминогруппу, например такие, как 1амино-3-этил-5,7-деметиладамантан, а также соединения, в которых R1 представляет собой аминогруппу, a
R3 и R4 представляют атом водорода, например такие, как 1-амино-3-циклогексиладамантан, 1-амино-3этиладамантан.
Предпочтительными производными адамантана являются 1-амино-3,5-диметиладамантан, 1-амино-3,5диэтиладамантан и N-замещенные соединения l-N-метиламино-3,5-диметиладамантан и соединение 1-Nэтиламино-3,5-диметиладамантан. Особенно предпочтительным является 1-амино-3,5-диметиладамантан, называемый мемантин (INN, Akatinol Меmantine®). В работе Görtelmeyer, R., et al., Spectrum of Neurorehabilitation, W.
Zuckschwerdt Publishers, Munich, 1993, 50ff, описано лечение мемантином синдрома Деменса (Demens syndrome).
Как отмечено выше, производные аминоадамантана, согласно настоящему изобретению, оказывают регулирующее влияние только на нейтрофилы, которые предварительно активированы или были стимулированы специальными активаторами.
В качестве активаторов известны вещества природного происхождения, такие как Зимозан, N-формилMet-Leu-Phe (N-FMLP) или А 23187 (антагонист Са). Эти вещества могут применяться, если кто-либо намеревается провести специфичное и более сильное активирование нейтрофилов как in vitro, так и in vivo. Благодаря этому возможно обнаружение нейтрофилов в образце, например в образце жидкости из организма, в
частности в образце крови, даже в том случае, когда присутствует лишь малое количество нейтрофилов или
когда их активность очень слаба. В связи с этим в сочетании с производными аминоадамантана может присутствовать активатор. Степень активации нейтрофилов, вызванной активатором, увеличивается путем одновременного добавления производного аминоадамантана.
Следующей областью применения явления улучшение иммунной защиты для пациентов с различными
формами иммунной недостаточности, в особенности для пациентов со СПИДом. В таком случае может вводиться фармацевтическая композиция, которая содержит производное аминоадамантана согласно изобрете1
2
3
4
4
BY 4861 C1
нию, возможно в сочетании с активатором нейтрофилов. Кроме того, возможно применение при заболеваниях агрануломатозом (CGD), грануломатозом Вегенера и/или при накоплении гликогена.
Естественно, что нейтрофилы могут также активироваться вследствие естественной иммунной реакции организма, как, например, реакция на различные иммуногены и аллергические реакции, воспаления и ревматические
симптомы, инициированные вследствие избыточной реакции. В таких случаях активность нейтрофилов может понижаться при применении для этого повышенной концентрации аминоадамантана и пациент может получить облегчение. Содержащие аминоадамантан лекарственные препараты могут особенно эффективно бороться с внешним и внутренним воспалением, например, колена, тазобедренного сустава или челюсти, а также с
аутоиммунными заболеваниями. Другой областью применения является лечение паразитарных заболеваний, таких
как лейшманиоз.
В связи с этим обеспечение необходимой концентрации производных аминоадамантана для регулирования и модулирования активности нейтрофилов путем подбора подходящей дозы и формы введения оставляется на усмотрение
лечащего врача. В зависимости от области применения здесь возможны парентеральные формы, например внутривенные или переральные формы введения, подходящими являются также формы длительного действия. Изобретение
включает также сочетания производных аминоадамантана согласно изобретению, а также их фармацевтически приемлемых солей, в особенности кислотно-аддитивных солей. В качестве примера здесь можно привести гидрохлориды,
гидробромиды, сульфаты, ацетаты, сукцинаты, тартраты или продукты присоединения фумаровой, малеиновой, лимонной или фосфорной кислот. Фармацевтические композиции могут дополнительно содержать активатор нейтрофилов, в зависимости от круга показаний. Для приготовления состава используются обычные фармацевтически приемлемые носители и адъюванты.
Следующий пример иллюстрирует при помощи определенного соединения - мемантина - зависимость влияния
производных аминоадамантана на повышение или подавление активности.
Определение активности стимулированных нейтрофилов при различных концентрациях мемантина проводили путем измерения с применением хемилюминесценции. Активированные нейтрофилы образуют реакционноспособные
кислородные частицы при респираторном взрыве, которые регистрируются в виде очень слабой хемилюминесценции
- так называемый низкий уровень сверхслабой хемилюминесценции. Чтобы повысить выход фотонов, в качестве сенсибилизатора добавляют люминол (зависимая от индикатора хемилюминесценция). Люминол представляет собой
циклический гидразид, который может окисляться реакционноспособными кислородными частицами до диазохинона.
При нуклеофильной атаке аниона перекиси водорода этот диазахинон далее превращается в αгидроксигидропероксид, который при испускании света разлагается до аминофталата.
Состав загрузки для реакции:
нейтрофилы
106 (число в образце)
ЗФР-буфер, (рН7,4)
до 250 мл
люминол
80 мкМ
мемантин
изменяемая концентрация
стимулирующее средство:
зимозан
2,5 мг/мл
или РМА
1 мкМ
или А 23187
20 мкМ
или N-FMLP
10 мМ
ЗФР - забуференный фосфатом физиологический раствор;
РМА - Форбол-Мистрат-Ацетат (Phorbol-Mystrate-Acetate).
Аналогичные реакционные составы могут быть приготовлены и с другими производными адамантана.
Измерение проводили при помощи высокочувствительных фотоумножителей с низким уровнем шума,
которые преобразуют фотоны на фотокатоде в первичные электроны и затем многократно усиливают последние до сигнала в виде электрического импульса.
Реакцию начинали при помощи стимулятора и проводили измерения без инкубационного периода в течение 40 минут (80 циклов).
Соответствующие результаты показаны на фиг. 2-5, где n = 2×6 означает, что проводили шесть параллельных опытов, повторенных дважды, для получения каждой точки данных, приведенных на диаграммах.
Для нейтрофилов, которые были активированы естественными стимуляторами (Зимозан А; А 23187; Nформил-Met-Leu-Phe) исходный показатель RLU (RLU = Relative Light Units, относительные световые единицы) может быть дополнительно повышен при помощи 10-6 М метамина (для Зимозана А приблизительно
на 90 %; для А 23187 приблизительно на 60 %; для N-FMLP приблизительно на 78 % от исходной стимуляции). Это предполагает повышенный респираторный взрыв и повышенную активность фагоцитоза. Эта реакция не происходит при стимуляции токсичным соединением Форбол-Мистрат-Ацетат (Phorbol-MystrateAcetate) (около -20 % от исходной стимуляции) (фиг. 5). В противоположность этому, мемантин в концентрации 10-3 М почти полностью подавляет исходную стимуляцию любыми стимуляторами.
В контрольном эксперименте было установлено, что сам по себе мемантин не обладает хемилюминесценцией и не гасит хемилюминесценцию.
5
BY 4861 C1
Регулятивное влияние производных аминоадамантана, согласно изобретению, является весьма специфичным для нейтрофилов. Так, у производных аминоадамантана не проявляется никакого воздействия на
эффект дерегулирования активированных лейкоцитов. Из фиг. 6 следует, что сама по себе АСС (1аминоциклопропан-1-карбоновая кислота) не взаимодействует с мемантином в относительно высоких концентрациях. АСС является специфичным индикатором для миелопероксидазы, которая выделяется посредством дегрануляции лейкоцитов и образует в межклеточном пространстве разрушительный гипохлорит.
Миелопероксидаза специфично взаимодействует с АСС с образованием этилена, который может обнаруживаться газохроматографическим методом. Вследствие этого, образовавшееся количество этилена представляет косвенное измерение количественного выражения активности лейкоцитов.
В противоположность этому, индикатор для респираторного взрыва и возникающие из него кислородные
радикалы (супероксид, ОН-радикалы и гидропероксид) активируются мемантином. Это проявляется уже при
концентрации лишь 10-7 М, которая может быть легко получена in vivo. Влияние активации может быть сделано видимым путем добавления Fe3+ , который сдвигает равновесие реакции благодаря реакции ХабераВайса (Haber-Waib reaction) от супероксида и гидропероксида в направлении ОН-радикалов. Чувствительным индикатором для частиц является КМВ (α-кето-g-метил-тиобутират), который разлагается в окислительных условиях, в числе прочего, до этилена и который может легко обнаруживаться (фиг. 7).
В качестве контрольного опыта на фиг. 8 показано, что при добавлении Fe3+ в концентрации > 5×10-4 M
первой стимулируется реакция КМВ, но не реакция АСС. Сам по себе Fe3+ влияния не оказывает.
Фиг. 2
Фиг. 3
Фиг. 4
Фиг. 5
6
BY 4861 C1
Фиг. 6
Фиг. 7
Фиг. 8
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220072, г. Минск, проспект Ф. Скорины, 66.
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
184 Кб
Теги
by4861, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа