close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY14755

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2011.08.30
(12)
(51) МПК
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
A 61K 47/36 (2006.01)
A 61K 47/10 (2006.01)
A 61K 9/00 (2006.01)
МУКОАДГЕЗИВНЫЕ КСИЛОГЛЮКАНСОДЕРЖАЩИЕ
ПРЕПАРАТЫ, ПОЛЕЗНЫЕ В МЕДИЦИНСКИХ УСТРОЙСТВАХ И В
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТАХ
(21) Номер заявки: a 20071481
(22) 2006.06.01
(31) BO2005A000388 (32) 2005.06.06 (33) IT
(85) 2008.01.06
(86) PCT/EP2006/005240, 2006.06.01
(87) WO 2006/131262, 2006.12.14
(43) 2008.06.30
(71) Заявитель: АЛЬФА ВАССЕРМАН
С.П.А. (IT)
(72) Авторы: БОТТОНИ, Джузеппе;
МАФФЕИ, Паола; СФОРЦИНИ,
Аннализа; ФЕДЕРИЧИ, Маша; КАРАМЕЛЛА, Карла; РОССИ, Сильвия; ВИСКОМИ, Джузеппе, Клаудио (IT)
BY 14755 C1 2011.08.30
BY (11) 14755
(13) C1
(19)
(73) Патентообладатель: АЛЬФА ВАССЕРМАН С.П.А. (IT)
(56) US 2004/0192640 A1.
US 6056950 A, 2000.
WO 97/29777 A1.
(57)
1. Мукоадгезивная композиция для нанесения на слизистые оболочки человека, отличающаяся тем, что содержит водный раствор, включающий очищенный природный полимер, имеющий структуру ксилоглюкана, в концентрации 0,05-5,00 мас. % и глицерин в
концентрации 10-70 мас. %, причем очищенный природный полимер, имеющий структуру
ксилоглюкана, характеризуется тем, что его 2 %-ный водный раствор при 25 °С имеет вязкость 150-800 мПа·с, измеренную со скоростью сдвига 200 с-1 и временем покоя 15 минут,
и величину поглощения при 280 нм менее 0,5 абсолютных единиц.
2. Мукоадгезивная композиция по п. 1, отличающаяся тем, что дополнительно содержит активные фармацевтические ингредиенты и эксципиенты, подходящие для фармацевтических препаратов.
3. Мукоадгезивная композиция по п. 2, отличающаяся тем, что выполнена в виде
препарата с регулируемым высвобождением, в котором регулируемое высвобождение
обеспечивается путем корректировки содержания глицерина в водном растворе.
4. Фармацевтический препарат для обработки слизистых оболочек человека, содержащий активные фармацевтические ингредиенты, эксципиенты и водный раствор, включающий очищенный природный полимер, имеющий структуру ксилоглюкана, в
концентрации 0,05-5,00 мас. % и глицерин в концентрации 10-70 мас. %, причем очищенный природный полимер, имеющий структуру ксилоглюкана, характеризуется тем, что
его 2 %-ный водный раствор при 25 °С имеет вязкость 150-800 мПа·с, измеренную со ско-
BY 14755 C1 2011.08.30
ростью сдвига 200 с-1 и временем покоя 15 минут, и величину поглощения при 280 нм менее 0,5 абсолютных единиц.
5. Фармацевтический препарат по п. 4, отличающийся тем, что выполнен в виде раствора, геля, овули, спрея, раствора для полоскания полости рта, крема, мази, жидкой мази
или средства для орошения полостей, а активные фармацевтические ингредиенты выбраны из антибиотиков, противогрибковых средств, противопротозойных средств, противовирусных средств, противовоспалительных средств, дезинфицирующих средств,
химиотерапевтических средств, анальгетиков, антисептических средств, муколитических
средств, противокашлевых средств, противоотечных средств, регуляторов всасывания
кальция, гормонов и вакцин.
6. Фармацевтический препарат противовоспалительного действия в виде спрея для ротоглотки, содержащий мукоадгезивную композицию по п. 1 и фармацевтически эффективное количество диклофенака в виде кислоты или его соли.
7. Фармацевтический препарат гормонального действия в виде вагинального геля, содержащий мукоадгезивную композицию по п. 1 и фармацевтически эффективное количество прогестерона.
8. Фармацевтический препарат противовоспалительного действия в виде средства для
орошения полости влагалища, содержащий мукоадгезивную композицию по п. 1 и фармацевтически эффективное количество гидрохлорида бензидамина.
9. Фармацевтический препарат для регулирования обмена кальция в виде назального
спрея, содержащий мукоадгезивную композицию по п. 1 и фармацевтически эффективное
количество кальцитонина.
10. Фармацевтический препарат, обладающий смягчающим действием, в виде спрея
для ротоглотки, содержащий фармацевтически эффективное количество мукоадгезивной
композиции по п. 1 и эксципиенты.
11. Очищенный природный полимер, имеющий структуру ксилоглюкана и характеризующийся тем, что его 2 %-ный водный раствор при 25 °С имеет вязкость 150-800 мПа·с,
измеренную со скоростью сдвига 200 с-1 и временем покоя 15 минут, и величину поглощения при 280 нм менее 0,5 абсолютных единиц.
12. Способ получения очищенного природного полимера, имеющего структуру ксилоглюкана и характеризующегося тем, что его 2 %-ный водный раствор при 25 °С имеет
вязкость 150-800 мПа·с, измеренную со скоростью сдвига 200 с-1 и временем покоя 15 минут, и величину поглощения при 280 нм менее 0,5 абсолютных единиц, при котором готовят 0,5-5,0 %-ную суспензию экстракта неочищенного природного полимера, имеющего
структуру ксилоглюкана, в холодной дистиллированной воде, вливают полученную суспензию в 4-кратный объем кипящей дистиллированной воды, выдерживают при кипячении и перемешивании в течение 15-30 минут, отстаивают в течение 10-20 часов,
центрифугируют при 4000-8000 об/мин в течение 15-30 минут, фильтруют супернатант
через полипропиленовый фильтр 6 мкм, дополнительно центрифугируют фильтрат при
12000-18000 об/мин в течение 30-60 минут и стерилизуют фильтрат через полипропиленовый фильтр 0,22 мкм или в автоклаве при 121 °С в течение 20-40 минут.
13. Способ по п. 12, отличающийся тем, что экстракт неочищенного природного полимера, имеющего структуру ксилоглюкана, представляет собой экстракт Detarium senegalense J.Gmelin или Afzelia africana.
Настоящее изобретение относится к мукоадгезивным препаратам, подходящим для
нанесения на слизистые оболочки человека, для применения в качестве увлажняющих и
смягчающих агентов или в качестве систем высвобождения фармацевтических средств
для местного и/или системного применения.
2
BY 14755 C1 2011.08.30
Слизистая оболочка представляет собой покрывающую мембрану внутренней поверхности полостей тела и каналов органов, прямо или опосредованно связанных с наружной
поверхностью, например, ротовой полостью, желудочно-кишечным трактом, дыхательными путями и полостью влагалища. Несмотря на некоторые различия, типичные для
каждого конкретного аппарата, слизистые оболочки по существу состоят из эпителия, покрывающего полость органа или просвет канала и, более глубоко, соединительной ткани
(tunica propria или дерма слизистой) с поддерживающей функцией, причем эта ткань может быть богатой эластичным волокном и лимфоцитами. Слизистые оболочки увлажнены
секретом желез, содержащихся в их толще, или непосредственно продуцируемым железистым эпителием, из которого они состоят. Такие жидкости главным образом состоят из
воды, гликопротеинов (муцин), липидов, минеральных солей и ферментов. Основные
функции всех секретируемых жидкостей заключаются в модуляции взаимодействий между эпителиальными клетками и их окружением посредством процесса смазывания/гидратации, регулирующего процесса на химико-физическом и микробиологическом
уровнях "экоситемы" полостей, действуя также как защитный барьер против патогенов.
Пониженная секреция жидкостей вызывает неизбежное возникновение "сухости" симптома, связанного с большим количеством патологических состояний. Действительно,
сухость слизистой оболочки является в большинстве случаев первым клиническим симптомом синдрома Шегрена, системного аутоиммунного заболевания, поражающего экзокринные железы, вызывая прогрессивную потерю их активности. Клиническая картина
характеризуется уменьшением слезной и слюнной секреций (сухость глаз с кератоконъюнктивитом, ксеростомия, дисфагия) и уменьшением секреции слизистой оболочки влагалища и бронхиального дерева.
Слизистая оболочка влагалища состоит из некератинизированного многослойного
плоского эпителия. Промежуточные слои этого эпителия имеют клетки, богатые гликогеном. Эпителий расположен на lamina propria без желез и богатой сосудами, в основном
венами. Слизистая оболочка в физиологических условиях покрыта смазывающей жидкостью, главным образом продуцируемой эндометрием матки, эндоцервикальными железами (слизь, выделяемая шейкой матки) и основными преддверными железами
(бартолиновы железы) [J.R. Berman et al., Eur. Urol., 38, 20-29, 2000].
Влагалищное отделяемое у женщины детородного возраста в норме является кислым
(pH 3,5-4,5), в то время как до полового созревания, а также после менопаузы секреты
имеют тенденцию быть щелочными. Влагалищное отделяемое является вязким, причем
вода является основным компонентом (90-99 %), в то время как количество муцина (гликопротеина) составляет до 0,5-5 мас. %. Муцин отвечает за химико-физические характеристики влагалищного отделяемого, в частности вязкость и мукоадгезивные свойства.
Влагалищное отделяемое также содержит плазматические белки, ферменты (протеазу, бетаглюкоронидазу, кислую и щелочную фосфатазу и эстеразу), аминокислоты, холестерин,
липиды, неорганические ионы, молочную кислоту, уксусную кислоту и слущенные эпителиальные клетки. Кроме влагалищной слизи во влагалище также присутствует сывороточный транссудат.
Продукция слизи и концентрация различных компонентов варьируются в течение
менструального периода [M.M. Garrey, "Ginecologia Illustrata", Ed. II Pensiero Scientifico,
1974].
Продукция влагалищной слизи регулируется главным образом половыми стероидами,
которые влияют на биофизические свойства секреции. Гормональные изменения могут
быть причиной снижения продукции слизи с последующим уменьшением смазки слизистой оболочки влагалища (сухость влагалища). Это состояние может часто возникать во
время менопаузы, когда, как следствие снижения уровней циркулирующих эстрогенов,
гениталии претерпевают анатомические изменения с последующим изменением морфологических и функциональных характеристик. Яичники склеротизируются, эндометрий
3
BY 14755 C1 2011.08.30
атрофируется, железистый компонент имеет тенденцию исчезать, цервикальный канал
сужается, и шеечная слизь исчезает, влагалище сужается и теряет свою эластичность,
стенки влагалища становятся более тонкими, атрофированными и сухими. Регрессия очевидна как во влагалище, так и в шейке, и плазматическая транссудация исчезает.
Сниженная продукция слизи подвергает слизистую оболочку большей уязвимости
против инфекций, как следствие механических повреждений поверхности вследствие трения, которые могут иметь место во время полового акта. Такая чувствительность может
дополнительно повыситься из-за влагалищных изменений (уменьшение внутриклеточного
гликогена, изменения рН и микрофлоры), типичных для менопаузы [G.B. Candiani, V.
Danesino, A. Gastaldi, La Clinica Ostetrica e Ginecologica, Ed. Masson, 1992]. Это состояние
вызывает совокупность симптомов, характеризующуюся диспареунией, жжением и зудом
с весьма значительными физиологическими и сексуальными расстройствами.
Временная, периодическая или дефинитивная сухость влагалища является распространенной проблемой, которая может возникнуть в любое время жизни женщины, от полового созревания до менопаузы, и часто может делать половой акт болезненным или
даже невозможным.
Помимо менопаузы, которая очевидно представляет собой наиболее распространенное
состояние, вызывающее сухость влагалища, существует много других причин либо эндокринной природы (пониженные уровни циркулирующих эстрогенов), либо неэндокринной
природы, таких как гистерэктомия/овариоэктомия, использование пероральных контрацептивов, аменорея, раздражение слизистой оболочки влагалища, вызванное микробными
или химическими агентами, лечение некоторыми лекарствами, синдром Шегрена, сахарный диабет и психические изменения.
Что касается слизистой оболочки ротовой полости, сухость зева может быть симптомом нескольких клинических картин, связанных с эндокринными патологиями, психическими изменениями типа тревоги и депрессии, недостаточностью питательных веществ,
поражениями черепно-мозговых нервов; либо также вредного побочного эффекта некоторых лекарств, таких как антидепрессанты, ингибиторы ангиотензин-конвертирующего
фермента (АСЕ), химиотерапевтические средства/радиотерапевтические средства, симпатомиметики, антиретровирусные средства, анксиолитики и седативные средства, противоаритмические средства, противовоспалительные, антигипертензивные, антигистаминные,
противоязвенные и нейролептические агенты.
Снижение секреции также вызывает проявления, связанные с изменением защитной и
регулятивной системы физиологического равновесия. Например, пониженное продуцирование слюны может быть ответственно за сухость полости рта (ксеростомия), изменение
вкуса, увеличение случаев возникновения кариеса и воспаления десен, стоматит и проблемы с разжевыванием.
Сухость зева также может быть симптомом, связанным с клиническими состояниями,
такими как подострый или хронический фарингит и хронический ларингит; этиологическими агентами этих заболеваний являются патогенные микробные агенты, а также раздражающие агенты типа атмосферных загрязнений, табачного дыма, холодного и сухого
воздуха, хроническое раздражение, вызываемое желудочной кислотой (гастроэзофагеальный рефлюкс) [J. Woodley, Bioadhesion, New possibilities for Drug Administrations, Clin.
Pharmacokinetic, 40, 77-84, 2001].
В свете вышеуказанных рассуждений полезно предложить медицинские устройства и
фармацевтические препараты, способные снизить или устранить негативные эффекты,
прямо и/или опосредованно связанные с сухостью слизистых оболочек.
Более того, поскольку органы, в которых присутствуют слизистые оболочки, также
подвержены конкретным патологиям и, кроме того, они способны к всасыванию лекарств,
полезным является изготовление доступных лекарственных средств, высвобождающих
лекарства в таких местах.
4
BY 14755 C1 2011.08.30
Для таких целей могут быть использованы биоадгезивные полимеры, либо вещества,
способные тесно прилипать к биологическим мембранам, например, как описано в EP
0770384 B1 для препаратов для вагинального применения.
Ксилоглюканы представляют собой класс полисахаридов, структурно подобных целлюлозе и тесно ассоциированных с ней в клеточной стенке высших растений. Более того,
ксилоглюканы представляют собой один из основных компонентов, наиболее вероятно
действующих как энергетический запас, семян растений, таких как Tamarindus Indica,
происходящего из Индии или Юго-Восточной Азии, Detarium senegalense Gmelin, распространенного в Африке (в частности, в Нигерии), Afzelia africana, распространенного в
Центральной и Восточной Африке, а также в саваннах и лесах вблизи побережья Восточной Африки, и ятоба.
Ксилоглюканы характеризуются основной цепью (1,4)-β-D-глюкана, замещенного боковыми цепями α-D-ксилопиранозы и β-D-галактопиранозил-(1,2)-α-D-ксилопиранозы,
связанными с остатками гликана через α(1,6)-связь. Распределение остатков в боковых
цепях различается у ксилоглюканов разных типов. Три олигомерные единицы были идентифицированы в структуре ксилоглюканов, а именно моносахариды, октасахариды и гептасахариды, которые отличаются друг от друга количеством галактозных боковых цепей
[U. Hiroshi, Trends in Glycoscience and Glycotechnology, 14, 355-376, 2002].
Основное применение ксилоглюканы находят в питании человека и животных. Более
того, мука, полученная с помощью семян вышеуказанных растений, содержащих ксилоглюканы, часто используется в пищевой промышленности в качестве стабилизирующего,
желирующего и загущающего агента.
Сообщается также о применении ксилоглюканов в медицинских устройствах или в качестве компонента в фармацевтических препаратах, хотя менее часто. Например, ксилоглюканы используют в качестве вяжущих агентов в продуктах, используемых в качестве
заменителей слезы, демонстрирующих безопасный токсикологический профиль, даже при
введении в слизистую оболочку глаза, которая является особо чувствительной к повреждениям и раздражениям [M.F. Saettone et al. в US 6056950]. В WO 9729777 (М. Shozo et
al.) описан препарат ксилоглюкана, частично расщепленный ферментом, таким как галактозидаза, для применения в качестве ингредиента в получении препаратов с регулируемым высвобождением. В соответствии с этим документом, частичное удаление
галактозных остатков из ксилоглюкана обеспечивает сильные желирующие свойства, так
что активное вещество, включенное в такой гель, может высвобождаться постепенно в месте
применения.
В настоящий момент обнаружено, и это является задачей настоящего изобретения, что
препараты по существу очищенных ксилоглюканов, объединенные с соответствующими
количествами глицерина, демонстрируют неожиданные мукоадгезивные свойства. Присутствие глицерина неожиданно увеличивает мукоадгезивность ксилоглюкана.
Более того, содержание глицерина прямо связано с характеристиками регулируемого
высвобождения данного препарата ксилоглюкана, и мукоадгезивность сохраняется даже
при снижении вязкости раствора.
Объектами изобретения являются мукоадгезивные препараты и мукоадгезивные препараты с регулируемым высвобождением, состоящие из водных растворов, содержащих
от 0,05 до 5 мас. % природного очищенного полимера, имеющего структуру ксилоглюкана, и от 10 до 70 мас. % глицерина. Эти препараты подходят для нанесения на слизистые
оболочки человека, такие как слизистые оболочки носовой полости, ротовой полости и
влагалища, в качестве увлажняющих и смягчающих агентов либо в качестве системы высвобождения фармацевтического средства. Комбинации по изобретению могут быть добавлены к активным веществам и эксципиентам, известным специалистам в данной
области техники, для получения фармацевтических препаратов или медицинских
устройств для применения у человека, что является дополнительной задачей изобретения.
5
BY 14755 C1 2011.08.30
Эти фармацевтические препараты и медицинские устройства могут быть приготовлены в виде растворов, гелей, овулей, спреев, растворов для полоскания полости рта, кремов, мазей, вагинальных растворов и любых других подходящих систем введения.
Множество активных веществ может быть использовано в настоящем изобретении,
предпочтительно антибиотики, противогрибковые средства, противопротозойные средства, противовирусные средства, противовоспалительные средства, дезинфицирующие
средства, химиотерапевтические средства, анальгетики, муколитические средства, противокашлевые средства, противоотечные средства, регуляторы всасывания кальция, гормоны и вакцины.
Очищенный ксилоглюкан по настоящему изобретению получают путем очистки растительных экстрактов ксилоглюканов либо имеющихся в продаже необработанных продуктов с различной степенью чистоты для применения в пищевой промышленности.
Очистку осуществляют в соответствии со следующим способом. В холодной дистиллированной воде готовят 0,5-5 % суспензию, предпочтительно 1-2 %, неочищенного порошка
экстракта ксилоглюкана. Суспензию затем вливают в четырехкратный объем кипящей дистиллированной воды и данный раствор кипятят в течение 15-30 минут при перемешивании. Полученный раствор оставляют стоять в течение 10-20 часов, до тех пор пока
примесные белки и волокна не осядут. Раствор затем центрифугируют при 40008000 об/мин в течение периода времени от 15 до 30 минут. Супернатант фильтруют через
полипропиленовый фильтр 6 мкм, и фильтрат дополнительно центрифугируют при 1200018000 об/мин в течение периода времени от 30 до 60 минут. Супернатант можно затем
стерилизовать либо путем фильтрования через полипропиленовый фильтр 0,22 мкм, либо
в автоклаве при 121 °С в течение периода времени от 20 до 40 минут. Полученный раствор может быть непосредственно использован как таковой либо лиофилизирован. Описанный способ дает очищенный ксилоглюкан с выходом от 30 до 80 % по отношению к
исходному продукту.
Такой способ очистки дает ксилоглюканы, подходящие для фармацевтического применения, в частности обеспечивая безопасный профиль для применения у людей, более
конкретно для нанесения на слизистые оболочки. Способ очистки по изобретению обеспечивает продукт с постоянными технологическими свойствами, что гарантирует воспроизводимость в отношении вязкости и мукоадгезивности. Вязкость является одним из
наиболее важных параметров, которые характеризуют продукт, предназначенный для мукоадгезивных препаратов. Способ по изобретению обеспечивает получение очищенного
ксилоглюкана с вязкостью, подходящей для объема изобретения, как определено на 2 %
по массе водном растворе с использованием ротационного вискозиметра при температуре
25 °С при измерении со скоростью сдвига 200 сек-1 и временем покоя 15 минут.
Полученные величины вязкости могут варьироваться в зависимости от исходного неочищенного продукта. Величины вязкости, подходящие для применения в объеме настоящего изобретения, варьируются от 150 до 800 мПа⋅сек.
Более того, способ очистки обеспечивает заметное снижение белковых примесей, присутствующих в исходном материале. Ксилоглюканы, свободные от белковых примесей,
необходимы, поскольку участки слизистых оболочек особенно чувствительны к раздражениям. С другой стороны, введение в ротовую полость может запускать анафилактические реакции. По этой причине в соответствии с изобретением была введена верхняя
граница УФ-поглощения при 280 нм, которая является косвенным показателем присутствия остаточных белков. Очищенные ксилоглюканы, подходящие для данного изобретения, должны иметь величину поглощения при 280 нм ниже чем 0,5 абсолютных (абс.)
единиц при измерении в 2 % по массе водном растворе при температуре 25 °С.
На фиг. 1 показан профиль мукоадгезивности препаратов, содержащих очищенный
ксилоглюкан, при возрастающих концентрациях глицерина, в соответствии с данными из
6
BY 14755 C1 2011.08.30
табл. 2 примера 3. Такой профиль демонстрирует синергетический эффект глицерина и
ксилоглюкана в повышении мукоадгезивности.
На фиг. 2 показано, что увеличение мукоадгезивности не связано с величинами вязкости соответствующих растворов, в соответствии с данными из табл. 2 примера 3.
Наконец, табл. 2 примера 3 показывает, что значительные уровни мукоадгезивности
обеспечиваются также при низких величинах вязкости, например, при величинах ниже
чем 30 мПа⋅сек.
Последние заключения являются особенно важными с точки зрения применений, обсуждаемых в настоящем изобретении. В действительности, после введения в слизистую
оболочку местные препараты могут подвергаться двум явлениям, причем оба обладают
возможным негативным влиянием на мукоадгезивность: действительно, вблизи поверхности слизистой оболочки совместное воздействие температуры и физиологических жидкостей будет индуцировать снижение вязкости и эффект разбавления препарата. Напротив,
ксилоглюкан-глицериновый препарат по настоящему изобретению поддерживает мукоадгезивность при низких концентрациях и на уровне, не связанном с вязкостью.
В соответствии с настоящим изобретением добавление глицерина в концентрациях от
10 до 70 мас. % к растворам очищенного ксилоглюкана в концентрации от 0,05 до 5 мас. %
обеспечивает регулируемое высвобождение лекарств некоторым образом, непосредственно связанным с содержанием глицерина и не связанным с вязкостью конечного раствора.
Регулируемое высвобождение лекарства из растворов, полученных, как описано в
примере 2 и показано в табл. 1, было продемонстрировано путем измерения высвобождения лекарства через ячейку Франца в течение времени.
Свойство регулируемого высвобождения, объединенное со свойством мукоадгезивности, обеспечивает постоянное пролонгированное высвобождение активного ингредиента в
месте действия, как показано в табл. 3 для диклофенака.
Препарат, содержащий ксилоглюкан и глицерин, по настоящему изобретению оценивали на безопасность: полученные результаты, приведенные в примерах 11, 12 и 13, доказывают хорошую местную переносимость, отсутствие свойств сенсибилизации и
цитотоксичности.
Эффективность и безопасность комбинации по настоящему изобретению также продемонстрирована клиническим исследованием, приведенным в примере 10, где применение медицинского устройства в виде вагинальной овули дает очень хорошие результаты
при лечении диспареунии, вызванной сухостью влагалища.
Конкретная мукоадгезивность вместе со свойствами регулируемого высвобождения
продуктов по изобретению является определяющей характеристикой также для получения
инновационных фармацевтических форм для высвобождения лекарств. Преимущества
связаны с возможностью сохранения активности фармацевтического ингредиента в месте
действия в течение более длительных периодов времени, увеличивая биодоступность лекарства. Более того, пролонгированное время устойчивости, объединенное с регулируемым высвобождением лекарства, дает возможность снижения частоты введения. Такие
свойства могут быть полезны для введения лекарств в слизистые оболочки ротовой полости, носовой полости и влагалища.
Настоящее изобретение также относится к медицинским устройствам и фармацевтическим препаратам, содержащим, в дополнение к фармацевтически активным ингредиентам и эксципиентам, от 0,05 до 5 мас. % очищенного природного полимера, имеющего
структуру ксилоглюкана, и от 10 до 70 мас. % глицерина.
В соответствии с настоящим изобретением предпочтительные активные вещества выбраны из противовоспалительных агентов, таких как диклофенак и бензидамин, гормонов,
таких как прогестерон и кальцитонин. Предпочтительные формы препаратов представляют собой овули, гели, средства для орошения полостей и спреи.
7
BY 14755 C1 2011.08.30
Примеры фармацевтических препаратов по настоящему изобретению представляют
собой спрей для ротоглотки, содержащий диклофенак натрия, вагинальный гель, содержащий прогестерон, средство для орошения полости влагалища, содержащее бензидамина
гидрохлорид, и назальный спрей, содержащий кальцитонин.
Примерами медицинских устройств по настоящему изобретению являются вагинальная овула, обладающая гидратирующими свойствами, и спрей для ротоглотки, обладающий смягчающими свойствами.
Указанные медицинские устройства и фармацевтические препараты описаны более
подробно в следующих примерах.
Пример 1
Получение очищенного ксилоглюкана
Суспензию готовят путем добавления 200 мл холодной дистиллированной воды к 20 г
Glyloid® 3S (Dainippon) в порошковой форме. Суспензию вливают в 800 мл кипящей дистиллированной воды и раствор поддерживают при кипячении в течение 20 минут при перемешивании на магнитной мешалке. Полученный раствор оставляют стоять в течение
12 часов, затем центрифугируют при 5000 об/мин в течение 20 минут. Супернатант фильтруют через полипропиленовый фильтр 6 мкм и полученный раствор дополнительно центрифугируют при 15000 об/мин в течение 30 минут. Затем раствор стерилизуют через
полипропиленовый фильтр 0,22 мкм. Наконец, полученный раствор лиофилизируют с получением 14 г очищенного препарата ксилоглюкана.
Вязкость очищенного продукта, измеренная при температуре 25 °С со скоростью
сдвига 200 сек-1 и временем покоя 15 минут, при концентрации 2 % по массе в водном
растворе составляет 229 мПа⋅сек.
Поглощение 2 % по массе водного раствора при температуре 25 °С, измеренное при
280 нм, составляет 0,2 абс. единицы.
Пример 2
Приготовление растворов, содержащих диклофенак натрия
Метил-параоксибензоат натрия растворяют в воде при температуре 70 °С, затем к
охлажденному раствору добавляют двузамещенный фосфонат натрия, диклофенак натрия
и глицерин. Раствор перемешивают до полного растворения.
Затем добавляют очищенный ксилоглюкан и раствор перемешивают в течение 8 часов
до полного набухания, затем доводят объем до 100 мл водой.
Составы растворов диклофенака натрия представлены в табл. 1.
Таблица 1
Компоненты
Диклофенак натрия (%мас., /мас.)
Очищенный ксилоглюкан (%мас.,/мас.)
Глицерин (%мас./мас.)
Метил-параоксибензоат натрия
(%мас./мас.)
Двузамещенный фосфат натрия
(%мас./мас.)
Деионизированная вода до 100 мл
Раствор 1
0,08
0
30
Раствор 2
0,08
0,4
0
Раствор 3
0,08
0,4
10
Раствор 4
0,08
0,4
30
0,15
0,15
0,15
0,15
0,22
0,22
0,22
0,22
Пример 3
Измерение вязкости и мукоадгезивности растворов диклофенака натрия
Вязкость растворов диклофенака натрия, полученных в соответствии с примером 2,
измеряли, используя реостат, имеющий геометрию измерения с конической пластиной С
60/1, скоростью сдвига 200 сек-1 и временем покоя 3 минуты.
8
BY 14755 C1 2011.08.30
Измерение in vitro мукоадгезивности растворов, полученных в соответствии с примером 2, осуществляли методом наклонной поверхности, как описано Sandri G. et al.
[J. Pharm. Pharmacol., 56, 1083-1090, 2004]. Тест осуществляют путем скольжения образца
по наклонной инертной подложке, покрытой слоем муцина свиного желудка. Абсорбцию
на муциновом слое оценивают относительно абсорбции того же образца на непокрытой
наклонной инертной подложке.
500 мг каждого образца растворов, представленных в табл. 1, содержащих очищенный
ксилоглюкан, помещали на самую высокую точку подложки, наклоненной под углом 60°,
и часть смеси, скользящую по подложке в течение 2 минут, собирали и измеряли путем
взвешивания.
Величины вязкости и мукоадгезивности растворов диклофенака натрия, описанных в
примере 2, представлены в табл. 2.
Таблица 2
Растворы
Вязкость (мПа·сек)
1
2
3
4
не определяли
7,86
11,32
28,83
% адгезивности к инертной подложке
4,3
14,0
17,8
18,8
% адгезивности к муцину
18,0
28,0
60,0
58,2
Пример 4
Оценка свойств регулируемого высвобождения раствора диклофенака натрия
Свойства регулируемого высвобождения раствора, содержащего диклофенак натрия,
полученного в соответствии с примером 2, оценивали, измеряя обогащаемость вязких растворов на ячейке Франца.
Растворы в оборудовании, термостатируемом при 37 °С, промывали фосфатным буфером при pH 7,4 и количество высвободившегося активного ингредиента измеряли через 1,
2, 3 и 4 часа. Процент от общего количества высвободившегося диклофенака натрия представлен в табл. 3.
Таблица 3
Время (часы) % диклофенака натрия % диклофенака натрия
Раствор 2
Раствор 3
1
31,6
26,7
2
46,4
35,5
3
48,1
38,0
4
52,7
38,0
% диклофенака натрия
Раствор 4
6,4
14,02
24,8
28,8
Пример 5
Изготовление овули, содержащей очищенный ксилоглюкан, обладающий гидратирующими свойствами
Криодегидратированный экстракт Aloe barbadensis, рыбный желатин, метил-парагидроксибензоат
натрия,
этил-лара-гидроксибензоат
натрия
и
пропил-парагидроксибензоат натрия солюбилизировали при 70 °С в 15 мл воды. После полной солюбилизации раствор охлаждали до 25 °С и добавляли очищенный ксилоглюкан. Раствор перемешивали в течение примерно 8 часов и после полного набухания доводили до
температуры 45 °С и добавляли глицерин.
После гомогенизации путем перемешивания деионизированную воду добавляли до
30 грамм общего веса и продукт распределяли по 10 формам.
Количества каждого компонента для получения 10 овулей приведены в табл. 4.
9
BY 14755 C1 2011.08.30
Таблица 4
Компоненты
Масса
300 мг
300 мг
600 мг
10,5 г
9,43 мг
4,2 мг
4,81 мг
Ксилоглюкан
Aloe barbadensis
Рыбный желатин
Глицерин
Метил-лара-гидроксибензоат натрия
Этил-пара-гидроксибензоат натрия
Пропил-лара-гидроксибензоат натрия
Деионизированная вода до 30 грамм
Пример 6.
Изготовление вагинального геля, содержащего прогестерон
В воду при 70 °С добавляют метил-лара-гидроксибензоат. После полного растворения
и охлаждения раствора добавляют глицериды гидрогенизированного пальмового масла и
ранее солюбилизированного прогестерона. После полного перемешивания добавляют
очищенный ксилоглюкан и смесь поддерживают при перемешивании в течение 8 часов до
полного набухания полимера. Последним добавляют глицерин и конечный раствор перемешивают.
Количества различных компонентов для получения вагинального геля приведены в
табл. 5.
Таблица 5
Компоненты
Ксилоглюкан
Прогестерон
Глицерин
Глицериды гидрогенизированного пальмового масла
Метил-лара-гидроксибензоат натрия
Деионизированная вода до 56 грамм
Масса
1г
8г
30 г
5г
0,15 г
Пример 7
Изготовление средства для орошения полости влагалища, содержащего бензидамина
гидрохлорид
Триметилцетиламмония пара-толуолсульфонат, ароматизатор "роза" и бензидамина
гидрохлорид растворяют в воде. Очищенный ксилоглюкан добавляют после полного растворения и раствор поддерживают при перемешивании в течение 8 часов до полного
набухания полимера. Добавляют глицерин и конечный раствор перемешивают до полной
гомогенизации.
Количества различных компонентов приведены в табл. 6.
Таблица 6
Компоненты
Масса
1г
100 мг
30 г
5г
100 мг
Ксилоглюкан
Бензидамина гидрохлорид
Глицерин
Триметиламмония пара-толуолсульфонат
Ароматизатор "роза"
Деионизированная вода до 64 грамм
10
BY 14755 C1 2011.08.30
Пример 8
Изготовление назального спрея, содержащего кальцитонин
Хлорид натрия, моногидрат лимонной кислоты, дигидрат цитрата натрия и соляную
кислоту добавляют к 65 мл воды. Смесь поддерживают при перемешивании до полного
растворения, а затем добавляют 10 мл воды, содержащей ранее солюбилизированный
кальцитонин. Добавляют очищенный ксилоглюкан, перемешивая в течение 8 часов до
полного набухания полимера. Затем добавляют глицерин, раствор перемешивают и добавляют воду до необходимой массы.
Количества различных компонентов приведены в табл. 7.
Таблица 7
Компоненты
Масса
400 мг
100000 ME
0,15 мг
9г
58 мг
58 г
15 г
Ксилоглюкан
Кальцитонин
0,1 н. соляная кислота
Хлорид натрия
Дигидрат цитрата натрия
Моногидрат лимонной кислоты
Глицерин
Деионизированная вода до 100 грамм
Пример 9
Изготовление спрея для ротоглотки, содержащего натуральные экстракты
Натуральные экстракты, сорбат калия и моногидрат двузамещенного фосфата натрия
добавляют к 65 мл воды. Добавляют очищенный ксилоглюкан, перемешивая в течение
8 часов до полного растворения. Затем добавляют воду до необходимого объема.
Количества различных компонентов приведены в табл. 8.
Таблица 8
Компоненты
Ксилоглюкан
Сухой экстракт желтушника
Сухой экстракт алтея
Сухой экстракт нони
Моногидрат двузамещенного фосфата натрия
Сорбат калия
Глицерин
Деионизированная вода до 100 грамм
Масса
400 мг
300 мг
200 мг
300 мг
220 мг
100 мг
30 г
Пример 10
Оценка эффективности и переносимости овулей. содержащих очищенный ксилоглюкан, на добровольцах
Эффективность и безопасность овулей, приготовленных в соответствии с примером 4,
оценивали при лечении диспареунии, вызванной сухостью влагалища у женщины в период менопаузы, не получающей заместительной гормональной терапии.
Целью открытого исследования была оценка эффективности лечения овулами примера 4 в уменьшении ряда симптомов, например диспареунии, зуда и жжения женских
наружных половых органов, связанных с сухостью влагалища.
8 женщин в возрасте между 45 и 65 годами в состоянии менопаузы в течение почти
3 лет и без активных инфекций влагалища были зарегистрированы в исследовании. Схема
11
BY 14755 C1 2011.08.30
лечения предполагала введение овули вагинальным путем дважды в сутки в течение периода 8 суток.
Конечную точку клинической картины оценивали путем использования шкалы оценок
от 0 (отсутствие симптоматики) до 5 (очень интенсивная симптоматика).
Все пациентки завершили лечение. Лекарство оказалось хорошо переносимым и эффективным как на местном, так и на системном уровне, как показано в табл. 9. Никаких
побочных эффектов не наблюдалось.
Таблица 9
Пациент (№)
Диспареуния
Исходная Конец лечения
4
1
4
2
5
2
3
0
4
1
2
0
3
0
3
1
3,50
0,88
Жжение вульвы
Исходная Конец лечения
5
3
4
2
4
1
4
0
4
1
3
0
2
0
3
0
3,63
0,88
Зуд вульвы
Исходная Конец лечения
3
1
2
0
2
0
2
0
1
1
2
0
3
1
3
0
2,25
0,38
1
2
3
4
5
6
7
8
Среднее
Пример 11
Исследование местной переносимости препарата, содержащего ксилоглюкан и глицерин
Местные эффекты спрея для ротоглотки из примера 9 на слизистые оболочки ротовой
полости определяли путем оценки местных изменений ткани после повторного помещения тестируемого продукта в защечный мешок сирийского хомячка в течение периода
7 суток.
Одну группу, состоящую из 5 мужских и 5 женских особей, лечили ежедневно данным
лекарственным препаратом в дозе 0,5 мл на каждое животное в течение суммарно 3 раз в
одни и те же сутки с 2-часовым интервалом, для получения суммарной суточной дозировки 1,5 мл для каждого животного.
Контрольной группе животных вводили стерильную воду в течение того же периода
времени. Никаких указаний на системный эффект тестируемого продукта не наблюдалось
в течение периода лечения. Легкое раздражение слизистой наблюдалось у животных, которых лечили данным лекарственным препаратом, приблизительно через 1 час после последнего введения, и никаких реакций не наблюдалось спустя 24 часа, таким образом
доказывая хорошую переносимость слизистыми оболочками ротовой полости хомячка.
Пример 12
Исследование препарата, содержащего ксилоглюкан и глицерин, на замедленную
кожную чувствительность
Модель морской свинки использовали в тесте Магнуссона и Клингмана [J. Invest.
Dermatol., 268-276, 1969] для индуцирования и выявления замедленной кожной чувствительности. Для индуцирования чувствительности тестируемой группе из 20 животных и
контрольной группе из 10 животных подкожно инъецировали эмульсию полного адъюванта Фрейнда (передние участки), неразбавленный тестируемый продукт (срединные
участки) и тестируемый продукт в концентрации 50 % в эмульсии полного адъюванта
Фрейнда (задние участки). Через одну неделю вводили повторно, путем местного применения, тестируемый продукт в 100 % концентрации поверх участков инъекции. Контрольной группе животных вводили стерильную воду в течение того же периода времени. Через
две недели после второй стадии индуцирования всем животным проводили провокационный тест путем местного применения обоим носителя.
12
BY 14755 C1 2011.08.30
В конце исследования отсутствие реакции было очевидно у любого животного из тестируемой или контрольной группы, и никакой реакции на носитель отдельно не наблюдалось ни у одного животного.
Пример 13
Анализ клеточной токсичности раствора, содержащего ксилоглюкан и глицерин
Цитотоксичность in vitro раствора, содержащего ксилоглюкан и глицерин, оценивали
на BALB/C3T3 клетках и измерение поглощения нейтрального красного на клеточную
токсичность осуществляли на культурах BALB/C3T3 клеток, обработанных различными
концентрациями тестируемого продукта, и в конце обработки культуры исследовали для
того, чтобы оценить изменения в морфологии клеток вследствие токсических эффектов
тестируемого продукта. Отрицательный и положительный контроль были включены в
данный эксперимент.
Тестируемый продукт растворяли в культуральной среде, и используемые концентрации представляли собой 39,1; 78,1; 156; 313; 625; 1250; 2500 и 5000 микрограмм/миллилитр. Цитотоксичность анализировали через 24 часа после момента
обработки. Никаких изменений в морфологии клеток и никакого значимого уменьшения в
поглощении нейтрального красного не наблюдалось после обработки тестируемым продуктом в любых экспериментах в любых тестируемых концентрациях.
Фиг. 1
Фиг. 2
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
13
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
224 Кб
Теги
by14755, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа