close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY5102

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
BY (11) 5102
(13) C1
(19)
7
(51) C 07D 307/82, 405/04,
(12)
A 61P 43/00
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
ПРОИЗВОДНЫЕ N-(3-БЕНЗОФУРАНИЛ)МОЧЕВИНЫ, СМЕСЬ ИХ
ИЗОМЕРОВ ИЛИ ОТДЕЛЬНЫЕ ИЗОМЕРЫ ИЛИ ИХ СОЛИ
(21) Номер заявки: 960572
(22) 1996.03.05
(31) 95 04 460.8 (32) 1995.03.06 (33) GB
(46) 2003.06.30
(71) Заявитель: Байер Акциенгезельшафт
(DE)
(72) Авторы: Габриэле БРОЙНЛИХ (DE);
Рюдигер Фишер (DE); Мацен ЭССАЙЕД (DE); Рольф ХЕННИНГ (DE);
Михаэль ШПЕРЦЕЛЬ (DE); Карл-Хайнц
ШЛЕММЕР (DE); Ульрих НИЛЬШ
(DE); Штифен ТУДХОП (GB); Грэхэм
СТАРТОН (GB); Трейвор С. ЭЙБРЭМ
(GB); Мэри Ф. ФРИТЗДЖЕРЕЛЬД (GB)
(73) Патентообладатель: Байер Акциенгезельшафт (DE)
(57)
1. Производные N-(3-бензофуранил)мочевины общей формулы I:
L
A
NH
C
NR1R2
, (I)
BY 5102 C1
D
O
CO
R3
где А и D одинаковы или различны и означают водород, прямой или разветвленный С1-С6ацил, прямой или разветвленный С1-С6-алкоксикарбонил, галоид, группу формулы -OR4,
где R4 - водород, прямой или разветвленный С1-С8-алкил, С1-С6-алкоксикарбонил или бензил, группу формулы -SO2-R5, где R5 - прямой или разветвленный С1-С4-алкил, или группу
формулы -NH-SO2R6, где R6 - фенил,
L - атом кислорода или серы,
R1 и R2 - одинаковы или различны и означают водород, С3-С6-циклоалкил, прямой или
разветвленный С1-С8-алкил, С1-С8-алкоксикарбонил, С1-С8-алкенил или бензоил; или R1 и
R2 вместе с атомом азота образуют 5-7-членный насыщенный гетероцикл,
R3 - фенил, незамещенный или замещенный 1-3 одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, включающей галоид, нитро, трифторметил, прямой или
разветвленный С1-С8-алкил и прямой или разветвленный С1-С8-алкокси,
смесь их изомеров или отдельные изомеры, или их соли.
2. Производные N-(3-бензофуранил)мочевины общей формулы I по п. 1,
где А и D одинаковы или различны и означают водород, прямой или разветвленный
С1-С5-ацил, С1-С5-алкоксикарбонил, фтор, хлор, бром, группу формулы -OR4, где R4 - водород, прямой или разветвленный С1-С6-алкил, прямой или разветвленный С1-С4алкоксикарбонил или бензил, группу формулы -SO2-R5, где R5 - прямой или разветвленный С1-С3-алкил, или группу формулы -NH-SO2R6, где R6 - фенил,
BY 5102 C1
L - атом кислорода или серы,
R1 и R2 - одинаковы или различны и означают водород, циклобутил, циклопентил, циклогексил, прямой или разветвленный С1-С6-алкил, С1-С6-алкоксикарбонил, С1-С6-алкенил
или бензоил; или R1 и R2 вместе с атомом азота образуют пирролидиновое кольцо,
R3 - фенил, незамещенный или замещенный 1-3 одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, включающей фтор, хлор, бром, йод, нитро, трифторметил, прямой или разветвленный С1-С6-алкил и прямой или разветвленный С1-С6-алкокси,
смесь их изомеров или отдельные изомеры, или их соли.
3. Производные N-(3-бензофуранил)мочевины общей формулы I по п. 1,
где А и D одинаковы или различны и означают водород, прямой или разветвленный
С1-С4-ацил, С1-С4-алкоксикарбонил, фтор, хлор, бром, группу формулы -OR4, где R4 - водород, прямой или разветвленный С1-С3-алкил, бензил или прямой или разветвленный С1С3-алкоксикарбонил, группу формулы -SO2-R5, где R5 - метил или группу формулы -NHSO2R6, где R6 - фенил,
L - атом кислорода или серы,
R1 и R2 - одинаковы или различны и означают водород, циклобутил, циклопентил,
циклогексил, прямой или разветвленный С1-С5-алкил, С1-С5-алкоксикарбонил, С1-С5алкенил или бензоил; или R1 и R2 вместе с атомом азота образуют пирролидиновое кольцо,
R3 - фенил, незамещенный или замещенный 1-3 одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, включающей фтор, хлор, бром, нитро, прямой или разветвленный С1-С5-алкил и прямой или разветвленный С1-С5-алкокси,
смесь их изомеров или отдельные изомеры, или их соли.
4. Производное N-(3-бензофуранил)мочевины общей формулы I по п. 1, представляющее собой 2-(2,4-дихлорбензоил)-3-уреидобензофуран-6-иловый эфир метансульфокислоты, смесь его изомеров или отдельные изомеры, или его соли.
(56)
EP 0146243 A1, 1985.
US 3920707, 1975.
GB 1464242 A, 1977.
US 4703053 A, 1987.
SU 692561 A1, 1979.
Настоящее изобретение относится к новым производным бензофуранила, обладающим
ценными биологическими свойствами, в частности, к производным N-(3-бензофуранил)мочевины, смеси их изомеров или отдельным изомерам и их солям.
Известны производные бензофуранила, обладающие биологической активностью, в частности ингибирующим липоксигеназу действием (см. заявку ЕР № 0 146 243 А1, А61 К 31/38,
С07 D 307/85, 407/12, 405/12, 26.06.1985 г.).
Задачей изобретения является расширение арсенала производных бензофуранила, обладающих биологической активностью, в частности ингибирующих образование кислородных радикалов.
Поставленная задача решается производными N-(3-бензофуранил)мочевины общей
формулы I:
L
A
NH
C
NR1R2
, (I)
D
CO-R3
O
2
BY 5102 C1
где А и D одинаковы или различны и означают водород, прямой или разветвленный ацил
с 1-6 атомами углерода, прямой или разветвленный алкоксикарбонил с 1-6 атомами углерода в алкоксильной части, галоид, группу формулы -OR4, где R4 означает водород, прямой или разветвленный алкил с 1-8 атомами углерода или алкоксикарбонил с 1-6 атомами
углерода в алкоксильной части, бензил и группу формулы -SO2-R5, где R5 означает прямой
или разветвленный алкил с 1-4 атомами углерода, или группу формулы -NH-SO2R6, где R6
означает фенил,
L - атом кислорода или серы,
R1 и R2 одинаковы или различны и означают водород, циклоалкил с 1-6 атомами углерода, прямой или разветвленный алкил, алкоксикарбонил или алкенил, каждый с 1-8 атомами углерода, или бензоил,
или
R1 и R2 вместе с атомом азота образуют 5-7-членный насыщенный гетероцикл,
R3 - фенил, незамещенный или замещенный 1-3 одинаковыми или различными заместителями из группы, включающей галоид, нитро, трифторметил, фенил, и прямые или
разветвленные алкил и алкокси, каждый с 1-8 атомами углерода,
смесью их изомерами или отдельными изомерами и их солями.
В первую группу предпочтительных производных N-(3-бензофуранил)мочевины общей формулы I входят соединения, у которых
А и D одинаковы или различны и означают водород, прямой или разветвленный ацил
с 1-5 атомами углерода, алкоксикарбонил с 1-5 атомами углерода в алкоксильной части,
фтор, хлор, бром, группу формулы -OR4, где R4 означает водород, прямой или разветвленный алкил с 1-6 атомами углерода, прямой или разветвленный алкоксикарбонил с 1-4 атомами углерода в алкоксильной части, бензил и группу формулы -SO2R5, где R5 означает
прямой или разветвленный алкил с 1-3 атомами углерода, или группу -NH-SO2R6, где R6
означает фенил,
L - атом кислорода или серы,
R1 и R2 одинаковы или различны и означают водород, циклобутил, циклопентил, циклогексил или прямой или разветвленный алкил, алкоксикарбонил или алкенил, каждый с
1-6 атомами углерода, или бензоил,
или
R1 и R2 вместе с атомом азота образуют пирролидиновое кольцо,
R3 - фенил, незамещенный или замещенный 1-3 одинаковыми или различными заместителями из группы, включающей фтор, хлор, бром, йод, нитро, трифторметил, фенил,
прямые или разветвленные алкил и алкокси, каждый с 1-6 атомами углерода,
смесь их изомеров или отдельные изомеры и их соли.
Во вторую группу предпочтительных производных N-(3-бензофуранил)мочевины общей формулы I входят соединения, у которых
А и D одинаковы или различны и означают водород, прямой или разветвленный ацил
с 1-4 атомами углерода, алкоксикарбонил с 1-4 атомами углерода в алкоксильной части,
фтор, хлор, бром, группу формулы -OR4, где R4 означает водород, прямой или разветвленный алкил с 1-3 атомами углерода, бензил, прямой или разветвленный алкоксикарбонил с
1-3 атомами углерода в алкоксильной части и группу формулы SO2R5, где R5 означает метил, или группу формулы -NH-SO2-R6, где R6 означает фенил,
L - атом кислорода или серы,
R1 и R2 одинаковы или различны и означают водород, циклобутил, циклопентил, циклогексил, прямой или разветвленный алкил, алкоксикарбонил или алкенил, каждый с 1-5
атомами углерода, или бензоил
или
R1 и R2 вместе с атомом азота образуют пирролидиниловое кольцо,
3
BY 5102 C1
R3 - фенил, незамещенный или замещенный 1-3 одинаковыми или различными заместителями из группы, включающей фтор, хлор, бром, нитро, прямые или разветвленные
алкил, алкокси, каждый с 1-5 атомами углерода,
смесь их изомеров или отдельные изомеры и их соли.
В частности предпочитаются производное N-(3-бензофуранил)мочевины формулы I
по п. 1, представляющее собой 2-(2,4-дихлорбензоил)-3-уреидобензофуран-6-иловый эфир
метансульфокислоты, смесь ее изомеров или отдельные изомеры и ее соли.
В рамках данного изобретения предпочитаются физиологически приемлемые соли.
Физиологически приемлемыми солями производных N-(3-бензофуранил)мочевины могут
быть соли металла или аммониевые соли предлагаемых соединений, которые содержат
свободную карбоксильную группу. В качестве таких солей в частности предпочитаются,
например, натриевые, калиевые, магниевые или кальцевые соли, а также аммониевые соли, производимые от аммиака или органических аминов, таких как, например, этиламин,
ди- или триэтиламин, ди- или триэтаноламин, дициклогексиламин, диметиламиноэтанол,
аргинин, лизин и этилендиамин.
Физиологически приемлемыми солями могут быть также соли предлагаемых соединений
с неорганическими или органическими кислотами. Предпочитаются соли с неорганическими
кислотами, такими как, например, хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, и соли с органическими карбоновыми кислотами и сульфокислотами,
такими как, например, уксусная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, яблочная
кислота, лимонная кислота, винная кислота, этансульфокислота, толуолсульфокислота и нафталендисульфокислота.
Как уже указывалось выше, предлагаемые соединения могут иметься в стереоизомерных формах, которые представляют собой энантиомеры или же диастереоизомеры. Изобретение относится как к антиподам, так и к рацемическим формам, а также к смесям диастереомеров. Рацемические формы, также как и диастереомеры, можно известным
методом разделять на чистые стереоизомеры.
Соединения общей формулы I можно получать любым известным способом. Так, например, соединения общей формулы II:
NH-R7
A
CO-R3
, (II)
O
D
где A, D и R3 имеют вышеуказанные значения, a R7 означает водород, прямой или разветвленный алкил с 1-6 атомами углерода, защитный радикал для аминогруппы или группа
формулы -CO-R8, где R8 означает гидроксил, прямой или разветвленный алкоксикарбонил
с 3-6 атомами углерода, циклоалкил с 3-6 атомами углерода, пиридил, пирролидинил или
прямой или разветвленный алкил с 1-8 атомами углерода, незамещенный или замещенный
галоидом, карбоксилом или прямым или разветвленным алкоксикарбонилом с 1-6 атомами углерода, или фенил, незамещенный или замещенный гидроксилом, карбоксилом или
прямым или разветвленным алкоксилом или алкоксикарбонилом, каждый с 1-6 атомами
углерода,
подвергают взаимодействию с соединениями общей формулы III:
1
R1 - N = L
,
(III)
где L и R имеют вышеуказанные значения,
в среде инертных растворителей, при необходимости в присутствии основания и/или в
присутствии вспомогательного вещества,
в случае, если R1/R2 = Н, и L = О,
соединения общей формулы II подвергают взаимодействию с соединениями общей формулы IIIa:
4
BY 5102 C1
E-SO2-N-C-O ,
(IIIa)
где Е - галоид, предпочтительно хлор,
в случае, если R1/R2 = Н, и L = S,
соединения общей формулы II подвергают взаимодействию с тиоцианатом аммония,
а в случае, если R7, R1 и/или R2 ≠ Н, аминогруппы могут производиться общепринятыми методами.
В качестве примеров защитного остатка для аминогруппы можно назвать, например, бензилоксикарбонил, 3,4-диметоксибензилоксикарбонил, 3,5-диметоксибензилоксикарбонил, 2,4диметоксибензилоксикарбонил, 4-метоксибензилоксикарбонил, 4-нитробензилоксикарбонил,
2-нитробензилоксикарбонил, 2-нитро-4,5-диметоксибензилоксикарбонил, метоксикарбонил,
этоксикарбонил, пропоксикарбонил, изопропоксикарбонил, бутоксикарбонил, изобутоксикарбонил, трет.бутоксикарбонил, аллилоксикарбонил, винилоксикарбонил, 2-нитробензилоксикарбонил, 3,4,5-триметоксибензилоксикарбонил, циклогексоксикарбонил, 1,1-диметилэтоксикарбонил, адамантилкарбонил, фталоил, 2,2,2-трихлорэтоксикарбонил, 2,2,2-трихлор-трет.бутоксикарбонил, метилоксикарбонил, феноксикарбонил, 4-нитрофеноксикарбонил, флуоренил9-метоксикарбонил, формил, ацетил, пропионил, пивалоил, 2-хлорацетил, 2-бромацетил, 2,2,2трифторацетил, 2,2,2-трихлорацетил, бензоил, 4-хлорбензоил, 4-бромбензоил, 4-нитробензоил,
фтальимидо, изовалероил или бензилоксиметилен, 4-нитробензил, 2,4-динитробензил или 4нитрофенил.
Вышеуказанный способ поясняется следующей реакционной схемой:
NH2
Cl- SO2 -NCO
O
H3CO
O
CH2Cl2
Br
NH- CO -NH2
O
H3CO
O
Br
Подходящими растворителями являются общепринятые органические растворители, которые не меняются в условиях реакции. Предпочтительно используют простые эфиры, такие
как, например, диэтиловый эфир, диоксан или тетрагидрофуран, ацетон, диметилсульфоксид,
диметилформамид или спирты, такие как метанол, этанил, пропанол, или галогенированные
углеводороды, такие как дихлорметан, трихлорметан или тетрахлорметан. Предпочитается
дихлорметан.
Подходящими основаниями в общем являются неорганические или органические основания. Предпочтительно используют гидроокиси щелочных металлов, такие как, например,
гидроокись натрия, бикарбонат натрия и гидроокись калия, гидроокиси щелочно-земельных
металлов, такие как, например, гидроокись бария, карбонаты щелочных металлов, такие как,
например, карбонат натрия, карбонат калия, карбонаты щелочно-земельных металлов, такие
как, например, карбонат кальция, или амины щелочных металлов или органические амины
5
BY 5102 C1
(триалкил(С1-С6)амины), такие как триэтиламины, или гетероциклы, такие как 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан, 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен, или амиды, такие как амид натрия,
бутиламид лития или же бутиллития, пиридин или метилпиперидин. Также возможно использовать в качестве основания щелочные металлы, такие как натрий или его гидриды, такие
как гидрид натрия. Предпочитается использовать в качестве основания карбонат калия, триэтиламин, бикарбонат натрия и гидроокись натрия.
Вышеуказанную реакцию в общем осуществляют при температурах от -30 °С до
+100 °С, предпочтительно при -10 °С до +50 °С, и атмосферном давлении. Но реакцию
можно также проводить при повышенном или пониженном давлении, например в пределах от 0,5-5 бар.
Основание применяют в количестве 1-10 моль, предпочтительно 1,0-4 моль, на моль
соединений общей формулы III или IIIa.
Соединения общей формулы II являются новыми, их получают путем взаимодействия
соединений общей формулы IV:
A
CN
, (IV)
D
OH
где А и D имеют вышеуказанные значения,
с соединениями общей формулы V:
R3CO- CH2 -T
3
,
(V)
где R имеет вышеуказанное значение,
Т - типичная удаляемая группа, такая как, например, хлор, бром, йод, тозилат или мезилат, предпочтительно бром,
в среде одного из вышеуказанных растворителей и в присутствии одного из вышеуказанных оснований, предпочтительно в среде диметилформамида в присутствии триэтиламина, и получаемые при этом соединения общей формулы VI:
A
CN
,
D
3
(VI)
O- CH2 -R3
где A, D и R имеют вышеуказанные значения,
подвергают взаимодействию с этилатом натрия в среде этанола.
Вышеуказанную реакцию в общем осуществляют при температурах от +10 °С до
+150 °С, предпочтительно при +30 °С до +80 °С, и атмосферном давлении. Но реакцию
можно также проводить при повышенном или пониженном давлении, например в пределах от 0,5-5 бар.
Соединения общих формул III, IIIa, IV, V и VI известны, в некоторых случаях являются новыми и могут получаться общепринятыми методами.
Соединения вышеприведенной общей формулы I ингибируют как образование кислородных радикалов, так и производство α-фактора некроза опухоли (далее: ФНО-α), и повышают выделение интерлейкина 10 (далее: IL-10). Они содействуют увеличению
концентрации клеточного циклического аденозинмонофосфата, что, вероятно, обусловлено ингибированием активности фосфодиэстеразы фагоцитов.
Предлагаемые соединения в частности ингибируют образование перекислов полиморфоядерными лейкоцитами. Кроме того, они ингибируют выделение ФНО-α и содействуют образование IL-10 в человеческих моноцитах в ответ на ряд стимулов, в том числе
бактериальными липополисакцаридами, опсонизированным комплементом зимозаном
(ZymC3b) и интерлейкином IL-1β.
6
BY 5102 C1
Вышеописанные действия вероятно обусловлены увеличением концентрации клеточного циклического аденозинмонофосфата, которое достигается благодаря ингибированию
фосфодиэстеразы типа IV, ответственной за его деградацию.
Поэтому предлагаемые соединения можно использовать в лекарственных препаратах,
применяемых для лечения острых и хронических воспалительных процессов.
Предлагаемые соединения являются пригодными для лечения и профилактики острых
и хронических воспалений и аутоиммунных болезней, например эмфиземы, альвеолита,
шокового состояния легких, всех видов астмы, хронического обструктивного заболевания
легких, респираторного дистресс-синдрома у взрослых, бронхита, артериосклероза, артроза, воспалений желудочно-кишечной системы, ревматоидного артрита, миокардита, сепсиса и септического шока, артрита, ревматоидного спондилита и остеоартрита, грамотрицательного сепсиса, синдрома шока от отравления, острого респираторного дистресссиндрома, атрофии кости, повреждений от повторной перфузии, реакции "трансплантат
против хозяина", отторжения трансплантата в результате малярии, миальгии, заболевания
ретровирусом HIV, спида, кахексии, болезни Крона, неспецифического язвенного колита,
пиреза, системной красной волчанки, рассеянного склероза, сахарного диабета типа I,
псориаза, болезни Бечета, анафилактического нефрита пурпура, хронического гломерулонефрита, воспалительной болезни кишки, лейкемии.
Кроме того, предлагаемые соединения пригодны для уменьшения повреждения ткани в
результате инфаркта после реоксигенации. В данном случае в целях торможения оксидазы
ксантина целесообразна одновременная дача аллопуринола. Целесообразна также комбинированная терапия с пероксидной дисмутазой, т.е. дисмутазой перекисных радикалов.
Нижеследующие опыты подтверждают биологическую активность предлагаемых соединений.
1. Подготовка человеческих полиморфно-ядерных нейтрофилов
У здоровых людей брали кровь и нейтрофилы выделяли путем осаждения с применением декстрина и повторного суспендирования в буферной среде.
2. Ингибирование образования перекидных анионных радикалов, вызванного тринуклеотидом формилметиноина, лейцина и фениланилина
2,5×105 мл-1 нейтрофилов смешивали с 1,2 мг/мл цитохрома С в углублениях микротитровой чашки. Предлагаемые соединения добавляли в виде смеси с диметилсульфоксидом. Концентрация предлагаемых соединений во всех углублениях составляла 2,5 нмоль
до 10 мкмоль, а концентрация диметилсульфоксида 0,1 объем. %. После добавления 5
мкг×мл-1 цитохалазина В чашку инкубировали при температуре 37 °С в течение 5 минут.
Затем нейтрофилы стимулировали путем добавления 4×10-8 моль тринуклеида формилметионина, лейцина и фениланалина и образование перекислов определяли как ингибируемое пероксидной дисмутазой уменьшение цитохрома С путем измерения оптической
плотности при 550 нм с применением спектрофотометра типа "Thermomax microtite plate
spectrophotometer". Полученные в результате опыта данные рассчитывали по кинетической расчетной программе "Softmax". Контрольные углубления содержали 200 единиц пероксидной дисмутазы. Ингибирование образования перекислов определяли по
следующему уравнению:
[1 − ((Rx − Rb) )] ⋅ 100 ,
((Ro − Rb))
где Rx - образование перекисных радикалов в углублениях, содержащих предлагаемые
соединения,
Ro - образование перекисных радикалов в контрольных углублениях, содержащих
только диметилсульфоксид,
Rx - образование перекисных радикалов в контрольных углублениях, содержащих
только пероксидную дисмутазу.
7
BY 5102 C1
Концентрация ингибирования КИ50 соединений примеров 1-47 составляет 0,07
мкмоль-10 мкмоль.
3. Определение концентрации циклического аденозинмонофосфата в полиморфноядерных нейтрофилах.
Предлагаемые соединения инкубировали вместе с 3,7×106 полиморфно-ядерных нейтрофилов при температуре 37 °С в течение 5 минут до добавления 4×108 моль тринуклеотида формилметионина, лейцина и фениланалина. Через 6 минут белок осаждали путем
добавления 1 %-ной по объему концентрированной соляной кислоты в 96 %-ном по объему этаноле, содержащем 0,1 ммоль этилендиаминотетрауксусной кислоты. После центрифугирования этанольные экстракты упаривали досуха в атмосфере азота и повторно
суспендировали в буфере 50 ммоль трис/HCl с pH 7,4, содержащем 4 ммоль этилендиаминотетрауксусной кислоты. Концентрацию циклического аденозинмонофосфата в экстрактах определяли методом фирмы Amersham International plc. Концентрации циклического
аденозинмонофосфата определяли в процентах контрольного опыта.
Соединения примеров 1-47 в концентрациях 1 мкмоль повышают уровень циклического аденазинмонофосфата на величину до 400 % контрольных значений.
4. Определение ингибирования фосфодиэстеразы в полиморфно-ядерных нейтрофилах.
Использовали фракцию частиц человеческих полиморфно-ядерных нейтрофилов, главным образом, по описанному Соунессом и Скоттом методу (Biochem. J. 291, 389-395, 1993).
Как описано авторами, для экспрессии дискретного стереоспецифического сайта на фосфодиэстеразе фракции обрабатывали смесью ванадата натрия и глютатиона. При этом концентрация ингибирования КИ50 соединений примеров 1-47 составляла 0,001 мкмоль-10 мкмоль.
5. Определение ингибирования фосфодиэстеразы в человеческих тромбоцитах.
Анализ в основном проводился методом по Шмидту и др. (Biochem. Pharmacol. 42,
стр. 153-162, 1991), за исключением того, что гомогенат обрабатывали смесью ванадата
натрия и глютатиона. При этом концентрация ингибирования КИ50 соединений примеров
1-47 свыше 100 мкмоль.
6. Определение связывания с сайтом связывания ролипрама в мозговых мембранах крыс.
Анализ проводился в основном по методу Шнейдера и др. (Eur. J. Pharmacol. 127, 105115, 1986). При этом концентрация ингибирования КИ50 соединений примеров 1-47 составляла 0,01-10 мкмоль.
7. Выделение ФНО-α, индуцируемое эндотоксином.
У нормальных доноров брали кровь. Моноциты выделяли из периферической крови путем
центрифугирования в градиенте плотности с последующим центробежным отмучиванием.
1×106 мл-1 моноцитов возбуждали 2 мкг/мл-1 липополисахаридов и инкубировали в присутствии предлагаемых соединений, взятых в различных концентрациях (10-4-10 мкг/мл-1).
Соединения растворяли в 2 %-ном по объему среды диметилсульфоксида. Клетки инкубировали в содержащей глутамин и эмбриональную тельячую сыворотку в среде RPMI-1640
во влажной атмосфере при 37 °С в присутствии 5 % двуокиси углерода. По истечении 1824 часов α-фактор некроза некрозной опухоли определяли в супернатантах специфическим иммуноферментным твердофазным анализом. Контрольными пробами служили нестимулированные и стимулированные моноциты без добавки предлагаемых соединений.
При этом установлено, что соединения примеров 2, 13 и 16 обеспечивают ингибирование
вызываемого бактериальными липополисахаридами действия ФНО-α в человеческих моноцитах (концентрация ингибирования КИ50: 10-3- 1 мкг/мл-1).
8. Индуцированная эндотоксином летальность вследствие шока у мышей.
Мышей рода B6D2F1 (n = 10) сенсибилизировали 600 мг/кг галактозамина, и шок и
летальность вызывали 0,01 мкг/мышь липополисахаридов. Предлагаемые соединения давали внутривенно за час до применения липополисахаридов. Опытными животными служили мыши, получившие только липополисахариды. Мыши умирали 8-24 часов после
дачи липополисахаридов. Соединения примеров 2, 13 и 16 в дозах 3-30 мг/кг снижали вы8
BY 5102 C1
зываемую эндотоксином смертность приблизительно от 70 до 100 %. Вызываемая введением галактозамина липополисахаридов смертность уменьшена.
9. Возбуждение человеческих моноцитов и определение уровня цитокина.
Человеческие моноциты (2×105 в 1 мл) стимулировали 100 нг/мл липополисахаридов,
0,8 мг/мл зимозана zymC3b или 10 нг/мл IL-1β в присутствии предлагаемых соединений.
Целевая концентрация диметилсульфоксида составила 0,1 объем. %. Клетки инкубировали в течение ночи при 37 °С во влажной атмосфере, содержавшей 5 % СO2. Супернатанты
удаляли и сохраняли при -70 °С. Концентрация ФНО-α определяли с помощью иммуноферментного твердофазного анализа при использовании моноклональных антител А6 против ФНО-α (продукт американской фирмы Майльс) как первичные антитела. Вторичными
антителами служили поликлональные антитела IP300 против ФНО-α (продукт немецкой
фирмы Гензим), а антителом для осуществления детекции служил поликлональный коньюгат антикроликового иммуноглобулина Г и щелочной фосфатазы (продукт немецкой
фирмы Зигма). IL-10 определяли с помощью иммуноферментного твердофазного анализа.
Соединение примера 2 в дозе 1-2 мкмоль обеспечивает 50 %-ное ингибирование вызываемого липополисахаридами и IL-1β образования ФНО-α в то время, как вызываемое зимозаном zymC3b образование ФНО-α ингибировалось этим соединением приблизительно на
50 % при его концентрации 10 мкмоль. Кроме того, соединение примера 2 обеспечивает
выделение IL-10 без стимулирования самообразования IL-10. При концентрации 10
мкмоль имеется, приблизительно, 3-4-кратное повышение образования IL-10.
Новые активные вещества можно известным образом переводить в известные препараты, например, в таблетки, драже, пилюли, грануляты, аэрозоли, сиропы, эмульсии, суспензии и растворы, с использованием инертных, нетоксичных, фармацевтически
пригодных носителей или растворителей. При этом терапевтически активное соединение
должно иметься в концентрации 0,5-90 % от веса общей смеси, то есть в количестве достаточном для достижения нижеуказанной дозировки.
Препараты получают, например, путем смешивания активного вещества с растворителями и/или носителями, в случае необходимости с использованием эмульгаторов или диспергаторов, причем, например, в случае использования воды в качестве разбавителя в
качестве вспомогательных растворителей можно, в случае необходимости, также применять органические растворители. Дачу осуществляют обычным образом, предпочтительно
орально или парентерально, в частности чрезъязычно или внутривенно.
В случае парентеральной дачи растворы активного соединения можно применять используя пригодные жидкие носители.
Для достижения желаемых результатов в общем выгодно в случае внутривенной дачи
применять активные вещества в общем количестве примерно 0,001-10 мг/кг, предпочтительно примерно 0,01-5 мг/кг веса тела, а в случае оральной дачи - в общем количестве
примерно 0,01-25 мг, предпочтительно 0,1-10 мг/кг веса тела.
Однако, в случае необходимости, может быть целесообразным отклоняться от указанных количеств, а именно в зависимости от вида и веса пациента, от способа дачи, от индивидуального поведения пациента относительно лекарственного препарата, вида препарата
и способа введения и момента и промежутков введения лекарственного средства. В случае
введения больших количеств может быть целесообразным распределение ежедневной общей дозы активного вещества на несколько отдельных доз.
Нижеследующие примеры поясняют получение соединений вышеприведенной общей
формулы I. В этих примерах употребляются следующие элюенты:
I смесь петролейного эфира и этилацетата в соотношении 1:1
II смесь петролейного эфира и этилацетата в соотношении 5:1
III смесь петролейного эфира и этилацетата в соотношении 5:2
IV этилацетат
V смесь дихлорметана и метанола в соотношении 5:1
9
BY 5102 C1
VI дихлорметан
VII смесь циклогексана и этилацетата в соотношении 3:1
Исходные соединения
Пример I
2-гидрокси-4-метоксибензонитрил
CN
H3CO
OH
55 г (0,36 моль) 2-гидрокси-4-метоксибензальдегида, 30 г (0,634 моль) хлористоводородной соли гидроксиламина и 34 г (0,5 моль) муравьинокислого натрия в течение 85 минут нагревают с обратным холодильником в 200 мл (98-100 %) муравьиной кислоты.
Затем при перемешивании в течение 3 минут раствор кратко охлаждают льдом. Осадок
отфильтровывают и тщательно промывают водой. После этого сушат в вакууме и получают 45 г (0,3 моль) целевого соединения кирпично-красного цвета.
Выход: 84 %, т.пл.: 169-171 °С, значение Rf: 0,43 (сложный этиловый эфир уксусной
кислоты).
Пример II
(3-амино-6-метокси-бензофуран-2-ил)-(3-нитро-фенил)-метанон
NH2
H3CO
O
NO2
CO
5 г (33,5 ммоль) 2-гидрокси-4-метокси-бензонитрила и 8,2 г (33,5 моль) ω-бромо-3нитроацетофенона растворяют в 30 мл диметилформамида. К раствору добавляют 4,6 мл
триэтиламина. Смесь в течение 90 минут нагревают до 75 °С, после чего ее охлаждают
водой и три раза экстрагируют дихлорметаном. Раствор отгоняют в вакууме и остаток сушат в течение ночи. Сырой продукт в течение 90 минут нагревают с обратным холодильником в смеси из 150 мг натрия и 50 мл этанола. После охлаждения до комнатной
температуры раствор отгоняют, остаток растворяют в воде и три раза экстрагируют этилацетатом. Органический слой сушат над сульфатом натрия, сгущают в вакууме. Остаток
очищают путем хроматографии (силикагель 60).
Выход: 9,6 г (92 %)
Значение Rf: 0,18 (III)
Точка плавления: 214 °С.
Аналогично примеру I получаются соединения, сведенные в таблицах I-V.
10
BY 5102 C1
Таблица I
NHR7
D
Соединение
примера №
D
O
R7
CO
R3
Т. пл.
Выход
(°C) (% теории)
R3
Rf
(элюент
№)
NO2
III
-ОСН3
-СО-СН3
202
100
0,39 (V)
162
57
0,73 (V)
190
34
0,43 (VI)
107
9
63 (VI)
166
32
0,09 (V)
Cl
119121
30
0,62 (IV)
Cl
IV
-ОСН3
H
Cl
Cl
V
-ОСН3
-СО-СO2СН3
Cl
Cl
VI
-ОСН3
-СО2СН3
Cl
Cl
VII
-ОСН3
-СО-СO2Н
Cl
Cl
VIII
-ОСН3
-СН3
IX
-ОСН3
-СО-СО2С2Н5
Cl
159
70
0,53 (VI)
X
-ОСН3
-СО-СO2Н
Cl
199
87
0,07 (V)
XI
-ОСН3
H
Cl
183
99
0,69 (V)
XII
-ОСН3
-СО-СН3
Cl
179
70
0,87 (V)
11
BY 5102 C1
Продолжение табл. I
Соединение
примера №
D
R
XIII
-ОСН3
-СО-(СН2)2-СН3
XIV
-ОСН3
7
R
Выход
Т. пл.
(% тео(°C)
рии)
3
Rf
(элюент №)
Cl
131,5
60
0,57 (V)
Cl
124,5
54
0,62 (VI)
Cl
238
41
0,43 (VI)
Cl
202
50
0,41 (VI)
Cl
308
11
0,32 (V)
Cl
279
45
0,37 (V)
Cl
206
72
0,59 (VI)
Cl
177
80
0,58 (VI)
Cl
155
(разл.)
74
0,1 (VI)
Cl
163
72
0,44 (VI)
Cl
139
44
0,44 (V)
Cl
177
84
0,64 (VI)
-CO
XV
-ОСН3
XVI
-ОСН3
-CO
CO2CH3
-CO
CO2CH3
XVII
-ОСН3
XVIII
-ОСН3
-CO
CO2H
-CO
CO2H
XIX
-ОСН3
XX
-ОСН3
-CO
OCH3
-CO
OCH3
XXI
-ОСН3
-CO
OCH3
XXII
-ОСН3
-CO
CO2H
XXIII
-ОСН3
-CO
CO2CH3
XXIV
-ОСН3
-CO-(CH2)3-Br
12
BY 5102 C1
Продолжение табл. I
Соединение
примера №
D
XXV
-ОСН3
XXVI
-ОСН3
XXVII
-ОСН3
XXVIII -ОСН3
XXIX
-ОСН3
R
7
R
Выход
Т. пл.
(% тео(°C)
рии)
3
Rf
(элюент №)
Cl
230
64
0,77 (V)
H
CH3
238
91
0,66 (IV)
-СО-СН2-СO2С2Н5
Cl
129
16
0,92 (V)
H
Br
122
82
0,62 (IV)
H
F
149151
56
0,64 (IV)
135
30
0,6 (I)
-CO
N
Br
XXX
-ОСН3
H
OCH3
XXXI
-ОСН3
H
123
89
0,7 (I)
XXXII
-ОСН3
H
136
41
0,8 (I)
137
47
0,3 (III)
19
0,56 (IV)
90
0,67 (IV)
CF3
XXXIII -ОСН3
H
F
Cl
XXXIV
-ОН
H
Cl
H3C
XXXV
-ОСН3
H
CH3
H3C
13
214
BY 5102 C1
Таблица II
7
NHR
D
O
R3
O
Соединение
примера №
R7
D
R3
Т. пл. (°C)
Выход
Rf (элюент
(% теории)
№)
Cl
XXXVI
ОСН3
H
90
90
0,1 (VI)
XXXVII
ОСН3
H
F
155
62
0,4 (VI)
XXXVIII
ОСН3
H
CH3
170
колич.
0,6 (VI)
XXXIX
ОСН3
H
C2H5
220
9
0,65 (VI)
XL
ОСН3
H
Cl
258
63
0,33 (I)
130
61
0,4 (I)
Cl
Cl
XLI
ОСН3
H
Таблица III
NH2
X
O
R3
O
Y
Z
Соединение примера №
X
Y
Т. пл. Выход (% Rf (элюент
(°С)
теории)
№)
R3
Z
Cl
XLII
H
СОСН3
H
Cl
209
19
0,72 (V)
198
37
0,7 (V)
Br
XLIII
H
СОСН3
H
14
BY 5102 C1
Продолжение табл. III
Соединение примера №
X
Y
Т. пл. Выход (% Rf (элюент
(°С)
теории)
№)
R3
Z
Cl
XLIV
H
H
NHSO2
Cl
223
25
0,71 (V)
253
30
0,72 (V)
258
51
0,70 (V)
210
72
0,67 (V)
Br
XLV
H
СООСН3
H
Cl
XLVI
H
СООСH3
H
Cl
Br
XLVII
H
H
NHSO2
Таблица IV
NH2
X
O
R3
O
Y
Z
Соединение примера №
X
Y
Т. пл. Выход (% Rf (элюент
(°С) теории)
№)
R3
Z
Cl
XLVIII
H
H
OCH3
Cl
210
57
0,4 (III)
157
41
0,44 (III)
147
69
0,78 (V)
214
62
0,4 (V)
Br
XLIX
H
H
OCH3
CH3
L
OCH3
H
H
CH3
Cl
LI
Cl
OCH3
H
Cl
15
BY 5102 C1
Продолжение табл. IV
Соединение примера №
X
Y
Т. пл. Выход (% Rf (элюент
(°С) теории)
№)
R3
Z
Cl
LII
H
H
-OCH2
Cl
150
46
0,5 (V)
178
68
0,7 (V)
125
39
0,78 (V)
127
59,4
0,65 (V)
171
47
0,83 (V)
Cl
LIII
OCH3
H
H
Cl
Br
LIV
OCH3
H
H
H3C
O
LV
OCH3
H
H
O
CH3
NO2
LVI
OCH3
H
H
Таблица V
NH2
X
O
R3
O
Y
Z
Соединение примера №
X
Y
R3
Z
Т. пл. (°С)
Выход (% Rf (элюент
теории)
№)
CH3
LVII
H
ОСН3
H
CH3
16
155
18
0,5 (III)
BY 5102 C1
Целевые соединения
Пример 1
N-(3-(6-метокси-2-(4'-метилбензоил)бензофуранил)мочевина
O
NH2
NH
CH3
H3CO
O
CO
1 г (3,55 ммоль) соединения примера II растворяют в 20 мл дихлорметана и охлаждают до 0 °С. К раствору в течение 30 минут прибавляют каплями 0,55 г (3,99 ммоль) хлорсульфонилизоцианата в 10 мл дихлорметана, после чего реакционную смесь доводят до
комнатной температуры и перемешивают в течение дальнейших 4 часов. Добавляют 20 мл
воды и перемешивают в течение ночи. Дихлорметан удаляют в вакууме, и остаток подают
в этилацетат, промывают солевым раствором, продукт отделяют и сушат над сульфатом
магния. В результате упаривания получают твердое вещество, которое растирают в порошок с применением пентана. Получают 1 г (3,1 ммоль, 87 %) целевого соединения в качестве твердого вещества желтого цвета.
Точка плавления: 258-260 °С.
Значение Rf: 0,82 (смесь метанола и хлористого метилена в соотношении 1:1)
Аналогично примеру 1 получают соединения, сведенные в таблице 1.
Таблица 1
L
NH
D
Соединение
примера №
D
L
R1
O
C
NR1R2
CO-R3
R2
Выход
Rf (элюТ. пл.
(% теоент №)
(°С)
рии)
R3
Cl
2
-OCH3
O
H
H
3
-OCH3
O
H
H
4
-OCH3
O
H
H
5
-OCH3
O
H
H
Cl
82
218
0,2 (V)
(разл.)
92
264
0,54 (V)
Cl
87
266
0,55 (V)
F
14
Br
206-7 0,65 (V)
NO2
6
-OCH3
O
H
H
59
17
23
0,2 (V)
BY 5102 C1
Продолжение табл. 1
Соединение
примера №
D
L
R
1
R
2
R
Выход
Rf (элюТ. пл.
(% теоент №)
(°С)
рии)
3
Cl
7
Н3СO2
С-О
O
H
H
Cl
53
208-9
0,6 (V)
65
337-9 0,12 (V)
Cl
8
НО
O
H
H
Cl
Cl
9
H3C-O
O
H
-CH3
Cl
56
174
0,87 (V)
22
204
0,7 (V)
41
217
0,62
(IV)
89
200
0,5 (I)
91
201
0,4 (I)
93
212
0,2 (III)
67
204
0,2 (III)
63
187
0,7 (V)
Cl
10
H3C-O
O
CH3
-CH3
Cl
H3C
11
H3C-O
O
H
H
CH3
H3C
Br
12
H3C-O
O
H
H
OCH3
13
H3C-O
O
H
H
F3C
14
H3C-O
O
H
H
F
15
H3C-O
O
H
H
Cl
16
H3C-O
O
H
H
18
BY 5102 C1
Продолжение табл. 1
Соединение
примера №
D
L
R
1
R
2
R
Выход
Rf (элюТ. пл.
(% теоент №)
(°С)
рии)
3
F
17
H3C-O
O
H
CH2
54
174
0,9 (V)
100
142
0,49 (II)
16
207
0,21 (II)
18
187
0,89 (V)
Br
18
H3C-O
O
H
F3C
19
H3C-O
O
H
CH2
Cl
20
H3C-O
O
Cl
Пример 21
N-бензоил-N'-(3-(2-(2',4'-дихлорбензоил)-6-метоксибензофуранил)тиомочевина
O
S
NH
NH
O
Cl
O
H3CO
Cl
1,35 г (4 ммоль) соединения примера IV и 720 мг (4,4 ммоль) бензоилизотиа-цианата в
20 мл ацетона нагревают с обратным холодильником в течение 24 часов, затем реакционную смесь охлаждают и при перемешивании вливают в ледяную воду. Осадок отфильтровывают и промывают водой. После сушки в вакууме, осуществляемой в эксикаторе,
получают 1,6 г (3,3 ммоль) целевого соединения в качестве твердого вещества желтого
цвета, выход 84 %. Точка плавления: 100 -102 °С Значение Rf: 0,67 (элюент № IV).
Аналогично примеру 1 получают соединения, сведенные в таблицах 2-6.
19
BY 5102 C1
Таблица 2
L
D
O
Соединение примера NQ
22
D
L
OCH3 O
R1 R2
H
R3
H
F
NH
C
CO
R3
NR1R2
Выход (%
теории)
Т. пл. (°С)
Rf (элюент
№)
49
228 (разл.)
0,34 (I)
29,5
231 (разл.)
0,42 (I)
63
258
0,33 (I)
Cl
23
OCH3 O
H
H
24
OCH3 O
H
H
Cl
25
OCH3 O
H
H
CH3
50,4
222
0,33 (I)
26
OCH3 O
H
H
C2H5
9
217
0,36 (I)
27
OCH3 O
H
H
33,5
214
0,4 (I)
Cl
Cl
20
BY 5102 C1
Таблица 3
O
NH2
NH2
X
O
O
Y
R3
Z
Соединение примера №
X
Y
Выход
Т. пл.
R (элю(% тео- f
(°С)
ент №)
рии)
R3
Z
Cl
28
H
H
OCH3
Cl
250 (Z)
46
0,7 (V)
226 (Z)
98
0,04 (III)
266
64
0,54 (V)
-
89
0,6 (V)
193
96
0,83 (V)
246
89
0,56 (V)
217
30
0,61 (V)
Br
29
H
H
OCH3
CH3
30
OCH3
H
H
CH3
Cl
31
Сl
OCH3
H
Cl
Cl
32
H
H
OCH2
Cl
Cl
33
OCH3
H
H
Cl
Br
34
OCH3
H
H
21
BY 5102 C1
Продолжение табл. 3
Соединение примера №
X
Y
Выход
Т. пл.
R (элю(% тео- f
(°С)
ент №)
рии)
R3
Z
H3C
O
35
OCH3
H
H
CH
O
202
50
0,52 (V)
234
79
0,41 (V)
NO2
36
OCH3
H
H
Таблица 4
O
NH2
NH2
X
O
O
Y
R3
Z
Соединение примера №
X
Y
Т. пл.
(°С)
3
Z
R
Выход
Rf
(% тео- (элюент
рии)
№)
Cl
37
H
COCH3
H
Cl
195
35
0,3 (III)
-
27
0,34
(III)
17
0,54
(III)
Br
38
H
COCH3
H
Cl
39
H
NHSO2
H
Cl
22
BY 5102 C1
Продолжение табл. 4
Соединение примера №
X
Y
Т. пл.
(°С)
R3
Z
Выход
Rf
(% тео- (элюент
рии)
№)
Br
40
H
COOCH3
H
146
35
0,88 (V)
245
37
0,77 (V)
221
20
0,44 (V)
Cl
41
H
COOCH3
H
Cl
Br
42
H
H
NHSO2
Таблица 5
S
NH
X
O
R3
R2~
R2
O
Y
Соединение примера №
NH
R3
Выход (% Rf (элюент
теории)
№)
X
Y
OCH3
H
62
034 (V)
H
OCH3
56
038 (VII)
Cl
44
COOC2H5
Cl
Cl
45
COOC2H5
Cl
23
BY 5102 C1
Таблица 6
O
NH
A
O
O
D
Соединение примера №
А
NH2
R3
D
R3
Т.пл. °С
Выход
(% теории)
Rf (элюент
№)
224
31
0,5 (V)
217
70
0,27 (III)
218
(разл.)
65
-
Cl
46
H
CH3
Cl
CH3
47
H
OCH3
CH3
Cl
48
H
OSO2CH3
Cl
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
24
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
329 Кб
Теги
by5102, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа