close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY12802

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2010.02.28
(12)
(51) МПК (2009)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
G 01N 33/02
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ
ЛАКТУЛОЗЫ В МОЛОКЕ
(21) Номер заявки: a 20080141
(22) 2008.02.08
(43) 2009.10.30
(71) Заявитель: Государственное учреждение "Республиканский научнопрактический центр гигиены" (BY)
(72) Авторы: Шуляковская Ольга Васильевна; Белышева Людмила Леонидовна; Соколов Сергей Михайлович; Воронцова Ольга Сергеевна
(BY)
BY 12802 C1 2010.02.28
BY (11) 12802
(13) C1
(19)
(73) Патентообладатель: Государственное
учреждение "Республиканский научно-практический центр гигиены" (BY)
(56) ГОСТ Р 51939-2002. Молоко. Метод
определения лактулозы.
Шуляковская О.В. и др. Здоровье и
окружающая среда. Вып. 8: Сб. научн.
тр. - Минск, 2006. - С. 486-489.
Белышева Л.Л. и др. Здоровье и окружающая среда. Вып. 8. Сб. научн. тр. Минск, 2006. - С. 182-185.
(57)
Способ определения содержания лактулозы в молоке, отличающийся тем, что пробу
испытуемого молока, содержащего лактулозу, и пробу молока, не содержащего лактулозу,
термостатируют при температуре 20 °С в течение 30 мин, гидролизуют 4,6 М серной кислотой в течение 15 мин в кипящей водяной бане, фильтруют, разбавляют гидролизаты
дистиллированной водой в соотношении 1 : 2 и измеряют при длине волны 285 нм оптическую плотность разведенного гидролизата пробы испытуемого молока относительно
разведенного гидролизата пробы молока, не содержащего лактулозу, находят концентрацию лактулозы С в мг/см3 по градуировочному графику, после чего рассчитывают содержание лактулозы по формуле:
C × 100
X=
,
1000
где Х - содержание лактулозы в молоке, г/100 см3.
Изобретение относится к медицине, к разделу лабораторной диагностики, а также к
пищевой промышленности.
Известен способ определения лактулозы в молоке, основанный на гидролизе лактулозы и лактозы, содержащихся в освобожденном от жира и белка водном экстракте пробы
молока, в присутствии гексокиназы с образованием моносахаров - галактозы, глюкозы и
фруктозы; преобразовании фруктозы под действием β-никотинамидадениндинуклеотидфосфата в присутствии гексокиназы, фосфоглюкозоизомеразы и глюкозо-6фосфатдегидрогеназы и спектрофотометрическом измерении массовой доли образовавшегося β-никотинамидадениндинуклеотидфосфата, восстановленной формы, эквивалентного
массовой доле фруктозы, и расчете содержания лактулозы по разности оптических плотностей раствора пробы, в которой лактулоза подвергнута гидролизу, и раствора пробы,
используемого при определении свободной фруктозы [1].
BY 12802 C1 2010.02.28
Способ является прототипом по отношению к заявляемому.
Однако указанный способ имеет недостатки. Во-первых, гидролиз проводится в течение 10 часов, затем проводят окисление глюкозы, находящейся в гидролизате, в течение 3
часов, что значительно удлиняет время анализа. Общее время анализа 15 часов. Вовторых, при его применении необходимо использовать большое количество реактивов и
дорогостоящих ферментов.
Лактулоза является пребиотиком. В настоящее время ею обогащают широкий круг
продуктов питания, в том числе и молоко, в связи с чем возникает необходимость в проведении экспресс-анализа такой продукции.
Задачей заявляемого изобретения является создание экспресс-способа определения
лактулозы в молоке с высокой точностью.
Поставленная задача достигается следующим образом. Предложен способ определения содержания лактулозы в молоке, когда пробу испытуемого молока и пробу молока, не
содержащего лактулозу, термостатируют при температуре 20 °С в течение 30 мин, гидролизуют 4,6 М серной кислотой в течение 15 мин в кипящей водяной бане, фильтруют, разбавляют гидролизат дистиллированной водой в соотношении 1 : 2 и измеряют при длине
волны 285 нм оптическую плотность разведенного гидролизата пробы испытуемого молока относительно разведенного гидролизата пробы молока, не содержащего лактулозу, находят концентрацию лактулозы С по градуировочному графику, после чего рассчитывают
содержание лактулозы по формуле:
C × 100
X=
,
1000
где Х - концентрация лактулозы в молоке, г/100см3.
Применение серной кислоты обусловлено в заявляемом способе тем, что кислотный
гидролиз упрощает определение лактулозы в молоке, позволяет убрать дорогостоящие
ферменты и сократить время анализа при высокой точности определения. Общее время
проведения анализа по предложенному способу составляет 2 ч.
Пример.
Определение лактулозы в молоке.
1. Кислотный гидролиз.
Молоко (300-500 см3) термостатируют при температуре 20 ± 2 °С в течение 30 мин и
тщательно перемешивают.
В градуированные пробирки вместимостью 10 см3 помещают 1 см3 подготовленной
пробы, добавляют 7 см3 раствора 4,6 М серной кислоты, встряхивают. Пробирки помещают в кипящую водяную баню на 15 мин, затем быстро охлаждают под струей холодной
воды, проверяют соответствие объема 8 см3, при необходимости доводят до указанного
объема дистиллированной водой. Параллельно готовят раствор сравнения: в пробирку
помещают 1 см3 молока, не содержащего лактулозы, добавляют 7 см3 раствора 4,6 М серной кислоты, встряхивают и далее проводят те же операции, как и при проведении кислотного гидролиза исследуемой пробы молока.
Полученные гидролизаты растворяют в дистиллированной воде в соотношении 1:2.
Для этого в пробирку объемом 5 см3 отбирают 1 см3 гидролизата и добавляют 2 см3 дистиллированной воды. Гидролизаты молока предварительно фильтруют через бумажный
фильтр.
2. Выполнение измерений.
Анализ полученных растворов по п. 1 проводят на спектрофотометре. Для этого полученные по п. 1 растворы помещают в кюветку для спектрофотометрирования. Проводят
анализ двух параллельных проб. Измеряют величину оптической плотности при длине
волны 285 нм против раствора сравнения. Каждый раствор спектрофотометрируют не менее двух раз.
3. Обработка результатов.
2
BY 12802 C1 2010.02.28
Расчет концентрации лактулозы (X) в г/100см3 для молока проводят по формуле:
C × 100
X=
,
1000
где С - концентрация лактулозы, найденная по градуировочному графику (мг/см3);
100 - расчет для 100 см3 молока;
1000 - пересчет мг в г.
За окончательный результат измерения принимают среднее арифметическое значение
результатов двух параллельных измерений. Вычисления проводят до третьего десятичного знака и округляют до второго. Допустимое расхождение между параллельными измерениями не должно превышать 1,3 %.
Таким образом, достигаемый технический результат заявляемого способа заключается
в том, что способ позволяет сократить время анализа в 7,5 раза и определять содержание
внесенной лактулозы в молоко с высокой точностью.
Определение содержания внесенной лактулозы в молоке предлагаемым способом
Количество внесенной
Определяемое содержание
Продукт
Извлечение, %
лактулозы, г/100 г
лактулозы, г/100 г
Молоко - сырье
0,1
0,1
100
Молоко пастери0,2
0,198
99
зованное
Молоко стерили0,2
0,196
98
зованное
Источники информации:
1. ГОСТ 51939-2002 Молоко. Метод определения лактулозы. Введ. 01.10.2003. - М.:
Госстандарт России, 2002. - 8 с.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
3
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
78 Кб
Теги
by12802, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа