close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY10092

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2007.12.30
(12)
(51) МПК (2006)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 10092
(13) C1
(19)
A 61K 39/002
ШТАММ PROTEUS MIRABILIS-Г КМИЭВ-44 - ШТАММ-АНТИГЕН
(21) Номер заявки: a 20041131
(22) 2004.12.03
(43) 2006.06.30
(71) Заявитель: Республиканское научноисследовательское дочернее унитарное предприятие "Институт экспериментальной ветеринарии имени
С.Н. Вышелесского" (BY)
(72) Авторы: Андросик Николай Николаевич; Ломако Юрий Васильевич;
Полоз Светлана Васильевна; Лукин
Олег Александрович; Карпович Валентина Константиновна (BY)
(73) Патентообладатель: Республиканское
научно-исследовательское дочернее
унитарное предприятие "Институт
экспериментальной ветеринарии имени С.Н. Вышелесского" (BY)
(56) Исметуллова Ф.М. Иммунизация глубокостельных коров ассоциированной
инактивированной вакциной с целью
профилактики диарей новорожденных
телят: Автореф. дис. - М., 1994. - С. 115.
RU 2217494 С2, 2003.
RU 2218395 C2, 2003.
RU 2209081 C1, 2003.
BY 10092 C1 2007.12.30
(57)
Штамм бактерий Proteus mirabilis-Г КМИЭВ-44 - штамм-антиген.
Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности к биологическим
препаратам, и может быть использовано для приготовления диагностикумов и вакцин.
Известны бактерии рода Proteus, участвующие в патологических процессах пищеварительного тракта сельскохозяйственных животных [1].
В настоящее время для профилактики протейной инфекции сельскохозяйственных
животных, например телят, применяют штамм Proteus vulgaris для производства вакцины против диареи телят, изготавливаемой в лаборатории болезней молодняка Московской ветеринарной академии совместно с Нижегородским НИИ эпидемиологии и
микробиологии Минздрава Российской Федерации [2]. Недостатком данного штамма
является отсутствие специфического полисахарида, обеспечивающего при изготовлении
профилактического препарата протективную способность против протейной инфекции
телят, вызванной Proteus mirabilis-Г.
Задачей изобретения является селекция штамма Proteus mirabilis-Г, участвующего в
патогенезе протейной инфекции телят, обладающего стабильными свойствами, высокой
иммуногенностью, который может быть использован для конструирования диагностических и профилактических препаратов.
Поставленная задача достигается тем, что в качестве штамма-антигена был селекционирован штамм Proteus mirabilis-Г, обладающий стабильными свойствами и высокой иммуногенностью по отношению к эпизоотическим штаммам, циркулирующим в хозяйствах
Республики Беларусь, отличающийся тем, что он является активным в антигенном отношении, не сбраживает мальтозу и амигдалин и не образует индол.
BY 10092 C1 2007.12.30
Штамм Proteus mirabilis-Г (КМИЭВ-44) выделен в 2001 году в колхозе "Гигант" Бобруйского района Могилевской области из печеночной ткани теленка четырнадцатидневного возраста, больного гастроэнтеритом. Штамм получен путем посева на бульон на
основе перевара Хоттингера с последующим выделением чистых культур, сбора коллекции штаммов и отбора из них активного в антигенном отношении штамма вида Proteus
mirabilis-Г (КМИЭВ-44), отличающийся тем, что он не сбраживает мальтозу и амигдалин
и не образует индол.
Штамм бактерий Proteus mirabilis депонирован в коллекции РНИУП "Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского Национальной академии наук Беларуси".
Таксонометрическая принадлежность. Proteus mirabilis относится к семейству Enterobacteriaceae, роду Proteus, вид Proteus mirabilis.
Культурально-морфологические признаки. Proteus mirabilis (КМИЭВ-44) при окраске
по Граму имеет вид мелких грамотрицательных палочек (0,4-0,6×1-3мкм), не образующих
капсул и спор.
Физиолого-биохимические признаки. Растет на МПБ, бульоне на основе перевара
Хоттингера с интенсивным помутнением среды, с образованием поверхностной пленки.
На МПА - характерный сливающийся рост без образования отдельных колоний, образование вуалеобразного налета. На средах с содержанием солей желчных кислот (среда Плоскирева, висмут-сульфит-агар, агар Мак-Конки) рост проявляется в О-форме. На висмутсульфит-агаре через 48 ч культивирования колонии имеют грязно-коричневый цвет, а после их снятия на среде остается грязно-коричневая редукционная зона.
Штамм Proteus mirabilis-Г (КМИЭВ-44) не ферментирует лактозу, арабинозу, дульцит,
не обладает декарбоксилазой лизина и дегидролазой аргинина, не утилизирует малонат, не
сбраживает мальтозу и амигдалин и не образует индол.
Чувствительность к антибиотикам. Штамм Proteus mirabilis-Г (КМИЭВ-44) высокочувствителен к стрептомицину, энроксилу, гентамицину, карбенициллину, цефалексину,
левомицетину, тетрациклину, неомицину, норфлоксацину, умеренно устойчив к доксициклину, пенициллину, устойчив к ампициллину (амписуру), эритромицину (галлимицину), олеандомицину, метицимину, линкомицину, кобактану, амоксициллину (ветримоксину), ристомицину.
Вирулентность, иммуногенность. Штамм Proteus mirabilis-Г (КМИЭВ-44) патогенен.
При внутрибрюшинном введении вызывает гибель белых мышей массой 14-16 г. ЛД50 для
белых мышей составляет 1,03⋅109м.к./0,5 мл 18-часовой бульонной культуры.
Иммуногенность штамма Proteus mirabilis-Г (КМИЭВ-44) составляет 100 %, антигенность - 9,64 log2.
Пример 1.
Для приготовления бульона Хоттингера перевар разводят дистиллированной водой до
содержания азота 200 мг %. К бульону добавляют 0,5 % натрия хлорида и 1 % пептона,
доводят до 7,4-7,6. Кипятят бульон на огне 30-40 мин в кастрюле с закрытой крышкой.
При выкипании уровень жидкости доводят до первоначального. После окончательного
установления pH бульон кипятят вторично. После кипячения среду оставляют для отстаивания, после чего осторожно сливают с осадка и фильтруют через полотняный фильтр или
3-4 слоя фильтровальной бумаги. Осадок на фильтре не выливают. Разливать бульон сразу
не рекомендуется. За время хранения он хорошо отстаивается. По мере надобности бульон
фильтруют, разливают по пробиркам. Бульон и агар Хоттингера стерилизуют 30 мин при
давлении 1 атм. После стерилизации окончательно проверяют pH.
Пример 2.
В бактериологические матрацы разливают по 250 см3 стерильного мясо-пептонного
агара на основе перевара Хоттингера. На застывший агар заливают по 5 см3 суточной
бульонной культуры. Культивируют при 37 °С. Через 24 ч выросшую культуру смывают
2
BY 10092 C1 2007.12.30
0,85 %-ным стерильным раствором натрия хлорида из расчета 50 см3 на 1 матрац. Концентрацию биомассы доводят по стандарту мутности до 10 млрд. микробных клеток в 1 см3.
Полученную взвесь разливают в 500 см3 флаконы. Инактивацию проводят с использованием формалина в конечной концентрации 0,4 %. Полученный препарат стерилен, безвреден.
Пример 3.
Препарат, полученный по примеру 1, используется для профилактики протейной инфекции телят. Препарат вводится глубоко стельным коровам в дозах 10 и 15 см3 внутримышечно с интервалом 10-15 дней. Из 20 животных опытной группы после применения
биологического препарата, компонентом которого являлся штамм бактерий Proteus mirabilis-Г (КМИЭВ-44) заболело 1 животное, из 20 животных контрольной группы после применения известного биологического препарата заболело 11 животных, из которых пало 3.
Таким образом, штамм Proteus mirabilis-Г (КМИЭВ-44) является активным в антигенном отношении, обладает достаточной иммуногенностью и может быть использован для
конструирования диагностических и профилактических препаратов.
Источники информации:
1. Краткий определитель бактерий Берги / Под ред. Дж. Хоулта. - М.: Мир, 1980. С. 188-189.
2. Исмегулова Ф.М. Иммунизация глубокостельных коров ассоциированной вакциной
с целью профилактики диарей новорожденных телят: Автореф. дис. канд. вет. наук МВА. М., 1994. - С. 15 (прототип).
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
3
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
71 Кб
Теги
by10092, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа