close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY11499

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2009.02.28
(12)
(51) МПК (2006)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
G 01N 33/48
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОЙ
ТРАНСФОРМАЦИИ КОСТНО-ХРЯЩЕВОГО ЭКЗОСТОЗА
КОЛЕННОГО СУСТАВА
(21) Номер заявки: a 20061177
(22) 2006.11.24
(43) 2008.06.30
(71) Заявитель: Государственное учреждение "Республиканский научнопрактический центр травматологии
и ортопедии" (BY)
(72) Авторы: Пашкевич Людмила Антоновна; Воронович Иосиф Робертович; Голутвина Наталья Олеговна
(BY)
BY 11499 C1 2009.02.28
BY (11) 11499
(13) C1
(19)
(73) Патентообладатель: Государственное
учреждение "Республиканский научно-практический центр травматологии
и ортопедии" (BY)
(56) ТРОФАИЛА И.А. Клиническое значение определения содержания ДНК в
остеосаркомах: Автореферат диссертации. - Москва, 2002. - С. 3-20.
RU 95111156 A1, 1997.
UA 38309 A, 2001.
(57)
Способ диагностики злокачественной трансформации костно-хрящевого экзостоза коленного сустава, заключающийся в том, что проводят предварительную клиникорентгенологическую диагностику, а после операции - гистохимическое исследование гистотопографических срезов хрящевых клеток из удаленного операционного материала,
причем определяют содержание ДНК в ядре клетки по методу Фельгена, РНК в цитоплазме - по методу Браше, содержание гликогена - по Бесту, ферментативную активность кислой фосфатазы - по методу Гомори, и при невысоком или незначительно увеличенном
содержании ДНК и РНК, единичных мелких зернах гликогена, низкой активности кислой
фосфатазы диагностируют отсутствие злокачественной трансформации костно-хрящевого
экзостоза, а при повышенном содержании ДНК и РНК, увеличении количества и размеров
зерен гликогена и повышении активности кислой фосфатазы диагностируют наличие злокачественной трансформации костно-хрящевого экзостоза.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для диагностики характера опухолевого процесса коленного сустава.
При выявлении опухолей нередко встречаются диагностические ошибки, особенно в
начальном периоде развития патологического процесса.
В настоящее время нет общепринятых патогистологических признаков для определения начальной стадии злокачественной трансформации доброкачественных опухолевых
процессов, на основании которых можно было бы с достаточной уверенностью говорить о
возможности злокачественного течения опухолевого процесса.
Для выбора наиболее адекватной технологии хирургического лечения ранняя диагностика опухолей, а также дифференциация между доброкачественными и злокачественными новообразованиями весьма актуальна и представляет большие сложности. Это
BY 11499 C1 2009.02.28
обусловливает необходимость выработки дополнительных диагностических критериев
для верификации опухолевого процесса.
Известны способы диагностики злокачественных новообразований, основанные на
сопоставлении клинико-рентгенологических проявлений в сопоставлении с морфологической структурой опухолей костей [1, 2]. Однако из-за отсутствия характерных гистологических признаков для опухолей коленного сустава, на основании которых можно
было бы с достаточной уверенностью говорить о возможности доброкачественного или
злокачественного течения опухоли, ранняя их диагностика представляет большие сложности. В настоящее время морфологические данные являются основой, на которой строятся наши представления о патогенезе и развитии опухоли, доброкачественного или
злокачественного течения опухоли.
Наиболее близким к предлагаемому является способ исследования опухолевых клеток
с помощью ДНК-проточной цитофлуорометрии, в котором определяют содержание ДНК
и индекс пролиферации в клетках опухоли, а также уровень щелочной фосфатазы в сыворотке крови, что позволяет в течение 20-30 мин получить дополнительную объективную
информацию о биологических характеристиках остеосаркомы, важную для клинициста с
точки зрения прогноза течения остеосаркомы, оценки риска метастазирования [3], но не
позволяет выделить переходную форму между доброкачественным и злокачественным
течением опухолевого процесса, в частности, коленного сустава.
Задача, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, - ранняя диагностика по лабораторным признакам доброкачественного или злокачественного течения
опухолевого процесса коленного сустава.
Поставленная задача решается предлагаемым способом диагностики злокачественной
трансформации костно-хрящевого экзостоза коленного сустава, включающим предварительную клинико-рентгенологическую диагностику, а после операции - гистохимическое
исследование гистотопографических срезов хрящевых клеток из удаленного операционного материала, причем определяют содержание ДНК в ядре клетки по методу Фельгена,
РНК в цитоплазме - по методу Браше, содержание гликогена - по Бесту, ферментативную
активность кислой фосфатазы - по методу Гомори, и при невысоком или незначительно
увеличенном содержании ДНК и РНК, единичных мелких зерен гликогена, низкой активности кислой фосфатазы диагностируют отсутствие злокачественной трансформации костно-хрящевого экзостоза, а при повышенном содержании ДНК и РНК, увеличении
количества и размеров зерен гликогена и повышении активности кислой фосфатазы диагностируют наличие злокачественной трансформации костно-хрящевого экзостоза.
Способ осуществляют следующим образом.
У больного с начальными симптомами опухолевого процесса после изучения анамнеза
заболевания с помощью рентгенографии или томографии выясняют локализацию, протяженность и характер патологического процесса.
Диагноз верифицируют путем гистохимических и иммуногистохимических исследований гистотопографических срезов операционного материала больных, удаленных костно-хрящевых экзостозов и прилегающей части материнской кости, в которых определяют
характер новообразования. Для гистохимического исследования берут мягкотканевые кусочки из периферической и центральной части новообразования. Определяют содержание
ДНК по методу Фельгена, РНК - по методу Браше, контрольные срезы обрабатывают рибонуклеазой. Содержание гликогена в хрящевых клетках определяют по Бесту, контрольные срезы обрабатывают диастазой, ферментативную активность кислой и щелочной
фосфатаз выявляют по методу Гомори.
Если экзостоз в исследуемом образце характеризуется невысоким содержанием ДНК в
ядре и РНК в цитоплазме, наличием мелких, единичных зерен гликогена, невысокой ферментативной активностью кислой фосфатазы, это указывает на типичный костнохрящевой экзостоз, если отмечают незначительное увеличение содержания нуклеиновых
2
BY 11499 C1 2009.02.28
кислот и гликогена в хрящевых клетках, повышенная активность кислой фосфатазы, это
указывает на экзостоз с хондромным ростом, при выявлении повышенного содержания
ДНК в ядре и РНК в цитоплазме, а также увеличение количества и размеров зерен гликогена и более высокой ферментативной активности килой фосфатазы можно говорить о начинающемся озлокачествлении процесса в хрящевой части экзостоза.
Способ был исследован и подтвержден в клинике ГУ БелНИИТО на 210 больных (3
группы).
При диагностике заболеваний основное внимание уделялось исследованию взаимосвязи между клиническими проявлениями новообразований, рентгенологическими изменениями и результатами гистохимического анализа гистотопографических срезов
операционного материала больных.
С целью выявления начальных признаков опухолевого роста на гистотопографических
срезах особое внимание обращалось на содержание нуклеиновых кислот и гликогена в
хрящевых клетках, ферментативную активность кислой фосфатазы.
Первая группа больных характеризовалась невысоким содержанием ДНК в ядре и
РНК в цитоплазме, наличием мелких, единичных гранул гликогена, невысокой ферментативной активностью кислой фосфатазы в хрящевых клетках.
У второй группы отмечено незначительное увеличение содержания нуклеиновых кислот и гликогена в хрящевых клетках, повышенная активность кислой фосфатазы.
У третьей группы экзостозов, с настоящей злокачественной опухолью, выявлено повышенное содержание ДНК в ядре и РНК в цитоплазме, а также гранул гликогена, и более
высокая ферментативная активность килой фосфатазы.
Примеры выполнения способа.
Пример 1
Больной Б. Госпитализирован с наличием безболезненного опухолевидного образования, плотного при пальпации, интимно спаянного с костью, медленно увеличивающегося
в размерах по мере роста ребенка. Появлялись ноющего характера периодические боли
при направленности роста образования в сторону нервных стволов. Наблюдалась ограниченность подвижности в коленном суставе.
Проведенные лабораторные исследования периферической крови и мочи отклонений
от нормальных показателей не выявили.
Рентгенологическая диагностика не вызвала затруднений, и картина была характерной
для экзостозной хондродисплазии. Было проведено удаление костно-хрящевого экзостоза
в пределах здоровой кости.
Морфологическому исследованию подвергся удаленный костно-хрящевой экзостоз и
прилегающая часть материнской кости.
Микроскопически изучались гистотопограммы всего экзостоза. В связи с тем, что
имеются случаи злокачественной трансформации костно-хрящевых экзостозов, была поставлена задача определить характер новообразования. Для этого определяли содержание
нуклеиновых кислот и гликогена в хрящевых клетках, ферментативную активность кислой фосфатазы. Данный экзостоз характеризовался невысоким содержанием ДНК в ядре
и РНК в цитоплазме, наличием мелких, единичных гранул гликогена, невысокой ферментативной активностью кислой фосфатазы, что указывало на типичный костно-хрящевой
экзостоз.
Пример 2
Больной В. Госпитализирован с наличием безболезненного опухолевидного образования, плотного при пальпации, интимно спаянного с костью.
При микроскопическом изучении гистотопограммы всего экзостоза отмечено незначительное увеличение содержания нуклеиновых кислот и гликогена в хрящевых клетках,
повышенная активность кислой фосфатазы, что указывало на экзостоз с хондромным ростом. Гистологически по своему строению хрящевая ткань экзостоза в отдельных участках
3
BY 11499 C1 2009.02.28
напоминала хондрому. Это еще не настоящая опухоль - хондрома, но уже и не типичный
костно-хрящевой экзостоз, а переходная стадия (или грань перехода) от пограничного
процесса, каковым является экзостоз, к опухолевому. Назначено дальнейшее наблюдение
за больным.
Пример 3
Больной С. У больного были боли, нарастающие по интенсивности, на рентгенограмме отмечена нечеткость наружного контура экзостоза и его "крапчатость".
Выявлено повышенное содержание ДНК в ядре и РНК в цитоплазме, а также гранул
гликогена, и высокая ферментативная активность кислой фосфатазы, что позволило сделать заключение о начинающемся озлокачествлении процесса. Это подтверждено гистологически.
Сопоставление особенностей клинического течения, рентгенологических изменений и
гистохимического анализа показало наличие агрессивных и озлокачествленных костнохрящевых экзостозов.
Таким образом, предлагаемый способ диагностики позволяет определить по гистохимическим признакам наличие доброкачественного и озлокачествленного течения опухолевого процесса коленного сустава, а также выделить переходную между ними форму,
особенно в затруднительных ситуациях.
Источники информации:
1. Grumwald F. Первичные опухоли костей // Nuklearmediziner. - 1997. - Вып. 4. С. 221-230.
2. Rahman Sheikh Mizanur; Itakura Hideyo. Морфометрия в гистологии. Рабочая установка для анализа изображений в патологоанатомической лаборатории // Anal. and Quant.
Cytol. and Histol. - 1996. - Вып. 6. - C. 471-480.
3. Трофаила И.А. Клиническое значение определения содержания ДНК в остеосаркомах: Дис... канд. мед. наук. - 2002.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
4
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
81 Кб
Теги
by11499, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа