close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY12012

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2009.06.30
(12)
(51) МПК (2006)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 12012
(13) C1
(19)
A 61K 36/00
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФЛАВОНОИДОВ, ОБЛАДАЮЩИХ
ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ И ПРОТИВОМИКРОБНОЙ
АКТИВНОСТЬЮ
(21) Номер заявки: a 20071613
(22) 2007.12.26
(71) Заявитель: Государственное учреждение "Республиканский научнопрактический центр гигиены" (BY)
(72) Авторы: Кузнецова Зинаида Павловна; Цыганков Василий Георгиевич;
Соколов Сергей Михайлович; Прихожий Сергей Степанович; Бондарук
Алла Михайловна; Жуков Андрей
Михайлович; Царева Ольга Владимировна; Журихина Лидия Николаевна (BY)
(73) Патентообладатель: Государственное
учреждение "Республиканский научнопрактический центр гигиены" (BY)
(56) BY 9869 C1, 2007.
BY 5642 C1, 2003.
RU 2072865 C1, 1997.
RU 2128516 C1, 1999.
SU 574215, 1977.
WO 95/26197 A1.
DE 19933912 A1, 2001.
BY 12012 C1 2009.06.30
(57)
Способ получения флавоноидов, обладающих противовоспалительной и противомикробной активностью, из вегетативной массы клюквы крупноплодной, при котором осуществляют ее экстрагирование 65-70 %-ным этиловым спиртом при температуре кипения,
экстракт упаривают до полного удаления спирта, водный остаток очищают от гидрофильных балластных веществ хлороформом, затем извлекают флавоноиды этилацетатом и
упаривают этилацетатные вытяжки в вакууме при 40 °С досуха.
Изобретение относится к медицине и касается создания лечебно-профилактических и
лекарственных средств на основе природного растительного сырья.
Известен способ получения флавоноловых соединений из вегетативной массы клюквы
крупноплодной, при котором осуществляют многократное холодное экстрагирование сырья 75 %-ным этиловым спиртом, из объединенных этаноловых извлечений отгоняют в
вакууме спирт, очищают водный остаток от балластных веществ на полиамидном сорбенте, элюируют целевой продукт 85 %-ным этиловым спиртом, объединенные этанольные
экстракты сгущают в вакууме и сушат при 40° [1].
Указанный способ является прототипом к заявляемому. Общими признаками для заявляемого способа и прототипа является экстракция этиловым спиртом, упаривание экстракта до водного остатка.
Однако метод колоночной хроматографии на полиамидном порошке нецелесообразен
для промышленного применения. Это многофазовый метод, что ведет к потере флавоноидных веществ при их адсорбции и десорбции с полиамидного порошка. Задачей заявляе-
BY 12012 C1 2009.06.30
мого изобретения является получение более качественного флавоноидного комплекса, дополнительно обладающего противовоспалительной и противомикробной активностью.
Поставленная задача достигается следующим образом.
Предложен способ получения флавоноидов, обладающих противовоспалительной и
противомикробной активностью, из вегетативной массы клюквы крупноплодной, при котором осуществляют ее экстрагирование 65-70-ным этиловым спиртом при температуре
кипения. Экстракт упаривают до полного удаления спирта, водный остаток очищают от
гидрофильных балластных веществ хлороформом, затем извлекают флавоноиды этилацетатом и упаривают этилацетатные вытяжки в вакууме при 40 °С досуха.
Предложенная технология позволяет получить более качественный целевой продукт с
некоторым уменьшением конечного продукта с 3,8-4,0 % до 3,0-3,5 %, при этом время получения флавоноидного комплекса уменьшается с 5 до 3 суток. Кроме того, в флавоноидном комплексе, полученном по новой технологии, наряду с флавоноловыми соединениями
присутствуют катехины, относящиеся к классу флавоноидов и хлорогеновые кислоты.
Пример получения: 1 кг воздушно-сухой, измельченной до размера частиц 1-2 см, вегетативной массы клюквы крупноплодной экстрагируют 65-70 %-ным этиловым спиртом
при температуре кипения. Извлечения повторяют до обесцвечивания растворителя. Этанольные экстракты объединяют и концентрируют до полного удаления спирта. Этанол
может быть использован многократно с небольшими потерями.
Водный остаток охлаждают и очищают хлороформом от гидрофильных балластных
веществ. Очистку проводят трехкратно, соотношение водного остатка и хлороформа - 1:3
по объему. Очищенный водный остаток элюируют этилацетатом 3 раза по 200 мл. Этилацетатные вытяжки упаривают досуха в вакуумном ротационном испарителе при 40 °С.
Сухой остаток измельчают. Выход флавоноидов - 2,8-3,0 % от веса сухого сырья.
Изучение фармакологической активности флавоноидного комплекса клюквы крупноплодной проводилось в лаборатории инфекционной ЦНИЛ БГМУ.
Противовоспалительную активность флавоноидов клюквы изучали на экспериментальной модели отека лапы у белых крыс массой 140-200 г, вызванного субпланитарным
введением 0,1 мл 1 % раствора каррагинина [2]. По изменению лапы у опытных и контрольных животных вычисляли процент угнетения отека.
Было установлено, что флавоноидный комплекс клюквы при однократном введении в
дозе 50 мг/кг обладает умеренной противовоспалительной активностью (угнетение отека
на 53-84 %).
Однако следует отметить, что антиэкссудативный эффект флавоноидного комплекса
клюквы сопоставим с антиэкссудативным действием ацетилсалициловой кислоты в фазе
нарастания каррагининового воспаления и несколько превосходит ее активность на стадии обратного развития отека.
Развитие каррагининового воспаления под влиянием флавоноидов клюквы характеризуется торможением экссудативной фазы на всех стадиях его развития. Необходимо указать,
что в контрольной группе животных особенно интенсивно отек нарастает после 2-го часа
и достигает максимума к 3-4 ч. В то же время следует отметить, что под действием изучаемого препарата отек задерживается несколько сильнее, именно на пике воспаления (3-4 ч).
Сравнительный анализ влияния флавоноидов клюквы и ортофена на течение экспериментального воспаления показывает значительно более выраженную (в 1,5-2 раза, Р<0,005)
положительную динамику отека у крыс, которым вводили ортофен.
Вместе с тем, по эффективности флавоноиды клюквы не уступают ацетилсалициловой
кислоте в первые 3 ч развития каррагининового отека и в 1,7 раза (Р<0,05) превосходит ее
на 5 ч наблюдения.
При изучении противомикробной активности был использован количественный метод
разведения флавоноидного комплекса в плотной питательной среде.
2
BY 12012 C1 2009.06.30
Установлено, что изучаемый флавоноидный комплекс клюквы обладает противомикробным действием в концентрации 1:100 на золотистый и эпидермальный стафилококк,
спороносные бактерии, неферментирующие граммотрицательные палочки антрокоид (из
группы сибиреязвенных бактерий) и не подавляет рост синегнойной и кишечной (лабораторный штамм) палочки, протея, грибов рода Candida.
В концентрации 1:1000 этот флавоноидный комплекс оказывает неполное (частичное)
противомикробное действие лишь на кишечную палочку (клинический штамм) и неферментирующие граммотрицательные бактерии.
В коцентрации 1:104 - 1:106 флавоноидный комплекс клюквы противомикробным действием не обладает.
Показатель эффективности противомикробного действия комплекса клюквы на стафилококки выше, чем у сульфацила натрия (55,5±0,5 мг/мл) и близок к нему у борной кислоты (3,0±0,2 мг/мл), резорцина (5,6±0,02мг/мл), хлорамина Б (5,6±0,02 мг/мл), диоксина
(2,6±0,07 мг/мл).
Следовательно, противомикробная активность изученного флавоноидного комплекса
клюквы крупноплодной проявляется в концентрации 1-10 мг/мл в отношении граммположительных бактерий (золотистый и эпидермальный стафилококк), спороносных бактерий
и антрокоид, а также неферментирующих граммотрицательных бактерий.
Таким образом, достигаемый технический результат заявляемого способа заключается
в получении более качественного флавоноидного комплекса и сокращения времени его
получения с 5 до 3-х суток.
Источники информации:
1. Патент 9869, МПК A 61K 36/00.
2. Winter C.A., Risley E.A., Nuss J.U. Proc. Soc. Exp. Biol (N.Y), 1962. V. 111. - P. 544-547.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
3
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
71 Кб
Теги
by12012, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа