close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY6293

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
BY (11) 6293
(13) C1
(19)
7
(51) C 12N 1/38
(12)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТИМУЛЯТОРА РОСТА БАКТЕРИЙ
(21) Номер заявки: a 19990341
(22) 1999.04.07
(46) 2004.06.30
(71) Заявители: Учреждение образования
"Витебская ордена "Знак Почета"
государственная академия ветеринарной медицины"; Частное производственное унитарное предприятие
"Витебская биофабрика" (BY)
(72) Авторы: Зайцев Владимир Владимирович; Максимович Владимир Васильевич; Дремач Геннадий Эдуардович;
Кулешова Ирина Петровна; Билецкий
Олег Романович; Ханецкий Юрий Викторович (BY)
(73) Патентообладатели: Учреждение образования "Витебская ордена "Знак Почета"
государственная академия ветеринарной
медицины"; Частное производственное
унитарное предприятие "Витебская
биофабрика" (BY)
BY 6293 C1
(57)
Способ получения стимулятора роста бактерий, включающий приготовление сыворотки крови животных и ее фильтрацию, отличающийся тем, что полученную сыворотку
крови разводят дистиллированной водой в объемном соотношении 1:1, затем обрабатывают аммиаком или гидроокисью натрия и перекисью водорода при температуре 100120 °C в течение 30-60 минут, при этом компоненты берут в следующем соотношении,
мас. %:
аммиак или гидроокись натрия
0,2-0,5
перекись водорода
0,1-0,2
смесь сыворотки и воды
остальное.
(56)
Справочник ветеринарного лаборанта. / Под ред. В.Я. Антонова. - М.: Колос, 1981. - С. 45.
Проблемы патологии, санитарии и бесплодия в животноводстве: Материалы международной научно-практической конференции. - Мн.: 1998. - С. 90-91.
SU 413192, 1974.
SU 699796 A, 1985.
UA 7335, 1995.
RU 2062787 C1, 1996.
US 5629468 A, 1997.
EP 223161 A3, 1988.
EP 173340 A3, 1986.
Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано для стимуляции
роста микроорганизмов.
BY 6293 C1
Для стимуляции роста микроорганизмов широко используют нативную сыворотку
крови различных животных [1, 2]. Однако биопрепараты, изготовленные с использованием нативной сыворотки, обладают высокой реактогенностью. Отдельные партии сывороток содержат ингибиторы и контаминированы различными вирусами.
Нативная сыворотка имеет также существенный недостаток в связи с содержанием у
значительной части животных, из крови которых она получена, специфических антител,
которые изменяют антигенную структуру, снижают иммуногенные свойства бактериальных культур, выращенных на питательных средах с ее добавлением.
Задача изобретения - повышение биологической активности и выхода целевого продукта.
Поставленная цель достигается тем, что сыворотку крови животных обрабатывают
аммиаком или натрия гидроокисью и перекисью водорода при температуре 100-120 °С.
Сущность предлагаемого изобретения заключается в том, что сыворотку крови животных, разведенную дистиллированной водой в соотношении 1:1 экстрагируют аммиаком или натрия гидроокисью и перекисью водорода при температуре 100-120 °С в течение
30-60 минут при следующем соотношении компонентов, вес. %:
аммиак или натрия гидроокись
0,2-0,5
перекись водорода
0,1-0,2
смесь сыворотки и воды
остальное.
При изготовлении стимулятора роста микроорганизмов используют кровь различных
видов животных.
Полученные гидролизаты расщелачивают добавлением уксусной или соляной кислоты
до рН = 6,8-7,4.
Сальмонеллы выращивают на бульоне Хоттингера, содержащем 10 % стимулятора,
полученного разными способами.
Пример 1.
Сыворотку крови животных разводили дистиллированной водой в соотношении 1:1.
Приготовленную смесь экстрагировали натрия гидроокисью и перекисью водорода при
температуре 100 °C в течение 60 мин при соотношении компонентов, вес. %:
натрия гидроокись
0,2
перекись водорода
0,1
смесь сыворотки и воды
остальное.
Выход целевого продукта составил 86 %. Плотность баксуспензии сальмонелл на среде с добавлением 10 % стимулятора составила 2,43 ± 0,12 млрд/см3.
Пример 2.
Способ осуществляли аналогично примеру 1, но при соотношении компонентов,
вес. %:
натрия гидроокись
0,4
перекись водорода
0,1
смесь сыворотки и воды
остальное.
Накопление сальмонелл в присутствии стимулятора составило 2,36 ± 0,10 млрд/см3.
Выход стимулятора - 85 %.
Пример 3.
Способ осуществляли аналогично примеру 1, но компоненты смешивали при следующем соотношении, вес. %:
натрия гидроокись
0,5
перекись водорода
0,1
смесь сыворотки и воды
остальное.
Выход стимулятора - 84 %. Накопление сальмонелл в присутствии стимулятора 2,24 ± 0,9 млрд/см3.
2
BY 6293 C1
Пример 4.
Способ осуществляли аналогично примеру 1, но компоненты смешивали при следующем соотношении, вес. %:
натрия гидроокись
0,1
перекись водорода
0,1
смесь сыворотки и воды
остальное.
Выход целевого продукта - 52 %. Накопление сальмонелл - 1,36 ± 0,08 млрд/см3.
Пример 5.
Способ осуществляли аналогично примеру 1, но компоненты смешивали при следующем соотношении, вес. %:
натрия гидроокись
0,2
перекись водорода
0,2
смесь сыворотки и воды
остальное.
Выход целевого продукта - 84,4 %. Накопление сальмонелл -2,41 ± 0,14 млрд/см3.
Пример 6.
Способ осуществляли аналогично примеру 1, но компоненты смешивали при следующем соотношении, вес. %:
натрия гидроокись
0,2
перекись водорода
0,3
смесь сыворотки и воды
остальное.
Выход целевого продукта - 28,0 %. Накопление сальмонелл - 1,42 ± 0,15 млрд/см3.
Пример 7.
Способ осуществляли аналогично примеру 1, но компоненты смешивали при следующем соотношении, вес. %:
натрия гидроокись
0,6
перекись водорода
0,05
смесь сыворотки и воды
остальное.
Выход целевого продукта - 31,4%. Накопление сальмонелл составило 1,18 ± 0,10 млрд/см3.
Пример 8.
Способ осуществляли аналогично примеру 1, но сыворотку не разводили водой.
Выход целевого продукта составил 8 %. Накопление сальмонелл - 1,58 ± 0,12 млрд/см3.
Пример 9.
Способ осуществляли аналогично примеру 1, но сыворотку разводили дистиллированной водой в соотношении 1:2.
Выход целевого продукта - 88,6 %. Накопление сальмонелл на среде со стимулятором
составило 1,62 ± 0,14 млрд/см3.
Пример 10.
Способ осуществляли аналогично примеру 1, но инкубацию смеси сыворотки и воды
осуществляли при температуре 120 °C в течение 60 мин.
Накопление сальмонелл составило 2,46 ± 0,14 млрд/см3. Выход целевого продукта - 87,4 %.
Пример 11.
Способ осуществляли аналогично примеру 1, но инкубацию смеси сыворотки и воды
осуществляли при температуре 120 °С в течение 30 мин.
Накопление сальмонелл на питательной среде в присутствии стимулятора составило
2,18 ± 0,12 млрд/см3. Выход целевого продукта - 85,4 %.
3
BY 6293 C1
Пример 12.
Способ осуществляли аналогично примеру 1, но смесь сыворотки и воды инкубировали при температуре 100 °C в течение 30 мин.
Накопление сальмонелл на питательной среде в присутствии стимулятора составило
2,32 ± 0,10 млрд/см3. Выход целевого продукта - 85,1 %.
Пример 13.
Сыворотку крови животных разводили дистиллированной водой 1:1. Приготовленную
смесь экстрагировали аммиаком и перекисью водорода при температуре 120 °С в течение
60 мин при соотношении компонентов, вес. %:
аммиак
0,5
перекись водорода
0,2
смесь сыворотки и воды
остальное.
Выход целевого продукта составил - 88,1 %. Плотность баксуспензии сальмонелл на
питательной среде в присутствии стимулятора составила 2,43 ± 0,12 млрд/см3.
Пример 14.
Способ осуществляли аналогично примеру 13, но при соотношении компонентов, вес. %:
аммиак
0,5
перекись водорода
0,1
смесь сыворотки и воды
остальное.
Накопление сальмонелл составило 2,48 ± 0,18 млрд/см3. Выход целевого продукта составил 88,5 %.
Пример 15.
Способ осуществляли аналогично примеру 13, но при соотношении компонентов, вес. %:
аммиак
0,5
перекись водорода
0,05
смесь сыворотки и воды
остальное.
Накопление сальмонелл составило 1,50 ± 0,12 млрд/см3. Выход целевого продукта составил 43,4 %.
Пример 16.
Способ осуществляли аналогично примеру 13, но при соотношении компонентов, вес. %:
аммиак
0,5
перекись водорода
0,25
смесь сыворотки и воды
остальное.
Выход целевого продукта составил 39,1 %. Накопление сальмонелл составило
1,68 ± 0,14 млрд/см3.
Пример 17.
Способ осуществляли аналогично примеру 13, но при соотношении компонентов, вес. %:
аммиак
0,6
перекись водорода
0,2
смесь сыворотки и воды
остальное.
Выход целевого продукта составил 82 %. Стимулятор обеспечивал накопление сальмонелл 1,68 ± 0,11 млрд/см3.
Пример 18.
Способ осуществляли аналогично примеру 13, но при соотношении компонентов, вес. %:
аммиак
0,2
перекись водорода
0,2
смесь сыворотки и воды
остальное.
4
BY 6293 C1
Выход целевого продукта составил 76,7 %. Стимулятор обеспечивал накопление
сальмонелл 2,04 ± 0,14 млрд/см3.
Пример 19.
Способ осуществляли аналогично примеру 13, но при соотношении компонентов, вес. %:
аммиак
1,0
перекись водорода
0,2
смесь сыворотки и воды
остальное.
Выход целевого продукта - 56,2 %. Стимулятор обеспечивал накопление сальмонелл
1,42 ± 0,11 млрд/см3.
Пример 20.
Способ осуществляли аналогично примеру 13, но при соотношении компонентов, вес. %:
аммиак
0,25
перекись водорода
0,2
смесь сыворотки и воды
остальное.
Выход целевого продукта составил 75,3 %. Стимулятор обеспечивал накопление
сальмонелл 2,62 ± 0,12 млрд/см3.
Пример 21.
Способ осуществляли аналогично примеру 13, но приготовленную смесь инкубировали при температуре 120 °C в течение 80 мин.
Накопление сальмонелл составило 1,54 ± 0,09 млрд/см3. Выход целевого продукта составил 50,8 %.
Пример 22.
Способ осуществляли аналогично примеру 13, но приготовленную смесь инкубировали при температуре 120 °С в течение 20 мин.
Выход целевого продукта составил 60,2 %, а накопление сальмонелл - 1,62 ± 0,11 млрд/см3.
Пример 23.
Способ осуществляли аналогично примеру 13, но приготовленную смесь инкубировали при температуре 120 °С в течение 30 мин.
Накопление сальмонелл в присутствии стимулятора составило 2,54 ± 0,18 млрд/см3.
Выход целевого продукта - 87,8 %.
Пример 24.
Способ осуществляли аналогично примеру 13, но приготовленную смесь инкубировали при температуре 130 °C в течение 60 мин.
Накопление сальмонелл составило 1,68 ± 0,14 млрд/см3. Выход целевого продукта составил 54,1 %.
Пример 25.
Способ осуществляли аналогично примеру 13, но приготовленную смесь инкубировали при температуре 100 °C в течение 60 мин.
Накопление сальмонелл составило 2,52 ± 0,12 млрд/см3. Выход целевого продукта составил 43,9 %.
В результате проведенных исследований установлено, что смесь сыворотки и воды
целесообразно инкубировать при температуре 100-120 °С в течение 30-60 мин и соотношении компонентов, вес %:
аммиак или натрия гидроокись
0,2-0,5
перекись водорода
0,1-0,2
смесь сыворотки и воды
остальное.
5
BY 6293 C1
При таких режимах получается стимулятор с высокой биологической активностью
(накопление сальмонелл - 2,24-2,54 млрд/см3, а выход целевого продукта составляет 84,087,8 %).
Обработка сыворотки при других изученных режимах снижает биологическую активность или выход целевого продукта.
Для культивирования аэробных бактерий в среду добавляют 5-10 % стимулятора и
анаэробных бактерий - 10-20 %.
Результаты исследований по оценке влияния стимулятора из нативной сыворотки и
предлагаемого стимулятора на интенсивность роста различных бактерий представлены в
таблице.
Влияние стимулятора на интенсивность роста бактерий
№
п/п
1
2
3
4
5
Вид микроорганизма
Наименование и
концентрация сальмонеллы эшерихии бактериоидес рожистые
коли
назодис
бактерии
стимулятора
Плотность баксуспензии (млрд/см3)
Бульон Хоттин0,80±0,08
1,60±0,11
0,20±0,04
0,30±0,05
гера
Бульон Хоттингера с 10 %-ной
1,30±0,12
2,20±0,13
0,8±0,09
1,10±0,12
нативной сывороткой
Бульон Хоттингера с 5 %-ным
1,68±0,14
2,74±0,18
1,1±0,10
1,60±0,15
предлагаемым
стимулятором
Бульон Хоттингера с 10 %-ным
2,40±0,14
3,40±0,18
1,4±0,10
2,20±0,14
предлагаемым
стимулятором
Бульон Хоттингера с 20 %-ным
2,20±0,15
3,44±0,15
1,5±0,12
2,22±0,11
предлагаемым
стимулятором
пастереллы
0,52±0,02
0,96±0,10
1,68±0,15
2,39±0,12
2,42±0,08
Из таблицы видно, что предлагаемый стимулятор обеспечивает более высокую продуктивность бактерий, чем нативная сыворотка. Выход нативной сыворотки из 1 дм3 сырья составляет 0,8 дм3, предлагаемого стимулятора - 1,6 дм3.
Источники информации:
1. Ветеринарные препараты: Справочник / Под ред. Д.Ф. Осидзе. - М.: Колос, 1981. С. 448.
2. Справочник ветеринарного лаборанта / Под ред. В.Я. Антонова. - М.: Колос, 1981. С. 248.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
131 Кб
Теги
by6293, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа