close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY12241

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
BY (11) 12241
(13) C1
(19)
(46) 2009.08.30
(12)
(51) МПК (2006)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
ИММУНОСТИМУЛЯТОР
(21) Номер заявки: a 20070439
(22) 2007.04.19
(43) 2008.12.30
(71) Заявитель: Республиканское научноисследовательское дочернее унитарное предприятие "Институт экспериментальной ветеринарии имени
С.Н.Вышелесского" (BY)
(72) Авторы: Ананчиков Михаил Алексеевич; Бирман Борис Яковлевич;
Якубовский Сулейман Мустафович; Черняк Владимир Васильевич;
Шешко Любовь Дмитриевна; Ивашкевич Олег Петрович (BY)
BY 12241 C1 2009.08.30
A 61K 31/715
A 61K 31/375
A 61K 33/04
A 61K 33/18
A 61P 37/00
(73) Патентообладатель: Республиканское
научно-исследовательское дочернее унитарное предприятие "Институт экспериментальной ветеринарии имени С.Н.Вышелесского" (BY)
(56) КУЧИНСКИЙ М.П. Биоэлементы – фактор здоровья и продуктивности животных.- Минск: Бизнесофсет, 2007.- С.
170-173.
АНАНЧИКОВ М.А. Эпизоотология,
иммунобиология, фармакология и санитария.- 2006.- № 1.- С. 26-31.
АНАНЧИКОВ М.А. и др. Эпизоотология, иммунобиология, фармакология и
санитария.- 2004.- № 3.- С. 57-61.
АЛБУЛОВ А.И. и др. Ветеринарная
наука - производству. Научные труды,
2005. Вып. 38.- С. 62-66.
JP 2005-60327 A.
KR 2001-0094457 A.
KR 2002-0045289 A.
KR 2001-0083256 A.
SU 1759424 A1, 1992.
BY a 20020953, 2004.
(57)
Иммуностимулятор, содержащий микроэлементы йод и селен и растворитель, отличающийся тем, что содержит йод в виде калия йодида, селен - в виде натрия селенита, в
качестве растворителя содержит физиологический раствор натрия хлорида и дополнительно содержит низкомолекулярный хитозан и аскорбиновую кислоту при следующем
соотношении компонентов, мас. %:
калия йодид
0,02-0,03
натрия селенит
0,200-0,228
низкомолекулярный хитозан
0,35-0,60
аскорбиновая кислота
1,35-1,45
физиологический раствор натрия хлорида
остальное.
BY 12241 C1 2009.08.30
Изобретение относится к области ветеринарной медицины и может найти применение
для повышения функционального уровня иммунной системы у животных.
Известен конъюгат, обладающий способностью активизировать иммунную систему,
представляющий модифицированный суперантиген - стафилококковый энтеротоксин Е,
характеризующийся тем, что имеет бактериальную природу и способность индуцировать
цитотоксичность Т-клеток и имеет низкую способность связываться с антигенами МНС II [1].
Этот препарат сравнительно сложен в изготовлении и поэтому дорогостоящий и, кроме того, обладает сравнительно малым диапазоном влияния на иммунную систему.
Известен иммуностимулятор, в состав которого в качестве основного действующего
вещества входит касолин. Этот иммуностимулятор эффективен, но очень дорог, т.к. касолин является препаратом природного происхождения из бобровой струи, а сбор бобровой
струи представляет определенные трудности [2].
Известен иммуностимулятор, полученный из лимфатических узлов, представляющий
собой комплекс низкомолекулярных белковых веществ [3].
Этот иммуностимулятор имеет недостаток, заключающийся в возможности возникновения при его применении аутоиммунных реакций, образования антител к собственным
тканям, что может привести к аутоиммунным заболеваниям.
Известен иммуностимулятор, полученный из молок лососевых рыб, представляющий
порошок белого цвета, содержащий комплекс полипептидов и белков с молекулярной
массой 5000-20000Д. Спектр поглощения 280 + 2 нм. Обладает иммуностимулирующей
активностью в дозах 0,01-0,1 мг на 1 кг массы тела [4].
Однако в условиях Республики Беларусь организовать промышленное производство
иммуностимулятора из молок лососевых рыб затруднительно ввиду отсутствия необходимого количества сырья, которое необходимо закупать за границей.
Наиболее близким аналогом, т.е. прототипом, является иммуностимулятор, представляющий собой комплексный минеральный препарат КМП, содержащий микроэлементы в
виде солей калия йодида, натрия селенита и растворитель в виде воды [5].
Однако этот иммуностимулятор не является органическим соединением и поэтому отличается сравнительно повышенной токсичностью и низкой биодоступностью.
Задачей настоящего изобретения является создание иммуностимулятора, положительно влияющего на систему антиоксидантной защиты организма, гуморальный и клеточный
иммунитет.
Поставленная задача достигается тем, что иммуностимулятор, содержащий йод и селен и растворитель, содержит йод в виде калия йодида, селен - в виде натрия селенита, в
качестве растворителя содержит физиологический раствор натрия хлорида и дополнительно содержит низкомолекулярный хитозан и аскорбиновую кислоту при следующем
соотношении компонентов, мас. %:
калия йодид
0,02-0,03
натрия селенит
0,200-0,228
хитозан низкомолекулярный
0,35-0,60
кислота аскорбиновая
1,35-1,45
физиологический раствор натрия хлорида
остальное.
Йод является важнейшим элементом минерального питания животных. Входя в состав
тироидных гормонов, йод оказывает разностороннее влияние на различные процессы в
организме. Недостаток йода является причиной эндемического зоба, нарушения овуляторной функции яичников, снижения лютеинизирующей функции гипофиза. Токсический
избыток йода также может привести к различным патологиям. Оптимальным вариантом
введения в организм животного йода являются соли йода, в частности в заявляемом изобретении это калия йодид [6].
Селен также играет большую роль в жизнедеятельности организма животного. Так,
при недостатке селена диагностируются случаи беломышечной болезни новорожденных и
2
BY 12241 C1 2009.08.30
молодняка сельскохозяйственных животных. При избытке наблюдаются хронические или
острые отравления селеном ("щелочная болезнь" лошадей, крупного рогатого скота; "слепая вертячка овец") [7]. Селен представляет собой основной компонент системы антиоксидантной защиты, связанной опосредованно через селенсодержащие ферменты и
гормоны с иммунной системой организма.
Хитозан - модификация хитина, его деацетилированное производное, представляющее
собой высокомолекулярный полимер глюкозамина, растворимый в разбавленных органических и неорганических кислотах (кроме серной). В отличие от практически нерастворимого хитина хитозан, растворимый в слабых кислых растворах, широко применяется в
различных отраслях промышленности, сельского хозяйства, медицины.
В основе получения хитозана лежит реакция отщепления от структурной единицы хитин-N-ацетил-Д-глюкозамина ацетильной группировки или реакции деацетилирования.
По внешнему виду хитозан представляет собой чешуйки размером менее 10 мм или
порошки различной тонины помола, от белого до кремового цвета, без запаха. Другими
свойствами сухого хитозана являются электризуемость и вяжущий вкус. По токсичности
хитозан относится к 4-му классу и считается безопасным.
Одной из уникальных биологических активностей хитозана является его способность
индуцировать устойчивость к вирусным заболеваниям, ингибировать вирусные и бактериальные инфекции у животных [8].
Снижение молекулярной массы хитозана вызывает резкое уменьшение выхода при его
осаждении и одновременное увеличение концентрации кватернизованных аминогрупп в
хитозане остаточным количеством уксусной кислоты. Для получения осажденного низкомолекулярного препарата с высоким выходом необходимо повышать уровень рН до 910 ед. Хитозан с молекулярной массой менее 10 кDа является водорастворимым, поэтому
не требует химической модификации [9].
Кислота аскорбиновая - белый кристаллический порошок, кислого вкуса. Играет важную роль в регулировании окислительно-восстановительных процессов, способствует повышению сопротивляемости организма. Профилактика и лечение гипо- и авитаминоза
витамина С. Обеспечение повышенной потребности в витамине С в период роста, беременности, стрессовых состояний, в период выздоровления после тяжелых заболеваний.
Применяется при геморрагических диатезах, кровотечениях, при передозировке непрямыми антикоагулянтами, вяло заживающих ранах и переломах костей. В слабых растворах аскорбиновой кислоты наблюдается хорошее растворение низкомолекулярного
хитозана.
Физиологический раствор - раствор натрия хлорида 0,9 %, осмотическое давление которого равно осмотическому давлению крови. Использован в заявляемом препарате в качестве растворителя в связи с парентеральным применением иммуностимулятора.
Хитозан - носитель составляющих компонентов, связывает через реакционноспособные аминогруппы (NH2) и гидроксильные группы (ОН) селен, йод и аскорбиновую кислоту. При поступлении в организм в связанном состоянии молекула хитозана
биодеградирует (распадается) и постепенно освобождает биоактивные элементы селен,
йод, которые необходимы для синтеза в организме ферментов и гормонов. Таким образом,
хитозан, химически связывая селен и йод из неорганических солей, способствует переходу селена и йода в органическую форму соединений, тем самым снижает токсичность
биоэлементов и повышает биодоступность селена и йода в биохимических реакциях, которые характеризуются активизацией системы антиоксидантной защиты и функций иммунной системы (стимуляция антителообразования и Т-лимфоцитов).
Заявленные в формуле изобретения соотношения компонентов обеспечивают функционирование специфических путей метаболизма селена и йода, а также оптимальное соотношение компонентов в препарате, растворимость, стабильность при хранении и
3
BY 12241 C1 2009.08.30
эффективность воздействия на функциональную активность иммунной системы организма животных.
Уменьшение доз приводит к снижению биологической активности препарата в связи с
несоответствием вводимых компонентов потребностям животного организма.
Увеличение доз приводит к ухудшению физико-химических свойств и стабильности
препарата, выпадению нерастворимого осадка при хранении и повышению токсичности
препарата.
Наличие растворителя в виде физиологического раствора натрия хлорида в концентрации 0,9 % позволяет сохранять целостность окружающих живых тканей при введении
препарата.
Пример приготовления иммуностимулятора.
Описание приготовления иммуностимулятора.
Реактивы и оборудование:
A. Хитозан низкомолекулярный.
B. Кислота аскорбиновая.
C. Натрия селенит, марки хч.
D. Калия йодид, марки хч.
E. Натрия хлорид, марки хч.
F. Весы аналитические типа ВЛР-200 по ГОСТ 24104-80.
G. Мешалка магнитная.
Состав:
хитозан низкомолекулярный: 0,35-0,60 мас. %, или 3,5-6,0 мг/см3;
кислота аскорбиновая: 1,35-1,45 мас. %, или 13,5-14,5 мг/см3;
натрия селенит: 0,200-0,228 мас. %, или 2,0-2,28 мг/см3;
калия йодид: 0,02-0,03 мас. %, или 0,20-0,30 мг/см3.
Схема приготовления.
Поскольку препарат предназначен для внутримышечных и/или подкожных инъекций,
для обеспечения изотоничности по отношению к окружающим тканям в качестве растворителя компонентов, входящих в состав препарата, использовали физиологический раствор хлорида натрия.
Для приготовления 1 дм3 препарата компоненты, входящие в состав препарата, были
взяты в следующих количествах:
хитозан низкомолекулярный: 0,35-0,60 мас. %, или 3,5-6,0 мг/см3;
кислота аскорбиновая: 1,35-1,45 мас. %, или 13,5-14,5 мг/см3;
натрия селенит: 0,200-0,228 мас. %, или 2,0-2,28 мг/см3;
калия йодид: 0,02-0,03 мас. %, или 0,20-0,30 мг/см3.
Приготовление препарата требует строгого соблюдения последовательности и полного растворения каждого вносимого компонента перед добавлением следующего. Поэтому
растворение компонентов проводили в следующей последовательности: хитозан низкомолекулярный, кислота аскорбиновая, натрия селенит, калия йодид.
Растворяли компоненты при постоянном перемешивании на магнитной мешалке. При
приготовлении препарата все манипуляции производились в микробиологическом боксе с
соблюдением правил асептики и антисептики.
Проведение исследований показало, что применение иммуностимулятора поросятамотъемышам в дозе 1,5 мл на голову способствует активизации клеточного звена иммунной
системы и сопровождается достоверным увеличением общего количества лейкоцитов и
абсолютного числа лимфоцитов в крови (табл. 1, 2). Парентеральное введение поросятам
иммуностимулятора за две недели до вакцинации характеризовалось стабильным высоким
уровнем лейкоцитов, в основном за счет роста числа лимфоцитов.
4
BY 12241 C1 2009.08.30
Таблица 1
Динамика гематологических и биохимических показателей у поросят после
введения иммуностимулятора
Количество Количество
Сроки взяГруппа Гемоглобин,
эритроцитов, лейкоцитов,
тия крови животных
г/л
1012/л
109/л
Через 7 дней
опыт
11,70 ± 1,05 6,17 ± 0,35 14,40 ± 1,63*
контроль 11,10 ± 0,31 5,80 ± 0,45
8,80 ± 0,51
Через 35 дней
опыт
9,40 ± 0,21
5,30 ± 0,28
16,60 ± 1,24
контроль 9,70 ± 0,24
5,40 ± 0,32
14,70 ± 1,50
Примечание: * - разница статистически достоверна (р < 0,01).
Общий белок, г/л
57,10 ± 0,21
51,40 ± 1,12
53,80 ± 0,09
50,0 ± 0,52
Таблица 2
Абсолютное количество лимфоцитов в крови поросят после введения
иммуностимулятора
Количество лимфоцитов, ×109/л
Опыт
Контроль
Через 7 дней (возраст 32-35 дней)
9,89 ± 0,84*
6,25 ± 0,66
Через 35 дней (возраст 60-63 дня)
10,15 ± 0,96*
8,10 ± 0,50
Примечание: * - разница статистически достоверна (р < 0,05).
Увеличение числа лимфоцитов, вероятно, обусловливает активизацию клеточного
иммунитета и коррелирует с поствакцинальным антителогенезом. Это предположение
нашло свое подтверждение при проведении производственных опытов на основных свиноматках.
Высокий уровень специфических антител при исследовании в ИФА с набором диагностикумов "Idexx" наблюдали у всех опытных животных. Однако коэффициент, отражающий уровень антител в сыворотке крови опытных животных второй группы, был
достоверно выше и составил 2,88 по сравнению с 1,71 - в первой группе. Уровню антителогенеза соответствовало абсолютное количество лимфоцитов, число которых во второй
опытной группе достигало 5,01 ± 0,35 × 109, а в первой - 3,96 ± 0,57 × 109.
Следовательно, использование иммуностимулятора способствует стимуляции клеточного и гуморального иммунитета у животных.
Сроки взятия крови
Источники информации:
1. Патент BY 6983, МПК7 С 07К 19/00, 14/31, 2005.
2. Патент BY 7019, МПК7 С 07К 19/00, 2005.
3. А. с. СССР 1187824, МПК5 А 61К 35/30, 1985. .
4. Патент RU 2 091073, МПК6 А 61К 35/60, 1997.
5. Кучинский М.П. Биоэлементы - фактор здоровья и продуктивности животных.Минск: ПЧУП "Бизнесофсет", 2007.- С. 170-171 (прототип).
6. Георгиевский В.И., Анненков Б.Н., Самохин В.Т. Минеральное питание животных.М.: Колос, 1979.- С. 214-219.
7. Георгиевский В.И., Анненков Б.Н., Самохин В.Т. Минеральное питание животных.М.: Колос 1979.- С. 229-230.
8. Хитин и хитозан. Получение, свойства и применение. / Под ред. академика РАСХН
К.Т. Скрябина, д. хим. наук Г.А. Вихоровой, д. хим. наук В.П. Варламова.- М.: Наука,
2002.- С. 17, 327.
5
BY 12241 C1 2009.08.30
9. Шинкарев С.М. Разработка и усовершенствование промышленных технологий получения препаратов на основе хитозана для лечения и профилактики болезней животных:
Автореф. дисс. канд. биол. наук.- Щелково, 2001.- С. 9.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
6
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
101 Кб
Теги
by12241, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа