close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY11965

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2009.06.30
(12)
(51) МПК (2006)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
A 61B 5/145
G 01N 33/48
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СОСТОЯНИЯ Т-СИСТЕМЫ
ИММУНИТЕТА У БОЛЬНОГО ВИРУСНЫМ ГЕПАТИТОМ В, С
ИЛИ МИКСТ-ГЕПАТИТОМ В+C
(21) Номер заявки: a 20060611
(22) 2006.06.19
(43) 2008.02.28
(71) Заявитель: Государственное учреждение "Научно-исследовательский
институт эпидемиологии и микробиологии" Министерства здравоохранения Республики Беларусь
(BY)
(72) Авторы: Титов Леонид Петрович;
Тарасюк Владимир Васильевич;
Черношей Дмитрий Александрович; Жмуровская Людмила Степановна (BY)
BY 11965 C1 2009.06.30
BY (11) 11965
(13) C1
(19)
(73) Патентообладатель: Государственное
учреждение "Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии" Министерства здравоохранения Республики Беларусь (BY)
(56) ТАРАСЮК В.В. и др. Медицинская
иммунология, 2002 г., т. 4, № 2, С. 261.
RU 2187119 C2, 2002.
BY 2890 C1, 1999.
(57)
Способ диагностики состояния Т-системы иммунитета у больного вирусным гепатитом В, С или микст-гепатитом В + С, заключающийся в том, что определяют в периферической крови количество лимфоцитов с маркерами CD11b, CD25, HLA-DR и CD95 и, если
отношение лимфоцитов CD95+ к CD11b+ составляет 2,08 ± 0,08, CD95+ к CD25+ составляет 2,14 ± 0,31 и CD95+ к HLA-DR+ составляет 1,93 ± 0,22, диагностируют нормэргию
Т-системы иммунитета, а при более высоких значениях этих отношений - анергию
Т-системы иммунитета.
Изобретение относится к области медицины, в частности к способам исследования
иммунной системы, и может быть использовано для диагностики функционального состояния клеток Т-системы иммунитета у больных вирусными гепатитами В (ВГВ), С
(ВГС) и микст-гепатитом В + С (МГВС).
Известен способ исследования Т-звена иммунитета путем постановки внутрикожных
тестов с антигенами и/или митогенами in vivo [1].
Недостатками известного способа являются его трудоемкость, инвазивная процедура,
недостаточная информативность вследствие неполной дифференциации типа реагирования иммунной системы на используемые митогены и невысокая точность (субъективность
полученных результатов).
В качестве прототипа выбран способ диагностики состояния Т-системы иммунитета
при различной иммунопатологии, заключающийся в иммунофенотипировании клеток периферической крови методом проточной цитометрии или иммунофлюоресцентным мето-
BY 11965 C1 2009.06.30
дом с целью определения поверхностных маркеров на мембране иммунокомпетентных
клеток (ИКК) [2].
Недостатком вышеизложенного способа является трудность интерпретации полученного результата без учета взаимосвязи между определенными отдельно функциональными
показателями клеток Т-системы иммунитета. Обычное определение экспрессии данных
рецепторов на ИКК является менее информативным при имеющихся нарушениях.
Задачей настоящего изобретения является создание более эффективного способа, а
именно повышение точности и информативности известного способа, диагностики состояния Т-системы иммунитета у больных ВГВ, ВГС и МГВС.
Поставленная задача решается за счет того, что в способе диагностики состояния
Т-системы иммунитета у больного вирусным гепатитом В, С и микст-гепатитом В + С,
заключающемся в том, что определяют в периферической крови количество лимфоцитов с
маркерами CD11b, CD25, HLA-DR и CD95 и, если отношение лимфоцитов CD95+ к
CD11b+ составляет 2,08 ± 0,08, CD95+ к CD25+ составляет 2,14 ± 0,31 и CD95+ к HLA-DR+
составляет 1,93 ± 0,22, диагностируют состояние нормэргии Т-системы иммунитета, а при
более высоких значениях этих отношений - анергию Т-системы иммунитета.
Отношение (индекс) CD95+ к CD11b+ определяет адгезивную способность ИКК, а отношения CD95+ к CD25+ и CD95+ к HLA-DR+ характеризуют этапы ранней активации
(процессы секреции и рецепции цитокинов) и поздней активации (дифференцировка
ИКК). Таким образом, предложенные индексы позволяют оценить вклад каждого этапа
активации в исход развития клеточного иммунного ответа. По полученным результатам
констатируют позитивную или негативную клеточную активацию. Позитивная активация
представляет собой "нормально" происходящий процесс активации Т-лимфоцитов, завершающийся осуществлением их эффекторной функции. Негативная активация приводит
ИКК к апоптозу, минуя эффекторную фазу, что существенно ограничивает протективные
возможности ИКК и приводит к формированию состояния анергии иммунной системы
при различной иммунопатологии [3]. При повышении этих индексов - состояние анергии,
т.е. состояние специфической неотвечаемости Т-системы иммунитета, что обусловлено
развитием иммунного ответа по пути апоптоза (негативная активация).
Способ осуществляют следующем образом: забирают кровь из периферической вены
(5-6 мл) в пробирки с гепарином (20 ЕД/мл), выделяют мононуклеары периферической
крови (МПК) методом градиентного центрифугирования или иммунофенотипирование
проводят в цельной крови. Экспрессия CD11b, CD25, HLA-DR и CD95 антигенов на МПК
определяется в реакции иммунофлюоресценции с помощью соответствующих моноклональных антител согласно инструкции производителя. Так, к 100 мкл МПК (1,0 × 106/мл)
или цельной крови добавляют 5-20 мкл соответствующего раствора моноклональных антител и инкубируют в течение 15-30 мин. Затем, в случае с выделенными МПК, проводят
двойную отмывку фосфатно-солевым буфером (ФСБ) и ресуспензируют в 300-500 мкл
1 % раствора параформальдегида для фиксирования. В случае с цельной кровью после
взаимодействия с моноклональными антителами добавляют лизирующий раствор по 2 мл
и инкубируют в темноте в течение 10 мин с последующей двойной отмывкой ФСБ и ресуспензированием в 300-500 мкл 1 % раствора параформальдегида. Учет реакции производится на проточном цитофлюориметре или люминесцентном микроскопе с
последующим определением относительного или абсолютного количества клеток, экспрессирующих изучаемые поверхностные антигены. Затем рассчитывают соотношения
относительного или абсолютного количества клеток, экспрессирующих маркер апоптоза
(CD95), к относительному или абсолютному количеству клеток, экспрессирующих маркеры адгезии (CD11b), ранней (CD25) и поздней активации (HLA-DR): 1) CD95+/CD11b+, 2)
CD95+/CD25+ и 3) CD95+/HLA-DR+.
2
BY 11965 C1 2009.06.30
Значения индексов CD95+/CD11b+, CD95+/CD25+ и CD95+/HLA-DR+ у практически
здоровых людей, свидетельствующие о состоянии нормэргии Т-системы иммунитета,
представлены в таблице.
Соотношения клеток, экспрессирующих маркеры адгезии, активации
и апоптоза, в норме и при ВГС, ВГВ, МГВС
Контрольная
Группы больных
Индексы
группа
ОГВ
ХГВ
ОГС
ХГС
МГВС
(n = 25)
(n = 38)
(n = 18)
(n = 38)
(n = 42)
(n = 24)
+
+
CD95 /CD11b
2,08±0,08
1,90±0,1 2,50±0,13 2,17±0,22 2,76±0,33* 2,29±0,24
CD95+/CD25+
2,14±0,05 5,00±0,58* 5,12±0,96* 4,24±0,58* 6,23±0,92* 4,38±0,53*
CD95+/HLA-DR+ 1,93±0,06 2,58±0,28** 2,96±0,28* 3,15±0,32* 3,64±0,38* 3,12±0,56*
Примечание: * - Р < 0,05; ** - Р < 0,1.
При ВГВ, ВГС и МГ выявлено значительное увеличение данных индексов по сравнению с таковыми в контрольной группе (Р < 0,05), что указывает на состояние анергии
(таблица). Повышение данных соотношений свидетельствует о пониженной адгезивной и
активационной способности Т-лимфоцитов на фоне высокой готовности их к процессам
апоптоза, приводящим к повышенной и "неправильной" активации ИКК и развитию иммунного ответа по пути апоптоза (негативная активация), что способствует формированию вирусоспецифической анергии Т-системы иммунитета и неэффективности
противовирусного ответа при данной патологии. Наличие состояния анергии иммунной
системы лежит в основе хронизации и персистенции HBV- и HCV-инфекций.
Способ подтверждается примерами:
1. Больной А., 28 лет, история болезни № 1499, дата госпитализации 24.04.2000.
Поступил в инфекционную больницу на 10 день болезни с клиническими признаками
острого вирусного гепатита. После биохимического и серологического обследования установлен диагноз: Острый гепатит С (anti-HCV+), желтушная среднетяжелая форма.
Результаты лабораторного обследования.
При поступлении. Биохимический анализ крови (БАК): билирубин общий - 154,0 (прямой (пр.) - 90,2) мкмоль/л, АлАТ - 40,5 ммоль/ч/л, тимоловая проба (ТП) - 1,1 ед. Общий
анализ крови (OAК): лейкоциты (L) - 5,6 × 109/л; лимфоциты (л) - 33 %.
Фенотипические параметры ИКК: CD3 - 71,98 % (1,33 × 109/л), CD4 - 33,06 %
(0,61 × 109/л), CD8 - 24,54 % (0,45 × 109/л), CD11b - 18,38 % (0,29 × 109/л), CD16 - 12,61 %
(0,23 × 109/л), CD20 - 8,56 % (0,16 × 109/л), CD25 - 6,38 % (0,12 × 109/л), CD95 - 41,74 %
(0,77 × 109/л), HLA-DR - 9,57 % (0,18 × 109/л).
При расчете CD95+/CD11b+, CD95+/CD25+ и CD95+/HLA-DR+ выявлено состояние
анергии: CD95+/CD11b+ - 2,27; CD95+/CD25+ - 6,54; CD95+/HLA-DR+ - 4,36.
Проводимое симптоматическое лечение способствовало улучшению состояния больного и снижению симптомов интоксикации.
При повторном обследовании (20 сутки болезни). БАК: билирубин общий - 69,5 (пр. 48,8) мкмоль/л, АлАТ - 34,5 ммоль/ч/л, ТП - 1,6 ед. OAК: L - 7,8 × 109/л; л - 34 %.
Фенотипические параметры ИКК: CD3 - 60,03 % (1,59 × 109/л), CD4 - 20,55 %
(0,54 × 109/л), CD8 - 49,62 % (1,34 × 109/л), CD11b - 18,38 %(0,29 × 109/л), CD16 - 27,48 %
(0,73 × 109/л), CD20 - 4,61 % (0,12 × 109/л), CD25 - 3,45 % (0,09 × 109/л), CD95 - 46,89 %
(1,24 × 109/л), HLA-DR - 6,25 % (0,17 × 109/л).
Несмотря на положительную клинико-лабораторную динамику, рассчитываемые соотношения клеток имели тенденцию к повышению (CD95 + /CD11b+ - 2,90; CD95+/CD25+ 13,59; CD95+/HLA-DR+ - 7,50) и сохраняли анергический характер. Это свидетельствует о
состоянии анергии Т-системы иммунитета, возможном неблагоприятном исходе острого
гепатита С и последующей хронизацией процесса.
3
BY 11965 C1 2009.06.30
Последующее диспансерное наблюдение за больным после выписки из стационара
подтвердило развитие хронического гепатита С.
2. Больной Т., 41 год, история болезни № 1462, дата госпитализации 20.04.2000.
Хронический гепатит С установлен в 1998 г., когда впервые были выявлены antiHCV+. Поступил в инфекционную больницу для обследования и уточнения активности
инфекционного процесса.
Жалоб на момент осмотра не предъявлял.
Результаты лабораторного обследования.
БАК: билирубин общ. - 24,4 (пр. - нет) мкмоль/л, АлАТ - 1,8 ммоль/ч/л, ТП - 9,2 ед.
OAК: 26.04.2000 L - 4,6 × 109/л; л - 39 %, п - 8 %, с - 45 %, м - 6 %, э - 2 %, СОЭ - 8 мм/ч.;
08.05.2000 L - 4,9 × 109/л; л - 30 %.
Установлен хронический гепатит С (anti-HCV+) клинико-биохимически минимальной
степени активности.
Фенотипическая характеристика ИКК проведена дважды с интервалом в 2 недели:
26.04.2000 г. - CD3 - 76,89 % (1,38 × 109/л), CD4 - 43,08 % (0,77 × 109/л), CD8 - 46,88 %
(0,84 × 109/л), CD11b - 26,92 % (0,48 × 109/л), CD16 - 34,38 % (0,62 × 109/л), CD20 - 6,7 %
(0,12 × 109/л), CD25 - 9,91 % (0,18 × 109/л), CD95 - 52,42 % (0,94 × 109/л), HLA-DR - 20,0 %
(0,36 × 109/л); 08.05.2000 г. - CD3 - 80,17 % (1,18 × 109/л), CD4 - 40,22 % (0,59 × 109/л),
CD8 - 26,54 % (0,39 × 109/л), CD11b- 14,0 % (0,21 × 109/л), CD16 - 10,07 % (0,15 × 109/л),
CD20 - 6,67 % (0,10 × 109/л), CD25 - 7,24 % (0,11 × 109/л), CD95 - 48,0 % (0,71 × 109/л),
HLA-DR - 13,43 % (0,20 × 109/л).
Соотношения клеток, экспрессирующих маркеры активации и апоптоза, свидетельствуют о состоянии анергии иммунной системы: при поступлении - CD95+/CD11b+ - 1,95,
CD95+/CD25+ - 5,29, CD95+/HLA-DR+ - 2,62; на 12 сутки - CD95+/CD11b+ - 3,42,
CD95+/CD25+ - 6,63, CD95+/HLA-DR+ - 3,57.
3. Больной М., 25 лет, история болезни № 493, дата госпитализации 06.02.2000.
Поступил в инфекционную больницу на 14 день болезни с жалобами на боль в животе,
тошноту, рвоту, желтуху на коже и видимых слизистых, холурию, ахолию.
Установлен диагноз: Микст-гепатит: Острый гепатит В (HBsAg+, anti-HBcor Ig M+),
желтушная среднетяжелая форма на фоне хронического гепатита С (anti-HCV+).
Результаты лабораторного обследования.
При поступлении. БАК: билирубин общий - 180,4 (пр. - 96,4) мкмоль/л, АлАТ 42,0 ммоль/ч/л, ТП - 8,4 ед. OAК: L - 8,5 × 109/л; л - 24 %, п - 9 %, с - 51 %, м - нет, э - 5 %,
СОЭ - 2 мм/ч.
Фенотипические параметры ИКК: CD3 - 61,02 % (1,24 × 109/л), CD4 - 11,77 %
(0,24 × 109/л), CD8 - 36,88 % (0,75 × 109/л), CD11b - 13,82 % (0,28 × 109/л), CD16 - 31,85 %
(0,65 × 109/л), CD20 - 9,23 % (0,19 × 109/л), CD25 - 4,55 % (0,09 × 109/л), CD95 - 33,63 %
(0,69 × 109/л), HLA-DR - 10,22 % (0,21 × 109/л).
Расчет соотношений клеток, экспрессирующих маркеры активации и апоптоза, выявил
состояние анергии Т-системы иммунитета: CD95+/CD11b+ - 2,43; CD95+/CD25+ - 7,39;
CD95+/HLA-DR+ - 3,29.
После проведенного лечения (дезинтоксикационная терапия + гепатопротекторы) в
удовлетворительном состоянии больной выписан.
При выписке. БАК: билирубин общ. - 31,9 (пр. - нет) мкмоль/л, АлАТ - 2,5 ммоль/ч/л,
ТП - 2,2 ед. OAК: L - 7,8 × 109/л; л - 51 %, п - 4 %, с -34 %, м - 5 %, э - 3 %, СОЭ - 4 мм/ч.
Фенотипические параметры ИКК: CD3 - 58,14 % (2,31 × 109/л), CD4 - 36,04 %
(1,43 × 109/л), CD8 - 32,09 % (1,28 × 109/л), CD11b - 24,07 % (0,96 × 109/л), CD16 - 30,03 %
(1,20 × 109/л), CD20 - 15,56 % (0,62 × 109/л), CD25 - 7,41 % (0,29 × 109/л), CD95 - 59,33 %
(2,36 × 109/л), HLA-DR - 15,86 % (0,63 × 109/л).
4
BY 11965 C1 2009.06.30
Соотношения сохранили высокие цифры (CD95+/CD11b+ - 2,46; CD95+/CD25+ - 8,01;
CD95+/HLA-DR+ - 3,74), что может указывать на активизацию хронического гепатита С
(дальнейшее угнетение функции иммунной системы) после улучшения клиникобиохимических показателей острого гепатита В.
Последующее диспансерное наблюдение за больным через 6 месяцев выявило:
HBsAg-, HBcor IgG+, ДНК HBV-, anti-HCV+, РНК HCV+.
4. Больной С., 16 лет, история болезни № 5105, дата госпитализации 01.12.1999.
Поступил в инфекционную больницу на 6 день болезни с жалобами на боль в животе,
тошноту, рвоту, желтуху на коже и видимых слизистых, холурию, ахолию. Установлен
диагноз: Острый ВГВ (HBsAg+, anti-HBcor IgM+), тяжелое течение.
Результаты лабораторного обследования.
При поступлении биохимический анализ крови (БАК): билирубин общий 236,2 мкмоль/л, АлАТ - 58,2 ммоль/ч/л. Общий анализ крови (OAК): лейкоциты (L) 6,2 × 109/л; лимфоциты (л) - 48 % (6,2 × 109/л).
Фенотипические параметры иммунокомпетентных клеток (ИКК): CD3 - 60,8 %
(1,81 ×109/л), CD4 - 37,1 % (1,11 × 109/л), CD8 - 29,9 % (0,83 × 109/л), CD11b - 12,95 %
(0,39 × 109/л), CD16 - 14,5 % (0,43 × 109/л), CD20 - 12,5 % (0,37 × 109/л), CD25 - 12,7 %
(0,38 × 109/л), CD95 - 27,7 % (0,83 × 109/л), HLA-DR - 13,95 % (0,42 × 109/л).
Значения индексов апоптоза (CD95+/CD11b+ - 2,14; CD95+/CD25+ - 2,18 и CD95+/HLA+
DR - 1,99) диагностировали состояние нормэргии.
После проведенного лечения (дезинтоксикационная терапия + гепатопротекторы) и
улучшения клинико-биохимических показателей острого ВГВ пациент был выписан в
удовлетворительном состоянии. При выписке значения индексов апоптоза практически не
изменились (CD95+/CD11b+ - 2,16; CD95+/CD25+ - 2,1; CD95+/HLA-DR+ - 1,9), указывая на
развитие адекватного противовирусного ответа Т-системы иммунитета (состояние нормэргии).
5. Больной У., 18 лет, история болезни № 1037, дата госпитализации 17.03.1999.
Поступил в отделение вирусных гепатитов ГИКБ г. Минска на 7 день болезни с клиническими признаками острого гепатита: 4-й день желтушного периода с жалобами на
слабость, отсутствие аппетита, тошноту, плохой сон, боль в области правого подреберья,
жидкий стул. После биохимического и серологического обследования установлен диагноз: Острый гепатит С (анти-НСV+, РНК HCV+), среднетяжелая форма.
Результаты лабораторного обследования.
При поступлении. БАК: билирубин общий - 169,2 (прямой (пр.) - 109,4) мкмоль/л,
АлАТ - 22,5 ммоль/ч/л, тимоловая проба (ТП) - 3,2 ед. OAК: L - 7,6 × 109/л; л - 34 %
(2,58 × 109/л).
Фенотипические параметры ИКК: CD3 - 71,6 % (1,85 × 109/л), CD4 - 45,5 %
(1,17 × 109/л), CD8 - 30,7 % (0,79 × 109/л), CD11b - 9,91 % (0,26 × 109/л), CD16 - 12,5 %
(0,32 × 109/л), CD20 - 13,6 % (0,35 × 109/л), CD25 - 8,26 % (0,21 × 109/л), CD95 - 43,61 %
(1,13 × 109/л), HLA-DR - 11,34 % (0,29 × 109/л).
При расчете CD95+/CD11b+, CD95+/CD25+ и CD95+/HLA-DR+ выявлено состояние
анергии: CD95+/CD11b+ - 4,40; CD95+/CD25+ - 5,28; CD95+/HLA-DR+ - 3,85.
Проводимое этиопатогенетическое и симптоматическое лечение способствовало улучшению состояния больного и снижению симптомов интоксикации.
При повторном обследовании (30 сутки болезни) БАК: билирубин общий - 22,7 (пр. нет) мкмоль/л, АлАТ - 2,1 ммоль/ч/л, ТП - 1,3 ед. OAК: L - 5,9 × 109/л; л - 45 %
(2,66 ×109/л).
Фенотипические параметры ИКК: CD3 - 64,4 % (1,71 × 109/л), CD4 - 36,37 %
(0,97 × 109/л), CD8 - 33,98 % (0,90 × 109/л), CD11b - 13,15 % (0,35 × 109/л), CD16 - 20,11 %
5
BY 11965 C1 2009.06.30
(0,53 × 109/л), CD20 - 10,08 % (0,27 × 109/л), CD25 - 12,13 % (0,32 × 109/л), CD95 - 26,53 %
(0,71 × 109/л), HLA-DR - 14,03 % (0,37 × 109/л).
Рассчитываемые соотношения клеток имели тенденцию к снижению (CD95+/CD11b+ 2,02; CD95+/CD25+ - 2,19; CD95+/HLA-DR+ - 1,89) и соответствовали состоянию нормэргии.
На фиг. 1 отображены значения CD95+/CD25+ индекса у больных ВГС и МГВС. Пиком кривых являются средние значения данного индекса; концы кривой - значения его доверительных интервалов. Поскольку степень функциональной неполноценности ИКК
периферической крови является признаком патогенетически значимого дефекта(ов) иммунного ответа и перспективным прогностическим критерием хронизации инфекций, то
индексы апоптоза при ВГС и МГВС, позволяя выявлять повреждения молекулярноклеточных механизмов функциональной активности Т-клеток, могут быть использованы
для мониторинга (прогноза) течения заболевания (фиг. 1). Так, среднее значение
CD95+/CD25+ индекса у больных ХГС значительно превышало таковой у больных ОГС и
МГВС (Р < 0,05). Оценивая значения доверительных интервалов данного индекса, предел
("cut-off point") CD95+/CD25+ для прогноза течения заболевания составил 4,75. Это свидетельствует, что наиболее выраженная анергия иммунной системы (нарушение этапа секреции/рецепции цитокинов) характерна для хронических гепатитов. При анализе
CD95+/HLA-DR+ и CD95+/CD11b+ индексов такая зависимость была незначительной
(Р < 0,05).
На фиг. 2 приведены значения CD95+/CD25+, CD95+/HLA-DR+ и CD95+/CD11b+ - индексов у больных ОГС (А), ХГС (Б) и МГВС (В) в зависимости от формы тяжести (ФТ) и
степени активности (СА) заболевания. Обозначение "*" свидетельствует о достоверности
различий показателей в сравнении с аналогичными в контрольной группе и равна Р < 0,05.
Увеличение индексов ассоциировалось с выраженностью цитолитического синдрома, что
позволяет их использовать для прогноза течения заболевания (фиг. 2).
У больных ОГС с легкой формой CD95+/CD25+ и CD95+/HLA-DR+ индексы значительно выше (Р < 0,05) по сравнению c таковыми в группе больных ОГС с тяжелой формой заболевания (фиг. 2-А). Диагностическая значимость данных индексов для прогноза
(диагностики) тяжести заболевания больных ОГС была следующей: "cut-off point" для
CD95+/CD25+ составил 3,17 при чувствительности - 0,71 и специфичности - 0,42; "cut-off
point" для CD95+/HLA-DR+ составил 2,87 при чувствительности - 0,60 и специфичности 0,59. При этом прогностическая ценность положительного результата данных индексов
равна 59 % и 58,3 % соответственно, а прогностическая ценность отрицательного результата - 44 % и 41,7 % соответственно. Значение CD95+/CD11b+ индекса не изменялось в зависимости от формы тяжести заболевания.
У больных ХГС значения индексов были значительно выше у больных с высокой клинико-биохимической степенью активности заболевания (фиг. 2-Б). Однако значение
CD95+/CD25+ индекса было также увеличено и у больных с умеренной клиникобиохимической степенью активности. Диагностическая значимость данных индексов для
оценки клинико-биохимической степени активности у больных ХГС была следующей:
"cut-off point" для CD95+/CD25+ составил 2,94 при чувствительности - 0,75 и специфичности - 0,39; "cut-off point" для CD95+/HLA-DR+ равен 2,90 при чувствительности - 0,54 и
специфичности - 0,41; "cut-off point" для CD95+/CD11b+ составил 2,89 при чувствительности - 0,30 и специфичности - 0,68. Прогностическая ценность положительного и отрицательного результатов для индексов равна 62,1 % и 46,2 % соответственно.
У больных МГВС со среднетяжелой и тяжелой формой значения CD95+/CD25+ и
СD95+/НLА-DR+ - индексов были значительно выше, чем у больных с легкой формой
(фиг. 2-В). Диагностическая значимость данных индексов для оценки для прогноза (диагностики) тяжести заболевания у больных МГВС была следующей: "cut-off point" для
CD95+/CD25+ составил 2,87 при чувствительности - 0,80 и специфичности - 0,37; "cut-off
6
BY 11965 C1 2009.06.30
point" для CD95+/HLA-DR+ - 2,43 при чувствительности - 0,44 и специфичности - 0,56.
При этом прогностическая ценность положительного и отрицательного результатов равна
52 % и 38 % соответственно. Значение CD95+/CD11b+ индекса также было увеличено
только у пациентов с тяжелой формой. "Cut-off point" для CD95+/CD11b+ составил 2,67
при чувствительности - 0,60 и специфичности - 0,20 (прогностическая ценность положительного и отрицательного результатов равна 52 % и 38 % соответственно).
Следовательно, наличие состояния анергии иммунной системы чаще наблюдается у
больных ОГС с легкой формой тяжести, а у больных ХГС и МГВС с высокой активностью
и тяжелой формой тяжести болезни соответственно. При этом в последнем случае анергия
иммунной системы обусловлена нарушением всех трех фаз активации ИКК (межклеточная адгезия, секреция/рецепция цитокинов, поздняя активация и дифференцировка). У
больных ХГС и МГВС с умеренной активностью и среднетяжелой формой тяжести преобладает нарушение только этапа ранней активации, сопровождающегося продукцией и
рецепцией цитокинов (CD95+/CD25+).
Таким образом, предлагаемый способ диагностики состояния Т-системы иммунитета у
больных ВГВ, ВГС и МГВС позволяет более эффективно оценить функциональное состояние ИКК и может использоваться для мониторинга и прогноза течения заболевания, а
также для оценки эффективности проводимой терапии. Рассчитываемые соотношения обладают более высокой информативностью в сравнении с обычными параметрами иммунной системы. Способ прост в исполнении, не требует больших материальных и временных
затрат по сравнению с известным способом.
Источники информации:
1. Клиническая иммунология и аллергология: Учебное пособие / Под ред. А.В. Караулова. - М.: Медицинское информационное агентство, 2002. - С. 365-369.
2. Тотолян А.А., Балдуева И.А., Бубнова Л.Н. и др. Стандартизация методов иммунофенотипирования клеток крови и костного мозга человека // Мед. иммунол. - 1999. - Т. 1. № 5. - С. 23
3. Чередеев А.Н., Ковальчук Л.В. Интерпретация лабораторных показателей при оценке иммунного статуса // Лабораторное дело. - № 2. - 1991. - С. 8.
Фиг. 1
7
BY 11965 C1 2009.06.30
Фиг. 2
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
8
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
978 Кб
Теги
by11965, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа