close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY11959

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2009.06.30
(12)
(51) МПК (2006)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 11959
(13) C1
(19)
G 01N 33/02
СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ ЛИЧИНОК И ЯИЦ ГЕЛЬМИНТОВ,
ООЦИСТ И ЦИСТ ПРОСТЕЙШИХ В МОЛОЧНЫХ ПРОДУКТАХ
(21) Номер заявки: a 20061120
(22) 2006.11.09
(43) 2008.06.30
(71) Заявитель: Государственное учреждение "Научно-исследовательский
институт эпидемиологии и микробиологии" Министерства здравоохранения Республики Беларусь (BY)
(72) Автор: Скрипова Лариса Викторовна (BY)
(73) Патентообладатель: Государственное
учреждение "Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии" Министерства здравоохранения Республики Беларусь (BY)
(56) КОТЕЛЬНИКОВ Г.А. Гельминтологические исследования животных и окружающей среды. - М.: Колос, 1984. С. 94-95.
SU 1308900 A1, 1987.
SU 1748757 A1, 1992.
BY 11959 C1 2009.06.30
(57)
Способ обнаружения личинок и яиц гельминтов, ооцист и цист простейших в молочных продуктах, заключающийся в том, что пробу продукта разбавляют 0,5 %-ным раствором жидкого моющего жирорастворяющего средства при объемном соотношении пробы и
раствора 1:(1-4), отстаивают в течение 15-20 мин, сливают надосадочную жидкость, прибавляют к ней дистиллированную воду при их объемном соотношении 1:(1-10), центрифугируют, из полученного осадка готовят препараты для микроскопирования и микроскопируют.
Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторному обнаружению личинок и яиц гельминтов, ооцист и цист простейших.
Санитарными правилами не допускается присутствие в молочной продукции личинок
и яиц гельминтов, ооцист и цист патогенных простейших.
Известны способы исследования молока и молочных продуктов на наличие яиц и личинок гельминтов [1].
Способ № 1. Пробу молока разбавляют 1:1 дистиллированной водой, центрифугируют
10 мин при 3000 об/мин, надосадочную жидкость сливают, а осадок исследуют по методу
флотации: к осадку добавляют флотационный раствор нитрата натрия, смешивают осадок
с ним и через 15 мин поверхностную пленку микроскопируют. Осадок, полученный при
центрифугировании, без обработки исследуют на наличие личинок нематод.
Способ № 2. Пробу творога заливают водой 1:10 и встряхивают каждые 30 мин в течение 5 мин, выдерживают 2-3 часа. Затем массу творога удаляют, жидкость отстаивают
1-1½ ч, надосадочную жидкость или отсасывают пипеткой, или осторожно сливают. Осадок взбалтывают, переливают в центрифужные пробирки и центрифугируют 5-10 мин при
3000 об/мин. Надосадочную жидкость сливают, а осадок смывают флотационным раствором нитрата натрия в стаканчики объемом 50-100 мл, доливают раствор до полного объема
BY 11959 C1 2009.06.30
и оставляют на 20-30 мин. Поверхностную пленку снимают металлической петлей на
предметное стекло и микроскопируют.
Способ № 3. Исследование сливочного масла проводят так же, но флотационный раствор подогревают до 37-38 °С, для того чтобы облегчить отделение яиц гельминтов от
всплывающего на поверхность жира.
Недостатками способов являются:
недостаточное отделение яиц гельминтов и цист, ооцист простейших из молочного
белка флотирующими реагентами;
потери возбудителей при снятии поверхностной пленки для микроскопии, образовавшейся после применения флотационного раствора;
длительность исполнения методики до 5 часов 15 минут;
низкая эффективность обнаружения яиц и личинок гельминтов до 26 %;
невыявляемость цист и ооцист простейших из-за их деструкции (разрушения) после
действия флотационного раствора нитрата натрия.
Задачей изобретения является разработка способа с эффективностью обнаружения личинок и яиц гельминтов, цист и ооцист простейших в молоке и молочных продуктах до
96 %, снижение трудоемкости и экономическая выгода.
Технический результат достигается в способе обнаружения личинок и яиц гельминтов, ооцист и цист простейших в молочных продуктах, заключающемся в том, что пробу
продукта разбавляют 0,5 %-ным раствором жидкого моющего жирорастворимого средства
при объемном соотношении пробы и раствора 1 % (1-4), отстаивают в течение 15-20 минут,
сливают надосадочную жидкость, прибавляют к ней дистиллированную воду при их объемном соотношении 1: (1-10), центрифугируют, из полученного осадка готовят препараты
для микроскопирования и микроскопируют.
Технический результат выражается в том, что раствор жидкого моющего, жирорастворимого средства действует в качестве растворителя молочного белка любой жирности,
при этом выделившиеся личинки и яйца гельминтов, цисты и ооцисты простейших находятся во взвешенном состоянии, а появившиеся молочные хлопья оседают на дно емкости.
Представленное действие способствует эффективности обнаружения возбудителей до
98,6 %. Время на исследование сокращено в 4-5 раз в сравнении с существующими методами.
Преимущества предлагаемого способа:
растворяет молочный белок и обезжиривает, что способствует отделению личинок и
яиц гельминтов, ооцист и цист простейших;
обнаруживаются ооцисты и цисты простейших;
исключается потеря возбудителей и их деструкция (разрушение);
сокращается время проведения методики исследования молочных продуктов;
упрощается метод исследования (смешение с жирорастворимым средством, центрифугирование, микроскопия осадка);
удешевление анализа за счет исключения применения химреактивов, уменьшения затрат времени на проведение исследования.
Сущность изобретения иллюстрируется примерами.
Пример 1
Санитарно-паразитологическое исследование молока.
Молоко в количестве 10 мл разбавляют 10 мл 0,5 % раствора жидкого моющего, жирорастворимого средства (например, которое используется для мытья посуды) и отстаивают
15-20 мин. Надосадочную жидкость с отделившимися возбудителями сливают в чистую
пробирку. Для осаждения возбудителей добавляют такое же количество дистиллированной воды, размешивают стеклянной палочкой и центрифугируют в течение 5 мин при
1500 об/мин (600g), из полученного осадка готовят препараты для микроскопирования и
микроскопируют. Время, затраченное на исследование: 40 минут.
2
BY 11959 C1 2009.06.30
Пример 2
Санитарно-паразитологическое исследование молока 4-10 % жирности, масла, кефира,
творога, сыров.
Пробу продукта в количестве 10 мл, г помещают в фарфоровую чашку, заливают
0,5 % раствором жидкого моющего, жирорастворимого средства в количестве 40 мл,
тщательно растирают пестиком и оставляют на 15-20 мин. Надосадочную жидкость с
отделившимися возбудителями сливают в чистый стакан. Для осаждения возбудителей
в стакан добавляют 5-10 частей дистиллированной или кипяченой воды, размешивают
стеклянной палочкой и отстаивают 5 мин. Центрифугируют 5 мин, из полученного осадка
готовят препараты для микроскопирования и микроскопируют.
Время, затраченное на исследование: 45 мин.
Пример 3
Санитарно-паразитологическое исследование молока 4-10 % жирности, масла, кефира,
творога, сыров.
Пробу продукта в количестве 10 мл, г помещают в фарфоровую чашку, заливают
0,5 % раствором жидкого моющего, жирорастворимого средства в количестве 40 мл,
тщательно растирают пестиком и оставляют на 15-20 мин. Надосадочную жидкость с
отделившимися возбудителями сливают в чистый стакан. Для осаждения возбудителей в
стакан добавляют 5-10 частей дистиллированной или кипяченой воды, размешивают стеклянной палочкой и отстаивают 5 мин. После отстаивания в стакан опускают концентратор
гидробиологический [2] на 5 мин (ритмично меняя глубину погружения - "вверх", "вниз")
и исследуют по инструкции. Из осадка готовят препараты для микроскопии и микроскопируют.
Время, затраченное на исследование: 1 час 10 минут.
Проведенные экспериментальные исследования по обнаружению личинок и яиц гельминтов, ооцист и цист простейших в молочных продуктах показали, что при использовании
разработанного способа количество обнаруженных яиц гельминтов и ооцист, цист простейших увеличилось в 3,7 раза, т.е. с 30 до 98 экземпляров. Данные приведены в таблице.
Паразитарные агенты
Количество экземпляров паразитарных агентов в одной пробе
Способ-прототип
Предлагаемый способ
Яйца аскариды
30
98
Цисты лямблий
0
96,8
Ооцисты криптоспоридий
0
96
Предлагаемый способ испытан лабораторно и одобрен Министерством здравоохранения Республики Беларусь (2005 г.)
Источники информации:
1. Котельников Г.А. Гельминтологические исследования животных и окружающей
среды. - М.: Колос, 1984. - С. 94-95.
2. Проблемы инфекционной патологии XXI века: Материалы юбилейной конференции, посвященной 80-летию НИИЭМ. - Минск, 2004. - С. 142-143.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
3
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
1
Размер файла
76 Кб
Теги
патент, by11959
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа