close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY14677

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2011.08.30
(12)
(51) МПК
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
C 12N 1/20
(2006.01)
СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ
ЛЕПТОСПИРОЗНЫХ БАКТЕРИЙ
(21) Номер заявки: a 20091494
(22) 2009.10.21
(43) 2010.04.30
(71) Заявители: Зайцев Владимир Владимирович; Зайцева Алеся Владимировна; Кондратенко Мария Юльяновна; Дремач Геннадий Эдуардович; Зайцева Людмила Петровна
(BY)
(72) Авторы: Зайцев Владимир Владимирович; Зайцева Алеся Владимировна; Кондратенко Мария Юльяновна; Дремач Геннадий Эдуардович; Зайцева Людмила Петровна
(BY)
(73) Патентообладатели: Зайцев Владимир Владимирович; Зайцева Алеся
Владимировна; Кондратенко Мария
Юльяновна; Дремач Геннадий Эдуардович; Зайцева Людмила Петровна (BY)
BY 14677 C1 2011.08.30
BY (11) 14677
(13) C1
(19)
(56) Справочник ветеринарного лаборанта. М.: Колос, 1981. - С. 37.
ЗАЙЦЕВ В.В. и др. // Ветеринарная
наука - производству. - 2005. - Вып. 38. С. 220-221.
BY 7321 C1, 2005.
BY a 20081175, 2009.
BY a 20081200, 2009.
RU 2177699 C1, 2002.
RU 2040932 C1, 1995.
RU 2054484 C1, 1996.
RU 2096042 C1, 1997.
RU 2006117257 A, 2007.
RU 2202608 C2, 2003.
ЗАЙЦЕВ В.В. // Ветеринарная медицина Беларуси. - 2004. - № 3. - С. 8-9.
ВОЛИНА Е.Г. и др. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2001. - № 1. - С. 3-5.
UA 26116 U, 2007.
RU 2021818 C1, 1994.
(57)
Среда для культивирования бактерий рода Leptospira, содержащая сыворотку крови
овец или кроликов, отличающаяся тем, что дополнительно содержит 0,4 % раствор биологически активных веществ мицелия и метаболитов гриба Fusarium sambucinum и фосфатный буфер с pH 7,0-7,4 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
сыворотка крови овец или кроликов
5-10
0,4 % раствор биологически активных веществ мицелия и метаболитов гриба Fusarium sambucinum
3-8
фосфатный буфер, pH 7,0-7,4
остальное.
Изобретение относится к микробиологии, в частности - к производственному культивированию лептоспирозных бактерий, используемых в диагностике и изготовлении вакцин.
Для культивирования лептоспирозных бактерий используют следующие питательные
среды: вводно-сывороточная среда Ферваорт-Вольфа (1928); Кортгофа (1932); Тарасова
(1937); синтетические безбелковые среды: Шенберга (1967), Торнея (1974), Элленгаузена
(1967), Элленгаузена для ветеринарных целей (1976), Рассела (1986), твин-альбумин-
BY 14677 C1 2011.08.30
сывороточная среда Эллиса, альбуминовая среда ГНКИ (М.А. Бабич, Ю.М. Дигальцев,
1965) и др. [1-6].
Наиболее близким техническим решением к предлагаемому изобретению является
среда Любашенко [3].
Среду Любашенко готовят путем фильтрации через бумагу и стерилизации при 1 атм.
в течение 30 мин нехлорированной водопроводной, колодезной или речной водой. После
охлаждения pH воды устанавливают 7,3-7,4 и добавляют 5 % сыворотки крови кролика
или барана, прогретой при 56 °С в течение 1 ч. Среду фильтруют через пластинки "СФ" в
приборе Зейтца при небольшом вакууме (660 мм ртутного столба) и асептически разливают в пробирки. Для проверки на стерильность пробирки выдерживают при 37 °С 48 ч.
При соблюдении всех необходимых условий штаммы лептоспирозных бактерий вырастают в этой среде через 5-7 суток, накопление их не превышает 80-100 млн./см3 микробных клеток.
Цель изобретения - повышение выхода и биологической активности целевого продукта.
Поставленная цель достигается тем, что к смеси белковой основы и буферного раствора добавляют стимулятор. В качестве стимулятора роста лептоспир используют 0,4 % раствор биологически активных веществ мицелия и метаболитов гриба Fusarium sambucinum.
Сущность предлагаемого изобретения заключается в том, что среда для культивирования бактерий рода Leptospira содержит сыворотку крови овец или кроликов и дополнительно 0,4 % раствор биологически активных веществ мицелия и метаболитов гриба
Fusarium sambucinum и фосфатный буфер с pH 7,0-7,4 при следующем соотношении компонентов, мас. %:
сыворотка крови овец или кроликов
5-10
0,4 % раствор биологически активных веществ ми3-8
целия и метаболитов гриба Fusarium sambucinum
фосфатный буфер, рН 7,0-7,4
остальное.
Пример 1
Для приготовления фосфатного буфера 1/15 M раствора двузамещенного фосфата
натрия и однозамещенного фосфата калия данные вещества смешивали в соотношении
7:3, смесь разводили дистиллированной водой в соотношении 1:10. pH устанавливали 7,07,4 добавлением первого или второго растворов и стерилизовали при температуре 120 °С
в течение 60 минут.
Кровь барана дефибринировали, отделяли сыворотку, прогревали при температуре 5658 °С в течение 30-60 минут. Прогретую сыворотку фильтровали через стерилизующие
фильтры.
Сыворотку крови овец, 0,4 % раствор биологически активных веществ метаболитов и
мицелия гриба Fusarium sambucinum fuckel и фосфатный буфер смешивали при соотношении компонентов (мас. %) 5:3:92.
Среда обеспечивала накопление лептоспирозных бактерий 750-840 млн/см3 микробных клеток. Вакцина, приготовленная из смеси культур лептоспир, вызывала у иммунизированных кроликов PMA в титре 1:800 к серогруппам Помона и Тарассови и 1:200 к
серогруппе Иктерогеморрагия.
Пример 2
Способ осуществляли аналогично примеру 1, но сыворотку крови овец, 0,4 % раствор
биологически активных веществ мицелия и метаболитов гриба Fusarium sambucinum и
фосфатный буфер смешивали при соотношении компонентов (мас. %) 5:4:41.
Среда обеспечивала накопление лептоспирозных бактерий 720-830 млн/см3 микробных клеток. Вакцина, приготовленная из смеси культур лептоспир, вызывала у иммунизированных кроликов PMA в титре 1:800 к серогруппам Помона и Тарассови и 1:200 к
серогруппе Иктерогеморрагия.
2
BY 14677 C1 2011.08.30
Пример 3
Способ осуществляли аналогично примеру 1, но для изготовления среды использовали
сыворотки крови кроликов.
Накопление лептоспирозных бактерий составило 810-860 млн/см3 микробных клеток.
Вакцина, приготовленная из смеси культур лептоспир, обеспечивала проявление иммунной реакции у иммунизированных кроликов в PMA 1:800 к серогруппам Помона и Тарассови и 1:200 к серогруппе Иктерогеморрагия.
Пример 4
Способ осуществляли аналогично примеру 1, но сыворотку крови овец, 0,4 % раствор
биологически активных веществ мицелия и метаболитов гриба Fusarium sambucinum и
фосфатный буфер смешивали при соотношении компонентов (мас. %) 2:1:48.
Среда обеспечивала накопление лептоспирозных бактерий 380-420 млн/см микробных
клеток. Вакцина, приготовленная из смеси культур лептоспир, обеспечивала проявление
иммунной реакции у иммунизированных кроликов в PMA 1:400 к серогруппам Помона и
Тарассови и 1:100 к серогруппе Иктерогеморрагия.
Пример 5
Способ осуществляли аналогично примеру 1, но сыворотку крови овец, 0,4 % раствор
биологически активных веществ мицелия и метаболитов гриба Fusarium sambucinum и
фосфатный буфер смешивали при соотношении компонентов (мас. %) 11:9:80.
Среда обеспечивала накопление лептоспирозных бактерий 410-430 млн/см3 микробных клеток. Вакцина, приготовленная из смеси культур лептоспир, обеспечивала проявление иммунной реакции у иммунизированных кроликов в PMA 1:400 к серогруппам
Помона и Тарассови и 1:100 к серогруппе Иктерогеморрагия.
Пример 6
Способ осуществляли аналогично примеру 1, но 0,4 % раствор биологически активных веществ мицелия и метаболитов гриба Fusarium sambucinum в среду не добавляли.
Среда обеспечивала накопление лептоспирозных бактерий 85-100 млн/см3 микробных
клеток. Вакцина, приготовленная из смеси культур лептоспир, обеспечивала проявление
иммунной реакции у иммунизированных кроликов в PMA 1:400 к серогруппам Помона и
Тарассови и 1:100 к серогруппе Иктерогеморрагия.
В ходе экспериментальной работы нами установлено, что при содержании сыворотки
животных в питательной среде менее 5 % и более 10 % существенно снижается интенсивность роста и деления лептоспирозных бактерий.
При содержании в питательной среде менее 3 % и более 8 % раствора биологически
активных веществ мицелия и метаболитов гриба Fusarium sambucinum интенсивность роста и деления лептоспир существенно снижается.
Из представленных данных видно, что для производственного культивирования лептоспирозных бактерий, используемых для изготовления вакцин, целесообразно применять
питательную среду, содержащую 5-10 % сыворотки крови овец или кроликов, 3-8 % раствора биологически активных веществ мицелия и метаболитов гриба Fusarium sambucinum
и 82-92 % фосфатного буфера.
Питательная среда вышеуказанного состава обеспечивает накопление лептоспир 720840 млн/см3 микробных клеток.
Источники информации:
1. Волина Е.Г. и др. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2001. - № 1. - С. 3-5.
2. Ситьков В.И. Научные и практические основы промышленного производства и
применения вакцин: Дисс. д-ра вет. наук. - Москва, 1997. - С. 58.
3
BY 14677 C1 2011.08.30
3. Справочник ветеринарного лаборанта / Ф.З.Андросов, И.Я.Беляев, Р.Т.Клочко и др. /
Под ред. В.Я.Антонова. - М.: Колос, 1981. - С. 37.
4. BY 3092 C1, 1999.
5. SU 1237707 Ф1, 1986.
6. SU 828459, 1983.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
4
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
78 Кб
Теги
by14677, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа