close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY10904

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2008.08.30
(12)
(51) МПК (2006)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 10904
(13) C1
(19)
A 01N 63/00
ШТАММ БАКТЕРИЙ BACILLUS SUBTILIS БИМ В-262,
ОБЛАДАЮЩИЙ АНТАГОНИСТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ
В ОТНОШЕНИИ ФИТОПАТОГЕНОВ ПЛОДОВЫХ
ИЛИ ЯГОДНЫХ КУЛЬТУР
(21) Номер заявки: a 20060835
(22) 2006.08.11
(43) 2008.04.30
(71) Заявитель: Государственное научное учреждение "Институт микробиологии Национальной академии
наук Беларуси" (BY)
(72) Авторы: Коломиец Эмилия Ивановна; Романовская Татьяна Витальевна; Молчан Ольга Владиславовна;
Здор Наталья Анатольевна; Лобанок Анатолий Георгиевич; Супранович Ромуальд Владимирович;
Плескацевич Ромуальда Иосифовна
(BY)
(73) Патентообладатель: Государственное
научное учреждение "Институт микробиологии Национальной академии
наук Беларуси" (BY)
(56) RU 2216173 C2, 2003.
SU 1706504 A1, 1992.
SU 1738200 A1, 1992.
RU 2099947 C1, 1997.
BY 10904 C1 2008.08.30
(57)
Штамм бактерий Bacillus subtilis БИМ В-262, обладающий антагонистической активностью в отношении фитопатогенов плодовых или ягодных культур.
Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии, предназначено для
защиты плодовых и ягодных культур от болезней и касается нового штамма - основы биопрепарата, который эффективен против фитопатогенных грибов и бактерий - возбудителей парши (Fusicladium dendriticum F.), бактериального рака яблони (Pseudomonas syringae
pv. syringae), обыкновенного (европейского) рака яблони (Nectria galligena Bres), а также
серой гнили земляники (Botrytis cinerea), распространенность и вредоносность которых в
последние годы увеличилась как в крупных промышленных садах государственных хозяйств, так и на участках садоводов-любителей.
Известны способы защиты плодово-ягодных культур от болезней с помощью химикатов (азофоса, препаратов групп бензимидазолов, фениламидов дикарбоксимидов, триазолов и др.). Однако применяемые химические пестициды со временем утрачивают свою
эффективность из-за распространения устойчивых к ним рас фитопатогенов. Кроме того, в
плодоводстве, как и в сельском хозяйстве в целом, использование химических препаратов
приводит к негативным экологическим и санитарно-гигиеническим последствиям нарушениям структуры биоценозов, накоплению высокотоксичных органических соединений в почве и воде, ухудшению качества получаемой продукции. Загрязнения окружающей среды и продукции остатками стойких пестицидов, употребление фруктов и ягод,
BY 10904 C1 2008.08.30
в основном, в свежем виде предопределяют необходимость использования экологически
безопасных методов биологического контроля фитопатогенов, основанных на явлении антагонизма микроорганизмов. Несмотря на очевидную потребность в микробных средствах
борьбы против парши и раковых болезней плодовых, универсальных штаммовантагонистов с широким спектром действия против возбудителей этих болезней не выявлено. В связи с этим поиск микроорганизмов-антагонистов, эффективных в отношении
наиболее вредоносных болезней плодовых и ягодных культур, вызываемых как грибными,
так и бактериальными фитопатогенами, и разработка новых средств защиты на их основе
является актуальной задачей.
Известен используемый против бактериального рака плодовых биопрепарат Пентафаг,
действующим началом которого являются вирионы пяти штаммов бактериальных вирусов
и биологически активные вещества, образующиеся в результате лизиса бактерийвозбудителей [1]. Однако бактерио-фитопатогены, вызывающие европейский рак, паршу
плодовых и серую гниль земляники.
Известен штамм бактерий Pseudomonas fluorescens CR-330-D, эффективный против
бактериального рака винограда [2], однако отсутствуют сведения о его действии на развитие возбудителей парши и рака (европейского и бактериального) плодовых культур и серую гниль земляники.
Известен штамм бактерий Bacillus subtilis ЦМПМ В-2895, предложенный для борьбы с
возбудителем серой гнили земляники Botrytis cinerea [3], однако спектр его антагонистического действия также не распространяется на возбудителей парши и раковых болезней
плодовых культур. К недостаткам изобретения можно отнести выбор способа культивирования штамма (поверхностный), обусловливающий необходимость длительного его выращивания для накопления биомассы, применение дорогостоящих пищевых наполнителей
и использование энергоемкого и длительного метода сушки. Вызывает сомнение также
правильность выбора питательной среды для культивирования бактериального штамма
(сусло-агар).
Известен штамм бактерий Bacillus subtilis ВНИИСХМ 131, используемый для получения препарата против возбудителей гнилей яблок и винограда при хранении [4]. Однако
спектр действия данного штамма ограничен грибными фитопатогенами и не затрагивает
возбудителей болезней бактериальной этиологии. Кроме того, приготовление препарата
на его основе повторяет недостатки предыдущего аналога.
Известны штаммы бактерий Bacillus pumilus NCIMB 40489, Pseudomonas fluorescens
NCIMB 40490 и Bacillus subtilis NCIMB 40491 для предотвращения заболевания фруктов
или овощей после сбора урожая [5]. Однако данные штаммы также оказывают ограниченное действие, направленное на отдельных грибных возбудителей родов Alternaria и Botrytis, вызывающих гнили сельскохозяйственной продукции при хранении.
Известен штамм Pseudomonas lemoignei BKM В-6615 для получения препарата, используемого для стимуляции роста и защиты растений от грибных патогенов в процессе
вегетации и при хранении урожая [6], однако он отличается от заявленного штамма по
спектру антагонистической активности и номенклатуре сельскохозяйственных культур, на
которых он применяется (зерновые, картофель).
Известен штамм бактерий Bacillus subtilis ВНИИСХМ 128 - основа биопрепарата Фитоспорин, который характеризуется антагонистической активностью в отношении ряда
фитопатогенных бактерий и грибов и предназначен для защиты различных видов сельскохозяйственных и декоративных растений, в том числе древесных [7]. Обработка препаратом на основе этого штамма семян ели и сосны уменьшает поражение саженцев
фузариозом. Однако штамм характеризуется низкой активностью в отношении фитопатогенных бактерий рода Pseudomonas (зона подавления роста тест-культур 6-10 мм), его антагонистическое действие не распространяется на возбудителей болезней плодовых
деревьев - паршу и рак, штамм не проявляет ростстимулирующих свойств.
2
BY 10904 C1 2008.08.30
Наиболее близким техническим решением (протопипом) является штамм бактерий
Bacillus subtilis 24 Д (ВНИИСХМ 129) - основа препарата Интеграл, характеризующийся
как антифунгальными, так и антибактериальными свойствами, и предназначенный для
предпосевной обработки семян и вегетирующих растений сельскохозяйственных культур,
плодовых деревьев и ягодных кустарников [8].
Однако он имеет ряд недостатков:
1) отсутствуют сведения об антимикробной активности штамма в отношении возбудителей наиболее вредоносных болезней плодовых и ягодных культур (парши, рака, серой
гнили);
2) пример применения штамма для защиты плодовых и ягодных культур от болезней
не подтвержден экспериментальными данными эффективности его действия;
3) не выявлена способность штамма стимулировать рост растений. Для улучшения
развития растений авторы предлагают добавлять к культуральной жидкости (КЖ) бактерий гуматы и микроэлементы в количестве 25- 30 % от итогового веса препарата, что, несомненно, увеличивает его стоимость и усложняет технологию получения;
4) способность к образованию бактериями спор приводится как основа повышения сохранности препарата, однако в характеристике препарата не указывается значение титра
спор, а представлен лишь титр клеток (5-109 кл/мл) КЖ бактерий.
Задачей изобретения является получение нового непатогенного штамма-антагониста с
более широким спектром антимикробного действия по сравнению с известными аналогами, эффективного против возбудителей наиболее вредоносных болезней плодово-ягодных
культур грибной и бактериальной этиологии, который также характеризуется ростстимулирующими свойствами.
Предлагаемый штамм выделен из ризосферной почвы с использованием мембранной
камеры, образованной двумя дисками мембранных фильтров "Синпор-2". В качестве тестобъекта использовали фитопатогенный гриб Fusicladium dendriticum. Отмытый мицелий
гриба помещали в камеру, которую устанавливали в сосуд объемом 500 мл с почвой и выдерживали 4 сут. при температуре 24 °С. По истечении этого срока камеру извлекали из
почвы, помещали в колбу со стерильной водой и встряхивали на качалке 30 мин. Из суспензии делали высевы на МПА с целью получения изолированных колоний бактерийантагонистов, которые оценивали в качестве агентов биоконтроля различных фитопатогенных микроорганизмов с помощью различных методов (точечного тестирования, реплик, лунок, кольца, отсроченного антагонизма). Отобранный наиболее активный
бактериальный изолят с широким спектром антагонистического действия идентифицировали по определителю Bergey's manyal of systematic bacteriology, Vol. 4, eds. Williams S.W.
et al., Baltimore/London, 1989) как Bacillus subtilis и депонировали в Коллекции непатогенных микроорганизмов ГНУ "Институт микробиологии НАН Беларуси" под регистрационным номером БИМ В-262.
Способы хранения штамма:
1) в пробирках на скошенном мясо-пептонном агаре при + 4 °С, рН 6,8-7,2, перевивка
1 раз в 6 месяцев;
2) в лиофилизированном состоянии в ампулах, частота перезакладки в ампулы 1 раз в
5 лет.
Культурально-морфологические свойства.
При поверхностном культивировании на мясо-пептонном агаре образует округлые колонии серо-белого цвета с зубчатым или чуть волнистым краем; поверхность гладкая.
Клетки подвижные, представляют собой палочки бациллярной формы размером 0,60,7×1,0-1,3 мкм с округлыми концами. Споры эллипсовидные, расположены центрально
или терминально. Спорангиум не раздут. Клетки расположены одиночно, в парах или коротких цепочках. Окраска по Граму положительная.
Физиолого-биохимические признаки.
3
BY 10904 C1 2008.08.30
Облигатный аэроб. Растет при температуре 15-50 °С. Оптимум 30-35 °С.
Отношение к источникам углерода: штамм утилизирует глюкозу, сахарозу, галактозу,
арабинозу, ксилозу, рамнозу, фруктозу, мальтозу, целлобиозу, трегалозу, рафинозу, инозит, дульцит, сорбит, глицерин, цитрат; разжижает желатину, гидролизует крахмал; не
утилизирует лактозу, маннозу, пропионат.
Отношение к источникам азота: штамм ассимилирует сульфат аммония, нитрат аммония, нитрат калия, мочевину, пептон, кукурузный и дрожжевой экстракт, восстанавливает
нитраты до нитритов;
Другие особенности: обладает каталазной активностью, образует ацетоин, разлагает
тирозин, растет на средах Мейнелла, Чапека, в 5-10 % NaCl.
Штамм не является патогенным и токсигенным. Токсикологические исследования
штамма проводили на лабораторных животных - белых мышах, крысах, кроликах. Установлено, что штамм при внутрижелудочном и внутрибрюшинном введении его суспензии
в дозе 3,5-4,0⋅1010 спор/животное, а также интраназально - в дозе 1010 спор/животное не
вызывает у белых крыс клинических симптомов интоксикации и гибели. В. subtilis БИМ
В-262 не обладает раздражающим действием на слизистые оболочки глаз кроликов. При
введении фильтрата 4-суточной жидкой культуры В. subtilis БИМ В-262 подкожно в заднюю лапку мышей в количестве 0,5 мл гибели опытных животных и некроза тканей в месте инъекции не выявлено. При лизисе клеток В. subtilis БИМ В-262 эндотоксины в
окружающую среду не выделяются, так, внутрибрюшинное введение убитой подогреванием культуры не вызывает у животных клинических симптомов интоксикации, гибели,
внешнего изменения тканей в месте инъекции. Проведенные исследования позволили сделать заключение о возможности использования штамма в микробиологическом производстве.
Штамм В. subtilis БИМ В-262 не фитотоксичен, о чем свидетельствует отсутствие
некротических пятен, ожогов и других изменений на листьях редиса после обработки
культуральной жидкостью бактерий кончиков корней проростков (точки роста и меристематической зоны) в течение 1ч и последующем инкубировании растений при 2224 °С. В качестве контроля использовали замоченные в воде и питательной среде растения.
Суть предлагаемого изобретения иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1
Культивирование штамма В. subtilis БИМ В-262 и исследование его антагонистической активности.
Штамм выращивали в условиях глубинной ферментации на среде Мейнелла (г/л:
К2НРО4⋅3Н2О-7,0; КН2РО4-3,0; MgSO4⋅7H2O-0,1; (NH4)2SO4-1,5; Na-цитрат-0,5), с мелассой (30 г/л) в качестве источника углерода в течение 36-48 ч при 28-30 °С. Антагонистическую активность полученной культуральной жидкости (КЖ) бактерий с титром 4-9⋅109
спор/мл определяли методом лунок по диаметру зон задержки роста фитопатогенов. Согласно полученным данным (табл. 1) заявляемый штамм эффективно подавляет рост широкого спектра грибных и бактериальных тест-культур и отличается от аналогов высокой
антагонистической активностью к возбудителям болезней плодовых и ягодных культур.
4
BY 10904 C1 2008.08.30
Таблица 1
Спектр антифунгального и антибактериального действия бактерий-антагонистов
Диаметр зоны подавления роста тест-объектов, мм
Тест-объект
В. subtilis БИМ В-262
аналоги*
Грибы-фитопатогены
Nectria galligena Bress. (европей35
нет данных
ский рак плодовых)
Fusicladium dendriticum Str (пар39
нет данных
ша яблони)
Fusicladium dendriticum X3 (парша
36
нет данных
яблони)
Fusicladium dendriticum Pi (парша
27
нет данных
яблони)
Fusicladium dendriticum V2-2
26
нет данных
(парша яблони)
Botrytis cinerea (серая гниль зем30-35
40 [2];19-21 [3]; 3-13, 6ляники)
18, 8-30, 30-34 [5]; 3040 [6]; 13-15 [7]
Monilia fructigena (гниль плодов
не опр.
12-16 [3]; 18-21 [4]
при хранении)
Penicillium sp. (гниль плодов при
25
14-17 [3]; 15-20 [4] 6-11
хранении)
[5]
Rhizopus sp. (гниль плодов при
не опр.
13-15 [3];17-21 [4]
хранении)
Alternaria sp. (гниль плодов при
26
3-12, 5-17, 17 [5]
хранении)
Alternaria brassicae (черная пятни33
20 [2]
стость овощных культур)
Alternaria radiciana (альтернариоз
не опр.
20-30 [6]
овощных и зерновых культур)
Alternaria alternata (альтернариоз)
30
19-22 [7]
Fusarium oxysporum (фузариоз
33
40[2];10-13[3] 11-13, 9овощных, зернобобовых культур)
14 [7]
Fusarium solani (фузариоз зерно30
40 [2]; 20-40 [6] 7-9, 11вых культур)
13 [7]
Rhizoctonia solani (ризоктониоз
32
40 [2]; 12-14 [7]
овощных культур)
Бактерии-фитопатогены
Erwinia carotovora (гнили овощ25
6-12 [2]; 18-23 [7]
ных культур
Pseudomonas syringae бактерине опр.
10-40 [2]
альный рак винограда)
Pseudomonas syringae 3-3 (бакте37
нет данных
риальный рак плодовых)
Pseudomonas syringae 4-1 (бакте35
нет данных
риальный рак плодовых)
Pseudomonas syringae 2-9 (бакте38
нет данных
риальный рак плодовых)
Pseudomonas syringae 1-1-II (бак40
нет данных
териальный рак плодовых)
5
BY 10904 C1 2008.08.30
Продолжение табл. 1
6-9 [7]
16[3];16-18[7]
Pseudomonas syringae 8511
не опр.
Xanthomonas campestris (сосуди31
стый бактериоз овощных культур)
Xanthomonas phaseoli (бактериоз
26
19-22 [7]
бобовых культур)
* в описании протопипа [8] спектр действия не приведен
Пример 2
Динамика роста и спорообразования бактерий В. subtilis БИМ В-262 при выращивании
на среде с мелассой.
Бактерии В. subtilis БИМ В-262 выращивали в условиях глубинной ферментации на
питательной среде, описанной в примере 1, и контролировали титр клеток и спор общепринятыми методами. В соответствии с результатами, представленными в табл. 2, к концу
наблюдений процесс спорообразования прошел практически полностью и достиг 96 %.
Таким образом, в условиях глубинного культивирования штамм по активности спорообразования превосходит прототип, высокое содержание спор в КЖ обеспечивает сохранность культуры в течение длительного хранения.
Таблица 2
Динамика роста и спорообразования бактерий В. subtilis БИМ В-262
при выращивании в колбах на качалке
Длительность
В. subtilis БИМ В-262
В. subtilis 24 Д (ВНИИСХМ 129)
культивироваТитр клеток, n/мл
Титр спор, n/мл Титр клеток, n/мл Титр спор, n/мл
ния, ч
0
не указан
не указан
1,8⋅107
4,0⋅103
8
3
6
не указан
не указан
1,5⋅10
4,0⋅10
8
4
12
не указан
не указан
4,9⋅10
7,0⋅10
24
не указан
не указан
6,3⋅108
2,8⋅108
8
8
36
не указан
не указан
8,6⋅10
6,8⋅10
9
9
9
48
не указан
9,8⋅10
9,4⋅10
5⋅10
Пример 3
Исследование ростстимулирующего действия бактериальной суспензии штамма В.
subtilis БИМ В-262 на всхожесть семян и развитие проростков растений в стерильных условиях (опыт в чашках Петри).
Для оценки влияния В. subtilis БИМ В-262 на всхожесть, предварительно продезинфицированные семена огурца (сорт Полянский) путем последовательной обработки 1 % раствором KMnO4 (15 мин) и 10 % раствором Н2О2 (15 мин) с последующим промыванием в
дистиллированной воде замачивали в 2 % растворе культуральной жидкости антагониста,
полученной в результате глубинного культивирования (см. пример 1). Обработанные семена помещали в чашки Петри на увлажненные стерильные фильтры по 100 штук. По результатам фитоэкспертизы установлено, что обработка бактериями В. subtilis БИМ В-262
активизирует процессы прорастания семян, повышая всхожесть (на 17 %) и энергию прорастания семян (на 22,5 %) по сравнению с контролем, а также оказывает ростстимулирующее действие на развитие проростков, что проявляется увеличении массы корней и
стеблей на 35 и 10 % соответственно (табл. 3). Полученные данные показывают, что заявленный штамм способен к прямой стимуляции роста растений в стерильных условиях.
6
BY 10904 C1 2008.08.30
Таблица 3
Влияние В. subtilis БИМ В-262 на посевные качества семян
и развитие проростков огурца
Энергия
Лаборатор- Масса корМасса стебля, %
Вариант опыта
прорастаная всхо- ня, % к конк контролю
ния %
жесть, %
тролю
В. subtilis БИМ В-262
98
95,0
135,3
110,0
Контроль (вода)
80
81,0
100,0
100,0
Пример 4
Ростстимулирующее и фитозащитное действие штамма В. subtilis БИМ В-262 в опытах на растениях огурца в почвенном агаре (ПА).
Выращивание культуры проводили, как описано в примере 1. Продезинфицированные
(пример 2) семена растений огурца замачивали в разбавленной в 50 раз КЖ бактерий. Затем семена промывали стерильной дистиллированной водой и проращивали в течение 2-3-х
суток в термостате (при 24-25 °С). Для исследования фитозащитного действия штаммаантагониста на инфицированном фоне проростки дополнительно погружали в суспензию
фитопатогенов P. syringae 181 (титр клеток 7-108) и F. culmorum F-55043 (титр КОЕ 8-107)
и вносили в пробирки с почвенным агаром. В контрольных вариантах для замачивания
семян использовали воду, разбавленную в 50 раз питательную среду Мейнелла, а также
суспензии клеток фитопатогенов (без предварительной обработки антагонистом). Результаты развития проростков оценивали на 30 сутки инкубирования по весу корневой и стеблевой части контрольных и опытных растений (табл. 4-6).
Таблица 4
Оценка ростстимулирующего действия В. subtilis БИМ 262
на растениях огурца в стерильном почвенном агаре
Средняя масса проростка в пересчете на 1 растение, мг
Вариант эксперимента
стебель
корень
K1 (вода)
12,2±0,5
3,0±0,1
K2 (среда Мейнелла)
10,6±0,4
3,9±0,2
B. subtilis БИМ 262
13,8±0,6
5,6±0,2
Таблица 5
Оценка фитозащитного действия В. subtilis БИМ 262 на растениях огурца
на инфекционном фоне Fusarium culmorum в почвенном агаре
Средняя масса проростка в
Вариант эксперимента
пересчете на 1 растение, мг
стебель
корень
K1, (вода)
12,2±0,5
3,0±0,1
K2 (F. culmorum F-55043, без обработки антагонистом)
6,3±0,3
2,6±0,1
В. subtilis БИМ 262 + F. culmorum F-55043
13,3±0,6
3,9±0,2
Таблица 6
Оценка фитозащитного действия В. subtilis БИМ 262 на растениях огурца
на инфекционном фоне Preudomonas syringae в почвенном агаре
Средняя масса проростка в пересчете
Вариант эксперимента
на 1 растение, мг
стебель
корень
К1 (вода)
12,2±0,5
3,0±0,1
К2 (Р. syringae 181, без обработки антагонистом)
11,6±0,5
2,6±0,1
В. subtilis БИМ 262 + P. syringae 181
13,9±0,6
5,0±0,2
7
BY 10904 C1 2008.08.30
Данные табл. 4 свидетельствуют о ростстимулирующем действии штамма, при обработке семян КЖ В. subtilis БИМ В-262 увеличение массы корневой системы составило
86 % к контролю K1 (вода) и 44 % - к контролю К2 (среда Мейнелла). Масса стеблевой
части проростков при этом увеличилась на 13 и 30 % соответственно.
Благодаря обработке семян антагонистом фитозащитное действие В. subtilis БИМ
В-262В наиболее выражено на инфицированном фоне (табл. 5, 6).
Пример 5
Биологическая эффективность КЖ бактерий В. subtilis БИМ В-262 против парши яблони.
Испытания проводили в молодом плодоносящем яблоневом саду колхоза "Узденский"
Минской области. В соответствии со складывающейся фитосанитарной ситуацией плодовые деревья опрыскивали пятикратно, КЖ бактерий В. subtilis БИМ 262 разбавляли водой
в 20 раз (5 % концентрация). Контролями служили варианты: без обработки и с применением эталона (химического фунгицида азофос, 75 % паста, РБ). Эффективность фитозащитного действия препарата оценивали по степени распространения и развития конидиальной стадии возбудителя парши яблони в течение вегетационного периода. В конце
сезона контролировали общий урожай с дерева и выход первосортной продукции.
К концу вегетационного сезона развитие парши на листьях достигает умеренного
уровня и составляет 15,9 % на листьях и 1,7 % на плодах, что превышает эффективность
применения эталона (26,5 % на листьях и 3,0 % плодах) (табл. 7).
Таблица 7
Оценка биологической эффективности КЖ бактерий В. subtilis БИМ В-262
против парши яблони
I учет, июнь
II учет, июль
III учет, август
Вариант
листья
листья
плоды
листья
плоды
Р
R
P
R
P
R
Р
R
P
R
КЖ В. subtilis
2,0
0,4
10,8
2,5
3,3
0,7
53,7 15,9
7,5
1,7
БИМ В-262
Эталон (азо7,0
1,8
16,5
5,0
5,0
1,9
70,7 26,5
9,5
3,0
фос)
К (без обра21,0
6,9
44,0
14,7
9,3
2,7
95,0 44,5 53,5 27,3
ботки)
Примечание: Р - распространенность парши, %; R - развитие болезни, %.
Учет общего урожая на модельных деревьях, а также проведенный расчет выхода первосортной продукции показали (табл. 8), что применение КЖ бактерий В. subtilis БИМ
В-262 способствует повышению урожайности молодых плодоносящих деревьев яблони и
получению высокого выхода первосортной продукции и по эффективности превосходит
используемый эталон азофос (урожайность - на 20,8 ц/га, а выход первосортной продукции - на 12,8 %).
Таблица 8
Эффективность использования КЖ бактерий В. subtilis БИМ В-262
против парши яблони
Общий урожай
Урожай в переВыход первосортВариант
с 1 дерева, кг
счете на 1 га, ц
ной продукции, %
КЖ В. subtilis БИМ В-262
34,3
68,6
83,3
Азофос
23,9
47,8
70,5
Контроль
21,8
43,6
50,6
НСР05
1,2
0,7
1,6
8
BY 10904 C1 2008.08.30
Пример 6
Биологическая эффективность КЖ бактерий В. subtilis БИМ 262 против раковых болезней яблони.
Раковые раны плодовых культур зачищали до здоровой древесины, дезинфицировали
1 %-ным азофосом (75 % паста) и наносили лечебную замазку по следующей схеме: 1.
Эталон I - лечебная замазка (глина и коровяк 1:1) - ЛЗ; 2. Эталон II - ЛЗ с добавлением
биопрепарата пентафаг (20 мл на 1 кг замазки); 3. Нанесение на рану 10 % КЖ В. subtilis
БИМ В-262 с последующим замазыванием ЛЗ; 4. Контроль - без лечения ран. Результаты
испытаний представлены в табл. 9.
Таблица 9
Антагонистическая активность штамма В. subtilis БИМ В-262 по отношению
к возбудителям раковых болезней молодых насаждений яблони
Размер ран
Биологическая
№
Площадь заВариант
эффективпосле
п/п
живления
до лечения
ность, %
лечения
1 Эталон I, ЛЗ
21,7
17,0
4,7
21,5
2 Эталон II, ЛЗ + биопрепарат
43,2
29,5
13,7
31,7
пентафаг
3 КЖ В. subtilis БИМ В12,5
6,6
5,9
47,2
262 + ЛЗ
4 Контроль
44,6
69,3
-24,7
Примечание: знак "-" означает увеличение площади ран.
Полученные данные свидетельствуют о превосходстве использования В. subtilis БИМ
В-262 для защиты яблони от раковых болезней, биологическая эффективность его составляет 47,2 %, что на 15,5 % выше, чем у аналога (Пентафага). Преимущество заявляемого
штамма обусловлено более широким спектром действия и способностью его подавлять
развитие двух возбудителей раковых ран, действующих в симбиозе - грибы N. galligena
Bres. и бактерии P. syringae pv. syringae, в то время как Пентафаг характеризуется только
антибактериальными свойствами и не эффективен против грибного фитопатогена.
Таким образом, заявляемый штамм по важнейшим показателям - спектру антимикробного действия, ростстимулирующей активности, биологической эффективности превосходит известные аналоги и может использоваться для защиты плодовых и ягодных культур
от болезней.
Источники информации:
1. Григорцевич Л.Н., Былинский А.Ф. Бактериофаг против возбудителя бактериоза
плодовых // Актуальные проблемы биологической защиты растений: Материалы науч.практ. конф., Прилуки, 15 апреля 1998 г. - Минск, 1998.- С. 46-47 (аналог).
2. Патент SU 1825446, МПК А 01 N 63/00, С 12 N 1/20, 1990 (аналог).
3. А.с SU 1738200, МПК А 01 N 63/00, С 12 N 1/20, 1989 (аналог).
4. А.с. SU 1706504, МПК А 01 N 63/00, С 12 N 1/20, 1990 (аналог).
5. Патент RU 2126210, МПК А 01 N 63/00, А 01 F 25/00, 1993 (аналог).
6. Патент RU 2121271, МПК А 01 N 63/00), С 12 N 1/20, 1997 (аналог).
7. Патент RU 2099947, МПК А 01 N 63/00, С 12 N 1/20, 1996 (аналог).
8. Патент RU 2216173, МПК А 01 N 63/00, А 01 С 1/6, 2001 (прототип).
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
9
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
1
Размер файла
158 Кб
Теги
патент, by10904
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа