close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY10972

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2008.08.30
(12)
(51) МПК (2006)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
G 01N 30/00
СПОСОБ ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ
СОДЕРЖАНИЯ ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ И
ПОЛИХЛОРИРОВАННЫХ БИФЕНИЛОВ В ЖЕНСКОМ МОЛОКЕ
(21) Номер заявки: a 20060417
(22) 2006.05.04
(43) 2007.12.30
(71) Заявитель: Государственное учреждение "Республиканский научнопрактический центр гигиены" (BY)
(72) Авторы: Шуляковская Ольга Васильевна; Баркатина Елена Николаевна; Застенская Ирина Алексеевна;
Буневич Наталья Викторовна; Фёдорова Татьяна Аркадьевна (BY)
BY 10972 C1 2008.08.30
BY (11) 10972
(13) C1
(19)
(73) Патентообладатель: Государственное
учреждение "Республиканский научнопрактический центр гигиены" (BY)
(56) Методы определения микроколичеств
пестицидов в продуктах питания, кормах
и внешней среде: Справочник. - Т. 1. М.: ВО “Колос”, 1992. - С. 19-25.
Методы определения микроколичеств
пестицидов в продуктах питания, кормах
и внешней среде. - М.: Колос, 1983. С. 10-20.
(57)
Способ газохроматографического определения содержания хлорорганических пестицидов и полихлорированных бифенилов в женском молоке, включающий их экстракцию,
отличающийся тем, что полученный экстракт хроматографируют на слабополярной колонке ДВ-1701 при давлении газа-носителя гелия на входе в колонку 100 кРа, повышении
температуры колонки от 100 до 200 °С со скоростью 30 °С/мин, от 200 до 260 °С 3 °С/мин и от 260 до 280 °С - 30 °С/мин, температуре испарителя 250 °С, температуре детектора 380 °С, при этом каждый из хлорорганических пестицидов и полихлорированных
бифенилов идентифицируют по времени удерживания, концентрацию каждого в экстракте
рассчитывают по площади соответствующего пика, а содержание в молоке - по формуле:
C× V
X=
,
m
где Х - содержание хлорорганического пестицида или полихлорированного бифенила в
молоке, мкг/см3;
С - концентрация хлорорганического пестицида или полихлорированного бифенила в
экстракте, мкг/см3;
V - объем полученного экстракта, см3;
m - объем пробы женского молока, см3.
Изобретение относится к медицине, к разделу лабораторной диагностики.
Известен способ газохроматографического определения хлорорганических пестицидов в грудном женском молоке, основанный на экстракции хлорорганических пестицидов,
очистке экстрактов и их раздельном определении на колонках разной полярности [1].
Способ является прототипом по отношению к заявляемому. Однако указанный способ
ограничен определением только хлорорганических пестицидов.
Задачей заявляемого изобретения является одновременное определение хлорорганических пестицидов (ХОП) и полихлорированных бифенилов (ПХБ).
BY 10972 C1 2008.08.30
Поставленная задача достигается следующим образом.
Предложен способ газохроматографического определения содержания хлорорганических пестицидов и полихлорированных бифенилов в женском молоке, включающий их
экстракцию, при этом полученный экстракт хроматографируют на слабополярной колонке
ДВ-1701 при давлении газа-носителя гелия на входе в колонку 100 кРа, повышении температуры колонки от 100 до 200 °С со скоростью 30 °С/мин, от 200 до 260 °С - 3 °С/мин и
от 260 до 280 °С - 30 °С/мин, температуре испарителя 250 °С, температуре детектора
380 °С, при этом каждый из хлорорганических пестицидов и полихлорированных бифенилов идентифицируют по времени удерживания.
Такой прием позволяет варьировать условия хроматографирования, получить хроматограмму с четко разделенными пиками определяемых контаминантов, что способствует
повышению селективности и чувствительности определения ХОП и ПХБ.
Пример.
Газохроматографическое определение содержания хлорорганических пестицидов и
полихлорированных бифенилов в женском молоке.
1. Экстракция.
К 5-7 см3 пробы грудного молока в делительной воронке вместимостью 50-75 см прибавляют 1 см3 5 %-ного раствора оксалата калия и 5 см3 этанола. Встряхивают в течение
1 мин. Прибавляют 10 см3 диэтилового эфира, встряхивают 1 мин, добавляют 5 см3 гексана и снова встряхивают 1 мин. Отстаивают 15 мин, отделяют эфирный слой, упаривают на
роторном испарителе под вакуумом при 35-40 °С до 0,5 см3.
2. Очистка и концентрирование экстракта.
Остаток по п. 1 растворяют в 30 см3 гексана, переносят в делительную воронку вместимостью 100 см3. Для очистки экстракта добавляют серную кислоту концентрацией
95,72 вес. % до тех пор, пока кислота не обесцветится. Нижний кислотный слой сливают,
а очищенный экстракт промывают сначала дистиллированной водой, затем 1 %-ным раствором NaНСО3 и снова дистиллированной водой до рН = 7. Далее очищенный экстракт
количественно переносят в коническую колбу вместимостью 100 см3, сушат 15 г безводного сульфата натрия, фильтруют в круглодонную колбу вместимостью 50 см3, отгоняют
растворитель на ротационном испарителе до объема 0,5-1,0 см3. Последние капли растворителя удаляют с помощью резиновой груши. К сухому остатку пипеткой вместимостью
1 см3 добавляют 1 см3 гексана, закрывают притертой стеклянной пробкой. Полученный
экстракт в количестве 5 мкл вводят в хроматограф.
3. Приготовление растворов.
3.1. Приготовление основных стандартных растворов хлорорганических пестицидов
концентрацией 1 мкг/см3 (а) и полихлорированных бифенилов концентрацией 0,4 мкг/см3 (б):
а) готовят основной стандартный раствор смеси ХОП концентрацией 1 мкг/см3. Взвешивают на часовом стекле с точностью до ± 0,0001 г 10 мг каждого ХОП. Навеску каждого ХОП количественно переносят в мерные колбы вместимостью 100 см3, добавляют
немного гексана. Колбы встряхивают до полного растворения вещества, затем доводят до
метки гексаном. Концентрация каждого раствора ХОП составляет 100 мкг/см3. По 1 см3
растворов ХОП концентрацией 100 мкг/см3 вносят в колбу вместимостью 100 см3, доводят
до метки гексаном. Концентрация каждого ХОП в смеси составляет 1 мкг/см3. Раствор
хранится в колбе с притертой пробкой в холодильнике в течение 6 месяцев;
б) готовят основной стандартный раствор смеси ПХБ концентрацией 0,4 мкг/см3. По
1 см3 раствора каждого ПХБ концентрацией 10 мкг/см3 в изооктане вносят в колбу вместимостью 25 см3. Доводят раствор до метки гексаном. Раствор может храниться в холодильнике в колбе с притертой пробкой в течение 6 месяцев.
3.2. Приготовление рабочего стандартного раствора смеси ХОП и ПХБ.
Готовят рабочий стандартный раствор смеси ХОП и ПХБ концентрацией 0,2 мкг/см.
Берут 2 см3 и 5 см3 раствора смеси ХОП и ПХБ соответственно пипеткой на 2 см3 и вносят
в мерную колбу вместимостью 10 см3. Доводят до метки гексаном. Раствор хранится в
колбе с притертой пробкой в холодильнике в течение месяца.
2
BY 10972 C1 2008.08.30
3.3. Приготовление градуировочных растворов смеси ХОП и ПХБ.
Для приготовления градуировочных растворов смеси ХОП и ПХБ в гексане с концентрацией 0,0002; 0,0004; 0,0016; 0,0062; 0,0248 берут 0,1 мкг/см3 рабочего стандартного
раствора в мерную колбу вместимостью 10 см3 микрошприцами на 10 мкл; 25 мкл; 100 мкл;
500 мкл и градуировочными пипетками на 2 см3 и 5 см3 вносят 9,8 мкл; 20 мкл; 78 мкл;
310 мкл и 1,24 см3, 5 см3 соответственно и доводят до метки гексаном. Растворы могут
храниться в холодильнике в течение недели.
4. Установление времени удерживания хлорорганических пестицидов и полихлорированных бифенилов.
Для определения времени удерживания ХОП и ПХБ 5 мкл рабочего стандартного раствора, приготовленного по 3.2, хроматографируют не менее 5 раз. Вычисляют среднее арифметическое из величин времени удерживания ХОП и ПХБ в пробах. Допустимое расхождение
времени удерживания определяемых компонентов при хроматографировании двух параллельных проб не должно отличаться более чем на 2 % от ранее установленных величин. Если
время удерживания ХОП и ПХБ отличается от зафиксированного, проверяют правильность
установления температурных режимов программирования колонки и давления газа-носителя.
Условия хроматографирования:
Объем вводимой пробы 5 мкл
Давление газа-носителя
гелия на входе в колонку 100 кРа
C / мин
° C / мин
C / мин
Температура колонки
100 °C 30
°
→ 200 °C 3
→ 260 °C 30
°
→ 280 °C
Температура испарителя 250 °С
Температура детектора 380 °С
Время удерживания исследуемых ХОП и ПХБ представлено в табл. 1
Таблица 1
Время удерживания исследуемых ХОП и ПХБ
Время
Время
Названия
удерживаНазвания изомеров ПХБ
удерживаХОП
ния, мин
ния, мин
ГХБ
5,7
ПХБ 28 (2,4,4' - трихлорбифенил)
7,7
ПХБ 52 (2,2',5,5' - тетрахлорбифенил)
6,6
8,6
α-ГХЦГ
ПХБ 101 (2,2',4,5,5' - пентахлорбифенил)
9,5
11,2
β-ГХЦГ
ПХБ 118 (2,3',4,4',5' - пентахлорбифенил)
7,5
13,8
γ-ГХЦГ
гептахлор
8,0
ПХБ 138 (2,2',3,4,4',5' - гексахлорбифенил)
16,0
альдрин
8,7
ПХБ 153 (2,2',4,4',5,5' - гексахлорбифенил)
14,5
ДДТ
16,6
ПХБ 180 (2,2',3,4,4',5,5' - гептахлорбифенил)
19,1
ДДД
15,9
ДДЕ
12,5
5. Установление градуировочных характеристик ХОП и ПХБ и построение градуировочного графика.
Хроматографируют градуировочные растворы по 2 раза, начиная с самой низкой концентрации, принимая за результат измерения среднее арифметическое двух параллельных
измерений. По полученным хроматограммам измеряют площади пиков, соответствующие
концентрациям ХОП и ПХБ в градуировочных растворах. Строят градуировочные графики
для каждого ХОП и ПХБ (всего 15 графиков), выражающие зависимость площадей каждого контаминанта (численные значения которых откладывают по оси Y) от концентрации
соответствующих градуировочных растворов (по 3.3), численные значения которых откладывают по оси X.
3
BY 10972 C1 2008.08.30
При построении градуировочного графика используют не менее 5 градуировочных
растворов, каждый раствор хроматографируют не менее 2 раз и вычисляют среднее арифметическое определяемых площадей. В области анализа используемых градуировочных
растворов график имеет линейный характер. Графики проходят через начало координат
либо имеют смещение по оси Y на ± 1-2 % от диапазона измерений по этой шкале.
6. Выполнение измерений.
Анализ полученных экстрактов проводится на газовом хроматографе. Условия хроматографирования такие же, как и при построении градуировочного графика п. 5. ХОП и
ПХБ идентифицируют по времени удерживания. Проводят расчет площади их пиков и по
градуировочным графикам, построенным при анализе градуировочных растворов, находят
содержание ХОП и ПХБ в гексановом экстракте.
7. Обработка результатов измерений.
Содержание ХОП и ПХБ в пробе в мкг/см3 рассчитывают по формуле:
C× V
X=
,
m
где X - содержание хлорорганического пестицида или полихлорированного бифенила в
молоке, мкг/см3;
С - концентрация хлорорганического пестицида или полихлорированного бифенила в
экстракте, мкг/см3;
V - объем полученного экстракта, см3;
m - объем пробы женского молока, см3.
Вычисления проводят с точностью до пятого знака с последующим округлением до
четвертого знака. За результат анализа принимают среднее арифметическое определений
концентраций ХОП и ПХБ, найденных в двух параллельных пробах.
Результаты определения ХОП и ПХБ в грудном женском молоке представлены в табл. 2.
Таблица 2
Определение хлорорганических соединений в грудном женском молоке
Предел обнару- Предел обнаруСпособ
Время Извлечение Извлечение
жения ХОП,
жения ПХБ,
определения анализа, ч ХОП, %
ПХБ, %
мг/см3
мг/см3
Известный
44,5-46,5
80-100
0,0002-0,005
(по прототипу)
Предлагаемый
17
85-100
85-100
0,0001
0,0001
Таким образом, заявляемый способ обладает следующими преимуществами:
позволяет одновременно определять ХОП и ПХБ из одного укола в хроматограф;
сокращает время анализа в 2,6-2,7 раза;
увеличивает предел обнаружения ХОП в 2-50 раз;
повышает точность определения.
Источники информации:
1. Методические указания по избирательному газохроматографическому определению
хлорорганических пестицидов в биологических средах (моче, крови, жировой ткани и
грудном женском молоке) № 3151 - 84: Сб. "Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде". - М.: ВО "Колос". - Т. 1. - 1992. С. 19-25 (прототип).
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
4
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
98 Кб
Теги
by10972, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа