close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY13575

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2010.08.30
(12)
(51) МПК (2009)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 13575
(13) C1
(19)
C 12N 1/20
C 05F 11/00
ШТАММ БАКТЕРИЙ RHIZOBIUM GALEGAE БИМ В-437 Д
ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ УРОЖАЙНОСТИ GALEGA ORIENTALIS
(21) Номер заявки: a 20081136
(22) 2008.09.03
(43) 2010.04.30
(71) Заявитель: Государственное научное учреждение "Институт микробиологии Национальной академии
наук Беларуси" (BY)
(72) Авторы: Картыжова Лилия Евгеньевна; Алещенкова Зинаида Михайловна (BY)
(73) Патентообладатель: Государственное научное учреждение "Институт
микробиологии Национальной академии наук Беларуси" (BY)
(56) RU 2025472 С1, 1994.
ДОВНАР И.А. Приемы оптимизации
технологии возделывания козлятника
восточного (Galega orientalis Lam.).
Автореферат диссертации. - Жодино,
2003. - С. 14-15.
ШЛАПУНОВ В.Н. и др. Земляробства
i ахова раслiн. - 2003. - № 2. - С. 21-22.
КАРТЫЖОВА Л.Е. и др. Защита растений. Сборник научных трудов.
Вып. 30. Ч. I. Стратегия и тактика защиты растений. Материалы научной
конференции. - Минск, 2006. - С. 233237.
КОЦЬ С.Я. и др. Микробиология и
биотехнология XXI столетия. Материалы международной конференции. Минск, 2002. - С. 236-237.
BY 13575 C1 2010.08.30
(57)
Штамм бактерий Rhizobium galegae БИМ B-437 Д, обладающий устойчивостью к углеводородам нефти, для повышения урожайности Galega orientalis.
Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии и предназначено для
повышения урожайности галеги восточной и восстановления почв, загрязненных нефтью.
Известно использование природной накопительной культуры ризобий из измельченных корней 6-8 растений бобовых трав тех же видов после возобновления их вегетации из
травостоев 2-3 года жизни путем смачивания их минеральной водой в количестве 1,52,0 л/га и смешивания их с гектарной нормой семян [1].
Недостатком данного способа является использование для инокуляции семян бобовых
трав спонтанной ризобиальной микрофлоры, не способной к созданию эффективного
симбиоза с растением-хозяином.
Известен штамм Trihoderma subtilis ИПМ-215, обладающий фунгицидными свойствами и использующийся в способе приготовления бактериального удобрения на основе биогумуса ("Способ приготовления бактериального удобрения на основе биогумуса") в
концентрациях 1⋅109 - 1 1012 спор на 1 кг биогумуса [2].
Однако данный способ имеет ряд существенных недостатков:
дополнительные расходы на прилипатели;
BY 13575 C1 2010.08.30
дефицит азота требует дополнительного ввода микроорганизмов, обладающих способностью фиксировать азот из атмосферы.
Известен штамм Rhizobium japonicum B-2437 с титром 8⋅107, использующийся в способе приготовления бактериального удобрения на основе биогумуса ("Способ приготовления бактериального удобрения на основе биогумуса") [3].
Недостатками данного изобретения являются:
трудоемкость способа (при достижении оптимальной (7,5) кислотности навоза);
ненадежность стерилизации биогумуса после добавления мелассы в связи с использованием ватно-марлевых пробок для закрытия полипропиленовых пакетов;
в больших партиях бактериального удобрения может наблюдаться отсутствие точности при расфасовке биогумуса, и в связи с этим количество вводимой мелассы может не
соответствовать необходимому содержанию для поддержания оптимального размножения
клубеньковых бактерий. Маловероятно, что полученный таким способом биогумус будет
включать в себя необходимое количество полезных микроорганизмов, в том числе и способных к фиксации азота.
Известен спектр азотфиксирующих бактерий, используемых в способе культивирования азотфиксирующих бактерий ("Способ культивирования азотфиксирующих бактерий")
[4]. Недостатком данного изобретения является то, что использование азотфиксирующей
культуры бактерий не изучено в условиях интенсивного ведения сельского хозяйства,
обусловленного применением пестицидов. Применение данного способа культивирования
не изучено на специфичных штаммах, таких как Rh. galegae.
Известен консорциум микроорганизмов, используемых в способе обезвреживания
сточных вод, содержащих ароматические амины, активным илом ("Способ обезвреживания сточных вод, содержащих ароматические амины, активным илом") [5]. Локальная
микробная очистка накапливающихся сточных вод основана на использовании высокоактивных штаммов микроорганизмов-деструкторов, более устойчивых к токсическому действию ингредиентов сточных вод. Консорциум микроорганизмов используется при
очистке сильнозагрязненных сточных вод. Для фиторемедиации загрязненных нефтью
почв использование этих высокоактивных микроорганизмов-деструкторов не изучено.
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому эффекту является штамм
Azotobacter, используемый в способе получения бактериального удобрения под галегу восточную ("Способ приготовления бактериального удобрения на основе бактерий рода
Azotobacter") [6]. Данное изобретение предусматривает предварительное выращивание
штаммов азотобактера на плотной питательной среде при температуре 26-28 °С. Дальнейшее культивирование производят в среде Берка с добавлением экстракта кормовых
дрожжей. Полученную накопительную культуру вносят в рабочий объем среды Берка с
добавлением триптофана и экстракта кормовых дрожжей. Затем штаммы выращивают в
ферментере на питательной среде Берка с добавлением триптофана и экстракта кормовых
дрожжей. Дальнейшее выращивание штаммов проводят в ферментере на питательной
среде Берка до концентрации клеток 108-109 кл./мл. Недостатки способа:
продолжительный период культивирования (48 часов);
применение дополнительных компонентов в среде для стимуляции культуры: экстракт
кормовых дрожжей и триптофан;
многоэтапность производства получения препарата;
низкие титры культуры;
узкий спектр хозяйственно-полезных и экологически важных свойств (устойчивость к
пестицидам, углеводородам нефти) у штаммов, являющихся основой бактериального
удобрения;
отсутствие симбиоза с галегой восточной, а лишь стимуляция роста;
низкая рентабельность при производстве бактериального удобрения за счет трудоемкости приготовления среды и дороговизны ее компонентов.
2
BY 13575 C1 2010.08.30
Задача данного изобретения - получение штамма клубеньковых бактерий Rhizobium
galegae, обладающего комплексом хозяйственно-полезных и экологически важных
свойств: азотфиксация, ростстимуляция, устойчивость к пестицидам и углеводовородам
нефти, способного к созданию высокоэффективного симбиоза с галегой восточной, и разработка технологических условий получения биопрепарата на его основе с целью инокуляции семян галеги восточной, возделываемой в условиях интенсивного земледелия и при
загрязнении почв углеводородами нефти.
Данная задача решается путем глубинного культивирования штамма клубеньковых
бактерий Rhizobium galegae БИМ B-437 Д на питательной кукурузно-мелассной среде
следующего состава, %: меласса - 0,5, кукурузный экстракт - 1,0, (NH4)3PO4 - 0,05, pH 6,5-7,0. Условия культивирования: ферментер - АНКУМ-2М, температура - 28±2 °С, аэрация 1,0 объема воздуха на объем среды, время выращивания - 36 часов.
Выделенный штамм клубеньковых бактерий, обладающий высокой степенью выживаемости, быстро размножающийся, колонизирующий корни Galega orientalis Lam., конкурентоспособный, обладающий высокой совместимостью и скоростью проникновения в
корень, способен к образованию эффективных клубеньков на поверхности корня, с высокой азотфиксирующей активностью, обладающий устойчивостью к протравителям и углеводородам нефти (активно размножаясь, использует их как источник питания и энергии),
является эффективным средством повышения урожайности галеги восточной в почвенноклиматических условиях Беларуси.
Штамм клубеньковых бактерий Rhizobium galegae БИМ B-437 Д был выделен из клубеньков старовозрастных посевов галеги восточной сорта "Нестерка", изучены его физиолого-биохимические свойства и определена эффективность микроорганизма в
агроэкосистемах.
Штамм непатогенен и депонирован в Белорусской коллекции непатогенных микроорганизмов Института микробиологии НАН Беларуси, где ему присвоен коллекционный
номер БИМ В-437 Д.
Характеристика штамма. Условия культивирования (поддержание): агаризованная бобовая среда, температура 26-28 °С, хранится в пробирках при +4 °С в течение 6 месяцев
без пересева.
Культурально-морфологические и биохимические свойства: клетки штамма палочковидные, 7,2×2,6 мкм, окружены капсулой. При росте на бобовом агаре образуют округлой
формы слизистые выпуклые колонии - бесцветные с явно выраженным центральным белого цвета точечным окрашиванием. Аэроб, в факторах роста не нуждается, титр при
росте на бедных средах без источника углерода (E-8) на 72 часах роста равен
3,9±0,12⋅108 КОЕ/мл. Обладает способностью к кислотообразованию, используя углеводы:
D-рибозу, D-ксилозу, D-маннозу, D-галактозу, D-арабинозу, D-мальтозу, лактозу, дульцитол. При росте с дрожжевым экстрактом и манитолом через 3 суток размер колоний равен
4-6 мм. Оптимальная температура роста - 28 °С, оптимальное значение pH 6,8-7,0, растет
на безазотистой среде Эшби. Штамм Rhizobium galegae БИМ В-437 Д при росте на общепринятых средах не требует добавления витаминов и стартовых доз азота. Растет в бедных
органических средах при pH 2,0 и 5,9, но не > 6,1, и в присутствии 20 % или более NaCl,
способен использовать C-соединения в качестве единственного источника углерода, растет за счет использования н-алканов из 13-20 атомов углерода при культивировании совместно с нефтью и дизельным топливом в жидкой среде E-8, фиксирует N2 в корневых
клубеньках галеги восточной.
Штамм не является патогенным и токсигенным. Токсикологические исследования
штамма проводились на лабораторных животных - белых крысах массой 20-22 г и кроликах массой 2,5-3 кг. Установлено, что штамм при внутрижелудочном и внутрибрюшинном
введении его суспензии в дозе 1,0-5,0⋅109 КОЕ/мл/животное, а также интраназально - в дозе 109 КОЕ/мл/животное не вызывает у белых крыс клинических симптомов интоксикации
3
BY 13575 C1 2010.08.30
и гибели. Rhizobium galegae БИМ B-437 Д не обладает раздражающим действием на кожу
при нанесении бактериальной суспензии на выбритый участок кожи кроликов размером
2×3 см в дозе 0,1 мл. Проведенные исследования позволяют сделать заключение, что
штамм может использоваться в микробиологическом производстве, так как он не вызывает раздражающего действия, непатогенен и нетоксичен.
Заявляемое изобретение иллюстрируется нижеприведенными примерами его конкретного осуществления.
Пример 1.
Подбор оптимальной питательной среды для роста и развития культуры клубеньковых
бактерий Rhizobium galegae БИМ B-437 Д проводили методом глубинного культивирования на 3 различных по составу компонентов и способу предварительной подготовки питательных средах: бобовой, %: гороховый отвар - 10,0; сахароза - 1,0; пищевой сахар - 1,0;
pH 7,2-7,6; агар-агар - 20,0; заводской, %: гороховый экстракт - 10,0, дрожжевой экстракт 0,05; сахароза - 0,5; глюкоза - 0,5; (NH4)2SO4 - 0,05, K2HPO4⋅3H2O - 0,025, MgSO4·7H2O0,020 [7]; кукурузно-мелассной, %: кукурузный экстракт - 1,0, меласса - 0,5, (NH4)2SO4 0,05, pH 7,4.
Глубинное культивирование Rhizobium galegae БИМ B-437 Д проводили в колбах Эрленмейера объемом 500 мл с 250 мл исследуемой питательной среды на лабораторной качалке (скорость вращения 200-220 об./мин) при температуре 26-28 °С.
Показатели роста Rhizobium galegae БИМ B-437 Д на сравниваемых средах приведены
в табл. 1. По результатам исследования для дальнейшей работы отобрана кукурузномелассная среда, обеспечивающая более высокий титр культуры-продуцента.
Таблица 1
Рост Rhizobium galegae БИМ B-437 Д на питательных средах различного состава
при глубинном культивировании на качалке
Титр Rhizobium galegae БИМ B-437 Д, КОЕ/мл среды
Среда культивирования
0ч
через 48 ч
через 72 ч
Бобовая среда (контроль)
2,22±0,08⋅107
1,01±0,2⋅109
5,5±0,6⋅109
Заводская
3,0±0,03⋅107
9,2±1,02⋅108
4,6±0,36⋅109
Кукурузно-мелассная
2,36±0,06⋅107
1,3±0,08⋅109
8,2±1,08⋅109
Пример 2.
Максимальный титр культуры Rhizobium galegae БИМ B-437 Д получен через 36 ч.
глубинного культивирования на ферментере АНКУМ-2М и составил - 8,7·109 КОЕ/мл
среды при µ = 0,05 ч-1, максимальная скорость роста (µ) была отмечена через 6 ч культивирования и составила 1,33 ч-1, при которой период удвоения популяции (g) составил
0,52 ч.
Таблица 2
Рост Rhizobium galegae БИМ B-437 Д при глубинном культивировании с различной
концентрацией основных питательных компонентов
Компоненты среды,
Титры клеток Rhizobium galegae БИМ B-437 Д,
% от объема
КОЕ/мл среды
Меласса Кукурузный экстракт
0ч
через 24 ч
через 36 ч
7
9
0,5
1,0
2,8±0,03⋅10
4,0±0,8⋅10
7,73±0,46⋅109
0,25
0,25
1,8±0,18⋅107
3,2±0,32⋅109
5,4±1,2⋅109
0,12
0,25
2,0±0,06⋅107
3,0±0,82⋅109
5,2±0,8⋅109
Увеличение содержания мелассы и кукурузного экстракта, вносимых в питательную
среду, будет способствовать снижению рентабельности при получении и применении
данного бактериального препарата в сельском хозяйстве.
4
BY 13575 C1 2010.08.30
Из приведенных данных следует, что получены по сравнению с прототипом (Azotobacter - 108) наиболее высокие титры жизнеспособных клеток Rhizobium galegae БИМ B-437 Д 109-1010 при культивировании на кукурузно-мелассной среде при следующем соотношении
компонентов, %: кукурузный экстракт - 1,0, меласса - 0,5, (NH4)3PO4 - 0,05. Простота приготовления, доступность компонентов и их дешевизна - это аргументы, которые являются основанием для использования данной питательной среды для культивирования штамма.
Пример 3.
Отработка оптимального количества посевного материала, обеспечивающего высокий
титр жизнеспособных клеток Rhizobium galegae БИМ B-437 Д. С этой целью колбы со
стерильной средой засевали культурой в количестве 5, 10 % от объема. В табл. 3 представлены данные, показывающие, что максимальный титр жизнеспособных клеток Rhizobium galegae БИМ B-437 Д получен при использовании 10 % посевного материала. Через
48 ч культивирования на качалке титр культуры возрос на 2 порядка и был выше почти в 2
раза титра, полученного при использовании 5 % посевного материала.
Таблица 3
Влияние количества посевного материала на рост Rhizobium galegae БИМ B-437 Д
на кукурузно-мелассной среде в условиях глубинного культивирования на качалке
Титр клеток Rhizobium galegae БИМ B-437 Д,
Количество посевного матеКОЕ/мл среды
риала, % от объема
0ч
48 ч
7
5
1,5±0,05⋅10
4,8±0,64⋅109
10
2,9±0,09⋅107
8,2±1,12⋅109
Сокращение до 5 % (от объема) посевного материала не позволяет получить достаточной концентрации клеток, а дальнейшее увеличение (более 10 %) будет приводить к удорожанию процесса.
Пример 4.
Оптимизацию основных параметров культивирования Rhizobium galegae БИМ B-437 Д
проводили в трех температурных режимах (20, 28, 35 °С), при давлении 0,5 атм, скорости
вращения мешалки 200-220 об./мин и расходе воздуха 1,0 и 2,0 объема на объем среды в
минуту. В табл. 4, 5 приведены результаты влияния температуры и аэрации на рост Rhizobium galegae БИМ B-437 Д.
Таблица 4
Влияние температуры культивирования на рост Rhizobium galegae БИМ B-437 Д
в ферментере АНКУМ-2М
Титр жизнеспособных клеток Rhizobium galegae БИМ B-437 Д,
КОЕ/мл среды
Температура, °С
0ч
24 ч
36 ч
7
8
20
3,2±0,6⋅10
3,6±0,12⋅10
6,0±1,02⋅109
28
3,4±0,02⋅107
4,6±0,32⋅109
8,7±0,96⋅109
35
3,6±0,08⋅107
4,0±0,6⋅109
8,0±0,84⋅109
Таблица 5
Влияние интенсивности аэрации на рост Rhizobium galegae БИМ B-437 Д
в ферментере АНКУМ-2М
Аэрация (объем возТитр жизнеспособных клеток Rhizobium galegae БИМ B-437 Д,
духа/объем среКОЕ/мл среды
ды/мин)
0ч
24 ч
36 ч
7
8
2,0
3,2±0,14·10
3,6±0,08·10
5,2±0,27·109
7
9
1,0
3,4±0,08·10
4,6±0,12·10
8,7±0,52·109
5
BY 13575 C1 2010.08.30
Максимальный титр жизнеспособных клеток Rhizobium galegae БИМ B-437 Д получен
при температуре 28 °С и расходе воздуха 1,0 объема на объем среды.
Пример 5.
Реакцию штамма клубеньковых бактерий Rhizobium galegae БИМ B-437 Д на протравители семян: фундазол, раксил и дивидент-стар и выживаемость на семенах определяли
путем сравнительной оценки полученных титров культуры в вариантах опыта с контрольными данными (без протравителей) на агаризованной бобовой среде и жидкой при глубинном культивировании в колбах Эрленмейера объемом 500 мл с 250 мл, на
лабораторной качалке (скорость вращения 200-220 об./мин) при температуре 26-28 °С.
Выживаемость штамма на протравленных семенах (в среднем от использования всех
вышеуказанных протравителей) составила 80 %. Применение дивидента-стар обеспечивает приживаемость и способствует стимуляции размножения штамма Rhizobium galegae
БИМ B-437 Д на семенах. По сравнению с контрольным вариантом приживаемость составила 107 %, что в среднем на 39 % выше, чем в вариантах с фундазолом и раксилом.
Пример 6.
При использовании галеги восточной в качестве фиторемедианта почв, загрязненных
нефтью, актуальным вопросом является проверка микросимбионтов - штаммов клубеньковых бактерий, специфичных для конкретного растения-хозяина, способных инфицировать и создавать эффективный симбиоз с ним, на устойчивость к углеводородам нефти. В
результате экспериментов было выявлено и изучено новое и неочевидное свойство нового
штамма клубеньковых бактерий Rhizobium galegae - устойчивость к углеводородам нефти
(нефть, бензол, толуол, гексан, гексадекан, дизельное топливо, ксилол нефтяной). Поверхностный посев бактериальных суспензий штаммов клубеньковых бактерий Rhizobium
galegae проводили на агаризованной бобовой среде методом лунок. У штамма Rhizobium
galegae БИМ B-437 Д отмечен сплошной рост по всей поверхности бобовой среды и вокруг лунки с исследуемыми углеводородами нефти. Установлено, что в присутствии углеводородов нефти у всех других штаммов клубеньковых бактерий Rhizobium galegae,
хранящихся в коллекции непатогенных микроорганизмов института микробиологии НАН
Беларуси, в этих условиях отсутствует рост на агаризованной бобовой среде. Изучение
роста и развития штамма Rhizobium galegae БИМ B-437 Д совместно с углеводородами
нефти в жидкой культуре проводили на среде E-8 (г/л): NaCl - 0,5; MgSO4 - 0,8; KH2PO4 0,7; (NH4)2HPO4 - 1,5; 0,5 и 1,0 % нефти и дизельного топлива в качестве единственного
источника углерода.
Глубинное культивирование Rhizobium galegae БИМ B-437 Д проводили в колбах Эрленмейера объемом 500 мл с 250 мл исследуемой питательной среды на лабораторной качалке (скорость вращения 200-220 об./мин) при температуре 26-28 °С.
Показатели роста Rhizobium galegae БИМ B-437 Д на сравниваемых средах приведены
в табл. 7. Результаты эксперимента, приведенные в табл. показали, что через 72 ч культивирования максимальный титр жизнеспособных клеток Rhizobium galegae БИМ B-437 Д
получен при внесении в среду 0,5 % дизельного топлива и составляет
1,3±0,03⋅109 КОЕ/мл, что на порядок выше, чем полученный в контроле (среда E-8 без углеводородов) титр. При использовании 0,5 и 1,0 % нефти титр культуры через 72 ч культивирования в жидкой культуре на порядок выше и составляет 1,4 и 1,5·109 КОЕ/мл
соответственно.
6
BY 13575 C1 2010.08.30
Таблица 7
Рост Rhizobium galegae БИМ B-437 Д на среде E-8 с углеводородами нефти
при глубинном культивировании на качалке
Часы культивирования
Вариант опыта
0
24
48
72
Контроль
1,57±1,04⋅1010
(исходный титр)
Контроль (среда Е-8 +
3,5±0,56⋅108
5,2±0,64⋅108
1,09±109
3,9±0,12⋅108
0,5 % сахарозы)
0,5 % дизельного топлива 6,97±1,16⋅108
2,5±0,08⋅108
1,2±0,06⋅109
1,3±0,03⋅109
1,0 % дизельного топлива
2,9±0,05⋅108
4,8±0,32⋅108 1,03±0,08⋅109 3,3±0,05⋅108
0,5 % нефти
7,9±0,24⋅108
6,6±0,08⋅108
1,1±1,0⋅109
1,4±0,08⋅109
8
8
9
1,0 % нефти
6,0±1,08⋅10
7,7±1,2⋅10
1,7±0,02⋅10
1,5±0,96⋅109
Пример 7.
Исследование азотфиксирующей и ростстимулирующей активности штамма Rhizobium galegae БИМ B-437 Д проводили в полевых условиях, оценивая нодулирующую способность, высоту растений, выход урожая зеленой массы и его качество, прибавку к
урожаю.
Симбиотическую способность Rhizobium galegae БИМ B-437 Д в симбиозе с галегой
изучали по количеству образованных клубеньков.
Таблица 8
Влияние инокуляции семян на формирование бобово-ризобиального симбиоза
галеги восточной сорта "Гале"
Высота
Количество
Количество
Количество Масса клу- Масса растений
активных
Варианты
клубеньков,
клубеньков, беньков, корней, перед
клубеньков,
штук/1раст.
штук/м2
г/м2
г/м2 уходом на
штук/1раст.
зиму, см
Контроль (без
9
2,9
547,3
31,6
обработки)
R. galegae БИМ
59
16,0
5872
17,2
832,1
58,0
B-437 Д
Почва со старопахотных
36
8,8
3132
9,4
634,2
48,4
посевов
Согласно полученным данным (табл. 8), при анализе симбиотических показателей
установлено, что применение штамма Rhizobium galegae БИМ B-437 Д для инокуляции
семян галеги восточной способствует созданию более эффективного симбиоза. Установлено, что за счет инокулянта Rhizobium galegae БИМ B-437 Д стимулируется нодулирующая способность (количество активных клубеньков/1раст., /м2 г/м2), высота растений и
масса корней. По сравнению с применением почвенной суспензии в 1,8 раза возрастает
количество активных клубеньков на 1 растение, что составляет 1914 штук/м2, масса корней увеличивается на 197,9 г/м2. Применение штамма стимулирует рост фитомассы дополнительно на 83 % по сравнению с растениями без инокуляции.
Пример 8.
Показатели эффективности инокуляции семян галеги восточной.
Прибавка урожая от применения препарата на основе Rhizobium galegae БИМ B-437 Д
составила 231 ц/га (во второй год вегетации) при урожайности 638 ц/га, что составляет
7
BY 13575 C1 2010.08.30
157 % от контрольной. По сравнению с использованием почвенного инокулюма прибавка
к урожаю по зеленой массе составила 118 ц/га.
Таблица 9
Урожайность зеленой массы галеги восточной (2 год жизни) при инокуляции
семян разными видами инокулюма
Урожайность
Прибавка урожая
Варианты опыта
ц/га
ц /га
%
Опытное поле "Подберезье" Витебской области, сорт "Гале"
Контроль, без обработки
407
R. galegae БИМ B-437 Д
638
231
108
Почва со старопахотных по520
113
53
севов
Пример 9.
Показатели качества урожая.
Благодаря инокуляции семян Rhizobium galegae БИМ B-437 Д продуктивность галеги
восточной (ц/га кормовых единиц) по сравнению с контролем возрастает во второй год
вегетации на 55 %, что дополнительно обеспечивает 46 к.е./га. Содержание переваримого
протеина увеличивается на 8,67 ц/га по сравнению с контролем (без инокуляции).
Таблица 10
Продуктивность галеги восточной сорта "Гале" в зависимости от инокулянта
Выход, ц/га
Вариант опыта
кормовых единиц
переваримого протеина
Витебская область, опытное поле "Подберезье"
Контроль (без обработки)
81,6
11,80
R. galegae БИМ B-437 Д
127,6
20,47
Почвенная суспензия
104,0
15,13
Таким образом, предлагается специфичный в отношении растения-хозяина штамм
клубеньковых бактерий Rhizobium galegae БИМ B-437 Д, способный создавать с Galega
orientalis Lam. высоэффективный симбиоз и обладающий комплексом полезных и хозяйственно-ценных свойств (азотфиксирующей и ростстимулирующей активностями, устойчивостью к пестицидам и углеводородам нефти), используемый для предпосевной
инокуляции семян.
Таким образом, заявляемый штамм клубеньковых бактерий Rhizobium galegae БИМ
B-437 Д обеспечивает следующие преимущества по сравнению с прототипом:
создание симбиоза с галегой восточной;
более высокие титры культуры в полученном препарате (на порядок выше по сравнению с прототипом);
использование более технологичной среды (недорогие компоненты);
полная замена азотных удобрений;
повышение урожайности и качества зеленой массы;
устойчивость к пестицидам и выживаемость на протравленных семенах;
устойчивость к углеводородам нефти - новое и неочевидное свойство заявляемого
штамма.
Источники информации:
1. Патент RU 2000126444.
2. Патент РФ 2125549.
8
BY 13575 C1 2010.08.30
3. Патент RU 2286982.
4. Патент RU, МПК 7 2265000 C 05F 11/08.
5. Патент 216609 C1, МПК6 C 02F 3/00, 1/58, 1999.
6. Патент RU3 2286324 C1, МПК C 05F 11/08, C 12N 1/20, C 12R 1/065, 2006.
7. Хотянович В.А., Поздныкова А.И., Амстердамская Н.Ю. Производство торфяных
препаратов клубеньковых бактерий. Тр. Всесоюз. Науч.-исслед. ин-т с.х. микробиол. СПб., 1980. Т.50. - С. 30-59.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
9
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
145 Кб
Теги
патент, by13575
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа