close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY11156

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2008.10.30
(12)
(51) МПК (2006)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
A 61K 36/02
ИНГИБИТОР ВИРУСА ЛИМФОЦИТАРНОГО ХОРИОМЕНИНГИТА
(21) Номер заявки: a 20051062
(22) 2005.11.03
(43) 2007.08.30
(71) Заявитель: Государственное учреждение "Научно-исследовательский
институт эпидемиологии и микробиологии" Министерства здравоохранения Республики Беларусь (BY)
(72) Авторы: Рустамова Лариса Михайловна; Богданова Наталья Леонидовна; Петкевич Александр Сергеевич
(BY)
(73) Патентообладатель: Государственное
учреждение "Научно-исследовательский институт эпидемиологии и
микробиологии" Министерства здравоохранения Республики Беларусь
(BY)
BY 11156 C1 2008.10.30
BY (11) 11156
(13) C1
(19)
(56) BY 5162 C1, 2003.
БОГДАНОВА Н.Л. и др. Зооантропонозные болезни, меры профилактики и
борьбы. Материалы международной
научно-практической конференции. Мн., 1997. - С. 55-56.
Зудин Б.И. и др. Современные проблемы инфекционной патологии человека (эпидемиология, клиника, микробиология, вирусология и иммунология).
Статьи и тезисы докладов I итоговой
научно-практической конференции. Мн., 1998. - С. 580.
БОГДАНОВА Н.Л. и др. Принципы и
перспективы диагностики новых и
вновь появляющихся инфекционных
заболеваний. Статьи и тезисы докладов
международной научно-практической
конференции. - Мн., 1997. - С. 89.
САБЫНИН В.М. и др. Современные
проблемы инфекционной патологии
человека (вирусология, микробиология,
иммунология, эпидемиология и клиника). Материалы II научно-практической конференции по итогам выполнения ГНТП "Инфекционные болезни"
1998-2000. - Мн.: ФилСерв плюс, 2001. С. 181-186.
(57)
Применение пищевой добавки "Цинк-спирулина" в качестве ингибитора вируса лимфоцитарного хориоменингита.
Изобретение относится к области вирусологии и может быть использовано как эффективный ингибитор вируса лимфоцитарного хориоменингита (ЛХМ) в культуре клеток и в
живом организме.
Разработка эффективных химио- и других препаратов для терапии и профилактики
инфекций, вызванных РНК-вирусом ЛХМ (семейство Arenaviridae), является задачей актуальной. Средства лечения и профилактики при этой инфекции практически отсутствуют [1].
Геморрагическая лихорадка, развивающаяся при инфицировании этим вирусом, характеризуется поражением центральной нервной системы, паренхиматозных органов, развитием
BY 11156 C1 2008.10.30
геморрагического синдрома, высоко контагиозна - передается воздушно-капельным путем,
протекает на фоне высокой температуры, сопровождается развитием менингита, менингоэнцефалита, могут сопутствовать артрит, миокардит и др., относится к малым иммунодефицитам. Инкубационный период составляет 7-10 дней. Источником и резервуаром
инфекции, вызываемой вирусом ЛХМ, являются мыши [2-5]. Кроме того, инфекция, вызываемая вирусом ЛХМ, регистрируется на территории Республики Беларусь.
Наиболее близким по противовирусному эффекту является соединение оригинального
синтеза: изоникотиноил-гидразон 5-нитро-2-фуральдегид (изогидрофурфурол), представленный в качестве прототипа [6, 7]. Недостатком прототипа является его очевидная токсичность по сравнению с заявляемым. Терапевтические дозы прототипа близки к токсичным. Соединение нерастворимо в воде, слабо - в спирте, диметилсульфоксиде, растворяется
в щелочах.
Задачей изобретения является поиск и расширение арсенала средств, эффективных в
отношении вируса ЛХМ.
Результат достигается применением препарата "Цинк-спирулина" в качестве ингибитора вируса лимфоцитарного хориоменингита.
Препарат ″Zn-спирулина ″, является биологически активной добавкой к пище с эссенциальным микроэлементом - цинком, представляющей собой природный растительный
комплекс микроводоросли спирулины (150 мг) и двухвалентного металла цинка (5 мг).
Выпускается в капсулах. Препарат нетоксичен, хорошо растворим в воде [8].
″Zn-спирулина″ применяется при повышенном уровне сахара в крови; плохих пищеварении, аппетите, обонянии, снижении функции вкусовых рецепторов; нарушении функции половой системы; склонности к злоупотреблению алкоголем; частых простудных
заболеваниях, герпесе; ухудшении памяти, гиперактивности; аллергических реакциях; задержке роста и развития; проблемах с волосами (выпадение, плохой рост), кожей (угри,
псориаз), ногтями, заживлением ран. Продукция ООО "БИОТИКА-С", Россия.
Предложенное решение является новым и неочевидным, так как до сих пор не описано применение указанного препарата в качестве средства, которое может быть применено
в качестве ингибитора вируса ЛХМ, вызывающего геморрагическую лихорадку, и предлагается к использованию по новому назначению. Это свойство выявлено впервые.
Результат изобретения выражается в подавлении ″Zn-спирулиной″ размножения вируса ЛХМ в культуре клеток Vero и на белых беспородных мышах, является новым и высоким: химиотерапевтический индекс препарата равен 16. Он достигается применением
препарата в концентрациях 1600, 800, 400, 200 и 100 мкг/мл. Сущность изобретения поясняется следующими примерами.
Пример 1.
Токсичность исследуемого препарата изучали на культуре клеток Vero, выращенных
на дне флаконов объемом 10 мл. Разведения препарата ″Zn-спирулина″ готовили на среде
Д/МЕМ с добавлением 2 % эмбриональной телячьей сыворотки в концентрациях: 1600,
800, 400, 200, 100 мкг/мл и в объеме 1 мл вносили на отмытый от ростовой среды клеточный монослой. Через 96 часов регистрировали под микроскопом цитодеструктивное действие препарата. Максимально переносимой концентрацией (МПК) считали 1/2 наивысшей концентрации, не вызывающей цитодеструктивных изменений клеток. Таким образом,
было установлено, что МПК исследуемого препарата составляет 1600 мкг/мл.
Пример 2.
Двухсуточную культуру клеток Vero заражали вирусом ЛХМ с множественностью
инфекции 0,1-0,01 бляшкообразующих единиц (БОЕ) на клетку. После адсорбции вируса
на культуре клеток вносили вышеописанный препарат в концентрациях 1600-800, 400,
200, 100 мкг/мл. После 72-часовой инкубации отбирали пробы и определяли инфекционную активность вируса методом редукции бляшек под агарозным покрытием. Контролем
служили культуры клеток, зараженные вирусом ЛХМ в аналогичных условиях, но без
2
BY 11156 C1 2008.10.30
препарата в культуральной среде. Результат оценивали по значению химиотерапевтического индекса (ХТИ), который вычисляли в отношении максимально переносимой концентрации (МПК) к минимально активной концентрации (МАК), эффект которой
находили в диапазоне 1,5-1,7 lg подавления размножения вируса.
Установлено, что препарат ″Zn-спирулина″ обладает выраженным ингибирующим
действием в отношении аренавируса ЛХМ (табл. 1).
Как видно из табл. 1 заявляемый препарат полностью подавляет размножение вируса в
концентрации 1600 и 800 мкг/мл, а в концентрациях 400, 200 и 100 мкг/мл наблюдается
снижение инфекционного титра на 2,5, 2,1 и 1,5 lg соответственно, по сравнению с контролем, где титр вируса составляет 5,5 lg. ХТИ препарата ″Zn-спирулина″, таким образом,
равен 16. В то же время изогидрофурфурол (прототип) имеет ХТИ, равный 12, и обладает
рядом токсических свойств.
Таблица 1
Ингибирование размножения вируса ЛХМ в присутствии препарата ″Zn-спирулина″″
Концентрация Титр вируса Снижение титра
ХТИ МПК/МАК
мкг/мл
lg БОЕ/кл*) вируса lg БОЕ/кл
Стандартный вирус
0
5,5
1600
0
5,5
800
0
5,5
Zn-спирулина
16
400
3,0
2,5
200
3,4
2,1
100
4,0
1,5
25
0
5,5
10
0
5,5
Изогидрофурфурол
12
5
2,3
3,2
2
3,7
1,8
1
4,8
0,7
)
Примечание: * БОЕ/кл - бляшкообразующие единицы.
Препарат
Пример 3.
Исследования препаратов в экспериментах in vivo были выполнены на белых беспородных мышах массой 9-11 г. Животных заражали интрацеребрально в дозе 1000 БОЕ/мышь,
что составляло 10 LD50, в объеме 0,03 мл. Это обеспечивало 100 % гибель контрольных
животных. Препарат разводили на бидистиллированной воде и вводили по схеме: - за
1 час до заражения, далее через 24, 48, 72, 96 часов и 5-9 сутки после заражения в дозе
500 мкг/мышь. Противовирусную активность препарата оценивали по увеличению выживаемости животных, средней продолжительности жизни (СПЖ), удлинению срока жизни
(УСЖ) по сравнению с контрольной группой, не получавшей лечения (табл. 2).
Таблица 2
Влияние препаратов на выживаемость белых беспородных мышей,
зараженных вирусом ЛХМ
Препарат
Zn-спирулина
Изогидрофурфурол
Контроль
Смертность, %
Защита, %
УПЖ (дней)
СПЖ (дней)
30
75
100
70
25
-
5
4
-
13
12
8
В результате проведенных исследований было установлено, что ″Zn-спирулина″ защищает от гибели животных на 70 %, СПЖ - 13 дней, УПЖ - 5 дней, в то время как при при3
BY 11156 C1 2008.10.30
менении прототипа защита значительно ниже и составляет лишь 25 %, СПЖ при этом 12 дней, а УПЖ - 4 дня, по сравнению с контрольной группой животных, не получавших лечение.
Таким образом, противовирусная активность предложенного препарата значительно
превосходит таковую изогидрофурфурола.
Источники информации:
1. Peters C.J., Jahrling P.B., Liu C.T., Kenyon R.H., McKee K.T. Jr., Barrera Oro J.G. Development of Therapeutic Measures // Arenaviruses: Biology and immunotherapy. Experimental
Studies of Arenaviral Hemorrhagic Fevers // Berlin, 1987.
2. Кочеровская М.Ю. Аренавирусы и их значение в патологии человека. - М.: Медицина, 1991.
3. Букринская А.Г. Вирусология. - М.: Медицина, 1986. - С. 302-307.
4. Pfau C.J., Bergold J.H., Casals J., Jonson K.M., Meurphy F.A., Pederson J.R.,
Rawls W.E., Rowe W.P., Webb P.A., Weissenbacher M.C. Arenaviruses. "Interviriligy",
1974, 4. - P. 207-213.
5. Jarling P.B., Peters C.J. // Arch. Pathol. Lab. Med. - 1992. - V-116. - P. 486-488.
6. Богданова Н.Л., Сабынин В.М., Рустамова Л.М., Петкевич А.С. Поиск активных противовирусных веществ на модели вируса лимфоцитарного хориоменингита. Современные
проблемы инфекционной патологии человека. Материалы II научно-практической конференции. - Мн., 2001. - С. 208-312.
7. Патент 5162, 2003.
8. Каталог природных биологически активных добавок к пище Российского производства. - М., 2002. - С. 69-70.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
4
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
1
Размер файла
92 Кб
Теги
by11156, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа