close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY15350

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2012.02.28
(12)
(51) МПК
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 15350
(13) C1
(19)
C 12N 9/99
A 61L 2/16
A 61L 101/32
(2006.01)
(2006.01)
(2006.01)
СПОСОБ ИНГИБИРОВАНИЯ АКТИВНОСТИ ВНЕКЛЕТОЧНЫХ
ГЕМОЛИЗИНОВ ПАТОГЕННОГО ШТАММА PSEUDOMONAS
AERUGINOSA
(21) Номер заявки: a 20090967
(22) 2009.06.30
(43) 2011.02.28
(71) Заявитель: Государственное учреждение "Республиканский научнопрактический центр эпидемиологии
и микробиологии" (BY)
(72) Авторы: Никандров Виталий Николаевич; Пыж Анна Эдуардовна (BY)
(73) Патентообладатель: Государственное учреждение "Республиканский
научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии" (BY)
(56) НИКАНДРОВ В.Н. и др. Международный Евро-Азиатский конгресс по инфекционным болезням. Т.1. Актуальные вопросы инфекционной патологии. - Витебск, 2008. - С. 25-26.
НИКАНДРОВ В.Н. и др. Совершенствование осуществления государственного санитарного надзора в
Республике Беларусь. Материалы XI
съезда гигиенистов и эпидемиологов
Республики Беларусь. - Минск:
Минсктиппроект, 2007. - С. 205-211.
RU 2180849 C2, 2002.
BY 15350 C1 2012.02.28
(57)
Способ ингибирования активности внеклеточных гемолизинов патогенного штамма
Pseudomonas aeruginosa, включающий добавление ингибитора в бесклеточный супернатант бульонной культуры Pseudomonas aeruginosa с последующим инкубированием при
37 °С в течение 24 часов, отличающийся тем, что в качестве ингибитора используют раствор метиленового синего в конечной концентрации 10-3-5·10-3 М.
Изобретение относится к биологии и экспериментальной медицине, в частности к ингибированию активности гемолизинов патогенных штаммов Pseudomonas aeruginosa как
одного из факторов патогенности данного микроорганизма.
Известен способ ингибирования активности гемолизинов патогенных штаммов данного микроорганизма. Он заключается в том, что при добавлении к бесклеточным супернатантам бульонных культур госпитальных штаммов псевдомонад нитротетразолиевого
синего в концентрации 10-3 M наблюдается ингибирование гемолитической активности на
45 % [1].
Указанный способ является прототипом по отношению к заявляемому.
Общим признаком для заявляемого способа и прототипа является ингибирование активности гемолизинов супернатантов бульонных культур госпитальных штаммов псевдомонад при добавлении к реакционной системе вещества химической природы.
Однако применяемый для ингибирования активности гемолизинов бесклеточных супернатантов бульонных культур госпитальных штаммов псевдомонад нитротетразолие-
BY 15350 C1 2012.02.28
вый синий является дефицитным и дорогостоящим реактивом, вызывающим гибель клеток и не относящимся к разряду фармацевтических препаратов.
То есть использование нитротетразолиевого синего в качестве ингибитора гемолизинов этого микроорганизма для лечебных целей невозможно.
Задачей заявляемого изобретения является создание способа, позволяющего ингибировать активность внеклеточных гемолизинов патогенных (госпитальных) штаммов Pseudomonas aeruginosa фармацевтическим препаратом.
Поставленная задача достигается тем, что предложен способ ингибирования активности внеклеточных гемолизинов патогенного штамма Pseudomonas aeruginosa, включающий добавление ингибитора в бесклеточный супернатант бульонной культуры
Pseudomonas aeruginosa с последующим инкубированием при 37 °С в течение 24 ч. В
качестве ингибитора используют раствор метиленового синего в конечной концентрации
10-3-5⋅10-3 M.
Метиленовый синий - химическое соединение с общей формулой C16H18ClN3S⋅3H2O является фармацевтическим препаратом - витальным красителем.
В медицине метиленовый синий используется в качестве антисептического средства
наружно при ожогах, пиодермии, фолликулитах, для промывания полостей при циститах
и уретритах и внутривенно в качестве антидота при отравлениях цианидами, окисью углерода и сероводородом, нитритами, анилином и его производными [2].
Использование метиленового синего позволяет достичь ингибирования активности
гемолизинов госпитальных штаммов псевдомонад на 50-65 %, исключив использование
нитротетразолиевого синего, являющегося дефицитным и дорогостоящим реактивом.
Пример 1.
Используют образцы бесклеточных супернатантов бульонных культур госпитального
штамма № 23/2гоб2 Pseudomonas aeruginosa, выращенного в течение 10 ч на питательном
бульоне с гидролизатом кильки в стандартных условиях.
Готовят две пластины мясо-пептонного агара, содержащие 3 % взвесь эритроцитов
барана, приготовленные как описано ранее [3]. Для одной пластины эритроцитарноагаровую смесь готовят на 0,15 M растворе NaCl pH 7,2, содержащем метиленовый синий
в концентрации 10-3 M. (опыт). Для второй пластины эритроцитарно-агаровую смесь готовят на 0,15 M растворе NaCl pH 7,2 (контроль).
Аликвоты образцов наносят в предварительно вырезанные в агаре лунки на обе эритроцитарно-агаровые пластины. Пластины с нанесенными пробами инкубируют при 37 °С
в течение 24 ч. Гемолитическую активность учитывают по площади зон лизиса эритроцитов [3].
Площадь зон (в мм2) лизиса эритроцитов (n = 3): на опытной эритроцитарно-агаровой
пластине - 43 ± 7; на контрольной эритроцитарно-агаровой пластине - 225 ± 6.
Следовательно, гемолитическая активность госпитального штамма Pseudomonas aeruginosa подавлялась на 81 %.
Пример 2.
Используют образцы бесклеточных супернатантов бульонных культур госпитального
штамма № 23/2гоб2 Pseudomonas aeruginosa, выращенного в течение 22 ч на питательном
бульоне с гидролизатом кильки в стандартных условиях.
Готовят две пластины мясо-пептонного агара, содержащие 3 % взвесь эритроцитов
барана, приготовленные как описано ранее [3]. Для одной пластины эритроцитарноагаровую смесь готовят на 0,15 M растворе NaCl pH 7,2, содержащем метиленовый синий
в концентрации 5⋅10-3 M (опыт). Для второй пластины эритроцитарно-агаровую смесь готовят на 0,15 M растворе NaCl pH 7,2 (контроль).
Аликвоты образцов наносят в предварительно вырезанные в агаре лунки на обе эритроцитарно-агаровые пластины. Пластины с нанесенными пробами инкубируют при 37 °С
2
BY 15350 C1 2012.02.28
в течение 24 ч. Гемолитическую активность учитывают по площади зон лизиса эритроцитов [3].
Площадь зон (в мм2) лизиса эритроцитов (n = 3): на опытной эритроцитарно-агаровой
пластине - 170 ± 10; на контрольной эритроцитарно-агаровой пластине - 336 ± 0.
Следовательно, гемолитическая активность госпитального штамма Pseudomonas aeruginosa подавлялась на 50 %.
Таким образом, достигаемый технический результат заключается в том, что способ
позволяет подавлять активность внеклеточных гемолизинов госпитального штамма псевдомонад, использовать доступный ингибитор, являющийся лекарственным препаратом и
безопасный для медицинского персонала и пациентов. Данный способ может найти широкое применение при разработке рациональных путей борьбы с системной псевдомонадной
инфекцией.
Источники информации:
1. Никандров В.Н., Пыжова Н.С., Пыж А.Э. Проявление гемолитической и протеолитической активности госпитальными штаммами Pseudomonas aeruginosa. В кн.: Материалы Международного Евро-Азиатского конгресса по инфекционным болезням. Т. 1.
Актуальные вопросы инфекционной патологии. - Витебск, 2008. - С. 24-26.
2. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Изд. 15-е, перераб., испр., доп. - М.:
Новая Волна, 2005. - С. 950.
3. Евченко Т.А., Лютов А.Г., Алешкин В.А. Оценка качества иммуноглобулинов методом радиальной диффузии в геле. Актуальные вопросы разработки, производства и применения иммунобиологических и фармацевтических препаратов. Матер. конф. Ч. 1. - Уфа,
2000. - С. 148-152.
Национальный центр интеллектуальной собственности.
220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
3
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
74 Кб
Теги
by15350, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа