close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY7386

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
BY (11) 7386
(13) C1
(19)
(46) 2005.09.30
(12)
7
(51) A 61K 39/35,
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
A 61P 37/08, 11/06
АЛЛЕРГОВАКЦИНА ПЕРОРАЛЬНАЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ
АТОПИЧЕСКОЙ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ
(21) Номер заявки: a 20000746
(22) 2000.08.08
(43) 2002.03.30
(71) Заявитель: Белорусская ассоциация
аллергологов и клинических иммунологов (БААКИ) (BY)
(72) Авторы: Новиков Дмитрий Кузьмич;
Выхристенко Людмила Ростиславна;
Янченко Владимир Вилиянинович
(BY)
(73) Патентообладатель: Белорусская ассоциация аллергологов и клинических иммунологов (БААКИ) (BY)
(56) Медуницын Н.В. Вакцинология. - М.:
Триада-Х, 1999. - С. 203.
Балаболкин И.И. и др. Педиатрия,
1999. - № 6. - С. 65-68.
Новиков Д.К. и др. Бронхиальная астма
у взрослых и детей. Москва-Витебск,
1998. - С. 17, 32-33, 138-140.
Litwin A. et al. Allergy and clinical immunology, 1997. - V. 100. - № 1. - P. 30-38.
WO 99/40936 A2.
RU 2055889 C1, 1996.
BY 7386 C1 2005.09.30
(57)
Аллерговакцина пероральная для лечения больных атопической бронхиальной астмой,
включающая водно-солевой экстракт причинно-значимого аллергена, отличающаяся
тем, что аллерген адсорбирован на оральном сорбенте с образованием иммуногенного
комплекса.
Изобретение относится к медицине, в частности к аллергологии и клинической иммунологии, и может быть использовано для лечения больных атопической бронхиальной астмой.
Аналогами предлагаемой пероральной аллерговакцины являются вакцины, использующиеся для лечения аллергических, IgE-зависимых заболеваний. Аллергенные вакцины
представляют собой очищенные водно-солевые экстракты аллергенов или выделенные из них
отдельные аллергенные компоненты. Метод лечения аллергенными вакцинами - специфическая аллерговакцинация (CAB) основан на введении в организм больного возрастающих
доз аллергена, к которому установлена повышенная чувствительность, что приводит к
уменьшению или полному исчезновению клинических симптомов заболевания. CAB способна остановить формирование более тяжелых форм заболевания, сохранить эффект ремиссии в течение длительного времени после прекращения лечения, а также предотвратить
расширение спектра аллергенов, к которым может развиться сенсибилизация [2, 5, 14].
В зависимости от способа введения аллергена различают инъекционные, мукозальные
и комбинированные методы CAB. Наиболее популярен классический способ подкожного
введения водно-солевого экстракта аллергена постепенно возрастающими дозами. Негативным обстоятельством при использовании этого метода является получение больным на
протяжении ряда месяцев нескольких десятков инъекций, что ограничивает свободу перемещения пациента в период лечения. В то же время не исключается возможность возникновения побочных системных реакций и нестойкого, кратковременного эффекта лечения.
BY 7386 C1 2005.09.30
Преимуществом мукозальной (энтеральной, интраназальной, ингаляционной) аллерговакцинации является высокая эффективность, малое количество побочных реакций,
безболезненность лечения. Однако, например, ингаляционный способ технически не всегда может быть выполнен, так как требует наличия специальной аппаратуры для введения
аллергена и хорошо обученного медперсонала.
По мнению многих исследователей, энтеральный способ вакцинации является самым
перспективным. Механизм действия пероральной аллерговакцины в основном идентичен
действию аллерговакцин, вводящихся в организм другим способом. Преимущества пероральной аллерговакцинации заключаются в легкой всасываемости и быстром проникновении
аллергена в шоковый орган, максимальной стимуляции местного иммунитета шокового
органа и, в то же время, воздействии на других территориях слизистой и в лимфоидной
ткани, не связанной непосредственно со слизистой [6, 7, 9, 11]. Пероральное введение аллергена вызывает наиболее выраженное образование секреторных иммуноглобулинов IgA и IgM [13]. Пероральная аллерговакцинация в значительной степени стимулирует выброс
интерлейкина-12 и включает активность Т-хелперов первого типа, что вызывает эффект
десенсибилизации. Введение антигена per os в большей степени, чем парентеральное, способствует формированию иммунологической толерантности к аллергенам и гаптенам различного вида.
Эффективность лечения может быть весьма вариабельной и зависит от многих факторов, наиболее важным из которых является качество используемой аллерговакцины [2, 4].
В настоящее время для CAB применяются следующие энтеральные аллерговакцины: водносолевые экстракты бытовых и пыльцевых аллергенов, глицериновые аллергены, аллергоиды, иммунотерапевтические комплексы и желатиновые капсулы, содержащие аллергены [1, 3, 6, 8, 10, 12].
Наиболее близким по составу и способу введения в организм, выбранным в качестве
прототипа, является водно-солевой экстракт аллергена домашней пыли, применяемый перорально. Недостатками прототипа, ограничивающими его применение, являются следующие: быстрое разрушение водно-солевого экстракта аллергена под действием
химических факторов защиты желудочно-кишечного тракта, что нарушает доставку аллергена к иммунокомпетентным клеткам, исключает его точную дозировку и объясняет
непродолжительный эффект лечения. Таким образом, для достижения иммунологической
толерантности необходимы высокие дозы вакцины, а это увеличивает риск развития побочных реакций и повышает экономические затраты на лечение.
До контакта с системой иммунитета желудочно-кишечного тракта пероральная аллерговакцина должна преодолеть действие кислой среды желудочного сока и ферментов, механические барьеры слизистой оболочки. Поскольку наибольшее всасывание и воздействие
аллергена на лимфоидный аппарат кишечника отмечается в тощей и подвздошной кишках,
большое значение приобретает доставка в эту зону нерасщепленного аллергена [4, 10, 12].
Поэтому необходимым становится использование носителя для ускорения транспорта аллергена к иммунокомпетентным клеткам, создания "депо" аллергена и замедления его
всасывания. Кроме того, аллерговакцины в комплексе с носителем частично утрачивают
аллергенную активность, но обладают большей иммуногенностью, усиливают иммунный
ответ и увеличивают его длительность.
Учитывая наличие ряда недостатков у прототипа, а также отсутствие на аптечном
рынке коммерческих аллергенов для перорального применения, целью изобретения является создание новой формы аллерговакцины, обеспечивающей более высокую эффективность и безопасность пероральной CAB.
Аллерговакцина пероральная состоит из водно-солевого экстракта аллергена, соединенного с инертным носителем, в частности с оральным сорбентом.
Для приготовления пероральной аллерговакцины водно-солевой экстракт аллергена
серийного производства соединяют с носителем и инкубируют 30 мин - 2 ч. При использовании твердых сорбентов после реакции соединения аллерговакцину высушивают в те2
BY 7386 C1 2005.09.30
чение 3-10 суток при температуре от 30-37 °C. Фасовка сухой аллерговакцины производится в капсулы или порошки. Для лечения используется также готовая к применению
суспензия аллерговакцины, расфасованная во флаконы.
В процессе изготовления аллерговакцины определяют количество аллергена, сорбированного на твердом носителе. Для этого измеряют поглощение (χ1) раствора аллергена на
спектрофотометре "СФ-46" при длине волны 280 нм. Затем готовят суспензию аллерговакцины, центрифугируют ее при 3000 оборотов в 1 мин в течение 30 мин и замеряют поглощение надосадочной жидкости от аллеровакцины (χ2). По разности χ1 и χ2
высчитывают количество аллергена в PNU, сорбированного на носителе (т.е. входящего в
состав аллерговакцины). Установлено, что 100 мг аллерговакцины пероральной содержит
200 PNU аллергена. В соответствии с проведенными расчетами производят дозирование
аллерговакцины в PNU и фасовку в желатиновые капсулы или прессование в таблетки.
Для определения степени сорбции аллергена на оральном сорбенте используют реактив
Бредфорда (реакция на пептиды). К 0,1 мл исследуемой пробы прибавляют 0,3 мл реактива
Бредфорда, экспозиция составляет 5 мин, затем к этому раствору добавляют 1 мл физ. Раствора, центрифугируют в течение 30 мин при 3000 об/мин и определяют поглощение надосадочной жидкости при длине волны 595 нм. За ноль принимают поглощение физ. раствора
при 595 нм. Установлено, что 1 мл орального сорбента поглощает 4113 PNU аллергена.
Для изучения подлинности аллерговакцины проводится исследование адгезии сенсибилизированных лимфоцитов на комплексе аллерген-сорбент. При световой микроскопии
производится подсчет количества лимфоцитов, сорбированных на комплексе аллергенволокнистый оральный сорбент. Коэффициент адгезии высчитывают по формуле: Ka = AB/A×100, где А - количество лимфоцитов больного бронхиальной астмой, соединившихся
с комплексом аллерген-сорбент (опыт); В - количество лимфоцитов здорового человека,
соединившихся с комплексом (контроль). Результаты исследования свидетельствуют, что
адгезия лимфоцитов в опыте превышает на 20 % и более контроль, что указывает на присутствие специфического аллергена на сорбенте. Подлинность аллерговакцины, конъюгированной с сорбентом, изучалась также путем определения количества общего белка в препарате
биуретовым методом (содержание общего белка в препарате составляет 0,003 мг/мл).
Десорбцию аллергена из аллерговакцины на твердой основе рассчитывают, определяя
поглощение надосадочной жидкости через 30, 60 мин и 24 ч после экспозиции аллерговакцины и физиологического раствора. Результаты показали, что в пероральной аллерговакцине даже за 24 ч не происходит десорбция аллергена в надосадочную жидкость.
Десорбцию аллергена из аллерговакцины на гелевой основе определяют биуретовым
методом, производя расчет содержания общего белка, оставшегося в аллерговакцине через
30, 60 мин и 24 ч после экспозиции препарата и физиологического раствора. При этом за 24 ч
выявлена минимальная десорбция аллергена из аллерговакцины, которая составляет 6 %.
Следовательно, заявляемый способ лечения больных атопической бронхиальной астмой
пероральной аллерговакциной отличается от прототипа тем, что аллерген, соединенный с
оральным сорбентом, длительно взаимодействует с лимфоидными образованиями слизистой
оболочки кишечника, создает "депо" аллергена и замедляет его всасывание, что способствует развитию выраженного местного и общего иммунного ответа. Применение сорбентов
позволяет уменьшить аллергенность вакцины, сохраняя и усиливая ее иммуногенность.
Прием пероральной аллерговакцины снижает стоимость лечения по сравнению с прототипом, так как для достижения эффекта можно применять более низкие дозы аллергена и
использовать экономичный сорбент.
Практическое применение CAB с использованием пероральной аллерговакцины условно подразделяли на 3 этапа: отбор больных (вводный период), стационарный курс лечения, амбулаторный прием поддерживающих доз аллерговакцины. Открытое исследование
по оценке эффективности и безопасности аллерговакцины домашней пыли пероральной
проводилось в аллергологическом отделении Витебской областной клинической больницы.
3
BY 7386 C1 2005.09.30
Под нашим наблюдением находилось 30 больных атопической бронхиальной астмой с
легкой и средней тяжестью течения. Из них: 11 мужчин и 19 женщин, средний возраст
32,6 года, длительность заболевания от 1 года до 25 лет, средняя продолжительность заболевания 5,9 года. CAB проводилась по круглогодичной схеме, включающей основной стационарный курс лечения и амбулаторный прием поддерживающих доз аллергена.
Все больные были подразделены на 3 рандомизированные группы (по 10 пациентов в
каждой): 1-я группа пациентов получали аллерговакцину домашней пыли пероральную,
курс лечения в стационаре составил 14-16 дней, средняя доза полученного аллергена составила 45500 PNU; 2-я группа - получали аллерген подкожно, стационарный курс лечения - 21-24 дня, доза аллергена составила 3800 PNU; 3-я группа пациентов получали
"плацебо" - оральный сорбент в течение 14 дней.
Во время проведения CAB оценивались клинические показатели тяжести бронхиальной астмы. Каждый пациент ежедневно вел дневник самонаблюдения состояния, где отражалась динамика показателей дневных и ночных симптомов астмы, потребность в β2агонистах, утренние и вечерние показатели пикфлоуметрии. Исследование функции
внешнего дыхания (ФВД) включало определение дыхательных объемов и расчетов скоростных показателей по кривой "поток-объем" (FVC, FEV1, FEF25, FEF50, FEF75, PEF), определение порога специфической чувствительности бронхов.
Больные 1-й группы, получающие пероральную аллерговакцину, начинали лечение с
дозы, определяемой путем аллергометрического титрования на слизистых желудочнокишечного тракта. При этом оценивалось состояние больного и показатели ФВД. Прием
аллерговакцины в стационаре производился ежедневно натощак или спустя 2 часа после
приема пищи, запивая водой. Средняя доза полученного аллергена за стационарный период составляла 45500 PNU. Прием поддерживающих доз аллерговакцины проводили в течение года, контролируя состояние больного. Суммарная доза аллерговакцины - 99500
PNU, а в ряде случаев увеличивалась индивидуально в ходе лечения.
Во 2-й группе больных применялся водно-солевой экстракт аллергена домашней пыли
серийного производства, содержащий 10000 PNU в 1 мл. Аллерген в разведении с 10-6 до
10-3 вводили подкожно в дозе 0,2-0,4-0,8 мл 1-2 раза в день. Затем следует разведение 10-2
в дозе 0,2-0,4-0,6-0,8 мл и 10-1 в дозе 0,1-0,2-0,3-0,4-0,5-0,6-0,7-0,8-0,9-1,0 мл ежедневно с
последующим введением поддерживающей дозы 1000 PNU 1 раз в месяц в течение года.
Эффективность CAB оценивали, спустя 6 и 12 месяцев после окончания стационарного
курса лечения. Результаты CAB определяли по 4-х бальной системе (отличный, хороший,
удовлетворительный результат, без результата) по анализу дневников самонаблюдения,
объективной оценке состояния больного врачом (пикфлоуметрия, регистрация показателей ФВД, изменение степени кожной и бронхиальной специфической реактивности), а
также на основании аллергенспецифических лабораторных исследований.
В 1-й группе больных отличный эффект отмечался у 7 %, хороший - у 69 %, удовлетворительный результат - у 16 %, отсутствие эффекта - в 8 % случаев (положительная эффективность - у 92 % больных). Эффективность лечения была более высокой у больных с
легким течением атопической бронхиальной астмы, аллергического ринита и конъюнктивита. Достоверным критерием эффективности лечения являлось увеличение порога специфической чувствительности бронхов по сравнению с исходным (FEV1 - на 9,7 %, MEF25
- на 15,2 %, MEF50 - на 12,1 %, MEF75 - на 16,1 %, PEF - на 12,3 %). После пероральной аллерговакцинации наблюдалось увеличение титров IgG (до лечения - титр 1:40 - у 27,3 %
больных; после лечения - титр 1:40 - у 59,1 % и 1:80 - у 9,1 % больных).
Побочные реакции отмечались у 11 % больных в виде симптомов ринита, у 6 % больных - легкие приступы удушья или кашля, которые проходили самостоятельно или после
ингаляции β2-агониста.
Во 2-й группе больных отличный эффект отмечен у 4 %, хороший - у 40 %, удовлетворительный - у 37 %, отсутствие эффекта - у 9 %. Увеличение порога специфической
чувствительности бронхов составило: FEV1 - на 4,3 %, MEF25 - на 13,4 %, MEF50 - на
4
BY 7386 C1 2005.09.30
10,5 %, MEF75 - на 13,3 %, PEF - на 9,4 %. Динамика титров IgG составила: до лечения титр 1:40 - у 29,2 % больных, после лечения - титр 1:40 - у 42,6 % и 1:80 - у 3,4 % больных.
Количество побочных реакций составило 21 % (местные - 12 %, местные и реакции со
стороны бронхов - 9 %).
В 3-й группе "плацебо" достоверных изменений изучаемых показателей не наблюдалось.
В качестве примера осуществления заявляемого способа ниже приведены схемы лечения больных атопической бронхиальной астмой с применением аллерговакцины домашней пыли.
Схема пероральной специфической аллерговакцинации.
Ф.И.О. больная Л.
Возраст - 35 лет.
№ истории болезни 3804.
Диагноз: Бронхиальная астма, атопическая форма, средней тяжести. ДН 0. Сенсибилизация к бытовым и эпидермальным аллергенам.
Аллерговакцина домашней пыли (суспензия).
Суточная доза аллерДень приема
Дата
Побочная реакция
гена (в PNU)
1
13.04.1999 г.
50
Отсутствует
2
14.04
100
-"3
15.04
250
-"4
16.04
500
-"5
17.04
1000
Чиханье
6
18.04
1250
Чиханье
7
19.04
2000
-"8
20.04
2500
-"9
21.04
3000
-"10
22.04
4000
-"11
23.04
5000
-"12
24.04
10000
-"13
25.04
10000
-"14
26.04
10000
-"Общее количество аллерговакцины 49 650 PNU
Схема приема поддерживающих доз аллерговакцины.
Первая неделя после выписки - 1 раз в день, доза аллергена 1000 PNU.
Вторая неделя - в дозе 1000 PNU через день.
Третья-четвертая - 1000 PNU 2 раза в неделю.
Пятая-восьмая - 1000 PNU 1 раз в неделю.
В последующем - 1000 PNU 1 раз в две недели в течение года.
В ходе лечения побочные реакции со стороны слизистых желудочно-кишечного тракта, других внутренних органов и систем не наблюдались. Симптомы ринита исчезли после
присоединения к лечению стабилизатора мембран тучных клеток - кетотифена.
В течение 12 месяцев у больной отсутствовали приступы удушья. Легкое затруднение
дыхания и кратковременный насморк возникают лишь после длительной экспозиции с аллергеном (пребывание в деревянном доме, ремонт в квартире).
Эффективность лечения соответствует хорошему результату.
Таким образом, пероральные аллерговакцины превосходят по ряду критериев прототип.
По литературным данным положительная эффективность CAB с применением прототипа
составляет 56,7 %, 88,1 % [1, 7]. Результаты клинических испытаний свидетельствуют о
хорошей переносимости пероральных аллерговакцин и уменьшении побочных реакций по
сравнению с прототипом (17 % и 21 % соответственно). Кроме того, использование перо5
BY 7386 C1 2005.09.30
ральных вакцин приводит к уменьшению материальных затрат на лечение за счет отмены
инъекционных процедур и сокращения продолжительности стационарного курса лечения
в среднем на 7-8 дней. Прием пероральной аллерговакцины снижает зависимость пациента от врача и экономит время на посещение пациентом аллергологического кабинета. Технология приготовления аллерговакцины проста, используемый режим дозирования
удобен, лечение безболезненно, исключает перенос инфекции.
Медико-экономическая эффективность изобретения заключается в том, что применение аллерговакцины пероральной позволяет повысить эффективность лечения, сократить
побочные реакции, повысить стойкость и длительность ремиссии заболевания и снизить
временную нетрудоспособность.
Источники информации:
1. Балаболкин И.И., Эффективность специфической иммунотерапии при бронхиальной астме у детей//Труды 2-й Международной конференции и 1-го съезда БААКИ. Минск-Витебск, 1998. - С. 57-58.
2. Гущин И.С. Аллергическое воспаление и его фармакологический контроль. - M.:
Фармарус Принт, 1998. - С. 119-140.
3. Куприянов С.H., Куприянова E.С. Методы и средства иммунодиагностики и иммунотерапии при атопических (пыльцевых) бронхиальной астме и бронхите: Сборник резюме 8-го Национального конгресса по болезням органов дыхания, 1998. - С. 61.
4. Медуницын Н.В., Вакцинология. - M.: Триада-Х, 1999. - С. 272.
5. Новиков Д.К., Новикова В.И., Доценко Э.А. Бронхиальная астма у взрослых и детей. - Москва-Витебск, 1998. - С. 335.
6. Передкова E.В., Медуницын H.В., Порошина Ю.А., Пероральный метод специфической иммунотерапии поллинозов //Иммунология. - 1986. - № 6. - С. 49-51.
7. Потемкина A.M. Оценка эффективности нового безынъекционного (сублингвального)
метода специфической иммунотерапии бытовыми аллергенами в лечении бронхиальной
астмы у детей//Труды 2-й Международной конференции и 1-го съезда БААКИ. - МинскВитебск, 1998. - С. 98-101.
8. Рахман Ю.А., Ермолов А.В., Пероральный лиофилизированный миксталлергоид для
иммунотерапии поллинозов: Сб. трудов 1-й Национ. конф. Российской ассоциации аллергологов и клинических иммунологов. - M.: 1997. - С. 625.
9. Bousquet J., Michel F.В. Subcutaneous and local specific immunotherapy in perspectivе //
Proceedings of XVI European Congress of Allergology and Clinical Immunology. - Madrid,
1995. - P. 717-722.
10. Litwin A., Flanagan M., Entis G., Gottschlich G., Esch R., Gartside P., Michael J.G. Oral
immunotherapy with short ragweed extract in a novel encapsulated preparation: a double-blind
study // Allergy Clin. Immunol. - 1997. - Jul. 100(1). - P. 30-8.
11. Sabbah A. Apropos of sublingual specific immunotherapy (editorial) // Allergy Immunol. Paris. - 1998, 30(4). - P. 97-8.
12. Sharif S., Wheeler A.W., O'Hagan DT. Biodegradable microparticles as a delivery system for the allergens of Dermatophagoides pteronyssinus (house dust mite). I.Preparation and
characterisation of microparticles // Int. J. Pharm. - 1995. - 119. - P. 239-43.
13. Wheeler A.W., Sharif S. Sublingual delivery of vaccines: can we enhance the immune
response induced by this route? // Eur. J. Pharm. Sc. – 1996. - 4 Suppl. - P. 539.
14. WHO Position Paper. Allergen immunotherapy: therapeutic vaccines for allergic diseases. Allergy. - 1998. Vol. 53. - Suppl. - P. 1-42.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
109 Кб
Теги
by7386, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа