close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY14663

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2011.08.30
(12)
(51) МПК
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 14663
(13) C1
(19)
A 61K 39/108
A 61K 39/112
A 61K 31/722
A 61P 37/02
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
ПРЕПАРАТ ДЛЯ ИММУНОКОРРЕКЦИИ У ЖИВОТНЫХ
(21) Номер заявки: a 20091495
(22) 2009.10.21
(43) 2010.04.30
(71) Заявитель: Зайцева Алеся Владимировна (BY)
(72) Автор: Зайцева Алеся Владимировна (BY)
(73) Патентообладатель: Зайцева Алеся Владимировна (BY)
(56) BY 7787 C1, 2006.
JP 2005-60327 A.
CN 101385504 A, 2009.
BY a 20090306, 2009.
BY 11671 C1, 2009.
JP 57-14533 A, 1982.
JP 59161320 A, 1984.
RU 2185191 C1, 2002.
RU 2311197 C1, 2007.
RU 2366455 C2, 2009.
BY 14663 C1 2011.08.30
(57)
Препарат для иммунокоррекции у животных, отличающийся тем, что содержит
1,0 %-ный раствор О-соматических антигенов сальмонелл или эшерихий в качестве иммуномодулятора и 2,0 %-ный раствор хитозана с молекулярной массой 20-100 кД при следующем соотношении компонентов, мас. %:
2,0 %-ный раствор хитозана с молекулярной массой 20-100 кД
2,5-12,5
1,0 %-ный раствор О-соматических антигенов сальмонелл или
эшерихий
87,5-97,5.
Изобретение относится к ветеринарной биотехнологии, а именно к способу получения
иммуностимулятора из соматических антигенов сальмонеллезных или колибактериозных
бактерий и хитозана.
Известны способы получения биологически активных препаратов [1, 8].
Широко известны способы получения иммуностимулирующих препаратов из компонентов бактериальных клеток:
детоксицированного липополисахарида из нейсерий [1];
липополисахарид из биомассы авирулентного штамма S. shigella sonnei выделяют
вводно-фенольной экстракцией при температуре 65 °С по способу O. Westphal, K. Jann [8]
и очищают гельфильтрацией на сефадексе G-200 [3];
липополисахарид получают путем экстракции бактерий трихлоруксусной кислотой [5];
липополисахарид из биомассы B. pertussis штамма 475 выделяют по методу O. Westphal et all. [7] и очищают путем трехкратного пересаждения и дальнейшего центрифугирования при 15000 д в течение 2 ч [6];
соматический антиген из биомассы S. pullorum-gallinarum [4];
полисахаридный антиген из сальмонелл [2];
BY 14663 C1 2011.08.30
Наиболее близким техническим решением к предлагаемому изобретению является
способ получения биологически активного препарата из сальмонелл [3].
Согласно описанному методу биомассу сальмонелл обрабатывают ацетоном, а полисахаридный антиген экстрагируют аммиаком и смешивают с тиосульфатом натрия.
Однако полученный препарат обладает высокой токсичностью и низкой биологической активностью.
Задача изобретения - увеличение биологической активности целевого продукта и снижение его токсичности.
Поставленная цель достигается тем, что 1 %-ный раствор О-соматических антигенов
сальмонелл или эшерихий в соотношении 1:7-1:39 смешивают с 2 %-ным раствором хитозана 20-100 KD.
Сущность изобретения. Препарат для иммунокоррекции у животных, отличающийся
тем, что содержит 1,0 %-ный раствор О-соматических антигенов сальмонелл или эшерихий в качестве иммуномодулятора и 2,0 %-ный раствор хитозана с молекулярной массой
20-100 KD при следующем соотношении компонентов, мас. %:
2,0 %-ный раствор хитозана с молекулярной массой 20-100 KD
2,5-12,5
1,0 %-ный раствор О-соматических антигенов сальмонелл или эшерихий
87,5-97,5.
Для оценки биологической активности препараты, изготовленные разными методами,
в дозе 0,2 см3 вводили подкожно белым мышам через 24 часа после их инфицирования
культурой рожистых бактерий матрикса Конева.
Для испытания каждого препарата использовали по 10 мышей. Контрольной группе
мышей препарат не вводили.
Учет выживаемости мышей осуществляли через 8 часов в течение 15 суток.
Все испытуемые препараты при внутрибрюшинном введении в дозе 0,5 см белым
мышам не вызывали заболеваемость и гибель животных в течение 10 суток наблюдения.
Было установлено, что в контрольной группе все белые мыши погибали в течение 4-7 суток.
Пример 1 (прототип)
Сальмонеллезные бактерии выращивают на питательной среде, содержащей в качестве белковой основы водный и кислотно-ферментативный гидролизат мясокостной муки,
а в качестве стимулятора роста - щелочно-перекисный гидролизат сыворотки крови животных. Полученную биомассу бактерий отделяют от культуральной жидкости путем центрифугирования. Биомассу сальмонелл инкубируют в ацетоне в течение 24 часов при
температуре 4 °С и соотношении ингредиентов 1:3.
Биомассу отделяют от ацетона, ресуспендируют в 1 %-ном растворе аммиака. Щелочной гидролиз осуществляют при температуре 105 °С в течение 60 минут. Экстракт центрифугируют, а в полученный гидролизат добавляют до 0,5 % тиосульфата натрия.
Через 10 суток после инфицирования рожистыми бактериями выживаемость мышей
составила 50 %.
Пример 2
2,0 %-ный раствор хитозана 80 KD смешивали с 1,0 %-ным раствором О-соматических
антигенов сальмонелл в соотношении 1:39. Выживаемость мышей составила 90 %.
Пример 3
2,0 %-ный раствор хитозана 80 KD смешивали с 1,0 %-ным раствором О-соматических
антигенов сальмонелл в соотношении 1:35. Выживаемость мышей составила 90 %.
Пример 4
Способ осуществляли аналогично примеру 2, но использовали 0,9 %-ный раствор
О-соматических антигенов сальмонелл и 1,9 %-ный раствор хитозана 80 KD. Выживаемость мышей составила 60 %.
Пример 5
Способ осуществляли аналогично примеру 2, но использовали 1,0 %-ный раствор
О-соматических антигенов эшерихий. Выживаемость мышей составила 90 %.
2
BY 14663 C1 2011.08.30
Пример 6
3,0 %-ный раствор хитозана 80 KD смешивали с 2,0 %-ным раствором О-соматических
антигенов сальмонелл в соотношении 1:39. Выживаемость мышей составила 50 %.
Пример 7
Способ осуществляли аналогично примеру 2, но вместо хитозана 80 KD использовали
хитозан 100 KD. Выживаемость мышей составила 90 %.
Пример 8
Способ осуществляли аналогично примеру 2, но вместо хитозана 80 KD использовали
хитозан 20 KD. Выживаемость мышей составила 90 %.
Пример 9
Способ осуществляли аналогично примеру 2, но вместо хитозана 80 KD использовали
хитозан 15 KD. Выживаемость мышей составила 50 %.
Пример 10
Способ осуществляли аналогично примеру 2, но вместо хитозана 80 KD использовали
хитозан 120 KD. Выживаемость мышей составила 40 %.
Пример 11
Способ осуществляли аналогично примеру 2, но растворы хитозана и О-соматических антигенов сальмонелл смешивали в соотношении 1:7. Выживаемость мышей составила 90 %.
Пример 12
Способ осуществляли аналогично примеру 2, но растворы хитозана и О-соматических антигенов сальмонелл смешивали в соотношении 1:49. Выживаемость мышей составила 50 %.
Пример 13
Способ осуществляли аналогично примеру 2, но растворы хитозана и О-соматических антигенов сальмонелл смешивали в соотношении 1:6. Выживаемость мышей составила 40 %.
Из представленных материалов видно, что для изготовления препарата 2 %-ый раствор хитозана 20-100 KD и 1,0 %-ый раствор О-соматических антигенов сальмонелл или
эшерихий следует смешивать в соотношении 1:7-1:39. Препарат защищает 90 % животных, инфицированных рожистыми бактериями.
Иммуномодулятор, приготовленный согласно параметрам, указанным в формуле
изобретения, по биологической активности в 1,5-1,8 раза выше, чем препараты, изготовленные при других условиях.
Источники информации:
1. Лазарева Д.Н. Стимуляторы иммунитета / Д.Н. Лазарева, Е.К. Алехин. - М.: Медицина, 1985. - С. 15.
2. Патент РБ 7787, МПК A 61K 35/74, 39/112, 2006.
3. Протективная активность детоксицированного липополисахарида Neiseria meningitides серогруппы А в опытах in vivo / А.А. Дельвич [и др.] // Журнал микробиология. 1989. - № 5. - С. 70.
4. Татаренко Т.М. Проблемы особоопасных инфекций / Т.М. Татаренко, С.М. Дальвадяну, Е.Э. Бахрах. - Саратов, 1972. - Вып. 3 (25). - С. 93-98.
5. Boivin A., Mesrobcani L. // C.R. Sos. Biol. - 1993. - Vol. 144. - P. 307-310.
6. Dalla Venezia N., Minka S., Brunetean M. et all. // Europ. J. Biochem. - 1985. - Vol. 151. P. 399-404.
7. Staub A.M. // Meth. Carbohydr. Chem. - 1965. - Vol. 5. - P. 92-95.
8. Westphal O., Jann. // Meth. Carbohydr. Chem. - 1965. - Vol. 5. - P. 83-91.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
3
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
76 Кб
Теги
by14663, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа