close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY10282

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2008.02.28
(12)
(51) МПК (2006)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 10282
(13) C1
(19)
A 61B 10/00
G 01N 33/49
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ ГЕСТОЗА
(21) Номер заявки: a 20050391
(22) 2005.04.18
(43) 2006.12.30
(71) Заявитель: Государственное научное
учреждение "Институт биофизики и
клеточной инженерии Национальной
академии наук Беларуси" (BY)
(72) Авторы: Мажуль Владимир Михайлович; Черновец Татьяна Сергеевна;
Сидоренко Валентина Николаевна;
Пискунова Инна Павловна (BY)
(73) Патентообладатель: Государственное
научное учреждение "Институт биофизики и клеточной инженерии Национальной академии наук Беларуси"
(BY)
(56) SU 1691739 A1, 1991.
RU 2143694 C1, 1999.
RU 2190848 C2, 2002.
UA 34608 C2, 2003.
RU 2215469 C1, 2003.
BY 10282 C1 2008.02.28
(57)
Способ определения степени тяжести гестоза, включающий получение обогащенной
тромбоцитами плазмы из венозной крови беременной, внесение индуктора агрегации
тромбоцитов и оценку агрегационной способности тромбоцитов в исследуемом образце,
отличающийся тем, что в качестве индуктора агрегации тромбоцитов используют протеазу в не повреждающей тромбоциты концентрации, а оценку агрегационной способности тромбоцитов осуществляют по величине светопропускания исследуемого образца,
причем при значении светопропускания в пределах 50-69 % степень гестоза определяют
как легкую, в пределах 35-49 % как среднюю и в пределах 0-34 % как тяжелую.
Фиг. 1
BY 10282 C1 2008.02.28
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано в женских консультациях и отделениях патологии беременных.
Гестоз занимает ведущее место в структуре материнской и перинатальной заболеваемости и смертности. Частота гестоза колеблется от 2,5 % до 16,5 % и не имеет тенденции
к снижению, несмотря на существенные достижения в изучении его этиологии, патогенеза
и разработку новых методов профилактики и лечения.
Известен способ диагностики позднего токсикоза беременных (гестоза) [1], заключающийся в том, что методом фазово-контрастного микроскопирования подсчитывают
количество тромбоцитов в крови, взятой из локтевой вены. Затем методом тетраполярной
дифференциальной реографии определяют показатели центрального и периферического
кровообращения. С помощью регистратора записывают реографический сигнал выброса,
определяют величину ударного выброса и вычисляют общее периферическое сопротивление крови по математической формуле. После этого накладывают на различные участки
тела женщины электроды реоплетизмографа и измеряют импеданс тканей между электродами. На основании полученных показателей вычисляют диагностический индекс. При
его значении ≥ диагностируют поздний токсикоз беременных. Однако данный способаналог является сложным, трудоемким и длительным. Его реализация требует наличия
достаточно большого количества различного лабораторного оборудования.
Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому является способ диагностики степени тяжести гестоза [2], заключающийся в следующем. У пациентки производят
забор венозной крови, стабилизируют ее цитратом натрия и путем центрифугирования
получают обогащенную тромбоцитами плазму. Осажденные при центрифугировании крови эритроциты трижды отмывают физиологическим раствором. Физиологический раствор
удаляют, эритроциты гемолизируют путем суспендирования в дистиллированной воде и в
пробирках готовят последовательные разведения гемолизата. Пробирки с обогащенной
тромбоцитами плазмой и различными разведениями гемолизата инкубируют при 37 °С.
Затем в одну из пробирок с плазмой вносят гемолизат в разведении 10-2 и с помощью секундомера определяют в проходящем свете при постоянном покачивании время появления первых видимых глазом агрегатов тромбоцитов. Повторяют исследование во второй
пробирке с обогащенной тромбоцитами плазмой и разведением гемолизата 10-6. Показания теста выражают в секундах времени агрегации (ВА). С использованием полученных
результатов по математической формуле определяют индекс активации тромбоцитов
(ИАТ). С помощью другой математической формулы определяют агрегационную активность тромбоцитов (ААТ). На основании анализа данных определения ВА, ИАТ, ААТ при
наличии повышения чувствительности тромбоцитов к гемолизату диагностируют различную степень тяжести гестоза. Однако способ-прототип является трудоемким, достаточно
длительным, его осуществление требует выполнения большого числа подготовительных
операций и вычислений. Кроме того, применяемый при реализации способа гемолизат повреждает тромбоциты, что снижает достоверность диагностики гестоза.
Задачей предлагаемого изобретения является упрощение определения степени тяжести гестоза, ускорение и повышение точности постановки диагноза.
Поставленная задача решается следующим образом. Способ определения степени тяжести гестоза, включающий получение обогащенной тромбоцитами плазмы из венозной
крови беременной, внесение индуктора агрегации тромбоцитов и оценку агрегационной
способности тромбоцитов в исследуемом образце, отличающийся тем, что в качестве индуктора агрегации тромбоцитов используют протеазу в не повреждающей тромбоциты
концентрации, а оценку агрегационной способности тромбоцитов осуществляют по величине светопропускания исследуемого образца, причем при значении светопропускания в
пределах 50-69 % степень гестоза определяют как легкую, в пределах 35-49 % как среднюю и в пределах 0-34 % как тяжелую.
Сущность предлагаемого изобретения поясняется чертежами, где:
2
BY 10282 C1 2008.02.28
на фиг. 1 показана кинетика протеазо-индуцированной агрегации тромбоцитов беременной без диагноза гестоз;
на фиг. 2 показана кинетика протеазо-индуцированной агрегации тромбоцитов беременной с диагнозом гестоз легкой степени;
на фиг. 3 показана кинетика протеазо-индуцированной агрегации тромбоцитов беременной с диагнозом гестоз средней степени;
на фиг. 4 показана кинетика протеазо-индуцированной агрегации тромбоцитов беременной с диагнозом гестоз тяжелой степени.
Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.
У беременной утром натощак из локтевой вены берут 3 мл крови, помещают кровь в
центрифужную пробирку, смешивают со стабилизатором - 3,8 % раствором цитрата натрия
в соотношении 9:1 и путем центрифугирования при 200 g в течение 7-10 мин получают
обогащенную тромбоцитами плазму. Затем 225 мкл обогащенной тромбоцитами плазмы и
225 мкл фосфатно-солевого буфера, содержащего катионы кальция, переносят в круглую
пластиковую кювету автоматизированного агрегометра АР 2110 производства "СОЛАР"
(Беларусь) и добавляют 50 мкл раствора протеазы (индуктор агрегации тромбоцитов) в
низких. Протеазо-индуцированная агрегация тромбоцитов быстро развивается и завершается в течение нескольких (3-7) минут. Поскольку при агрегации клеток уменьшается светорассеяние обогащенной тромбоцитами плазмы, то, измеряя величину светопропускания
исследуемых образцов, можно оценить способность тромбоцитов к протеазо-индуцированной агрегации.
Возможность определения степени тяжести гестоза с помощью предлагаемого способа
основана на том, что способность тромбоцитов к протеазо-индуцированной агрегации
снижается в соответствии со степенью его тяжести. При беременности без гестоза способность тромбоцитов к агрегации под действием протеазы максимальна. Близкие к максимальным имеют и конечные значения светопропускания образцов обогащенной
тромбоцитами плазмы (регистрируемые после завершения протеазо-индуцированной агрегации клеток). При гестозе легкой степени способность тромбоцитов к агрегации под
действием протеаз незначительно снижается. Гестоз средней степени тяжести характеризуется существенно сниженной способностью тромбоцитов к протеазо-индуцированной
агрегации. При гестозе тяжелой степени агрегационная способность у тромбоцитов слабо
выражена или вовсе отсутствует. Соответственно, по мере возрастания степени тяжести
гестоза будут снижаться конечные величины светопропускания образцов обогащенной
тромбоцитами плазмы. Следовательно, значения светопропускания исследуемых образцов
отражают способность тромбоцитов к протеазо-индуцированной агрегации и имеют диагностическую ценность. При этом величины светопропускания образцов обогащенной
тромбоцитами плазмы при гестозе тяжелой степени будут иметь наиболее низкие или
близкие к нулевым значения. Таким образом, регистрируемые агрегометром значения светопропускания исследуемых образцов в пределах 50-69 % диагностируют легкую степень
гестоза, 35-49 % - среднюю степень, 0-34 % - тяжелую степень гестоза.
Сущность изобретения поясняется примерами.
Пример 1.
Больная З., 29 лет. Поступила в отделение патологии беременных с диагнозом: беременность I, 29 недель, угрожающие преждевременные роды. Нейро-циркуляторная дистония (НЦД) по гипертоническому типу.
При поступлении артериальное давление (АД) равно 130/90 мм рт. ст., в анализе мочи
выявляются следы белка. Определена способность тромбоцитов к протеазо-индуцированной агрегации по интенсивности светопропускания, которая составила 82 % (фиг. 1).
На основании результатов измерения интенсивности светопропускания суспензии
тромбоцитов диагноз гестоза исключен. Диагноз клинический: беременность I, 29 недель.
НЦД по гипертоническому типу. В дальнейшем беременность протекала без патологии.
3
BY 10282 C1 2008.02.28
Родоразрешена в срок. Проведена операция кесарева сечения в связи с тазовым предлежанием плода. Послеоперационный период без особенностей. Выписана домой на 9 сутки в
удовлетворительном состоянии.
Пример 2.
Больная К., 31 года поступила в отделение патологии с диагнозом: беременность 33-34
недели. Гестоз средней степени. Угрожающие преждевременные роды. Возрастная первородящая НЦД по кардиальному типу. Пролапс митрального клапана, Н0. При поступлении
АД 140/90 мм рт. ст. Отеки голеней. В анализе мочи белок 0,66 г/л. С учетом результатов
измерения светопропускания обогащенной тромбоцитами плазмы после внесения в нее
протеазы, которое составило 60 % (фиг. 2), поставлен диагноз: гестоз легкой степени. Беременность 33-34 недели. Угрожающие преждевременные роды. Возрастная первородящая НЦД по кардиальному типу. Пролапс митрального клапана, Н0.
После лечения беременность протекала до 38 недель с периодическим повышением
АД до 130/90 мм рт. ст., в моче - следы белка. Родоразрешена в срок путем операции кесарево сечение в связи с преждевременным излитием вод, слабостью родовой деятельности.
В родах повышение АД до 130/90 мм рт. ст.
Окончательный клинический диагноз: Беременность 39 недель, роды I, срочные. Гестоз легкой степени. Возрастная первородящая НЦД по кардиальному типу. Пролапс митрального клапана, Н0. Преждевременное излитие вод, слабость родовой деятельности.
Ребенок родился с оценкой по Апгар 7/8 баллов.
Послеоперационный период протекал без особенностей. Выписана домой с ребенком
на 10-е сутки.
Пример 3.
Больная Д., 24 года, поступила в отделение патологии с диагнозом: беременность 3132 недели. Гестоз средней степени. Угрожающие преждевременные роды. Нарушение жирового обмена. Хронический пиелонефрит вне обострения.
При поступлении АД 130/90 мм рт. ст. Отеки голеней. В анализе мочи белок 0,033 г/л.
На основании результатов измерения интенсивности светопропускания обогащенной
тромбоцитами плазмы после внесения в нее протеазы, которая составила 40 % (фиг. 3),
установлена пониженная способность тромбоцитов к протеазо-индуцированной агрегации. Выставлен клинический диагноз: беременность 31-32 недели. Гестоз средней степени. Угрожающие преждевременные роды. Нарушение жирового обмена. Хронический
пиелонефрит вне обострения.
После лечения беременность протекала в течение 38 недель с периодическим повышением АД до 130/90 мм рт. ст., в моче - следы белка. Роды произошли в 38 недель. В родах повышение АД до 140/90 мм рт. ст.
Окончательный клинический диагноз: Беременность 38 недель, роды I, срочные. Гестоз средней степени. Нарушение жирового обмена I степени. Хронический пиелонефрит
вне стадии обострения.
Пример 4.
Больная Т., 28 лет. Поступила в отделение патологии беременных в сроке беременности 34 недели. При поступлении АД 140/90 мм рт. ст., отеки голеней, в анализе мочи белок 0,66 г/л.
Диагноз при поступлении: беременность 34 недели. Гестоз средней степени. НЦД по
гипертоническому типу. Пролапс митрального клапана I ст. Н0.
С учетом результатов определения способности тромбоцитов к протеазо-индуцированной агрегации по интенсивности светопропускания обогащенной тромбоцитами плазмы,
равной 14 % (фиг. 4), выставлен клинический диагноз: беременность 34 недели. Гестоз
тяжелой степени. НЦД по гипертоническому типу. Пролапс митрального клапана I ст. Н0.
4
BY 10282 C1 2008.02.28
Эффекта от лечения не было. Окончательный клинический диагноз - беременность 38
недель, НЦД по гипертоническому типу. Пролапс митрального клапана I ст. Н0. Гестоз
тяжелой степени. Принято решение о досрочном родоразрешении. Родоразрешение в сроке 36 недель путем кесарева сечения. В послеродовом периоде АД 140/90 мм рт. ст.,
130/90 мм рт. ст., белок в анализе мочи 0, 033 г/л. В связи с недоношенным плодом переведена на 2-й этап выхаживания. Выписана из стационара на 21 сутки.
Таким образом, предлагаемый способ позволяет быстро и достоверно определять степень тяжести гестоза, что способствует своевременному корректированию состояния здоровья матери и плода.
Источники информации:
1. А.с. СССР 1792533 МПК5 G 01N 33/48, 1993.
2. А.с. СССР 1691739, МПК5 G 01N 33/48, 1991.
Фиг. 2
Фиг. 3
Фиг. 4
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
5
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
120 Кб
Теги
by10282, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа