close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY5162

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
BY (11) 5162
(13) C1
(19)
7
(51) A 61K 31/345,
(12)
A 61P 31/14
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
ИНГИБИТОР ВИРУСА ЛИМФОЦИТАРНОГО ХОРИОМЕНИНГИТА
(21) Номер заявки: a 19980148
(22) 1998.02.17
(46) 2003.06.30
(71) Заявитель: Белорусский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии (BY)
(72) Авторы: Петкевич Александр Сергеевич; Рустамова Лариса Михайловна;
Сабынин Вячеслав Михайлович; Богданова Наталья Леонидовна; Ермакова Татьяна Сергеевна (BY); Присакарь
Виорел Иванович; Самусь Нина Михайловна; Цапков Виктор Иванович
(MD)
(73) Патентообладатель: Белорусский научноисследовательский институт эпидемиологии и микробиологии (BY)
(57)
Применение изоникотиноилгидразона 5-нитро-2-фуральдегида в качестве ингибитора
вируса лимфоцитарного хориоменингита.
BY 5162 C1
(56)
Богданова Н.Л. и др. Принципы и перспективы диагностики новых и вновь появляющихся инфекционных заболеваний. - Мн.: 1997. - С. 89.
MD 196 B1, 1995.
Klavinskis ls. et al. J. Gen. Virol. 1989. Vol. 70. - № 12. - Р. 3317-3325.
Gessner A. et al. J. Virol. 1989. Vol. 63. - № 4. - Р. 1827-1832.
Изобретение относится к области вирусологии и может быть использовано как эффективный ингибитор вируса лимфоцитарного хориоменингита (ЛХМ) в культуре клеток Vero.
Разработка эффективных химиопрепаратов для лечения и профилактики вирусных
инфекций является актуальной задачей. Арсенал известных противовирусных средств ограничен и отсутствует в отношении указанной инфекции, протекающей с поражением
нервной системы и имеющей распространение на территории Республики Беларусь.
Наиболее близким по химическому строению и проявляющим противовирусную активность является (5-нитро-2-фурфурилиден)-1-аминогидантоин, представленный в качестве прототипа [1]. Недостаток прототипа - невысокая противовирусная активность.
Химиотерапевтический индекс равен 5.
Задачей изобретения является поиск и расширение арсенала средств, эффективных в
отношении вируса ЛХМ.
Поставленная задача достигается применением соединения оригинального синтеза
изоникотиноил-гидразон 5-нитро-2-фуральдегида общей формулы:
BY 5162 C1
O 2N
O
CH
N
NH
.
C
O
Данное соединение нерастворимо в воде, слабо растворимо в спирте, ди-метилсульфоксиде, растворяется в щелочах. Предложенное решение является новым и неочевидным, т.к.
до сих пор не описано применение указанного соединения в качестве ингибитора вируса ЛХМ.
Это свойство выявлено впервые и известна лишь его противомикробная активность [2].
Сущность изобретения поясняется примерами:
Пример 1.
Токсичность исследуемого вещества изучали на культуре клеток Vero, выращенных
на дне пенициллиновых флаконов. Вещество растворяли в 2,5 % среде гемогидролизата и
наносили на отмытые от ростовой среды клетки в концентрациях от 400 до 1 мкг/мл.
Спустя 96 ч регистрировали цитопатическое действие вещества под микроскопом. Максимально переносимой концентрацией (МПК) считали 1/2 наивысшей концентрации, не
вызывающей цитодеструктивных изменений клеток. МПК исследуемого соединения составила 25 мкг/мл.
Пример 2.
Двухсуточную культуру клеток Vero заражали вирусом ЛХМ с множественностью инфицирования 0,1-0,01 БОЕ/клетка. После адсорбции вируса на культуре клеток в поддерживающую среду зараженных клеток вносили предлагаемое соединение в концентрациях 2, 5,
10, 25 мкг/мл. Инкубация продолжалась в течение 72 ч при температуре 37 °С. В отобранных
пробах определяли инфекционную активность вируса методом редукции бляшек под агаровым покрытием [3]. Контрольными служили культуры клеток, зараженные вирусом ЛХМ в
аналогичных условиях, но в отсутствие предлагаемого соединения в культуральной среде.
Результат оценивали по значению химиотера-певтического индекса (ХТИ), который равен
отношению МПК к минимально активной концентрации (МАК, доза препарата, при которой
подавление размножения вируса находится в диапазоне 1,5-1,7 Ig). Предлагаемое соединение
обладает выраженным противовирусным действием в отношении вируса ЛХМ (табл. 1).
Таблица 1
Ингибирование размножения вируса ЛХМ в присутствии изоникотиноилгидразон 5-нитро-2-фуральдегида в культуре клеток VERO
МПК
Соединение
мкг/мл
Заявляемое
Прототип
25
5
Концентрация
Титр вируса Ингибиция
препарата
Ig БОЕ/мл
Ig БОЕ/мл
мкг/мл
25
10
5
2
0
5
1
0
2,7
4,1
6,0
2,0
3,7
5,5
6,0
6,0
3,3
1,9
3,5
1,8
-
МАК
мкг/мл
ХТИ
2
12
1
5
Показано снижение инфекционного титра вируса ЛХМ по сравнению с контролем на
величину, превышающую 1,7 Ig в концентрациях 2, 5, 10, 25 мкг/мл, ХТИ равно 12. В то
же время прототип имеет ХТИ 5 и более токсичен.
2
BY 5162 C1
Пример 3. В экспериментах на животных использовали дозу вируса - 10 LD50. Животных инфицировали интрацеребрально, раствор соединения в дозе 150 мг/кг вводили внутрибрюшинно по 0,2 мл за 24 ч и 1 ч до заражения и затем через 24, 48, 72, 96 и 120 ч после
заражения. Об эффективности соединения судили по увеличению выживаемости животных по сравнению с контрольной группой. В результате проведенных опытов установлено, что изученное соединение, защищало 25,0 % животных от гибели и значительно
удлиняло (4,2 суток) срок жизни. Применение прототипа по той же схеме практически не
влияло на выживаемость и срок жизни инфицированных животных (табл. 2).
Таблица 2
Влияние изоникотиноил-гидразон 5-нитро-2-фуральдегида на выживаемость
мышей, инфицированных вирусом ЛХМ
Препарат
Заявляемое
Контроль
Прототип
Контроль
Количество
животных
Смертность
%
Защита %
20
19
25
23
75,0
100,0
100,0
100,0
25,0
-
Средний день Удлинение срогибели (сут.) ка жизни (сут.)
12,4
8,2
6,4
6,3
4,2
0,1
-
Технический результат изобретения заключается в подавлении размножения вируса
ЛХМ в культуре клеток Vero. Эффект новый и достаточно высокий, химиотерапевтический индекс равен 12. Он достигается применением соединения в концентрациях 2, 5, 10,
25 мкг/мл.
Таким образом заявляемое соединение менее токсично, обладает способностью высокоэффективно подавлять размножение вируса ЛХМ культуре клеток Vero, увеличивать
продолжительность жизни лабораторных животных и давать 25,0 % защиту при лечении
экспериментальной инфекции, вызванной вирусом ЛХМ. В этом преимущество перед взятым прототипом.
Вышеизложенные биологические свойства предлагаемого соединения позволяют считать его потенциальным противовирусным препаратом в отношении вируса ЛХМ.
Источники информации:
1. Богданова Н.Л., Сабынин В.М., Рустамова Л.М. и др. Сб.: Принципы и перспективы
диагностики новых и вновь появляющихся инфекционных заболеваний. - Мн.: 1997. - С. 89
(прототип).
2. Buletin oficial de proprietate Industrialа, 1995. - №5. - С. 84. - № 196 В 1.
3. Porterfield I.S., Allison S.A. Studies with Pox viruses by an Improved Plaque Technique.
Virology. - 1960. - № 10. - Р. 233-244.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
3
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
122 Кб
Теги
патент, by5162
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа