close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY6420

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
BY (11) 6420
(13) C1
(19)
7
(51) A 61K 33/24, 47/38
(12)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
ПОЛИМЕР-ЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА
ЦИС-ДИАММИНДИХЛОРПЛАТИНЫ (II), ОБЛАДАЮЩАЯ
ПРОТИВООПУХОЛЕВЫМ ДЕЙСТВИЕМ
(21) Номер заявки: a 19991018
(22) 1999.11.17
(46) 2004.09.30
(71) Заявители: Учреждение Белорусского государственного университета
"Научно-исследовательский институт физико-химических проблем";
Государственное учреждение "Научно-исследовательский институт
онкологии и медицинской радиологии им. Н.Н. Александрова" (BY)
(72) Авторы: Бычковский Павел Михайлович; Юркштович Татьяна Лукинична;
Капуцкий Федор Николаевич; Жаврид
Эдвард Антонович; Шелег Сергей Владимирович; Беляев Сергей Александрович (BY)
(73) Патентообладатели: Учреждение Белорусского государственного университета "Научно-исследовательский институт физико-химических проблем"; Государственное учреждение "Научно-исследовательский институт онкологии и
медицинской радиологии им. Н.Н. Александрова" (BY)
BY 6420 C1
(57)
Полимер-лекарственная форма цис-диамминдихлорплатины (II) в виде салфетки или
бинта, обладающая противоопухолевым действием, содержащая в качестве полимера 6карбоксицеллюлозу со степенью полимеризации n ≥ 50 и степенью замещения по карбоксильным группам х = 0,45 ÷ 1,0 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
цис-диамминдихлорплатина (II)
3-5
6-карбоксицеллюлоза
95-97.
(56)
US 4612009, 1986.
WO 98/47496 A2.
RU 2033998 C1, 1995.
RU 1474919 C, 1994.
US 5633016 A, 1997.
US 4278660, 1981.
Изобретение относится к области биологически активных соединений, касается противоопухолевого средства на основе цис-диамминдихлорплатины (II) и может быть использовано в медицине в качестве препарата, обладающего локальным противоопухолевым действием и рассасывающегося в организме при имплантации, в частности в
нейрохирургии для предотвращения возникновения рецидивов злокачественных образований головного мозга при хирургическом удалении [1-3].
BY 6420 C1
Известен препарат "Цисплатин" (платамин, цис-диамминдихлорплатина (II)), представляющий собой соединение из группы цитостатиков: цис-диамминдихлорплатину (II),
эффективное, как показали Rosenberg et al. в 1969 г., в отношении солидной саркомы-180
и опухоли L 1210 при лейкемии у мышей и имеющий формулу цис-[РtСl2(NН3)2]. Исследования in vitro свидетельствуют о том, что ДНК является основной мишенью цисплатина
[4]. Широкий спектр активности препарата был продемонстрирован на разных экспериментальных опухолях: меланома В 16, карциносаркома Walker 256, карциносаркома легких Lewis и др. Цисплатин нашел широкое применение в химиотерапии рака яичников,
мочевого пузыря и различных злокачественных новообразований головы и шеи.
Однако препарат обладает высокой ото- и нефротоксичностью (изменения со стороны
слуха и почек, что лимитирует его широкое применение). Клиническое применение цисплатина для локальной химиотерапии злокачественных опухолей головного мозга также
выявило существенный недостаток, а именно высокую нейротоксичность [5].
Задачей изобретения является создание биорассасывающейся полимер-лекарственной
формы цис-диамминдихлорплатины (II) для локальной (местной) химиотерапии злокачественных новообразований головного мозга, обладающей уменьшенным нейротоксическим действием и увеличенным цитостатическим эффектом.
Поставленная задача решается тем, что, согласно изобретению, в качестве противоопухолевого средства предложена полимер-лекарственная форма на основе цис-диамминдихлорплатины (II), содержащая в качестве полимера 6-карбоксицеллюлозу со степенью
полимеризации n ≥ 50 и степенью замещения x = 0,45 ÷ 1,0 при следующем соотношении
компонентов (мас. %):
цис-диамминдихлорплатина (II)
3-5
6-карбоксицеллюлоза
95-97.
Получение смеси цис-диамминдихлорплатины (II) и 6-карбоксицеллюлозы осуществляли путем окисления целлюлозы двуокисью азота и последующим проведением процесса
взаимодействия окисленной целлюлозы с цис-диамминдихлорплатиной (II).
В качестве исходных материалов для получения заявленного средства использовали
хлопковую целлюлозу в виде трикотажного полотна, марли, бязи и др.
Смесь цис-диамминдихлорплатины (II) с 6-карбоксицеллюлозой получали следующим
образом:
100 г целлюлозы помещали в автоклав, который герметизировали и вакуумировали до
остаточного давления 0,3-0,5 атм, после чего в автоклав подавали 250 мл жидкой двуокиси азота и нагревали до температуры 36-45 °С. После достижения в автоклаве температуры 36-45 °С проводили процесс окисления в течение 0,5-1,5 часа. По окончании окисления
полученную окисленную целлюлозу отмывали дистиллированной водой до исчезновения
в промывных водах реакции на NO2-, NO3--ионы и определяли в ней содержание карбоксильных групп кальций-ацетатным методом. Степень замещения окисленной целлюлозы
по карбоксильным группам (X) рассчитывали по формуле:
162 × C COOH
,
X=
4500 − 14 × C COOH
где СCOOH - содержание карбоксильных групп в 6-карбоксицеллюлозе, %.
В 1000 мл 0,2 % раствора цис-диамминдихлорплатины (II) вносили 100 см2 (≈1,6 г)
окисленной целлюлозы (ОЕ = 3,5 мгэкв/г). Процесс взаимодействия проводили в течение
20 часов при комнатной температуре и периодическом перемешивании. Полученные образцы извлекали из раствора и сушили на воздухе.
Количество цис-диамминдихлорплатины (II) в полученном препарате определяли
атомно-абсорбционным методом по платине.
Содержание цис-диамминдихлорплатины (II) расчитывалась по формуле.
5,13 ⋅ 10 −6 ⋅ a ⋅ V
y=
,
m
2
BY 6420 C1
где y - концентрация цис-диамминдихлорплатины (II) в препарате, ммоль⋅г-1;
а - концентрация цис-диамминдихлорплатины (II) в фотометрируемом растворе, ppm;
V - объем царской водки, в котором растворяли навеску цис-диамминдихлорплатины6-карбоксицеллюлоза, мл;
m - масса навески цис-диамминдихлорплатина-6-карбоксицеллюлоза, г.
Полученные препараты проанализированы также методом ИК-спектроскопии с применением спектрометра Spekord-75IR. В спектрах не проявляются интенсивные полосы
поглощения 1430 и 1610 см-1 симметричных и асимметричных валентных колебаний карбоксилат-ионов, что свидетельствует об отсутствии солеобразования. Измерение рН осуществлялось на ионометре. Изменение рН обусловлено кислотными свойствами МКЦ.
Условия и состав полученных смесей приведены в таблице. Медико-биологические испытания проводились для всех указанных смесей.
Условия получения и состав заявляемой смеси
Условия получения
Состав получаемого соединения
Конц. pH расВремя
№,
Время
Температура
циствора
взаимо- СКЦ, Сцис-ДДП,
пп
окисX
n (≈)
окисления
ДДП,
цисдействия,
%
%
ления
%
ДДП
ч
1
36
0,5
0,14
4,7
24
97,0
3,0
0,45
300
2
45
1,0
0,16
4,5
24
96,7
3,3
0,57
70
3
45
1,0
0,17
4,5
24
96,3
3,7
0,57
75
4
45
1,5
0,19
4,2
24
95,8
4,2
0,67
150
5
42
1,2
0,20
4,1
24
95,4
4,6
1,00
50
6
42
1,2
0,21
4,1
24
95,4
4,6
0,67
150
7
45
1,5
0,22
3,9
24
95,2
4,8
0,67
150
8
42
1,2
0,22
3,7
24
95,0
5,0
1,00
50
Цис-ДДП - цис-диамминдихлорплатина (II);
КЦ - 6-карбоксицеллюлоза.
Цитостатическое действие исходной цис-диамминдихлорплатины (II) и смеси цисдиамминдихлорплатина-6-карбоксицеллюлоза изучали на монослойной культуре опухолевых клеток HeLa, выращиваемой в питательной среде 199 с добавлением 10 %-ой сыворотки эмбрионов коровы и 10 мкг/мл канамицина. Для эксперимента культуру рассеивали
в пенициллиновые флаконы по 100 тыс. клеток в 2 мл среды.
Пластинки 6-карбоксицеллюлозы с цис-диамминдихлорплатиной добавляли непосредственно в питательную среду клеток в конечной концентрации препарата 1,5 и 10 мкг-мл-1
среды. В контрольные флаконы добавляли раствор цис-диамминдихлорплатины (II). После 24-часовой инкубации клеточных культур с препаратом оценивали процент жизнеспособных клеток. Полученные данные свидетельствовали о том, что полимер-лекарственная
форма цис-диамминдихлорплатины (II) (ПЛФ-Ц) так же, как и чистая цис-диамминдихлорплатина (II), обладает цитостатическим эффектом (процент живых клеток при конечной концентрации препаратов 5 мг-мл-1 был соответственно 49,4 % для чистой инкубации и 39,6 % для ПЛФ-Ц). Аналогичные данные были получены in vitro на первичной
клеточной культуре мультиформной глиобластомы человека и in vivo на интактной нервной ткани головного мозга крысы. Таким образом, полученные данные свидетельствуют
об увеличении цитостатического эффекта на различных моделях опухолей.
Исследование нейротоксического эффекта ПЛФ-Ц было выполнено на белых крысах в
НИИ онкологии и медицинской радиологии им. Н.Н. Александрова.
3
BY 6420 C1
ПЛФ-Ц (пластинки 0,25 мм2 с количеством цис-диамминдихлорплатины (II) 0,3 мг)
имплантировали в условиях хирургической операции в головной мозг крыс. В контрольной группе крыс имплантировали чистую субстанцию 6-карбоксицеллюлозы.
Для морфологического исследования забирали головной мозг крыс спустя 7-ой, 14-ый
и 21-ый день с момента имплантации полимеров.
Гистологические препараты окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином
по Ван Гизону и тионином по Нисслю.
При просмотре гистологических препаратов было установлено, что при имплантации
в головной мозг крыс ПЛФ-Ц не выявлялось выраженных нейротоксических изменений
интактной нервной ткани.
Таким образом, ПЛФ-Ц не обладает выраженным нейротоксическим эффектом на интактную ткань головного мозга, имеет повышенное цитостатическое действие, что очень
важно в условиях выполнения нейрохирургических операций на головном мозге человека
по поводу злокачественных глиом.
На основании полученных данных создана ПЛФ-Ц, удовлетворяющая требованиям
применения в клинической практике.
Источники информации:
1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - Вильнюс: 1994. Т. 2. - С. 398.
2. Bouvier G., Penn R.D., Kroin J.S. et al. Stereotactic administration of intratumoral
chronic chemotherapy of recurrent malignant gliomas//Appl. Neurophysiol, 1987. Vol. 50. P. 223-226.
3. Бертрам Г. Катцунг Базисная и клиническая фармакология. - М.: 1998. Т. 2. - С. 429.
4. Преображенская М.Н. Поиск молекулярных мишеней химиотерапии рака // Журнал
Всесоюзного хим. об-ва им. Менделеева, 1986. Т. 31. - № 3. - С. 332.
5. Актуальные проблемы онкологии и медицинской радиологии // Сб. науч. работ. Мн.: 1997. - С. 275-278.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
183 Кб
Теги
by6420, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа