close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY14446

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2011.06.30
(12)
(51) МПК
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 14446
(13) C1
(19)
B 01D 11/04 (2006.01)
ЭКСТРАКЦИОННАЯ СМЕСЬ
ДЛЯ ИЗВЛЕЧЕНИЯ МЕТИЛКСАНТИНОВ
(21) Номер заявки: a 20091352
(22) 2009.09.21
(43) 2011.04.30
(71) Заявитель: Учреждение образования
"Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский
университет" (BY)
(72) Авторы: Жебентяев Александр Ильич;
Пивовар Михаил Леонидович (BY)
(73) Патентообладатель: Учреждение образования "Витебский государственный
ордена Дружбы народов медицинский
университет" (BY)
(56) MEATHERALL R. et al. Therapeutic
Drug Monitoring. - 1988. - V. 10. - № 1. P. 101-115.
GB 2185376 A, 1987.
US 4390698, 1983.
US 4755391, 1988.
US 4904773, 1990.
SU 85014, 1950.
BY 14446 C1 2011.06.30
(57)
Экстракционная смесь для извлечения метилксантинов, содержащая хлороформ и
спирт, отличающаяся тем, что в качестве спирта содержит н-бутанол или изобутанол при
следующем соотношении компонентов, об. %:
хлороформ
67
н-бутанол или изобутанол
33.
Изобретение относится к области фармации, а именно к химико-токсикологическому
анализу, и может применяться для экстракции теобромина и теофиллина из водных сред и
биоматериала.
Как известно, теофиллин относится к группе спазмолитиков миотропного действия и
широко применяется для профилактики бронхоспазмов. Теобромин также проявляет спазмолитические свойства, но значительно реже применяется в медицинской практике [1].
При химико-токсикологическом исследовании биоматериал подвергается пробоподготовке. При использовании метода жидкость-жидкостной экстракции (ЖЖЭ) в качестве
экстрагента применяются индивидуальные органические растворители или их смеси. Использование смесей обусловлено их высокой эффективностью (высокие коэффициенты
распределения, меньшее экстрагирование примесей и проч.) по сравнению с индивидуальными органическими растворителями [2].
Прототипом данного изобретения является экстракционная смесь состава [3]:
хлороформ
95 % (по объему)
изопропанол
5 % (по объему).
Извлечение метилксантинов из биоматериала обычно осуществляют экстракцией смесью алкилгалогенидов (хлороформ, дихлорметан) со спиртами (изопропанол, метанол) в
различных соотношениях. Чаще всего используют смесь хлороформ: изопропанол в соот-
BY 14446 C1 2011.06.30
ношении (по объему): 95:5 [3, 4, 5, 6]. Это обусловлено тем, что она хорошо экстрагирует
кофеин и ее потери в водной фазе минимальны (за счет низкого содержания изопропанола, который в значительной степени переходит в водную фазу после экстракции).
Однако эта экстракционная смесь имеет существенный недостаток - невысокие коэффициенты распределения теобромина и теофиллина.
Задача изобретения - разработать состав экстракционной смеси с высокими коэффициентами распределения теобромина и теофиллина.
Реализация задачи достигается за счет того, что вместо изопропанола в экстракционной
смеси используют н-бутанол или изобутанол.
Изобретение поясняется следующими графическими материалами: на фиг. 1 изображен
график зависимости коэффициентов распределения теобромина и теофиллина от объемного процента (ω) н-бутанола в экстракционной смеси хлороформ: н-бутанол. На фиг. 2
изображен график зависимости коэффициентов распределения теобромина и теофиллина
от объемного процента (ω) изобутанола в смеси хлороформ: изобутанол.
Для приготовления экстракционных смесей берут хлороформ, н-бутанол и изобутанол,
соответствующие квалификации химически чистый (х.ч.) или чистый для анализа (ч.д.а.).
Хлороформ предварительно подвергают очистке от стабилизирующей добавки этанола по
следующей методике. Хлороформ встряхивают с концентрированной серной кислотой
(H2SO4), промывают водой, сушат над карбонатом калия (K2CO3) и перегоняют [7]. Изобутанол и н-бутанол дополнительной очистке не подвергают.
Экстракционные смеси готовят путем смешивания хлороформа, н-бутанола или изобутанола в посуде достаточной емкости. Расчет объемов органических растворителей производят исходя из следующей формулы:
ω ⋅ Vсмеси
Vспирта =
,
100%
где ω - процентное содержание (по объему) н-бутанола или изобутанола в смеси; Vспирта объем н-бутанола или изобутанола; Vсмеси - объем смеси.
Таким образом, для получения 100 мл предлагаемых экстракционных смесей органические растворители смешивают в следующих соотношениях:
для экстракционной смеси хлороформ: н-бутанол (содержание н-бутанола 33 %(об/об)):
хлороформ
67 мл
н-бутанол
33 мл,
для экстракционной смеси хлороформ: изобутанол (содержание изобутанола 33 % (об/об)):
хлороформ
67 мл
изобутанол
33 мл.
Для установления оптимального соотношения органических растворителей в смеси
предварительно были определены коэффициенты распределения теобромина и теофиллина при экстракции из модельных растворов смесями, содержащими различный объемный
процент н-бутанола или изобутанола.
Равновесную экстракцию при равных объемах водной и органической фаз (по 4 мл)
изучали в экстракционных флаконах объемом 10 мл. Температура при определении коэффициентов распределения составляла 20±1 °С. В каждый флакон помещали рассчитанные
объемы растворов теобромина или теофиллина и буферного раствора с pH = 5,0. Выбор
данного значения pH сделан из середины диапазона (pH = 4-7), рекомендуемого для извлечения теобромина и теофиллина [8]. Экстракцию проводили 4 мл смеси органических
растворителей во вращающем экстракторе в течение 5 мин. По окончании экстракции
флаконы центрифугировали при 3000 об/мин 5 мин для предотвращения образования микроэмульсии в водной фазе. Анализ водной фазы осуществляли УФ-спектрофотометрическим
методом (при длине волны 273 нм для теобромина и 272 нм для теофиллина) на регистрирующем спектрофотометре Specord 250. Для расчета концентраций исследуемых веществ
2
BY 14446 C1 2011.06.30
в водной фазе предварительно были построены градуировочные графики и рассчитаны
молярные коэффициенты поглощения.
На основе полученных данных были построены графики зависимости изменения коэффициентов распределения теобромина и теофиллина от содержания спирта в экстракционной смеси (фиг. 1, фиг. 2). В связи с большим различием коэффициентов распределения
теобромина и теофиллина на приведенных диаграммах для удобства используется логарифмическая шкала для коэффициентов распределения. Как видно из приведенных диаграмм, оптимальными для экстракции являются смеси хлороформ: н-бутанол (содержание
н-бутанола 33 %(об/об)) и хлороформ: изобутанол (содержание изобутанола 33 % (об/об)).
Коэффициенты распределения теобромина и теофиллина при экстракции предлагаемыми экстракционными смесями, смесью-прототипом и индивидуальными органическими растворителями из модельных растворов приведены в таблице.
Коэффициенты распределения метилпроизводных ксантина
при экстракции смесями органических растворителей (n = 5; α = 0,05).
Вещество:
Теобромин
Теофиллин
Экстрагент:
хлороформ: н-бутанол (ω = 33 %)
1,429±0,011
6,477±0,055
хлороформ: изобутанол (ω = 33 %)
1,492±0,021
6,748±0,057
хлороформ: изопропанол (ω = 5 %)
0,702±0,005
0,920±0,006
хлороформ
0,363±0,006
0,210±0,011
н-бутанол
0,582±0,014
1,885±0,019
изобутанол
0,567±0,016
1,449±0,017
Положительный эффект изобретения заключается в том, что при экстракции предложенными экстракционными смесями коэффициенты распределения теобромина в 2 раза
выше, чем у смеси-прототипа и в 4 раза выше, чем у индивидуальных растворителей. При
экстракции теофиллина коэффициенты распределения выше в 6 раз по сравнению со смесью-прототипом и в 30 раз выше, чем при экстракции хлороформом. Что позволяет в
большей степени извлекать теобромин и теофиллин из водных растворов и биологических
объектов.
Источники информации:
1. Курбат Н.М., Станкевич П.Б. Фармакорецептурный справочник врача. 2-е изд. испр.
и доп. - Минск: Выш. шк., 2003. - 605 с.
2. Коренман И.М. Экстракция в анализе органических веществ. - М.: Химия. - 1977. 200 с.
3. Meatherall R., Ford D. Isocratic liquid chromatographic determination of theophylline, acetaminophen, chloramphenicol, caffeine, anticonvulsants, and barbiturates in serum / // Ther.
Drug Monit. - 1988. - Vol. 10. - No. l.-P. 101-115 (прототип).
4. Pellegrini M., Marchei E., Rossi S., Vagnarelli F., Durgbanshi A., García-Algar O., Vall O.,
Pichini S. Liquid chromatography/electrospray ionization tandem mass spectrometry assay for
determination of nicotine and metabolites, caffeine and arecoline in breast milk // Rapid Commun.
Mass. Spectrom. - 2007. - Vol. 21, No. 16. - P. 2693-2703.
5. Bailey D.G., Davis H.L., Johnson G.E. Improved theophylline serum analysis by an appropriate internal standard for gas chromatography // J. Chromatogr. - 1976. - Vol. 21. - No. 2. P. 263-268.
6. Soldin S.J., Hill J.G. A rapid micromethod for measuring theophylline in serum by reversephase high-performance liquid chromatography // Clin. Biochem. - 1977. - Vol. 10. - No. 2. P. 74-77.
3
BY 14446 C1 2011.06.30
7. Гордон А., Форд Р. Спутник химика. - M.: Мир, 1976. - 544 с.
8. Крамаренко, В.Ф. Токсикологическая химия. - Киев: Выща шк. Головное изд-во,
1989. - 447 с.
Фиг. 1
Фиг. 2
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
4
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
92 Кб
Теги
by14446, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа