close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY8033

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
BY (11) 8033
(13) C1
(19)
(46) 2006.04.30
(12)
7
(51) A 61K 47/48, 38/09,
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
СОЛИ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ПЕПТИДОВ
С ЗАДЕРЖАННЫМ ВЫХОДОМ И ИХ ПОЛУЧЕНИЕ
(21) Номер заявки: a 20010764
(22) 2000.01.29
(31) 60/119,076 (32) 1999.02.08 (33) US
(85) 2001.09.07
(86) PCT/ЕР00/00697, 2000.01.29
(87) WO 00/47234, 2000.08.17
(43) 2002.03.30
(71) Заявитель: ЗЕНТАРИС ГМБХ (DE)
BY 8033 C1 2006.04.30
9/10, 9/14
(72) Авторы: БАУЭР, Хорст (DE); ДЕГЕР,
Вольфганг (DE); САРЛИКИОТИС,
Вернер (GR); ДАММ, Микаэль (DE)
(73) Патентообладатель: ЗЕНТАРИС ГМБХ
(DE)
(56) WO 98/25642 A2.
BY 2225 C1, 1998.
BY 1921 C1, 1997.
(57)
1. Фармацевтическая композиция пролонгированного действия, содержащая пептидное соединение и макромолекулу-носитель, отличающаяся тем, что представляет собой
нерастворимую в воде соль пептидного соединения и макромолекулы-носителя и получена с помощью стадий раздельного образования свободных ионов обоих соединений путем
удаления противоионов с помощью ионообменника, затем соединения не содержащего
противоионы пептидного соединения и не содержащей противоионы макромолекулыносителя в таких условиях, при которых образуется нерастворимая в воде соль пептидного соединения и макромолекулы-носителя.
2. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что фармацевтически
активное пептидное соединение является катионным, а макромолекула-носитель является
анионной.
3. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что фармацевтически
активное пептидное соединение является анионным, а макромолекула-носитель является
катионной.
4. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-3, отличающаяся тем, что образование нерастворимой в воде соли может быть дополнительно опосредовано, по меньшей
мере, частично образованием водородной связи между фармацевтически активным пептидным соединением и макромолекулой-носителем.
5. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-4, отличающаяся тем, что образование нерастворимой в воде соли может быть дополнительно опосредовано, по меньшей
мере, частично гидрофобными взаимодействиями между фармацевтически активным пептидным соединением и противоионной макромолекулой-носителем.
6. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-5, отличающаяся тем, что одна
доза нерастворимой в воде соли обеспечивает задержанную доставку фармацевтически
активного пептида субъекту в течение, по меньшей мере, одной недели после того, как
фармацевтическую композицию вводят субъекту.
7. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-5, отличающаяся тем, что одна
доза нерастворимой в воде соли обеспечивает задержанную доставку фармацевтически
BY 8033 C1 2006.04.30
активного пептида субъекту в течение, по меньшей мере, двух недель после того, как
фармацевтическую композицию вводят субъекту.
8. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-5, отличающаяся тем, что одна
доза нерастворимой в воде соли обеспечивает задержанную доставку фармацевтически
активного пептида субъекту в течение, по меньшей мере, трех недель после того, как фармацевтическую композицию вводят субъекту.
9. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-5, отличающаяся тем, что одна
доза нерастворимой в воде соли обеспечивает задержанную доставку фармацевтически
активного пептида субъекту в течение, по меньшей мере, четырех недель после того, как
фармацевтическую композицию вводят субъекту.
10. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-9, отличающаяся тем, что
фармацевтически активное пептидное соединение представляет собой одно-, двух- или
многовалентный катионный или анионный пептид.
11. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-9, отличающаяся тем, что
фармацевтически активное пептидное соединение представляет собой одно-, двух- или
многовалентный амфолитный пептид.
12. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-9, отличающаяся тем, что пептидное соединение имеет 5-100 аминокислот.
13. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-9, отличающаяся тем, что пептидное соединение имеет 5-20 аминокислот.
14. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-9, отличающаяся тем, что пептидное соединение имеет 8-12 аминокислот.
15. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-9, отличающаяся тем, что
противоионная макромолекула-носитель представляет собой анионный полимер.
16. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-9, отличающаяся тем, что
противоионная макромолекула-носитель представляет собой амфолитный полимер.
17. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-9, отличающаяся тем, что
противоионная макромолекула-носитель представляет собой анионный многоатомный
спирт, его производное или фрагмент.
18. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-9, отличающаяся тем, что
противоионная макромолекула-носитель представляет собой анионный полисахарид, его
производное или фрагмент или его фармацевтически приемлемую соль.
19. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-9, отличающаяся тем, что
противоионная макромолекула-носитель представляет собой карбоксиметилцеллюлозу.
20. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-9, отличающаяся тем, что
противоионная макромолекула-носитель выбрана из группы, состоящей из альгина, альгиновой кислоты, альгината натрия, анионных ацетатных полимеров, ионных акриловых
или метакриловых полимеров и сополимеров, пектина, камедей трагаканта и ксантана,
анионных производных карагинана, анионных производных полигалактуроновой кислоты, сульфатированного и сульфонированного полистирола, натриевой соли гликолата
крахмала и их соответствующих фрагментов и производных.
21. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-9, отличающаяся тем, что противоионная макромолекула-носитель выбрана из группы, состоящей из альбуминов, желатина типа А, желатина типа В и их фрагментов или производных.
22. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-9, отличающаяся тем, что
противоионная макромолекула-носитель представляет собой катионную макромолекулу,
предпочтительно поли-1-лизин, и другие полимеры основных аминокислот.
23. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-22, отличающаяся тем, что
представляет собой сухое твердое вещество.
24. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-22, отличающаяся тем, что
представляет собой жидкую суспензию или полутвердую дисперсию.
2
BY 8033 C1 2006.04.30
25. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-24, отличающаяся тем, что
макромолекула-носитель представлена КМЦ и соль пептид-КМЦ имеет массовое соотношение пептид: КМЦ от 1:0,006 до 1:40, предпочтительно от 1:0,04 до 1:14, более предпочтительно от 1:0,1 до 1:5, особенно от 1:0,1 до 1: 3.
26. Фармацевтическая композиция по п. 25, отличающаяся тем, что пептидное соединение представляет собой аналог LHRH.
27. Фармацевтическая композиция по п. 26, отличающаяся тем, что аналог LHRH
представляет собой антагонист LHRH.
28. Фармацевтическая композиция по п. 27, отличающаяся тем, что антагонист LHRH
выбран из группы, состоящей из цетрореликса, тевереликса, абареликса, ганиреликса, RS26306, азалина В, антида, ORF-23541, А-75998, детиреликса, RS-68439, рамореликса,
HOE-2013, Nal-Glu, ORF-21234.
29. Фармацевтическая композиция по п. 27 или 28, отличающаяся тем, что антагонист LHRH представлен цетрореликсом.
30. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 25-29, отличающаяся тем, что
комплекс цетрореликс-КМЦ имеет массовое соотношение цетрореликс: КМЦ 1:0,1.
31. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 25-29, отличающаяся тем, что
комплекс цетрореликс-КМЦ имеет массовое соотношение цетрореликс: КМЦ 1:0,213.
32. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 25-29, отличающаяся тем, что
комплекс цетрореликс-КМЦ имеет массовое соотношение цетрореликс: КМЦ 1:0,5.
33. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 25-29, отличающаяся тем, что
комплекс цетрореликс-КМЦ имеет массовое соотношение цетрореликс: КМЦ 1:2,13.
34. Способ получения фармацевтической композиции пролонгированного действия,
содержащей пептидное соединение и макромолекулу-носитель, отличающийся тем, что
включает стадии образования свободных ионов пептидного соединения и макромолекулыносителя путем удаления противоионов, соединения ионного пептидного соединения и
ионной макромолекулы-носителя в таких условиях, при которых образуется нерастворимая в воде соль пептидного соединения и макромолекулы-носителя, и приготовления
фармацевтической композиции, содержащей нерастворимую в воде соль.
35. Способ по п. 34, отличающийся тем, что противоион удаляют с помощью ионообменной смолы.
36. Способ по п. 34 или 35, отличающийся тем, что раствор ионного пептидного соединения и раствор макромолекулы-носителя являются свежеприготовленными перед их
соединением с образованием нерастворимой в воде соли пептидного соединения и макромолекулы-носителя.
37. Способ по любому из пп. 34-36, отличающийся тем, что раствор ионного пептидного соединения и раствор макромолекулы-носителя соединяют с целью образования нерастворимой в воде соли пептидного соединения и макромолекулы-носителя.
38. Способ по любому из пп. 34-37, отличающийся тем, что дополнительно включает
стадию стерилизации нерастворимой в воде соли путем γ-облучения или облучения пучком электронов.
39. Способ по любому из пп. 34-38, отличающийся тем, что нерастворимую в воде
соль получают с использованием асептических процедур.
40. Способ по любому из пп. 34-39, отличающийся тем, что пептидное соединение
является катионным, а макромолекула-носитель является анионной.
41. Способ по любому из пп. 34-39, отличающийся тем, что пептидное соединение
является анионным, а макромолекула-носитель является катионной.
42. Способ по любому из пп. 34-39, отличающийся тем, что пептидное соединение
представляет собой одно-, двух или многовалентный катионный или анионный пептид.
43. Способ по любому из пп. 34-39, отличающийся тем, что пептидное соединение
представляет собой одно-, двух или многовалентный амфолитный пептид.
3
BY 8033 C1 2006.04.30
44. Способ по любому из пп. 34-39, отличающийся тем, что пептидное соединение
является аналогом LHRH.
45. Способ по п. 44, отличающийся тем, что аналог LHRH является антагонистом
LHRH.
46. Способ по п. 45, отличающийся тем, что антагонист LHRH представляет собой
цетрореликс.
47. Способ по п. 45, отличающийся тем, что антагонист LHRH представляет собой
тевереликс.
48. Способ по п. 45, отличающийся тем, что антагонист LHRH представляет собой
абареликс.
49. Способ по п. 45, отличающийся тем, что антагонист LHRH представляет собой
ганиреликс RS-26306.
50. Способ по п. 45, отличающийся тем, что антагонист LHRH представляет собой
азалин В.
51. Способ по п. 45, отличающийся тем, что антагонист LHRH представляет собой
антид ORF-23541.
52. Способ по п. 45, отличающийся тем, что антагонист LHRH представляет собой А75998.
53. Способ по п. 45, отличающийся тем, что антагонист LHRH представляет собой
детиреликс RS-68439.
54. Способ по п. 45, отличающийся тем, что антагонист LHRH представляет собой
рамореликс НОЕ-2013.
55. Способ по п. 45, отличающийся тем, что антагонист LHRH представляет собой
Nal-Glu ORF-21234.
Данное изобретение относится к фармацевтическим композициям фармакологически
активных полипептидов, которые обеспечивают задержанный выход полипептида в течение продолжительного периода времени.
Согласно предшествующему уровню техники (WO 98/25642), заявлены фармацевтические препараты, содержащие стабильный нерастворимый в воде комплекс, состоящий из
пептидного соединения (например, пептида, полипептида, белка, пептидомиметика и т.п.),
предпочтительно фармацевтически активного пептидного соединения, и макромолекулыносителя, которая обеспечивает задержанную доставку пептидного соединения in vivo при
введении комплекса. В соответствии с предшествующим уровнем техники комплекс может
обеспечить непрерывную доставку фармацевтически активного пептидного соединения
субъекту в течение длительных периодов времени, например в течение одного месяца. Более
того, ассоциация пептидного соединения и макромолекулы-носителя в виде прочного стабильного комплекса позволяет нагружать препарат высокими концентрациями пептидного соединения.
Комплекс, представленный в изобретении, в соответствии с предшествующим уровнем
техники, образуют путем соединения пептидного соединения и макромолекулы-носителя
в таких условиях, при которых образуется практически нерастворимый в воде комплекс,
например, водные растворы пептидного соединения и макромолекулы-носителя перемешивают до тех пор, пока комплекс не выпадает в осадок.
Комплекс может находиться в форме твердого вещества (например, пасты, гранул, порошка или лиофилизата) или порошковая форма комплекса может быть распылена достаточно тонко для образования стабильных жидких суспензий или полутвердых дисперсий.
В предпочтительном варианте осуществления изобретения пептидное соединение нерастворимого в воде комплекса представлено аналогом LHRH, более предпочтительно
4
BY 8033 C1 2006.04.30
антагонистом LHRH, а макромолекула-носитель представляет собой анионный полимер,
предпочтительно натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы. Комплекс, соответствующий
изобретению, является пригодным для стерилизации, например, как γ-облучением или облучением пучком электронов, перед применением in vivo. Предложены также способы лечения субъекта при состояниях, которые лечат аналогом LHRH, путем введения субъекту
соответствующей изобретению композиции, содержащей аналог LHRH.
Проблемы, существующие в предшествующем уровне техники.
Для производства заявленных комплексов должны быть приготовлены довольно высококонцентрированные растворы (5-25 мг/мл) пептидного соединения в воде. Вследствие
присущей многим пептидным соединениям тенденции к образованию агрегатов нельзя
гарантировать, что при использовании заявленной процедуры производства могут быть
получены не содержащие агрегаты растворы. В зависимости от растворимости в воде конкретного пептидного соединения и технологии, использованной для приготовления данного раствора, концентрированный раствор пептида в воде может не содержать агрегаты
или быть загрязненным различными концентрациями и разными типами пептидных агрегатов и осадков. Поскольку данный высококонцентрированный раствор пептида является
исходным материалом для получения заявленных комплексов, растворение пептидного
соединения в воде, по-видимому, представляет собой важную стадию.
При добавлении водного раствора натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы к данным плохо определенным и охарактеризованным высококонцентрированным растворам
пептидов в различных соотношениях (от 0,1:1 до 0,5:1 масс/масс) комплексы и осадки образуются спонтанно неопределенным неконтролируемым образом. Осадки собирают
фильтрацией или центрифугированием, отмывают, прополаскивая в воде, и сушат. Затем
твердый материал превращают в порошок с помощью ступки и пестика. Потом аналитически
определяют содержание пептидного соединения. В связи с данной процедурой изготовления нельзя гарантировать образование стехиометрических комплексов воспроизводимым
и хорошо определенным образом.
Кроме того, при добавлении раствора натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы (содержащего 6,5-9,5 % натрия согласно USP) значительное количество ионов металла, т.е.
ионов натрия, контактирует с пептидным соединением. Пептиды и белки могут выпасть в
осадок в присутствии солей. Вследствие этого неясно, образуются ли комплексы или
осадки, описанные в предшествующем уровне техники, в результате взаимодействий между пептидным соединением и функциональными группами самой карбоксиметилцеллюлозы или исключительно за счет осаждающего пептид действия ионов натрия, или в
результате неизвестной и неконтролируемой комбинации данных двух процессов.
После сушки и измельчения пептидные препараты, описанные в предшествующем
уровне техники, суспендируют в солевом растворе, что также может привести к дальнейшим нежелательным неконтролируемым процессам взаимодействия.
Задачей изобретения является создание фармацевтической композиции фармакологически активных полипептидов, которые обеспечивают задержанный выход полипептида в
течение продолжительного периода времени.
Решением поставленной задачи являются представленные в данном изобретении фармацевтические композиции, содержащие стабильную хорошо определенную стехиометрическую соль, состоящую из кислого или основного пептидного соединения (например,
пептида, полипептида, белка, пептидомиметика и т.п.) и ионной основной или кислой
макромолекулы-носителя, соответственно, обеспечивающей задержанную доставку пептидного соединения после введения in vivo соли конкретного пептидного соединения.
Объектом изобретения является фармацевтическая композиция пролонгированного
действия, содержащая пептидное соединение и макромолекулу-носитель, которая представляет собой нерастворимую в воде соль пептидного соединения и макромолекулыносителя и получена с помощью стадий раздельного образования свободных ионов обоих
5
BY 8033 C1 2006.04.30
соединений путем удаления противоионов с помощью ионообменника, затем соединения
не содержащего противоионы пептидного соединения и не содержащей противоионы
макромолекулы-носителя в таких условиях, при которых образуется нерастворимая в воде
соль пептидного соединения и макромолекулы-носителя.
В предпочтительных вариантах фармацевтически активное пептидное соединение
может быть катионным, в то время как макромолекула-носитель является анионной, либо
фармацевтически активное пептидное соединение может быть анионным, в то время как
макромолекула-носитель является катионной.
Образование нерастворимой в воде соли может быть дополнительно опосредовано, по
меньшей мере, частично образованием водородной связи между фармацевтически активным пептидным соединением и макромолекулой-носителем либо гидрофобными взаимодействиями между фармацевтически активным пептидным соединением и противоионной
макромолекулой-носителем.
Фармацевтически активное пептидное соединение может представлять собой одно-,
двух- или многовалентный катионный или анионный пептид либо амфолитный пептид,
причем пептидное соединение имеет 5-100 аминокислот, предпочтительно 5-20 аминокислот, более предпочтительно 8-12 аминокислот.
В предпочтительных вариантах противоионная макромолекула-носитель может быть
выбрана из группы, состоящей из анионного полимера, амфолитного полимера, анионного
многоатомного спирта, его производного или фрагмента, анионного полисахарида, его
производного или фрагмента или его фармацевтически приемлемой соли.
Предпочтительно, когда противоионная макромолекула-носитель представляет собой
карбоксиметилцеллюлозу.
Кроме того, противоионная макромолекула-носитель может быть выбрана из группы,
состоящей из альгина, альгиновой кислоты, альгината натрия, анионных ацетатных полимеров, ионных акриловых или метакриловых полимеров и сополимеров, пектина, камедей
трагаканта и ксантана, анионных производных карагинана, анионных производных полигалактуроновой кислоты, сульфатированного и сульфонированного полистирола, натриевой соли гликолата крахмала и их соответствующих фрагментов и производных.
Противоионная макромолекула-носитель может быть выбрана из группы, состоящей
из альбуминов, желатина типа А, желатина типа В и их фрагментов или производных.
Противоионная макромолекула-носитель может представлять собой катионную макромолекулу, предпочтительно поли-1-лизин, и другие полимеры основных аминокислот.
Фармацевтическая композиция по изобретению представляет собой сухое твердое вещество, жидкую суспензию или полутвердую дисперсию.
Макромолекула-носитель может быть представлена КМЦ и соль пептид-КМЦ имеет
массовое соотношение пептид: КМЦ от 1:0,006 до 1:40, предпочтительно от 1:0,04 до 1:14,
более предпочтительно от 1:0,1 до 1:5, особенно от 1:0,1 до 1:3.
Более конкретно пептидное соединение представляет собой аналог LHRH и аналог
LHRH предствляет собой антогонист LHRH.
Антогонист LHRH может быть выбран из группы, состоящей из центрореликса, тевереликса, абареликса, ганиреликса, RS-26306, азалина В, антида, ORF-23541, А-75998, детиреликса, RS-68439, рамореликса, НОЕ-2013, Nal-Glu, ORF-21234.
Антогонист LHRH может быть поедставлен центрореликсом и комплекс центрореликсКМЦ может иметь, например, массовое соотношение центрореликс: КМЦ 1:0,1; 1:0,213;
1:0,5 или 1:2,13.
Фармацевтические композиции, соответствующие изобретению, обеспечивают задержанную доставку пептидного соединения субъекту in vivo после введения композиции
субъекту. Продолжительность и уровень задержанной доставки могут варьировать в зависимости от концентрации пептидного соединения и макромолекулы-носителя, использованных для получения соли, в течение одной, двух, трех или четырех недель.
6
BY 8033 C1 2006.04.30
Другим объектом изобретения является способ получения фармацевтической композиции пролонгированного действия, содержащая пептидное соединение и макромолекулуноситель, который включает стадии образования свободных ионов пептидного соединения и макромолекулу-носитель путем удаления противоионов, соединения ионного пептидного соединения и ионной макромолекулы-носителя в таких условиях, при которых
образуется нерастворимая в воде соль пептидного соединения и макромолекулы-носителя
и приготовление фармацевтической композиции, содержащей нерастворимую в воде соль.
В предпочтительном варианте способа по изобретению противоион удаляют с помощью ионообменной смолы, раствор ионного пептидного соединения и раствор макромолекулы-носителя являются свежеприготовленными перед их соединением. Далее эти
растворы соединяют с цепью образования нерастворимой в воде соли пептидного соединения и макромолекулы-носителя.
Предпочтительный вариант способа дополнительно включает стадию стерелизации
нерастворимой в воде соли путем γ-облучения или облучения пучком электронов, либо с
использованием асептических процедур.
В предпочтительных вариантах способа по изобретению пептидное соединение является катионным, а макромолекула-носитель является анионной либо пептидное соединение является анионным, а макромолекула-носитель является катионной.
Пептидное соединение представляет собой одно-, двух- или многовалентный катионный или анионный пептид или амфолитный пептид.
Более конкретно пептидное соединение является аналогом LHRH и аналог LHRH является антагонистом LHRH, например цетрореликс, тевереликс, абареликс, ганиреликс
RS-26306, азалин В, антид ORF-23541, А-75998, детиреликс RS-68439, рамореликс НОЕ2013, Nal-Glu ORF-21234.
Структуры вышеупомянутых аналогов LHRH представлены, например, в следующих
ссылках и обзорах: цетрореликс, тевереликс, антареликс (см. статью Deghenghi и соавт.,
Biomed. & Pharmacother., 47, с. 107, (1993)), абареликс (см. статью Molineaux и соавт., Molecular Urology, 2, с. 265, (1998)), ганиреликс (см. статью Nestor и соавт., J. Med. Chem., 35,
с. 3942, (1992)), азалин В, антид, А-75998 (см. статью Cannon и соавт., J. Pharm. Sci., 84, с.
953, (1995)), детиреликс (см. статью Andreyko и соавт., J. Clin. Endocrinol. Metab., 74, с.
399, (1992)), RS-68439, рамореликс (см. статью Stoeckemann и Sandow, J. Cancer Res. Clin.
Oncol., 119. с. 457, (1993)), Nal-Glu, Behre и соавт., Обзор антагонистов GnRH (гонадотропин-высвобождающий гормон), Труды 2-ой Всемирной конференции по вопросам индукции овуляции (Proceedings of the 2nd World Conference on Ovulation Induction), The
Parthenon Publishing Group Ltd, UK; Kutscher и соавт., Angew, Chem., 109, с. 2240, (1997)).
Для получения заявленных фармацевтических композиций пролонгированного действия объединяют эквивалентные количества свежеприготовленного раствора основания
пептида или кислоты пептида, соответственно, и не содержащего противоион раствора
макромолекулы-носителя. Соотношение пептидного соединения и макромолекулыносителя (мас./мас.) может составлять, например, 1:0,1, 1:0,213, 1:0,5, 1:2,13. Неограничивающие примеры условий и способов получения нерастворимого в воде комплекса, соответствующего изобретению, описаны в примерах 1-4.
Данный процесс приводит к образованию хорошо определенных стехиометрических и
чистых солей пептидного соединения и макромолекулы противоиона. Данные чистые соли не содержат примеси других ионов, ни анионов (например, ацетата), ни катионов (например, натрия).
Пример 1.
Лиофилизат соли цетрореликса-КМЦ (карбоксиметилцеллюлозы) с массовым соотношением цетрореликс: КМЦ, 1:0,1, примерно соответствующим молярному соотношению цетрореликс: карбоксильная функция КМЦ, 1:0,48, получают следующим образом.
7
BY 8033 C1 2006.04.30
0,22 г Na-КМЦ (карбоксиметилцеллюлоза низкой вязкости, Hercules) растворяют в 40 г
воды и добавляют 3 г ионообменной смолы (Amberlite®). После перемешивания в течение
20 мин ионообменную смолу удаляют фильтрацией, используя стекловолоконный фильтр.
2,21 г цетрореликса ацетата растворяют в 23,4 г воды и добавляют 74,6 г 96 % (об./об.)
этанола. Добавляют 20 г ионообменной смолы (Amberlite®). После перемешивания в течение 20 мин ионообменную смолу удаляют фильтрацией, используя стекловолоконный
фильтр. Отфильтрованный раствор цетрореликса основания добавляют при непрерывном
перемешивании в раствор не содержащей натрия КМЦ с получением прозрачного раствора. Через 1 ч перемешивания раствор выпаривают под вакуумом для удаления этанола и
получают дисперсию. Наконец, дисперсию замораживают и сушат вымораживанием.
Пример 2.
Лиофилизат соли цетрореликса-КМЦ с массовым соотношением цетрореликс: КМЦ,
1:0,213, примерно соответствующим молярному соотношению цетрореликс: карбоксильная функция КМЦ, 1:1, получают следующим образом. 0,426 г Na-КМЦ (карбоксиметилцеллюлоза низкой вязкости, Hercules) растворяют в 40 г воды и добавляют 5 г ионообменной смолы (Amberlite®). После перемешивания в течение 25 мин ионообменную
смолу удаляют фильтрацией, используя стекловолоконный фильтр. 2,21 г цетрореликса
ацетата растворяют в 23,4 г воды и добавляют 74,6 г 96 % (об./об.) этанола. Добавляют 20 г
ионообменной смолы (Amberlite®). После перемешивания в течение 20 мин ионообменную смолу удаляют фильтрацией, используя стекловолоконный фильтр. Отфильтрованный раствор цетрореликса основания добавляют при непрерывном перемешивании в
раствор не содержащей натрия КМЦ с получением прозрачного раствора. Через 1 ч перемешивания раствор выпаривают под вакуумом для удаления этанола и получают дисперсию. Наконец, дисперсию замораживают и сушат вымораживанием.
Пример 3.
Лиофилизат соли цетрореликса-КМЦ с массовым соотношением цетрореликс: КМЦ,
1:0,5, примерно соответствующим молярному соотношению цетрореликс: карбоксильная
функция КМЦ, 1:2,41, получают следующим образом. 1,1 г Na-КМЦ (карбоксиметилцеллюлоза низкой вязкости, Hercules) растворяют в 200 г воды и добавляют 15 г ионообменной смолы (Amberlite®). После перемешивания в течение 20 мин ионообменную смолу
удаляют фильтрацией, используя стекловолоконный фильтр. 2,21 г цетрореликса ацетата
растворяют в 23,4 г воды и добавляют 74,6 г 96 % (об./об.) этанола. Добавляют 20 г ионообменной смолы (Amberlite®). После перемешивания в течение 20 мин ионообменную
смолу удаляют фильтрацией, используя стекловолоконный фильтр. Отфильтрованный
раствор цетрореликса основания добавляют при непрерывном перемешивании в раствор
не содержащей натрия КМЦ с получением прозрачного раствора. Через 1 ч перемешивания раствор выпаривают под вакуумом для удаления этанола и получают дисперсию. Наконец, дисперсию замораживают и сушат вымораживанием.
Пример 4.
Лиофилизат соли цетрореликса-КМЦ с массовым соотношением цетрореликс: КМЦ,
1:2,13, примерно соответствующим молярному соотношению цетрореликс: карбоксильная
функция КМЦ, 1:10, получают следующим образом. 4,26 г Na-КМЦ (карбоксиметилцеллюлоза низкой вязкости, Hercules) растворяют в 400 г воды и добавляют 50 г ионообменной смолы (Amberlite®). После перемешивания в течение 25 мин ионообменную смолу
удаляют фильтрацией, используя стекловолоконный фильтр. 2,21 г цетрореликса ацетата
растворяют в 23,4 г воды и добавляют 74,6 г 96 % (об./об.) этанола. Добавляют 20 г ионообменной смолы (Amberlite®). После перемешивания в течение 20 мин ионообменную
смолу удаляют фильтрацией, используя стекловолоконный фильтр. Отфильтрованный
8
BY 8033 C1 2006.04.30
раствор цетрореликса основания добавляют при непрерывном перемешивании в раствор
не содержащей натрия КМЦ с получением прозрачного раствора. Через 1 ч перемешивания раствор выпаривают под вакуумом для удаления этанола и получают дисперсию. Наконец, дисперсию замораживают и сушат вымораживанием.
Пример 5.
Растворимость не содержащих натрий очищенных солей КМЦ с различными композициями пептида в форме основания: КМЦ в форме кислоты определяют в изотоническом
растворе Рингера. Соли цетрореликса-КМЦ готовят согласно примерам 1-4. Кроме того,
выход in vitro цетрореликса в растворе Рингера из данных не содержащих натрия солей
КМЦ тестируют в течение 168 ч, используя проточную систему. Количество цетрореликса, освобождающегося через 168 ч, выражают как процент дозы цетрореликса, использованной в данном способе тестирования in vitro.
Данные полученные in vitro результаты для не содержащих натрия солей КМЦ, соответствующих изобретению (табл. 1), сравнивают с комплексами цетрореликса, изготовленными с использованием Na-КМЦ с идентичными массовыми соотношениями пептида
и КМЦ, в соответствии с предшествующим уровнем техники (WO 98/25642) (табл. 2).
Удаление ионов натрия и ацетата из солей пептида-КМЦ приводит к значительным
улучшениям поведения данных препаратов in vitro, т.е. характеристик растворимости и
освобождения in vitro.
У комплексов Na-КМЦ, соответствующих предшествующему уровню техники, растворимость в растворе Рингера является очень низкой и не может быть модифицирована
соотношением компонентов пептида и Na-КМЦ. Таким образом, кинетика освобождения
пептидного соединения из данных препаратов не может быть модифицирована.
Напротив, для не содержащих натрия солей КМЦ пептидного соединения, полученных согласно изобретению, показана четкая зависимость между массовым соотношением
компонентов соли и их поведением in vitro. Повышение процента не содержащей натрий
КМЦ в форме кислоты в данных препаратах приводит к значительному повышению растворимости пептидного соединения в растворе Рингера. Таким образом кинетика освобождения пептидного соединения из не содержащих натрий препаратов соли КМЦ может
быть модифицирована и проконтролирована. Вследствие этого в зависимости от желательной кинетики освобождения для определенных клинических применений могут быть
получены определенные препараты соли КМЦ с соответствующими характеристиками
освобождения.
Пример 6.
Готовят как не содержащие натрий соли КМЦ цетрореликса, соответствующие примерам 1-4, так и комплексы Na-КМЦ и цетрореликса с эквивалентным массовым соотношением цетрореликс: КМЦ в соответствии с предшествующим уровнем техники. Получают
суспензии данных не содержащих натрия солей КМЦ цетрореликса и комплексов NaКМЦ и цетрореликса, соответственно, и однократно инъецируют крысам внутримышечно
в дозе 1,5 мг/кг. Уровни тестостерона в плазме и уровни цетрореликса в плазме определяют в различных точках времени. Кроме того, в конце супрессии тестостерона крыс забивают. Мышцу, в которую вводят дозу, удаляют и анализируют на остаточное количество
введенной дозы цетрореликса в области иньекции.
Результаты представлены на фиг. 1.
Абсолютная биодоступность солей цетрореликса-КМЦ показана в диапазоне 78 %111 %. Биодоступность комплексов цетрореликс-Nа-КМЦ составляет только 32 %, указывая на отрицательное влияние ионов натрия на свойства препаратов, приготовленных в
соответствии с предшествующим уровнем техники.
9
BY 8033 C1 2006.04.30
Фиг. 1
Пример 7.
Не содержащие натрия соли КМЦ цетрореликса, соответствующие данному изобретению, в том виде, как они описаны в предшествующих примерах, готовят в виде лиофилизатов. Лиофилизаты диспергируют в водной среде и однократно инъецируют подкожно
собакам в дозе 1,0 мг/кг. Уровни тестостерона в плазме и уровни цетрореликса в плазме
определяют в различных точках времени. Результаты представлены на фиг. 2.
Таблица 1
Пептид в форме основания:КМЦ (мас./мас.)
1:0,1
1:0,213
1:0,5
1:2,13
Растворимость в растворе
Рингера, мкг/мл
3,5
2,7
17,5
54
Освобождение in vitro в растворе
Рингера, через 168 час, %
23
30
63
76
Таблица 2
Пептид в форме основания: КМЦ (мас./мас.)
1:0,1
1:0,253
1:0,5
1:2,13
Растворимость в растворе
Рингера, мкг/мл
2,5
1,5
2
2
10
Освобождение in vitro в растворе
Рингера, через 168 час, %
46
48
45
17
BY 8033 C1 2006.04.30
Фиг. 2
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
11
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
206 Кб
Теги
by8033, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа