close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY5651

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
BY (11) 5651
(13) C1
(19)
7
(51) A 61K 31/409,
(12)
A 61P 35/02
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
СРЕДСТВО ДЛЯ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ - ФОТОЛОН
(21) Номер заявки: a 19990767
(22) 1999.08.04
(46) 2003.12.30
(71) Заявитель: Открытое акционерное
общество "Белмедпрепараты" (BY)
(72) Авторы: Петров Петр Тимофеевич;
Царенков Валерий Минович (BY); Мещерякова Аделия Леонидовна; Альбицкая Ольга Николаевна (RU); Тюрин Виталий Иванович; Саржевская Марина
Васильевна (BY); Каплан Михаил
Александрович (RU); Кочубеева Нина
Даниловна; Журавкин Иван Никифорович (BY)
(73) Патентообладатель: Открытое акционерное общество "Белмедпрепараты" (BY)
(57)
Средство для фотодинамической терапии злокачественных новообразований на основе порфиринов, содержащее в качестве фотосенсибилизатора хлорин е6, отличающееся
тем, что дополнительно содержит поливинилпирролидон при следующем соотношении
компонентов, мас. %:
хлорин е6
40-90
поливинилпирролидон
10-60.
BY 5651 C1
(56)
Жаврид Э.А. и др. Актуальные проблемы онкологии и медицинской радиологии. Минск, 1998. - С. 388-391.
RU 2071320 C1, 1997.
RU 2054476 C1, 1996.
RU 2093158 C1, 1997.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и может быть использовано
при получении фотосенсибилизаторов, используемых при лечении злокачественных опухолей.
Фотосенсибилизаторы являются необходимым компонентом при лечении рака методом фотодинамической терапии (ФДТ).
Метод ФДТ основан на использовании веществ-сенсибилизаторов, которые при введении в организм локализуются преимущественно в опухолевой ткани, а при воздействии
на него светом лазера с определенной длиной волны продуцируют цитотоксические вещества, прежде всего синглетный кислород, которые вызывают некроз опухоли.
В настоящее время известны сенсибилизаторы на основе гемина крови (гематопорфирины), фталоцианины и нафталоцианины, входящие в состав препаратов наружного и
внутреннего действия для лечения онкологических заболеваний методом ФДТ.
BY 5651 C1
Применение синтетических фталоцианиновых соединений осложнено их высокой фототоксичностью, а также необходимостью использования для их возбуждения лазеров с
высокой мощностью излучения.
Одним из наиболее изученных фотосенсибилизаторов в настоящее время является
препарат, представляющий собой сложную смесь, содержащую порфириновые элементы,
соединенные простыми и сложными эфирными связями (полигематопорфириновые простые/сложные эфиры, ПГП) [1].
Он используется в виде раствора, содержащего 2,5-5,0 мг/мл смеси ПГП в физиологическом растворе. Препарат является недостаточно стабильным и склонным к образованию
макрочастиц, т.к. при хранении его при комнатной температуре эфирные связи легко разрушаются. Это вызывает необходимость хранения и транспортировки его в замороженном
состоянии, размораживание производят непосредственно перед использованием.
Особенность ПГП заключается в том, что они имеют интенсивные полосы поглощения в ультрафиолетовой и видимой (синей, зеленой) областях спектра, и в то же время в
наиболее длинноволновой полосе поглощения (630 ± 10 нм), важной для ФДТ, коэффициент экстинкции относительно невысок. Вследствие этого, для эффективной фотодинамической терапии требуется введение в организм пациента высоких концентраций
препарата. Кроме того, при попадании пациента под прямое солнечное излучение накопленный в коже препарат проявляет значительную фототоксичность. Сильное поглощение
несенсибилизированных тканей организма в спектральном диапазоне 620-640 нм приводит к значительным потерям излучения вне опухолевых тканей, обуславливает малую глубину проникновения излучения в ткани, что затрудняет лечение опухолей больших размеров.
Все это приводит к снижению лечебной эффективности ФДТ с использованием ПГП.
Таким образом, к недостаткам фотосенсибилизаторов на основе ПГП относится неопределенность их химического состава вследствие нестандартности основного сырья, нестабильность при хранении, склонность к агрегации в водных растворах, недостаточно
высокая селективность накопления в опухолевых тканях, а также низкая скорость выведения из организма, в том числе из кожи, высокая фототоксичность.
Прототипом заявляемого изобретения являются производные хлорофилла А, например 18-карбокси-20-(карбоксиметил)-8-этенил-13-этил-2, 3-дигидро-3,7,12,17-тетраметил21H, 23Н порфин-2-пропионовая кислота - хлорин e6 и его соли [2]. Использование фотосенсибилизаторов данной группы позволяет получить следующие преимущества:
увеличить глубину проникновения возбуждающего излучения, поскольку максимум
поглощения хлоринов лежит вблизи окна прозрачности животной ткани (600-660 нм);
повысить способность накопления в опухоли по сравнению с нормальной тканью;
увеличить скорость эвакуации фотосенсибилизатора из организма, что резко снижает
фототоксичность: через 24 часа в организме остается не более 4-6 % от первоначально
введенного количества, в то время как производные гематопорфиринов могут оставаться в
организме до 30 суток, что создает значительные трудности при их использовании в виду
опасности светового стресса;
Снизить дозу вводимого фотосенсибилизатора, а, следовательно, и токсичность. Хлорин e6 относится к нетоксичным соединениям;
препараты на основе хлоринов обладают выраженной фотодинамической активностью:
коэффициент торможения роста ряда перевиваемых опухолей у крыс достигал 89,8 %.
Недостатком хлорина e6 и его солей является нестабильность при их хранении в растворе и
в лиофилизированном состоянии при комнатной температуре. В этих условиях наблюдается
процесс агрегации и снижения растворимости хлорина e6 в водных растворах, это сопровождается снижением квантового выхода, а следовательно, снижением цитотоксического действия.
Задачей изобретения является повышение качества препарата за счет сохранения стабильности
физико-химических свойств, в том числе растворимости, и повышения специфической актив-
2
BY 5651 C1
ности препарата. При этом достигается постоянство активности при длительном хранении в
лиофилизированном состоянии при комнатной температуре.
Суть изобретения заключается в создании фотосенсибилизатора для ФДТ на основе
фармацевтической композиции (ФК), имеющего более высокую лечебную эффективность
и стабильность при хранении.
Поставленная задача достигается тем, что в качестве фотосенсибилизатора используется ФК, включающая в себя производные хлорофилла А, например, хлорин e6 и/или его
соли в комплексе с поливинилпирролидоном (ПВП) при следующем соотношении компонентов (мас. %): хлорин e6 - 40-90, ПВП - 10-60.
Молекулы хлорина e6 включаются в гидрофобные ячейки (участки) молекул поливинилпирролидона в водном растворе. Получаемая ФК стабильна, при введении в организм
селективно накапливается в опухолевых тканях. При этом исключается процесс ассоциации молекул хлорина е6.
Примеры конкретного получения ФК.
Пример 1.
В 150 мл воды для инъекций растворяют 1 г поливинилпирролидона (ПВП), имеющего молекулярную массу (ММ) 6-12 кДа, затем добавляют 1 г хлорина е6 при перемешивании до полного растворения. Объем раствора доводят водой для инъекций до 200 мл.
Раствор подвергают предварительной, а затем стерилизующей фильтрации. Раствор разливают по 20 мл во флаконы вместимостью 50 или 100 мл и сушат.
Получают в каждом флаконе по 200 мг фотолона, включающего в себя хлорина e6 100 мг и ПВП - 100 мг при соотношении (мас. %): хлорин e6 - 50, ПВП - 50 .
Пример 2.
В 150 мл воды для инъекций растворяют 0,2 г ПВП, имеющего ММ 6-12 кДа, затем добавляют 1,8 г хлорина e6 при перемешивании до полного растворения. Объем раствора доводят
водой для инъекций до 200 мл. Раствор подвергают предварительной, а затем стерилизующей
фильтрации. Раствор разливают по 20 мл во флаконы вместимостью 50 или 100 мл и сушат.
Получают в каждом флаконе по 200 мг фотолона, включающего в себя хлорина e6 180 мг и ПВП - 20 мг при соотношении (мас. %): хлорин e6 - 90, ПВП - 10.
Пример 3.
В 150 мл воды для инъекций растворяют 1,2 г ПВП, имеющего ММ 6-12 кДа, затем добавляют 0,8 г хлорина e6 при перемешивании до полного растворения. Объем раствора доводят
водой для инъекций до 200 мл. Раствор подвергают предварительной, а затем стерилизующей
фильтрации. Раствор разливают по 20 мл во флаконы вместимостью 50 или 100 мл и сушат.
Получают в каждом флаконе по 200 мг фотолона, включающего в себя хлорина e6 - 80 мг
и ПВП - 120 мг при соотношении (мас. %): хлорин e6 - 40, ПВП - 60.
При содержании в ФК ПВП ниже 10 % не обеспечивается полное связывание хлорина
e6 и не достигается необходимая стабильность и активность фотосенсибилизатора. При
содержании в ФК ПВП выше 60 % часть ПВП остается в избытке и не включается в процесс комплексирования с хлорином e6, т.е. является балластным. Этим определяются граничные условия содержания компонентов в ФК.
Результаты испытаний растворимости препаратов хлорина e6 и ФК, именуемой далее
фотолон, полученные по примерам 1-3, приводятся в таблице.
Контроль за растворимостью осуществлялся с использованием оптического счетчика частиц. Продолжительность хранения препаратов при комнатной температуре перед анализом
составляла 6 и 12 месяцев. Было установлено, что фотолон, изготовленный по примерам 1-3,
сохраняет хорошую растворимость в воде в течение указанного периода времени. Образования микрочастиц в растворах не обнаружено и после 2-х лет хранения. При хранении хлорина
е6 без добавки ПВП через 6 месяцев были обнаружены частицы размером более 20 мкм, количество частиц в процессе хранения увеличивается, свойства препарата резко ухудшаются.
3
BY 5651 C1
Сравнительные исследования хлорина e6 и фотолона, изготовленного в соответствии с
процедурой, описанной в примерах 1-3, показали, что фотолон обладает более высокой
специфической активностью, чем хлорин e6, в отношении перевиваемых опухолей крыс
(саркома М-1 и альвеолярный рак печени РС-1): наблюдается полный некроз опухолей на
глубину до 16 мм при дозировке препарата 1 мг/кг и облучении лазерным источником
света (длина волны 666 нм, энергетическая экспозиция 50 Дж/см). Тогда как хлорин е6 в
такой же дозировке обеспечивает частичный некроз опухолей на глубину 7 мм. Токсичность ФК сохранялась на низком уровне: Ld50 превышала 140 мг/кг.
Количество частиц размером более 0,2 нм в 1 мл раствора
Количество частиц в 1 мл раствора
Хранение 6 мес.
Хранение 12 мес.
Хлорин е6
52
110
Фотолон (Хлорин е6 + ПВП) по примеру 1
0
0
Фотолон (Хлорин е6 + ПВП) по примеру 2
0
0
Фотолон (Хлорин е6 + ПВП) по примеру 3
0
0
Предлагаемое фармацевтическое средство фотолон позволяет сохранить стабильность
основных физико-химических характеристик, в частности, растворимости, а также повысить противоопухолевый эффект препарата.
Длина волны света (663 нм), поглощаемая фотолоном, находится в окне проницаемости биологической ткани.
На моделях опухолей саркомы М-1 и альвеолярного рака печени РС-1 на крысах показано, что избирательность накопления в опухолевых тканях фотолона в 3 раза выше, чем у
хлорина е6. Частота полного некроза опухолей при использовании в качестве фотосенсибилизатора фотолона в 2-4 выше, чем для хлорина е6.
Изучение динамики роста саркомы М-1 после фотодинамического воздействия с применением фотолона и хлорина е6 (доза 2,5 мг/кг) и последующего лазерного облучения с
энергетической экспозицией 50 Дж/см показало, что на 21 сутки объем перевитой опухоли
в первом случае составил 2,48 см3, а во втором - 11,37 см3, т.е. в этом плане фотолон эффективнее в 4,5 раза.
Показатель торможения роста опухоли (альвеолярный рак печени РС-1) для фотолона
(доза 2,5 мг/кг, энергетическая экспозиция 50 и 100 Дж/см) превышал 90 % и сохранялся
на этом уровне в течение 43 суток, в то время как в аналогичных условиях хлорин е6 обеспечивал показатель в начальной стадии около 60 %, а затем снижался до 10 %.
Таким образом, фотолон как фотосенсибилизатор в фотодинамической терапии рака
значительно превосходит хлорин е6.
Предлагаемая ФК фотолон обладает длительным сроком хранения при комнатной температуре в сухом виде без ухудшения фотосенсибилизирующих свойств и растворимости.
Наименование испытуемого препарата
Источники информации:
1. Ворожцов Г.Н., Дашкевич С.Н., Лощенов В.Б., Лукьянец Е.А. Сенсибилизатор для
фотодинамического разрушения клеток злокачественных новообразований. - Патент РФ
№ 2071320 // Бюл. № 1, 1997.
2. Жаврид Э.А. и др. Актуальные проблемы онкологии и медицинской радиологии.
Мн., 1998. - С. 388-391.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
4
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
163 Кб
Теги
by5651, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа