close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY9867

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2007.10.30
(12)
(51) МПК (2006)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 9867
(13) C1
(19)
G 01N 30/00
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА ВНЕСЕННОЙ
ФОЛИЕВОЙ КИСЛОТЫ В ПЛОДООВОЩНОЙ ПРОДУКЦИИ
И ХЛЕБОБУЛОЧНЫХ ИЗДЕЛИЯХ
(21) Номер заявки: a 20050292
(22) 2005.03.25
(43) 2006.12.30
(71) Заявитель: Государственное учреждение "Республиканский научнопрактический центр гигиены " (BY)
(72) Авторы: Шуляковская Ольга Васильевна; Белышева Людмила Леонидовна; Соколов Сергей Михайлович; Воронцова Ольга Сергеевна;
Полянских Елена Ильинична (BY)
(73) Патентообладатель: Государственное
учреждение "Республиканский научнопрактический центр гигиены " (BY)
(56) konings E.J.M. Journal of AOAC International, 1999. - V. 82. - № 1. - P. 119-127.
Жданов Ю.И. и др. Медицинская наука
и ее связь с практическим здравоохранением. Тез. докл. республиканской науч.практ. конф. - Витебск, 1998. - С. 41.
Экспериментальная витаминология.Мн.: Наука и техника, 1979. - С. 353-389.
SU 1065779 A1, 1984.
BY 9867 C1 2007.10.30
(57)
Способ определения количества внесенной фолиевой кислоты в плодоовощной продукции или хлебобулочных изделиях, при котором осуществляют экстракцию фолиевой
кислоты из образца продукта или изделия, очистку и концентрирование полученного экстракта на колонке, заполненной анионитом "ФИБАН А-6", и определяют массовую концентрацию фолиевой кислоты методом ВЭЖХ.
Изобретение относится к медицине, к разделу лабораторной диагностики, а также к
сельскому хозяйству и пищевой промышленности.
Заявителю неизвестен способ определения количества внесенной фолиевой кислоты в
плодоовощной продукции и хлебобулочных изделиях, в силу чего не может быть указан
объект, являющийся наиболее близким аналогом заявленного способа.
Задачей заявляемого изобретения является создание способа, позволяющего быстро и
точно определить количество внесенной фолиевой кислоты в плодоовощной продукции и
хлебобулочных изделиях
Поставленная задача достигается следующим образом.
Предложен способ определения количества внесенной фолиевой кислоты в плодоовощной продукции и хлебобулочных изделиях, при котором осуществляют экстракцию
фолиевой кислоты из образца продукта или изделия, очистку и концентрирование полученного экстракта на колонке, заполненной анионитом "ФИБАН А-6", и определяют массовую концентрацию фолиевой кислоты методом ВЭЖХ.
BY 9867 C1 2007.10.30
Пример.
Определение количества внесенной фолиевой кислоты в плодоовощной продукции и
хлебобулочных изделиях
1. Экстракция.
Навеску образца массой 20-30 г помещают в коническую колбу вместимостью
250 см3 , вносят 100 см3 0,01 М раствора гидроксида натрия, тщательно перемешивают.
Устанавливают колбу на перемешивающее устройство для экстракции. Время экстракции
60 мин. Содержимое конической колбы переносят количественно в мерную колбу объемом
200 см3 и доводят до метки 0,01 М раствором гидроксида натрия. Полученный экстракт
переносят в центрифужные стаканы объемом 250 см3. Вес стаканов уравновешивают с
точностью до 0,05 г. Стаканы устанавливают в лабораторную центрифугу для центрифугирования. Условия центрифугирования: скорость 5-5,5 тыс. оборотов в мин, время - 20 мин.
Надосадочную жидкость дополнительно фильтруют через бумажный фильтр (синяя
лента). Замеряют общий объем экстракта.
2. Очистка и концентрирование экстракта.
50 см3 экстракта, полученного по п. 1, пропускают через хроматографическую колонку, заполненную анионитом "ФИБАН А-6", подготовленную соответствующим образом*,
со скоростью 1 капля в секунду. Элюируют фолиевую кислоту из хроматографической
колонки 7 см3 15 % раствора NaCl с рН = 9.
*Примечание: 0,5 г сухого анионита помещают в стеклянную или тефлоновую колонку с ∅ 8-10 мм. Колонку заполняют 10 %-ным раствором соляной кислоты и выдерживают 15-20 мин, кислоту вымывают дистиллированной водой до рН = 7. Далее колонку
заполняют 2н раствором NaOH и выдерживают 15-20 мин, затем отмывают от щелочи
дистиллированной водой до рН = 7. Потом колонку заполняют 10 %-ным раствором соляной кислоты и выдерживают 15-20 мин, промывают дистиллированной водой до нейтральной реакции. Затем пропускают экстракт для очистки и концентрирования через
колонку с анионитом "ФИБАН А-6".
3. Подготовка к выполнению измерений.
3.1 Подготовка измерительной аппаратуры.
Включают хроматограф согласно инструкции по эксплуатации, устанавливают рабочие режимы для детектора и насоса. Прокачивают через колонку смесь буферов в течение
0,5 ч до выхода прибора на режим и стабилизации процессов в колонке. Включают систему регистрации сигналов согласно инструкции по эксплуатации.
3.2 Установление градуировочной характеристики.
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади хроматографического пика от концентрации фолиевой кислоты в растворе, устанавливают по 6 точкам в
диапазоне от 1,0 до 0,05 мкг/см3. Градуировочные растворы хроматографируют не менее 5
раз, начиная с самой низкой концентрации. Регистрацию сигнала, обработку и хранение
полученной информации проводят с использованием компьютерной системы. Площадь
пика стандарта вычисляют общепринятыми методами.
Затем строится градуировочная зависимость величины отклика детектора от концентрации фолиевой кислоты.
Условия хроматографического анализа:
объем вводимой в хроматограф пробы
0,02 см3
расход буфера
0,5 см3/мин
температура колонки
20 ± 5 °С
длина волны детектора
286 нм
подвижная фаза
буферы А и Б.
Соотношение буферов А и Б представлено в табл. 1.
Время выхода фолиевой кислоты устанавливают при проведении градуировочных работ.
2
BY 9867 C1 2007.10.30
Таблица 1
Условия градиентного элюирования
Время анализа, мин
Соотношение буферов (рН = 2,9)
А - ацетонитрил
Б - вода
0
5
95
5
5
95
10
30
70
13
80
20
15
80
20
4. Выполнение измерений.
Подготовленную пробу по п. 2 (объем 7 см3) вводят в прибор в количестве 0,02 см3.
Анализ проводят при тех же условиях, что и калибровку (см. п. 3.2.). Вычисление площади пика фолиевой кислоты в пробе проводится системой регистрации, обработки и хранения спектрометрической информации.
5. Обработка результатов измерений.
Массовую концентрацию фолиевой кислоты в образцах обогащенной плодоовощной
продукции и хлебобулочных изделиях вычисляют по формуле:
C × V1 × V2
X=
× 100 ,
m × V3 × V4
где X - массовая концентрация фолиевой кислоты в пробе, мкг/100 г;
V1 - общий объем экстракта, см3;
V2 - объем элюата, пропущенного через хроматографическую колонку, см3;
m - масса навески пробы, г;
С - концентрация фолиевой кислоты, найденная по градуировочному графику,
мкг/см3;
V3 - объем экстракта, взятого для элюирования, см3;
V4 - объем элюата, взятого для хроматографирования, см3;
100 - коэффициент пересчета концентрации фолиевой кислоты на 100 г продукта.
За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое значение
(X) результатов двух параллельных определений, рассчитанных до третьего и округленных до второго десятичного знака.
Результаты определения количества внесенной фолиевой кислоты в плодоовощной
продукции и хлебобулочных изделиях предлагаемым способом представлены в табл. 2.
Таблица 2
Определение количества внесенной фолиевой кислоты
в плодоовощной продукции и хлебобулочных изделиях
Способ
Количество используемых
Время
Извлечение фолиевой
определения
реактивов
анализа, ч
кислоты, %
1. Ацетонитрил
2. Анионит "ФИБАН А-6"
Предлагаемый 3. Соляная кислота
2
97
4. Гидроксид натрия
5. Фолиевая кислота
Таким образом, достигаемый технический результат заявляемого способа заключается
в точном и быстром определении количества внесенной фолиевой кислоты в плодоовощной продукции или хлебобулочных изделиях при небольшом использовании дорогостоящих реактивов.
3
BY 9867 C1 2007.10.30
Источники информации:
1. Konings E.J.M. Journal of AOAC International. - 1999. - V. 82, № 1. - P. 119-127.
2. Жданов Ю.И. и др. Медицинская наука и ее связь с практическим здравоохранением.
Тезисы докладов республиканской научно-практической конференции. - Витебск, 1998. С. 41.
3. Экспериментальная витаминология. - Мн.: Наука и техника, 1979. - С. 353-389.
4. SU 1065779 А1, 1984.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
4
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
85 Кб
Теги
by9867, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа