close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY5481

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
BY (11) 5481
(13) C1
(19)
7
(51) G 09B 23/28
(12)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ НИКОТИНОЗАВИСИМОСТИ У
ЖИВОТНЫХ
(21) Номер заявки: a 19980966
(22) 1998.10.22
(46) 2003.09.30
(71) Заявитель: Государственное учреждение "Научно-исследовательский
институт санитарии и гигиены"
(BY)
(72) Авторы: Римжа Елена Андреевна; Талапин Виталий Иванович (BY)
(73) Патентообладатель: Государственное
учреждение "Научно-исследовательский институт санитарии и гигиены"
(BY)
(57)
1. Способ моделирования никотинозависимости у животных путем никотинизации лабораторных животных, отличающийся тем, что никотинизацию осуществляют в два этапа, с принудительным энтеральным или парентеральным введением никотина или его
солей на начальном этапе и последующим внутрижелудочным введением в постепенно
возрастающих дозах.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что никотинизацию осуществляют путем введения никотина или его солей в виде водного раствора.
3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что водный раствор никотина или его солей
вводят в течение 45 суток в постепенно возрастающих дозах до 0,2 мг/кг.
BY 5481 C1
(56)
Ходжагельдиев Т. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1984. Т. 98. - № 11. - С. 576-578.
SU 1277448 A, 1988.
Изобретение относится к экспериментальной биологии, медицине и наркологии и может быть использовано при изучении экспериментального никотинизма и проведения медико-биологических исследований, связанных со скринингом и углубленным изучением
фармакологических средств антиникотинового действия.
Известен способ отбора животных для фармакологического скрининга антиникотиновых веществ [1], обладающий следующими недостатками. Он относится к способам отбора животных для изучения табачного дыма, исключает возможность свободного выбора
между вдыханием табачного дыма и дыма, не содержащего никотин, не обеспечивает точного индивидуального дозирования поступления в организм вредных веществ табачного
дыма и требует специальной камеры-установки, конструкция установки не предусматривает помещения для предварительного нахождения животных до осуществления ими выбора и для контрольного задымливания и ингаляции нейтрального дыма (папиросной
бумаги или другого вида плацебо, не содержащего табака).
BY 5481 C1
Известен способ формирования влечения к никотину у белых крыс [2] (прототип) путем потребления 0,005 % раствора никотина в качестве жидкости для питья в течение 8
недель в суточной дозе 1,788 мг/кг или в течение 16 недель при дозе 1,266 мг/кг. Данный
способ требует продолжительного времени (минимум - 8 недель) и не позволяет осуществлять точное индивидуальное дозирование количества никотина, попадающего в организм
животных. Применение постоянной концентрации и дозы никотина на всем протяжении
опыта не является патогноматичным формированию никотинозависимости у человека, так
как не учитывает одну из основных закономерностей проявления хронического никотинизма, заключающуюся в необходимости постоянного увеличения поступающих в организм количеств токсиканта (никотина).
Задачей настоящего изобретения является повышение эффективности и экономичности, упрощение и ускорение способа моделирования хронического никотинизма.
Задача решается двухэтапной никотинизацией животных с принудительным энтеральным или парентеральным введением никотина или его солей на начальном этапе и последующим внутрижелудочным введением в постепенно возрастающих дозах. Никотинизацию осуществляют путем введения никотина или его солей в виде водного раствора, который вводят в течение 45 суток в постепенно возрастающих дозах до 0,2 мг/кг.
Способ осуществляется следующим образом. Лабораторным животным (белые крысы)
никотин в виде водного раствора никотина-основания или его солей (тартрата, салицилата
и др.) вводят первоначально путем ежедневных подкожных инъекций в течение 7 суток в
дозе 0,04 мг/кг, затем внутрижелудочно ежедневно в течение 45 суток в возрастающих
дозах: в период 8-15-х суток эксперимента - в дозе 0,1 мг/кг, с 16-х до 30-х суток в дозе
0,15 мг/кг и с 31-х до 45-х суток опыта - в дозе 0,2 мг/кг. Констатацию возникновения никотинозависимости у животных осуществляют с использованием теста на предпочтительное потребление никотина крысами в условиях свободного выбора жидкости для питья
(раствор никотина или вода дистиллированная) и теста толерантности.
Опыты проводят на нелинейных белых крысах (каждая группа состоит из 8-10 животных). В течение 7 суток у животных регистрируют динамику среднесуточного потребления питьевой воды. Крысы содержатся в стандартных условиях вивария при естественном
освещении, первоначально групповом (по 4-5 особей в клетке), затем при индивидуальном размещении в условиях, исключающих проявления гиподинамии и изоляционного
стресса. После 24-часового полного лишения питьевой воды животным предоставляется
выбор для добровольного предпочтительного потребления жидкости для питья (никотин/вода). Для снятия стереотипизма поилки с растворами никотина и водой периодически меняют местами, используя т.н. "двухбутылочный тест".
Учет результатов эксперимента ведут по критериям суточного потребления жидкости
(раствора никотина и воды).
При анализе суточного потребления жидкости белыми крысами в условиях свободного выбора в динамике формирования никотинозависимости установлено, что подопытные
животные к исходу 45 суток никотинизации закономерно предпочитают раствор алкалоида, что указывает на сформировавшуюся зависимость от препарата (табл. 1).
Таблица 1
Суточное потребление жидкости белыми крысами (свободный выбор)
в динамике формирования никотинозависимости
Время никотинизации
Суточное потребление жидкости
вода
никотин
7-е сутки
11,0 ± 2,9
9,7 ± 2,1
15-е сутки
12,7 ± 3,6
11,9 ± 4,8
45-е сутки
12,8 ± 0,4
25,4 ± 0,6*
Примечание: * - статистически достоверные различия.
2
BY 5481 C1
На протяжении эксперимента по моделированию хронической никотинизации толерантность крыс к алкалоиду и количество выживших животных закономерно возрастают в
динамике исследования. Так, через 7 суток принудительной парентеральной никотинизации погибли 17 животных из 22, а через 15 и 30 суток опыта - соответственно 10 и 9
(табл. 2). Наиболее выражены результаты на 45-е сутки эксперимента.
Таблица 2
Причинно-следственная зависимость (по значениям коэффициента ассоциации и
критерия хи-квадрат) гибели животных от продолжительности введения никотина
Группы
животных
1
Контрольная
Получавшие
никотин в
течение:
7 суток
15 суток
30 суток
45 суток
Число
животных
2
22/21
22/17
22/10
22/9
22/3
3
Коэффиц.
ассоциации
4
Критерий
хи-квадрат
5
7 суток - контроль
0,20 ± 0,12
1,74
>0,05
15 суток - контроль
0,50 ± 0,08
10,92
<0,05
15 суток - 7 суток
0,28 ± 0,11
3,96
<0,05
30 суток - контроль
0,54 ± 0,07
10,68
<0,05
30 суток - 7 суток
0,32 ± 0,10
4,61
<0,05
30 суток-15 суток
0,01 ± 0,15
0,05
>0,05
45 суток - контроль
0,78 ± 0,03
26,49
<0,05
45 суток - 7 суток
0,59 ± 0,06
15,49
<0,05
45 суток - 15 суток
0,30 ± 0,11
3,94
<0,05
45 суток - 30 суток
0,26 ± 0,11
3,86
<0,05
Сравниваемые группы
Р
6
Примечание: * - в числителе общее число животных, в знаменателе - число павших.
Для подтверждения пригодности предлагаемой модели формирования никотинозависимости организма проведены эксперименты по специфической медикаментозной коррекции патологии с применением накожной противокурительной терапевтической системы с цитизином (ТТС с цитизином).
Воздействие ТТС осуществляли путем 7-суточной непрерывной эпикутанной аппликация нативных образцов размером 2,5×2,5 см на предварительно выстриженные латеральные участки спины животных. Препарат дополнительно фиксировали с помощью
полос лейкопластыря. Животные размещались в индивидуальных станках-кассетах круглосуточно, за исключением времени для кормления, ухода, прогулки, дополнительной
фиксации либо смены образцов.
Замену образцов на свежие производили через 4 суток: образцы снимали, участки
кожных покровов обмывали теплой водой с мылом, подсушивали вначале марлевыми
салфетками, а затем на воздухе, состригали отросший шерстный покров. После 4-часовой
паузы фиксировали свежие образцы препарата. Для профилактики гиподинамии крыс 4
раза в сутки на 1 час помещали в прогулочный манеж. В целях профилактики изоляционного стресса животных каждой группы во время ухода, кормления и прогулки содержали
совместно.
3
BY 5481 C1
В результате проведенных исследований установлено, что разработанная модель никотинозависимости организма пригодна для апробации специфических методов медикаментозной коррекции патологии, что показывают эксперименты с трансдермальной терапевтической системой с цитизином (табл. 3), обладающей корригирующим действием
на состояние экспериментальной никотинозависимости организма. Так, если из 22 животных с сформировавшимся состоянием никотинозависимости на 45 сутки опыта после
пробного применения смертельной дозы никотина гибнет всего 3 особи, то после лечения
противокурительным средством (ТТС) реакция животных приближается к показателям
контроля - из 22 леченных животных от тест-никотина гибнет 14 (для сравнения - из 22
контрольных крыс после применения смертельной дозы никотина гибнет 21 животное).
Результаты (коэффициент ассоциации и критерий хи-квадрат) статистически достоверны.
Таблица 3
Результаты изучения толерантности к никотину у животных, леченных с
применением накожной терапевтической системы с цитизином
Группы
Число
Сравниваемые группы
животных животных
1
2
3
Контрольная
22/21
45 суток
22/3
45 суток - контроль
45 суток - 7 суток
45 суток - 15 суток
45 суток - 30 суток
Леченные
22/14
ТТС - контроль
ТТС
ТТС - 7 сут.
ТТС - 15 сут.
ТТС - 30 сут.
ТТС - 45 сут.
Коэффиц.
ассоциации
4
Критерий
хи-квадрат
5
0,78 ± 0,03
0,59 ± 0,06
0,30 ± 0,11
0,26 ± 0,11
0,34 ± 0,10
0,10 ± 0,14
0,14 ± 0,13
0,18 ± 0,12
0,47 ± 0,08
26,49
15,49
3,94
3,86
5,03
0,44
2,29
3,28
13,80
Р
6
<0,05
<0,05
<0,05
<0,05
<0,05
>0,05
>0,05
>0,05
<0,05
Примечание: в числителе общее число животных, в знаменателе - число павших.
Таким образом, заявленный способ в 1,5 раза ускоряет развитие никотинозависимости
у животных по сравнению с известным способом.
Техническим результатом настоящего изобретения является возможность осуществления селективного скрининга фармакологических средств антиникотинового действия.
Промышленная применимость заявляемого способа заключается в возможности осуществления отбора новых антиникотиновых средств, предлагаемых для изготовления или
выпускаемых промышленным способом.
Источники информации:
1. А.с. СССР, SU 1277448 А.
2. Ходжагельдиев Т. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1984. Т. 98. - № 11. - С. 576-578 (прототип).
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
120 Кб
Теги
патент, by5481
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа