close

Вход

Забыли?

вход по аккаунту

?

Патент BY15378

код для вставкиСкачать
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
РЕСПУБЛИКА БЕЛАРУСЬ
(46) 2012.02.28
(12)
(51) МПК
НАЦИОНАЛЬНЫЙ ЦЕНТР
ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ
СОБСТВЕННОСТИ
(54)
BY (11) 15378
(13) C1
(19)
C 12N 5/079
A 61P 43/00
(2010.01)
(2006.01)
СПОСОБ ЗАЩИТЫ ПЕРВИЧНОЙ ИЛИ ПЕРЕВИВАЕМОЙ
КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК НЕРВНОЙ ТКАНИ ОТ РАЗВИТИЯ
ТОКСИЧЕСКОГО ОТЕКА, ИНИЦИИРУЕМОГО ИОНАМИ Mn2+
(21) Номер заявки: a 20091337
(22) 2009.09.17
(43) 2011.04.30
(71) Заявитель: Государственное научное учреждение "Институт физиологии Национальной академии наук
Беларуси" (BY)
(72) Авторы: Жук Ольга Николаевна; Никандров Виталий Николаевич; Гронская Раиса Ивановна; Полукошко
Елена Федоровна (BY)
(73) Патентообладатель: Государственное
научное учреждение "Институт физиологии Национальной академии
наук Беларуси" (BY)
(56) BY 10290 C1, 2008.
ЖУК В.М. и др. // Весцi Акадэмii
навук БССР. Серыя бiялагiчных навук.
- 1986. - № 1. - С. 56-60.
BY 15378 C1 2012.02.28
(57)
Способ защиты первичной или перевиваемой культуры клеток нервной ткани от развития токсического отека, инициируемого 10-4 M MnCl2, заключающийся в том, что к
клеткам, которые культивируют в синтетической питательной среде DMEM, содержащей
MnCl2, в атмосфере с 5 %-ным содержанием CO2 и 90 %-ной влажностью при температуре
37 °С, добавляют фактор роста нервов до концентрации 50-100 нг/мл.
Изобретение относится к медицине и биологии, в частности к культивированию первичной и перевиваемой культур клеток нервной ткани, и позволяет защищать указанные
культуры от развития токсического отека, инициируемого ионами Mn2+ марганца.
Заявителю неизвестен наиболее близкий аналог, касающийся способа защиты культивируемых клеток от развития токсического отека, инициируемого ионами марганца.
Задачей заявляемого способа является создание способа защиты первичных и перевиваемых культур клеток нервной ткани от токсического отека, инициируемого ионами марганца.
Поставленная задача достигается тем, что предложен способ защиты первичной и перевиваемой культур клеток нервной ткани от токсического отека, инициируемого 10-4 M
MnCl2, заключающийся в том, что к клеткам, которые культивируют в синтетической питательной среде DMEM, содержащей MnCl2, в атмосфере с 5 %-ным содержанием CO2 и
90 %-ной влажностью при температуре 37 °С, добавляют фактор роста нервов до концентрации 50-100 нг/мл.
Фактор роста нервов - протеин молекулярной массой 116-140 кДа - относится к семейству полипептидных биорегуляторов, контролирующих на ауто-, пара- и эндокринном
уровнях выживаемость, дифференцировку, поддержание функциональной активности
практически всех клеток развивающегося и зрелого организма. Он обладает нейротрофической активностью и обслуживает такие важные функции в нервной ткани, как индукция
BY 15378 C1 2012.02.28
выроста нейритов, ориентация растущих нейритов по направлению к источнику фактора
роста нервов и способствование выживанию нервных клеток [1].
Введение фактора роста нервов в конечной концентрации 50-100 нг/мл питательной
среды позволяет осуществлять протекцию первичных и перевиваемых культур клеток
нервной ткани от токсического отека, инициируемого ионами марганца.
Пример 1
Суспензию перевиваемых линий клеток нервной ткани (глиома C6) плотностью
(2,0-3,0)× 10 клеток/см2 высевают на пластиковые чашки Петри и культивируют их в синтетической питательной среде DMEM с добавлением хлористого марганца 10-4 M и фактора роста нервов в конечной концентрации 100 нг/мл питательной среды.
В качестве контроля используют сестринские культуры, которые выращивают в такой
же синтетической питательной среде в присутствии 10-4 M MnCl2.
С помощью светового микроскопа оценивают морфологические характеристики исследуемых клеток через 24 часа культивирования. Измеряют наибольший и наименьший
диаметры клеток для определения их объема и учитывают количество клеток [2].
При содержании исследуемых клеток в питательной среде с 10-4 M MnCl2 70 % клеток
погибает, в оставшихся развивается гидратация (отек). Клетки набухают - объем клеток
увеличен на 25 % (контроль).
При внесении в питательную среду совместно с 10-4 M MnCl2 фактора роста нервов в
конечной концентрации 100 нг/мл питательной среды гибель клеток составляет 8 %, объем клеток увеличен только на 9 % (опыт).
Пример 2
Выделяют кору головного мозга новорожденной крысы и подвергают механическому и
ферментативному дезинтегрированию на отдельные клетки, наносят полученную суспензию
с плотностью (2,5-3,0)× 104 клеток/см2 на покрытые коллагеном покровные стекла и культивируют их в синтетической питательной среде DMEM с добавлением хлористого марганца
10-4 М и фактора роста нервов в конечной концентрации 50 нг/мл питательной среды.
В качестве контроля используют культуры, которые выращивают в такой же синтетической питательной среде в присутствии 10-4 M MnCl2.
С помощью светового микроскопа оценивают морфологические характеристики исследуемых клеток через 24 часа культивирования. Измеряют наибольший и наименьший
диаметры клеток для определения их объема и учитывают количество клеток [2].
При содержании исследуемых клеток в питательной среде с 10-4 M MnCl2 75 % клеток
погибает, в оставшихся развивается отек. Клетки набухают - объем клеток увеличен на
28 % (контроль).
При внесении в питательную среду фактора роста нервов в конечной концентрации
50 нг/мл погибает 18 % клеток, объем клеток увеличен на 12 % (опыт).
Таким образом, достигаемый технический результат заключается в том, что способ
позволяет осуществлять протекцию клеток первичных и перевиваемых культур клеток
нервной ткани от токсического отека, инициируемого ионами марганца. Данный способ
может найти широкое применение в экспериментальной биологии и медицине.
Источники информации:
1. Калюнов В.Н. Фактор роста нервной ткани. - Мн., 1984. - С. 169-173.
2. Жук О.Н. Морфометрический анализ симпатических нейронов при индивидуальном
и комбинированном воздействии нейроростового фактора и гуанетидина / О.Н.Жук,
В.Н.Калюнов, Е.Н.Гулецкая // Весцi АН БССР. Сер. бiял. навук. - 1986. - № 1. - С. 56-60.
Национальный центр интеллектуальной собственности. 220034, г. Минск, ул. Козлова, 20.
Документ
Категория
Без категории
Просмотров
0
Размер файла
68 Кб
Теги
by15378, патент
1/--страниц
Пожаловаться на содержимое документа