close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY10884

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2008.08.30
(12)
(51) МПК (2006)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 10884
(13) C1
(19)
C 21N 1/20
ШТАММ ESCHERICHIA COLI КМИЭВ-22 - ШТАММ-АНТИГЕН
(21) Номер заявки: a 20041133
(22) 2004.12.03
(43) 2006.06.30
(71) Заявитель: Республиканское научноисследовательское дочернее унитарное предприятие "Институт экспериментальной ветеринарии имени
С.Н. Вышелесского" (BY)
(72) Авторы: Андросик Николай Николаевич; Ломако Юрий Васильевич;
Полоз Светлана Васильевна; Карпович Валентина Константиновна
(BY)
(73) Патентообладатель: Республиканское
научно-исследовательское дочернее
унитарное предприятие "Институт
экспериментальной ветеринарии имени С.Н. Вышелесского" (BY)
(56) Зайцев В.В. и др. Ученые записки Учреждения образования "Витебская ордена "Знак Почета" государственная
академия ветеринарной медицины". Т.
39. Ч. 2, С. 29-30.
RU 2222592 C2, 2004.
RU 2035916 C1, 1995.
BY 10884 C1 2008.08.30
(57)
Штамм Escherichia coli КМИЭВ-22 - штамм-антиген.
Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности к биотехнологии,
и касается штамма, выделенного от телят, больных колибактериозом, обладающего антигенной активностью, и может быть использовано для конструирования диагностических и
профилактических препаратов при данном заболевании.
Известно, что традиционные штаммы бактерий вида Escherichia coli населяют желудочно-кишечный тракт животных и человека [1].
Известны штаммы, участвующие в патологических процессах пищеварительного тракта сельскохозяйственных животных [2]. К недостаткам известных штаммов следует отнести тот фактор, что они имеют отличную антигенную структуру.
Известны штаммы эшерихия коли O117, O119, участвующие в патогенезе колибактериоза животных [3]. К недостаткам этих штаммов следует отнести тот фактор, что в антигенной структуре их не содержится специфических белков, комплиментарных возбудителям колибактериоза животных, циркулирующим в определенном регионе. Это касается и
штамма, используемого для создания в Московской ветеринарной академии препарата,
применяемого для иммунизации глубокостельных коров с целью профилактики диарей
новорожденных телят [4], т.к. в состав его входит штамм, отличающийся по антигенной
структуре отсутствием соматического антигена, который имеется у штаммов Escherichia
coli, выделенных от больных животных из хозяйств Республики Беларусь.
Задачей изобретения является селекционирование штамма, пригодного для конструирования диагностических и профилактических препаратов при колибактериозе телят, обладающего наличием в антигенной структуре соматического антигена со стабильными
свойствами и высокой иммуногенностью.
BY 10884 C1 2008.08.30
Поставленная задача достигается тем, что в качестве штамма-антигена был селекционирован штамм Escherichia coli O33, обладающий стабильными свойствами и высокой
иммуногенностью по отношению к эпизоотическим штаммам, циркулирующим в хозяйствах Республики Беларусь.
Штамм выделен в 2001 году в колхозе "Звезда" Чаусского района Могилевской области из почечной ткани теленка пятидневного возраста, больного гастроэнтеритом, путем
посева ткани почки на среду Эндо с последующим выделением чистых культур, сбора
коллекции штаммов и отбора из них активного в антигенном отношении штамма вида Escherichia coli, из которого путем селекции выделен штамм Escherichia coli O33, отличающегося наличием в антигенной структуре соматического антигена О33-П, который был
определен в реакции агглютинации с монорецепторной сывороткой.
Штамм бактерий Escherichia coli O33 (КМИЭВ-22) депонирован в коллекции РНИУП
"Институт экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского Национальной академии наук Беларуси".
Таксонометрическая принадлежность. Согласно определителю бактерий Берджи Escherichia coli относится к 5-ой группе факультативно анаэробных грамотрицательных палочек, подгруппе 1 - семейство Enterobacteriaceae, роду Escherichia, виду Escherichia coli.
Культурально-морфологические признаки. Штамм Escherichia coli О33 (КМИЭВ-22)
при окраске по Граму имеет вид толстых, коротких (0,2-0,7 × 2-4 мкм) грамотрицательных, не образующих спор, палочек.
Физиолого-биохимические признаки. Растет на МПБ, бульоне на основе перевара
Хоттингера с интенсивным помутнением среды, иногда с образованием поверхностной
пленки. Культуры на плотных питательных средах формируют круглые, сочные, блестящие, равномерно выпуклые колонии; на среде Эндо образовывают колонии красного или
малинового цвета с металлическим блеском.
На средах, содержащих углеводы и многоатомные спирты, штаммы ферментируют
глюкозу, лактозу, манит, сорбит, арабинозу, мальтозу, ксилозу, манозу, галактозидазу и
проявляют инертность в отношении адонита, инозита, целлобиоза, оксидазы, продуцируют индол, не образуют сероводород, не разжижают желатин.
Чувствительность к антибиотикам. Штамм Escherichia coli О33 (КМИЭВ-22) высокочувствителен к гентомицину, левомицетину, энрофлоксацину, неомицину, тетрациклину,
амоксициллину (ветримоксину), карбенициллину, флюмеквину, спектиномицину (спектаму), линкомицину, колистину, слабочувствителен к стрептомицину, рифампицину, окситетрациклину, мономицину.
Вирулентность, иммуногенность, антигенная структура. Штамм Escherichia coli O33
(КМИЭВ-22) патогенен. При внутрибрюшинном введении вызывает гибель новорожденных телят и белых мышей массой 14-16 грамм. ЛД50 для белых мышей составляет 2,92⋅109
м.к./0,5 мл составляет 18-ти часовой бульонной культуры. Иммуногенность штамма Escherichia coli O18 составляет 100 %, антигенность - 8,99 log2.
Пример 1.
Производственный штамм выращивают в течение 8-10 часов (не более 12 часов) при
температуре 37 °С; скорости вращения мешалки в начале культивирования - 70, а в конце 300 об/мин; подаче стерильного воздуха в процессе всего периода культивации - 0,1 л/л
среды. Через каждый час культивирования отбирают пробы микробной суспензии, определяют уровень накопления бактериальной массы (по оптическим стандартам мутности) и
устанавливают рН среды. Понижение рН в растущей культуре до 7 и ниже регулируют
подщелачиванием путем добавления 10 %-ного раствора NaOH до рН 7,6-7,8. Через 2, 4,
6 часов от начала засева среду трижды обогащают раствором глюкозы из расчета 0,3 %
сухого вещества глюкозы на 1 л среды.
2
BY 10884 C1 2008.08.30
Пример 2.
Выращенную культуру проверяют на чистоту роста микроскопией мазков. Культура
должна иметь типичный рост на питательных средах и морфологию бактериальных клеток, характерную для E.coli (в мазках). После окончания срока выращивания концентрация бактериальной массы должна быть в пределах 8-12 млрд. м.т. в 1 мл. Концентрацию
определяют по стандарту мутности.
Источники информации:
1. Исмегулова Ф.М. Иммунизация глубокостельных коров ассоциированной вакциной
с целью профилактики диарей новорожденных телят: Автореф. дис. канд. вет. наук МВА,
1994. - С. 15.
2. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования /
Под ред. М.О. Биргера. - М.: Медицина, 1967. - С. 224-225.
3. Зайцев В.В., Фроленко Т.В., Дремач Г.Э. Пути конструирования эффективной вакцины против колибактериоза животных. Ученые записки УО "Витебская Ордена "Знак
почета" государственная академия ветеринарной медицины. Т. 39. Ч. 2. - Витебск, 2003. С. 29-30 (прототип).
4. Краткий определитель бактерий Берги / Под ред. Дж. Хоулта. - М.: Мир, 1980. С. 141-144.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
3
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
72 Кб
Теги
by10884, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа